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Aspectos clínicos e de manejo de preguiça-de-garganta- marron Bradypus variegatus (Schinz, 1825) de vida livre na Mesorregião Metropolitana do Recife, Pernambuco, BrasilXAVIER, Gileno Antonio Araújo 12 February 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-02-12 / The aim of this study was to look into some ways of management, physiology and sanitary aspects in a population of free living throated-brown three-toed sloths (Bradypus variegatus) at the Ecological Station of Caetés, Metropolitan Mesoregion of Recife, Pernambuco, Brazil. The study was carried out in two distinct phases. The first phase was the development, testing and evaluation of a temporary marking technique and its applicability in ethological and population study. The second phase was the collection of biological material, such as blood, skin and scab samples, which were sent to respective laboratories in an effort to establish hematological and biochemical parameters, and also, reporting on the etiology of the state of the clinical dermatosis. The ungeal marking consisted of painting the dorsal and lateral areas of the thoracic claws of 46 animals using nail polish of differents colours. Monitoring was carried out by observing the animals with the use of a binocular, individual checksheets and recapture. The technique did not seem to have any adverse effect on the natural and social habits of the individuals and did not compromise the health of the claws. The markings remained legible for a period of up to 9 months, with some variation between animals. This marking technique was shown to be very satisfactory for the identification of free living animals and thus could be recommended for use in studies on sloths in captivity and semi captivity. For the hematological and biochemical studies blood samples were collected from 25 clinically healthy sloths of differents sexes and ages. The techniques used in the determination of the hemograms and proteinograms were similar to those recommended for cats and dogs. These results could be used to evaluate any physiological and pathological alteration in free living and captive brown throat sloth. For the report on the etiology of dermatosis, three clinical cases were studied. The animals had areas of alopecia on the pelvic and thoracic members with the presence of scab. Skin and scab samples were examined directly with a 30% KOH and cultivated on Myocel Agar. By direct examination arthrospores were observed on the skin. In the culture, colonies suggestive of the genera Microsporum were seen confirmed by the presence of macroconidia. This is the first reported case of the occurrence of dermatophytosis caused by Microsporum canis and Microsporum gypseum in free living brown throat sloth in the State of Pernambuco. The establishing of hematological and biochemical parameters together with the study of the etiology of dermatosis are of great importance in understanding some clinical and pathological process in the specie. The first occurrence of total albinism in Bradypus variegatus in the State of Pernambuco is also told. / Objetivou-se com este trabalho realizar alguns estudos relacionados ao manejo, fisiologia e aspectos sanitários em uma população de preguiças-de-garganta-marrom (Bradypus variegatus) de vida livre na Estação Ecológica de Caetés, Mesorregião Metropolitana do Recife, PE, Brasil. O estudo foi realizado em duas etapas distintas. A primeira consistiu na elaboração e avaliação de uma técnica de marcação temporária e sua aplicabilidade para estudo etológico e populacional. Na segunda etapa realizou-se a coleta de material biológico como sangue, pêlos e crostas que foram submetidos a procedimentos laboratoriais para o estabelecimento dos parâmetros hematológicos e bioquímicos, além do relato da etiologia de quadros clínicos de dermatoses. A marcação ungueal consistiu em pintar as faces dorsais e laterais das garras dos membros torácicos de 46 animais com o auxílio de esmalte de unha de cores variadas. O monitoramento foi realizado através de observações com auxílio de binóculo, fichas individuais de monitoramento e recapturas. A técnica não determinou nenhum efeito adverso nos hábitos natural e social dos indivíduos e não comprometeu a saúde de suas garras, sendo possível constatar durante a execução deste estudo que as marcas permaneceram por um período de até nove meses e variou entre indivíduos. Esta técnica de marcação se mostrou bastante satisfatória para a identificação de animais de vida livre e pode ser indicada também para estudos com preguiças em cativeiro e semicativeiro. Para o estudo hematológico e bioquímico foram coletadas amostras de sangue de 25 preguiças clinicamente sadias de sexo e faixa etária variadas. As técnicas utilizadas para determinação das variáveis do hemograma e proteinograma foram similares às recomendadas para cães e gatos. Os resultados deste estudo podem servir de referência para avaliar alterações fisiológicas e patológicas em preguiças-de-garganta-marrom de vida livre e de cativeiro. Para relatar a etiologia das dermatoses, foram estudados três casos clínicos onde os animais apresentavam áreas de alopecia nos membros pélvicos e torácicos, além da presença de crostas. Amostras de pêlos e crostas foram submetidos ao exame direto com KOH a 30% e cultivo em Ágar Mycosel. Ao exame direto foram observados artrosporos nos pêlos e após o cultivo foram observadas colônias sugestivas do gênero Microsporum, confirmadas através da observação da estrutura dos macroconídeos. Relata-se a primeira ocorrência de dermatofitose por Microsporum canis e por Microsporum gypseum em preguiças-de-garganta-marrom de vida livre no estado de Pernambuco. Os resultados obtidos neste estudo permitem avançar no conhecimento de algumas técnicas de manejo que podem auxiliar na realização de outros trabalhos com populações de preguiças de vida livre. Por outro lado, o estabelecimento dos parâmetros hematológicos e bioquímicos assim como o estudo da etiologia das dermatoses são de grande importância para a compreensão das alterações clínico-patológicas que envolvem esta espécie. Relata-se a primeira ocorrência de albinismo total em Bradypus variegatus no Estado de Pernambuco.
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Perfil hematológico de tilápias (Oreochromis niloticus) cultivadas em PernambucoGUIMARÃES, João Menezes 11 February 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-02-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The environmental changes during fish culture reflect directly in the animal health, so the physiologic state should be evaluated systematically. It’s important to assess the animal health during whole culture, making possible an intervention as fast as necessary when any anomaly be detected. The hematological exams are an important tools to diagnose early symptoms. The aim of this study was to investigate the hematological reference values for Nile tilapia, Oreochromis niloticus (Cichlidae), cultured in Pernambuco. Were analyzed 109 fishes with weight and length mean of 525g and 27.7cm. Were determined the hematocrit, red blood cells (RBC); white blood cells (WBC); total thrombocyte; differential count of leukocytes expressed in relative and absolute values; hemoglobin concentration; mean corpuscular volume (MCV); mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) and mean corpuscular hemoglobin (MCH). When evaluated separately the fishes from two different groups according to the culture technique (pond or cage), great heterogeneity was observed between the two groups. The mean value of RBC from tilapia cultured in ponds was 2.14x106/μL and in cages was 1.86x106/μL, being around 15% greater. The mean value of hemoglobin and hematocrit were, respectively, 16.87% and 26.14% greater in the pond cultured fish. Was verified difference (P<0.05) in the mean values of total thrombocyte, WBC and lymphocyte/μL, that were respectively 34.83%, 38.55%, 33.28% greater in tilapia cultured in ponds. These differences demonstrate that generic parameters to tilapia hematology must be used with caution, try when possible to establish specific values to the target population, using as reference in sanity accompaniment. / As alterações ambientais no cultivo refletem diretamente na saúde animal, necessitando, por isso, avaliar sistematicamente o estado fisiológico. É importante ter um acompanhamento do estado animal durante todo o cultivo, possibilitando uma rápida intervenção quando for detectada qualquer anomalia. Os exames hematológicos é uma importante ferramenta para um diagnostico ou sinalização precoce e por isso objetivou-se com este estudo investigar os valores hematológicos para a tilápia do Nilo, Oreochromis niloticus (Cichlidae), cultivadas em Pernambuco. Foram analisados 109 peixes, com peso e comprimento médios de 525g e 27,7cm. Foram determinados o hematócrito, contagem de eritrócitos, leucócitos totais, trombócitos totais, contagem diferencial de leucócitos expressa em valores relativos e absolutos, taxa de hemoglobina, volume corpuscular médio (VCM), concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) e hemoglobina corpuscular média (HCM). Ao avaliar separadamente os peixes classificados em dois grupos, de acordo com a técnica de cultivo (viveiro e tanques-rede) observou-se grande heterogeneidade entre os dois grupos. O valor médio de eritrócitos de tilápias cultivadas em viveiro foi 2,14x106/μL e em tanque-rede de 1,86x106/μL, sendo em torno de 15% maior, assim como as médias de hemoglobina e de hematócrito, que foram respectivamente, 16,87% e 26,14% maiores para os peixes de viveiro. Também foi verificado diferença nas médias de trombócitos totais, leucócitos totais e linfócitos/μL, que foram 34,83%, 38,55%, 33,28% maiores no sangue das tilápias cultivadas em viveiro. Tais diferenças demonstram que perfis genéricos para hematologia de tilápias devem ser usados com cautela, devendo-se sempre que possível estabelecer valores específicos para a população que se quer aferir os parâmetros, para servirem como referência no acompanhamento da sanidade.
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Avaliação dos achados clínicos, hematológicos e bioquímico séricos em cães naturalmente infectados por Leishmania infantum submetidos a tratamento experimentalHUARINGA PAYANO, Víctor Jesús 19 April 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-04-19 / Canine Visceral Leishmaniose (CVL) is an anthropozoonosis caused by a intracelular parasite Leishmania infantum. The canines can be classified by asymptomatic or symptomatic, the clinical signs depend on the immune response of each animal. The treatment is still a challenge, also the interpretation of hematologic and serum biochemical findings, because the results has not a consensus. The aim of this study was evaluate the clinical, haematological and serum biochemical findings of canines naturally infected with Leishmania infantum, submitted to experimental treatment. Were used 14 canines with
positive parasitological diagnostic to Leishmania spp. them were separated in two treatment groups, one allopurinol associate with domperidone (DOA) (n=7) and other allopurinol associated with mitelfosine (MIA) (n=7). The animals were monitored every 30 days until 90 days of treatment, were made physical and clinical exam, parasitological analysis to find amastigote forms of Leishmania sp. on bone marrow, lymph node and skin cytology, also were made an complete blood count (CBC) and serum biochemistry (urea, creatinine, ALT, AST, total proteins, globulin and albumin). Al the animals showed clinical improve and were
negative to parasitological exam since day 60. Both treatment groups revealed thrombocytopenia, plasmatic hyperproteinemia and anaemia on CBC, serum biochemistry revealed hyperglobulinemia, hipoalbuminemia, azotaemia and increased AST. After 90 days of treatment CBC and biochemistry alterations decreased, DOA treatment still has Anaemia (14,29%), thrombocytopenia (28,57%), hyperproteinemia (71,43%) and leucocytosis (42,86%) at CBC, and e azotaemia (14,29%), hipoalbuminemia (71,43%) and hyperglobulinemia (71,43%), at serum biochemistry. MIA group still present lymphocytosis
(28,57%), eosinophilia (14,29%), thrombocytopenia (42,86%) e plasmatic hyperproteinemia (71,43%)at CBC, and azotaemia (42,86%), hyperglobulinemia (100%) and hipoalbuminemia (85,71%) at serum biochemistry. Was concluded that allopurinol associated with domperidone treatment is the best protocol because it decrease clinical signs and laboratorial findings. / A Leishmaniose visceral canina (LVC) é uma antropozonoose causada pelo parasito de tipo intracelular Leishmania infantum. Os cães podem ser classificados em assintomáticos ou sintomáticos, sendo os sinais dependentes da resposta imune de cada animal. O tratamento continua sendo um desafio, assim como a interpretação dos achados hematológicos e da bioquímicos sérica, pela falta de uniformização dos resultados. O objetivo deste trabalho foi a avaliar achados clínicos, hematológicos e da bioquímicos sérica de cães naturalmente infectados com Leishmania infantum, submetidos a tratamento experimental. Foram utilizados 14 cães com diagnóstico parasitológico positivo para Leishmania spp. Estes foram separados em dois grupos de tratamento, um com alopurinol associado a domperidona (DOA) (n=7) e o outro grupo alopurinol associado a miltefosina (MIA) (n=7). Os animais foram monitorados a cada 30 dias até o dia 90 pós tratamento, e realizou-se exame físico, clínico, pesquisa parasitológica de formas amastigotas de Leishmania sp. de aspirado de medula óssea, linfonodo e citologia esfoliativa de pele, além do hemograma e bioquímica sérica: ureia, creatinina, ALT, AST, proteínas totais, globulina e albumina. Todos os animais a partir do dia 60 apresentaram melhora clínica e negativaram na pesquisa parasitológica. Os dois grupos de tratamento no início do estudo
revelaram trombocitopenia seguida por hiperproteinemia plasmática e anemia, os resultados da bioquímica sérica revelaram hiperglobulimenia, hipoalbuminemia, AST elevado e azotemía. Após 90 dias de tratamento as
alterações hematológicas e bioquímicas diminuíram, mas no grupo DOA ainda apresentou anemia (14,29%), trombocitopenia (28,57%), hiperproteinemia (71,43%) e leucocitose (42,86%) no hemograma, e azotemía (14,29%), hipoalbuminemia (71,43%) e hiperglobulinemia (71,43%) na bioquímica sérica. No grupo MIA apresentou linfocitose (28,57%), eosinofilia (14,29%), trombocitopenia (42,86%) e hiperproteinemia plasmática (71,43%) no hemograma, e azotemia (42,86%), hiperglobulinemia (100%) e hipoalbuminemia (85,71%) na bioquímica sérica. Conclui-se que, o tratamento de alopurinol associado a domperidona é o melhor protocolo favorecendo a remissão dos achados clínicos e laboratoriais.
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Parâmetros fisiológicos de três espécies de tucunaré (Cichlaspp.) do lago de Balbina, Presidente Figueiredo, AmazonasCastro, Philip Dalbert da Silva, 92-99173-8580 31 March 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-03-31 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Cichlas spp. constitute a group of fish that present great importance in the Amazon region,
since they stand out as edible fish, in sport fishing and also have potential to be used as
ornamental fish. The present work aims to establish the hematological characteristics and the
ecophysiological relationships of three species peacock bassCichla monoculus, Cichla
temensis and Cichla vazzoleri from Lake Balbina, Presidente Figueiredo, Amazonas. The
animals were captured with the help of rod and reel, hand line with natural and artificial bait.
Blood was drawn by caudal puncture and hematological data were determined according to
methodology previously described in the literature. In the erythrogram, only the hemoglobin
concentration and the Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (MCHC)were observed,
where C. monoculus presented a difference in relation to the other two species investigated.
The thrombogram showed similarity among the three species investigated, the total count of
leukocytes showed that in C. temensis the values are larger to the other species, it was
demonstrated that lymphocytes were predominant in C. temensis and C. vazzoleri. In plasma
metabolites, it was possible to observe differences among the three species of peacock bass in
the levels of proteins, glucose, triglycerides, urea, chlorides and potassium. In the physical
properties of the water it was demonstrated that pH was lower in the places where the C.
temensis were captured. Regarding the echophysiological interactions, the Principal
Component Analysis (PCA) of the erythrogram showed an interaction of 86.26% (x axis =
52.70%, y = 33.56%). It is observed that C. temensis and C. vazzoleri are species closer than
C. monoculars. The PCA of the thrombogram and leukogram showed no interaction 50.73%
(x axis = 29.31%, y = 21.42%). The PCA of the plasma metabolites showed no interaction in
which it presented only 51.55% (axis x = 29.01%, y = 22.54%), however, there was a
tendency in the x axis, in which C. monoculos appears to be a species with different
ecophysiological patterns of C. temensis and C. vanzzoleri. In the analysis of the physical
properties of the water, interactions of 96.59% (axis x = 63.29%, y = 33.30%) were observed,
in which X C. monocular and C. vanzzoleri inhabit exclusive locations for each species. It is
concluded that the three species of peacock bass present in the lake of Balbina present
hematological differentiation and in the pH of the water, indicating that they have
differentiated responses in oxygen uptake, in the immune response of their blood cells and in
the physiology of the plasma metabolites. The interaction between the biological, ecological,
hematological and water properties of the occurrence sites of three species of peacock bass
from the Amazon region is evidenced for the ecophysiological interactions. It is possible to
conclude that the C. monoculos presents differentiated patterns of C. temensis and C.
vazzoleri, indicating that this species presents differentiated ecophysiological aspects, in
which it must be managed and conserved in a differentiated way of the other species of
peacock bass of the Amazon region. / Os Cichlas spp. Constitui-se em um grupo de peixes que apresentam grande importância na
região Amazônica, pois, se destaca como peixes comestíveis, na pesca esportiva e também
possue potencial para a utilização como peixe ornamental. O presente trabalho tem por
objetivo estabelecer as características hematológicas e as relações ecofisiológicas de três
espécies de tucunarés Cichla monoculus, Cichla temensis e Cichla vazzolerioriundos do lago
de Balbina, Presidente Figueiredo, Amazonas. Os animais foram capturados com auxílio de
vara e carretilha, linha de mão com isca natural e artificial. O sangue foi retirado por punção
caudal e os dados hematológicos foram determinados de acordo com metodologia
previamente descrita na literatura. No eritrograma foram observadas diferenças somente na
concentração de hemoglobina e na concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM)
onde a espécie C. monoculus apresentou diferença em relação a outras duas espécies
investigadas. O trombograma demonstrou similaridade entre as três espécies investigadas, a
contagem total de leucócitos demonstrou que em C. temensis os valores são superiores as
demais espécies, foi demonstrado que os linfócitos foram às células predominantes em C.
temensis e C. vazzoleri. Nos metabólitos plasmáticos, foi possível observar diferenças entre as
três espécies de tucunarés nos níveis de proteínas, na glicose, nos triglicerídeos, na uréia, nos
cloretos e no potássio. Nas propriedades físicas da água foi demonstrada que o pH foi inferior
nos locais onde foram capturados os C. temensis.Em relação as interações ecofisiológicas a
Análise de Componentes Principais (ACP) do eritrograma demonstrou uma interação de
86,26 % (eixo x= 52,70 %; y= 33,56 %). Observa-se que C. temensis e C. vazzoleri são
espécies mais próximas do que C. monoculos. A ACP do trombograma e leucograma
demonstra ausência de interação 50,73 % (eixo x= 29,31 %; y= 21,42 %). A ACP dos
metabolitos plasmáticos demonstrou ausência de interação na qual apresentou apenas 51,55 %
(eixo x= 29,01 %; y= 22,54 %), entretanto, houve uma tendência no eixo x, na qual C.
monoculos parece ser uma espécie com padrões ecofisiológicos diferentes de C. temensis e C.
vanzzoleri. Na análise do ACP das propriedades físicas da água foi observada interação de
96,59 % (eixo x= 63,29 %; y= 33,30 %), na qual se observa que no eixo X C. monoculos e C.
vanzzoleri habita localidades exclusiva para cada uma das espécies. Conclui-se que as três
espécies de tucunarés existentes no lago de Balbina apresentam diferenciação hematológica e
no pH da água, indicando que as mesmas possuem respostas diferenciadas na captação por
oxigênio, na resposta imunológica de suas células do sangue e na fisiologia da bioquímica
plasmática. Para as interações ecofisiológicas evidencia-se a interação entre os aspectos
biológicos, ecológicos, hematológicos e das propriedades das águas dos locais de ocorrência
de três espécies de tucunarés da região Amazônica. É possível concluir que o tucunaré C.
monoculos apresenta padrões diferenciados de C. temensis e C. vazzoleri, indicando que essa
espécie apresenta aspectos ecofisiológicos diferenciados, na qual deve ser manejada e
conservada de forma diferenciada das outras espécies de tucunarés da região Amazônica.
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Polimorfismos do gene TP53 no linfoma de Hodgkin / TP53 Gene Polymorphisms in Hodgkin LymphomaDaniel de AraÃjo Viana 14 September 2007 (has links)
FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / O Linfoma de Hodgkin à uma hemopatia linfÃide pode ocorrer em qualquer faixa etÃria; no entanto, à mais comum na idade adulta jovem, dos 15 aos 40 anos. O TP53 à um gene de 20kb de comprimento que possui 11 Ãxons situado no cromossomo 17 e codifica a proteÃna p53, uma proteÃna cuja principal funÃÃo està relacionada à preservaÃÃo da integridade do cÃdigo genÃtico, e, durante o ciclo celular faz verificaÃÃo quanto à eventual ocorrÃncia de uma mutaÃÃo na seqÃÃncia do cÃdigo genÃtico. Na presenÃa dessas mutaÃÃes, impede que esta cÃlula entre em processo de mitose e complete a divisÃo celular. A maioria dos cÃnceres apresenta mutaÃÃes pontuais na seqÃÃncia do TP53. A anÃlise dos padrÃes dessas mutaÃÃes à de grande valia uma vez que o conhecimento dessas mutaÃÃes leva a um melhor entendimento das funÃÃes dos vÃrios domÃnios da proteÃna p53 e seu envolvimento com o mecanismo de supressÃo tumoral, alÃm de permitir que essas mutaÃÃes sejam utilizadas como biomarcadores para desvendar a oncogÃnese humana. Na literatura vigente, poucos trabalhos abordam a identificaÃÃo dessas mutaÃÃes em relaÃÃo ao linfoma de Hodgkin â forma clÃssica. Dessa forma, este trabalho se propÃe a investigar quantitativa e qualitativamente os padrÃes de polimorfismos existentes nesta forma do linfoma de Hodgkin. A primeira etapa do nosso experimento constou da seleÃÃo de 42 casos de linfonodos diagnosticados como linfoma de Hodgkin entre os anos de 2000 e 2006, arquivados em blocos de parafina. Os casos foram selecionados de pacientes com diagnÃstico de linfoma de Hodgkin, sem predileÃÃo por idade, sexo ou raÃa. Em seguida, o DNA foi extraÃdo das amostras selecionadas para reaÃÃo de PCR, realizada para isolar e amplificar, o fragmento de 137pb correspondente ao Ãxon 8 do gene TP53, atravÃs de primers exclusivos desenhados para o experimento: PFw8 e PRv8. ApÃs a reaÃÃo, os produtos de PCR foram purificados para reaÃÃo de SeqÃenciamento de DNA, utilizando o seqÃenciador automÃtico de DNA da marca ABI Prism 3100 de 16 capilares (Applied Biosystems). A Ãltima etapa aconteceu em laboratÃrio de bioinformÃtica â dry lab, onde as seqÃÃncias de DNA obtidas foram analisadas qualitativa- e quantitativamente. Os processos de extraÃÃo do DNA genÃmico, amplificaÃÃo do Ãxon 8, purificaÃÃo do produto de PCR foram realizadas com sucesso em todas as amostras obtidas de material parafinizado. No seqÃenciamento do DNA parafinizado foi possÃvel determinar, com seguranÃa e confiabilidades previstas em parÃmetros convencionais, a seqÃÃncia de pelo menos 32 amostras; contudo, nÃo se obteve distinÃÃo suficiente dos picos de eletroferogramas para a determinaÃÃo de eventuais polimorfismos na regiÃo analisada. NÃo foi possÃvel portanto, verificar com margem de seguranÃa razoÃvel, a presenÃa ou ausÃncia de SNPs nas amostras seqÃenciadas. Houve, contudo, uma qualificaÃÃo e competÃncia laboratorial instalada localmente (em Fortaleza), a partir da experiÃncia desenvolvida com o esforÃo deste trabalho, para continuar a investigaÃÃo molecular em prol da determinaÃÃo, em futuro breve, da ocorrÃncia ou nÃo de SNPs no exon 8 do TP53 em linfoma de Hodgkin. / Hodgkin lymphoma is a hematololgic B neoplasm occurring at patients within any age, however more likely to affect those from 15 to 40 years-old. The TP53 gene is 20kb length gene with 11 exons that encodes the p53 protein, which main function is related to the conservation and integrity of the genetic code. Most cancers show point mutations in the TP53 sequence. The analysis of these mutations allows a better understanding of the function of the diverse domains of the protein and its relationship to tumor suppression. There is only a few data about TP53 polymorphisms and Hodgkin lymphoma. In this manner, in our study we try to detect polymorphisms within the codons 272, 273, 278, 282, 306 of the exon 8 of the TP53 gene in Hodgkin lymphoma. In our survey we analyzed 42 paraffin-embedded tissues from 2000 to 2006. These samples were prepared for DNA extraction and PCR isolation and amplification of the 137bp fragment of the exon 8 of the TP53 gene, using exclusive primers specially designed to our experiment: PFw8 e PRv8. After PCR amplification, the products of the reaction were purified to the Sequencing reaction. The last part of the experiment encoded the bioinformatics analysis of sequences. DNA extraction and PCR amplification were successfully obtained in our study in all the samples. However, the DNA sequencing was only obtained in 32 samples, but there was no characteristic electropherogram of the analyzed region of the gene. Therefore, it was not possible to determine the presence or absence of SNPs in the TP53 exon 8.
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Análise funcional da proteína KMT2E na leucemia mielóide aguda / Functional analysis of KMT2E protein in acute myeloid leukemiaJuliana Poltronieri de Oliveira 03 March 2017 (has links)
O gene humano lysine methyltransferase 2E (KMT2E) pertence ao grupo Trithorax (TrxG) e age como proteína modificadora de histonas envolvida no controle transcricional de genes relacionados a hematopoiese. Foi previamente identificado como supressor tumoral, atuando sobre a diferenciação, proliferação e ciclo celular. DAMM et al. (2011) e LUCENA-ARAÚJO et al. (2014) descreveram a associação entre baixos níveis de expressão do gene KMT2E e desfechos desfavoráveis do tratamento de pacientes com leucemia mielóide aguda (LMA) e leucemia promielocítica aguda (LPA), respectivamente. O objetivo desse trabalho foi estudar os efeitos do aumento da expressão do gene KMT2E na leucemia mielóide aguda (LMA). Foi utilizada a linhagem celular U937, reconhecida como modelo de LMA, e o aumento da expressão do gene de interesse foi obtido por meio da transfecção das células com um vetor lentiviral contendo o cDNA codificante para a isoforma longa do gene (pCDH-MSCV-MCS-EF1-GFP+Puro, aqui chamado pMEG). As partículas lentivirais foram geradas por co-transfecção em células da linhagem HEK 293T, e posteriormente, titulados com a linhagem celular HT 1080. A expressão do gene e a presença da proteína foram confirmadas por qPCR e western blotting, respectivamente. Foram realizados ensaios funcionais de ciclo celular, proliferação, viabilidade, apoptose espontânea e induzida por trióxido de arsênico e luz ultravioleta e diferenciação celular induzida por 12-miristato 13-acetato de forbol (TPA), com as amostras U937 wild type (WT), U937 pMEG (U937 transduzidas com o vetor vazio) e U937 pMEG-KMT2E. Também foram realizadas mensurações da massa tumoral das células inoculadas em camundongos NSG. A expressão relativa do gene KMT2E na célula U937 pMEG-KMT2E foi 1000 vezes mais alta que na célula U937 sem a modificação genética. Os ensaios de diferenciação celular demonstraram que as células U937 pMEG-KMT2E apresentaram maior diferenciação em monócitos/macrófagos que as células controles, quando levada em consideração a marcação para o antígeno CD11c. A expressão induzida de KMT2E em células U937 não alterou a proliferação, viabilidade, ciclo celular, apoptose, ix espontânea ou induzida e o aspecto clonogênico in vitro, porém, foi associado a um maior crescimento tumoral em modelo animal. Nossa hipótese para justificar as diferenças entre os achados in vitro e in vivo é que o aumento da expressão de KMT2E, talvez por meio do aumento de CD11c, facilitou a interação entre as células e o microambiente, estimulando assim o crescimento tumoral in vivo. / The human lysine methyltransferase 2E (KMT2E) gene belongs to the Trithorax (TrxG) group and acts as a histone modifying protein participating in the transcriptional regulation of hematopoiesis-related genes. KMT2E has been previously described as a tumor suppressor, involved in cellular differentiation, proliferation and cell cycle progression. DAMM et al. (2011) and LUCENA-ARAÚJO et al. (2014) described the association between low levels of KMT2E gene expression and poor treatment outcomes in patients with acute myeloid leukemia (AML) and acute promyelocytic leukemia (APL), respectively. The aim of this project was to study the effects of high levels of KMT2E expression in acute myeloid leukemia (AML). For this purpose, the U937 AML cell line was used and an high expression of the gene was obtained by transfecting the cells with a lentiviral vector containing the cDNA encoding the long isoform of the gene (pCDH-MSCV-MCS-EF1- GFP + Pure, here called pMEG). The lentiviral particles were transfected into HEK 293T cells and the viral concentration was determined by titration using HT 1080 cells. The gene expression and the protein presence were confirmed by qPCR and western blotting, respectively. All experiments to determine the biological function of overexpressed KMT2E were conducted with U937 wild type, U937 pMEG (U937 transduced with the empty vector) and U937 pMEG-KMT2E cells. In-vitro the impact of overexpressed KMT2E was studied on cell cycle progression, proliferation and cell viability, spontaneous and induced apoptosis by arsenic trioxide and ultraviolet light and cell differentiation induced by 12-myristate 13-phorbol acetate (TPA). In vivo, the effect of overexpressed KMT2E was detected by comparing the tumor mass growth in NSG mice when inoculating U937 pMEG and pMEG-KMT2E cells in each flank of the same mouse. The relative expression level of the KMT2E gene in pMEG-KMT2E U937 cells was 1000 higher than in the wild type U937 strain. The cell differentiation assay revealed that U937 pMEG-KMT2E cells presented an increased monocyte/macrophage differentiation, when analyzing the CD11c antigen. Induced xi overexpression of KMT2E in U937 cells did not alter cell proliferation, cell viability, cell cycle progression, spontaneous or induced apoptosis or clonogenic appearance in vitro. However, the overexpression of KMT2E resulted in an increased tumor mass formation in vivo. Taking our discrepant in vitro and in vivo results into account, we could hypothesize that the increased expression of KMT2E, possibly caused by the enhanced expression of CD11c, favored the interaction between U937 pMEGKMT2E cells and their microenvironment, thereby stimulating tumor growth in vivo.
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Avaliação da toxicidade de agrotóxicos utilizados na cultura do arroz irrigado para girinos de Lithobates catesbeianus / Evaluation of toxicity of pesticides used in irrigated rice crops to Lithobates catesbeianus tadpolesFernanda Menezes França Salgueiro 12 December 2012 (has links)
Os girinos de rã-touro, Lithobates catesbeianus, podem ser bons bioindicadores de condições ambientais. O objetivo desse trabalho foi determinar o potencial de toxicidade para L. catesbeianus de alguns dos principais agrotóxicos utilizados no cultivo de arroz irrigado. Foram realizados testes de toxicidade aguda para a determinação da CL50-96h do bentazon, penoxsulam, óleo vegetal, permetrina e carbofuran, separadamente, e da mistura desses agrotóxicos. Com esses resultados foram estimados os índices de segurança dos produtos. Girinos em fase pré-metamorfose foram expostos aos agrotóxicos na própria lavoura de arroz e em laboratório por 21 dias, para avaliar os possíveis efeitos crônicos destas substâncias, separadamente e da mistura, sobre o quadro hematológico, metamorfose (regulada pelo eixo tiroideano), e também o possível potencial mutagênico através do teste do micronúcleo. A CL50-96h para girinos foi de 4530 mg/L para o bentazon; 7,52 mg/L para o penoxsulam + 145,66 mg/L do óleo vegetal; 81,57 mg/L para o óleo vegetal, 0,10 mg/L para a permetrina, 29,90 mg/L para o carbofuran (ingredientes ativos) e, 38,79 vezes a dose utilizada no campo para a mistura desses produtos. Foi determinado risco ambiental apenas para o inseticida permetrina. Nos testes in situ, as águas de irrigação não apresentaram toxicidade aguda para os girinos. A taxa de metamorfose não diferiu entre os tratamentos, demonstrando que os agrotóxicos utilizados nas doses indicadas não tem ação desreguladora do eixo tiroideano. As análises do micronúcleo mostraram aumento significativo de eritrócitos micronúcleoados para os testes in situ e, no laboratório, para o herbicida bentazon e para a mistura dos agrotóxicos. As análises hematológias mostraram diminuição da hemoglobina e número de eritrócitos no teste de campo, retornado aos padrões normais na semana seguinte. No laboratório houve queda na contagem de eritrócitos para o bentazon, aumento do VCM e HCM para o bentazon e penoxsulam; aumento do CHCM para o penoxsulam e para a mistura dos agrotóxicos. Para a série branca não houve diferenças no teste in situ, mas obtivemos aumento dos números de neutrófilos dos girinos tratados com o bentazon. / American bullfrogs, Lithobates catesbeianus could be good environmental indicators. The aim of this study was evaluate the potential toxicity of some principal pesticides used in irrigated rice crops to L. catesbeianus tadpoles. The pesticides Bentazon, Penoxsulam, Vegetable oil, Permetrina, Carbofuran and the mixture of them were assessed. Pre-metamorphose tadpoles were exposed to all of these agrochemicals in the laboratory to determinate de LC50-96h and so estimate the index of security by each product. Animals in the same phase were exposed to these pesticides on the rice crops, in situ and in laboratory per 21 days to evaluate the possible chronic effects of the substances, separated and in the mixture of them. The hematological results, red and white series, the mutagenic potential (micronucleous test), and the metamorphose rate (regulated by thyroid axis) were evaluated. The LC50-96h to tadpoles was 4530 mg/L to Bentazon; 7.52 + 145.66 mg/L to Penoxsulam + vegetable oil; 81.57 mg/L to vegetable oil; 0.10 mg/L to Permetrina; 29.90 mg/L to Carbofuran (active ingredients) and 38.79 times to the dose used in the field to the mixture of the products. Only to Permetrina insecticide was observed environmental risk. The metamorphose rate showed no difference between the treatments suggesting that these pesticides, used on indicated doses did not promote deregulated action on the thyroid axis. In situ tests the irrigated waters showed low mortality to the animals. The red series showed in situ, a decrease in the haemoglobin tax and in the counting of erytrocyte\'s number however return to the normal values in the follow week. In laboratory tests showed a decrease in the counting of erytrocyte\'s number to the animals exposed to Bentazon, an increase in the MCV and MCH to the animals exposed to Bentazon and Penoxsulam, an increase in the MCHC to those exposed to Penoxsulam and to the \"mixture\". The white series showed no difference in situ test however an increase in the neutrophils number was observed to the animals exposed to Bentazon in laboratory. The micronucleous analyze showed significant increase in the erytrocyte\'s micronucleated number in situ and in laboratorial tests to animals exposed to Bentazon and to the \"mixture\".
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SORGO NA ALIMENTAÇÃO DE JUVENIS DE PACU / SORGHUM IN PACU JUVENILE SUPPLYSanchez, Milena Souza dos Santos 07 April 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-04-07 / In recent years, the corn, the main energy food used in fish feed, has been suffering from supply and demand fluctuations with consequent increases in its price in the international market. Thus, many foods are being evaluated in order to minimize the impact on the final cost of production, especially sorghum, which has nutritional characteristics similar to corn, but with lower price. Furthermore, information on the use of food for native species is scarce, and so the aim of this study was to evaluate the apparent digestibility of nutrients and energy sorghum and productive performance, somatic indices and hematological parameters of pacu juvenile fed diets containing sorghum. To determine the apparent digestibility coefficients (ADC%) were used 160 pacu with average total weight of 56.00 ± 8.04 g, distributed in eight cages (80 liters). Two diets were made: Reference and test (30% sorghum), both added 0.1% chromium III oxide. The collection of stool was held in conical bottom tanks (200 liters). Were determined ADC of dry matter (DM), crude protein (CP), ether extract (EE), gross energy (GE) and the chromium content in the feces and in the diets. Furthermore, it was quantified the tannin content, crude fiber (CF) and mineral matter (MM) in sorghum. For testing of productive performance were used 180 pacu with full weight average of 10.80 ± 0.77 g, distributed in 15 tanks (200 liters). The performance data presented in this study were submitted to analysis of variance. ACD sorghum by pacu were 78.52% for MS; 74.82% for PB; 94.36% to 77.24% and EE. No significant differences were observed (p > 0.05) for the performance variables, somatic indices and hematological parameters. Sorghum has ACD similar to corn and can fully replace this food energy in diets for pacu juveniles without providing negative changes in productive performance, somatic indices and hematological parameters. Moreover, the inclusion of sorghum in the diets of young pacu to reduce the cost of development and production. / Nos últimos anos, o milho, principal alimento energético utilizado em rações para peixes, vem sofrendo oscilações de oferta e demanda com consequentes aumentos em seu preço no mercado internacional. Dessa forma, diversos alimentos estão sendo avaliados, a fim de minimizar os impactos sobre o custo final de produção. Destaque é dado ao sorgo, que apresenta características nutricionais semelhantes ao milho, porém com preço inferior. Por outro lado, informações sobre a utilização deste alimento para peixes ainda são escassas, e dessa forma o objetivo desse estudo foi avaliar a digestibilidade aparente de nutrientes e energia do sorgo, bem como o desempenho produtivo, índices somáticos e parâmetros hematológicos de juvenis de pacu alimentados com dietas contendo sorgo. Para a determinação do coeficiente de digestibilidade aparente (CDA%) foram utilizados 160 juvenis de pacu com peso médio de 56,00 ± 8,04 g, distribuídos em oito gaiolas (80 L). Foram confeccionadas duas dietas: referência e teste (30% sorgo), ambas acrescidas com 0,1% de óxido de cromo III. A coleta das fezes foi realizada em aquários de fundo cônico (200 L). Foram determinados os CDA da matéria seca (MS), proteína bruta (PB), extrato etéreo (EE), energia bruta (EB) e o teor de cromo nas fezes e nas dietas. Além disso, foi quantificado o teor de tanino, fibra bruta (FB) e matéria mineral (MM) no sorgo. Para o ensaio de desempenho produtivo foram utilizados 180 juvenis de pacu com peso total médio de 10,80 ± 0,77 g, distribuídos em 15 aquários (200 L). A partir dos dados de digestibilidade foram formuladas cinco dietas com quatro níveis de substituição da energia do milho pela do sorgo, 0, 25, 50, 75 e 100%, que corresponderam aos tratamentos. Os CDA do sorgo pelo pacu foram 78,52% para MS; 74,82% para PB; 94,36% para EE e 77,24% para EB. Não foram observadas diferenças (p > 0,05) para as variáveis de desempenho, índices somáticos e parâmetros hematológicos. O sorgo apresenta CDA semelhantes ao do milho, podendo substitui-lo integralmente em dietas para juvenis de pacu sem alterar negativamente o desempenho produtivo, índices somáticos e parâmetros hematológicos. Além disso, a inclusão do sorgo nas dietas para juvenis de pacu reduz o custo da formulação e produção.
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Efeitos da suplementação parenteral com selênio e vitamina E nos valores hemáticos e séricos de cavalos de enduro / Effects of parenteral supplementation with vitamin E and selenium in hematic and seric values of endurance horsesMariano Etchichury 13 December 2004 (has links)
O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da suplementação parenteral com vitamina E e selênio em determinados parâmetros hemáticos e séricos usados comumente na clínica diária em cavalos de enduro. Foram utilizados seis cavalos em treinamento das raças Árabes e Anglo-árabes em um delineamento em Cross Over de dois períodos de 84 dias cada, divididos em grupos Tratamento e Controle. Não foi observado efeito de tratamento para as variáveis peso, hematócrito, contagem eritrocitária, hemoglobina, leucócitos, freqüência cardíaca, concentração de hemoglobina corpuscular média, uréia, glutationa peroxidase, creatinina lactatodesidrogenase, creatiniquinase, gammaglutamiltransferase e glutationa peroxidase. Os valores de enzimas lactatodesidrogenase e creatiniquinase em repouso ficaram muito por cima dos níveis de referência em ambos grupos. No dia 70 foi observada diferença significativa (p < 0,05) para volume corpuscular médio e hemoglobina corpuscular média, correspondendo o valor menor ao grupo tratamento. As conclusões extraídas deste estudo são: 1. A suplementação parenteral de selênio e vitamina E não influi nos parâmetros analisados em cavalos que treinam e competem em provas de até 60 km. 2. Apesar de inconstantes, os achados nos valores de volume corpuscular médio e hemoglobina corpuscular média podem sinalizar uma tendência de adaptação ao exercício destes valores hematimétricos em animais com melhor defesa antioxidante. / The aim of this study was to measure the effects of parenteral supplementation with selenium and vitamin E in predetermined hematic and serics parameters commonly used in endurance horse daily clinic. Six Arab and Anglo-Arab horses in endurance training were used in a Cross Over experimental design of two periods of 84 days each, divided in Treatment and Control groups. No treatment effects was detected for weight, packed cell volume, red blood cell count, hemoglobin, leucocytes, heart rate, mean corpuscular hemoglobin concentration, reduced glutathion, urea, creatinine and lactatodeshidrogenase, creatinikinase, gammaglutamiltransferase or glutathion peroxidase. The lactatedeshidrogenase and creatinikinase values were high than those used as reference in both groups. In 70\'th day was observed a statistical difference (p < 0,05) for mean corpuscular volume and mean corpuscular hemoglobin parameters, with the lowest value in the treatment group. The following conclusions were extracted from this trial: 1. A parenteral supplementation with selenium and vitamin E had no effect in the examined parameters in horses training and competing in races till 60 km. 2. Despite the inconsistence of mean corpuscular volume and mean corpuscular hemoglobin finds, this observation can indicate an exercise adaptation tendency of this hematimetric values in horses with better antioxidant defense.
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Estudo da factibilidade da avaliação funcional ambulatorial em pacientes submetidos ao transplante de células-tronco hematopoiéticas / Feasibility study of an outpatient functional evaluation in patients undergoing hematopoietic stem cells transplantationSouza, Clarissa Vasconcellos de, 1982- 20 August 2018 (has links)
Orientador: Afonso Celso Vigorito / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-20T03:28:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2011 / Resumo: O procedimento de transplante de células-tronco hematopoiéticas (TCTH) pode causar perdas funcionais que dificultam atividades diárias que requeiram habilidades físicas. Nosso objetivo foi avaliar a função dos pacientes pré e após o TCTH utilizando uma avaliação em ambiente ambulatorial. De novembro de 2008 a Novembro de 2010, 50 pacientes, 29 (58%) mulheres, mediana de idade de 48 anos (24-67), foram arrolados no estudo. A coleta foi realizada pré e pós TCTH alogênico ou autólogo. Os instrumentos utilizados foram o teste de caminhada de 2 minutos (TC2M), saturação de oxigênio (SatO2), freqüência cardíaca (FC) e escala modificada de Borg (EMB) antes e depois do TC2M para avaliação da performance da marcha, teste de força de preensão (TFP) para avaliação de força muscular, teste de Schober (TS) para avaliação de mobilidade de coluna lombar e escala máxima e adaptada de atividade (EMA e EAA) do questionário Perfil de Atividade Humana (PAH) para avaliação da função física. Cinqüenta pacientes foram avaliados pré TCTH; 6 não foram submetidos ao TCTH; 3 morreram previamente, 1 se recusou e 2 foram excluídos. Quarenta e quatro de 50 (88%) foram submetidos ao TCTH, 21 alogênicos e 23 autólogos. Trinta e três de 44 (75%) pacientes foram submetidos à ambas as avaliações, 11/44 (25%) pacientes não foram submetidos: 9 morreram e 2 foram excluídos. Entre os grupos que foram submetidos às duas avaliações, achamos valores estatisticamente menores na avaliação pós para TC2M (p= 0,004), TFP para mão direita e esquerda (p= 0,004 e < 0,0001), TS, EMA e EAA (p< 0,0001); e valores maiores para FC (p= 0,01) antes do TC2M e SatO2 (p= 0,02) após o TC2M. Também encontramos diferenças estatisticamente significantes entre os grupos de pacientes autólogo e alogênico nas variáveis Hemoglobina (Hb), EMA (p= 0,002) e EAA (p= 0,008) no pós TCTH. Estas diferenças indicam um decréscimo no condicionamento aeróbico antes do stress físico, redução da performance da marcha, da força muscular, da flexibilidade da coluna e na função em atividades de vida diária no pós TCTH, mostrando perdas físicas nesta população. Ademais, o prejuízo funcional e físico foi mais severo nos pacientes submetidos ao procedimento alogênico no pós TCTH. Concluindo, o entendimento da intensidade e a especificidade dessas perdas físicas podem ajudar a conduzir melhor um programa de reabilitação no pós TCTH / Abstract: Hematopoietic stem cell transplant (HSCT) procedure may cause functional losses that impair daily tasks that require physical skills. Our aim was to evaluate function of patients pre and post HSCT using an assessment in outpatient basis. From November 2008 to November 2010, 50 patients, 29 (58%) female, median age 48 years (24-67), were enrolled in the study. Collection was performed pre and post autologous or allogeneic HSCT. Instruments were 2 minutes walking test (2MWT), oxygen saturation (Sa02), heart rate (HR) and Borg Scale (BS) before and after 2MWT for gate performance evaluation; Grip Strength (GS) for strength evaluation, Schober Test (ST) for spine mobility testing and maximum and adapted activity score (MAS and AAS) of Human Activity Profile (HAP) questionnaire for function role evaluation. Fifty patients were evaluated pre HSCT; 6 did not undergo HSCT; 3 died, 1 refused, and two were excluded. Forty four out of 50 (88%) underwent HSCT, 21 allogeneic, 23 autologous. Thirty three out of 44 (75%) patients performed both evaluations, 11/44 (25%) patients did not: 9 died and 2 were excluded. Among groups who performed both evaluations, we found significant lower values in the post evaluation for 2MWT (p= 0.004), GS for right and left hand (p= 0.004 and <0.0001 respectively), ST, MAS and AAS (p< 0.0001); and higher HR (p= 0.01) before 2MWT and Sa02 (p=0.02) after 2MWT. We also found statistically differences between allogeneic and autologous groups of patients for hemoglobin (Hb), MAS (p= 0.002) and AAS (p= 0.008) variables on post HSCT. Those differences indicate decrease on aerobic conditioning before physical stress, decline of gate performance, hand strength, spine flexibility and on function role on daily activities post HSCT, showing physical losses in this population. Moreover, functional and physical prejudice was more severe in patients that underwent allogeneic procedure on post HSCT. In conclusion a better understanding of intensity and specificity of those physical losses may help to conduct a better rehabilitation program on post HSCT period / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica
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