Made available in DSpace on 2014-06-12T15:04:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4513_1.pdf: 733474 bytes, checksum: 96d9ff147d1527b544a0ce02910e2af1 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / A antracnose foliar ou mal-das-sete-voltas na cebola, causada pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides, destaca-se como uma das principais doenças em locais de produção da cebola no estado de Pernambuco. O presente trabalho objetivou estudar a patogenicidade na cebola de isolados de C. gloeosporioides e analisar a variabilidade genética pelo uso dos marcadores moleculares RAPD e a região ITS do rDNA. No trabalho foram utilizados 11 isolados do fungo, obtidos de diferentes substratos e hospedeiros e 5 isolados obtidos de cebola de diferentes regiões de Pernambuco e um do Amazonas. O teste de patogenicidade foi realizado em mudas e bulbos da cebola Os isolados mais agressivos foram quatro provenientes de cebola nos dois testes. Nas análises de RAPD foram utilizados sete primers de seqüências arbitrárias. Os produtos de amplificação foram separados em gel de agarose a 1,4%. e mostraram bandas polimórficas que permitiram avaliar a distância genética entre os 15 isolados. Estes foram classificados em quatro grupos distintos. Os produtos de amplificação dos lócus ITS1-5.8S-ITS2 do rDNA com primer ITS1 e ITS4 também apresentaram polimorfismo e foram digeridos com três enzimas de restrição, Dra I, Hae III e Msp I. Apenas as duas últimas foram eficientes em mostrar variações genéticas entre os isolados. Os dois marcadores utilizados foram capazes de diferenciar o isolado do Amazonas dos demais de Pernambuco. Os resultados obtidos com os marcadores moleculares não mostraram relação com o grau de patogenicidade dos mesmos à cebola

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:05:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4539_1.pdf: 2994862 bytes, checksum: 47749e2ac452270d83ec4a6ac83056aa (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / A antracnose causada pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides é uma das doenças mais graves da mangueira, sendo um fator limitante à produção de frutos sadios e comercializáveis. O presente trabalho objetivou analisar a variabilidade de isolados de C. gloeosporioides, quanto à patogenicidade a frutos de mangueira, marcadores RAPD e região ITS do rDNA. Foram utilizados cinco isolados obtidos de cebola e 10 de mangueiras de diferentes regiões do estado de Pernambuco. O teste de patogenicidade foi realizado em frutos das variedades Rosa e Espada. Para a análise de RAPD foram utilizados os iniciadores OPX-15, OPX-02, OPX-06, OPA-11 e OPA-02 e para a amplificação do locus ITS1-5.8S-ITS2 do rDNA, os iniciadores ITS1 e ITS4. Os isolados oriundos de mangueiras com sintomas de antracnose foram mais agressivos para as duas variedades estudadas do que os isolados de cebola. Do dendrograma gerado pela análise do RAPD, dois grupos foram delineados, separando todos os isolados de mangueiras dos isolados de cebola. Não houve polimorfismo entre os isolados de C. gloeosporioides pela análise dos produtos de amplificação da região ITS1-5.8S-ITS2 do rDNA, porém, a digestão do produto com a enzima Msp I evidenciou diferença para o isolado URM 4596 (Mangifera indica L./Ilha de Itamaracá-PE)

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O mamão (Carica papaya L.) é um fruto nativo de clima tropical e comercializado em todo o mundo. O Brasil é um dos grandes produtores e consumidores destes frutos, porém, anualmente, são perdidas aproximadamente 10 toneladas dos frutos devido ao escasso controle de qualidade e, principalmente, às doenças pós-colheita, como a antracnose, ocasionada pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides. O objetivo do presente estudo foi avaliar a associação de óleo essencial e película de carboximetilcelulose a fim de controlar a antracnose em mamão e monitorar os efeitos deste tratamento nas características físico-químicas e de aparência dos frutos. A pesquisa foi realizada em duas etapas: a primeira com caráter fitopatológico, e a segunda, quanto à qualidade físico-química e de aparência dos frutos tratados. Na primeira etapa foram realizados os seguintes testes: eficiência in vitro da Concentração Inibitória Mínima (CIM) dos óleos de Eucaliptus staigeriana, Lippia sidoides e Pimenta pseudocaryophyllus e suas misturas sobre o fungo C. gloeosporioides pelos métodos de diluição em ágar e modelo matemático de Gompertz; avaliação do óleo selecionado (o que apresentou a menor CIM), em relação à composição química; Concentração Mínima Fungicida (CMF) e eficiência in vivo (determinação da incidência e severidade). Na segunda etapa, foram avaliadas as qualidades físico-químicas (cor, perda de massa, firmeza, taxa respiratória, acidez titulável, teor de sólidos solúveis e ratio) e de aparência (presença de murchamento e podridão) nos frutos após a aplicação do óleo essencial associado à película. Na primeira etapa, os óleos essenciais de L. sidoides, E. staigeriana, P. pseudocaryophyllus e suas misturas apresentaram ação inibitória nos experimentos in vitro contra C. gloeosporioides. O melhor desempenho foi do óleo de L. sidoides, que apresentou concentração inibitória mínima de 125 ppm no método de diluição em ágar, e 75,3 ppm pelo modelo matemático de Gompertz. A concentração fungicida mínima encontrada foi 62 ppm pelo método de caldo. Quanto à composição de L. sidoides, o timol, que possui ação antifúngica reconhecida, foi encontrado como composto majoritário. Os resultados da avaliação in vivo mostraram que os menores valores de severidade ocasionada por C. gloesporiodes foram observadas no tratamento envolvendo a associação da película de carboximetilcelulose com o óleo essencial de L. sidoides, quando aplicados preventivamente, porém não inibiu a incidência da doença. Na segunda etapa do estudo, os resultados demonstraram que a utilização da película de carboximetilcelulose em associação com o óleo essencial de L. sidoides (375 ppm) conservou por 9 dias as características físico-químicas e de aparência dos mamões, enquanto que no controle e no tratamento somente com a película, 5 e 7 dias, respectivamente. Com base nos dados obtidos, concluiu-se que os óleos essenciais de Lippia sidoides, Eucaliptus staigeriana e Pimenta pseudocaryophyllus e suas misturas binárias 1:1 possuíram ação antifúngica contra C. gloeosporioides. Lippia sidoides demonstrou ser altamente eficaz em menor dose, e que a associação deste óleo (375 ppm) com a película de carboximetilcelulose (0,25%) contribuiu efetivamente para o aumento da vida útil dos mamões armazenados a 22°C, conservando suas características físico-químicas e de aparência por 9 dias. / The papaya (Carica papaya L.) is a tropical fruit and it is commercialized around the world. Brazil is one of the major producers and consumers of these fruits, but approximately 10 tons of fruits are lost annually due to poor quality control and especially postharvest diseases such as anthracnose, caused by Colletotrichum gloeosporioides fungus. The objective of the present study was to evaluate the association of essential oil and carboxymethylcellulose film in order to control the anthracnose in papaya and to monitor the effects of this treatment on its physicochemical and appearance characteristics. The research had two stages: the first one had phytopathological character and the second one regarding the physicochemical quality and appearance of treated fruits. In the first stage, the following tests were carried out: Determination in vitro of Minimum Inhibitory Concentration (MIC) for the Eucalyptus staigeriana, Lippia sidoides and Pimenta pseudocaryophyllus oils and their mixtures on C. gloeosporioides fungus by agar dilution and Gompertz mathematical model; Evaluation for the selected oil (the oil presenting the lowest MIC), of its chemical composition; Minimum Fungicidal Concentration (MFC) and in vivo efficiency (by incidence and severity determination). In the second stage it was evaluate the physicochemical qualities (color, weight loss, firmness, respiratory rate, titratable acidity, soluble solids content and ratio) and appearance (presence of shriveling and rot) of fruits after oil application associated with film. In the first stage, the essential oils of L. sidoides, E. staigeriana, P. pseudocaryophyllus and their mixtures showed inhibitory action in the in vitro experiments on C. gloeosporioides. The best oil was L. sidoides, it had a minimum inhibitory concentration of 125 ppm by agar dilution method and of 75.3 ppm by Gompertz mathematical model. The minimum fungicide concentration found was 62 ppm by the both method. About the composition of the L. sidoides oil, thymol, which has been reported as presenting antifungal activity, was found as its major compound. The results of in vivo evaluation showed that the lowest values of disease severity caused by C. gloesporiodes were present in the treatment involving the association of carboxymethylcellulose film with L. sidoides, when it was applied preventively, but it did not inhibit disease incidence. In the second stage of the study the results showed that the use of carboxymethylcellulose film in association with L. sidoides (375 ppm) preserved the physicochemical and appearance characteristics of papaya fruits for 9 days, whereas in the control and treatment with the film sole, it preserved for 5 and 7 days, respectively. Based on the obtained data, it was concluded that the essential oils of Lippia sidoides, Eucalyptus staigeriana and Pimenta pseudocaryophyllus and their 1:1 binary mixtures had antifungal action on C. gloeosporioides. Lippia sidoides, which proved to be highly effective, was more prominent, and the association of this oil (375 ppm) with the carboxymethylcellulose film (0,25%) effectively contributed to increased lifespan of stored papayas at 22°C, preserving its physicochemical and appearance characteristics for 9 days.

Orientador: Adriana Zanin Kronka / Banca: Danila Comelis Bertolin / Banca: Antonio Ismael Inácio Cardoso / Resumo: O pimentão (Capsicum annum L.) é uma das hortaliças mais consumidas no mercado brasileiro, contudo, uma importante doença fúngica, a antracnose, pode dizimar todos os seus frutos em campo, caso ocorram condições favoráveis ao seu estabelecimento. A antracnose é causada por um complexo de espécies do gênero Colletotrichum, podendo o fungo ser transmitido via semente, constituindo-se essa em um importante meio de introdução e disseminação do patógeno em novas áreas. O tratamento das sementes torna-se, então, uma medida importante no manejo e controle desta doença. Visando diminuir a aplicação de produtos químicos, a pesquisa por substâncias naturais com ação antifúngica vem sendo estimulada. Neste trabalho, foi investigada a ação de oito óleos essenciais (alecrim, citronela, cravo, copaíba, eucalipto, hortelã, manjericão e tea tree) sobre Colletotrichum gloeosporioides, isolado do pimentão. Inicialmente, foi avaliada a atividade in vitro dos óleos essenciais sobre o fungo, adicionando-os ao meio de cultura batata-dextrose-ágar (BDA) contido em placas de Petri, nas concentrações 0,25%, 0,50% e 0,75%. Em seguida, o fungo foi transferido para o centro de cada placa de Petri contendo os tratamentos. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, segundo o esquema fatorial 8x3 (oito óleos essenciais x três concentrações), e um tratamento testemunha (composto por BDA puro), e três repetições. O experimento foi conduzido em duplicata. As placas foram mantidas a ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: weet pepper (Capsicum annum) is one of the most consumed vegetables in the Brazilian market, however, an important fungal disease, anthracnose, can decimate all its fruits in the field. The anthracnose is caused by a complex of species of the genus Colletotrichum, and the fungus can be transmitted by infected seeds, constituting an important means of introducing and disseminating the pathogen in new areas. Then, seed treatment becomes an important measure for anthracnose management and control. Aiming to reduce the application of chemical products in the culture, the research for natural substances with antifungal action has been stimulated. In this work, the action of eight essential oils (rosemary, citronella, clove, copaíba, eucalyptus, mint, basil and tea tree) on Colletotrichum gloeosporioides, isolated from the sweet pepper fruits, was investigated. Initially, the in vitro activity of the essential oils on the fungus was evaluated by adding these oils to the potato-dextrose-agar (PDA) culture medium, in petri dishes, at following concentrations: 0.25%, 0.50% e 0.75%. The fungus was then transferred to the center of each petri dish containing the treatments. The experiment was conducted in a completely randomized design according to the 8x3 factorial scheme (eight essential oils x three concentrations), and one control treatment (composed of pure BDA), and three replicates. The experiment was conducted in duplicate. Plates were maintained at 22°C and 12 hour-photoperiod. To verify the effect of the essential oils, mycelial growth (diameter of colony), percentage of growth inhibition (PIC) and sporulation (number of spores / mL) were evaluated. In both trials, the essential oils of clove, citronella, eucalyptus, mint and basil, regardless of the concentration, totally inhibited the pathogen, not allowing the its sporulation. The second stage of this research aimed to study the action of the .. / Mestre

VARELA, Anna Lídia Nunes. Ação de galactomanana sulfatada isolada de Adenanthera pavonina na resposta bioquímica de defesa do feijão-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.] desafiado pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides. 2012. 96 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2012. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-07-08T13:35:57Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_alnvarela.pdf: 2177919 bytes, checksum: b7898740c28944706d715c2b6f0eb897 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T20:17:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_alnvarela.pdf: 2177919 bytes, checksum: b7898740c28944706d715c2b6f0eb897 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T20:17:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_alnvarela.pdf: 2177919 bytes, checksum: b7898740c28944706d715c2b6f0eb897 (MD5) Previous issue date: 2012 / Cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] is a food of great commercial importance, being the main food source in some regions such as northeastern Brazil. Unfortunately, cowpea is subject to attack by various pathogens and pests, causing considerable losses in productivity. To reduce these losses, there are several chemical methods that are widely used, but the indiscriminate use of fungicides has caused damage to the environment and living beings. In search of alternative environmentally friendly, a promising option would be the induction of defense mechanisms of the plant itself through elicitor molecules. Given the above, this study aimed to elicit defense responses in cowpea through the use of galactomannan isolated from Adenanthera pavonina and induce resistance to Colletotrichum gloeosporioides. Twelve days after germination, cowpea plants (Vigna unguiculata) were treated with A. pavonina galactomannan (at concentrations of 100 mg/L and 200 mg/L) in the absence or presence of the fungus C. gloeosporioides (inoculated 6 hours after treatment with carbohydrate) for 6, 12, 24 and 48 h were carried out on biochemical analysis of protein extracts obtained from primary leaves. For enzymes POX and APX a significant increase occurred after 12 h of treatment with the galactomannan. With respect to antifungal activity of the enzymes and βGLU CHI, the plants treated with the galactomannan in general, showed an increase above 50% compared to control. Macroscopic analysis revealed that the leaves treated with 200 mg/L of galactomannan and infected with C. gloeosporioides showed necrotic lesions visibly reduced compared to control. Furthermore, the galactomannan was unable to inhibit the germination of spores and vegetative growth of the fungus C. gloeosporioides in vitro. The results of the present study indicate that galactomannan isolated from A. pavonina can increase crop tolerance of cowpea (V. unguiculata) against the fungus C. gloeosporioides. / O feijão caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] é um alimento de grande importância comercial, sendo a principal fonte alimentícia em algumas regiões, como no Nordeste brasileiro. Infelizmente, o feijão-de-corda está sujeito ao ataque de vários patógenos e pestes, acarretando perdas consideráveis em sua produtividade. Para diminuir essas perdas, existem diversos métodos químicos que são largamente utilizados, porém o uso indiscriminado de fungicidas tem causado danos ao meio ambiente e aos seres vivos. Na busca de alternativas ecologicamente saudáveis, uma opção promissora seria a indução de mecanismos de defesa da própria planta através de moléculas elicitoras. Diante do exposto, o presente trabalho teve como objetivo elicitar respostas de defesa em feijão-de-corda através do uso de galactomanana sulfatada isolada de Adenanthera pavonina e induzir a resistência ao fungo Colletotrichum gloeosporioides. Doze dias após germinação, plantas de feijão-de-corda (Vigna unguiculata) foram tratadas com galactomana de A. pavonina (nas concentrações de 100 mg/L e 200 mg/L), na ausência ou presença do fungo C. gloeosporioides (inoculado após 6 h do tratamento com carboidrato) por 6, 12, 24 e 48 h, tendo sido realizadas as análises bioquímicas nos extratos protéicos obtidos das folhas primárias. Para as enzimas POX e APX ocorreu um significativo aumento a partir de 12 h do tratamento com a galactomanana. Em relação a atividade das enzimas antifungicas βGLU e CHI, as plantas tratadas com a galactomanana, no geral, apresentaram um aumento acima de 50% em relação ao controle. Análises macroscópicas revelaram que as folhas tratadas com 200 mg/L da galactomanana e infectadas com o C. gloeosporioides apresentaram lesões necróticas visivelmente reduzidas em relação ao controle. Ademais, a galactomana não foi capaz de inibir a germinação de esporos e crescimento vegetativo do fungo C. gloeosporioides in vitro. A partir dos resultados obtidos neste trabalho, conclui-se que, a galactomanana isolada de A. pavonina é capaz de aumentar a tolerância da cultura de feijão-de-corda (V. unguiculata) contra o fungo C. gloeosporioides.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-28Bitstream added on 2014-06-13T19:44:37Z : No. of bitstreams: 1 carvalho_prs_dr_jabo.pdf: 817782 bytes, checksum: f660ce8f19f225b54d401b2637051704 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Plantas e extratos vegetais podem apresentar ação antifúngica e de indução de defesa em função da presença de compostos com características elicitoras. Nesse sentido, foram objetivos do trabalho avaliar o efeito antifúngico dos extratos brutos aquosos de alecrim pimenta, nim e urtiga sobre Colletotrichum gloeosporioides; o potencial como elicitores de fitoalexina e o efeito de controle da antracnose em folhas destacadas de cajueiro. Os extratos brutos aquosos em três concentrações (5%, 10% e 15%) foram adicionados ao meio de cultura BDA para avaliar a ação sobre o crescimento micelial e esporulação e ao substrato Ágar-água para avaliar o efeito na germinação dos conídios e formação de apressórios. O potencial elicitor foi investigado em mesocótilos estiolados de sorgo e cotilédones de soja, determinando a capacidade elicitora das fitoalexinas deoxiantocianidina e gliceolina, respectivamente. Alecrim pimenta a 10% e 15% inibiu totalmente o crescimento micelial de C. gloeosporioides, a esporulação e germinação dos conídios. Nim inibiu parcialmente o crescimento micelial, esporulação e germinação dos conídios de forma proporcional à concentração usada. Urtiga estimulou o crescimento micelial, mas inibiu parcialmente a esporulação e a germinação. Apressórios não foram formados na presença dos três extratos brutos aquosos. Apenas alecrim pimenta a 15% mostrou potencial elicitor de deoxiantocianidina em sorgo. Já em soja foi observado potencial elicitor de gliceolina, embora com acentuada variação, tanto pelos três extratos brutos aquosos quanto pelas concentrações estudadas. O controle da antracnose em folhas destacadas de cajueiro foi observado em todas as concentrações dos extratos de alecrim pimenta e nim e, com urtiga a 15%. O maior efeito de controle foi proporcionado, igualmente, pelas concentrações do extrato de alecrim pimenta / The use of plant extracts have shown antifungal and induction of defense due to the presence of compounds with characteristics elicitors. Therefore, the goals were to evaluate the antifungal effect of aqueous extracts of rosemary pepper, neem and nettle on Colletotrichum gloeosporioides and the potential as elicitors of phytoalexin and the effect of control of anthracnose in detached leaves of cashew plant. The extracts of three concentrations (5, 10 and 15%) were added to the culture medium to evaluate the effect on the mycelial growth and sporulation or to the water-agar substrate to evaluate the effect on conidial germination and apressoria formation. The potential elicitor was investigated in etiolated sorghum mesocotyl and soybean cotyledons, determining the ability of the phytoalexin elicitor deoxyanthocyanidin and gliceollin respectively. Rosemary Pepper 10 and 15% completely inhibited the mycelial growth of C. gloeosporioides and sporulation and germination. Nim partially inhibited the mycelial growth, sporulation and spore germination in proportion to the concentration used. Nettle stimulated mycelial growth, but partially inhibited the sporulation and germination. Appressoria were not formed in the presence of the three extracts. Only rosemary pepper 15% showed potential elicitor of deoxyanthocyanidin in sorghum. In soybean, potential elicitor of gliceolina, although with marked variation, was observed so the three extracts as the concentration. Control of anthracnose in detached leaves of cashew plant was observed at all concentrations of extracts of rosemary pepper and neem and nettle to 15%. The biggest effect of control was provided equally by the concentrations of the extract of rosemary pepper

Resumo: Plantas e extratos vegetais podem apresentar ação antifúngica e de indução de defesa em função da presença de compostos com características elicitoras. Nesse sentido, foram objetivos do trabalho avaliar o efeito antifúngico dos extratos brutos aquosos de alecrim pimenta, nim e urtiga sobre Colletotrichum gloeosporioides; o potencial como elicitores de fitoalexina e o efeito de controle da antracnose em folhas destacadas de cajueiro. Os extratos brutos aquosos em três concentrações (5%, 10% e 15%) foram adicionados ao meio de cultura BDA para avaliar a ação sobre o crescimento micelial e esporulação e ao substrato Ágar-água para avaliar o efeito na germinação dos conídios e formação de apressórios. O potencial elicitor foi investigado em mesocótilos estiolados de sorgo e cotilédones de soja, determinando a capacidade elicitora das fitoalexinas deoxiantocianidina e gliceolina, respectivamente. Alecrim pimenta a 10% e 15% inibiu totalmente o crescimento micelial de C. gloeosporioides, a esporulação e germinação dos conídios. Nim inibiu parcialmente o crescimento micelial, esporulação e germinação dos conídios de forma proporcional à concentração usada. Urtiga estimulou o crescimento micelial, mas inibiu parcialmente a esporulação e a germinação. Apressórios não foram formados na presença dos três extratos brutos aquosos. Apenas alecrim pimenta a 15% mostrou potencial elicitor de deoxiantocianidina em sorgo. Já em soja foi observado potencial elicitor de gliceolina, embora com acentuada variação, tanto pelos três extratos brutos aquosos quanto pelas concentrações estudadas. O controle da antracnose em folhas destacadas de cajueiro foi observado em todas as concentrações dos extratos de alecrim pimenta e nim e, com urtiga a 15%. O maior efeito de controle foi proporcionado, igualmente, pelas concentrações do extrato de alecrim pimenta / Abstract: The use of plant extracts have shown antifungal and induction of defense due to the presence of compounds with characteristics elicitors. Therefore, the goals were to evaluate the antifungal effect of aqueous extracts of rosemary pepper, neem and nettle on Colletotrichum gloeosporioides and the potential as elicitors of phytoalexin and the effect of control of anthracnose in detached leaves of cashew plant. The extracts of three concentrations (5, 10 and 15%) were added to the culture medium to evaluate the effect on the mycelial growth and sporulation or to the water-agar substrate to evaluate the effect on conidial germination and apressoria formation. The potential elicitor was investigated in etiolated sorghum mesocotyl and soybean cotyledons, determining the ability of the phytoalexin elicitor deoxyanthocyanidin and gliceollin respectively. Rosemary Pepper 10 and 15% completely inhibited the mycelial growth of C. gloeosporioides and sporulation and germination. Nim partially inhibited the mycelial growth, sporulation and spore germination in proportion to the concentration used. Nettle stimulated mycelial growth, but partially inhibited the sporulation and germination. Appressoria were not formed in the presence of the three extracts. Only rosemary pepper 15% showed potential elicitor of deoxyanthocyanidin in sorghum. In soybean, potential elicitor of gliceolina, although with marked variation, was observed so the three extracts as the concentration. Control of anthracnose in detached leaves of cashew plant was observed at all concentrations of extracts of rosemary pepper and neem and nettle to 15%. The biggest effect of control was provided equally by the concentrations of the extract of rosemary pepper / Orientador: Modesto Barreto / Coorientador: Margarete Camargo / Banca: Luiz Evaldo de Moura Pádua / Banca: Érica Auxiliadora Giacheto Scaloppi / Banca: Rita de Cássia Panizzi / Banca: Antonio Baldo Geraldo Martins / Doutor

Orientador: Edson Luiz Furtado / Banca: Cesar Junior Bueno / Banca: Marli de Fátima Stradioto Papa / Resumo: A cultura da seringueira [Hevea brasiliensis (Willd. ex Adr. Jussieu) Muell. Arg.] vem sendo atacada por várias doenças de importância econômica, dentre as quais está a antracnose, causada pelo fungo Colletotrichum sp. (teleomorfo: Glomerella sp.). Este fungo causa vários danos na planta como lesões nos folíolos, nos ponteiros, nos ramos, nos frutos e cancros no painel de sangria. Somente Colletotrichum gloeosporioides foi relatado como agente causal desta doença no Brasil. O presente trabalho teve como objetivo identificar isolados de Colletotrichum spp. de seringueira de diversas regiões de plantio do Estado de São Paulo. O trabalho foi conduzido em cinco fases: a) caracterização cultural, na qual foram observadas a coloração e o aspecto das culturas in vitro. Produção de conídios e taxa de crescimento em seis temperaturas (10, 15, 20, 25, 30 e 35 °C); b) caracterização morfológica, na qual foi medido comprimento, largura e observado o formato dos conídios; c) teste de patogenicidade em folíolos destacados e em discos de folíolos, com quatro isolados de seringueira e dois de citros; d) crescimento em benomyl em quatro concentrações de princípio ativo; e) Identificação molecular para culturas monospóricas e multispóricas com primers específicos para as espécies de Colletotrichum gloeosporioides e Colletotrichum acutatum e os primers ITS1 e ITS4 os quais amplificaram uma pequena região (18S) e uma grande região (28S), e estes também permitiram a amplificação da região 5.8S do rDNA e os espaçadores internos transcritos (ITS1 e ITS2), e f) testes de crescimento em meio de cultivo acrescido com fungicidas: flutriafol, tebuconazol, epoxiconazol + piradostrobina, clorotalonil + tiofonato-metílico, captana, mancozebe, carbendazim, azoxistrobina + ciproconazol e propiconazol. Neste teste foram utilizados quatro isolados de diferentes órgãos da planta... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The rubber cultivation [Hevea brasiliensis (Willd. ex Adr. Jussieu) Muell. Arg.] is being attacked by several diseases of economic importance, among which is the anthracnose; this is caused by the fungus Colletotrichum spp. (teleomorph: Glomerella spp). This fungus causes several damages in the plant such as injuries in the leaves, branches, fruits and cankers in the taping panel. Only Colletotrichum gloeosporioides was reported as the causal agent of this disease in Brazil. The aim of this study was to identify isolates of the fungus Colletotrichum spp. from rubber trees, localized in different regions of Sao Paulo state. The study was carried out by six phases: a) culture characterization, in which the color and the culture appearance were observed in vitro, conidial production and growth rate at six temperatures (10, 15, 20, 25, 30, 35 °C); b) morphological characterization, which consist of measuring the length and width, and observed the shape of the conidia; c) pathogenicity test on selected leaves and disks of leaves, with four isolates from rubber and two isolates from citrus; d) growth in fungicide benomyl at four concentrations of active ingredient; e) molecular identification for monosporic and multisporic cultures with specific primers to the species of Colletotrichum gloeosporioides and Colletotrichum acutatum and ITS1 and ITS4 primers which amplified a small region (18S) and a large region (28S), and these also allowed the amplification of 5.8S rDNA and internal transcribed spacers (ITS1 and ITS2); f) Growth tests in culture medium supplemented with fungicides: flutriafol, tebuconazole, epoxiconazole + piradostrobina, chlorothalonil + tiofonato-methyl, captan, mancozeb, carbendazim, azoxystrobin + cyproconazole and propiconazole. In this test, four isolates were used from... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Este trabalho objetivou isolar leveduras capazes de produzir e excretar a toxina killer a partir de frutos tropicais, para atuarem no controle biolÃgico de fitopatogenos em pÃs-colheita. Inicialmente, foram isoladas 580 leveduras a partir de 87 amostras de frutos tropicais (mamÃo, caju, sapoti, murici, manga e acerola), dentre as quais 29 exibiram o fenÃtipo killer. Todas as cepas killer foram identificadas pelo sequenciamento da regiÃo D1/D2 do 28S rRNA, em que ficou demonstrada a presenÃa de Candida aaseri, Wickerhamomyces anomalus, Pichia kluyveri, Meyerozyma guilliermondii, Kodamaea ohmeri. Cinco leveduras foram capazes de inibir em 100% a germinaÃÃo de conÃdios em meio lÃquido e reduzir o crescimento micelial, em meio sÃlido de Colletotrichum gloeosporioides in vitro, com destaque para M. guilliermondii (cepa 443) que foi capaz de reduzir o crescimento micelial do fitopatogeno em 60% em meio sÃlido. As duas leveduras com melhores resultados in vitro foram testadas in vivo, contra C. gloeosporioides, agente da antracnose em pÃs-colheita de mamÃo e outros frutos tropicais, W. anomalus (cepa 422) e M. guilliermondii (cepa 443). TambÃm foi investigada a ocorrÃncia de micoparasitismo como mecanismo de aÃÃo do antagonista por meio de microscopia eletrÃnica de varredura â MEV e detecÃÃo das enzimas hidrolÃticas, quitinase e β-1-3 glucanase. Os resultados demonstraram que, quando aplicada simultaneamente ao fitopatÃgeno e incubadas em cÃmara Ãmida (95% U.R.) a 28 ÂC, as leveduras W. anomalus (cepa 422) e M. guilliermondii (cepa 443) foram capazes de reduzir a ocorrÃncia da doenÃa em 24,62%, 7,0% e 20,68%, respectivamente, atà 06 dias apÃs a inoculaÃÃo. Verificou-se que o tempo de inoculaÃÃo da levedura teve significativa influÃncia sobre sua aÃÃo antagonista; a aplicaÃÃo dos agentes com 24 ou 12 horas de antecedÃncia em relaÃÃo ao fitopatÃgeno resultou em reduÃÃo de 30% e 13,75% para W. anomalus (cepa 422), em 40% e 35% para W. anomalus (cepa 440) e em, 41,17 e 31,35% para M. guilliermondii (cepa 443) respectivamente. A ocorrÃncia de micoparasitismo foi confirmada atravÃs de eletromicrografias que evidenciaram a uniÃo das leveduras Ãs hifas do C. gloeosporioides, provocando, em alguns casos, perda de turgidez e atà ruptura dessas; tudo isso associado à produÃÃo de β 1-3-glucanase. As leveduras killer, W. anomalus (cepa 422) e M. guilliermondii (cepa 443) que apresentaram melhores resultados nos testes in vivo foram testadas associaÃÃo com cinco diferentes veÃculos de aplicaÃÃo na proteÃÃo em pÃs-colheita de mamÃo. ApÃs 90 dias de incubaÃÃo a 4 ÂC, essas leveduras mantiveram-se viÃveis em todos os veÃculos de aplicaÃÃo testados e durante todo o perÃodo de incubaÃÃo, frutos tratados com formulaÃÃes (leveduras + veÃculos de aplicaÃÃo) apresentaram incidÃncia de doenÃa, pelo menos 30% menores, quando comparadas aos frutos nÃo tratados. Para W. anomalus (cepa 422), o tratamento que utilizou amido (2%) reduziu em 48,3% a ocorrÃncia de doenÃas, jà para M. guilliermondii, (cepa 443), os tratamentos mais eficientes no controle da doenÃa foram os que utilizaram gelatina e cera lÃquida de carnaÃba (2%) como veÃculos de aplicaÃÃo, ambos foram capazes de reduzir em 50% a ocorrÃncia de doenÃas em pÃs-colheita de mamÃes. Eletromicrograficas revelaram que todos os veÃculos de aplicaÃÃo foram eficientes em permitir a fixaÃÃo das leveduras na superfÃcie do fruto. Leveduras killer podem atuar no biocontrole em pÃs-colheita de mamÃo e estes microrganismos atuam atravÃs de uma variedade de mecanismos de aÃÃo, o que potencializa seu efeito protetor e amplia sua eficiÃncia de aÃÃo. / This study aimed to isolate yeast able to produce and excrete the toxin from killer tropical fruits, to act in the biological control of plant pathogens in postharvest. A total of 580 yeasts strains, isolated from Ceara State of Brasil, were evaluated for their ability to produce killer toxin. Of these strains, 29 tested positive for the killer phenotype and were further evaluated for their ability to control Colletotrichum gloeosporioides germination in vitro. All yeast strains that expressed the killer phenotype were characterized by sequencing the D1/D2 regions of the large subunit of the rRNA gene. Five yeast strains provided a significant reduction in mycelial growth and conidial germination of C. gloeosporioides in vitro, especially Meyerozyma guilliermondii, which was able to reduce the fungal mycelial growth on solid medium (PDA) by 60% and block 100% of conidia germination in liquid media (PDB). Filtering and autoclaving the liquid cultures had no effect on the growth of the pathogen. These results indicate the potential use of antagonist yeasts isolated from tropical fruits in the control of anthracnose caused by C. gloeosporioides in papaya. Further elucidation of main mechanisms involved on anthracnose control by these yeasts could be helpful for the development of biocontrol techniques related to the management of this disease in tropical fruits. The efficiency of two killer yeast strains, with better results in vitro were tested in vivo against C. gloeosporioides, Wickerhamomyces anomalus (strain 422) and Meyerozyma guilliermondii (strain 443), as biocontrol agents against C. gloeosporioides, a postharvest anthracnose agent of papaya and other tropical fruits, was assessed. These strains were previously selected through in vitro assays, but in the present study, their in vivo action was assessed. In addition, the influence of phytopathogen inoculation time on the fruit in combination with the use of the biocontrol agent was also assessed. Through the use of scanning electron microscopy (SEM), we assessed mycoparasitism as an antagonistic mechanism of action. In addition, two hydrolytic enzymes, chitinase and β-1, 3 glucanase, were assayed. Our results indicated that W. anomalus (strain 422) and M. guilliermondii (strain 443) reduced the disease occurrence by 24.62% and 20.68%, respectively, for up to 6 days after inoculation, when applied 3 hours before the phytopathogen and incubated in a wet chamber (95% relative humidity) at 28ÂC. The time of yeast inoculation had a significant effect on its antagonistic action. Application of the yeasts 12 or 24 hours before the phytopathogen inoculation resulted in 13.75% and 30% of disease reductions for W. anomalus (strain 422) and 31.35% and 41.17% reductions for M. guilliermondii (strain 443), respectively. Electron micrographs confirmed mycoparasitism by clearly indicating the interaction of the yeasts with C. gloeosporioides hyphae, causing, in some cases, a loss of turgor and yeast penetration of walls with marked concavity formation on hypha cell walls. The efficiency of two killer yeasts, Wickerhamomyces anomalus (strain 422) and Meyerozyma guilliermondii (strain 443), which showed better results in tests in vtro and in vivo, associated with five different application vehicles was assessed for the protection of papayas postharvest. In this study, after 90 days of incubation at 4ÂC, W. anomalus (strain 422) and M. guilliermondii (strain 443) were viable with all application vehicles tested. Fruits treated with different formulations (yeasts + application vehicles) had a decreased incidence of disease (by at least 30%) compared with untreated fruits. The treatment of W. anomalus (strain 422) + 2% starch lowered disease occurrence by 48.3%. The most efficient treatments using M. guilliermondii (strain 443) were those with 2% gelatin or 2% liquid carnauba wax, both of which reduced anthracnose by 50% in postharvest papayas. Electron micrographs of the surface tissues of the treated fruits showed that all application vehicles provided excellent adhesion of yeast to the surface. The formulations based on starch (2%), gelatin (2%) and carnauba wax (2%) were the most efficient at controlling fungal diseases in postharvest papayas