Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 459063.pdf: 1347092 bytes, checksum: 2e34761fdd59a6506f5f964b304ec24c (MD5) Previous issue date: 2014-03-12 / Introduction: Dental pulp is composed of loose connective tissue, which reacts when facing a pathogenic agent, and the inflammation is the first response. DGK? is one of the key enzymes involved on inflammations cellular events. It participates on the neutrophils recruiting to the injury site and on the regulation of superoxide production. The aim of this study was to evaluate the localization of the DGK? in healthy and inflamed/infected dental pulp of rats. Methods: Were used eighteen (18) male Wistar rats. The animals were divided into three groups of six rats each. In Group 1 (control group), no cavity opening was performed. In Groups 2 and 3 dental pulp of the left first molars was exposed to oral environment for 24hours and 7 days respectively. Euthanasia was performed after the experimental periods and the jaws were dissected for histological evaluation and immunodetection of DGK? enzyme. Results: Histological analysis of the dental pulp showed that tissue exposure led to inflammatory and degenerative events, which varied in their extension according to the experimental period of time. In groups 2 and 3, DGK? immunolabeling was observed in neutrophils and abscessed areas, being detected on a greater amplitude of pulp tissue in the 24 hour period. Conclusions: DGK? is expressed on the initial stages of pulp inflammation, although there is no relation with its extent. The understanding of the DGK? role in the pathways of pulp inflammation can help the development of new therapeutic strategies to promote pulp repair. / Introdu??o: A polpa dent?ria ? formada por um tecido conjuntivo frouxo, que reage frente a um agente agressor patog?nico, sendo a inflama??o uma de suas manifesta??es iniciais. A DGK? ? uma das enzimas-chave envolvida em eventos celulares da inflama??o. A mesma participa do recrutamento de neutr?filos para o local da inj?ria e da regula??o da produ??o de super?xido. O objetivo deste estudo foi avaliar, em ratos, a localiza??o da DGK? em polpas saud?veis e em polpas inflamadas/infectadas. Metodologia: Foram utilizados dezoito (18) ratos machos Wistar. Os animais foram divididos em tr?s grupos de seis animais cada. No grupo 1 (grupo controle), n?o foi realizado nenhum procedimento. Nos grupos 2 e 3, a polpa dent?ria dos primeiros molares do lado esquerdo foi exposta ao meio bucal por 24horas e por 7 dias, respectivamente. A eutan?sia foi realizada ap?s os per?odos experimentais, e as mand?bulas foram dissecadas para an?lise histol?gica e imunolocaliza??o da enzima DGK?. Resultados: A avalia??o histol?gica da polpa dent?ria mostrou que a exposi??o tecidual levou a eventos inflamat?rios e degenerativos, que variaram de acordo com o per?odo de tempo. Nos grupos 2 e 3, houve marca??o da DGK? em neutr?filos e ?reas pr?ximas a abscessos, sendo detectada em uma maior amplitude no per?odo de 24 horas. Conclus?es: A DGK? ? expressa em est?gios iniciais da inflama??o, n?o sendo relacionada com a extens?o da inflama??o pulpar. O entendimento do papel da DGK? na cascata de eventos da inflama??o pulpar pode trazer informa??es para o desenvolvimento de novas estrat?gias terap?uticas que promovam o reparo pulpar.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 459627.pdf: 7400131 bytes, checksum: 7fad83acbbcc467bba6b608474393763 (MD5) Previous issue date: 2014-02-25 / The dental pulp activates inflammatory and immunopathologic defenses owing to microorganisms. However, pulp tissue is confined by rigid walls and inflammation may perpetuate or extend pathologic alteration due to its own events. Within this context, the enzyme Purine Nucleoside Phosphorylase (PNP) is related to a chain of events that generate activated T cells, thus it becomes an interesting target for pulp inflammation control. Under these circumstances, the present study aimed to characterize the PNP enzyme in rat pulp tissue, by immunohistochemistry, as well as establish a correlation among the inflammatory events with the enzyme, by histologic methods. Eighteen animals were divided into 3 groups: group 1 (n=6) no cavity opening was performed; group 2 (n=6) pulp tissue exposure for 24 hour; group 3 (n=6) pulp tissue exposure for 7 days. Qualitative analysis was applied for histologic observations, which has indicated the same intensity of inflammation for groups 2 and 3. However, in group 3, inflammation was further extended through the pulp. The main inflammatory cells observed were neutrophils, for both experimental periods. No pathologic alterations were shown for the control group. Immunolocalization detected the presence of PNP in endothelial cells of group 3 at the transition period from acute to chronic inflammation. No PNP basal expression was observed for the groups 1 and 2. In conclusion, PNP is activated in rat pulp tissue. Our findings show a novel endodontic target and contribute with ongoing and future endodontic scientific studies that aim drugs development for pulp damage control. / Dentre as fun??es do tecido pulpar, o papel de defesa contra as inj?rias provocadas por microorganismos ocorre com o desenvolvimento dos processos inflamat?rio e imunol?gico. No entanto, a polpa encontra-se confinada por paredes r?gidas e a inflama??o pode perpetuar ou ampliar a altera??o patol?gica em fun??o de seus pr?prios eventos. Dentro deste contexto, a enzima Purina Nucleos?deo Fosforilase (PNF) ? um alvo interessante para o controle de inflama??o pulpar, pois est? relacionada a cascata de eventos que gera c?lulas T ativadas. Sendo assim, o presente estudo objetivou caracterizar a enzima PNF em tecido pulpar de ratos wistar, atrav?s de imunohistoqu?mica, bem como estabelecer correla??o entre a presen?a da enzima PNF e os eventos inflamat?rios observados por m?todo histol?gico. Foram utilizados 18 animais divididos em 3 grupos: grupo 1 [n=6]: sem exposi??o pulpar; grupo 2 [n=6]: com exposi??o pulpar por 24h; grupo 3 [n=6]: com exposi??o pulpar por 7 dias. A an?lise qualitativa aplicada para o m?todo histol?gico indicou maior extens?o inflamat?ria para o grupo 3, sendo que a intensidade de inflama??o permaneceu a mesma para os grupos 2 e 3. O principal tipo celular inflamat?rio encontrado foi o neutr?filo, para ambos per?odos experimentais. O grupo controle n?o apresentou altera??es patol?gicas. A imunolocaliza??o detectou a presen?a da enzima PNF em c?lulas endoteliais no grupo 3. N?o houve express?o basal da enzima nos grupos 1 e 2. Sendo assim, concluiu-se que h? presen?a da enzima PNF no tecido pulpar j? no evento de transi??o do per?odo agudo para o per?odo cr?nico. A partir deste achado, a enzima torna-se alvo interessante de estudos endod?nticos futuros que elucidem seu o papel, objetivando assim, o desenvolvimento de f?rmacos que controlem o dano pulpar.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:32:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 398803.pdf: 2839902 bytes, checksum: 29b463d8444f9fc0af2812799399ac5e (MD5) Previous issue date: 2008-01-21 / OBJETIVOS: Comparar os achados ultra-sonogr?ficos em escala de cinza e com Doppler em cores, com os colonosc?picos e histol?gicos, em pacientes pedi?tricos com suspeita de processos inflamat?rios intestinais. MATERIAIS E M?TODOS: Foram analisados, retrospectivamente e consecutivamente, os prontu?rios de 72 pacientes, com suspeita de processo inflamat?rio intestinal, atendidos entre janeiro de 2000 e dezembro de 2006. Foram inclu?dos pacientes que realizaram o estudo ultra-sonogr?fico em escala de cinza e com Doppler em cores, at? 30 dias antes da colonoscopia. Na ultrasonografia em escala de cinza, foi avaliada a espessura e, no Doppler, a vasculariza??o da parede intestinal. Esses achados foram comparados com os da colonoscopia e da histologia. Foi determinada sensibilidade e a especificidade da espessura intestinal, para detectar inflama??o intestinal. A correla??o dos achados do Doppler com a colonoscopia/histologia foi determinada pelo coeficiente de Spearman (rs). RESULTADOS: Foram estudados 370 segmentos intestinais, atrav?s da ultrasonografia, e a correla??o com colonoscopia/histologia foi realizada em 352 segmentos. A espessura intestinal, na detec??o de inflama??o moderada/grave, teve alta sensibilidade e especificidade, no ?leo terminal e c?lon direito, e alta especificidade e baixa sensibilidade, nos demais segmentos. O Doppler, na detec??o de inflama??o, apresentou uma correla??o muito boa, no ?leo terminal (rs: 0.84, p<0.001), e de regular a boa (rs: 0.28-0.68 - p <0.001), nos demais segmentos. Quando o intervalo entre os estudos foi menor do que 10 dias, houve uma melhor correla??o em todos eles (rs 0.31-0.85, p< 0.001). Nove pacientes, com altera??es ultra-sonogr?ficas unicamente em intestino delgado, tinham colonoscopia normal; em tr?s desses casos, diagnosticou-se doen?a de Crohn. CONCLUS?O: No ?leo terminal e no c?lon direito, houve uma alta sensibilidade e especificidade da ultra-sonografia em escala de cinza na detec??o de inflama??o intestinal, assim como tamb?m uma correla??o muito boa entre o Doppler e os achados colonosc?picos e histol?gicos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:33:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 464694.pdf: 2239500 bytes, checksum: dffe466aa07a18c4c357e965ce0174ea (MD5) Previous issue date: 2014-10-27 / Introduction: Studies of children with severe therapy-resistant asthma are scarce in developed countries and there is no published data about clinical presentations and characteristics of these patients in developing countries. Objective: To describe the main clinical characteristics, lung function, radiological findings, and inflammation of induced sputum of children with severe therapy-resistant asthma from a reference center in southern Brazil. Methods: Children between 6-14 years of age, followed by at least 6 months in a reference center, with severe therapy-resistant asthma (uncontrolled asthma using elevated doses of inhaled corticoid associated with long-acting beta-2 agonist) were retrospectively selected. All subjects from the reference center had clinical data, disease control, lung function, skin test reactivity to aeroallergens, inflammation of induced sputum, chest computerized tomography, and pH esophageal monitoring results prospectively collected. Results: 21 patients were selected (mean age: 9.2 yo). Eighteen patients (86%) were atopic. Most patients presented uncontrolled disease during most visits, with nearly normal baseline lung function parameters. The sputum of two patients were paucigranulocytic, 4 were eosinophilic and 7 neutrophilic, where 67% of the children who repeated sputum exam changed the inflammatory patterns. 6/7 (86%) of the children who were treated with omalizumab (anti-IgE) showed improvement in quality of life, with an important reduction in exacerbations and hospitalizations. Conclusions: Most children with severe therapy-resistant asthma from a non-affluent population were patients with difficult-to-control disease, with nearly normal lung function and prone to change airway inflammatory pattern during follow-up, most of them atopics. This profile, unlike adults, need to be better understood in relation to the mechanisms that result in symptoms unresponsive to optimized drug therapies. / Introdu??o: estudos de crian?as com asma grave resistente ? terapia (AGRT) s?o escassos em pa?ses desenvolvidos e n?o h? dados publicados sobre apresenta??o cl?nica e caracter?sticas desses pacientes em pa?ses em desenvolvimento. Objetivo: descrever as principais caracter?sticas cl?nicas, funcionais, radiol?gicas e de inflama??o no escarro induzido de crian?as com AGRT, provenientes de um centro de refer?ncia do sul do Brasil. M?todos: foram selecionadas retrospectivamente crian?as entre 6-14 anos, acompanhadas por pelo menos 6 meses em um centro de refer?ncia do sul do Brasil, com diagn?stico AGRT (asma n?o controlada, usando doses elevadas de corticoide inalat?rio associado a beta-2 agonista de a??o longa). A partir de dados coletados prospectivamente no seguimento cl?nico, foram analisados controle da doen?a, fun??o pulmonar, teste cut?neo para aeroal?rgenos, avalia??o da inflama??o no escarro induzido, tomografia de t?rax, e phmetria. Resultados: 21 pacientes foram selecionados (m?dia de 9,2 anos). Dezoito (86%) pacientes s?o at?picos. A maioria dos pacientes apresenta pouco controle da doen?a, com fun??o pulmonar basal sempre pr?xima do normal. Dois pacientes apresentaram escarro paucigranuloc?tico, 4 eosinof?lico e 7 neutrof?lico, onde 67% que repetiram o exame apresentaram mudan?a no padr?o inflamat?rio. 6/7 (86%) pacientes que utilizaram omalizumabe (anti-IgE) apresentaram melhora importante da qualidade de vida, com redu??o importante das exacerba??es. Conclus?es: crian?as com AGRT apresentam doen?a dif?cil de controlar, fun??o pulmonar pr?xima do normal e padr?o inflamat?rio das vias a?reas vari?vel durante seguimento cl?nico, sendo em sua maioria at?picas. Esse perfil, diferente dos adultos, precisa ser melhor entendido em rela??o aos mecanismos que resultam em sintomas n?o responsivos a terapias medicamentosas otimizadas.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 400759.pdf: 708078 bytes, checksum: cd4affe5828ac74eab2d88638778ae91 (MD5) Previous issue date: 2008-03-24 / A S?ndrome da Pr?-Ecl?mpsia (SPE) ? o dist?rbio hipertensivo que ocorre na segunda metade da gesta??o. Os sinais cl?nicos s?o parte de uma resposta inflamat?ria intensa que inclui a ativa??o leucocit?ria. O desequil?brio no balan?o de citocinas secretadas pelos linf?citos auxiliares Ta1 (inflamat?rias) e Ta2 (antiinflamat?rias) a favor do perfil Ta1 dominante ? descrito como um marcador da resposta inflamat?ria sist?mica na SPE. O presente estudo investigou as altera??es nas citocinas totais T1/T2 nos linf?citos T CD3+ e a distribui??o dos linf?citos sangu?neos perif?ricos nas mulheres com pr?-ecl?mpsia em compara??o ?s gestantes normotensas. Cinq?enta e uma mulheres foram inclu?das no estudo (SPE=26, Controles=25). A contagem global de leuc?citos e a contagem de linf?citos, o percentual de c?lulas CD3+ (linf?citos T imunocompetentes), o percentual das c?lulas INF- g+/CD3+ (linf?citos T com imunofen?tipo de citocinas do tipo 1), o percentual das c?lulas IL- 4+/CD3+ e IL-10+/CD3+ (linf?citos T com imunofen?tipo de citocinas do tipo2), o percentual das c?lulas CD4+/CD8+ (linf?citos T auxiliares/T citot?xicos) e o percentual das c?lulas CD26+ (atividade dipeptidil-peptidase IV) foram determinados em amostras de sangue atrav?s das an?lises por citometria de fluxo em 2 cores. Detectou-se que o n?vel do subtipo linfocit?rio CD4+ no grupo SPE foi mais elevado que no grupo controle (43.6?5.8 vs 37.8?5.7%; P=0.002). Todos os outros par?metros imunol?gicos n?o foram significativamente diferentes entre os grupos (P>0.05). Concluiu-se que a situa??o de ativa??o imunol?gica, devido ao aumento nos n?veis dos linf?citos Ta, est? associada com a resposta inflamat?ria sist?mica descrita na mulher com SPE. O desquil?brio no perfil de citocinas totais do tipo 1 e do tipo 2 na SPE n?o foi evidenciado nas c?lulas com imunofen?tipo CD3+, e pode estar presente em outros subtipos celulares espec?ficos como nos linf?citos CD4+ ou CD3-.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 423442.pdf: 1209531 bytes, checksum: 4d513a858906ef3ce6edee1972e580be (MD5) Previous issue date: 2010-03-31 / Introdu??o: A s?ndrome metab?lica (SM) ? caracterizada por um conjunto de anormalidades metab?licas e hemodin?micas, estando associada com risco aumentado de diabetes mellitus tipo 2 (DM2) e eventos cardiovasculares. Citocinas inflamat?rias, como a interleucina 6 (IL6) e fator de necrose tumoral-alfa (TNF-&#945;) que contribuem para a resist?ncia a insulina, afetam a fun??o vascular, causando doen?a ateroscler?tica. Al?m disso, v?rios estudos t?m associado ? presen?a de agentes infecciosos como a Chlamydia pneumoniae com a inicia??o e ou progress?o da aterosclerose. Objetivo: Avaliar os n?veis s?ricos de citocinas pr?-inflamat?rias (TNF-alfa e IL-6) e de anticorpos anti-Chlamydia pneumoniae em pacientes com SM com e sem eventos cardiovasculares. Material e m?todos: Estudo transversal constitu?do por 147 indiv?duos do ambulat?rio de risco cardiometab?lico do Servi?o de Cardiologia do Hospital S?o Lucas da PUCRS, dos quais 100 (68%) com SM sem eventos cardiovasculares e 47(32%) com SM e eventos, sendo 13 (6,11%) com IAM e 10 (4,7%) AVC. O diagn?stico da SM foi determinado pelos crit?rios do NCEP-ATPIII. Interleucina-6, TNF-&#945; e anticorpos anti-Chlamydia pneumoniae IgG e IgA foram determinados por ensaio imunoenzim?tico (Elisa), Prote?na C reativa ultra sens?vel (PCR-us) foi mensurada por nefelometria; colesterol HDL e triglicer?deos pelo m?todo enzim?tico colorim?trico. Resultados: Do total de participantes, 108 (72,8%) eram do sexo feminino e 39 (26,5%) eram do sexo masculino. A idade m?dia dos sujeitos com eventos foi de 61,26 ? 8,5 e de 59,32 ? 9,9 para os indiv?duos sem eventos. (p=0,279).O grupo com SM e sem evento apresentou maior peso, altura, IMC e circunfer?ncia abdominal comparado ao grupo com SM com evento. Hipertens?o, dislipidemia, Intoler?ncia a glicose e tabagismo predominaram no grupo com eventos card?acos, sem diferen?as estat?sticas. IL-6, TNF-&#945; e doen?a vascular perif?rica apresentaram n?veis maiores nos indiv?duos com eventos (p=0,001). Observou-se n?veis mais elevados de anticorpos IgG para Chlamydia pneumoniae no grupo sem eventos, enquanto que IgA foi maior no grupo com eventos quando comparados os dois grupos. N?veis s?ricos para PCR-us foram semelhantes entre os grupos n?o apresentando diferen?as estat?sticas significativas. Com rela??o ao IAM e o AVC, estes sujeitos apresentaram marcadores inflamat?rios significativamente maiores (p=0,001), quando comparados aos controles. Marcador de fase aguda (PCR-us) n?o apresentou diferen?a significativa, assim como a presen?a de Chlamydia IgG e IgA. Associa??o positiva foi observada com o uso de estatinas, hipoglicemiantes orais, injet?veis e antiinflamat?rios n?oesteroidais no grupo com eventos. Conclus?o: Existe associa??o entre n?veis elevados de IL6 e TNF-&#945; com a s?ndrome metab?lica, em pacientes com eventos cardiovasculares, comparados aos sem eventos. A PCR-us n?o demonstrou ser um marcador de risco para estes eventos. Quando avaliamos os pacientes com SM, com IAM e AVC, verificamos que os n?veis de anticorpos IgG e IgA anti-Chlamydia pneumoniae n?o foram estatisticamente significativos quando comparados ao grupo sem eventos cardiovasculares.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 324875.pdf: 462529 bytes, checksum: 0fcad9bdd0ab101f8e4e8660f680797c (MD5) Previous issue date: 2004-08-30 / O objetivo deste trabalho foi estudar inflama??o e anemia em pacientes realizando hemodi?lise cr?nica (HD) em hospital de refer?ncia. Estabeleceu-se a preval?ncia do padr?o inflamat?rio(PI) em centros de diversas complexidades quanto ? gravidade de pacientes atendidos, descreveu-se o perfil dos indiv?duos com Defici?ncia Funcional do Ferro(DFF) e Bloqueio Inflamat?rio do Ferro(BIF), e avaliou-se a evolu??o cl?nica e laboratorial do padr?o inflamat?rio com a introdu??o de ?gua ultrapura em hemodi?lise. O estudo foi transversal e descritivo. O PI correspondeu a ferro s?rico < 60 mg/dL, capacidade ferrop?xica < 250 &#956;g/dL e ferritina > 100 ng/dL. A preval?ncia deste padr?o foi estudada em 284 pacientes que realizavam HD em quatro hospitais de diferentes complexidades. Para estudar as caracter?sticas cl?nicas e laboratoriais dos pacientes com PI foram exclusivamente utilizados os dados dos pacientes de um centro de refer?ncia, divididos inicialmente em 2 grupos (GA e GB), de acordo com o n?vel s?rico de prote?na C reativa ultra-sens?vel(PCR). Posteriormente, os doentes do GB tamb?m foram divididos em 2 subgrupos (GB1 e GB2), de acordo com aus?ncia ou presen?a de infec??o ou inflama??o clinicamente identificada. A preval?ncia do PI foi aumentada em hospitais de refer?ncia e maior complexidade. Aproximadamente um quarto dos pacientes com PI tinham PCR normal. Estes n?o apresentaram infec??o ou inflama??o expl?citas, n?o portavam acessos tempor?rios, e hospitalizaram menos. Tinham n?veis de hemat?crito (Htc), hemoglobina(Hgb) e ferro(Fe) mais elevados, receberam significativamente menos transfus?es, e a taxa de mortalidade foi menor. Preenchiam os requisitos que os definiam como DFF. Nos pacientes com PCR aumentado houve necessidade de maior quantidade de acessos tempor?rios, mais infec??o-inflama??o, e a preval?ncia de hospitaliza??es foi maior. Os n?veis de Htc, Hgb e Fe foram significativamente menores. A quantidade de transfus?es de sangue e a taxa de mortalidade foram maiores. Estes pacientes parecem se enquadrar no perfil BIF. Quando se analisou exclusivamente os com aumento do PCR, sem infec??o ou inflama??o espec?fica, verificou-se que as dosagens foram obtidas antes da instala??o do sistema de tratamento para obten??o de ?gua ultrapura. Nestes pacientes, ap?s a introdu??o de ?gua ultrapura houve normaliza??o dos n?veis de PCR.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 455924.pdf: 866376 bytes, checksum: 11973f76ada2aeeeb6a5dcd6c7c51f89 (MD5) Previous issue date: 2014-01-02 / Paraquat (PQ) is an agrochemical agent commonly used worldwide, which is allied to potential risks of intoxication. This herbicide induces the formation of reactive oxygen species (ROS) that ends up compromising various organs, particularly the lungs (by the polyamine uptake system), and the brain (by dopaminergic neuronal cell loss). This study evaluated the deleterious effects of paraquat on the central nervous system (CNS) (changes in physiologic parameters, nociceptive responses, locomotor activity and motor coordination, and expression profile of some inflammatory markers), or peripherally (inflammatory cells in the blood and lungs), with special attempts to assess the putative protective effects of the selective CXCR2 receptor antagonist SB225002 on these parameters. PQ-toxicity was induced in male Wistar rats, in a total dose of 50 mg/kg, given by the intraperitoneal (i.p.) route (10 mg/kg each three days). Control animals received saline solution (10 ml/kg) at the same schedule of administration. Separate groups of animals were treated with the selective CXCR2 antagonist SB225002 (1 or 3 mg/kg, i.p.), administered 30 min before each paraquat injection. The major changes found in paraquat-treated animals were: decreased body weight and hypothermia, nociception behavior, impairment of locomotor and gait capabilities, enhanced TNF-&#945; and IL-1&#946; expression in the striatum, and cell migration to the lungs and blood. Some of these parameters were reversed when the antagonist SB225002 was administered, including recovery of physiological parameters, decreased nociception, improvement of gait abnormalities, modulation of striatal TNF-&#945; and IL-1&#946; expression, and decrease of neutrophil migration to the lungs and blood. Taken together, our results demonstrate that damage to the central and peripheral systems elicited by paraquat can be prevented by the pharmacological inhibition of CXCR2 chemokine receptors. The experimental evidence presented herein extends the comprehension on the toxicodynamic aspects of paraquat, and opens new avenues to treat intoxication induced by this herbicide. / O paraquat (PQ) ? um composto qu?mico bastante utilizado no mundo, o qual ? aliado a potenciais riscos de intoxica??o. Este herbicida induz a forma??o de esp?cies reativas de oxig?nio (ROS) que podem comprometer v?rios ?rg?os, especialmente os pulm?es (atrav?s da recapta??o de poliaminas), e o c?rebro (pela perda de neur?nios dopamin?rgicos). Este trabalho avaliou os efeitos delet?rios do paraquat frente ao Sistema Nervoso Central (SNC) (como mudan?as nos par?metros fisiol?gicos, respostas nociceptivas, atividade locomotora e coordena??o motora, e o perfil de express?o de alguns marcadores moleculares de inflama??o), e perif?rico (como c?lulas inflamat?rias no sangue e pulm?es), com o objetivo de avaliar o poss?vel papel protetor do antagonista de receptores de quimiocinas CXCR2, o SB225002, nestes par?metros. A toxicidade ao paraquat foi induzida em ratos machos Wistar, em uma dose total de 50 mg/kg, administrada intraperitonealmente (i.p.) (10 mg/kg a cada tr?s dias). Animais do grupo controle receberam solu??o salina (10 ml/kg) no mesmo protocolo de administra??o. Diferentes grupos de animais foram tratados com o antagonista SB225002 (1 ou 3 mg/kg, i.p.), administrado 30 minutos antes de cada aplica??o do paraquat. As prinicpais mudan?as encontradas nos animais tratados com paraquat foram: diminui??o do peso corporal e hipotermia, aumento da resposta nociceptiva, diminui??o da capacidade de marcha e locomo??o, aumento da express?o de TNF-&#945; e IL-1&#946; no estriado, e a migra??o de c?lulas inflamat?rias no sangue e pulm?es. Alguns destes par?metros foram revertidos quando administrado o antagonista SB225002, como recupera??o dos par?metros fisiol?gicos, diminui??o da nocicep??o, melhora na atividade de marcha, modula??o da express?o estriatal de TNF-&#945; e IL-1&#946;, e diminui??o da migra??o neutrof?lica para o sangue e pulm?es. Em conjunto, nossos resultados demonstram que os danos causados pelo paraquat ao sistema central e perif?rico podem ser prevenidos atrav?s da inibi??o farmacol?gica dos receptores de quimiocinas CXCR2. A evid?ncia experimental aqui apresentada extende a compreens?o dos efeitos toxicodin?micos do paraquat, e proporciona novas possibilidades para tratar a intoxica??o causada por este herbicida.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 455930.pdf: 2412584 bytes, checksum: f510a7887fb6fa3e2f006d9db557d511 (MD5) Previous issue date: 2014-01-24 / Spinal voltage-gated calcium channels (VGCC) are pivotal regulators of painful and inflammatory alterations, representing attractive therapeutic targets. We examined the effects of epidural administration of the selective P/Q- and N-type VGCC blockers Tx3-3 and Ph&#945;1&#946;, respectively, isolated from the spider P. nigriventer, on symptomatic, inflammatory and functional changes allied to cyclophosphamide (CPA)-induced hemorrhagic cystitis (HC) in mice. The effects of P. nigriventer-derived toxins were compared to those displayed by MVIIC and MVIIA, extracted from the cone snail C. magus. HC was induced by a single intraperitoneal injection of CPA (300 mg/kg). The spinal blockage of P/Q-type VGCC by Tx3-3 and MVIIC, or N-type VGCC by Ph&#945;1&#946; attenuated nociceptive and inflammatory events associated with HC, including bladder oxidative stress and cytokine production. Moreover, CPA produced an evident increase of bladder TRPV1 and TRPA1 mRNA expression, which was virtually reversed by all the tested toxins. Noteworthy, Ph&#945;1&#946; strongly prevented bladder neutrophil migration, besides HC-related functional alterations. Finally, the spinal co-administration of the selective NK1 receptor antagonist CP-96345 heightened Ph&#945;1&#946; antinociceptive effects. Our results shed new lights on the role of spinal P/Q and N-type VGCC in bladder dysfunctions, pointing out Ph&#945;1&#946; as a promising alternative for treating complications associated to CPA-induced HC. / Os canais de c?lcio voltagem-dependentes (CCVDs), ao n?vel medular, s?o um dos principais reguladores das altera??es inflamat?rias e dolorosas, representando um interessante alvo terap?utico. Com isso, avaliamos os efeitos da administra??o intratecal dos bloqueadores seletivos dos CCVD do subtipo P/Q e N, Tx3-3 e Ph&#945;1&#946;, respectivamente, isolados do veneno da aranha P. nigriventer, nas mudan?as sintom?ticas, inflamat?rias e funcionais, relacionadas com a cistite hemorr?gica (CH), induzido pelo quimioter?pico ciclofosfamida (CPA) em camundongos. Os efeitos dos pept?deos provenientes da aranha P. nigriventer foram comparados com os exibidos pelas toxinas MVIIC e MVIIA, obtidas do caramujo C. magus. A CH foi induzida por uma ?nica administra??o intraperitoneal de CPA (300 mg/kg). O bloqueio medular dos CCVD do subtipo P/Q atrav?s da Tx3-3 e MVIIC ou, o bloqueio dos CCVD do subtipo N pela toxina Ph&#945;1&#946; atenuou as respostas nociceptivas e inflamat?rias associadas ? CH, incluindo estresse oxidativo e produ??o de citocinas na bexiga. Al?m disso, a CPA produziu um aumento evidente na express?o do RNAm de TRPV1 e TRPA1 na bexiga, o qual foi virtualmente revertido por todas as toxinas. Notavelmente, a isoforma Ph&#945;1&#946; reduziu a migra??o de neutr?filos para a bexiga, al?m de reverter as disfun??es da bexiga relacionadas ? CH. Finalmente, a co-administra??o medular do antagonista seletivo dos receptores NK1, CP-96345, com o pept?deo Ph&#945;1&#946;, intensificou o efeito antinociceptivo do mesmo. Nossos resultados trazem novas evid?ncias da fun??o dos CCVD do subtipo P/Q e N ao n?vel medular na disfun??o da bexiga, apontando a Ph&#945;1&#946; como uma poss?vel alternativa de tratamento para complica??es associadas ? CH, induzida por CPA.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-06-17T19:39:46Z No. of bitstreams: 1 TES_ALINE_DEFAVERI_DO_PRADO_COMPLETO.pdf: 1737423 bytes, checksum: 77ee581083f58c46dd10a545b62097a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-17T19:39:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_ALINE_DEFAVERI_DO_PRADO_COMPLETO.pdf: 1737423 bytes, checksum: 77ee581083f58c46dd10a545b62097a5 (MD5) Previous issue date: 2016-03-28 / Introduction: Rheumatoid Arthritis (RA) is an autoimmune, inflammatory and chronic disease. Muskuloskeletal ultrasound (MSUS) has been increasingly used for diagnostic evaluation and monitoring of patients. Regulatory T cells (Tregs) and lymphocytes producers of IL 17 (Th17) imbalance and disfuntion, as well as pro inflammatory cytokines, have been implicated in the pathogenesis of RA. There are few studies on the association of circulating lymphocites subtypes and cytokines with MSUS findings in RA. Methods: One hundred and one RA patients (1987 American College of Rheumatology criteria) treated with disease-modifying antirheumatic drugs (DMARDs) were included in this cross sectional study. A blood sample was taken just before clinical and ultrasonographic evaluation, which were all performed on the same day, consecutively and in a blinded fashion. Lymphocytes were isolated and immunophenotyped by flow cytometry to investigate regulatory FoxP3+ T cells and IL-17+ cells. Plasma Th1-Th2-Th17 cytokines (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17, TNF e IFN-?) and VEGF were searched using a Cytometric Bead Array (CBA; BD biosciences) kit by flow cytometry. Disease acitivity and disability were measured using Disease Activity Score in 28 joints (DAS28) and Health Assessment Questionnaire (HAQ). MSUS (MyLab 60, Esaote, Genova, Italy, 18 MHz linear probe) was performed consecutively by two ultrassound-trained rheumatologists on the wrists, 2th and 3th metacarpophalangeal and 2th and 3th proximal interphalangeal joints of both hands. Gray-scale synovial hypertrophy (PS) and power Doppler signal (pD) were searched using a semi-quantitative scale (0-3). Erosions were classified as present or absent. The sum of the individual joint scores for PS and pD (10-joint PS and pD scores) was calculated and used to correlate with clinical and laboratory data. Mann-Whitney test, Kruskal-Wallis test and Spearman correlation coefficient (rS) were used for statistical analysis, as well as liner multivariate regression. Interater agreement was tested using kappa statistics and intraclass correlation. Results: Among 101 patients, we were able to measure Treg/Th-17 in 90 individuals. Plasma cytokines were searched in 64 patients. Clinical and demographic features were: mean age, 55.8 ? 11 years; female gender, 80%; Caucasians, 85%; median (interquartile range) disease duration 6 (2-13) years; mean ? SD DAS28, 4.28 ? 1.64; mean ? SD HAQ score, 1.11 ? 0.85. Interobserver agreement (kappa) for US features varied from 0.53 to 1.0. Intraclass correlation for 10-joint PS score was 0.964 (95% CI 0.899-0.986, P <0.000) and for 10-joint pD score was 0,859 (95% CI 0.646-0.941, P <0.001). There was no significant correlation of 10-joint PS and pD scores with DAS28 and HAQ score. The presence of bone erosions was associated with 10-joint PS and pD scores (p=0.002), but not with DAS 28 (p=0.079) or HAQ (0.057). Swollen joint count, but not tender joint count, was correlated with 10-joint PS and pD scores (rS=0.54, P<0.001 and rS=0.39, P<0.001; respectively), as well as associated with bone erosions (P<0.001). There was no significant correlation of with 10-joint PS and pD scores with peripheral Tregs (rS=0.122, P=0.254 and rS=0,056, P=0.602) and Th17 cells (rS=-0.083, P=0.438 and rS=-0.060, P=0,575). Tregs and Th17 cells were not associated with erosions (p= 0,831 and p=0,632, respectively). Among all tested cytokines, IL-6 was correlated with DAS28 (rs 0.31 IC95% 0.07 to 0.52), eritrocyte sedimentation rate (rs 0.43 IC95% 0.19 to 0.62) and swollen joint count (rs 0.39 95%CI 0.15 a 0.59). IL-6 was also correlated with 10-joint pD score (rs 0.33 IC95% 0.07 to 0.56), right and left wrists pD (rs 0.34 IC95% 0.11 to 0.54 and rs 0.45 IC95% 0.21 to 0.64), and right and left PS (rs 0.40 IC95% 0.20 to 0.59 and rs 0.35 IC95% 0.08 to 0.57). Using multivariate linear regression model, 10-joint pD score was positively associated with IL-6 independently of DAS28 (P=0.025). There was no association of any of the tested cytokines with bone erosions (P? 0.17 for all tests). Conclusions: In established RA patients, treated with non biological DMARDs, we observed the following: lack of correlation of 10-joint PS and pD scores and DAS28 and HAQ; positive association of 10-joint PS and pD scores with bone erosions; positive association of swollen joint count, but not tender joint count, with MSUS synovitis and erosions; lack of correlation of MSUS features and circulating Treg and Th-17 cells; positive correlation of plasma IL-6 and MSUS synovitis. The association of IL-6 with 10-joint pD score was independent of DAS28. / Introdu??o. A artrite reumatoide (AR) ? uma doen?a autoimune inflamat?ria cr?nica com envolvimento articular proeminente. O ultrassom de alta resolu??o (US) tem sido empregado de maneira crescente na avalia??o diagn?stica e monitoriza??o da doen?a. O desequil?brio entre as fun??es de linf?citos T regulat?rios (Treg) e Th-17, bem como o papel de citocinas pr? inflamat?rias s?o centrais em sua patog?nese. H? escassez de estudos sobre a associa??o entre os achados ultrassonogr?ficos de atividade da AR e dano estrutural com subtipos linfocit?rios e citocinas no sangue perif?rico. M?todos: Neste estudo transversal, foram inclu?dos 101 pacientes com AR de acordo com os crit?rios de 1987 em tratamento com drogas remissivas n?o-biol?gicas. Uma amostra de sangue foi coletada imediatamente antes das avalia??es cl?nica e ultrassonogr?fica, que foram feitas todas no mesmo dia, em sequ?ncia. Os linf?citos foram isolados e imunofenotipados por citometria de fluxo para identificar c?lulas T reg FoxP3+ e linf?citos produtores de IL-17. Citocinas do perfil Th1-Th2-Th17 (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17, TNF e IFN-?) e VEGF foram quantificadas no plasma por citometria de fluxo utilizando-se o kit Cytometric Bead Array (CBA; BD biosciences). Atividade da doen?a foi quantificada por DAS28 e capacidade funcional, pelo HAQ, ambos realizados por reumatologista treinado, cegado em rela??o aos achados de US. Dois reumatologistas (cegados em rela??o aos dados cl?nicos) com treinamento em ultrassonografia realizaram avalia??o de sinovite e presen?a de eros?es em punhos, 2? e 3? articula??es metacarpofalangeanas e 2? e 3? interfalangeanas proximais bilateralmente utilizando aparelho de alta resolu??o (MyLab 60, Esaote, It?lia, transdutor linear de 18 mHz). Prolifera??o sinovial na escala de cinzas (PS) e capta??o de power Doppler (pD) foram avaliadas utilizando uma escala semi-quantitativa com varia??o de 0 a 3. Eros?es foram classificadas como presentes ou ausentes. A soma dos escores individuais de PS e pD foi calculada (escore 10 PS e escore 10 pD) e utilizada para correlacionar com dados cl?nicos e de laborat?rio. Teste de Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e coeficiente de correla??o de Spearman foram usados na an?lise estat?stica, bem como regress?o linear m?ltipla. Correla??o intraclasse e estat?stica kappa foram usados para concord?ncia interobservador. Resultados: Dentre os 101 pacientes inclu?dos, obtivemos quantifica??o de c?lulas Treg e Th-17 em 90 pacientes e dosagem de citocinas em 64 indiv?duos. Em sua maioria, a amostra foi composta por mulheres (80%) da ra?a branca (85%), com m?dia de idade de 55,8 anos (?11.1anos), tempo de dura??o de doen?a de 6 (2-13) anos (mediana e IIQ). A m?dia do DAS 28 (VSG) foi de 4.28 (?1.64) e do HAQ 1.11 (?0.85). Valores de kappa para a concord?ncia interobservador para o exame ultrassonogr?fico variaram de 0.53 a 1; a correla??o intraclasse para o escore 10 PS foi de 0.964 (IC95% 0.899-0.986, P <0.001) e, para o escore 10 pD, 0.859 (IC95% 0.646-0.941, P <0.001). N?o houve correla??o entre escore 10 PS e escore 10 pD com DAS28 e HAQ. Eros?es ?sseas foram associadas ao escores 10 PS e pD (p=0.002), mas n?o com DAS 28 (P=0,079) e HAQ (P =0,057). Observamos correla??o entre contagem de articula??es edemaciadas com escore 10 PS e escore 10 pD (rS=0.54, P<0.001 e rS=0.39, P<0.001; respectivamente), bem como associa??o com a presen?a de eros?es (P<0.001). N?o observamos correla??o entre contagem de articula??es dolorosas com escore 10 GS (rS = -0.071 P = 0.524), escore 10 pD (rS = -0.196 P = 0.078) ou associa??o com presen?a de eros?es (P=0.248). N?o houve correla??o significativa de escore 10 PS e pD com Treg (rS=0.122, P=0.254 e rS=0,056, P=0.602, respectivamente) e Th-17 perif?ricas (rS=-0.083, P=0.438 e rS=-0.060, P=0,575, respectivamente). N?o se observou associa??o entre percentual de c?lulas Treg e Th-17 e presen?a de eros?es (P=0.831 e P=0.632, respectivamente). A concentra??o de IL-6, mas n?o de outras citocinas, se correlacionou ao DAS28 (rs 0.31 IC95% 0.07 a 0.52), VSG (rs 0.43 IC95% 0.19 a 0.62) e contagem de articula??es edemaciadas (rs 0.39 95%CI 0.15 a 0.59), bem como com escore 10 pD (rs 0.33 IC95% 0.07 a 0.56), capta??o de pD em punhos direito e esquerdo (rs 0.34 IC95% 0.11 a 0.54 e rs 0.45 IC95% 0.21 a 0.64, respectivamente) e PS em punhos direito e esquerdo (rs 0.40 IC95% 0.20 a 0.59 e rs 0.35 IC95% 0.08 a 0.57, respectivamente). Utilizando-se modelo de regress?o linear m?ltipla, observou-se que o escore 10 pD foi positivamente associado a IL-6 independente de DAS28 (P=0.025). N?o houve associa??o entre nenhuma das citocinas testadas e a presen?a de eros?es ?sseas (P? 0.17 para todos os testes). Conclus?es: Em pacientes com AR estabelecida sob uso de remissivos sint?ticos, observamos: aus?ncia de associa??o de escore 10 PS e pD com DAS28 e HAQ; associa??o entre escore 10 PS e pD e eros?es ?sseas; associa??o de contagem de articula??es edemaciadas, mas n?o de articula??es dolorosas, com sinovite e eros?es no US; aus?ncia de associa??o entre achados de US e linf?citos Treg e Th-17 no sangue perif?rico; associa??o entre IL-6 plasm?tica e achados de sinovite no US. A associa??o entre IL-6 e escore pD ocorreu independente do DAS28.