Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-03-21T14:29:08Z No. of bitstreams: 1 camilasiqueiraneves.pdf: 1998026 bytes, checksum: 3b2029c3ffcbc8a5c407289f0b315c67 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-04-24T02:15:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 camilasiqueiraneves.pdf: 1998026 bytes, checksum: 3b2029c3ffcbc8a5c407289f0b315c67 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-24T02:15:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 camilasiqueiraneves.pdf: 1998026 bytes, checksum: 3b2029c3ffcbc8a5c407289f0b315c67 (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O uso de plantas com fins terapêuticos é uma das práticas mais antigas da humanidade e foi reconhecido pela Organização Mundial de Saúde em 1978. No entanto, sabe-se que o uso indiscriminado de plantas medicinais em doses excessivas pode trazer prejuízos à saúde humana. Os principais efeitos adversos em resposta ao uso de plantas medicinais são a toxidez, diferenças no índice de células em divisão e a indução de alterações cromossômicas. P. glomerata é popularmente conhecida como ginseng brasileiro, por apresentar propriedades farmacológicas semelhantes ao ginseng coreano (Panax ginseng C. A. Mey). A espécie é geralmente empregada como tônico, afrodisíaco, no tratamento de doenças reumáticas, anti-estresse e anti-diabético. Diversos ensaios biológicos que empregam organismos como bioindicadores estão disponíveis para a avaliação destes efeitos, sendo Allium cepa um dos mais empregados. O teste de A. cepa foi utilizado no presente trabalho com o objetivo de avaliar os efeitos citogenotóxicos de extratos de Pfaffia glomerata. Foram testados dois tipos de extratos de raízes: metanólico e aquoso, em concentrações que variaram de 8 a 256 mg/mL. Ensaios de germinação e crescimento radicular foram realizados pelo período de oito dias e os ensaios de citogenotoxidade foram feitos nos períodos de 24, 48 e 72h de exposição. As lâminas foram preparadas pela técnica de esmagamento e coradas com Giemsa 5%. Os resultados mostraram inibição da germinação de sementes após exposição ao extrato metanólico e redução do comprimento das raízes, de forma dependente da dose. Foi observada inibição significativa dos índices mitóticos após exposição aos dois extratos, sendo o índice observado para o extrato metanólico ainda menor. Alterações cromossômicas foram observadas em todas as concentrações testadas, com maior frequência de cromossomos aderentes, formação de pontes em anáfase e telófase e também indução de micronúcleos. Os ensaios com Allium cepa mostraram ação tóxica e genotóxica tanto para o extrato aquoso de P. glomerata quanto para o extrato metanólico. Estes efeitos são provavelmente devido à presença de saponinas e ecdisteróides (β-ecdisona) nas raízes da espécie. O teste de Allium cepa com a substância β-ecdisona também mostrou efeito citogenotóxico. Sugere-se, portanto, o uso racional de raízes de P.glomerata com fins terapêuticos e a necessidade de estudos mais aprofundados acerca de seu potencial citogenotóxico. / The use of plants for therapeutic purposes is one of the oldest practices of mankind, and was recognized by the World Health Organization in 1978. However, it is known that the indiscriminate use of medicinal plants in excessive doses can be harmful to human health. The main adverse effects in response to the use of medicinal plants are the toxicity, differences in the rate of cell division and the induction of chromosomal aberrations. P. glomerata is popularly known as "Brazilian Ginseng" due it´s pharmacological properties similar to Korean ginseng (Panax ginseng C. A. Mey). The species is usually used as tonic, aphrodisiac, in the treatment of rheumatic diseases, anti-stress and antidiabetic. Several biological assays using organisms as bioindicators are available to assess these effects and Allium cepa is the most used. The A. cepa test was used in this study, with the aim to evaluate the citogenotoxic effects of P. glomerata extracts using A. cepa test model. Two different root extracts were tested: methanolic and aqueous, with concentrations ranging from 8 to 256 mg/mL. Germination and root growth assays were performed for eight days and the citogenotoxic tests were performed during 24, 48 and 72 hours of exposure. Slides were prepared by the squash technique and stained with 5% Giemsa. The results showed inhibition of germination after exposure to methanolic extract and reduction of root length in a dose-dependent manner. Significant inhibition of mitotic index was observed after exposure to the two extracts, being the index for the methanolic extract even smaller. Chromosomal aberrations were observed at all concentrations tested and the most frequent abnormalities were chromosome adherence, bridges in anaphase and telophase and micronuclei. P. glomerata roots are rich in saponins and ecdysteroids, being β- ecdysone it´s major component. The A. cepa model showed toxic and genotoxic effects for both extracts tested. These effects are probably due to the presence of saponins and ecdysteroids (β-ecdysone) in P. glomerata roots. The Allium cepa test showed that β-ecdysone also showed cytogenotoxic effects. It is suggested, therefore, the rational use of P.glomerata roots for therapeutic purposes and the necessity of further studies about its citogenotoxic potential.

Orientadores: Fernando Antonio Cabral, Carmen Lucia Queiroga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-24T20:47:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bitencourt_RaphaelaGabri_M.pdf: 3804854 bytes, checksum: 637f4c96c752119c1bf3fe68678e9bbb (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Saponinas são compostos que se destacam por apresentarem ações farmacológicas, e também por serem empregadas nas indústrias de alimentos e de cosméticos devido às suas propriedades físico-químicas, tais como agentes de superfície. Processos de extração com dióxido de carbono supercrítico (scCO2), como substituto de solventes orgânicos tóxicos representam uma boa opção para extração de compostos bioativos, pois produzem extratos e resíduos isentos de solventes indesejáveis sendo, portanto, tecnologias limpas. Neste sentido, este trabalho teve como objetivo extrair e fracionar saponinas a partir de três fontes vegetais, sendo elas raízes de Pfaffia glomerata e de Hebanthe eriantha, conhecidas como ginseng brasileiro, e frutos de Melia azedarach, utilizando um processo sequencial em leito fixo usando scCO2, etanol e água como solventes. As extrações foram realizadas a 50 oC e 300 bar e em quatro etapas sequenciais. Na primeira etapa utilizou-se como solvente scCO2, na segunda escoou-se pelo leito fixo uma mistura scCO2 + etanol na proporção 70:30 (m/m) e, etanol puro e uma mistura etanol/água (70:30 v/v) foram usados nas terceira e quarta etapas, respectivamente. A eficiência do processo de extração e fracionamento foi avaliada com base: 1) nos valores de rendimento de extração, 2) na presença de saponinas, as quais foram monitoradas por cromatografia em camada delgada (CCD) e 3) pela capacidade de redução da tensão superficial de soluções aquosas. Os extratos de M. azedarach ainda foram avaliados quanto ao teor de fenóis e flavonoides totais, perfil químico de compostos voláteis por CG- EM e por espectrometria de massas (ESI-EM). As raízes estudadas apresentaram curvas de extração (cinética) e rendimento semelhantes entre si nas três primeiras etapas. Os rendimentos de extração para as quatro etapas de extração foram 0,16; 0,55; 1,00 e 6,9 % para raízes de P. glomerata e 0,17; 0,58; 0,89 e 28 % para raízes de H. eriantha, respectivamente, indicando presença majoritária de compostos de maior polaridade nestas espécies. Os rendimentos de extração a partir de frutos de M. azedarach apresentaram-se maiores (7,6; 6,4; 19 e 12,3 %) que os de raízes de ginseng brasileiro. As análises por CCD mostraram que o processo de extração foi seletivo de acordo com a polaridade do solvente utilizado, fornecendo frações enriquecidas em diferentes compostos. Os extratos das três matrizes vegetais obtidos pela mistura de dióxido de carbono e etanol (SCEE) apresentaram a maior redução da tensão superficial, apresentando valores de 25,0; 25,0 e 26,9 mN.m-1 para P. glomerata, H. eriantha e M. azedarach, respectivamente, contra 36,3 mN.m-1 para solução de surfactante sintético (dodecil sulfato de sódio). Este resultado sugere que esta capacidade está associada a presença de saponinas de menor polaridade. E, ainda, verificou-se que as saponinas de ginseng brasileiro apresentam concentração micelar crítica (CMC) ? 20 g.L-1. Os maiores teores de compostos fenólicos dos extratos de M. azedarach foram obtidos nos extratos hidroalcoólico (21,6 mg de EAG/g de extrato) e SCEE (20,6 mg de EAG/g de extrato). Não foi verificada presença significativa de compostos voláteis em frutos de M. azedarach por CG-EM. Análises de EM identificaram ácidos graxos (linoleico, palmítico e mirístico) e azedaraquina C (limonoide) no extrato supercrítico e compostos fenólicos (ácido cafeico e ácido málico) nos demais extratos. Por fim, o dióxido de carbono supercrítico mostrou-se seletivo às saponinas com maior capacidade de reduzir a tensão superficial de soluções aquosas, quando utilizado com etanol como cossolvente e, no geral, o processo de extração sequencial em leito fixo utilizando o solventes "verdes" apresentou-se como uma boa alternativa ao uso de solventes orgânicos para extrair e fracionar saponinas presentes em diferentes fontes vegetais / Abstract: Saponins are compounds that stand out due to their pharmacological actions, and also because they are employed by food and cosmetics industry due to its physicochemical properties, such as surfactants. Extraction processes with supercritical carbon dioxide (scCO2) as a substitute of toxic organic solvents represent a good option for extracting biocompounds since they obtain free of undesirable solvents extracts and residues thus being a green technology. Therefore, this study aimed to extract and fractionate saponins of three plant sources: roots of Pfaffia glomerata and Hebanthe eriantha (Brazilian ginseng) and fruits of Melia azedarach, by a sequential process in fixed bed using scCO2, ethanol and water as solvents. The extractions were performed at 50 °C and 300 bar in four sequential steps. In the first step scCO2 was used as solvent; in the second scCO2/ethanol mixture, mass ratio 70:30 (w/w); pure ethanol and ethanol/water mixture 70:30 (v/v) were used in the third and fourth stages, respectively. The efficiency of extraction and fractionation process was evaluated based on: 1) the extraction yield, 2) presence of saponins, which were monitored by thin layer chromatography (TLC) and 3) the potential of extracts to reduce the surface tension of aqueous solutions. The extracts of Melia azedarach also were evaluated for their content of total phenols and flavonoids, chemical profile by GC-MS and mass spectrometry (ESI-MS). The roots studied presented similar overall extraction curves (kinetic) and yields in the first three steps. The extraction yields for the four stages of extraction were 0.16, 0.55, 1.00 and 6.9 % for roots of P. glomerata and 0.17, 0.58, 0.89 and 28 % for H. eriantha roots, respectively, showing predominant presence of polar compounds in these species. The extraction yields from fruits of M. azedarach were higher (7.6, 6.4, 19 and 12.3 %) than roots of Brazilian ginseng. Analyses by TLC indicated that process was selective in accordance with the polarity of the solvent used providing fractions enriched in different compounds. The extracts of three plant matrices obtained by carbon dioxide and ethanol mixture (SCEE) presented highest ability to reduce surface tension, with values of 25.0, 25.0 and 26.9 mN.m- 1 for P. glomerata, H. eriantha and M. azedarach, respectively, against 36.3 mN.m-1 for a synthetic surfactant solution (sodium dodecyl sulphate). This result suggests that ability is associated with the presence of less polar saponins. And further, Brazilian ginseng saponins have critical micelle concentration (CMC) ? 20 g.L-1. The highest levels of phenolic compounds of M. azedarach were obtained in hydroalcoholic extract (21.6 mg EAG/g extract) and SCEE (20.6 mg EAG/g extract). It was not observed a significant presence of volatile compounds in fruits of M. azedarach by GC-MS. ESI-MS analyses identified fatty acids (linoleic, palmitic and myristic acid) and azedarachin C (limonoid) in supercritical extract (SCE) and the presence of phenolic compounds (caffeic and malic acid) in the other extracts. Finally, the supercritical carbon dioxide has shown to be selective for saponins with the highest capacity to reduce the surface tension of water when used with ethanol as cosolvent. In general, process of sequential fixed bed extraction with green solvents represents a great alternative instead of using organic solvents to extract and fractionate saponins present in different plant sources / Mestrado / Engenharia de Alimentos / Mestra em Engenharia de Alimentos

Bakgrund: Ginseng klassas som ett traditionellt växtbaserat läkemedel som säljs inom egenvården på apotek samt hälsokostbutiker. Det påstås att ginseng har en uppiggande effekt och anses vara effektivt mot trötthet. Trötthet finns i olika former och grader samt beror på olika faktorer. Fatigue är också en typ av trötthet men beror på en bakomliggande sjukdom och anses vara mer utmattande än trötthet. Ordet används också för att skilja det från så kallad normal trötthet. Syfte: Syftet med detta arbete är att genom systematiska sammanställningar och meta-analyser analysera om det finns bevis som stödjer påståendet om att ginseng ska vara effektivt mot trötthet och fatigue.Mål: Hitta systematiska sammanställningar samt meta-analyser genom identifiering av relevant litteratur genom en databassökning, bedöma kvaliteten genom PRISMA och sammanställa resultat för att besvara syftets frågeställning.Metoder: Litteratursökning genom relevanta databaser samt värdera de med hjälp utav PRISMA. Slutligen ska litteraturen sammanställas. Resultat: 4 systematiska sammanställningar samt 1 meta-analys ingick i analysen. De bedömdes vara av medel till hög kvalitet enligt PRISMA. Resultaten variera beroende på vilken typ av ginseng som deltagarna fick. Majoriteten av resultaten från de enskilda studierna tyder på att amerikansk och asiatisk ginseng är effektivt mot fatigue. Röd ginseng är däremot inte lika effektiv. Nio utav de sammanlagda nitton studierna gjordes på friska individer och endast två utav studierna rapporterade att ginseng hade en signifikant förbättring på trötthet.Slutsats: Amerikansk ginseng, följt av asiatisk ginseng, visade sig vara bra mot fatigue. Däremot hade röd ginseng ingen effekt på fatigue i samma grad som amerikansk och asiatisk. Dock är det svårt att påstå hur det fungerar mot just trötthet, då trötthet har många grader och beror på olika faktorer samt att det inte finns tillräckligt med belägg av bra kvalitet som kan styrka påståendet om att det skulle fungera mot trötthet, som inte är orsakad av någon bakomliggande sjukdom som fatigue. / Background: Ginseng is classified as a traditional herbal medicine sold in the self-care section at pharmacies and health food stores. It is claimed that ginseng has a revitalizing effect and is considered effective against tiredness. Tiredness exists in various forms and degrees and depends on various factors. Fatigue is also a type of tiredness but depends on an underlying disease and is more exhausting than tiredness. The word is also used to distinguish it from so-called normal tiredness.Purpose: The aim of this work is to find systematic reviews and meta-analyzes to see if there is evidence supporting the claim that ginseng is effective against tiredness and fatigue.Objective: Find systematic reviews and meta analyzes by identifying relevant literature through a database search, assessing the value of the studies through PRISMA and compiling results to answer the purpose of this work. Method: Literature search through relevant databases and assess the studies based on PRISMA’s checklist. Finally the studies should be compiled.Results: 4 systematic reviews and 1 meta-analysis were obtained. They were to be of average to high quality according to the PRISMA checklist. The results vary depending on the type of ginseng that was given to the participants. Most of the studies indicate that American and Asian ginseng are effective against fatigue. However, the studies indicate that red ginseng is not effective. Conclusion: In conclusion ginseng is effective in people with fatigue, depending on the type of ginseng it is. American ginseng, followed by Asian ginseng, proved to be good against fatigue that’s caused by an underlying illness. However, red ginseng had no effect on fatigue to the same extent as American and Asian. Also, it is difficult to claim how it works against people who are only feeling tired, as normal tiredness has many degrees and depends on various factors and that there is not enough evidence of good quality that can substantiate the claim that it would work against tiredness that’s not caused by an underlying illness.

No description available.

Orientador: Wellerson Rodrigo Scarano / Resumo: Citocinas e proteínas quinases são fundamentais para o controle do processo espermatogênico, estando diretamente envolvidas na dinâmica da barreira hematotesticular. Diferentes mecanismos de controle são modulados por receptores como o GPR30, que ativa rapidamente diferentes vias de sinalização, responsáveis pelos processos de proliferação, sobrevivência e morte celular. Os desreguladores endócrinos (DEs) possuem grande afinidade pelo GPR30, além de potencial para ativar vias de estresse oxidativo e a abertura da barreira. Antagonistas funcionais dos DEs, como o Panax ginseng, podem ser protetores contra seus efeitos. Considerando a importância das vias de sinalização que regulam a espermatogênese e a constante exposição ambiental aos DEs a que estamos submetidos, este trabalho objetiva estudar a possível modulação da via não genômica ativada por GPR30 e do estresse oxidativo em células de Sertoli expostas a baixas doses do DE Monobutil Ftalato (MBP) bem como o potencial papel citoprotetor do GIM-1 (metabólito do P. ginseng) sobre essas células. Para tal, as células de Sertoli humanas (HSec) foram mantidas sobre matriz artificial, simulando o ambiente in vivo. A exposição ao MBP e ao GIM-1 foi realizada nos tempos de 30min, 1, 12, e 48 horas, em doses pré-estabelecidas pelo ensaio do MTT (teste de toxicidade) em 4 grupos: controle, MBP, GIM-1 e MBP + GIM-1. A morfologia celular foi avaliada pela coloração com Hematoxilina e Eosina, evidenciando efeitos deletérios do MBP sobre... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cytokines and kinases protein are essential to control the spermatogenic process, being directly involved in the blood-testis barrier control. Activation of these mechanisms is modulated by receptors such as GPR30, which rapidly activates different signaling pathways responsible for proliferation and cell death processes. Endocrine Disruptors (EDs) have high affinity for GPR30, causing oxidative stress and possible barrier rupture. Functional antagonists of EDs, such as Panax ginseng, may be protective against their effects. Considering the importance of the signaling pathways that regulate spermatogenesis and the constant environmental exposure to the EDs to which we are subject, this work aims to study the possible modulation of the non-genomic pathway activated by GPR30 and oxidative stress in Sertoli cells exposed to low doses of the ED Monobutyl Phthalate (MBP) and the possible cytoprotective role of GIM-1 (P. ginseng metabolite) on these pathways. To this end, HSec human lineage cells were maintained on artificial matrix, simulating in vivo environment. Exposure to MBP and GIM-1 was performed at 30 min, 1, 12 and 48 hours at pre-set MTT (toxicity assay) levels in 4 groups: control, MBP, GIM-1 and MBP + GIM-1. Morphology and cell adhesion were evaluated by staining with Hematoxylin and Eosin, evidencing deleterious effects of MBP above cell distribution and adhesion in basement membrane; GIM-1 group was similar to Control and MBP+GIM-1 showed an intermediate aspect. In o... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

<p><em>Panax ginseng</em> is a traditional herb that has been used for over 2000 years to promote health and longevity. Active components of ginseng include ginsenosides, polysaccharides, flavonoids, polyacetylenes, peptides, vitamins, phenols and enzymes, of which the ginsenosides are considered to be the major bioactive constituents. Although widely used, the exact mechanisms of ginseng and its compounds remain unclear. In this thesis we use melanophores from <em>Xenopus laevis</em> to investigate the effects of <em>Panax ginseng</em> extract G115 and its constituents on organelle transport and signalling. Due to coordinated bidirectional movement of their pigmented granules (melanosomes), in response to defined chemical signals, melanophores are capable of fast colour changes and provide a great model for the study of intracellular transport. The movement is regulated by alterations in cyclic adenosine 3’:5’-monophosphate (cAMP) concentration, where a high or low level induce anterograde (dispersion) or retrograde (aggregation) transport respectively, resulting in a dark or light cell. Here we demonstrate that <em>Panax ginseng</em> and its constituents ginsenoside Rc and Rd and flavonoid quercetin induce a concentration-dependent anterograde transport of melanosomes. The effect of ginseng is shown to be independent of cAMP changes and protein kinase A activation. Upon incubation of melanophores with a combination of Rc or Rd and quercetin, a synergistic increase in anterograde movement was seen, indicating cooperation between the ginsenoside and flavonoid parts of ginseng. Protein kinase C (PKC) inhibitor Myristoylated EGF-R Fragment 651-658 decreased the anterograde movement stimulated by ginseng and ginsenoside Rc and Rd. Moreover, ginseng, but not ginsenosides or quercetin, stimulated an activation of 44/42-mitogen activated protein kinase (MAPK), previously shown to be involved in both aggregation and dispersion of melanosomes. PKC-inhibition did not affect the MAPK-activation, suggesting a role for PKC in the ginseng- and ginsenoside-induced dispersion but not as an upstream activator of MAPK.</p> / <p><em>Panax ginseng </em>är ett av de vanligaste naturläkemedlen i världen och används traditionellt för att öka kroppens uthållighet, motståndskraft och styrka. Ginseng är ett komplext ämne bestående av ett antal olika substanser, inklusive ginsenosider, flavonoider, vitaminer och enzymer, av vilka de steroidlika ginsenosiderna anses vara de mest aktiva beståndsdelarna. Flavonoider (som finns i till exempel frukt och grönsaker) och ginseng har genom forskning visat sig motverka bland annat hjärt-och kärlsjukdomar, diabetes, cancer och demens. Trots den omfattande användningen är dock mekanismen för hur ginseng verkar fortfarande oklar. I den här studien har vi använt pigmentinnehållande celler, melanoforer, från afrikansk klogroda för att undersöka effekterna av <em>Panax ginseng</em> på pigment-transport och dess maskineri. Melanoforer har förmågan att snabbt ändra färg genom samordnad förflyttning av pigmentkorn fram och tillbaka i cellen, och utgör en utmärkt modell för studier av intracellulär transport. Förflyttningen regleras av förändringar i halten av cykliskt adenosin-monofosfat (cAMP) i cellen, där en hög eller låg koncentration medför spridning av pigment över hela cellen (dispergering) eller en ansamling i mitten (aggregering), vilket resulterar i mörka respektive ljusa celler. Här visar vi att <em>Panax ginseng</em>, ginsenosiderna Rc och Rd samt flavonoiden quercetin stimulerar en dispergering av pigmentkornen. När melanoforerna inkuberades med en kombination av ginsenosid Rc eller Rd och quercetin, kunde en synergistisk ökning av dispergeringen ses, vilket tyder på en samverkan mellan ginsenosid- och flavonoid-delarna av ginseng. Ett protein som tidigare visats vara viktigt för pigmenttransporten är mitogen-aktiverat protein kinas (MAPK), och här visar vi att också melanoforer stimulerade med ginseng, men dock inte med ginsenosider eller quercetin, innehåller aktiverat MAPK. Genom att blockera enzymet protein kinas C (PKC) (känd aktivator av dispergering), minskade den ginseng- och ginsenosid-inducerade dispergeringen, medan aktiveringen av MAPK inte påverkades alls. Detta pekar på en roll för PKC i pigment-transporten men inte som en aktivator av MAPK.</p>

Panax ginseng is a traditional herb that has been used for over 2000 years to promote health and longevity. Active components of ginseng include ginsenosides, polysaccharides, flavonoids, polyacetylenes, peptides, vitamins, phenols and enzymes, of which the ginsenosides are considered to be the major bioactive constituents. Although widely used, the exact mechanisms of ginseng and its compounds remain unclear. In this thesis we use melanophores from Xenopus laevis to investigate the effects of Panax ginseng extract G115 and its constituents on organelle transport and signalling. Due to coordinated bidirectional movement of their pigmented granules (melanosomes), in response to defined chemical signals, melanophores are capable of fast colour changes and provide a great model for the study of intracellular transport. The movement is regulated by alterations in cyclic adenosine 3’:5’-monophosphate (cAMP) concentration, where a high or low level induce anterograde (dispersion) or retrograde (aggregation) transport respectively, resulting in a dark or light cell. Here we demonstrate that Panax ginseng and its constituents ginsenoside Rc and Rd and flavonoid quercetin induce a concentration-dependent anterograde transport of melanosomes. The effect of ginseng is shown to be independent of cAMP changes and protein kinase A activation. Upon incubation of melanophores with a combination of Rc or Rd and quercetin, a synergistic increase in anterograde movement was seen, indicating cooperation between the ginsenoside and flavonoid parts of ginseng. Protein kinase C (PKC) inhibitor Myristoylated EGF-R Fragment 651-658 decreased the anterograde movement stimulated by ginseng and ginsenoside Rc and Rd. Moreover, ginseng, but not ginsenosides or quercetin, stimulated an activation of 44/42-mitogen activated protein kinase (MAPK), previously shown to be involved in both aggregation and dispersion of melanosomes. PKC-inhibition did not affect the MAPK-activation, suggesting a role for PKC in the ginseng- and ginsenoside-induced dispersion but not as an upstream activator of MAPK. / Panax ginseng är ett av de vanligaste naturläkemedlen i världen och används traditionellt för att öka kroppens uthållighet, motståndskraft och styrka. Ginseng är ett komplext ämne bestående av ett antal olika substanser, inklusive ginsenosider, flavonoider, vitaminer och enzymer, av vilka de steroidlika ginsenosiderna anses vara de mest aktiva beståndsdelarna. Flavonoider (som finns i till exempel frukt och grönsaker) och ginseng har genom forskning visat sig motverka bland annat hjärt-och kärlsjukdomar, diabetes, cancer och demens. Trots den omfattande användningen är dock mekanismen för hur ginseng verkar fortfarande oklar. I den här studien har vi använt pigmentinnehållande celler, melanoforer, från afrikansk klogroda för att undersöka effekterna av Panax ginseng på pigment-transport och dess maskineri. Melanoforer har förmågan att snabbt ändra färg genom samordnad förflyttning av pigmentkorn fram och tillbaka i cellen, och utgör en utmärkt modell för studier av intracellulär transport. Förflyttningen regleras av förändringar i halten av cykliskt adenosin-monofosfat (cAMP) i cellen, där en hög eller låg koncentration medför spridning av pigment över hela cellen (dispergering) eller en ansamling i mitten (aggregering), vilket resulterar i mörka respektive ljusa celler. Här visar vi att Panax ginseng, ginsenosiderna Rc och Rd samt flavonoiden quercetin stimulerar en dispergering av pigmentkornen. När melanoforerna inkuberades med en kombination av ginsenosid Rc eller Rd och quercetin, kunde en synergistisk ökning av dispergeringen ses, vilket tyder på en samverkan mellan ginsenosid- och flavonoid-delarna av ginseng. Ett protein som tidigare visats vara viktigt för pigmenttransporten är mitogen-aktiverat protein kinas (MAPK), och här visar vi att också melanoforer stimulerade med ginseng, men dock inte med ginsenosider eller quercetin, innehåller aktiverat MAPK. Genom att blockera enzymet protein kinas C (PKC) (känd aktivator av dispergering), minskade den ginseng- och ginsenosid-inducerade dispergeringen, medan aktiveringen av MAPK inte påverkades alls. Detta pekar på en roll för PKC i pigment-transporten men inte som en aktivator av MAPK.

published_or_final_version / Anatomy / Master / Master of Philosophy

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-11-11T16:46:37Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 682521 bytes, checksum: 869569e287896b20f5fe279b28aee120 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-11T16:46:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 682521 bytes, checksum: 869569e287896b20f5fe279b28aee120 (MD5) Previous issue date: 2006-11-06 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Com o apelo da mudança para hábitos saudáveis, observa-se o aumento do consumo de fruta fresca em todo o mundo, que se estende aos sucos processados. Bebidas com novos sabores e aromas estão sendo elaboradas, sendo as bebidas mistas de frutas mais uma opção para os consumidores e uma tendência do mercado internacional. A adição de componentes funcionais também vem sendo feita, e os extratos de Ginkgo biloba e Panax ginseng vêm como uma nova opção, por apresentarem inúmeros benefícios à saúde, agregando valor aos produtos de frutas. Diante do exposto, o presente trabalho objetivou a elaboração de néctares mistos à base de caju, manga e acerola, adicionados de extratos de Ginkgo biloba e Panax ginseng e a mistura dos dois extratos, além de estudar a estabilidade dos produtos por um período de seis meses. Foram formulados néctares mistos de frutas tropicais, a partir de 35% de polpa e sólidos solúveis totais padronizados a 11 °Brix. Os teores de polpas variaram segundo um delineamento de misturas: caju (12,25%-21,00%); acerola (1,75%-10,50%); e manga (12,25%-21,00%). A formulação com 12,25% de caju, 21,00% de manga e 1,75% de acerola foi a mais aceita pelos provadores, e apresentou 49,9 mg de vitamina C/100mL de néctar. As respostas sensoriais também foram avaliadas através de análise de agrupamento e os grupos obtidos foram submetidos à análise de componentes principais, revelando a existência de três grupos distintos entre os provadores, indicando claramente a segmentação dos consumidores que preferiam formulações diferenciadas. A adição de extratos de Ginkgo biloba, Panax ginseng e a mistura de ambos em concentrações 15, 20, 25 e 30mg/100mL de néctar foi testada nos néctares, observando-se diminuição das notas de aceitação com o aumento da concentração dos extratos. Foram selecionados os néctares com adição de 15 mg de extrato de Ginkgo biloba/100 mL, 20 mg de extrato de Panax ginseng / 100 mL e a mistura com 10 mg de extrato de Ginkgo biloba e 10 mg de extrato de Panax ginseng/100 mL para avaliação da estabilidade durante 180 dias de armazenamento em condições similares às de comercialização. O tratamento térmico de 90 oC / 60s, conjuntamente com a adição de benzoato de sódio e metabissulfito foram suficientes para garantir a estabilidade microbiológica dos néctares formulados à temperatura ambiente. Os valores de pH, sólidos solúveis, acidez, e açúcares redutores apresentaram pouca variação ao longo dos 180 dias de armazenamento a temperatura ambiente. Os teores de vitamina C foram os que apresentaram maiores variações em todos os néctares mistos de frutas no decorrer de armazenamento. O tempo de armazenamento não afetou a qualidade sensorial dos produtos; sendo que a adição de extrato de Ginkgo biloba ao néctar misto de frutas alterou a aceitação pelos consumidores, sendo a aceitação destes produtos menores. Os resultados sensoriais foram avaliados através da metodologia de Mapa de Preferência Interno, que permitiu identificar a segmentação dos consumidores no aroma, sabor e impressão global, podendo ser feita uma identificação e caracterização de preferências e grupos consumidores. Os néctares sem adição de extrato (controle) e com adição de Panax ginseng foram os mais aceitos pelos consumidores em todos os atributos testados. / With the appealing of changes to healthy habits, it is observed that the consumption of fresh fruit has increased all over the world, and processed juices are an extension of that. Beverages presenting new flavors and aromas are being elaborated; being the mixed fruit drinks one more option to consumers and a trend to international market. The addition of functional components can also be noticed, and extracts of Ginkgo biloba e Panax ginseng are new options, once they present large benefits to human s health and aggregate value to fruit products. According to what was quoted, the actual work had as objective to develop mixed nectars based on cashew apple, mango and acerola, added to extracts of Ginkgo biloba e Panax ginseng and the mix of both extracts, as well as to study the stability of the developed products for six months. They were developed mixed nectars of tropical fruit formulated with at least 35% of pulp and total soluble solids, with 11°Brix. The values of pulp varied according to design of the mixtures: cashew apple (12.25%-21.00%); acerola (1.75%-10.50%); and mango (12.25%-21.00%). The formulation containing 12.25% of cashew apple, 21.00% of mango and 1.75% of acerola was best accepted among the panelists, and it showed 49.9mg of vitamin C/100mL of nectar. The sensorial responses were also evaluated trough cluster analyses and the obtained groups were submitted to main components analyses, showing the existence of three distinct groups among the panelists, indicating clearly consumer s segmentation that preferred different formulations. The addition of Ginkgo biloba and Panax ginseng extracts and the mixture of both in concentrations of 15, 20, 25 and 30mg/100ml nectar were tested at nectars; it was observed that values decreased as the concentration of the extract was being enhanced. They was selected the nectars with addition of 15mg of Ginkgo biloba extract/100 mL, 20 mg of Panax ginseng extract/100 mL and the mixture containing 10 mg of de Ginkgo biloba extract and 10 mg of Panax ginseng extract/100 mL for stability evaluation for the period of 180 days of storage in similar conditions of commercialization. The thermal treatment of 90 o C / 60s, combined to the addition of sodium benzoate and sodium metabisulfite were sufficient to guarantee microbiological stability of the formulated nectars at room temperature. The values of pH, soluble solids, acidity and reducing sugar showed little variation during 180 days of storage at room temperature. The contents of vitamin C were the ones that presented the highest variations in all mixed fruit nectars during the storage. The storage period did not affect the sensorial quality of the products, besides that, the addition of Ginkgo biloba extract to the mixed fruit nectar altered the consumers acceptance, being these products acceptance the lowest ones. The sensorial results were evaluated trough internal preference mapping methodology, which allowed an identification of the consumers segmentation of aroma, flavor and global impression, being possible an identification of characterization of preferences and consumers groups. The nectars without the addition of extract (control) and addition of Panax ginseng were preferred by consumers in all tested attributes.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Many biotechnological techniques have been formed by new tools to the study of medicinal plants and for the production of homogenous and productive biomass. This work aimed to examine aspects of morphogenesis and callogenesis in Pfaffia glomerata and Pfaffia tuberosa as well as to evaluate the production of β-ecdysone in micropropagated plants, clones and calli in vitro. Nodal segments of two accessions (BRA and JB-UFSM) of P. glomerata were cultivated on Murashige and Skoog (MS) medium. In relation to P. tuberosa the process of disinfection, multiplication and acclimatization of the plants was studied. Studies referring to the induction of callus, organogenesis and embryogenesis were conducted using medium supplemented with auxins and cytokinins. Roots and aerial parts of the micropropagated plants, clones regenerated by indirect organogenesis and calli in vitro were analysed in relation to production of β-ecdysone by high efficiency liquid chromatography. Micropropagation proved to be a viable method for the production of P. glomerata plants on a commercial scale. The BRA accessions presented higher multiplication rate and β-ecdysone content when compared to JB-UFSM. Nodal segments of P. tuberosa showed an absence of microorganisms and a high survival rate after being washed with various disinfecting solutions. Better results in relation to micropropagation in this species were registered in medium with 1μM of thidiazuron, followed by subcultivation of shoots in medium without thidiazuron, where the plants showed excellent development and good adaptation to ex vitro conditions. After cultivation in the field, the β-ecdysone content found in these plants was similar to that found in wild plants in vivo. It was found that, in both studied species, the aerial parts of the plants accumulated a greater β-ecdysone content when compared to roots. Calli from nodal segments of P. glomerata showed differences in consistency, morphogenic potential and β-ecdysone content, depending on plant growth regulators concentrations added to the nutritive medium. In general, the production of this metabolite in the calli appear to be associated with the friable consistency and regeneration of shoots. In P. tuberosa the β-ecdysone content varied among the friable calli depending on the concentration of auxin and appear to be dependent on the regeneration of shoots. The P. glomerata calli presented a low plant regeneration frequency; the plants (clones) regenerated from calli presented normal morphology, but differed in relation to β-ecdysone content. In P. tuberosa several clones were regenerated from friable calli in medium MS with auxin or auxin and cytokinin. On the other hand, root explants formed embryogenic calli in medium MS with auxin and cytokinin. These biotechnological strategies involving cultivation techniques in vitro together with the dosage of β-ecdysone are pioneer studies for the genus and could be useful for the propagation and genetic breeding of these species of Brazilian ginseng. / Diversas técnicas biotecnológicas têm se constituído em novas ferramentas para o estudo de plantas medicinais, bem como para a produção de biomassa homogênea e produtiva. Em função disso, este estudo teve como objetivo estudar aspectos da morfogênese e a calogênese de Pfaffia glomerata e Pfaffia tuberosa e avaliar a produção de b-ecdisona em plantas micropropagadas, clones e calos in vitro. A micropropagação de acessos (BRA e JBUFSM) de P. glomerata foi conduzida a partir de segmentos nodais em meio nutritivo Murashige e Skoog (MS). Em P. tuberosa, estudou-se o processo de desinfestação, multiplicação e aclimatização das plantas. Estudos referentes à indução de calos, organogênese e embriogênese foram conduzidos em meio MS suplementado com auxinas e citocininas. Raízes e as partes aéreas das plantas micropropagadas, plantas (clones) regeneradas via organogênese indireta e calos cultivados in vitro foram analisados em relação ao conteúdo de b-ecdisona em cromatografia líquida de alta eficiência. A micropropagação mostrou ser um método adequado para a produção de mudas de P. glomerata, em escala comercial. O acesso BRA apresentou uma maior taxa de propagação em meio MS e um maior teor de b-ecdisona quando comparado ao acesso JB-UFSM. Segmentos nodais de P. tuberosa apresentaram ausência de microrganismos e uma alta taxa de sobrevivência após lavagens com várias soluções desinfestantes. Melhores resultados em relação à micropropagação nesta espécie foram registrados em meio MS acrescido de 1 μM de TDZ, seguido do subcultivo dos brotos em meio MS isento de fitoreguladores, no qual as plantas apresentaram excelente desenvolvimento e uma ótima adaptação às condições ex vitro. Após cultivo no solo, o teor de β-ecdisona encontrado nessas plantas foi similar ao encontrado em plantas nativas in vivo. Constatou-se que, em ambas as espécies estudadas, as partes aéreas das plantas acumularam um maior teor de β-ecdisona quando comparado ao sistema radicular. Calos de P. glomerata apresentaram diferenças quanto à consistência, potencial morfogênico e produção de b-ecdisona dependendo das concentrações dos fitoreguladores adicionados ao meio nutritivo. Em geral, a produção desse metabólito nos calos parece estar associada à consistência friável e a regeneração de brotos. Em P. tuberosa, o teor de β-ecdisona variou entre os calos friáveis organogênicos dependendo da concentração de auxina adicionada ao meio nutritivo; além disso, a presença de β-ecdisona nos calos parece ser dependente da regeneração de parte aérea. Os calos de P. glomerata apresentaram um baixa frequência de regeneração de brotos; as plantas (clones) regeneradas a partir dos calos apresentaram morfologia normal, mas diferiram quanto ao conteúdo de β-ecdisona. Em P. tuberosa, vários clones foram regenerados a partir de calos friáveis formados em meio MS com auxina ou auxina e citocinina. Por outro lado, explantes radiculares formaram calos embriogênicos apenas quando cultivados em meio com citocinina e auxina. Estas estratégias biotecnológicas envolvendo técnicas de cultivo in vitro juntamente com o doseamento de β-ecdisona são pioneiras para o gênero e poderão ser úteis para a propagação e o melhoramento dessas espécies de ginseng brasileiro.