Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: Actualmente, la odontología está fuertemente enfocada en la estética dental. Además del color, existen otras propiedades ópticas que participan en la estética dental, dentro de las cuales se encuentra la fluorescencia. La fluorescencia es un fenómeno óptico que se produce por la absorción de luz por parte de un objeto y la posterior emisión espontánea de una luz de longitud de onda mayor que la absorbida. Esta luz se conoce como fluorescencia visible inducida por luz ultravioleta y puede ser captada mediante sistemas fotográficos para su posterior estudio. En los dientes, se observa dentro del espectro del color azul y es más intensa en dentina que en esmalte, ya que la luz interactúa con el material orgánico, como el triptófano e hidroxipiridino de la dentina. Como estos tejidos experimentan cambios con la edad, se esperaría que también lo haga la fluorescencia. Objetivo: Determinar la fluorescencia visible inducida por luz UV que presentan los dientes anteriores de pacientes de distintos grupos etarios. Metodología: De un total de 35 participantes separados en 5 grupos de 7 individuos cada uno, se obtuvo una muestra de 70 dientes (incisivos centrales superiores), los cuales fueron fotografiados utilizando como fuente de iluminación luz UV para generar el fenómeno de fluorescencia. Se evaluó este fenómeno en cada diente dividiéndolo en tercios y considerando la corona completa. Cada imagen fue analizada en el software computacional Image J para obtener las coordenadas de color en el espacio CIELab. Los datos obtenidos fueron analizados mediante las pruebas estadísticas de Kruskal-Wallis y Mann Whitney. Resultados: En la corona completa y tercio cervical se encontraron diferencias estadísticamente significativas en L, a* y b* entre los distintos grupos etarios. En el tercio medio e incisal no se encontraron diferencias significativas en la coordenada b* entre los 5 grupos etarios. Se observó para las 3 coordenadas de color que los grupos que presentaron mayores diferencias en las 4 áreas evaluadas fueron el grupo 1-2, con el grupo 1-5. Además, en todas las áreas evaluadas se observó que existían variaciones de las 3 coordenadas con la edad, pero que no variaban de una forma lineal continua. Conclusión: Se evidenció diferencias estadísticamente significativas de fluorescencia visible inducida por luz ultravioleta medida en las coordenadas de color CIELab, al comparar los distintos grupos etarios. / Adscrito a Proyecto PRI-ODO 15/003 #Validación del análisis computacional de color de dientes naturales a través de imágenes digitales

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-01-26Bitstream added on 2014-06-13T19:15:17Z : No. of bitstreams: 1 boldieri_t_me_arafo.pdf: 746279 bytes, checksum: b5ba3ba85b23d18eeec3dfacda538455 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo da presente pesquisa foi avaliar o desempenho dos métodos baseados na captação de fluorescência induzida por luz (DIAGNOdent (DD) , DIAGNOdent Pen (DDP), câmera Vista Proof (VP) e Quantitative Light-induced Fluorescence (QLF) na detecção de lesões de cárie residual após a remoção de tecido cariado dentinário. Foram utilizados 94 terceiros molares humanos hígidos. Foram excluídos aqueles que apresentavam, áreas hipoplásicas, restaurações, selantes ou manchas. O esmalte oclusal foi seccionado horizontalmente e a superfície dentinária subjacente foi polida a fim de remover restos de esmalte remanescente e alisar a superfície. Os ápices radiculares foram preenchidos com resina composta e todo o restante do dente recoberto por resina epóxi e verniz ácido-resistente deixando uma janela de dentina onde foi desenvolvido a lesão de cárie artificial utilizando um protocolo microbiológico in vitro desenvolvido para esse fim. Todos os espécimes foram avaliados por dois examinadores independentes, utilizarando o método de inspeção visual-tátil para determinar a presença ou ausência de lesão de cárie. Os espécimes foram aleatoriamente divididos em dois grupos (n=47) de acordo com o método de remoção da lesão: fresa em baixa rotação convencional e escavação manual. A quantidade de tecido removido foi determinada de acordo com os parâmetros determinados pelos exames visual e tátil. As lesões também foram examinadas pelos métodos de indução de fluorescência: DD; DDpen; VP e QLF, antes do desenvolvimento da lesão, com o dente cariado e após a remoção, para determinar a presença ou ausência de lesão cariosa e de remanescente após a remoção. Após todas as avaliações, os dentes foram seccionados perpendicularmente ao longo eixo, no sentido mesio-distal, e essas secções de dentes foram observadas e fotografados em lupa estereoscópica... / The aim of this study was to evaluate the performance of light-induced fluorescence methods (DIAGNOdent (DD), DIAGNOdent Pen (DDP), Proof camera View (PV) and Quantitative Light-induced Fluorescence (QLF) to detect residual caries. 94 human molars were used . Teeth with those who had, hypoplastic areas, fillings, sealants or stains were excluded. The occlusal enamel was sectioned perpendicular to the long axis of the tooth using a low-speed diamond saw under water cooling (Isomet, Buehler Ltd, Lake Bluff, IL, USA) to expose adjacent dentin. The dentin surface was wet ground flat with 180 and 400 grit silicon carbide abrasive paper until all enamel had been removed. Samples were covered with acid-resistant nail varnish leaving an uncoated window in the center of the dentin surface for caries development. All specimens were evaluated by two independent observers,in use the method of visual-tactile inspection to determine the presence or absence of caries. The specimens were randomly divided into two groups (n = 47) according with the method of removal of the lesion: at low speed and conventional hand excavation. The amount of removed tissue was determined in accordance with the parameters determined by visual and tactile examinations. The lesions were also examined by fluorescence methods: DD; DDpen, VP and QLF, at baseline, after induction lesion of caries like lesion and after caries removal to determine the presence or absence of carious lesion and remaining after the removal. After all evaluations, the teeth were sectioned perpendicular to the long axis in the mesio-distal direction, and those sections of teeth were observed and photographed under a stereomicroscope with 30x increase by an examiner independent. Was determined by the visual inspection of images of the magnifying glass and also with the aid of an explorer, the presence or absence of caries, to determining the gold standard... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-18Bitstream added on 2014-06-13T19:36:00Z : No. of bitstreams: 1 bussaneli_dg_me_arafo.pdf: 476016 bytes, checksum: 4715f2efcaea730d4ad57d5b3dbcf350 (MD5) / O objetivo deste trabalho foi avaliar o desempenho de sistemas de diagnóstico óptico para detecção de lesões de cárie. No estudo in vitro, a viabilidade da transiluminação com laser infravermelho próximo (TI-NIR) para o diagnóstico de lesões iniciais de cárie foi avaliada. Dois examinadores avaliaram 94 sítios na superfície oclusal de molares e pré-molares humanos recém extraídos, classificados com escore 0, 1, 2 ou 3 ICDAS, utilizando um protótipo TI-NIR, a radiografia (RX), o DIAGNOdent Pen (DDPen) e o Quantitative Light-induced Fluorescence (QLF). Para validação, a análise histológica foi considerada como o padrão ouro. A reprodutibilidade intra e interexaminador foi avaliada com o coeficiente Kappa. Concluiu-se que o desempenho da TI-NIR bom, e constitui-se como uma alternativa válida e confiável para o diagnóstico de lesões iniciais na superfície oclusal de dentes permanentes. No segundo estudo, in vivo, o objetivo foi avaliar o desempenho do exame visual com os critérios Nyvad (EV), radiografia interproximal (RX), dispositivo de fluorescência a laser (DIAGNOdent Pen - DDPen) e suas associações no diagnóstico de lesões proximais em dentes decíduos. Para isso, foram selecionadas 45 crianças (n=59 superfícies) de ambos os sexos com idades entre 5 e 9 anos que apresentavam molares deciduos com sinais sugestivos da presença de lesão de cárie ou hígidos. As superfícies foram avaliadas clinicamente e codificadas segundo os critérios Nyvad, e logo depois com o DDPen. O exame radiográfico foi realizado apenas naquelas superfícies codificadas com os escores Nyvad 2, 3, 5 ou 6. Lesões de cárie ativas e/ou com superfície descontinuada foram restauradas, considerando-se a profundidade da lesão como padrão de referência. O desempenho do exame visual, radiográfico e DDpen e suas associações... / The aim of this study was to evaluate the performance of optical diagnostic systems for detection of caries lesions. In the in vitro study, the viability of the near infrared laser transillumination (TI-NIR) for diagnosis of incipient carious lesions was evaluated. Two examiners evaluated 94 sites in occlusal surface of molars and premolars freshly extracted, selected with score 0, 1, 2 or 3 ICDAS using the TI-NIR prototype, bitewing radiographs (RX), the DIAGNOdent Pen (DDPen) and Quantitative Light-induced Fluorescence (QLF). For validation, histological analysis was considered as the gold standard. The performance of TI-NIR was good, and its constitutes as a reliable and valid alternative for the diagnosis of early lesions in the occlusal surface of permanent teeth. In the second study, in vivo, the performance of the visual examination with the criteria Nyvad (EV), radiographs (RX), laser fluorescence device (DIAGNOdent Pen - DDPen) and their associations in the diagnosis of proximal lesions in deciduous teeth was evaluated. Were selected 45 children (n = 59 surfaces) of both sexes aged between 5 and 9 years who had deciduous molars with signs suggestive of the presence of caries or sound. The surfaces were evaluated clinically and scored with the Nyvad criteria, and DDPen. Radiographic examination was performed only on those surfaces scored with Nyvad 2, 3, 5 or 6. Caries active and / or discontinued surface were restored, considering the depth of the lesion as a reference standard. The performance of visual examination, and radiographic DDpen and their associations was good, but the use of the criteria NYVAD proved sufficient for the diagnosis of interproximal lesions. It could be observed that optical technologies appear to contribute positively in the diagnosis process in the diagnosis of caries. However, they should be considered as adjuncts to conventional methods in this process

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-25Bitstream added on 2014-06-13T19:49:36Z : No. of bitstreams: 1 crulhas_bp_me_rcla_parcial.pdf: 100924 bytes, checksum: c0953845b12fd7e562861860ab7b97ca (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-25T13:01:17Z: crulhas_bp_me_rcla_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-25T13:03:31Z : No. of bitstreams: 1 000713376_20160402.pdf: 87205 bytes, checksum: b056e25228f33bc3a3f95fc8c1ac65c2 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-04-04T12:10:27Z: 000713376_20160402.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-04T12:11:07Z : No. of bitstreams: 1 000713376.pdf: 656987 bytes, checksum: f6bb8af3851049442710d3f18ac08f28 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A luz incidente é certamente uma das principais variáveis ambientais que influenciam a distribuição, estrutura e funcionamento das comunidades de macroalgas de ecossistemas lóticos. Por isso, a influência da variação qualitativa e quantitativa da luz incidente sobre as respostas fotossintéticas foi analisada em onze táxons macroalgais pertencentes aos Filos Chlorophyta, Cyanobacteria, Rhodophyta e Xanthophyta, utilizando as técnicas de oxigênio dissolvido e fluorescência da clorofila a. Através destas técnicas foram produzidas curvas de fotossíntese-irradiância e então calculados vários parâmetros fotossintéticos. As espécies do Filo Chlorophyta registraram uma preferência pela luz verde, com altos valores de Pmax, eficiência fotossintética e rendimento quântico efetivo, nesta faixa do espectro luminoso. Em relação à quantidade de luz disponível, o grupo apresentou padrões espécie-específicos, tanto com espécies tidas como de sombra como de sol. O Filo Cyanobacteria apresentou melhor aproveitamento fotossintético quando exposto à luz vermelha, pois, obteve altos valores de rendimento quântico efetivo e eficiência fotossintética neste tratamento. Quanto à quantidade de luz incidente, o grupo demonstrou resposta indiferente, sem uma clara tendência nos seus parâmetros fotossintéticos nos tratamentos de atenuação. O Filo Rhodophyta demonstrou altos valores de eficiência fotossintética e rendimento quântico efetivo nos espectros luminosos azul e vermelho e, considerando os dados quantitativos, o grupo apresentou respostas fotossintéticas típicas de plantas de sombra, com baixos valores de Pmax, e do ponto de saturação e altos valores de rendimento quântico efetivo e eficiência fotossintética sob menores irradiâncias. O Filo Xanthophyta, no experimento qualitativo, obteve... / The incident light is certainly one of the main environmental variables which influence the distribution, structure and functioning of lotic macroalgae communities. Therefore, the influence of qualitative and quantitative variation of incident light on the photosynthetic responses were analyzed in eleven especies pertaining to Chlorophyta, Cyanobacteria, Rhodophyta and Xanthophyta, using the techniques of dissolved oxygen and chlorophyll a fluorescence. Through these techniques the irradiance curves were made and then the photosynthetic parameters were analyzed. The species of Chlorophyta recorded a preference for the green light, with high Pmax, photosynthetic efficiency and quantum yield, in this range of the light spectrum. Relative to the quantity of light available, the group presented speciesespecific patterns with both sun and shade species. The Cyanobacteria showed better exploitations when exposed to red light, whereas, obtained high values of effective quantum yield and photosynthetic efficiency in this treatment. Regarding to the amount of incident light, the group showed indifferent response, with no clear trend in its photosynthetic parameters in the attenuation treatments. The Rhodophyta, in the qualitative experiment demonstrated high values of photosynthetic efficiency and effective quantum yield in the blue and red spectrum, and in the quantitative experiment, the group presented photosynthetic results typical of shade plants due to low Pmax and saturation point, and high values of effective quantum yield and photosynthetic efficiency under lower irradiances. The Xanthophyta obtained milder and similar values of photosynthetic parameters among the tested treatments in the qualitative experiment, being indifferent to the type of available spectrum. In the quantitative experiment, it showed a preference... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-23Bitstream added on 2014-06-13T19:29:05Z : No. of bitstreams: 1 panfilo_bml_me_botfm.pdf: 670714 bytes, checksum: 9a685841adbac5afeb54be3702f287e2 (MD5) / Fundação Amaral Carvalho / O câncer de pele é uma neoplasia que vem aumentando no Brasil e no mundo. Dentre eles está o melanoma, que embora represente apenas 4% dos cânceres de pele é responsável por 60% das mortes por esta neoplasia. Existem grandes dificuldades na triagem do melanoma, pois um de seus diagnósticos diferenciais é a queratose seborreica pigmentada. Tal fato causa grande dificuldade para o diagnóstico dos médicos não especialistas. O objetivo deste estudo foi identificar os padrões de autofluorescência de lesões de pele para que se possa excluir o diagnóstico de melanoma em lesões enegrecidas. Participaram 31 pacientes, com 31 lesões enegrecidas, sendo 17 pacientes com diagnóstico de melanoma e 14 pacientes com queratose seborreica pigmentada. Cada lesão enegrecida foi avaliada, sendo realizada foto macroscópica, dermatoscópica e fotos com fluorescência com o equipamento LINCE. Em seguida foi realizada biópsia de todas as lesões para confirmação diagnóstica. Foram avaliados os padrões de fluorescência da queratose seborreica e do melanoma. Através dos resultados observou-se que todas as lesões de queratose seborreica apresentaram um padrão de fluorescência peculiar. Quando iluminada pelo ultravioleta, a queratose seborreica apresentou estruturas puntiformes esbranquiçadas que permitiram diferenciá-la do melanoma. Tal diferença pôde ser vista em todas as lesões. Frente aos fatos apresentados no presente estudo, pode-se concluir que a fluorescência, pode excluir o diagnóstico de melanoma, facilitando a triagem de lesões enegrecidas / Skin cancer, including melanoma, is increasing worldwide. Although melanoma represents only 4% of skin cancers it is responsible for 60% of deaths from this cancer. There are difficulties in screening for melanoma. One of the differential diagnosis is the pigmented seborrheic keratosis. The aim of this study was to identify patterns of fluorescence of skin lesions of sborreic keratosis to exclude the melanoma. It was taken 31 patients with 31 dark and assimetric lesions. Seventeen patients with melanomas lesions and 14 patients with pigmented seborrheic keratosis. Each lesion was evaluated, being held macroscopic and dermoscopic photo images with fluorescence by the prototipe named LINCE. Biopsies of all lesions were carried out for diagnostic confirmation. The fluorescence patterns of seborrheic keratosis and melanoma were evaluated. The results showed that all lesions of seborrheic keratosis showed a peculiar pattern of fluorescence. When illuminated by ultraviolet, all the seborrheic keratosis showed white dots that allowed differentiate it from melanoma. This difference was observed in all lesions. It can be concluded that fluorescence can exclude the diagnosis of melanoma when a pigmented lesion is evaluated

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-19Bitstream added on 2014-06-13T20:12:00Z : No. of bitstreams: 1 presoto_cd_me_arafo.pdf: 461997 bytes, checksum: ffe164e46bfc14958e25dbcde74db705 (MD5) / O objetivo deste estudo foi avaliar o desempenho clínico da câmera de fluorescência VistaProof, da câmera intraoral digital Vista Cam e do critério ICDAS para detecção de cárie oclusal. Cento e sete dentes posteriores de pacientes adultos foram examinados visualmente e por meio de radiografias digitais por dois examinadores, que os classificaram de acordo com a presença ou ausência de cárie oclusal, em dois momentos, a fim de determinar a reprodutibilidade intra e interexaminadores. Esta avaliação foi considerada padrão-ouro. Os dentes foram então avaliados pelo critério visual ICDAS, fluorescência e imagem digital ampliada por outros dois examinadores, em dois momentos. Para estudo da efetividade estimou-se a sensibilidade, especificidade, razão de verossimilhança positiva e negativa. Construiu-se a curva ROC e estimou-se sua área (AUROC). A concordância intra e interexaminadores para a microcâmera intraoral e para o ICDAS foi ótima (κ˃0,81) e no mínimo boa para a câmera VistaProof (κ˃0,63). Houve excepcional capacidade discriminante para a imagem intraoral (AUROC=0,93) e para o ICDAS (AUROC=0,91) e diferença estatística não significativa entre eles (z= 0,35; p=0,73). A fluorescência apresentou capacidade discriminante aceitável (AUROC=0,78), porém menor que os demais. A razão de verossimilhança positiva encontrada para a fluorescência foi de apenas 2,32, enquanto que para a imagem intraoral foi 20,58 e para o ICDAS, 58,11. Pode-se concluir que a reprodutibilidade intra e interexaminadores para o ICDAS e para os métodos de detecção de cárie utilizados foi considerada adequada. Os três apresentaram adequado desempenho clínico, sendo este melhor para o ICDAS e para a imagem intraoral. / The aim of this study was to evaluate the clinical performance of the VistaProof fluorescence camera, Vista Cam digital intraoral camera and ICDAS criterion for occlusal caries detection. One hundred and seven posterior teeth of adult patients were examined visually and by means of digital radiographs by two examiners who rated them according to the presence or absence of occlusal caries in two stages in order to determine the reproducibility intra and interexaminers. This evaluation was considered the gold standard. The teeth were then evaluated by the visual criterion ICDAS, fluorescence and digital image magnified by two other examiners, on two occasions. The effectiveness of the methods was estimated by sensitivity, specificity, positive and negative likelihood ratio. For each method was constructed ROC curve and its area (AUROC) was estimated. The intra and interexaminer agreement for the intraoral camera and the ICDAS was excellent (κ˃0.81) and at least good for the VistaProof camera (κ˃0.63). There was exceptional discrimination capacity for intraoral image (AUROC=0.93) and for ICDAS (AUROC=0.91) and no significant statistical difference between them (z=0.35, p=0.73). The fluorescence showed acceptable discrimination capacity ROC (AUROC=0.78), but lower than the others. The positive likelihood ratio found for the fluorescence was only 2.32, while for intraoral image was 20.58 and the ICDAS, 58.11. It can be concluded that the reproducibility intra and interexaminer to ICDAS and for caries detection methods utilized was considered adequate. The three had good clinical performance, which is better for the ICDAS and for intraoral image.

Memoria para optar al título profesional de Ingeniero Agrónomo Mención: Manejo de Suelos y Aguas / Con el propósito de caracterizar el ambiente lumínico y fotosintético de la uva de mesa conducida bajo sistema de parrón, se realizó el presente estudio durante los meses de enero y marzo del año 2008, en un predio ubicado en la localidad de Isla de Maipo, Región Metropolitana, Chile. Se estudiaron cuatro plantas de vigor medio, midiéndose en ellas la penetración vertical de luz. Con esta información se separo el follaje en tres capas: una expuesta mayoritariamente al sol llamada capa superior, una capa media expuesta a una condición de manchas de sol y una capa inferior expuesta mayoritariamente a condiciones de sombra.

Memoria para optar al título de Químico / Los Hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAP) son un grupo de compuestos orgánicos constituidos por 2 o más anillos aromáticos simples unidos, que no contienen heteroátomos ni otros sustituyentes. Generan diversos daños a la salud debido a su carácter cancerígeno y mutagénico. Considerando su carácter lipofílico los HAPs pueden acumularse en grasas y en los tejidos vegetales con una alta persistencia. Por esto los podemos ingerir indirectamente al incluir en nuestra dieta alimentos ricos en grasas o aceites como es el caso de los aceites vegetales. Las técnicas más ampliamente utilizadas para determinar las concentraciones de los HAPs en aceites han sido la cromatografía líquida de alta eficiencia asociada a detección por fluorescencia o espectrometría de masas. Sin embargo, al utilizar HPLC los tiempos de análisis y de preparación de muestra ocupan un tiempo considerable. Es un método relativamente costoso tanto en equipamiento de la técnica y en análisis. Una alternativa a estos métodos son aquellos basados en espectroscopía de fluorescencia, principalmente por su menor costo y rapidez. La relevancia de estos métodos ha sido limitada por su falta de selectividad, especialmente cuando compuestos similares deben ser analizados en matrices complejas. Una forma de alcanzar una mayor selectividad analítica es asociar la espectroscopía de fluorescencia con diferentes métodos quimiométricos de análisis de datos, constituyendo un método de calibración multivariado. En trabajos recientes, realizados en el laboratorio donde se desarrolló la presente tesis, se ha propuesto una extracción líquido-líquido asistida por microondas (MAE) asociada a extracción en fase sólida con sílica (SPE) como etapa de preparación de los aceites, previa a la cuantificación por espectroscopía de fluorescencia y calibración multivariada. En el presente estudio se utilizó la espectroscopía de fluorescencia asociada a calibración multivariada de segundo orden (U-PLS/RBL) para determinar un grupo de siete HAPs (Figuras 1-7: benzo[a]antraceno (BaA), benzo[b]fluoranteno (BbF), benzo[k]fluoranteno (BkF), benzo[a]pireno (BaP), indeno [1,2,3–c,d]-pyreno (IP), dibenzo[a,h]antraceno (DBahA) y benzo[g,h,i]perileno (BghiP). Se realizó una etapa de calibrado con mezclas de los estándares de los siete compuestos de interés preparados en solventes seleccionados, encontrando el intervalo espectral óptimo y el número óptimo de factores para cada HAPs. Se validó con un conjunto preparado en solvente, los valores obtenidos para el error relativo de predicción (REP) (entre 4,8% y 25,2% para BaP y BghiP) y la raíz de error cuadrado medio de predicción (RMSEP) (entre 0,03 ng mL-1 para BkF y 0,88 ng mL-1 para BghiP) se consideraron bajos por lo que las predicciones fueron satisfactorias. La capacidad predictiva del modelo de calibración U-PLS/RBL fue evaluada utilizando muestras de aceite fortificadas con los siete compuestos desde el inicio del proceso obteniendo altos valores de REP y RMSEP. Con el objetivo de incrementar la selectividad y así mejorar la capacidad predictiva disminuyendo los parámetros anteriores, tanto las matrices de excitación emisión (EEMs) del grupo de validación preparado en matriz así como los del conjunto de calibrado fueron derivados y usados para predecir las concentraciones de los HAPs. Otra de las medidas tomadas para mejorar la capacidad predictiva fue que al tratamiento de muestra (MAE-SPE) se le incorporó la precipitación de aceite co-extraído por disminución de temperatura logrando bajar la carga de algunos de los interferentes, que perjudican el análisis y así obtener mejores resultados en la predicción. Se preparó un nuevo grupo de muestras en duplicado fortificadas desde el comienzo del proceso, tratadas con MAE-precipitación de aceite co-extraído- SPE y analizadas mediante HPLC-FLD como método de referencia. Las recuperaciones promedio determinadas mediante HPLC-FLD estuvieron entre un 55 y 79%, no encontrándose diferencias significativas con los valores determinados mediante U-PLS/RBL para BbF, BkF, BaP, BghiP, DBahA e IP. Además, se estableció que los HAPs son estables al menos por dos meses en los extractos finales obtenidos luego del proceso de extracción; puesto que presentaron concentraciones semejantes entre ambos grupos duplicados, aun cuando uno de ellos se analizó después del tiempo señalado.El método propuesto fue aplicado a 15 aceites de oliva virgen comerciales, en uno solo de ellos se detectaron concentraciones por sobre el límite de detección (LOD) para BaA 1,62 ng g-1 y BghiP 1,88 ng g-1 dando un total de 3,5 ng g-1 de HAPs. A pesar de esto, ambos HAPs se encuentran bajo los límites máximos permitidos por la legislación Europea. Por último para investigar si al ser calentado el aceite de oliva en presencia de materia orgánica durante 24 horas, surgen modificaciones del perfil de concentraciones de dos HAPs modelo (BaA e IP), se aplicó el método MAE precipitación de aceite co-extraído SPE. El estudio mostró posibles fenómenos de sorción de los compuestos por la materia orgánica que varían en el tiempo / The Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAH) are a group of organic compound composed of 2 or more simple aromatic rings joined together, which contain neither heteroatoms nor others sustituents. They generate several health problems due to their carcinogenic and mutagenic nature. Considering their lipophilic nature, the PAHs can gather together in fat and vegetal tissues with a high persistence. For this reason we can ingest them indirectly when including fatty food or oils as in the case of vegetal oils. The techniques thoroughly used in order to determine the PAHs concentrations in oils have been the high efficiency liquid chromatography associated to detection by fluorescence or mass spectrometry. Nevertheless, HPLC analysis and the previous sample preparation take a considerable time. Moreover, is a relatively expensive method not only in the technique equipment, but also in the analysis. As alternative to these methods are those based on fluorescence spectroscopy, mainly because of its low cost and rapidity. The relevance of these methods has been limited by its lack of selectivity, specially when similar compounds must be analyzed in complex matrix. One way of achieving a bigger analytical selectivity is associating the fluorescence spectroscopy with different chemometrics methods of data analysis, constituting a multivaried calibration method. In recent research, carried out in the laboratory where this thesis was developed, it has been proposed a liquid-liquid microwave-assisted extraction (MAE) associated to silica-based solid phase extraction (SPE) as preparation phase of oils, prior to the quantification by fluerescence spectroscopy and multivaried calibration. In the present study it was used the fluorescence spectroscopy associated to a second order multivaried calibration (U-PLS/RBL) so as to determine a group of seven PAHs (Figures 1-7: benzo[a]anthracene (BaA), benzo[b]fluoranthene (BbF), benzo[k]fluoranthene (BkF), benzo[a]pyrene (BaP), indeno [1,2,3–c,d]- pyrene (IP), dibenzo[a,h]anthracene (DBahA) and benzo[g,h,i]pyrelene (BghiP). It was carried out a calibrated phase with mixture of the seven compounds of interest prepared in solvent, finding the optimal spectrum interval and the optimal number of factors for each PAHs. It was validated with a set prepared in solvent, the values obtained for the relative-error prediction (REP) (between 4,8% and 25,2% for BaP y BghiP) and the root of the mean squared error of prediction (RMSEP) (between 0,03 ng mL-1 for BkF and 0,88 ng mL-1 for BghiP) were low so the predictions were satisfactory. The predictive capacity of the calibration model U-PLS/RBL was evaluated using fortified oil samples with the seven compounds from the beginning of the process obtaining high values of REP and RMSEP. With the purpose of increasing the selectivity and, in that way, also improving the predictive capacity reducing the previous parameters, not only the Emission Excitation Matrix (EEMs) of the validation group prepared in matrix, but also those from the calibration set were derived and used in order to predict the HAPs concentrations. Another measure taken in order to improve the predictive capacity was incorporating to the sample treatment (MAE-SPE) the precipitation of co-extracted oil throught temperature reduction lowering the charge of some of the interferents. It was prepared a new duplicated sample group fortified from the beginning of the process, treated with MAE- low temperature precipitation-SPE and analyzed through HPLC-FLD as reference method. The average recoveries determined by HPLC-FLD fluctuated between 55 and 79%, finding no significant differences with the determined values through U-PLS/RBL for BbF, BkF, BaP, BghiP, DBahA and IP. Furthermore, it was established that HAPs are steady at least for two months in the final extracts obtained after the extraction process; due to the fact that they presented similar concentrations between both duplicated groups, even though one of them was analized after the indicated period of time. The proposed method was applied to 15 commercial virgin olive oils, only in one of them were detected concentrations over the limit of detection (LOD) for BaA 1,62 ng g-1 and BghiP 1,88 ng g-1 revealing a total of 3,5 ng g-1 of HAPs. In despite of this, both HAPs are under the maximum limits allowed by the European legislation. Lastly, the method was applied to evaluate possible change of the profile of two selected PAHs (BaP and IP) in olive oil heated up in presence of organic matter for 24 hours. The study showed possible sorption phenomena of the compounds on the organic matter depending on time / FONDECYT

Orientador: Fernando Lucas Primo / Banca: Alberto Colli Badino Júnior / Banca: Ariela Veloso de Paula / Resumo: O controle da qualidade dos resultados de análises químicas tem sido cada vez mais exigido devido ao grande prejuízo que dados analíticos não confiáveis podem gerar, principalmente quando se diz respeito à segurança do produto, e às consequências financeiras irreversíveis que pode causar. Para garantir a confiabilidade dos resultados obtidos durante as etapas analíticas é necessário que o método empregado seja validado. Neste contexto, o presente trabalho visa desenvolver e validar um método espectroanalítico para determinação de corantes vermelho e derivados livre e nanoencapsulado, por espectroscopia de absorção e emissão de fluorescência no UV-Vis, como métodos alternativos aos cromatográficos tradicionais. A partir da espectroscopia de absorção e emissão de fluorescência no UV-visível utilizando-se o espectrofotômetro modelo Genesys 10s da Thermo Scientific e espectrofluorímetro Shimadzu RF6000 desenvolveu-se um protocolo experimental para determinação da curva de correlação entre máximo de emissão de absorção e emissão de fluorescência em função de diferentes concentrações de quinizarina. O método foi determinado com número de repetição (n) igual a 3. Os parâmetros de aquisição dos espectros de fluorescência foram fixados com um comprimento de onda de excitação igual a 480 nm, fendas de excitação e emissão igual a 10/10 nm, respectivamente, com emissão na faixa de 520 a 680 nm. As amostras foram preparadas com auxílio de uma micropipeta (10,0 uL Eppendorf) a partir de di... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Quality control of chemical analysis results has been increasingly required because of the great harm that unreliable analytical data can generate, especially when it comes to product safety, and the irreversible financial consequences it can cause. To guarantee the reliability of the results obtained during the analytical steps it is necessary that the method employed be validated. In this context, the present work aims to develop and validate a spectroanalytical method for the determination of red dyes and free and nanoencapsulated derivatives, by absorption spectroscopy and UV-Vis fluorescence emission, as alternative methods to traditional chromatographic methods. UV-visible fluorescence emission and absorption spectroscopy using the Genesys 10s spectrophotometer from Thermo Scientific and Shimadzu RF6000 spectrofluorimeter was developed an experimental protocol for determination of the correlation curve between maximum emission of absorption and emission of fluorescence as a function of different concentrations of quinizarin. The method was determined with repeat number (n) equal to 3. The acquisition parameters of the fluorescence spectra were set with an excitation wavelength equal to 480 nm, excitation and emission slots equal to 10/10 nm, respectively, with emission in the range of 520 to 680 nm. The samples were prepared using a micropipette (10.0 μL Eppendorf) from infinite dilution in acetonitrile (2.0 mL), directly into a 10 mm optical path quartz cuvette, starting with an initial solution of quinizarin 1.00 mg / mL in dimethylsulfoxide. The methods showed linearity in the range of... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

[pt] A Terapia Fotodinâmica (PDT) consiste na irradiação com luz visível de um tecido após a aplicação de um fotossensibilizante. São produzidas diferentes espécies reativas, em especial oxigênio singleto, que desencadeiam uma série de eventos que resultam na inativação ou morte celular. O desenvolvimento de fotossensibilizantes e o estudo de sua distribuição aos locais das lesões são importantes para ampliar as aplicações de PDT. O objetivo deste trabalho foi avaliar as propriedades de ftalocianinas associadas a surfactantes que facilitassem a distribuição e atividade fotocatalítica desse tipo de fotossensibilizante. Foram utilizadas as propriedades espectroscópicas de absorção e fluorescência dos fotossensibilizantes. Numa primeira etapa, foi avaliada a ftalocianina de zinco (ZnPc) em formulações com diferentes surfactantes iônicos (SDS, CTAB, HPS) e não iônicos (Tween 20, Tween 80, Pluronic F-68, PF-127, Triton X-100). Encontrou-se que soluções concentradas de ZnPc e surfactante em DMF ou DMSO formam nanoemulsões instáveis em solução aquosa. No início, ZnPc apresenta-se monomérica nessas nanoemulsões, mas sofre agregação com o passar do tempo, diminuindo sua eficiência como sensibilizante. A cinética de agregação mostrou que HPS e CTAB formam as nanoemulsões mais estáveis, com tempos característicos de formação de agregados superiores a dois dias. Em seguida foi avaliado um novo derivado mentolado de ftalocianina, MentaZnPc, sintetizado por K. Oliveira e colaboradores, em micelas dos surfactantes acima, além dos polioxietilenos C12E9 e Brij 30, 35, 97 e 98. A presença dos grupos mentol como substituintes diminuiu a tendência de empilhamento e produziu maior solubilidade no compartimento hidrofóbico das micelas. Foram avaliados rendimentos quânticos de fluorescência, de produção de oxigênio singleto, usando DPBF como sonda, e fotobranqueamento dos fotossensibilizantes nos meios microheterogêneos. As melhores condições para a geração de 1O2 por ZnPc foram encontradas em nanoemulsões de HPS. Por outro lado, MentaZnPc apresentou ótimo rendimento quântico de oxigênio singleto em micelas não iônicas, especialmente em PF-127, já utilizado amplamente na indústria farmacêutica. / [en] Photodynamic Therapy (PDT) involves irradiation of a tissue with visible light after application of a photosensitizer. Different reactive species are produced, which initiate events that result in inactivation or cell death. The development of photosensitizers and the study of their delivery to sites of the lesions are important to broaden the applications of PDT. The objective of this study was to evaluate the properties of phthalocyanines associated with surfactants that facilitate the distribution and photocatalytic activity of this type of photosensitizer. The spectroscopic properties of absorption and fluorescence were used. In a first step, zinc phthalocyanine (ZnPc) was evaluated in formulations with different ionic (SDS, CTAB, HPS) and nonionic surfactants (Tween 20, Tween 80, Pluronic F-127 and F-127, Triton X-100). It was found that concentrated solutions of the surfactants with ZnPc in DMF or DMSO form unstable nanoemulsions in aqueous solution. At first, ZnPc is monomeric in the nanoemulsions, but aggregates in the course of time, reducing its efficiency as a sensitizer. The kinetics of aggregation showed that HPS and CTAB form the more stable nanoemulsions with aggregation lifetimes greater than two days. Then, a new menthol phthalocyanine derivative, MentaZnPc, synthesized by K. Oliveira et al., was evaluated in micelles of the surfactants above, and of several polyoxyethylenes. The presence of menthol groups as substituents decreased the stacking tendency and produced a greater solubility in the hydrophobic compartment of the micelles. Fluorescence, singlet oxygen quantum yields and photobleaching of the photosensitizers were evaluated in the microheterogeneous media. The best conditions for 1O2 generation by ZnPc were found in HPS nanoemulsions. MintZnPc presented an excellent singlet oxygen quantum yield in non-ionic micelles, especially in Pluronic F-127, which has been widely used in the pharmaceutical industry.