The viral family Herpesviridae consists of large double stranded DNA viruses including eight species that infect humans with varying pathology from benign rashes to cancerous cell transformation. From three subfamilies, alpha-, beta- and gammaherpes, the alphaherpes contains the genera iltovirus, mardivirus, varicellovirus and simplex, two of which, the human simplex viruses I and 2 (HSV) induce life-long infections that have appeared to have coevolved with their hosts from the origins of our species. Unique features of the simplex genus are latency, tropism in dorsal root ganglia neurons, extraordinary high GC content ranging from 65 to 77%, and nucleosome formation of their genomes within the host's nucleus without integration. Reviewing the basic molecular and genetic characteristics of herpes simplex will introduced in Chapter 1, followed by the introduction of a newly sequenced, de novo assembled and predicatively annotated herpes simplex virus, Leporid Herpes Virus-4 (LHV4). Isolated from a virulent outbreak in domesticated rabbits, LHV4 has the smallest reported simplex virus to date at roughly 125,600 base pairs and presents similar pathology seen in rabbit models infected with HSV. Comparative genomics revealed a high degree of sequence similarity and genome synteny between LHV4 and other simplex viruses. Four genes were not computationally predicted in our annotation and may be absent in the LHV4 genome. The absent proteins correspond to: UL56, ICP34.5, US5 and US12 and have postulated roles in membrane trafficking, neurovirulence, apoptotic control and MHC I presentation respectively. The solved genome structure leads to how this compacted genome functions with the noted absences to produce a similar pathology in rabbits to that of HSV and whether other biological correlates will continue to be found in in vitro and in vivo infection. The inverted repeat regions (IR), duplicated and inverted to simplex virus' two larger blocks of protein-coding regions are described in Chapter 3. The similarities and differences in critical genes from the IR that balance latency and replicative viral cycles are compared. A two-fold reduction in IR content indicates the ability for a simplex virus to maintain infectivity despite this large truncation. The appendix describes the eukaryotic phylogeny of two initiating proteins of the mismatch repair (MMR) pathway. MMR proteins are present in the replicative foci of productive herpes virus infection and this analysis may indicate adaptive pressures involved in both genomic fidelity and host tropism. The emerging era of state-of-the-art genome sequencing and computational power advances this newly characterized herpes virus, along with its model host organism, as excellent candidates for systems interaction, and experimental biology. / Graduation date: 2012

Thesis (Ph. D.)--University of Sydney, 2005. / Title from title screen (viewed 20 May 2008). Submitted in fulfilment of the requirements for the degree of Doctor of Philosophy to the Faculty of Medicine. Degree awarded 2005; thesis originally submitted 2004, corrected version submitted April 2005. Includes bibliographical references. Also available in print form.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T02:40:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 289417.pdf: 1893898 bytes, checksum: 17201c8d5b781dc68c78399d88568a31 (MD5) / Os cardenolídeos pertencem a um grupo de compostos naturais, que inibem a bomba de Na+/K+ (NKATPase). Tradicionalmente, eles têm sido utilizados para o tratamento da insuficiência cardíaca congestiva e de arritmias atriais, tais como a digoxina, a digitoxina e a ouabaína. Trabalhos recentes descreveram a potencial atividade anti-herpética de alguns cardenolídeos. Os Herpes Simplex Virus tipos 1 e 2 (HSV-1 e HSV-2) são responsáveis por infecções nas regiões oral, ocular e genital e, além disso, estes vírus podem estabelecer infecções persistentes (latência) no sistema nervoso. O tratamento é realizado com análogos de nucleosídeos, como o aciclovir, efetivo na maioria dos casos; entretanto, a resistência a esses fármacos tem aumentado devido ao seu uso prolongado, principalmente em pacientes imunocomprometidos. Inicialmente, a citotoxicidade (CC50) e a atividade anti-HSV foram avaliadas através do ensaio colorimétrico do MTT e do ensaio de inibição da formação das placas de lise (CI50), respectivamente. De acordo com os resultados obtidos através da triagem anti-HSV de 65 cardenolídeos e derivados, dois compostos (4 e 12) foram selecionados devido aos seus promissores índices de seletividade (IS=CC50/CI50) de 2.107 e 645 (HSV-1 cepa KOS); 4.566 e 792 (HSV-1 cepa 29-R) e 6.250 e 1.238 (HSV-2 cepa 333). O mecanismo de ação foi avaliado através de uma sequência de ensaios, que visaram avaliar a possível interferência destes compostos nas diversas etapas do ciclo de replicação viral. Na avaliação do efeito do tempo de adição e remoção, estes compostos inibiram significativamente a replicação viral, quando adicionados até 12 h pós-infecção, ou removidos após este período de tempo. Esses compostos não apresentaram atividade virucida, nem inibiram a entrada viral dos vírus nas células (adsorção e penetração). Entretanto, eles mantiveram sua atividade anti-HSV, mesmo no maior MOI testado (0,4), que foi 1000X maior que o MOI (0,0004) utilizado para a triagem antiviral. As amostras também inibiram a dispersão viral intercelular e interferiram na liberação viral, apresentando perfis concentração-dependentes. Os níveis de RNAm dos genes herpéticos não foram alterados pelo tratamento com os cardenolídeos nas condições experimentais testadas. Entretanto, a análise da expressão proteica viral mostrou que os compostos inibiram a expressão das proteínas ? (ICP27), ? (UL42) e ? (gB and gD), em diferentes intensidades. A avaliação da atividade anti-ATPásica demonstrou que esses cardenolídeos reduziram esta atividade enzimática, sugerindo que uma alteração do gradiente eletroquímico celular pode estar envolvida no mecanismo de inibição da replicação viral.

Ocorrências comuns de infecções virais graves, aparecimento de cepas resistentes e um limitado número de quimioterápicos antivirais disponíveis mostram a necessidade da busca por novas substâncias ativas como antivirais. Muitas substâncias derivadas de plantas são candidatas ao estudo do seu potencial na terapia sistêmica e/ou profilaxia de herpes simplex virus 1 (HSV-1). Dentre as plantas com atividade antiviral, destacam-se as do gênero Baccharis. O objetivo geral do trabalho foi o estudo da composição química e avaliação da atividade antiviral das folhas de Baccharis anomala D.C. através de fracionamento bioguiado. Utilizando precipitação com etanol e fracionamento por permeação molecular foi possível separar os constituintes químicos ativos contra o vírus HSV-1 presentes no extrato aquoso de Baccharis anomala. Os testes de prospecção de constituintes químicos indicaram a presença de taninos, catequinas e saponinas no extrato aquoso da espécie. Através da análise cromatográfica foi possível detectar a presença de compostos fenólicos, utilizando-se coloração com cloreto férrico e reagente natural. Em relação à atividade antiviral, a fração ativa denominada AQ PPT FR 4-5 apresentou pronunciada atividade antiviral, inibindo a replicação viral em 100 % nas concentrações de 1,25, 0,625, 0,312 e 0,156 mg/mL, contra as cepas ATCC-VR733 e Aciclovir-resistente 29-R do HSV-1. Em relação ao mecanismo de ação, observou-se atividade virucida da fração AQ PPT FR 4-5. Estes resultados são muito importantes, pois, de acordo com a literatura, ainda não foram relatados compostos com atividade virucida úteis clinicamente para o tratamento de infecções por HSV-1. Conclui-se, portanto, que Baccharis anomala possui potente atividade antiviral contra o vírus HSV-1 e é promissora para estudos posteriores que visem ao isolamento, identificação e estudo do mecanismo de ação antiviral de compostos ativos da espécie, considerando a emergência de cepas resistentes e a necessidade de compostos com novos mecanismos de ação. / Common occurrences of severe viral infections, emergence of resistant strains and a limited number of available antiviral chemotherapeutics show the need to search for new active substances as antiviral. Many compounds derived from plants are candidates for the study of their potential in systemic therapy and/or prophylaxis of herpes simplex virus type 1 (HSV-1). Among the plants with antiviral activity, those from the genus Baccharis are remarkable. The main objective of the work was the study of the chemical composition and evaluation of the antiviral activity of extracts from Baccharis anomala D.C., using bioactivity guided fractionation. Through precipitation with ethanol and fractionation by molecular permeation it was achieved the separation of the active chemical constituents against HSV-1 virus in the aqueous extract of Baccharis anomala. Phytochemical tests indicated the presence of tannins, catechins and saponins in the aqueous extract. By thin layer chromatography it was detected the presence of phenolic compounds using ferric chloride and natural reagent. Concerning the antiviral activity, the active fraction named AQ PPT FR 4-5 showed pronounced antiviral activity, represented by 100 % inhibition of viral replication at concentrations of 1.25, 0.625, 0.312 and 0.156 mg/mL, against the strains ATCC-VR733 and Acyclovir-resistant 29-R of HSV-1 virus. Regarding the mechanism of action, virucidal activity on the fraction AQ PPT FR 4-5 was detected, which is also very important because, as far as we know, compounds with virucidal activity for clinical use in the treatment of HSV-1 infections were not reported yet. In conclusion, Baccharis anomala displayed pronounced antiviral activity against HSV-1 virus and it is promising for further studies aimed to the isolation, identification and mechanism of action of antiviral active compounds of the species, considering the emergence of resistant strains and the need for compounds with new mechanisms of action.

Made available in DSpace on 2015-10-06T13:03:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-09-03. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:18:21Z : No. of bitstreams: 1 000819068.pdf: 952868 bytes, checksum: 7410b5526acec730446d60283aed0de1 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente estudo buscou detectar o herpesvirus felino tipo 1 (HVF-1) em fragmentos de conjuntiva de uma população de gatos pela técnica de PCR em tempo real. Além disso, procurou-se associar estes resultados aos sinais oculares verificados nestes animais. Para isso, foram utilizados 70 gatos, que conviviam em contato direto, provenientes de uma residência da cidade de Araçatuba, SP. Por meio de PCR em tempo real, foi detectado DNA de HVF-1 em 78,1% (25/32) dos gatos com ao menos um sinal ocular e em 26,3% (10/38) dos assintomáticos, totalizando uma prevalência de 50% (35/70) na amostra global. Nos animais com sinais de conjuntivite, em 60% (21/35) dos gatos positivos havia ao menos um destes sinais e nenhum destes nos 40% (14/35) restantes. Nos gatos com sinais de ceratite, em 49% (17/35) dos positivos havia ao menos um destes sinais e nenhum deste nos 51% (18/35) restantes. Foi detectada a presença de HVF-1 em todos (17/100%) os gatos com defeito epitelial corneal. Houve associação significativa entre a presença de ao menos um sinal ocular, ao menos um sinal de conjuntivite e de ceratite com os resultados do PCR. Em relação a cada sinal ocular, somente o defeito epitelial corneal e o blefarospasmo tiveram associação significativa com estes resultados e também estavam associados entre si, sugerindo que, nos gatos com sinais de ceratoconjuntivite, o defeito epitelial corneal pode ser um fator de influência ao surgimento do blefarospasmo. A elevada prevalência da infecção ocular por HVF-1 encontrada nos animais com sinais oculares sugere o agente como possível causador destas lesões / This study aimed to detect feline herpesvirus type 1 (FHV-1) in the conjunctival fragments of a cat population by PCR real-time. In addition, we sought to associate these results to ocular signs observed in these animals. For this, we used 70 cats that lived in direct contact, from a residence from Araçatuba, SP. By means of real-time PCR, DNA was detected FHV-1 in 78.1% (25/32) of cats with at least one ocular sign and 26.3% (10/38) of asymptomatic patients, a total prevalence 50% (35/70) in the sample. In animals with signs of conjunctivitis in 60% (21/35) cats were positive at least one of these signals and none of the 40% (14/35) remaining. In cats with signs of keratitis in 49% (17/35) were positive from at least one of the signals and none of the 51% (18/35) remaining. We have detected the presence of FHV-1 at all (17/100%) cats with corneal epithelial defect. There was a significant association between the presence of at least one eye sign, at least a sign of conjunctivitis and keratitis with PCR results. For each ocular sign, only the corneal epithelial defect and blepharospasm were significantly associated with these outcomes and also were associated with each other, suggesting that, in cats with signs of keratitis, corneal epithelial defect may be a factor influencing the emergence of blepharospasm. The high prevalence of ocular infection by FHV-1 found in animals with ocular signs suggested as a possible causative agent of these injuries

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-20. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:25:55Z : No. of bitstreams: 1 000837195_20150920.pdf: 65943 bytes, checksum: 3d08551c973f38fe482173b18c355947 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-09-21T13:18:54Z: 000837195_20150920.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-21T13:19:51Z : No. of bitstreams: 1 000837195.pdf: 1333023 bytes, checksum: 03e8d0fbb6f677497c15b782303ed41d (MD5) / O herpesvírus caprino tipo 1 (CpHV-1) e o herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) acarretam consideráveis perdas econômicas para o produtor, uma vez que determinam transtornos reprodutivos na espécie hospedeira. A escassez de estudos sobre esses vírus em plantéis caprinos brasileiros direcionaram o presente estudo que objetivou verificar se indícios da infecção por esses vírus influenciam a eficiência reprodutiva, por meio de uma análise precedente dos parâmetros reprodutivos descritos na escrituração zootécnica apresentados por animais positivos e negativos no exame pontual de um rebanho caprino com histórico de problemas reprodutivos no município de Monte Santo de Minas (MG), além de proceder pesquisa de ocorrência de anticorpos neutralizantes contra o BoHV-1 e o CpHV-1 pelo teste de virusneutralização (VN) em rebanhos caprinos em três ambientes diferentes: estado de São Paulo, Zona da Mata Mineira (MG) e uma propriedade no município de Monte Santo de Minas (MG). Assim, verificou-se que nos rebanhos do estado de São Paulo e da Zona da Mata Mineira não havia indícios de circulação viral recente de qualquer das espécies virais estudadas. Por outro lado, no rebanho de Monte Santo de Minas (MG) houve evidências da circulação viral recente especificamente para o CpHV-1, mas não para o BoHV-1. A análise estatística mostrou que houve mais chances dos animais serem positivos para o BoHV-1 no rebanho de Ipiguá (SP), e para o CpHV-1 no rebanho de Monte Santo de Minas (MG) e que, apesar do não isolamento, tanto BoHV-1 quanto CpHV-1 estão presentes entre rebanhos caprinos nos estados de São Paulo e de Minas Gerais. Ademais, a associação das condições sanitárias caracterizadas pela análise sorológica com detecção de alterações de parâmetros reprodutivos específicos no rebanho de Monte Santo de Minas (MG) direcionam o diagnóstico da infecção pelo CpHV-1 como... / The caprine herpesvirus type 1 (CpHV-1) and the bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) cause considerable economic losses for the producer, since they determine the host species reproductive disorders. The scarcity of studies about theses virus in brazilian goat herds directed this study that aimed to verify if infection evidence by them influence reproductive efficiency, carrying out the previous analysis of reproductive parameters of the zootechnical bookkeeping showed by negative and positive animals on the pontual assay of a goat herd with reproductive problems, in the municipality of Monte Santo de Minas, by research of the occurrence of neutralizing, besides research of the occurrence of neutralizing antibodies against BoHV-1 and CpHV-1, using virusneutralization test (VN), in goat herds in three different environments: São Paulo State, Zona da Mata Mineira (Minas Gerais State) and in a farm in the municipality of Monte Santo de Minas (Minas Gerais State). Thus, it was found that in São Paulo State and in Zona da Mata Mineira (MG) there was no evidence of recent viral circulation of any of the genotypes studied. On the other hand, in Monte Santo de Minas farm there were evidences of recent viral circulation specifically for CpHV-1, but not for BoHV-1. The statistical analysis showed that there were more chances of the animals were positive for BoHV-1 in Ipiguá herd (SP), and for CpHV-1 in Monte Santo de Minas (MG) herd and, despite not isolated both BoHV-1 and CpHV-1 are present in got herds of São Paulo and Minas Gerais herds. In addition, the association of health conditions characterized by serological analysis with detection of specific changes in reproductive parameters in Minas Gerais (MG) goat directs the diagnosis of infection by CpHV-1 as the cause of the problems presented by the herd showing that the presence of this virus causes reproductive problems in ...

Contexte Malgré le développement des connaissances physiopathologiques et la généralisation des techniques de biologie moléculaire, l'étiologie des encéphalites reste inconnue dans la majorité des cas. Leur incidence, le pronostic des patients à moyen et court terme et la persistance et la gravité des séquelles sont inconnus. Les objectifs de ce projet étaient d'améliorer les connaissances sur l'étiologie des encéphalites en France et dedécrire les patients hospitalisés en France pour encéphalites en terme cliniques, biologiques, démographiques, épidémiologiques et pronostiques Matériel et méthode Les patients de plus de 28 jours répondant à la définition de cas étaient inclus au cours de l'année 2007. Une exploration des étiologies possibles était effectuée selon une stratégie pré-définie. Des informations épidémiologiques, cliniques, paracliniques et biologiques étaient recueillies à l'aide de questionnaires standardisés à l'admission, 5 jours après et à la sortie de l'hôpital. Cette étude était réalisée selon la règlementation en vigueur. Le devenir à long terme des patients a été évalué au cours de l'année 2010 à l'aide de questionnaires standardisés. Les données recueillies concernaient les symptômes persistants, la reprise des activités de loisirs, la reprise du travail ou de la scolarité et la qualité de vie. Le déclin cognitif était évalué auprès de la famille des patients à l'aide du test QIDECO. La mesure principale de l'issue de l'encéphalite était le Glasgow outcome scale (GOS). Résultats 253 patients atteints d'encéphalites aiguës ont été inclus. Un agent étiologique a été identifié pour 131 (52%) d'entre eux. Les agents étiologiques les plus fréquemment identifiés étaient le virus Herpes simplex (HSV, n=55), le virus Varicella Zoster (VZV, n=20), Mycobacterium tuberculosis (n=20) et Listeria monocytogenes (n=13). Vingt-six patients (10%) sont décédés durant l'hospitalisation. En 2010, 176 patients ont pu être inclus et évalués. L'issue de l'encéphalite était favorable pour 61% des patients et défavorable pour 39%. Parmi les patients qui travaillaient avant l'encéphalite, 24% n'avaient pas repris le travail au moment de l'évaluation. Les patients qui avaient présenté une encéphalite herpétique en 2007, avaient un GOS étaient moins bon que les autres patients. Discussion Notre travail a permis une amélioration significative de la proportion d'encéphalites pour lesquelles un diagnostic étiologique est établi. Nous avons montré que les bactéries occupent une place non négligeable dans les causes de ce syndrome, et sont responsables de la majorité des décès survenant durant la phase aigue des encéphalites. A long terme, une proportion importante de patients présente des séquelles significatives ce qui témoigne de la transformation de l'encéphalite en maladie neurologique et neuropsychologique chronique une fois l'épisode infectieux aigu résolu. La fréquence importante des séquelles d'encéphalite herpétique relativise le succès obtenu en terme de létalité avec la généralisation de l'aciclovir. Conclusion Notre travail permet de définir des recommandations utilisables en routine pour le diagnostic étiologique des encéphalites, et le suivi à long terme des patients qui devrait être généralisé. Les encéphalites herpétiques doivent faire l'objet de recherche physiopathologique pour expliciter lagravité résiduelle de la maladie en dépit d'un traitement spécifique, et proposer une meilleureprévention et une meilleure prise en charge des séquelles. / Abstract Background Despite a better knowledge about pathophysiological mechanisms and the generalisation of molecular biological Tools, the aetiology of encephalitis is still undetermined in most cases. Their incidence, the short-term and long-term prognosis of the disease and the persistence of sequelae are unknown. The objectives of this work were to improve the knowledge about the aetiology of encephalitis in France and to describe the patients hospitalized in France with encephalitis according to clinical, biological, demographic, epidemiological and outcome data. Methods Patients aged 28 days or more, who fitted the case definition, were enrolled in 2007. The investigation of aetiological diagnosis was carried out according to a previously defined diagnosis strategy. Epidemiological, clinical and biological data were collected using standardised questionnaires on admission, on day 5 of hospitalisation and on discharge. The study was carried out in accordance with French regulations. The long-term outcome of patients was assessed in 2010. Data collected encompassed persisting symptoms, resuming leisure activities, return to wok or resuming education and quality of life. Cognitive decline was assessed with patients' relatives using IQCODE. The main outcome measure was the Glasgow outcome scale (GOS). Results 253 patients presenting with acute encephalitis were included. A causative agent was identified for 131 (52%) of them. Most frequent causative agents were Herpes simplex virus (HSV, n=55), Varicella Zoster virus (VZV, n=20), Mycobacterium tuberculosis (n=20) and Listeria monocytogenes (n=13). Twenty-six patients (10%), died during hospitalisation. In 2010, 176 patients could be included and assessed. The outcome of encephalitis was favourable for 61% of patients and 39% had a poor outcome. Among patient employed before onset of encephalitis, 24% had not returned to work at the time of evaluation. Patients who presented with herpes encephalitis in 2007 had a lower score on GOS than other patients. Discussion Our study resulted in a important improvement of the proportion of encephalitis with a causative agent identified. We demonstrated that bacteria play a significant role as causes of encephalitis, and are responsible for most death occurring during the acute stage of encephalitis. An important proportion of patients presented long-term sequelae, illustrating the evolution of encephalitis from an acute infectious disease toward a chronic neurological disease. The high frequency of sequelae following herpes encephalitis is a shadow on the success of aciclovir. Conclusion Considering our results, we can propose recommendation for the everyday management of encephalitis patients, both to achieve aetiological diagnosis and a long-term follow-up that should be extended to all encephalitis patients. Herpes encephalitis should be more studied on pathophysiological aspects to explicate the severity of the disease despite the existence of a specific treatment, and to propose better prevention and management of sequelae.

Orientador: Samir Issa Samara / Coorientador: Edviges Maristela Pituco / Banca: Maria da Glória Buzinaro / Banca: Bruna Alexandrino / Banca: Moacir Marchiori Filho / Banca: Fernanda Senter Magajevski / Resumo: O herpesvírus caprino tipo 1 (CpHV-1) e o herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) acarretam consideráveis perdas econômicas para o produtor, uma vez que determinam transtornos reprodutivos na espécie hospedeira. A escassez de estudos sobre esses vírus em plantéis caprinos brasileiros direcionaram o presente estudo que objetivou verificar se indícios da infecção por esses vírus influenciam a eficiência reprodutiva, por meio de uma análise precedente dos parâmetros reprodutivos descritos na escrituração zootécnica apresentados por animais positivos e negativos no exame pontual de um rebanho caprino com histórico de problemas reprodutivos no município de Monte Santo de Minas (MG), além de proceder pesquisa de ocorrência de anticorpos neutralizantes contra o BoHV-1 e o CpHV-1 pelo teste de virusneutralização (VN) em rebanhos caprinos em três ambientes diferentes: estado de São Paulo, Zona da Mata Mineira (MG) e uma propriedade no município de Monte Santo de Minas (MG). Assim, verificou-se que nos rebanhos do estado de São Paulo e da Zona da Mata Mineira não havia indícios de circulação viral recente de qualquer das espécies virais estudadas. Por outro lado, no rebanho de Monte Santo de Minas (MG) houve evidências da circulação viral recente especificamente para o CpHV-1, mas não para o BoHV-1. A análise estatística mostrou que houve mais chances dos animais serem positivos para o BoHV-1 no rebanho de Ipiguá (SP), e para o CpHV-1 no rebanho de Monte Santo de Minas (MG) e que, apesar do não isolamento, tanto BoHV-1 quanto CpHV-1 estão presentes entre rebanhos caprinos nos estados de São Paulo e de Minas Gerais. Ademais, a associação das condições sanitárias caracterizadas pela análise sorológica com detecção de alterações de parâmetros reprodutivos específicos no rebanho de Monte Santo de Minas (MG) direcionam o diagnóstico da infecção pelo CpHV-1 como... / Abstract: The caprine herpesvirus type 1 (CpHV-1) and the bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) cause considerable economic losses for the producer, since they determine the host species reproductive disorders. The scarcity of studies about theses virus in brazilian goat herds directed this study that aimed to verify if infection evidence by them influence reproductive efficiency, carrying out the previous analysis of reproductive parameters of the zootechnical bookkeeping showed by negative and positive animals on the pontual assay of a goat herd with reproductive problems, in the municipality of Monte Santo de Minas, by research of the occurrence of neutralizing, besides research of the occurrence of neutralizing antibodies against BoHV-1 and CpHV-1, using virusneutralization test (VN), in goat herds in three different environments: São Paulo State, Zona da Mata Mineira (Minas Gerais State) and in a farm in the municipality of Monte Santo de Minas (Minas Gerais State). Thus, it was found that in São Paulo State and in Zona da Mata Mineira (MG) there was no evidence of recent viral circulation of any of the genotypes studied. On the other hand, in Monte Santo de Minas farm there were evidences of recent viral circulation specifically for CpHV-1, but not for BoHV-1. The statistical analysis showed that there were more chances of the animals were positive for BoHV-1 in Ipiguá herd (SP), and for CpHV-1 in Monte Santo de Minas (MG) herd and, despite not isolated both BoHV-1 and CpHV-1 are present in got herds of São Paulo and Minas Gerais herds. In addition, the association of health conditions characterized by serological analysis with detection of specific changes in reproductive parameters in Minas Gerais (MG) goat directs the diagnosis of infection by CpHV-1 as the cause of the problems presented by the herd showing that the presence of this virus causes reproductive problems in ... / Doutor

Ocorrências comuns de infecções virais graves, aparecimento de cepas resistentes e um limitado número de quimioterápicos antivirais disponíveis mostram a necessidade da busca por novas substâncias ativas como antivirais. Muitas substâncias derivadas de plantas são candidatas ao estudo do seu potencial na terapia sistêmica e/ou profilaxia de herpes simplex virus 1 (HSV-1). Dentre as plantas com atividade antiviral, destacam-se as do gênero Baccharis. O objetivo geral do trabalho foi o estudo da composição química e avaliação da atividade antiviral das folhas de Baccharis anomala D.C. através de fracionamento bioguiado. Utilizando precipitação com etanol e fracionamento por permeação molecular foi possível separar os constituintes químicos ativos contra o vírus HSV-1 presentes no extrato aquoso de Baccharis anomala. Os testes de prospecção de constituintes químicos indicaram a presença de taninos, catequinas e saponinas no extrato aquoso da espécie. Através da análise cromatográfica foi possível detectar a presença de compostos fenólicos, utilizando-se coloração com cloreto férrico e reagente natural. Em relação à atividade antiviral, a fração ativa denominada AQ PPT FR 4-5 apresentou pronunciada atividade antiviral, inibindo a replicação viral em 100 % nas concentrações de 1,25, 0,625, 0,312 e 0,156 mg/mL, contra as cepas ATCC-VR733 e Aciclovir-resistente 29-R do HSV-1. Em relação ao mecanismo de ação, observou-se atividade virucida da fração AQ PPT FR 4-5. Estes resultados são muito importantes, pois, de acordo com a literatura, ainda não foram relatados compostos com atividade virucida úteis clinicamente para o tratamento de infecções por HSV-1. Conclui-se, portanto, que Baccharis anomala possui potente atividade antiviral contra o vírus HSV-1 e é promissora para estudos posteriores que visem ao isolamento, identificação e estudo do mecanismo de ação antiviral de compostos ativos da espécie, considerando a emergência de cepas resistentes e a necessidade de compostos com novos mecanismos de ação. / Common occurrences of severe viral infections, emergence of resistant strains and a limited number of available antiviral chemotherapeutics show the need to search for new active substances as antiviral. Many compounds derived from plants are candidates for the study of their potential in systemic therapy and/or prophylaxis of herpes simplex virus type 1 (HSV-1). Among the plants with antiviral activity, those from the genus Baccharis are remarkable. The main objective of the work was the study of the chemical composition and evaluation of the antiviral activity of extracts from Baccharis anomala D.C., using bioactivity guided fractionation. Through precipitation with ethanol and fractionation by molecular permeation it was achieved the separation of the active chemical constituents against HSV-1 virus in the aqueous extract of Baccharis anomala. Phytochemical tests indicated the presence of tannins, catechins and saponins in the aqueous extract. By thin layer chromatography it was detected the presence of phenolic compounds using ferric chloride and natural reagent. Concerning the antiviral activity, the active fraction named AQ PPT FR 4-5 showed pronounced antiviral activity, represented by 100 % inhibition of viral replication at concentrations of 1.25, 0.625, 0.312 and 0.156 mg/mL, against the strains ATCC-VR733 and Acyclovir-resistant 29-R of HSV-1 virus. Regarding the mechanism of action, virucidal activity on the fraction AQ PPT FR 4-5 was detected, which is also very important because, as far as we know, compounds with virucidal activity for clinical use in the treatment of HSV-1 infections were not reported yet. In conclusion, Baccharis anomala displayed pronounced antiviral activity against HSV-1 virus and it is promising for further studies aimed to the isolation, identification and mechanism of action of antiviral active compounds of the species, considering the emergence of resistant strains and the need for compounds with new mechanisms of action.

Ocorrências comuns de infecções virais graves, aparecimento de cepas resistentes e um limitado número de quimioterápicos antivirais disponíveis mostram a necessidade da busca por novas substâncias ativas como antivirais. Muitas substâncias derivadas de plantas são candidatas ao estudo do seu potencial na terapia sistêmica e/ou profilaxia de herpes simplex virus 1 (HSV-1). Dentre as plantas com atividade antiviral, destacam-se as do gênero Baccharis. O objetivo geral do trabalho foi o estudo da composição química e avaliação da atividade antiviral das folhas de Baccharis anomala D.C. através de fracionamento bioguiado. Utilizando precipitação com etanol e fracionamento por permeação molecular foi possível separar os constituintes químicos ativos contra o vírus HSV-1 presentes no extrato aquoso de Baccharis anomala. Os testes de prospecção de constituintes químicos indicaram a presença de taninos, catequinas e saponinas no extrato aquoso da espécie. Através da análise cromatográfica foi possível detectar a presença de compostos fenólicos, utilizando-se coloração com cloreto férrico e reagente natural. Em relação à atividade antiviral, a fração ativa denominada AQ PPT FR 4-5 apresentou pronunciada atividade antiviral, inibindo a replicação viral em 100 % nas concentrações de 1,25, 0,625, 0,312 e 0,156 mg/mL, contra as cepas ATCC-VR733 e Aciclovir-resistente 29-R do HSV-1. Em relação ao mecanismo de ação, observou-se atividade virucida da fração AQ PPT FR 4-5. Estes resultados são muito importantes, pois, de acordo com a literatura, ainda não foram relatados compostos com atividade virucida úteis clinicamente para o tratamento de infecções por HSV-1. Conclui-se, portanto, que Baccharis anomala possui potente atividade antiviral contra o vírus HSV-1 e é promissora para estudos posteriores que visem ao isolamento, identificação e estudo do mecanismo de ação antiviral de compostos ativos da espécie, considerando a emergência de cepas resistentes e a necessidade de compostos com novos mecanismos de ação. / Common occurrences of severe viral infections, emergence of resistant strains and a limited number of available antiviral chemotherapeutics show the need to search for new active substances as antiviral. Many compounds derived from plants are candidates for the study of their potential in systemic therapy and/or prophylaxis of herpes simplex virus type 1 (HSV-1). Among the plants with antiviral activity, those from the genus Baccharis are remarkable. The main objective of the work was the study of the chemical composition and evaluation of the antiviral activity of extracts from Baccharis anomala D.C., using bioactivity guided fractionation. Through precipitation with ethanol and fractionation by molecular permeation it was achieved the separation of the active chemical constituents against HSV-1 virus in the aqueous extract of Baccharis anomala. Phytochemical tests indicated the presence of tannins, catechins and saponins in the aqueous extract. By thin layer chromatography it was detected the presence of phenolic compounds using ferric chloride and natural reagent. Concerning the antiviral activity, the active fraction named AQ PPT FR 4-5 showed pronounced antiviral activity, represented by 100 % inhibition of viral replication at concentrations of 1.25, 0.625, 0.312 and 0.156 mg/mL, against the strains ATCC-VR733 and Acyclovir-resistant 29-R of HSV-1 virus. Regarding the mechanism of action, virucidal activity on the fraction AQ PPT FR 4-5 was detected, which is also very important because, as far as we know, compounds with virucidal activity for clinical use in the treatment of HSV-1 infections were not reported yet. In conclusion, Baccharis anomala displayed pronounced antiviral activity against HSV-1 virus and it is promising for further studies aimed to the isolation, identification and mechanism of action of antiviral active compounds of the species, considering the emergence of resistant strains and the need for compounds with new mechanisms of action.