Submitted by PATRICK DA SILVA null (patrick_dasilva@ymail.com) on 2016-09-01T14:44:37Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Patrick da Silva.pdf: 3098856 bytes, checksum: 3fb93fb0061cbc5d3f1d4f4066945e07 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-09-01T18:20:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_p_me_arafcf.pdf: 3098856 bytes, checksum: 3fb93fb0061cbc5d3f1d4f4066945e07 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-01T18:20:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_p_me_arafcf.pdf: 3098856 bytes, checksum: 3fb93fb0061cbc5d3f1d4f4066945e07 (MD5) Previous issue date: 2016-07-19 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Sinalização química em bactérias patogênicas é um mecanismo empregado para interagir com o hospedeiro e sua respectiva microbiota. Através desta interação ocorre a regulação dos mecanismos de virulência. Estudando o mecanismo de sinalização química do sistema de 2-componentes QseBC em Salmonella enterica serovar Typhimurium foi aberta uma nova perspectiva para desvendar os mecanismos de patogenicidade. Dentre estes, uma nova proteína VisP (Virulence and stress-related Periplasmic protein) foi reportada. Seu papel inicial na interação com a enzima LpxO em S. Typhimurium foi anteriormente demonstrada. O antígeno-O da camada de LPS fornece proteção contra as defesas do hospedeiro e, particularmente, o comprimento de sua cadeia exerce um papel essencial. A montagem do antígeno-O possui o sistema Wzz, o qual determina o comprimento final de sua cadeia polissacarídica, e também apresenta uma distribuição tri-modal. Forma cadeias curtas (S-OAg), longas (L-OAg) e muito longas (VL-OAg) de antígeno-O. As proteínas WzzST e WzzfepE regulam, respectivamente, a síntese das cadeias L-OAg e VL-OAg. Neste estudo, os genes wzzST, wzzfepE, visP e lpxO foram mutados, via mutagênese λ Red, obtendo simples e duplos mutantes. Dados preliminares evidenciaram que há um aumento nas cadeias VL-OAg e L-OAg no mutante ΔvisP, e reciprocamente há diminuição de L-OAg em ΔlpxO. Foram feitos ensaios para avaliar a motilidade, invasão em células epiteliais e sobrevivência intracelular em macrófagos com as amostras obtidas pelos ensaios de mutagênese. Foi evidenciado uma redução de 1,2 e 1,0 ordem de magnitude nos processos de invasão e sobrevivência intracelular, respectivamente, no mutante ΔvisP em relação à amostra selvagem, conforme já descrito, e também uma redução de 70,61% na motilidade comparada com à amostra selvagem. Observou-se que a deleção dos genes wzzfepE e lpxO no mutante ΔvisP faz com que a bactéria retorne ao fenótipo da amostra selvagem nos processos de motilidade, invasão em células epiteliais e sobrevivência intracelular em macrófagos. Este efeito de complementação fenotípica não ocorre no mutante duplo ΔwzzST, apresentando os mesmos níveis do mutante simples ΔvisP, apesar deste possuir um aumento na expressão de genes envolvidos na motilidade e invasão celular comparado com o mutante ΔvisP. Aparentemente, há a atenuação destes processos patogênicos em bactérias com um alto nível de VL-OAg, levando-nos a hipotetizar que este tipo de cadeia de antígeno-O possui relevância na patogênese de S. Typhimurium. WzzfepE e LpxO apresentaram uma evidente participação nos processos de motilidade, invasão celular e sobrevivência intracelular via VisP, e possivelmente o antígeno-O de comprimento muito longo (VL-Oag) apresenta um papel de inibição nestes processos, além disso, evidenciou-se que VisP desempenha uma função relevante na montagem das cadeias de antígeno-O e na patogênese de S. Typhimurium. / Chemical signaling is a mechanism employed by several bacterial species to interact within surrounding microbiota and their host. Upon this interaction the pathogenic bacteria regulate their virulence traits. The two-component system QseBC was described on chemical signaling in Salmonella enterica serovar Typhimurium, and a novel branch of pathogenic cascade regulation was revealed. Among these mechanisms a novel protein was described, VisP (Virulence and stress related Periplasmic protein). VisP interacts with LpxO enzyme on the periplasm. The O-antigen of the LPS layer provides protection against host defenses, and particularly its chain’s length plays an essential role. The O-antigen assembly has the Wzz system, which determines the O-antigen final chain length, and also presents a tri-modal distribution. It forms short (S-OAg), long (L-OAg) and very-long (VL-OAg) O-antigen chains. The WzzST and WzzfepE proteins respectively regulate the L-OAg and VL-OAg synthesis. In this study, wzzST, wzzfepE, visP and lpxO genes were mutated via λ Red mutagenesis, obtaining single and double-mutants. Our preliminary data have shown that VisP increases VL-OAg and L-OAg, conversely LpxO diminishes L-OAg chain length. The motility, epithelial cell invasion and macrophage intracellular survival and replication were assessed with the mutants obtained. The ΔvisP presented 1,2 and 1,0 order of magnitude reduction in cell invasion and intracellular macrophage replication, respectively, comparing with WT S. Typhimurium, as described, and 70,61% less motility rate than WT. Mutating wzzfepE or lpxO genes in ΔvisP recovers the motility, epithelial cell invasion and macrophage intracellular survival and replication WT phenotypes. Nonetheless, this effect does not occur with wzzST gene deletion in ΔvisP, as this double-mutant presents the same phenotypes of ΔvisP single-mutant, although this deletion raises expression rates of motility and cell invasion related genes significantly. Apparently, these pathogenic processes are attenuated within samples with VL-Oag high levels, taking us to hypothesize that there is a correlation between this O-antigen chain length and S. Typhimurium pathogenesis. WzzfepE and LpxO presented an important role on motility, epithelial cells invasion and macrophage intracellular survival through VisP, and probably the VL-OAg inhibits these processes. Furthermore, VisP plays a relevant function on O-antigen chain assembly and pathogenesis of S. Typhimurium. / CNPq: 134434/2014-5

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:25:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE SILVANA LV SANTOS 2012 - texto.pdf: 1699937 bytes, checksum: 1ea3a901a7686050491e179ef0b83b40 (MD5) Previous issue date: 2012-03-30 / This cross-sectional study was performed in the dressing rooms of the primary healthcare network of Goiânia, Goiás, Brasil, with the following objectives: to identify the prevalence of Gram-negative bacteria (GNB) in venous ulcers (VU) with clinical signs of infection; analyze the susceptibility profile of the isolates; detect the production of AmpC &#946;-lactamases and metallo-beta-lactamases, and extended spectrum beta-lactamase (ESBL); describe the clinical signs and symptoms of infection in VU; evaluate the wounds clinical stage of infection and its relationship with the presence of GNB. The data were analyzed by means of descriptive statistics procedures, proportion and Chi-square tests (p<0.05). All ethical aspects were followed. The participants were 69 patients with venous ulcers, with or without arterial complication, totaling 98 wounds. It was verified that 74.5% of the wounds showed GNB growth, particularly enterobacteria (53.8%) and non-fermenting gram-negative bacteria (46.2%). The prevalent species among the enterobacteria was Escherichia coli (24.5%), followed by Enterobacter aerogenes, Pantoea agglomerans and Proteus mirabilis (12.2% each). Regarding the non-fermenting gram-negative bacteria, the prevalent genre was Pseudomonas (66.6%), particularly the species P. aeruginosa (59.5%), present in 25.5% of the analyzed wounds. Regarding the susceptibility profile of the enterobacteria, the highest resistance rates were to tetracycline (38.8%) and amoxicillin-clavulanic acid (26.5%). Among P. aeruginosa, the highest resistance was observed for cefoxitin (100%). Regarding the production of the AmpC enzyme, 30% of the microorganisms in the CESP (Citrobacter spp., Enterobacter spp., Serratia spp. and Providencia spp.) group, and 100% of the P. aeruginosa were resistant to cefoxitin. The remaining microorganisms of the CESP group (70%) that were sensitive to cefoxitin were subjected to a confirmatory test, and 37.5% were found to be positive for the production of the AmpC enzyme. Regarding metallo-beta-lactamase, 23.8% of the non-fermenting gram-negative bacteria showed reduced sensitivity to imipenem, meropenem or ceftazidime. When subjected to the confirmatory test, 8% of the P. aeruginosa were positive for the MBL enzyme. Regarding the clinical signs and symptoms of infection, the highlighted results with >70% frequency are: opaque and/or reddish brown discoloration; increase in exudate volume and pain. Stage-three infection was the most prevalent (71.4%). An association was found between cellulitis and friable granulation tissue that bleeds easily and the culture for GNB. In conclusion, the presence of gram-negative pathogens with resistance profiles in primary healthcare patients suggests the need to implement microbiological surveillance for patients with VU experiencing a prolonged or difficult healing process, and that the identification VU infection should be guided by knowledge regarding the etiology, classic characteristic and clinical stages of infection. / Estudo transversal realizado nas salas de curativos da atenção primária a saúde em Goiânia, Goiás, Brasil, cujos objetivos foram identificar a prevalência de bastonetes Gram-negativos (BGN) em úlceras venosas (UV) com sinais clínicos de infecção; analisar o perfil de suscetibilidade dos isolados; detectar a produção de &#946;-lactamases tipo AmpC, metalo-beta-lactamase e ESBL; descrever os sinais e sintomas clínicos de infecção em UV; avaliar o estágio clínico de infecção das lesões e a relação destes com a presença de BGN. Utilizou-se de análise descritiva, teste de proporções e Qui-quadrado (p<0,05). Os aspectos éticos foram observados. Participaram 69 pacientes com úlceras venosas com ou sem complicações arteriais, totalizando 98 lesões. Verificou-se que em 74,5% das lesões houve crescimento de BGN. Foram identificadas Enterobactérias (53,8%) e bastonetes Gram-negativos não fermentadores (46,2%). Dentre as enterobactérias prevaleceu a espécie Escherichia coli (24,5%), seguida de Enterobacter aerogenes, Pantoea aglomerans e Proteus mirabillis com 12,2% cada um. Em relação aos bastonetes Gram-negativos não fermentadores, destacou-se a prevalência do gênero Pseudomonas com 66,6% e em especial a espécie P. aeruginosa com 59,5%, presente em 25,5% das feridas analisadas. Quanto ao perfil de suscetibilidade das enterobactérias, destacaram-se a resistência à tetraciclina (38,8%), à amoxacilina-ácido clavulânico (26,5%). Entre as P. aeruginosa, a maior resistência foi observada para cefoxitina (100%). Quanto à produção de enzima AmpC, 30% dos micro-organismos do grupo CESP e 100% das P. aeruginosa foram resistentes a cefoxitina. Os demais micro-organismos do grupo CESP (70%) sensíveis à cefoxitina foram submetidos ao teste confirmatório e 37,5% apresentaram-se positivos a produção de enzima AmpC. Em relação a metalo-beta-lactamase, 23,8% dos bastonetes Gram-negativos não fermentadores apresentaram sensibilidade reduzida ao imipenem, meropenem ou ceftazidima. Ao serem submetidos ao teste confirmatório, observou-se que 8% das P. aeruginosa foram positivas para a enzima MBL. Não foi identificada ESBL. Quanto aos sinais e sintomas clínicos de infecção na lesão, destacaram-se, com freqüência >70%: descoloração do tipo opaca e/ou tijolo vermelho escuro; aumento do volume do exsudato e dor. O estágio três de infecção foi o mais prevalente (71,4%). Houve relação entre celulite e tecido de granulação friável que sangra facilmente e o resultado de cultura para BGN. Conclui-se que a presença de patógenos Gram-negativos resistentes em pacientes na atenção primária a saúde sugere a necessidade de instituir-se vigilância microbiológica para os pacientes com UV com processo cicatricial de difícil evolução e que a identificação de infecção nas UV deve ser norteada pelo conhecimento acerca da etiologia, características clássicas e estágios clínicos de infecção.

Made available in DSpace on 2016-01-26T12:51:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 vivianedeciceracolombooliveira_dissert.pdf: 908582 bytes, checksum: 3c95ae4a3fb33fb357397cfbcc4f9bdf (MD5) Previous issue date: 2011-05-02 / Hospital bacterial resistance to multiple antibiotics is a great concern worldwide. This study objective was to know the multidrug-resistantance (MDR) agents, clinical materials, origin, trends, and to correlate them with the bacterial sensitivity and antimicrobial consumption. A total of 53,316 nosocomial bacteria were assessed in a tertiary hospital during the period from 1999 to 2008. MDR was defined for gram negative bacteria (GNB) when it presented resistance to two or more classes/groups of antibiotics. GNB were predominant (66.1%). GNB MDR had a global increase of 3.7 times in the end of the period. Acinetobacter baumannii was the most prevalent (36.2%). The most frequent materials were urinary and respiratory. A significant increase occurred during the period of 4.8 and 14.6 times of the A. baumannii and K. pneumoniae, respectively. Sixty-seven percent of GNB MDR was from the Intensive Care Units. A. baumannii resistance to carbapenemics increased from 7.4% to 57.5% during the period, concomitant to the consumption increase. The resistance of K. pneumoniae to the cephalosporins had a high increase during the decade. P. aeruginosa decreased in these last two years with a recovery of the sensitivity. / A resistência bacteriana hospitalar a múltiplos antibióticos é uma grande preocupação mundial. O objetivo deste estudo foi conhecer os agentes multidroga-resistentes (MDR), materiais clínicos, origem, evolução e correlacionar com a sensibilidade bacteriana e consumo de antimicrobianos. Foram avaliadas 53.316 bactérias de origem nosocomial, num hospital terciário, durante o período de 1999 a 2008. Foi definida a MDR para as bactérias gram negativas (BGN) quando apresentava resistência a duas ou mais classes/grupos de antibióticos. As BGN foram predominantes (66,1%). As BGN MDR tiveram um aumento global de 3,7 vezes no final do período. O Acinetobacter baumannii foi o mais prevalente (36,2%). Os materiais mais freqüentes foram urinário e respiratório. Ocorreu um aumento significativo durante o período de 4,8 e 14,6 vezes do A. baumannii e K. pneumoniae, respectivamente. Sessenta e sete por cento das BGN MDR foram das UTIs. A resistência do A. baumannii aos carbapenêmicos aumentou de 7,4% para 57,5% durante o período, concomitante ao aumento do consumo. A resistência da K. pneumoniae às cefalosporinas teve um grande aumento durante a década. Houve diminuição da P. aeruginosa nos últimos dois anos com uma recuperação da sensibilidade.

Introducción: Escherichia coli es una bacteria gram-negativa que se transmite a través de aguas contaminadas, vectores (moscas) y alimentos contaminados. Para su tratamiento se utilizan antibióticos como Ciprofloxacino, mientras que la Kanamicina se utiliza como antibiótico de amplio espectro. Por otra parte, algunas plantas poseen sustancias bioactivas, como los compuestos fenólicos, a los cuales se les atribuyen propiedades antimicrobianas y efectos beneficiosos para la salud. Existe evidencia de que al relacionar polifenoles con antibióticos es posible observar tanto efectos sinérgicos como antagónicos en el crecimiento de algunas cepas bacterianas. El objetivo de esta investigación es determinar la relación entre el ácido cafeico, un polifenol hidroxicinámico, y los antibióticos ciprofloxacino y kanamicina sobre el crecimiento de Escherichia coli. Materiales y métodos: Evaluamos la relación entre el ácido cafeico-ciprofloxacino y ácido cafeico-kanamicina contra la cepa E. coli ATCC 25922 con el método Checkerboard. Por otro lado, determinamos la Concentración Mínima Inhibitoria (MIC) de cada compuesto utilizando el método de microdilución seriada. Resultados: La MIC para el ácido cafeico, Ciprofloxacino y Kanamicina fueron de 2 mg/ml, 0.25 ug/ml y 12.5 mg/ml, respectivamente. Sin embargo, cuando se relaciona el ácido cafeico con cada uno de los antibióticos, se observó un aumento en la IC50 de cada fármaco lo que indica una disminución de la acción antibacteriana y un efecto antagónico. Además, mediante el FIC index (indicador de sinergismo o antagonismo), también se determinó antagonismo y que el ácido cafeico en concentración de 1 mg/ml aumentó la MIC de Kanamicina y la MIC de Ciprofloxacino en 4 veces aproximadamente. Conclusiones: El ácido cafeico y los antibióticos mostraron efecto antibacteriano al evaluarlos por separado. Sin embargo, al combinarlos, se observó un efecto antagónico. Probablemente, este efecto se deba por una competencia molecular entre los compuestos o por mecanismos de protección generados por la propia bacteria como expresión de bombas de eflujo o recodificación de rutas enzimáticas. / Introduction: Escherichia coli is a gram-negative bacterium that is transmitted through contaminated water, vectors (flies), and contaminated food. Antibiotics such as Ciprofloxacin are used for its treatment, while Kanamycin is used as a broad-spectrum antibiotic. On the other hand, some plants contain bioactive substances, such as phenolic compounds which are considered to have antimicrobial properties and beneficial health effects. There is evidence that when associating polyphenols with some antibiotics on bacterial strains, it is possible to observe both synergistic and antagonistic effects on cell growth. The aim of this research is to determine the relationship between caffeic acid, a hydroxycinnamic polyphenol, and the antibiotics ciprofloxacin and kanamycin on the growth of Escherichia coli. Materials and methods: We evaluated the relationship between caffeic acid-ciprofloxacin and caffeic acid-kanamycin against E. coli ATCC 25922 strain with the Checkerboard method. On the other hand, we determined the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of each compound using the serial microdilution method. Results: The MIC for caffeic acid, Ciprofloxacin, and Kanamycin were 2 mg/ml, 0.25 ug/ml, and 12.5 mg/ml, respectively. However, when caffeic acid is related to each of the antibiotics, an upward increase in the IC50 of each drug was observed, indicating a decrease in antibacterial action and as a result, an antagonistic effect. In addition, through the FIC index, antagonism was also determined, and that caffeic acid in a concentration of 1 mg/ml increased the MIC of Kanamycin and the MIC of Ciprofloxacin by approximately 4 times. Conclusions: Caffeic acid and antibiotics showed antibacterial effects when evaluated individually. However, by combining these substances, an antagonistic effect was observed. This effect is probably due to molecular competition between the compounds or to resistance mechanisms induced in the bacteria itself, such as the expression of efflux pumps or the recoding of metabolic pathways. / Tesis

O fungo Pleurotus ostreatus pertence ao grupo de basidiomicetos que degradam madeira. Este cogumelo cultivado em todo mundo apresenta grande rusticidade e produtividade, e pode ainda ser usado em processos de biorremediação e biopolpação. Devido a seu potencial biotecnológico, torna-se interessante a compreensão da interação deste com outros microrganismos. Neste sentido, recentemente foi observada a presença de bactérias associadas a P. ostreatus em culturas in vitro, que apresentavam grande pleomorfismo. A partir desta observação foram elaborados ensaios que visaram a confirmação da presença de bactérias. Para tanto, foi utilizada a estratégia do "Ciclo Completo de Análise do rRNA" (full-cycle rRNA analysis) empregada em microrganismos não cultiváveis ou de crescimento fastidioso, além do emprego de técnicas de microbiologia básica, e de estudos de ultraestrutura. Os estudos de microbiologia básica indicaram que se tratava de um microrganismo fastidioso e que se desenvolvia melhor na presença do fungo em sistema de co-cultivo em meios contendo Tween 80 ou Tween 20. Por sua vez, a análise de ultraestrutura demonstrou a presença de estruturas pleomórficas, tanto internamente como externamente à hifa. Em relação ao "Ciclo completo de Análise do rRNA" este se iniciou pela amplificação e seqüenciamento de parte do rDNA bacteriano, que revelou a proximidade desta bactéria com o Complexo Burkholderia cepacia (CBC). A partir desta seqüência, foi realizado um estudo de bioinformática que indicou sondas específicas para este grupo de bactérias. Completando o Ciclo completo de Análise do rRNA, foram realizados ensaios de hibridização in situ fluorescente (FISH) para a confirmar a relação entre as estruturas bacterianas e a seqüência obtida. Este método comprovou a presença das bactérias no interior das hifas de P. ostreatus. Este trabalho constitui o primeiro relato de bactérias pleomórficas pertencente ao complexo B. cepacia associados a P. ostreatus. / The fungus Pleurotus ostreatus, which belongs to white rot basidiomycete group, is a widely cultivated mushroom; this species has high productivity and rusticity, besides its use in biobleaching and bioremediation processes. This biotechnological potential justifies microbial interaction studies between this fungi and others microorganisms. In P. ostreatus mycelia, it has been observed pleomorphic bacteria growing on agar media. This research describes several assays to confirm bacterial presence in this sample. Therefore, the full-cycle rRNA analysis (described for unculturable or fastidious microorganism), ultrastructure and basic microbiology approaches were employed. Basic microbiology approaches indicated slow growing bacteria, which grown faster near to fungi colonies in solid media amended with Tween 80 or Tween 20 (co-culture system). Ultrastructure studies confirm the presence of intracellular and extracellular pleomorphic bacteria. The full-cycle rRNA analysis started with 16S rDNA amplification and sequencing. This approach demonstrated a relation between these bacteria with Burkholderia cepacia complex. By bioinformatics analysis was determinate which DNA probes can be use to identified this bacterial group. The last step for full-cycle rRNA analysis was applying fluorescent in situ hybridization (FISH). This technique confirmed the relationship between 16S rDNA bacterial sequence and bacterial forms. This is the first time that a pleomorphic bacteria from B. cepacia complex is found associated with P. ostreatus.

O fungo Pleurotus ostreatus pertence ao grupo de basidiomicetos que degradam madeira. Este cogumelo cultivado em todo mundo apresenta grande rusticidade e produtividade, e pode ainda ser usado em processos de biorremediação e biopolpação. Devido a seu potencial biotecnológico, torna-se interessante a compreensão da interação deste com outros microrganismos. Neste sentido, recentemente foi observada a presença de bactérias associadas a P. ostreatus em culturas in vitro, que apresentavam grande pleomorfismo. A partir desta observação foram elaborados ensaios que visaram a confirmação da presença de bactérias. Para tanto, foi utilizada a estratégia do “Ciclo Completo de Análise do rRNA” (full-cycle rRNA analysis) empregada em microrganismos não cultiváveis ou de crescimento fastidioso, além do emprego de técnicas de microbiologia básica, e de estudos de ultraestrutura. Os estudos de microbiologia básica indicaram que se tratava de um microrganismo fastidioso e que se desenvolvia melhor na presença do fungo em sistema de co-cultivo em meios contendo Tween 80 ou Tween 20. Por sua vez, a análise de ultraestrutura demonstrou a presença de estruturas pleomórficas, tanto internamente como externamente à hifa. Em relação ao “Ciclo completo de Análise do rRNA” este se iniciou pela amplificação e seqüenciamento de parte do rDNA bacteriano, que revelou a proximidade desta bactéria com o Complexo Burkholderia cepacia (CBC). A partir desta seqüência, foi realizado um estudo de bioinformática que indicou sondas específicas para este grupo de bactérias. Completando o Ciclo completo de Análise do rRNA, foram realizados ensaios de hibridização in situ fluorescente (FISH) para a confirmar a relação entre as estruturas bacterianas e a seqüência obtida. Este método comprovou a presença das bactérias no interior das hifas de P. ostreatus. Este trabalho constitui o primeiro relato de bactérias pleomórficas pertencente ao complexo B. cepacia associados a P. ostreatus. / The fungus Pleurotus ostreatus, which belongs to white rot basidiomycete group, is a widely cultivated mushroom; this species has high productivity and rusticity, besides its use in biobleaching and bioremediation processes. This biotechnological potential justifies microbial interaction studies between this fungi and others microorganisms. In P. ostreatus mycelia, it has been observed pleomorphic bacteria growing on agar media. This research describes several assays to confirm bacterial presence in this sample. Therefore, the full-cycle rRNA analysis (described for unculturable or fastidious microorganism), ultrastructure and basic microbiology approaches were employed. Basic microbiology approaches indicated slow growing bacteria, which grown faster near to fungi colonies in solid media amended with Tween 80 or Tween 20 (co-culture system). Ultrastructure studies confirm the presence of intracellular and extracellular pleomorphic bacteria. The full-cycle rRNA analysis started with 16S rDNA amplification and sequencing. This approach demonstrated a relation between these bacteria with Burkholderia cepacia complex. By bioinformatics analysis was determinate which DNA probes can be use to identified this bacterial group. The last step for full-cycle rRNA analysis was applying fluorescent in situ hybridization (FISH). This technique confirmed the relationship between 16S rDNA bacterial sequence and bacterial forms. This is the first time that a pleomorphic bacteria from B. cepacia complex is found associated with P. ostreatus.