O urubu-de-cabeça-preta (Coragyps atratus) é uma ave de vida livre com ampla distribuição no Brasil. Esta espécie é comumente encontrada em áreas urbanas concentrando-se em locais de deposição de lixo. O fato de se alimentarem de carcaças em decomposição facilita o contato de urubus-de-cabeça-preta com muitos patógenos. No entanto, ainda não está clara qual a real implicação de muitos desses microrganismos para a saúde dos mesmos. Assim, o objetivo desse estudo foi investigar a ocorrência de alguns patógenos selecionados, avaliar o perfil hematológico e a microbiota cloacal de C. atratus em ambiente urbano. Para isso, amostras de sangue, soro e swab cloacal foram obtidos de 120 urubus de vida-livre capturados na Fundação Parque Zoológico de São Paulo, SP. A prova de soroaglutinação rápida (SAR) foi utilizada na detecção de anticorpos contra Salmonella Pullorum/Gallinarum, Mycoplasma synoviae e M. gallisepticum. O teste de aglutinação em látex (AL) foi utilizado para a pesquisa de antígeno de Cryptococcus neoformans. Foram utilizadas técnicas convencionais de hematologia, microbiologia e testes de sensibilidade microbiana. Das amostras de soro analisadas pela SAR, 15% foram reagentes para M. gallisepticum. Anticorpos contra S. Pullorum/Gallinarum e M. synoviae não foram detectados. Nenhuma amostra foi positiva para C.neoformans ou para hemoparasitas. A média e o desvio padrão dos seguintes valores hematológicos foram obtidos para 61 aves: eritrócitos (1.8x10¹²/L); leucócitos (13,11x10/L); hemoglobina (10,4 g/dL); hematócrito (48,44%); VCM (275,1 fL); HCM (42 pg); CHCM (15,8 g/dL); proteína sérica total (3,76 g/dL); heterófilos (78%); linfócitos (13,5%); eosinófilos (5,4%); monócitos (2,8%); basófilos (0,1%); trombócitos (14,14x10/L). De 75 colônias bacterianas isoladas de 20 swabs cloacais, 78,7% foram Gram-positivas e 21,3% Gram-negativas, sendo Enterococcus sp. o gênero mais frequente. Aproximadamente 86,7% das cepas isoladas foram resistentes a pelo menos um dos antibióticos testados. Cepas de Bacillus sp. e Enterococcus casseliflavus apresentaram resistência a sete dos oito antibióticos testados. Leveduras não foram isoladas em nenhumas das culturas. As informações obtidas nessa pesquisa são de suma importância, uma vez que poucos estudos avaliam o estado de saúde de urubus no mundo. / Black vulture (Coragyps atratus) is a free-living bird widely distributed across Brazil. These birds feed on rotting carcasses and large groups are commonly found in urban areas, including rubbish dumps. By feeding on decomposing carcasses, they are often exposed to innumerous pathogens. However, the role of infectious microorganisms on vultures health still need to be clarify. Thus, the aim of this study was to investigate the occurrence of selected infectious agents, the hematological profile and cloacal microbiota of black vulture in urban areas. Therefore, blood, serum and cloacal swabs were obtained from 120 free-living vultures trapped in Fundação Parque Zoológico de São Paulo, SP. The rapid seroagglutination test (RST) was performed for detection of antibodies against Salmonella Pullorum/Gallinarum, M. synoviae and M. gallisepticum. Furthermore, latex agglutination test was used to detect Cryptococcus neoformans \' antigen. Conventional techniques for hematology, microbiology and antimicrobial susceptibility testing were performed. From the serum samples analyzed by RST, 15% were positive for M. gallisepticum, antibodies against S. Pullorum/Gallinarum and M. synoviae were not detected. None sample was positive to Cryptococcus neoformans or hemoparasites. Mean and standard deviation from the following hematological values were obtained for 61 birds: erythrocytes (1.8x10¹²/L); leukocytes (13.11x10/L); hemoglobin (10.4 g/dL); hematocrit (48.44%); MCV (275,1 fL); MCH (42 pg); MCHC (15,8 g/dL); total serum protein (3.76 g/dL); heterophils (78%); lymphocytes (13.5%); eosinophils (5.4%); monocytes (2.8%); basophils (0,1%); thrombocyte (14.14x10/L). From 75 bacterial colonies isolated from 20 cloacal swabs, 78.7% were Gram-positive and 21.3% were Gram-negative. Enterococcus sp. was the most frequent genus. Approximately 86.7% of the isolated strains were resistant to at least one of the antibiotic tested. Bacillus sp. and Enterococcus casseliflavus strains shown resistance to seven in eight antibiotics tested. Yeasts were not isolated. The information obtained in this research is of paramount important since few studies have been carried out on the vultures health condition in the world.

O aquarismo é uma atividade mundialmente difundida e um segmento extremamente grande da indústria de animais de estimação. O Brasil, em 2007, exportou o valor de US$ 5.871.576,73 em peixes. Devido à biologia dos peixes, todo seu manejo pode desencadear uma resposta fisiológica de estresse, que, dependendo da duração, tipo e espécie de manejo leva a uma resposta imunossupressora, que pode acarretar doença e morte aguda e consequentemente grande prejuízo à produção desses animais. O uso de imunoestimulantes, como suplementação dietética pode prover defesa inata e resistência a patógenos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a viabilidade da utilização de mananoligossacarídeo de levedo de cerveja (Saccharomyces cerevesiae), como imunoestimulante adicionado à ração oferecida a peixes da espécie Cyprinus carpio durante 45 dias. Para avaliar a imunidade dos peixes, foram feitas avaliações hematológicas periódicas e, no final do período determinado, os peixes foram desafiados imunologicamente com estresse e infectados com Aeromonas hydrophila. As carpas do grupo controle tiveram uma taxa de crescimento de 0,05 g/dia, conversão alimentar de 14,09 e eficiência protéica de 0,25, enquanto o grupo imunoestimulado obteve a taxa de crescimento de 0,11g/dia, conversão alimentar de 6,15 e eficiência protéica de 0,57. Não houve diferença estatística entre o resultado da hematologia dos animais do grupo controle e do grupo imunoestimulado. Dos animais infectados experimentalmente, 88% morreram em menos de 24 horas por choque endotóxico e, no exame post mortem, não houve diferença entre os grupos. A carpa que recebeu alimentação controle e foi infectada teve anemia macrocítica normocrômica, trombocitopenia, linfopenia, monocitose e aumento do número de CGE. A carpa que recebeu alimentação com MOS, foi infectada e sobreviveu, não apresentou alteração nos parâmetros hematológicos. A ração com MOS foi zootecnicamente melhor para a nutrição das carpas. Com base na taxa de sobrevivência e na avaliação hematológica, não há como responder se a ração suplementada com MOS foi imunologicamente melhor do que a ração controle. / The aquarium hobby is an activity wordwide spread and a segment extremely large of the pet industry. Brazil, in 2007, exported an amount of US$ 5.871.576,73 of fishes. Due to the biology of the fishes, all its management can trigger a physiological response leading to stress, that depending on the duration, type and specie, can conclude in immunosuppressive response, leading to disease and acute death, creating a great prejudice. The use of immunostimulants, as dietary supplementation may provide an innate defense against pathogens. This study aims to evaluate the feasibility of using mannan oligosaccharide of brewer yeast (Saccharomyces cerevesiae) as immunostimulants added to the feed for koi fishes (Cyprinus carpio) during 45 days. To evaluate the immunity of the fishes, periodic hematologic evaluations were made and at the end of the determined period, the fishes were immunologically challenged with stress and inoculation with Aeromonas hydrophila. The control group had a growth rate of 0,05g/day, feed conversion of 14,09 and protein efficiency ratio of 0,25, while the treatment group had growth rate of 0,11g/day, feed conversion of 6,15 and protein efficiency ratio of 0,57. The hematological results showed no statistical difference between the control group and immunostimulant group according. Analyzing the experimental infected animals, 88% died within 24 hours, due to endotoxic shock, and in the post mortem examination, there were no difference between groups. The koi that received control feed and it was infected had macrocytic normochromic anemia, thrombocytopenia, lymphopenia, monocytosis and increased of special granulocytic cells. The koi that received the MOS feed, was infected with A. hydrophila and survived, had no alteration on haematological parameters. The feed with MOS was zootechnical better than the control feed to carps. Based on the rate of survival and hematology, there are no possibility of answering if supplemented feed with MOS was immunologic better than control feed.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Clara da Silva Negreiros Botelho.pdf: 723451 bytes, checksum: 1e37e85e4e70439cfb2171e80f21bc04 (MD5) Previous issue date: 2010-03-08 / The canine monocytic ehrlichiosis, an infectious disease of worldwide distribution, is caused by the rickettsia Ehrlichia canis, an obligatory intracellular parasite of mononuclear cells and transmitted by the dog tick Rhipicephalus sanguineus. The clinical and hematological abnormalities are varied, depending on the strain of Ehrlichia spp., the immune response of the dog and the concomitant presence of other diseases. Among the various hematological disorders, thrombocytopenia is a common feature. The disease can manifest itself through a variety of clinical veterinarians, particularly those working in endemic areas, should always consider the possibility of infection with Ehrlichia spp., especially in dogs with nonspecific signs of illness. This study aimed to evaluate clinical and hematologic recuperation of dogs naturally infected with Ehrlichia sp. and treated with doxycycline. The trial was performided at the Laboratory of Experimental Chemotherapy from the Department of Animal Parasitology of the Institute of Veterinary of the Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. About the total of 90 Beagles dogs kept in kennels experimental laboratory, twelve were selected, with clinical signs such as fever, anorexia, vomiting, weight loss, pale mucous membranes, hepatomegaly and splenomegaly and the presence of ticks R. sanguineus and find hematologic thrombocytopenia. The laboratory diagnosis was confirmed by direct identification of morulae of Ehrlichia sp. in blood smears stained with Giemsa. After weighing all of 12 dogs, they were individually treated with doxycycline at a dose of 10mg/kg body weight every 12 hours for 21 days, during which assessments were made of clinical and hematologic exams. Some clinical changes were observed during the evaluation period as fever, anorexia, vomiting, diarrhea, pale mucous membranes, splenomegaly and lymphadenopathy presenting these standard parameters the 21 days of treatment. The abnormalities found were thrombocytopenia and normochromic normocitic anemia. In the days +14 and +21, the mean counts of red blood cells and hematocrit value were within normal physiological parameters for the species. There was a statistically significant difference between days -1 and +21 by red blood counts and hematocrit values. At the end of treatment, all animals were normalized to platelet count, statistically significant differences between days -1 and +21. It is concluded that there was clinical-hematological normalization at the end of the treatment period and that it administered at a dose of 10mg/kg over 21 days produced no clinical and hematological reactions. Key words: Antibioticotherapy, Ehrlichia spp., Hematology. / A ehrlichiose monoc?tica canina, doen?a infecciosa de distribui??o mundial, ? causada pela riqu?tsia Ehrlichia canis, parasita intracelular obrigat?rio de c?lulas mononucleares caninas e transmitida pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus. As anormalidades cl?nicas e hematol?gicas s?o variadas, dependendo da linhagem de Ehrlichia spp., da resposta imune do c?o e da presen?a concomitante de outras doen?as. Entre as diversas anormalidades hematol?gicas, a trombocitopenia ? um achado predominante. Como a doen?a pode se manifestar atrav?s de uma grande variedade de sinais cl?nicos, os m?dicos veterin?rios, particularmente aqueles que trabalham em regi?es end?micas, devem sempre considerar a possibilidade de infec??o por Ehrlichia spp., especialmente em c?es com sinais n?o espec?ficos da doen?a. O presente estudo teve como objetivo avaliar a recupera??o cl?nicohematol?gica de c?es naturalmente infectados por Ehrlichia sp. e tratados com doxiciclina. O estudo foi realizado nas depend?ncias do Laborat?rio de Quimioterapia Experimental em Parasitologia Veterin?ria do Departamento de Parasitologia Animal da UFRRJ. Selecionou-se 12 animais da ra?a Beagle, do total de 90 c?es mantidos no canil experimental do laborat?rio, com sinais cl?nicos, como febre, anorexia, v?mito, emagrecimento, mucosas hipocoradas, hepato e esplenomegalia, al?m da presen?a de carrapatos R. sanguineus e do achado hematol?gico de trombocitopenia. O diagn?stico laboratorial foi confirmado pela identifica??o direta de m?rulas de Ehrlichia sp. em esfrega?os sangu?neos corados por Giemsa. Ap?s a pesagem dos 12 c?es, os mesmos foram tratados individualmente com doxiciclina, na dose de 10mg/kg de peso corporal, por via oral, a cada 12 horas por um per?odo de 21 dias, durante os quais foram realizadas avalia??es de par?metros cl?nicos e hematol?gicos. Algumas altera??es cl?nicas foram observadas ao longo do per?odo de avalia??o como febre, anorexia, v?mito, diarr?ia, mucosas hipocoradas, esplenomegalia e linfadenomegalia apresentando-se estes par?metros normalizados ao 21? dia de tratamento. As altera??es hematol?gicas encontradas foram trombocitopenia e anemia normocit?ca normocr?mica. Nos dias +14 e +21, as contagens m?dias de hem?cias e valor de hemat?crito estavam dentro dos par?metros fisiol?gicos normais para a esp?cie. Houve diferen?a estat?stica significativa entre os dias -1 e +21 na contagem de hem?cias e nos valores de hemat?crito. Quanto a trombocitopenia, no fim do tratamento, todos animais estavam com plaquetometria normalizada, havendo diferen?a estat?stica significativa entre os dias -1 e +21. Conclui-se que houve uma normaliza??o dos quadros cl?nico-hematol?gicos ao final do per?odo de tratamento e que o mesmo administrado na dose de 10mg/Kg ao longo de 21 dias n?o produziu rea??es cl?nicas e hematol?gicas adversas. Palavras-chave: Antibioticoterapia, Ehrlichia spp., Hematologia.

O curto tempo de armazenamento dos hemocomponentes é um dos fatores que dificulta e limita a quantidade de sangue que pode ser efetivamente armazenada, o que é uma desvantagem na medicina veterinária, pois o acesso a doadores é restrito e a demanda é contínua e cada vez maior na prática de clínicas e hospitais veterinários. Durante o armazenamento do sangue em baixas temperaturas, seja sob a forma de sangue total ou concentrado de eritrócitos, há uma queda intensa de metabólitos importantes para a viabilidade e funcionalidade dos eritrócitos. O desenvolvimento de meios e soluções de preservação sanguínea possibilitou o armazenamento dos eritrócitos e, consequentemente, facilitou o trabalho dos bancos de sangue. Portanto, a busca por melhores formas e soluções para preservação capazes de evitar ou diminuir estes efeitos prejudiciais durante o seu armazenamento é contínua, para que ao final se obtenha uma melhor qualidade do sangue transfundido. O presente trabalho avaliou o concentrado de eritrócitos felino armazenado na solução de CPDA-1 e CPD/SAGM durante 35 dias. Os dados laboratoriais foram comparados entre grupos e ao longo do tempo. Neste experimento foram utilizadas 10 bolsas de concentrado de eritrócitos felino divididos em dois grupos de cinco para avaliação de cada um dos aditivos. Os parâmetros laboratoriais K+, Na+, Cl-, lactato, HCO3-, amônia, glicose e pH foram avaliados nos dias 1, 7, 14, 21, 28 e 35 após a coleta. Vários parâmetros (K+, lactato, HCO3, glicose e cloreto) demonstraram que a solução CPD/SAGM manteve o metabolismo energético do eritrócito mais estável. Com este trabalho, foi possível entender melhor as alterações metabólicas sofridas pelos eritrócitos felinos durante o armazenamento. Concluímos que, apesar da solução CPD/SAGM se mostrar mais eficaz in vitro, são necessários mais estudos com relação aos hemocomponentes em gatos e à sua viabilidade pós-transfusional. / The short shelf life of blood products is one factor that complicates and limits the amount of blood that can be effectively stored, and it is a disadvantage in veterinary practice, because the access to donors is restricted and the demand is continuous and increasing at veterinary clinics and hospitals. During blood storage at low temperatures, either as whole blood or as packed red cells, there is a significant decrease of metabolites that are important for the viability and functionality of erythrocytes. The development of blood preservation solutions has enabled the storage of red blood cells and improved the service at the blood banks. Therefore, the search for better ways and blood preservation solutions to avoid or reduce these harmful effects during the storage conditions is continuous, in order to obtain the best blood product to be transfused. This study evaluated 10 bags of feline erythrocyte concentrate divided into two groups, stored in CPDA-1 and CPD/SAGM solutions during 35 days. The laboratory data were compared between groups and over time. K+, Na+, Cl-, lactate, HCO3-, ammonia, glucose and pH were assessed on days 1, 7, 14, 21, 28, and 35 after collection. On various parameters (K+, Cl-, HCO3-, glucose and lactate) solution of CPD/SAGM kept the energy metabolism of red blood cells more stable. With these results we can better understand the biochemical changes of feline erythrocytes during storage. We conclude that, although the CPD/SAGM solution shown to be more effective, more studies are needed to improve knowledge of feline blood components and post-transfusion viability.

As anormalidades hematológicas de origem paraneoplásica são identificadas em diversos tipos de neoplasias que acometem cães e gatos. Nas neoplasias mamárias em cadelas, já foram identificadas anormalidades relacionadas com a coagulação, onde verificou-se que a coagulação intravascular disseminada (CID) clínica e subclínica pode estar presente em 83% das cadelas com carcinoma mamário. Na medicina humana, é dada relevância à investigação de tais alterações uma vez que são fatores indicadores de prognóstico do câncer. Enquanto isso, na medicina veterinária, são escassos os estudos que relacionam as alterações hematológicas com o tipo tumoral, estadiamento e determinação de prognóstico. O objetivo do presente estudo foi realizar a avaliação hematológica, bioquímica e da hemostasia de cadelas acometidas por neoplasia mamária para identificar a alteração mais frequente, além de relacionar as anormalidades com o estadiamento tumoral. Para isso, foram utilizadas 25 cadelas atendidas pelo Grupo de Estudos em Oncologia em pequenos animais (ONCOVET) do Hospital de Clínicas Veterinárias da UFRGS (HCV-UFRGS) durante o período de 4 meses. Foi realizado coleta de sangue para hemograma, contagem de plaquetas, bioquímica sérica (albumina, ALT, cálcio, creatinina, FA, glicose, ureia) e teste de coagulação que constou de TP (tempo de protrombina), TTPa (tempo de tromboplastina parcial ativada), TT (tempo de trombina), fibrinogênio e mensuração do dímero-D. O estadiamento tumoral foi obtido através do exame físico e do resultado da biopsia das mamas. As anormalidades encontradas incluíram anemia, leucocitose neutrofílica, monocitose, eosinofilia, trombocitose, hipoalbuminemia, hipocalcemia, hipoglicemia e diminuição dos níveis de ureia sanguínea. Entretanto, essas alterações não foram relacionadas diretamente com a progressão tumoral, uma vez que não houve diferença entre os grupos avaliados. Apenas as variáveis RDW e ALT apresentaram relação significativa entre os grupos, contudo, sem relevância clínica. No teste de coagulação, houve diferença significativa entre os grupos apenas no TT e fibrinogênio, que foi relacionado com o estadiamento tumoral. / Hematological abnormalities of paraneoplastic origin are identified in several types of cancers that affect dogs and cats. In dogs with mammary neoplasms, abnormalities associated with coagulation have been identified, and verified that disseminated intravascular coagulation (DIC) clinical and subclinical may be present in 83% of dogs with mammary carcinoma. In human medicine, research in this field has been relevant since those factors are indicators of cancer prognosis. Meanwhile, in veterinary medicine, there are few studies that relate hematological changes with tumor type, staging and determination of prognosis. The aim of this study was to evaluate the hematological, biochemical and hemostathic abnormalities in bitches affected by mammary cancer to identify the most frequent alteration and associate with tumor staging. For this, 25 bitches attended by the Oncology Study Group in small animals (ONCOVET) of the Veterinary Hospital of UFRGS (HCV-UFRGS) for the period of 4 months were used. Blood collection for complete blood count, platelet count, serum biochemistry (albumin, ALT, calcium, creatinine, ALP, glucose, urea) and coagulation test that consisted of PT (prothrombin time), aPTT (activated partial thromboplastin time), TT (thrombin time), fibrinogen and D-dimer measurement were performed. Tumor staging was obtained by physical examination and the results of the biopsy of the breast. The abnormalities found included anemia, neutrophilic leukocytosis, monocytosis, eosinophilia, thrombocytosis, hypoalbuminemia, hypocalcemia, hypoglycemia and decreased levels of urea. However, these changes were not associated directly with tumor progression, since there was no difference among the groups. Only the RDW and ALT variables was associated significantly between the groups, however, with no clinical relevance. In the coagulation test, there was significant difference between the groups only in TT and fibrinogen, which was associated with tumor staging.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-10-04T18:07:36Z No. of bitstreams: 1 2017 - Camila Fl?via Magalh?es Botelho.pdf: 1531668 bytes, checksum: b445ba2353dc7515e478a8e151b24d75 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-04T18:07:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Camila Fl?via Magalh?es Botelho.pdf: 1531668 bytes, checksum: b445ba2353dc7515e478a8e151b24d75 (MD5) Previous issue date: 2017-02-14 / CAPES / Hemotrophic mycoplasmas hemoparasites are pleomorphic, epicellular, gram negative organisms that are located on the surface of erythrocytes of several species. In dogs, hemoplasma infection can cause hemolytic anemia in the acute phase, while in the chronic phase the signs are generally inapparent, and immunosuppression can trigger the acute disease. The present study aimed to detect molecularly the presence of hemotrophic mycoplasma agents in domestic dogs from the urban and rural areas of Aragua?na, Tocantins and, in addition, to correlate hematological alterations and factors associated with natural infection. In the analysis of the results, 2.9% (3/105) of the dogs sampled from the urban area and 24.49% (24/99) from the rural area were positive for Mycoplasma spp. by the Real Time Polymerase Chain Reaction (qPCR). The frequency of hemoplasmas species infection by PCR using species-specific oligonucleotides was 1.9% (2/105) and 13.26% (13/99) for Mycoplasma haemocanis in the urban and rural areas, respectively. No positive dogs were observed for ?Candidatus Mycoplasma turicensis? and ?Candidatus Mycoplasma haematoparvum?/?Candidatus Mycoplasma haemominutum? in both areas studied. Regarding hematological alterations, there was no statistical association with the infection by Mycoplasma spp. Similarly, among the analyzed variables (age, gender, racial pattern, site cleanliness and housing), no statistical correlation was observed in either urban or rural areas. This is the first report of the molecular detection of Mycoplasma haemocanis in dogs from Tocantins and opens up prospects for future studies in this group of hemotrophic agents. / Os hemoparasitos micoplasmas hemotr?ficos s?o organismos pleom?rficos, epicelulares, Gram negativos, que se localizam na superf?cie dos eritr?citos de diversas esp?cies. Em c?es, a infec??o pelos hemoplasmas pode causar anemia hemol?tica na fase aguda, enquanto na doen?a cr?nica os sinais em geral s?o inaparentes, sendo que a imunossupress?o pode desencadear a doen?a aguda. O presente estudo objetivou detectar molecularmente a presen?a de infec??o pelos agentes micoplasmas hemotr?ficos em c?es dom?sticos procedentes de ?reas urbana e rural de Aragua?na, Tocantins e, adicionalmente correlacionar as altera??es hematol?gicas e fatores associados com a infec??o natural. Na an?lise dos resultados obtidos, 2,9% (3/105) dos c?es amostrados da ?rea urbana e 24,49% (24/99) da ?rea rural foram positivos pela Rea??o em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (qPCR) para Mycoplasma spp. A frequ?ncia de infec??o das esp?cies de hemoplasmas pela PCR, utilizando oligonucleot?deos esp?cie-espec?ficos, foi de 1,9 % (2/105) e 13,26% (13/99) para Mycoplasma haemocanis na ?rea urbana e rural, respectivamente. N?o foram observados c?es positivos para ?Candidatus Mycoplasma turicensis? e ?Candidatus Mycoplasma haematoparvum?/?Candidatus Mycoplasma haemominutum? em ambas as ?reas estudadas. No tocante ?s altera??es hematol?gicas, n?o houve associa??o estat?stica com a infec??o por Mycoplasma spp. De modo semelhante, dentre as vari?veis analisadas (idade, sexo, padr?o racial, limpeza do local e moradia) n?o foi verificada qualquer correla??o estat?stica com a infec??o pelo agente Mycoplasma spp., seja na ?rea urbana ou na rural. Esta constitui a primeira detec??o molecular de Mycoplasma haemocanis em c?es do Tocantins e abre perspectivas para futuros estudos neste grupo de agentes hemotr?ficos.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-06-09T11:31:58Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_IdentificacaoPortadorasMutacoes.pdf: 1748546 bytes, checksum: dcb49984318f2b4b158034c608be1490 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-06-12T14:08:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_IdentificacaoPortadorasMutacoes.pdf: 1748546 bytes, checksum: dcb49984318f2b4b158034c608be1490 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-12T14:08:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_IdentificacaoPortadorasMutacoes.pdf: 1748546 bytes, checksum: dcb49984318f2b4b158034c608be1490 (MD5) Previous issue date: 2017-02-01 / A hemofilia A é um distúrbio hereditário da coagulação, ligado ao cromossomo X, causado pela deficiência do Fator VIII (FVIII) da coagulação que se caracteriza por episódios de sangramentos espontâneos ou pós-traumáticos, que pode levar à incapacitação física por artropatia, até risco de morte. A deficiência do FVIII é causada por mutações no gene F8. O diagnóstico do estado de portadora do gene da hemofilia A é importante para a realização do aconselhamento genético, assim como para oferecer tratamento para portadoras sintomáticas. Na maioria dos casos, a mulher portadora desconhece este fato. Neste trabalho, pretendemos criar a metodologia necessária para identificação molecular de portadoras de hemofilia A, a partir da análise de 26 pacientes diagnosticados, cadastrados no Centro de Hemoterapia e Hematologia do Pará, e de seus parentes consanguíneos, prováveis portadores do alelo. O grupo controle foi constituído de 110 indivíduos do sexo masculino da população de Belém. A investigação foi baseada nas análises de seis STR (Short Tandem Repeats) localizados na região 3’ do final do gene F8: CTT3, TAAA3, TTTA3, DXS10011, DXS7423, GATA31E08. A utilização dos seis marcadores se mostrou útil tanto na identificação como na exclusão das portadoras, sendo que todas as portadoras obrigatórias foram identificadas. Este protocolo de identificação poderá ser utilizado rotineiramente para identificação das portadoras da hemofilia A, possibilitando o aconselhamento genético nessas mulheres. / Hemophilia A is an inherited X-linked bleeding disorder caused by a deficiency of coagulation FVIII, characterized by spontaneous or post-traumatic bleeding episodes, which can lead to physical incapacitation due to arthropathy and even death. The deficiency is the result of mutations on F8 gene. Diagnosis of Hemophilia A carrier status is important for genetic counseling as well as to provide treatment for symptomatic carriers, which, in most cases, are unaware of the fact. In this work, we intend to create the necessary methodology for the molecular identification of hemophilia A carriers, based on the analysis of 26 diagnosed patients, enrolled in the Centro de Hemoterapia e Hematologia do Pará, and their consanguineous relatives, likely carriers of the allele. The control group consisted of 110 males of the population of Belém. The research was based on analyzes of six STRs (Short Tandem Repeats) located in the 3' end region of the gene F8: CTT3, TAAA3, TTTA3, DXS10011, DXS7423, GATA31E08. The use of the six markers proved to be useful in the identification and in the exclusion of the carriers, and all the obligatory carriers were identified. This identification protocol can be routinely used to identify hemophilia A carriers and to provide genetic counseling in these women.

Com o objetivo de avaliar a evolução clínica, a persistência da infecção e a resposta imune humoral e celular, sete cães adultos desprovidos de anticorpos anti-Ehrlichia canis foram inoculados com E. canis e acompanhados durante vinte semanas. Três cães permaneceram como controle. Exame físico diário e avaliação laboratorial (hemograma, bioquímica sanguínea, fragilidade osmótica eritrocitária, teste de Coombs, teste de redução de tetrazólio nitroazul), reação em cadeia da polimerase (PCR), pesquisa de anticorpos anti-E. canis (IFI) e quantificação dos linfócitos T CD4+ e CD8+ por citometria de fluxo foram realizados, em diferentes momentos, durante o período de observação. A infecção foi comprovada pela presença de mórulas em linfócitos/monócitos no sangue circulante, soroconversão, com títulos de anticorpos entre 1.280 a 20.480 e a reação positiva ao PCR. Febre, esplenomegalia, linfadenomegalia, trombocitopenia, anemia não regenerativa, aumento das atividades séricas de ALT, AST e FA, foram as principais alterações clínicas e de patologia clínica observadas, com pico máximo entre 21 e 28 dias. Também nesses momentos foram observados o aumento de linfócitos T CD8+ e a diminuição dos linfócitos T CD4+. O aumento do metabolismo oxidativo dos neutrófilos, quando estimulados, entre o 28º e 35º dia p.i., o aumento de reticulócitos na circulação sanguínea nessa ocasião, a redução dos linfócitos T CD4+ e o aumento de linfócitos T CD8+ indicaram a resposta do hospedeiro, na tentativa de eliminar a infecção. No auge da infecção entre o 21º e 49º dia p.i., houve a inversão da relação CD4:CD8, principalmente o aumento dos linfócitos T CD8+. A fragilidade osmótica eritrocitária manteve-se inalterada, bem como o teste de Coombs, comprovando não ter ocorrido a hemólise imunomediada. Nos cães infectados não foram detectados a presença de anticorpos IgM anti-E. canis em nenhum momento de observação. O aumento de reticulócitos na circulação sanguínea a partir do 28º dia p.i. sugere ser temporária a supressão da atividade eritropoética. O baixo número de linfócitos T CD4+, coincidindo com a esplenomegalia e a PCR positiva até a vigésima semana p.i., sugere a relação entre a persistência da infecção, com a localização esplênica de E. canis e ativação de um mecanismo de escape pelo microrganismo, representado pelo baixo limiar de ativação de linfócitos T CD4+. Por outro lado, o aumento de linfócitos T CD8+ no auge da infecção coincidindo com a melhora clínica, sugere o envolvimento do mecanimo de citotoxicidade na patogenia da erliquiose canina. O bloqueio parcial da atividade dos linfócitos T CD4+, constitui-se provavelmente em um dos mecanismos de escape da E. canis, enquanto a contínua liberação de TNF-α pelas células citotóxicas, como parte do mecanismo do hospedeiro para a eliminação do parasita pode resultar na pancitopenia terminal observado freqüentemente nos cães cronicamente infectados por E. canis. / The clinical evolution, the persistence of infection and humoral and cellular immune response were evaluated on seven adult naïve dogs experimentally inoculated with an E. canis strain and followed during 20 weeks. Three dogs were remained as control. Daily clinical evaluation and laboratorial exams (hematological, biochemistry, erythrocyte osmotic fragility, Coombs´ test, neutrophils oxidative metabolism by nitroblue tetrazolium reduction test), polymerase chain reaction assay (PCR), anti-E. canis antibodies detection by indirect immunofluorescence assay (IFA) and quantification of CD4+ and CD8+ T lymphocytes by flow cytometry technique were evaluated, at different moments during all the experimental period. The presence of E. canis morulae, seroconversion with high antibodies titers (1,280 to 20,480) and positive PCR had confirmed the infection in all the inoculated animals. Fever, splenomegaly, lymphadenomegaly, thrombocytopenia, non-regenerative anemia and increase on liver´s enzymes serum activity (ALT, AST and ALP) were the main clinical and laboratorial changes observed, with the highest point between days 21 and 28 post-infection (p.i.). Also at these moments were observed increase of CD8+ T lymphocytes and reduction of the CD4+ T lymphocytes. The increase in the stimulated neutrophils oxidative metabolism between days 28 and 35 p.i., and the increase of reticulocytes in the same period, allied to the reduction of the CD4+ T lymphocytes and the increase of CD8+ T lymphocytes, indicated the host´s immune response in the attempt to eliminate the infection. On the peak of the infection, from the 21st to the 49th post-infection day, there was an inversion in the CD4:CD8 ratio of blood lymphocytes, mainly caused by increase of the CD8+ T lymphocytes. There was no variation on erythrocyte osmotic fragility and Coombs? test results, which suggested the absence of immune-mediated hemolysis. It wasn´t detected any anti-E. canis IgM antibodies in the infected group of dogs. The increase of reticulocytes only from the 28th post-infection day suggests a temporary erythropoietic suppression. The low number of CD4+ T lymphocytes, coinciding with the splenomegaly and the positive PCR until the twentieth week p.i., suggest that there is a relation between the persistent infection, the splenic localization of E. canis and an evasion mechanism, represented for the low threshold of activation of CD4+ T lymphocytes. On the other hand, the increase of CD8+ T lymphocytes in the peak of infection, coinciding with clinical improvement, suggests the involvement of the cytotoxicity mechanism on canine ehrlichiosis pathogenesis. The partial blockage of CD4+ T lymphocytes activity could probably be one of the E. canis escape mechanisms, while the continue TNF-α release by host´s cytotoxic cells, as a mechanism to eliminate the parasite, could result in terminal pancytopenia commonly observed in dogs chronically infected with E. canis.

O aquarismo é uma atividade mundialmente difundida e um segmento extremamente grande da indústria de animais de estimação. O Brasil, em 2007, exportou o valor de US$ 5.871.576,73 em peixes. Devido à biologia dos peixes, todo seu manejo pode desencadear uma resposta fisiológica de estresse, que, dependendo da duração, tipo e espécie de manejo leva a uma resposta imunossupressora, que pode acarretar doença e morte aguda e consequentemente grande prejuízo à produção desses animais. O uso de imunoestimulantes, como suplementação dietética pode prover defesa inata e resistência a patógenos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a viabilidade da utilização de mananoligossacarídeo de levedo de cerveja (Saccharomyces cerevesiae), como imunoestimulante adicionado à ração oferecida a peixes da espécie Cyprinus carpio durante 45 dias. Para avaliar a imunidade dos peixes, foram feitas avaliações hematológicas periódicas e, no final do período determinado, os peixes foram desafiados imunologicamente com estresse e infectados com Aeromonas hydrophila. As carpas do grupo controle tiveram uma taxa de crescimento de 0,05 g/dia, conversão alimentar de 14,09 e eficiência protéica de 0,25, enquanto o grupo imunoestimulado obteve a taxa de crescimento de 0,11g/dia, conversão alimentar de 6,15 e eficiência protéica de 0,57. Não houve diferença estatística entre o resultado da hematologia dos animais do grupo controle e do grupo imunoestimulado. Dos animais infectados experimentalmente, 88% morreram em menos de 24 horas por choque endotóxico e, no exame post mortem, não houve diferença entre os grupos. A carpa que recebeu alimentação controle e foi infectada teve anemia macrocítica normocrômica, trombocitopenia, linfopenia, monocitose e aumento do número de CGE. A carpa que recebeu alimentação com MOS, foi infectada e sobreviveu, não apresentou alteração nos parâmetros hematológicos. A ração com MOS foi zootecnicamente melhor para a nutrição das carpas. Com base na taxa de sobrevivência e na avaliação hematológica, não há como responder se a ração suplementada com MOS foi imunologicamente melhor do que a ração controle. / The aquarium hobby is an activity wordwide spread and a segment extremely large of the pet industry. Brazil, in 2007, exported an amount of US$ 5.871.576,73 of fishes. Due to the biology of the fishes, all its management can trigger a physiological response leading to stress, that depending on the duration, type and specie, can conclude in immunosuppressive response, leading to disease and acute death, creating a great prejudice. The use of immunostimulants, as dietary supplementation may provide an innate defense against pathogens. This study aims to evaluate the feasibility of using mannan oligosaccharide of brewer yeast (Saccharomyces cerevesiae) as immunostimulants added to the feed for koi fishes (Cyprinus carpio) during 45 days. To evaluate the immunity of the fishes, periodic hematologic evaluations were made and at the end of the determined period, the fishes were immunologically challenged with stress and inoculation with Aeromonas hydrophila. The control group had a growth rate of 0,05g/day, feed conversion of 14,09 and protein efficiency ratio of 0,25, while the treatment group had growth rate of 0,11g/day, feed conversion of 6,15 and protein efficiency ratio of 0,57. The hematological results showed no statistical difference between the control group and immunostimulant group according. Analyzing the experimental infected animals, 88% died within 24 hours, due to endotoxic shock, and in the post mortem examination, there were no difference between groups. The koi that received control feed and it was infected had macrocytic normochromic anemia, thrombocytopenia, lymphopenia, monocytosis and increased of special granulocytic cells. The koi that received the MOS feed, was infected with A. hydrophila and survived, had no alteration on haematological parameters. The feed with MOS was zootechnical better than the control feed to carps. Based on the rate of survival and hematology, there are no possibility of answering if supplemented feed with MOS was immunologic better than control feed.

Glucocorticoids are frequently included in the chemotherapy regimens administered to patients with CLL because they are potent immunosuppressant agents and because they are able to induce apoptosis in CLL cells. Although used from a long time, the molecular mechanisms by which glucocorticoids induce cell death in CLL cells are largely unknown. Interestingly, CLL cells from prognostic groups defined by the mutational load of the IGHV genes and the expression of ZAP70 seem to have different responses to glucocorticoids. The hypothesis in this thesis is that there are genes or proteins that determine the different response to glucocorticoids among the specific prognostic groups of patients with CLL. Sensitivity to dexamethasone was analyzed ex vivo in 50 CLL and compared according to IGHV mutational status and/or ZAP70 expression. The response was further compared by gene expression profiling (GEP) of selected cases. Expression of genes of interest was validated by quantitative reverse transcriptase PCR. Response to dexamethasone is higher in cases with unmutated IGHV/high ZAP70 expression and the levels of induction of the pro-apoptotic BIM gen correlate with the degree of cell death. The different levels of apoptosis induced by dexamethasone observed in the CLL groups defined by ZAP70 expression translate into different profiles of gene expression. These differences are mainly quantitative; cases with high ZAP70 expression show higher levels of gene induction/repression than cases with low ZAP70 expression. Specific analysis of genes of interest performed in a large series disclosed that baseline mRNA and protein expression levels of FKBP5, the co-chaperone of the glucocorticoid receptor, correlate with the extent of CLL cells apoptosis induced by the treatment with dexamethasone. Baseline FKBP5 levels are higher in samples from patients with high ZAP70 expression. GILZ is differentially induced by dexamethasone in ZAP70 expression groups of CLL, being higher in cases with high ZAP70 expression. Induction of GILZ correlates with induction of BIM and levels of apoptosis. Unmutated IGHV/high ZAP70 CLL cells exhibit better response to dexamethasone treatment, which is accompanied by a differential expression of genes involved in the glucocorticoid-receptor pathway and by an increased induction of genes related to apoptosis. / Los glucocorticoides son frecuentemente incluidos en la quimioterapia administrada a pacientes con leucemia linfática crónica (LLC), pues son potentes inmunosupresores e inducen la apoptosis de las células de LLC. Los mecanismos moleculares por los cuales los glucocorticoides inducen la apoptosis de las células de LLC son en gran parte desconocidos. Las células LLC de grupos pronósticos definidos por el estado mutacional de los genes IGHV y por la expresión de ZAP70 parecen tener diferentes respuestas a los glucocorticoides. La hipótesis de esta tesis es que hay genes o proteínas expresados de forma diferente en los grupos pronósticos de pacientes con LLC que determinan los diferentes niveles de apoptosis inducidos por los glucocorticoides. La sensibilidad al glucocorticoide dexametasona, se determino ex vivo en 50 muestras de pacientes con LLC y se comparo en función del estado mutacional de los genes IGHV y/o de la expresión de ZAP70. También se compararan los perfiles de expresión génica (GEP) de casos seleccionados. Los niveles de expresión de los genes de interés se validaran por QRT-PCR. La respuesta a la dexametasona es superior en los casos de LLC con genes IGHV no mutados/alta expresión de ZAP70. Los niveles de inducción del gen proapoptótico BIM se correlacionan con el grado de muerte celular. Los diferentes niveles de apoptosis inducida por dexametasona en los grupos de LLC definidos por la expresión de ZAP70 se traducen diferentes GEP. Las diferencias entre los GEP de cada grupo fueran principalmente cuantitativas, los casos con alta expresión de ZAP70 muestran niveles más altos de inducción/represión génica que los casos con baja expresión. Se observo que los niveles basales de ARNm y proteína de FKBP5, una cochaperona del receptor de los glucocorticoides, se correlacionan con el grado de apoptosis inducida por la dexametasona y que los niveles de FKBP5 son más elevados en los casos con alta expresión de ZAP70. GILZ induce diferencialmente por la dexametasona, observándose mayores inducciones en los casos con alta expresión de ZAP70. La inducción de GILZ se correlaciona con la inducción de BIM y con la magnitud de la apoptosis.