Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-04-07Bitstream added on 2014-06-13T20:51:48Z : No. of bitstreams: 1 gryninger_g_me_botfm.pdf: 272447 bytes, checksum: 5ed6892f68f886811597fca3fd900973 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O vírus da hepatite C é uma das principais causas de doença hepática no mundo inteiro. O estudo histopatológico é de grande importância no prognóstico e indicação de tratamento. A coinfecção com o vírus da hepatite B oculta pode agravar a lesão hepática e diminuir a resposta ao tratamento. As citocinas IL-2, INF, TNF- induzem lesão hepática e fibrose. A IL-10 apresenta atividade antiinflamatória e o TGF- induz o desenvolvimento e depósito de matriz extracelular causando fibrose. Este estudo avaliou, em pacientes com HCC, a presença da hepatite B oculta, a dosagem das citocinas IL-2, INF, TNF , TGF e IL-10, correlacionando com o estágio de fibrose em pacientes tratados e não tratados com interferon, comparando também com indivíduos saudáveis. Foram estudados 55 pacientes com HCC crônica, atendidos na Faculdade de Medicina de Botucatu, excluindo-se pacientes imunossuprimidos e gestantes. O grupo controle foi constituído de 20 indivíduos doadores de sangue. O vírus da hepatite B oculto foi pesquisado por de PCR in house, segundo técnica de Kaneno, com limite de detecção menor que 100 cópias/ml. A dosagem de citocinas foi determinada por método de Elisa. A avaliação da fibrose hepática seguiu aquela proposta pela Sociedade Brasileira de Patologia. Os resultados mostraram predominância do gênero masculino, adulto jovem, 36,4% foram usuários de drogas endovenosas e 41,8% haviam sido hemotransfundidos. Nenhum paciente apresentou coinfecção pelo vírus da hepatite B oculto. Na biópsia hepática predominou fibrose leve ou ausência de fibrose (47,2%). As citocinas analisadas não discriminaram o grau de fibrose nos indivíduos com HCC crônica, mesmo quando separados em pacientes que foram submetidos ao tratamento e pacientes que não receberam o tratamento. Não houve também discriminação das citocinas... / The Hepatitis C virus is one of the major causes of hepatic diseases worldwide. Histopathological analyses play a leading role in determining disease outcome and treatment. Co-infection with occult Hepatitis B can aggravate liver injury and diminish treatment response. Cytokines such as IL-2, INF and TNF- induce liver injury and fibrosis. IL-10 has an antiinflamatory action and TGF- induces extracellular matrix development and deposition causing fibrosis. In this study, the presence of occult Hepatitis B and the expression of IL-2, INF, TNF , TGF and IL-10 were assessed in HCC patients and correlated with fibrosis stage in patients treated and non-treated with interferon, as well as healthy individuals. A total of 55 patients with chronic HCC seen at Botucatu Medical School were included. Immunosuppressed or pregnant patients were excluded. The control group consisted of 20 blood donors. The occult Hepatitis B virus was detected by in-house PCR according to the technique of Kaneno with a detection limit < 100 clones/ml. Cytokine levels were determined by the Elisa method. Hepatic fibrosis was assessed as proposed by the Brazilian Society of Pathology. The results showed a predominance of male young adults of whom 36.4% had used endovenous drugs and 41.8% had been hemotransfused. No patient showed occult Hepatitis B co-infection. Hepatic biopsy revealed that fibrosis was either absent or mild in most cases (47.2%). The cytokines under study did not correlate with fibrosis stage in individuals with chronic HCC no matter whether they had or not received treatment. In addition, no correlations with cytokine levels were observed when VHC patients were separated into groups of individuals treated and non-treated with interferon . However, cytokine expressions were significantly increased in all cases in comparison with the control group.

Orientador : Prof. Dr. Roberto Pontarolo / Coorientadora : Profª. Drª. Astrid Wiens Souza / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 04/08/2017 / Inclui referências : f. 120-140 / Resumo: A hepatite C crônica é um relevante problema de saúde pública, sendo alvo de inúmeras investigações em ensaios clínicos, especialmente em relação aos novos tratamentos medicamentosos. Contudo, a população brasileira tem sido pouco representada nos estudos. A primeira geração dos antivirais de ação direta (DAAs) para o tratamento da hepatite C crônica genótipo 1 (boceprevir e telaprevir) foi incorporada pelo sistema público de saúde do Brasil em 2012. Dada a recente inclusão dessas terapias, o Ministério da Saúde recomendou a realização de estudo observacional para avaliar resultados de segurança e efetividade do telaprevir e boceprevir no Brasil. Portanto, com este trabalho, o objetivo foi avaliar a efetividade, a segurança e a relação custo-efetividade destas terapias sob a perspectiva do sistema público de saúde brasileiro. Para tanto, foi realizado um estudo prospectivo longitudinal em cinco centros de referência em atendimento a pacientes com hepatite C do Estado do Paraná, entre 2014 e 2016. Os dados relativos à efetividade e à segurança foram coletados dos prontuários de pacientes tratados com boceprevir ou telaprevir. Os desfechos de eficácia incluíram a resposta virológica rápida (RVR) e a resposta virológica sustentada (RVS), e os resultados de segurança incluíram os eventos adversos relatados nos prontuários. Cento e vinte e um pacientes foram incluídos no estudo observacional (19 no grupo boceprevir e 102 no grupo telaprevir), dos quais 67 completaram o tratamento (oito no grupo boceprevir e 59 no grupo telaprevir). Dos 121 pacientes incluídos na análise por intenção de tratar 26,3% atingiram a RVR no grupo boceprevir e 84,3% no grupo telaprevir (p<0,001). A RVS foi atingida por 47,4% e 61,8% nos grupos boceprevir e telaprevir, respectivamente (p=0,424). Náusea foi o evento adverso mais prevalente no grupo boceprevir e prurido no grupo telaprevir. Em relação à tolerabilidade, 57,9% dos pacientes descontinuaram o tratamento com boceprevir e 42,2% com telaprevir. Para avaliar a relação custo-efetividade dos regimes com boceprevir, telaprevir e terapia dupla padrão (interferon peguilado associado à ribavirina) no tratamento da hepatite C crônica foi desenvolvido um modelo de Markov simulando a progressão da doença em pacientes infectados com o genótipo 1 do vírus. Os desfechos de longo prazo contemplaram anos de vida ganhos (AVG), anos de vida ajustados pela qualidade (QALYs) e razão custo-efetividade incremental (ICER). Para todos os desfechos analisados a terapia tripla com boceprevir foi dominada pela terapia tripla com telaprevir, que foi a mais efetiva entre os tratamentos analisados, a um custo de R$ 63.642,00. As ICERs corresponderam a R$ 120.693/RVS, R$ 47.718/AVG e R$ 33.464/QALY para a terapia tripla com telaprevir versus a terapia dupla. Dados do estudo de prevalência, realizado na cidade de Curitiba com pacientes atendidos entre 2013 e 2016 (n=452), revelaram a maior prevalência da infecção pelos genótipos 1 e 3 do vírus. Além disso, foi observada maior prevalência do estágio de fibrose F4 entre os pacientes avaliados. Comparando indiretamente os DAAs de primeira e segunda geração por meio de revisão sistemática com meta-análise em rede, verificou-se a superioridade do daclatasvir sobre as demais terapias analisadas. Palavras-chave: Agentes antivirais. Hepatite C. Hepatite C - Tratamento farmacológico. / Abstract: Chronic hepatitis C is a relevant public health issue, and has been under investigation through several clinical trials, especially regarding new therapies. However, the Brazilian population has been poorly represented in the studies. The first-generation direct-acting antiviral agents (DAAs) for chronic hepatitis C genotype 1 treatment (boceprevir and telaprevir) was approved by the public health system in Brazil in 2012. Due to the recent inclusion of these therapies, the Brazilian Ministry of Health recommended the conduction of an observational study to evaluate the safety and effectiveness of telaprevir and boceprevir in Brazil. Therefore, the aim of the present study was to evaluate the effectiveness, safety and cost-effectiveness of the new therapies from the perspective of the Brazilian public health system. Hence, a prospective longitudinal study was conducted in five reference centers in the State of Paraná between 2014 and 2016. Data regarding effectiveness and safety were collected from patients' medical records receiving boceprevir or telaprevir. Effectiveness outcomes included rapid virological response (RVR) and sustained virological response (SVR), and safety results included the adverse events reported on the medical records. One hundred and twenty one patients were included in the observational study (19 in the boceprevir group and 102 the in telaprevir group), of which 67 completed the treatment (eight in the boceprevir group and 59 in the telaprevir group). Of the 121 patients included in the intention-to-treat analysis, 26.3% achieved RVR in the boceprevir group and 84.3% in the telaprevir group (p <0.001). SVR was achieved by 47.4% and by 61.8% in the boceprevir and telaprevir groups, respectively (p = 0.424). Nausea was the most frequent adverse event with boceprevir and pruritus with telaprevir. Regarding tolerability, 57.9% of the patients discontinued the treatment with boceprevir and 42.2% with telaprevir. To evaluate the cost-effectiveness of regimens with boceprevir, with telaprevir and standard dual therapy (peguilated interferon with ribavirin) for chronic hepatitis C treatment, a Markov model was developed simulating the natural course of the disease in patients infected with the genotype 1 of the virus. Long-term outcomes included remaining life expectancy in life years (LYs), quality-adjusted life years (QALYs) and incremental cost-effectiveness ratio (ICER). For all evaluated outcomes the regimen with boceprevir was dominated by the regimen with telaprevir, which was the most effective among the evaluated treatments, with a cost of R$ 63.642,00. ICERs were R$ 120.693/SVR, R$ 47.718/LY and R$ 33.464/QALY for triple therapy with telaprevir versus standard dual therapy. Data from the cross-sectional study, which was conducted in Curitiba with patients attended between 2013 and 2016 (n=452), revealed a higher frequency of infection by the genotypes 1 and 3. Moreover, a higher prevalence of the F4 fibrosis stage was observed in the evaluated patients. Indirect comparison of first and second-generation DAAs through network meta-analysis exhibited the superiority of daclatasvir over the other evaluated therapies. Keywords: Antiviral agents. Hepatitis C. Hepatitis C - Pharmacological treatment.

Orientador : Prof. Dr. Roberto Pontarolo / Coorientadora : Drª. Inajara Rotta / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 22/09/2017 / Inclui referências : f. 83-93 / Resumo: A hepatite viral C crônica é causada pelo vírus da hepatite C (VHC) e os indivíduos são considerados curados após atingir a resposta virológica sustentada (RVS). Porém, os elevados custos dificultam o acesso às terapias disponíveis. Dados os recursos limitados, a inserção de novas terapias deve ter sua viabilidade farmacoeconômica avaliada, para que a alocação de recursos seja eficiente. Portanto, o objetivo deste trabalho foi realizar análise de custo-efetividade das terapias preconizadas pelo Protocolo Clínico e Diretrizes Terapêuticas de 2015 no tratamento precoce de pacientes com hepatite C crônica sob a perspectiva do SUS. Esta análise utilizou um modelo de Markov para comparar o momento de inserção da terapia, comparando-se o tratamento a partir de F0, F1 ou F2 com o preconizado pelo PCDT de 2015, apenas F3 e F4. Como há diferentes genótipos (GT) do vírus e para alguns deles mais de uma terapia descrita, foram realizadas análises de subgrupos. O horizonte temporal foi a expectativa de vida do paciente, e a taxa de desconto foi determinada em 5%. A perspectiva do trabalho foi a do SUS, assim, foram mensurados apenas os custos diretos médicos. Como medida finalística foram utilizados os anos de vida ajustados por qualidade (AVAQ), estimados com base nas melhores evidências disponíveis. Os dados de eficácia foram empregados como probabilidade de transição entre os estágios de fibrose e a RVS e as demais probabilidades também foram estimadas com base na literatura. Foi assumido que apenas pacientes monoinfectados pelo VHC fariam parte do modelo, apenas os que atingissem a RVS a partir de F3 ou F4 poderiam continuar progredindo no modelo e após atingida a RVS eles não poderiam ser reinfectados. A análise demonstrou que a inserção precoce do tratamento é custo-efetiva, considerando limiar implícito sugerido para o Brasil para todas as terapias: sofosbuvir e daclatasvir para os genótipos 1, 3 e 4; sosfosbuvir e ribavirina para GT2; e sosfosbuvir, peguinterferona e ribavirina (PR) para GT3. E não é custo-efetiva para o tratamento a partir de F0, mas sim a partir de F1 ou F2 para as terapias sofosbuvir e simeprevir para GT1 e daclatasvir e PR para GT4. Porém com diferenças significativas entre as razões custo-efetividade incrementais (RCEI), variando de R$ 8.583/AVAQ a R$ 30.185/AVAQ. Para avaliar a robustez do modelo foram realizadas análises de sensibilidade. A análise determinística univariada demonstrou que as variáveis que mais afetam o modelo estão relacionadas à taxa de desconto dos resultados, ao custo dos medicamentos e aos dados de utilidade. A probabilística (PSA) permitiu quantificar as incertezas, fornecendo melhor evidência para o gestor. As 5000 iterações de cada subgrupo mantiveram-se no quadrante custo-efetivo do plano de custo-efetividade. Assim, pode-se afirmar que o tratamento precoce da hepatite C crônica é custo-efetivo, mas a alteração dos protocolos futuros depende de outras avaliações por parte dos gestores. Palavras-chave: hepatite C crônica, custo-efetividade, tratamento precoce, sofosbuvir, daclatasvir, simeprevir. / Abstratc: Chronic viral hepatitis C is caused by the hepatitis C virus (HCV) and is considered a curable disease, since individuals can achieve sustained virological response (SVR). However, access to the available therapies isn't universal, mainly due to high costs. As much as health resources are limited, pharmacoeconomic assessments that allow better allocation of resources are necessary. Therefore, the objective of this study is to perform a cost-effectiveness analysis of the therapies advocated by the Clinical Protocol and Therapeutic Guidelines of 2015 on early treatment of patients with chronic hepatitis C from the SUS perspective. This cost-effectiveness analysis used a Markov model to compare the moment of insertion of the therapy, comparing the treatment starts at F0, F1 or F2 with treatment according to the protocol, only F3 e F4. As there are different genotypes (GT) of the virus and for some of them more than one described therapy, subgroup analyses were performed. The model has a lifetime horizon, and the discount rate was defined in 5%. Considering the perspective of the work as the public health system, only direct medical costs were measured. As a final measure, quality adjusted life years (QALY) were estimated, based on the best available evidence. Efficacy data were used as a transition probability between the stages of fibrosis and SVR and the other probabilities were also estimated based on the literature. It was assumed that only HCV patients would be part of the model, just those who reached SVR from F3 or F4 could continue to progress in the model after reaching SVR and none of them could be reinfected. The analysis showed that the early insertion of the treatment is cost-effective, considering implicit limit suggested for Brazil for the therapies: sofosbuvir and daclatasvir for genotypes 1, 3 and 4; sosfosbuvir and ribavirina for GT2; sosfosbuvir; and peginterferon and ribavirin (PR) for GT3. And it isn't for treatment starting on F0, but it is when starting on F1 or F2 for the therapies sofosbuvir and simeprevir for GT1 and daclatasvir and PR for GT4. However, there were significant differences between the incremental cost-effectiveness ratios (ICER), ranging from R$ 8.583/AVAQ to R$ 30.185/AVAQ. To assess the robustness of the model, sensitivity analyses were performed. The univariate deterministic analyses showed that the variables that most affect the model are related to the discount rate of the results, the cost of medications and the utility data. The probabilistic (PSA) allowed to quantify the uncertainties, providing better evidence for the manager. The 5000 iterations of each subgroup remained in the cost-effective quadrant of the cost-effectiveness plan. Thus, it can be affirmed that the early treatment of chronic hepatitis C is cost-effective, but the change of future guidelines depends on other evaluations by the managers. Key-words: chronic hepatitis C, cost-effectiveness, early treatment, sofosbuvir, daclatasvir, simeprevir.

Orientador: Jussara Marcondes Machado / Banca: Sueli Aparecida Calvi / Banca: Maria Cassia Jacintho Mendes Correa / Resumo: O vírus da hepatite C é uma das principais causas de doença hepática no mundo inteiro. O estudo histopatológico é de grande importância no prognóstico e indicação de tratamento. A coinfecção com o vírus da hepatite B oculta pode agravar a lesão hepática e diminuir a resposta ao tratamento. As citocinas IL-2, INF, TNF- induzem lesão hepática e fibrose. A IL-10 apresenta atividade antiinflamatória e o TGF- induz o desenvolvimento e depósito de matriz extracelular causando fibrose. Este estudo avaliou, em pacientes com HCC, a presença da hepatite B oculta, a dosagem das citocinas IL-2, INF, TNF , TGF e IL-10, correlacionando com o estágio de fibrose em pacientes tratados e não tratados com interferon, comparando também com indivíduos saudáveis. Foram estudados 55 pacientes com HCC crônica, atendidos na Faculdade de Medicina de Botucatu, excluindo-se pacientes imunossuprimidos e gestantes. O grupo controle foi constituído de 20 indivíduos doadores de sangue. O vírus da hepatite B oculto foi pesquisado por de PCR in house, segundo técnica de Kaneno, com limite de detecção menor que 100 cópias/ml. A dosagem de citocinas foi determinada por método de Elisa. A avaliação da fibrose hepática seguiu aquela proposta pela Sociedade Brasileira de Patologia. Os resultados mostraram predominância do gênero masculino, adulto jovem, 36,4% foram usuários de drogas endovenosas e 41,8% haviam sido hemotransfundidos. Nenhum paciente apresentou coinfecção pelo vírus da hepatite B oculto. Na biópsia hepática predominou fibrose leve ou ausência de fibrose (47,2%). As citocinas analisadas não discriminaram o grau de fibrose nos indivíduos com HCC crônica, mesmo quando separados em pacientes que foram submetidos ao tratamento e pacientes que não receberam o tratamento. Não houve também discriminação das citocinas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Hepatitis C virus is one of the major causes of hepatic diseases worldwide. Histopathological analyses play a leading role in determining disease outcome and treatment. Co-infection with occult Hepatitis B can aggravate liver injury and diminish treatment response. Cytokines such as IL-2, INF and TNF- induce liver injury and fibrosis. IL-10 has an antiinflamatory action and TGF- induces extracellular matrix development and deposition causing fibrosis. In this study, the presence of occult Hepatitis B and the expression of IL-2, INF, TNF , TGF and IL-10 were assessed in HCC patients and correlated with fibrosis stage in patients treated and non-treated with interferon, as well as healthy individuals. A total of 55 patients with chronic HCC seen at Botucatu Medical School were included. Immunosuppressed or pregnant patients were excluded. The control group consisted of 20 blood donors. The occult Hepatitis B virus was detected by in-house PCR according to the technique of Kaneno with a detection limit < 100 clones/ml. Cytokine levels were determined by the Elisa method. Hepatic fibrosis was assessed as proposed by the Brazilian Society of Pathology. The results showed a predominance of male young adults of whom 36.4% had used endovenous drugs and 41.8% had been hemotransfused. No patient showed occult Hepatitis B co-infection. Hepatic biopsy revealed that fibrosis was either absent or mild in most cases (47.2%). The cytokines under study did not correlate with fibrosis stage in individuals with chronic HCC no matter whether they had or not received treatment. In addition, no correlations with cytokine levels were observed when VHC patients were separated into groups of individuals treated and non-treated with interferon . However, cytokine expressions were significantly increased in all cases in comparison with the control group. / Mestre

Orientador: Sidney José Lima Ribeiro / Co-orientador: Marli Leite de Moraes / Banca: Eduardo Maffud Cilli / Banca: Orlando Fatibello Filho / Resumo: Neste trabalho foram investigados a fibroína da seda (silk fibroin, SF) com o peptídeo antigênico da proteína NS5A-1 derivado do vírus da hepatite C (HCV) e nanopartículas de vanadato de ítrio dopadas com európio em filmes nanoestruturados. Dois foram os tópicos abordados: i) interação e organização estrutural do peptídeo com a fibroína. ii) imobilização do peptídeo, da fibroína e nanopartículas em filmes automontados (Layer-by-Layer, LbL), visando estudar a interação específica peptídeo antigênico-anticorpo e a produção de protótipos de imunossensores. As interações fibroína-peptídeo foram estudadas em solução e em filmes LbL pelas técnicas espectroscópicas de dicroísmo circular e luminescência. Os resultados indicaram que há uma mudança conformacional da fibroína em solução para a fibroína em filmes, de aleatória para folha-β, respectivamente, e que o filme de fibroína induz a estrutura secundária do peptídeo que não possui uma conformação bioativa em solução. O crescimento dos filmes LbL foi monitorado por espectroscopia UV-visível, e pôde-se observar um crescimento linear a cada deposição realizada. Além do estudo fundamental das interações a nível molecular, os sistemas foram utilizados para o desenvolvimento de protótipos de imunossensores. A interação peptídeo antigênico-anticorpo foi estudada por medidas de detecção eletroquímica, elétrica e óptica. Para a detecção eletroquímica realizou-se medidas de voltametria cíclica, indicando uma diminuição na corrente quando em presença dos anticorpos anti-HCV e testes em amostras reais soropositivas para o vírus, que indicaram uma maior densidade de elétrons nos voltamogramas referentes às amostras infectadas. A detecção elétrica foi analisada por espectroscopia de impedância elétrica, e observou-se que há um aumento no sinal da capacitância e das perdas dielétricas de acordo com o aumento da concentração... / Abstract: The present study investigated the silk fibroin (SF) with the antigenic peptide of the NS5A-1 protein of the hepatitis C virus (HCV) and nanoparticles of yttrium vanadate doped with europium immobilized on nanostructured films. Two main topics were explored: i) interaction and structural organization of the peptide with fibroin. ii) immobilization of the peptide together with fibroin and nanoparticles in LbL films (Layer- by- Layer), in order to study the specific interaction peptide antigen-antibody and production of prototype immunosensors. The fibroin-peptide interactions were studied in solution and in LbL films by spectroscopic techniques of circular dichroism and luminescence. The results indicate that there is a conformational change of fibroin in the fibroin solution in film, sheet to random coil-B, respectively, and that the fibroin film induces the secondary structure of the peptide does not possess a bioactive conformation in solution. The growth of the LbL films was monitored by UV-visible spectroscopy, and could observe a linear growth every deposit made. Besides the fundamental study of interactions at the molecular level, the systems were used for the development of prototype immunosensors. The peptide antigen-antibody interaction was studied by electrochemical, electrical and optical detection measures. For electrochemical detection, were made cyclic voltammetry measurements indicating a decrease in current when in the presence of anti-HCV antibodies, and were made tests on real samples seropositive for the virus, which indicated a higher density of electrons in voltammograms respect to infected samples. The electrical detection was analyzed by electrical impedance spectroscopy, and it was observed that there is an increase in the signal of capacitance and the dielectric losses in accordance with the increase in antibody concentration. This increase in signal is higher for films containing smaller number of bilayers and... / Mestre

Resumo: O fluxograma de investigação laboratorial da hepatite C, proposto pelo Ministério da Saúde, envolve a utilização de metodologias que pesquisam anticorpos anti-VHC como testes de triagem para a infecção, sendo que os testes moleculares vêm sendo utilizados como confirmatórios mediante sorologia positiva. Neste fluxo, algumas amostras podem apresentar, nos testes de triagem, resultados reagentes próximos ao limiar de reatividade e estes resultados muitas vezes não se confirmam quando se utilizam outras metodologias. Estes resultados falso-positivos podem gerar descarte de bolsas de sangue e conseqüências psicológicas negativas para doadores e pacientes. Assim, o objetivo deste estudo foi estabelecer valores de corte entre resultados reagentes e fracamente reagentes no diagnóstico laboratorial da hepatite C pelo Imunoensaio Quimioluminescente de Micropartículas (CMIA), e avaliar estes resultados com outras metodologias. Foram analisados 2535 resultados anti- VHC por CMIA para a seleção das amostras reagentes independente do valor da razão S/CO. Destas, apenas as amostras com a razão S/CO entre 1,11 e 6,99 por CMIA foram testadas por MEIA, ELISA e RT-PCR. Das 2535 amostras, 100 (3,95%) foram reagentes pela CMIA e destas, a menor freqüência foi observada em amostras com a razão S/CO entre 6,00 e 6,99. No mesmo sentido, a detecção do RNA do VHC foi crescente a partir da razão S/CO 7,00 sugerindo uma maior ocorrência de resultados falso-positivos em amostras com valor de S/CO inferior a 7,00. No período do estudo, 56 amostras apresentaram-se reagentes por CMIA com razão S/CO entre 1,11 e 6,99 e 49 (87,5%) delas foram reagentes por MEIA, das quais 25 (44,6%) também foram reagentes por ELISA. Apenas uma amostra apresentou RNA do VHC detectável por RT-PCR. Esses resultados sugerem que os resultados reagentes pelos métodos de triagem com valores próximos ao limiar de ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Hepatitis C laboratorial investigation, proposed by Ministry of Health, includes anti-HCV tests for screening and molecular methodologies for confirmation of the positive results. Some time the samples can present reagents results near to the cut off and, these results, a lot of times, are not confirmed by other methodologies. False positives results can lead blood units discard and negative psychological consequences for donors and patients. The goal of this study was establish a threshold among resulted reagents and weakly reagents in the hepatitis C laboratorial diagnosis by CMIA, and to evaluate these results with other methodologies. In this study were analyzed 2535 resulted anti-VHC by CMIA for the selection of the reagents samples independent of the S/CO obtained. The samples with S/CO between 1.11 and 6.99 by CMIA were tested by MEIA, ELISA and RT-PCR. From 2535 samples, 100 (3.95%) were reagents for CMIA and the lower frequency it was observed in samples with S/CO between 6.00 and 6.99. In the same sense, the HCV RNA detection was confirmed in samples with S/CO upper than 7.00; suggesting an occurrence of false-positive results in samples with S/CO lower to 7.00. In study period 56 samples were reagents by CMIA with S/CO between 1.11 and 6.99 and 49 (87.5%) were reagents by MEIA, which 25 (44.6%) were also reagents by ELISA. One sample presented HCV RNA detected by RTPCR. Those results suggest that the reagents results by the screening tests, with S/CO near to cut off should be analyzed with precaution and different of the reagents results with upper S/CO / Orientador: Maria Inês de Moura Campos Pardini / Coorientador: Rejane Maria Tommasini Grotto / Banca: Giovanni Faria Silva / Banca: Neiva Sellan Lopes Gonçales / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T02:02:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000458596-Texto+Completo-0.pdf: 1378457 bytes, checksum: a9dd142726a70a37208a48023c45293e (MD5) Previous issue date: 2014 / The pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is not completely elucidated. There is increasing evidence that oxidative stress is involved in this process. The objective of the present study was to evaluate the role of plasma markers of oxidative stress in morbidly obese patients with NAFLD. Forty-three morbidly obese patients were subjected to Roux-en-Y gastric bypass with a liver biopsy obtained during surgery. Plasma oxidative stress was measured by thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and superoxide dismutase (SOD) assays. Histologic analysis showed NASH in 65. 1% of patients and simple steatosis in 34. 9%. The plasma TBARS levels were significantly greater in the patients with NASH when compared to those with simple steatosis [1. 65 (1. 43-1. 82) nM/ml vs 1. 12 (1. 04-1. 42) nM/ml; P=0. 002]. There was a correlation of TBARS with NAS score (rs = 0. 470; P = 0. 001). Among the patients with NASH and simple steatosis, there was no difference in plasma antioxidant status measured by SOD. Our findings suggest that plasma lipid peroxidation is associated with the severity of NAFLD in the morbidly obese patients. / A patogênese da doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) não está completamente esclarecida. Existem evidências cada vez maiores de que o estresse oxidativo participa desse processo. O objetivo do presente estudo é avaliar o papel de marcadores plasmáticos de estresse oxidativo em obesos mórbidos com DHGNA. Foram incluídos 43 obesos mórbidos submetidos ao bypass gástrico em Y-de-Roux, com biópsia hepática obtida durante a cirurgia. O estresse oxidativo plasmático foi mensurado por meio das substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e ao superóxido dismutase (SOD). A análise histológica evidenciou NASH em 65,1% dos pacientes e esteatose simples em 34,9%. Os níveis plasmáticos de TBARS foram significativamente maiores nos pacientes com NASH, quando comparados aos com esteatose simples [1,65 (1,43-1,82) nM/ml vs 1,12 (1,04-1,42) nM/ml; P=0,002]. Houve correlação da TBARS com o NAS score (rs= 0,470; P=0,001). Entre os pacientes com NASH e esteatose simples, não houve diferença no status antioxidante plasmático medido pela SOD. Nossos achados sugerem que a lipoperoxidação plasmática está associada com a gravidade da DHGNA em obesos mórbidos.

Orientador: Giovanni Faria Silva / Resumo: Introdução. O virus da Hepatite C é um ads principais causa de cirrosehepática e carcinoma hepatocelular. O objetivo do tratamento com InterferonPeguilado e ribavirina é alcançar a cura. Não obstante, ainda não há metodologiapadrã-ouro para a valiação da composição corporal desses pacientes. O obejtivodesse estudo foi avaliar a associação dos valores pré-tratamento do Ângulo de Fase,e sua variação, com a resposta virológica na semana 24 e resposta virológicasustentada no tratamento com Interferon Peguilado e Ribavirina. Método. Foirealizado um estudo prospectivo, por 6 meses, de Abril de 2010 a Junho de 2013.Bioimpedância Elétrica, tetrapolar, unifrequência foi realizada no pré-tratamentoe na semana 24 de tratamento. Exames bioquímicos e biópsia hepática foramcoletados dos prontuários médicos. Resultados. Foram avaliados 87 pacientes comidade média de 49.78 ± 10.51,47.12% do sexo masculino. A media do ângulo defase foi de 6.56 ± 0.78°. No total, 49 (56.32%) obtiveram resposta virológica nasemana 24 de tratamento e 43 (49.4%) atingiram resposta virológica sustentada.Em relação aos pacientes genótipo-1 51% obtiveram resposta virológica na semana24, 24, 46% resposta virológica sustentada e 54% foram não-respondedores. Napopulação estudada, 38.88% dos pacientes virgens de tratamento e do genótipo-1alcançaram resposta virológica sustentada,36.84% dos pacientes emretratamento obtiveram resposta virológica sustentada. Quanto aos pacientes nãogenót... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Background. Hepatitis C virus is one of the major causes of liver chirrosis and hepatocellular carcinoma. The objective of the treatment with Pegylated Interferon and Ribavirin was to achieve the cure of the virus. So far, we have no gold-standard methodology to assess the body composition of these patients. The aim of our study was to evaluate the association of baseline Phase Angle (PhA), and it’s variation, with virological response treatment week 24 with Pegylated Interferon and Ribavirin and sustained virological response. Methods. Patients were prospectively evaluated for 6 months, from April 2010 to June 2013. A tetrapolar single-frequency bioimpedance were performed at baseline and at treatment week 24. Biochemical and liver biopsy data were collected from the patient´s medical chart. Results. A total of 87 patients with mean age of 49.78 ± 10.51 y were studied ,47.12% were male. The phase angle mean was 6.56 ± 0.78°.A total of 49 (56.32%) of them achieved virological response at treatement week 24 and 43 (49.4%) reached sustained virological response. Considering the genotype- 1 population 51% achieved virological response at tw 24, 46% SVR and 54% were non-responders. Among the population studied, 38.88% of näive genotype-1 patients achieved sustained virological response, 36.84% of previous NR achieved sustained virological resposnse. Regarding non gentotype-1 population 57.14% achieved SVR and among them 70% were naive. Considering sustained virological response, ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

A ciclosporina (CsA), a despeito da recente introdução de novas drogas imunossupressoras, permanece como a pedra angular da terapia antirejeição do receptor de enxerto renal. No Brasil, 30% dos pacientes em lista de espera para transplante renal são anti-VHC+, e observações prévias do nosso grupo sugerem uma farmacocinética da CsA alterada nesses pacientes. Com o objetivo de avaliar esta hipótese, dois estudos paralelos foram feitos: um estudo pré-transplante com 22 pacientes em hemodiálise aguardando transplante, 11 anti-VHC+ (ELISA3), 7 dos quais PCR+, e 11 anti-VHC-, que receberam uma dose única oral de 8 mg/kg de ciclosporina em microemulsão (CsA-ME); e um estudo no 15º dia pós-transplante, com 24 receptores consecutivos, 10 ELISA+ (6 PCR+) e 14 ELISA-, que receberam a dose oral de CsA em microemulsão indicada pela equipe assistente. Os parâmetros farmacocinéticos foram calculados a partir de 13 dosagens (tempo 0-12 h pós-dose) feitas por fluorimetria polarizada com anticorpos monoclonais (Abbot Laboratories, Illinois). Aqueles HbsAg+, com transaminases elevadas, diabéticos ou usando drogas que tivessem interação farmacocinética com a CsA foram excluídos. A análise estatística foi feita pelo teste t e Mann-Whitney. As variáveis demográficas com conhecida influência sobre a farmacocinética da CsA foram similares nos dois grupos. No estudo pré-transplante, , a Cmáx foi 40% maior, a ASC0-12 42% maior (p<0,05) e a Cmin 56% maior entre os pacientes ELISA+ comparados aos ELISA-. Essas diferenças foram acentuadas comparando o subgrupo PCR+ com os pacientes VHC- (Cmáx 58% maior -p=0,05-, ASC0-12 69% maior -p<0,01-, e Cmin 91% maior -p<0,01-). No estudo pós-transplante a Cmáx, a ASC0-12/dose e a Cmin não diferiram estatisticamente entre os grupo anti-VHC+ e anti-VHC- (21%, 23% e 2% maior, respectivamente). Ao avaliar apenas os pacientes PCR+, a Cmáx foi 50% maior (p<0,01) e a ASC0-12/dose 45% maior (p<0,05) do que o grupo ELISA-. O nível de vale, acompanhado pelos 12 meses pós-transplante, foi sempre superior entre os pacientes ELISA+, a despeito de doses menores de CsA, atingindo significância aos seis meses. Concluímos que os pacientes anti-VHC+, principalmente aqueles com viremia (PCR+), têm a farmacocinética da CsA microemulsão alterada, com níveis de pico e ASC0-12/dose maiores que os controles anti-VHC-. / Cyclosporine (CsA), despite recent introduction of new immunosuppressive drugs, still remains the cornerstone of kidney transplant recipient immunosuppression. In Brazil, 30% of patients waiting for kidney transplantation are anti-HCV+, and previous observations of our group suggest an altered CsA pharmacokinetics in these patients. In order to evaluate that, two parallel studies were done: a pre-transplant study with 22 dialysis patients waiting for transplantation, 11 anti-HCV+ (ELISA third generation), 7 of them PCR+, and 11 anti-HCV-, which received a 8 mg/kg single oral dose of CsA microemulsion (CsAME); and a 15th day post-transplant study with 24 consecutive recipients, 10 ELISA+ (6 PCR+) and 14 ELISA-, which received the CsA microemulsion oral dose indicated by the assistants. Pharmacokinetics parameters were calculated from 13 dosages (time 0-12 hours post-dose) performed by fluorescence polarization immunoassay with monoclonal antibodies (Abbot Laboratories, Illinois). Those patients HbsAg+, with elevated transaminases, diabetics or using drugs interacting with CsA pharmacokinetics were excluded. Statistical analysis was done by t test and Mann-Whitney. Demographic variables with already known CsA pharmacokinetics influences were similar in both groups. In the pre-transplant study, Cmax was 40% higher, AUC0-12 42% higher (p< 0,05) and Cmin 56% higher for HCV+ patients in comparison to HCV- ones. These differences were accentuated comparing PCR+ with HCV- patients (Cmax 58% higher - p= 0,05 -, AUC0-12 69% higher - p< 0,01 -, and Cmin 91% higher- p< 0,01). In the post-transplant study Cmax was 21% higher, AUC0-12/dose 23% higher and Cmin 2% higher for HCV+ patients. When evaluating only PCR+ patients, Cmax was 50% higher (p< 0,01) and AUC0-12/dose 45% higher (p< 0,05) than ELISA- group. Trough levels, followed for 12 months PO, remained higher in HCV+ patients, despite small doses of CsA. We conclude that anti-HCV+ patients, mainly those with viremia (PCR+), have altered CsA microemulsion pharmacokinetics, with higher peak levels and drug exposure than control patients anti-VHC-.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2007. / Submitted by Fernanda Weschenfelder (nandaweschenfelder@gmail.com) on 2009-11-27T12:51:09Z No. of bitstreams: 1 2007_ClaudinerPereiradeOliveira.PDF: 1257306 bytes, checksum: 80ba64f9f84780f82bd656c86c09fada (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2009-11-27T13:28:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_ClaudinerPereiradeOliveira.PDF: 1257306 bytes, checksum: 80ba64f9f84780f82bd656c86c09fada (MD5) / Made available in DSpace on 2009-11-27T13:28:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_ClaudinerPereiradeOliveira.PDF: 1257306 bytes, checksum: 80ba64f9f84780f82bd656c86c09fada (MD5) Previous issue date: 2007 / As infecções pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV-1) e pelo vírus da hepatite C (HCV) são consideradas problemas de saúde pública com cerca de 40 milhões de pessoas infectadas com o HIV-1 e cerca de 170 milhões com HCV no mundo. A co-infecção HIV-1/HCV é comum em indivíduos expostos a vias de transmissão percutânea e a hepatite C tem emergido como a principal causa de morte em pacientes HIV-1 soropositivos, devido à alta prevalência do HCV nessa população. O HCV pertence à família Flaviviridae, gênero Hepacivirus, e é classificado em 6 genótipos e múltiplos subtipos. Diferenças na distribuição genotípica são observadas em diferentes áreas do mundo e em um mesmo país. Alguns genótipos do HCV parecem estar relacionados a uma melhor resposta virológica sustentada após o tratamento, como os genótipos 2 e 3, que apresentam melhor resposta do que indivíduos infectados com os genótipos 1 e 4. Existem poucos dados sobre populações de co-infectados com HIV-1/HCV, a prevalência dos genótipos é relatada para as infecções separadamente nas diferentes populações. Assim, esse trabalho teve como objetivo caracterizar a prevalência dos genótipos e subtipos do HCV na população de co-infectados com HIV-1/HCV no Distrito Federal e entorno. Para isso foram analisadas 45 amostras de indivíduos co-infectados com HIV-1 e anti-HCV positivos por meio de amplificação por PCR das regiões genômicas 5‟UTR e NS5B do HCV seguida de seqüenciamento e análise filogenética. O genótipo 1 foi o mais prevalente (81%), seguido dos genótipos 3 (10%), 2 (6%) e 4 (3%). Esse resultado está de acordo com relatos de outros estudos da região Centro-Oeste, onde existe maior prevalência do genótipo 1. Os genótipos 2 e 4, raros no Brasil, foram descritos pela primeira vez na população HCV positiva do Distrito Federal (DF). A concordância entre os resultados obtidos por meio da análise de homologia das seqüências pelo programa HCV-BLAST para as regiões 5‟UTR e NS5B foi de 97% para os genótipos e 90% para os subtipos, corroborando o descrito na literatura sobre a necessidade da análise de mais de uma região para a correta determinação do subtipo. A análise filogenética das seqüências definiu os genótipos e subtipos divergentes. A presença de genótipos 1, 2, 3 e 4 do HCV na população de co-infectados com HIV-1 atendidos no DF indica a importância da genotipagem nessa população uma vez que esses genótipos têm importância clínica na predição da resposta ao tratamento antiviral, sendo o HCV-1 o que responde mal ao tratamento ao tratamento. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Human immunodeficiency virus (HIV-1) and Hepatitis C virus (HCV) are considered problems of public health with about 40 millions infected by HIV-1 and 170 millions infected by HCV worldwide. The co-infection HIV-1/HCV is common in individuals exposed to percutaneous pathways and the hepatitis C has been emerging as the main cause of death in HIV-1 positive individuals due the high prevalence of HCV in this population. The HCV is classified into 6 genotypes and several subtypes. Differences in the genotypic distribution are observed in different areas worldwide and within a country. Some HCV genotypes appear to be related to a better virological response after treatment, as the genotypes 2 and 3 for example, that show better response than individuals infected with genotypes 1 and 4. There is little information about co-infected HIV-1/HCV population; the genotype prevalence is reported to the infections separately. Thus, the aim of this study was to characterize the HCV genotypes and subtypes prevalence in the co-infected HIV-1/HCV population of Federal District. Forty-five samples from co-infected patients were analyzed by PCR amplification of 5‟UTR and NS5B genomic sequences followed by automatic sequencing and phylogenetic analysis. The HCV genotype 1 was the most prevalent (81%), followed by genotype 3 (10%), 2 (6%) and 4 (3%). This result is in concordance with reports from other studies from Central West region of Brazil, where there is a major prevalence of genotype 1. The genotypes 2 and 4, rare in Brazil, were described for the first time in the HCV positive population of Federal District. The agreement between the results obtained by the analysis of the sequences homology by the software HCV-BLAST to the regions 5‟UTR and NS5B was of 97% for genotypes and of 90% for subtypes, corroborating with the described in literature as to the need to the analyze more than one genomic region in order to achieve correct subtype determination. The phylogenetic analysis defined the diverging genotypes and subtypes. The presence of the genotypes 1, 2, 3, and 4 in the co-infected HIV-1/HCV population attended in the Federal District indicates the importance of genotyping in this population once these genotypes have clinical importance in the prediction of the response to the antiviral treatment.