Submitted by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-30T17:28:27Z No. of bitstreams: 1 TES_CRISTINE_RUVIARO_DE_OLIVEIRA_PARCIAL.pdf: 3979228 bytes, checksum: da264217bd5a33ffd8471f140d41c962 (MD5) / Approved for entry into archive by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-30T17:28:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TES_CRISTINE_RUVIARO_DE_OLIVEIRA_PARCIAL.pdf: 3979228 bytes, checksum: da264217bd5a33ffd8471f140d41c962 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-30T17:28:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_CRISTINE_RUVIARO_DE_OLIVEIRA_PARCIAL.pdf: 3979228 bytes, checksum: da264217bd5a33ffd8471f140d41c962 (MD5) Previous issue date: 2017-03-03 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Introduction: The central peripheral insertion catheter (PICC) has been an imperative in the survival of smaller and smaller newborns, since it makes possible the administration of parenteral nutrition (NP) and concentrated solutions in deep access, through a border procedure Of the bed. Although there is a recommendation to use exclusive access for infusion of NP, in the perspective that its properties are preserved avoiding interaction with other intravenous (IV) solutions, this does not always occur in daily practice, due to the low availability of Neonatal double lumen catheters and also by the lack of knowledge in this area of knowledge. Thus, this study has as main objective to compare infection rates in infants hospitalized in a Neonatal Intensive Care Unit (NICU) associated to the use of mono-lumen PICC in relation to the double lumen, the latter being an exclusive route for infusion Of NP. In addition, it intends to: compare the frequency of the isolated germs, the occurrence of other complications, the time of permanence of the PICC for the infusion of NP; To determine the frequency of the need for peripheral accesses (veno-punctures in addition to the PICC), and the type of complication associated with the use of a peripheral catheter in relation to PICC in newborns (NB) using the mono-lumen catheter To the double lumen. Methodology: This was a randomized, comparative study with a NICU of a university hospital in the interior of the State of Rio Grande do Sul as the study scenario. Subjects of the study were NB interns who used PICC for infusion of NP and other IV infusions from July 2014 to May 2016. NBs from said NICU with NP prescription and indication of PICC insertion were included. NBs that at the time of insertion of the PICC were diagnosed with clinical or laboratory sepsis (ANVISA-2010 criteria) and / or hematological score> 3 were excluded; Those infants in whom the PICC was not centrally located; RN with permanence of umbilical catheter; Check-list of the PICC insertion procedure with a score lower than 10 and those in which the consent of the parents or guardians to participate in the study was not obtained. Continuous variables were expressed as mean and standard deviation or median and interquartile range, and the categorical variables were in absolute and relative frequency. Statistical tests were used: Student's t-test, Mann-Whitney test, Chi-square test and Fisher's exact test. For control of confounding factors, the Poisson Regression analysis was applied. All tests were considered bidirectional and the differences were considered significant with p <0.05. The study was approved by the Research Ethics Committee (CEP) and registered at the REBEC clinical trial registration site. Results: We included 156 RNs: 78 in the mono-lumen group and 78 in the double-lumen group. The RNs remained for about 8 days with parenteral nutrition (NP) and used the PICC for approximately 10 days in the groups. Almost half of the sample presented some complication, being the suspicion of infection more frequent. There was a significant predominance of disruption (p = 0.001) and a reduction in obstruction rate (0.008) in the mono-lumen catheter, when compared to double. In the double-lumen group, there was a significantly greater withdrawal of the catheter due to suspected infection only due to clinical worsening compared to the mono-lumen. The most frequent germ found in the cultures was Staphylococcus Epidermidis. Approximately 30% of the newborns presented clinical or laboratorial infection related to the catheter, presenting as clinical symptoms: hypoactivity or lethargy, followed by respiratory discomfort and hemodynamic instability. Even using PICC, many RNs required concomitant peripheral venous catheter (CVP), and this need is greater in the mono-lumen group. Approximately 75% of the sample that used CVP presented complications, being the edema, followed by the catheter obstruction the most frequent. The low weight, corrected gestational age at the time of catheter insertion and the need for the 2nd PICC were significantly associated with the proven infection. Conclusion: It was concluded that there was no difference regarding the occurrence of infection with the use of a mono-lumen or double-lumen catheter in the neonatal period. These findings contradict the hypothesis that infection rates would be lower by infusing NP in an exclusive pathway. / Introdu??o: O cateter central de inser??o perif?rica (PICC) tem representado um imperativo na sobreviv?ncia de rec?m-nascidos cada vez menores, por tornar poss?vel a administra??o de nutri??o parenteral (NP) e solu??es concentradas em acesso profundo, por meio de um procedimento a beira do leito. Apesar de existir a recomenda??o de utiliza??o de acesso exclusivo para infus?o de NP, na perspectiva que as propriedades desta sejam preservadas evitando a intera??o com as demais solu??es intra-venosas (IV), isso nem sempre ocorre na pr?tica di?ria, devido a pouca disponibilidade de cateteres duplo l?men neonatais e tamb?m pelo desconhecimento nesta ?rea do conhecimento. Deste modo este estudo tem como objetivo principal comparar as taxas de infec??o em rec?m-nascidos internados em Unidade de Terapia Intensiva Neonatal (UTIN) associadas ao uso de PICC mono l?men, em rela??o ao duplo l?men, sendo este ?ltimo, uma via exclusiva para infus?o de NP. Al?m disso, pretende: comparar a frequ?ncia dos germes isolados, a ocorr?ncia de demais complica??es, o tempo de perman?ncia do PICC para a infus?o de NP; determinar a frequ?ncia da necessidade de acessos perif?ricos (veno-pun??es al?m do PICC), e o tipo de complica??o associada ao uso de cateter perif?rico, em rela??o ao PICC, nos rec?m-nascidos (RN) que utilizaram o cateter mono l?men, em rela??o ao duplo l?men. Metodologia: Trata-se de um ensaio cl?nico randomizado, comparativo, tendo como cen?rio de estudo a UTIN de um hospital universit?rio do interior do Estado do Rio Grande do Sul. Os sujeitos da pesquisa foram os RNs internados na UTIN que utilizaram PICC para infus?o de NP e demais infus?es IV no per?odo de julho de 2014 a maio de 2016. Foram inclu?dos os RN da referida UTIN com prescri??o de NP e indica??o da inser??o de PICC. Foram exclu?dos os RN que no momento da inser??o do PICC tinham diagn?stico de sepse cl?nica ou laboratorial (crit?rios da ANVISA-2010), e/ou escore hematol?gico > 3; os RN nos quais o PICC n?o estava em localiza??o central; RN com perman?ncia de cateter umbilical; check-list do procedimento de inser??o do PICC com pontua??o inferior a 10 e aqueles em que n?o se obteve o consentimento dos pais ou respons?veis para a participa??o no estudo. As vari?veis cont?nuas foram expressas como m?dia e desvio padr?o ou mediana e intervalo interquartil, e as categ?ricas em frequ?ncia absoluta e relativa. Foram utilizados os testes estat?sticos: teste t-Student, teste de Mann-Whitney, Qui-quadrado e teste exato de Fisher. Para controle de fatores confundidores, a an?lise de Regress?o de Poisson foi aplicada. Todos os testes foram considerados bidirecionais e as diferen?as foram consideradas significativas com p < 0,05. O estudo foi aprovado pelo Comit? de ?tica em Pesquisa (CEP) e registrado no site para registro de ensaios cl?nicos ? REBEC. Resultados: Foram inclu?dos 156 RNs: 78 no grupo mono-l?men e 78 no duplo-l?men. Os RNs permaneceram cerca de 8 dias com nutri??o parenteral (NP) e utilizaram o PICC por aproximadamente 10 dias nos grupos. Quase metade da amostra apresentou alguma complica??o, sendo a suspeita de infec??o a mais frequente. Houve um predom?nio significativo de rompimento (p=0,001) e uma redu??o no ?ndice de obstru??o (0,008) no cateter mono-l?men, quando comparado ao duplo. No grupo duplo-l?men, houve uma retirada significativamente maior do cateter devido a suspeita de infec??o somente por piora cl?nica, em compara??o ao mono-l?men. O germe mais frequente encontrado nas culturas foi o Staphylococcus Epidermidis. Cerca de 30% dos RNs apresentaram infec??o cl?nica ou laboratorial relacionado ao cateter, apresentando como sintomas cl?nicos: hipoatividade ou letargia, seguido de desconforto respirat?rio e instabilidade hemodin?mica. Mesmo utilizando o PICC, muitos RNs necessitaram de cateter venoso perif?rico (CVP) concomitante, sendo essa necessidade maior no grupo mono-l?men. Aproximadamente 75% da amostra que utilizou CVP apresentou complica??es, sendo o edema, seguido da obstru??o do cateter as mais frequentes. O baixo peso, a idade gestacional corrigida no momento da inser??o do cateter e a necessidade do 2? PICC foram associados significativamente com a infec??o comprovada. Conclus?o: Conclui-se que n?o houve diferen?a quanto a ocorr?ncia de infec??o com o uso de cateter mono-l?men ou duplo-l?men, no per?odo neonatal. Estes achados contrariam a hip?tese de que os ?ndices de infec??o seriam menores infundindo a NP em via exclusiva.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 386732.pdf: 399583 bytes, checksum: fd819014b2d965768d8d68375135c0ff (MD5) Previous issue date: 2006-09-14 / O CD14 ? uma prote?na de 53-55kD que n?o possui por??o citoplasm?tica e atua como um receptor de uma ampla gama de microorganismos onde reconhece diferentes estruturas de lipopolissacar?deos (LPS). O CD14 pode ser encontrado sob duas formas: na superf?cie de mon?citos, macr?fagos e neutr?filos (mCD14 ou CD14 de membrana) ou na forma de CD14 sol?vel (sCD14). Tanto o mCD14 quanto o sCD14 desempenham um importante papel na gera??o de uma resposta imune inata contra pat?genos bacterianos. A ativa??o do sistema imune inato por componentes bacterianos pode ser modulada pela diferente express?o do mCD14 e varia??es do sCD14. Sugere-se que a express?o aumentada do CD14 pode trazer benef?cios para pacientes com sepse. Um polimorfismo de nucleot?deo ?nico (SNP) de transi??o de uma citosina para uma timina na posi??o -260 na regi?o promotora do gene CD14 foi identificado. Este SNP parece ter um papel significante na express?o do CD14. De fato, existem estudos sugerindo que homozigotos TT apresentam um aumento na densidade do mCD14 e nos n?veis de sCD14 quando comparados aos indiv?duos que carregam o alelo C. O objetivo deste estudo foi verificar se o polimorfismo -260C>T do promotor do gene que codifica para o CD14 interfere na sua express?o, e se se relaciona com o desfecho de sobrevida em pacientes s?pticos, al?m de verificar se existe diferen?a significativa na express?o do CD14 entre indiv?duos saud?veis e pacientes s?pticos. Observamos que a express?o do CD14, medida pela densidade de mCD14 e n?veis de sCD14, estava aumentada em pacientes s?pticos quando comparados com indiv?duos saud?veis e tamb?m detectamos que o gen?tipo TT estava associado com altos n?veis de mCD14. N?s verificamos, ap?s incuba??o com LPS, que existe um aumento significativo na densidade de mCD14. Esta foi a primeira vez em que pacientes s?pticos foram avaliados para o polimorfismo -260C>T, express?o do CD14 e mortalidade. Entretanto, nenhuma associa??o estatisticamente significativa entre estas tr?s vari?veis foi encontrada. Nossos resultados est?o de acordo com estudos pr?vios, nos quais o aumento da express?o do CD14 pode estar associado com o gen?tipo TT, embora isto n?o tenha influenciado o desfecho cl?nico dos pacientes s?pticos.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ValeriaCRD.pdf: 561661 bytes, checksum: db7bb8f80270953b3297a614e463feeb (MD5) Previous issue date: 2003-03-21 / Infections for intestinal parasites are one of the main morbidade causes in humans and, its relationships with socioeconomic levels and hygiene conditions in countries in development are already very established. Many works, even so, they are being accomplished to elucidate the complex interactions among nutrition, these infections and answer imunol?gica, because it is seen that malnutrition commits the immunity increasing the susceptibilidade for infectious diseases and these for its time can harm the state human nutricional. It is known that sponge helm?nticos they stimulate synthesis of IgE so much policlonal as specific for the same ones and that IgA secretora, main imunoglobulina of defense of the mucous ones, can act against protozoa as the Giardia lamblia and against helmintos as Trichuris tichiura and Strongyloides stercorales. Some studies show that the malnutrition energy prot?ica influences in the production of these answers, but some authors show results divergentes. In this work it was evaluated the levels of total IgE, IgA s?rica and secretora, contagem of sanguine eosin?filos, levels of proteins s?ricas and state nutricional, in 103 children of low socioeconomic level, to discover a correlation between those and infection for enteroparasitas. They participated in the study children of both sexes, with age of 3 to 6 years, visitors of the same creche and residents in a neighborhood with precarious hygiene conditions and basic saneamento, in the city of Christmas. The obtained results showed that the faulty environmental and socioeconomic conditions favored to a high infection frequency for enteroparasitas, mainly Trichuris trichiura and Ascaris lumbricoides between the helmintos and Endolimax sleep and Gi?rdia lamblia among the protozoa. Light malnutrition without deficit prot?ico was observed in 30% of the children, which didn't also present significant deficiencies of IgA s?rica and secretora. The sponged children / Infec??es por parasitas intestinais s?o uma das principais causas de morbidade em humanos e, suas rela??es com n?veis s?cio-econ?micos e condi??es de higiene em pa?ses em desenvolvimento j? s?o bem estabelecidas. Muitos trabalhos, por?m, est?o sendo realizados para elucidar as complexas intera??es entre nutri??o, estas infec??es e resposta imunol?gica, pois ? visto que desnutri??o compromete a imunidade aumentando a susceptibilidade para doen?as infecciosas e estas por sua vez podem prejudicar o estado nutricional humano. Sabe-se que parasitas helm?nticos estimulam s?ntese de IgE tanto policlonal como espec?fica para ant?geno dos mesmos e que IgA secretora, principal imunoglobulina de defesa das mucosas, pode atuar contra protozo?rios como a Giardia lamblia e contra helmintos como Trichuris tichiura e Strongyloides stercorales. Alguns estudos mostram que a desnutri??o energ?tico prot?ica influencia na produ??o destas respostas, mas outros autores mostram resultados divergentes. Neste trabalho avaliou-se os n?veis de IgE total, IgA s?rica e secretora, contagem de eosin?filos sangu?neos, n?veis de prote?nas s?ricas e estado nutricional, em 103 crian?as de baixo n?vel s?cio-econ?mico, para se averiguar uma correla??o entre esses e infec??o por enteroparasitas. Participaram do estudo crian?as de ambos os sexos, com idade de 3 a 6 anos, freq?entadoras da mesma creche e residentes em um bairro com prec?rias condi??es de higiene e saneamento b?sico, na cidade do Natal. Os resultados obtidos mostraram que as deficientes condi??es ambientais e s?cio-econ?micas favoreceram a uma alta freq??ncia de infec??o por enteroparasitas, principalmente Trichuris trichiura e Ascaris lumbricoides entre os helmintos e Endolimax nana e Gi?rdia lamblia entre os protozo?rios. Desnutri??o leve sem d?ficit prot?ico foi observada em 30% das crian?as, as quais tamb?m n?o apresentaram defici?ncias significativas de IgA s?rica e secretora. As crian?as parasitadas apresentaram eosinofilia sangu?nea e n?veis s?ricos de IgE total elevados confirmando a importante participa??o das mesmas na resposta imune contra helmintos. Pode-se, portanto, sugerir que as crian?as apesar de poliparasitadas n?o estavam com sua resposta imune de mucosa contra parasitas, prejudicada, provavelmente por ainda n?o estarem intensamente infectados, como observado na contagem de ovos por grama de fezes e tamb?m por n?o terem seu estado nutricional gravemente comprometido

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ElianaLTN_TESE.pdf: 2435421 bytes, checksum: e2270899f92315394897270d5f3384f3 (MD5) Previous issue date: 2009-10-05 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Visceral leishmaniasis (VL) has undergone changes in terms of clinical and epidemiological presentation worldwide. Urbanization has been described in different regions of Brazil and the world, as well as in the state of Rio Grande do Norte. These changes have impacted in the clinical outcome of Leishmania infection. A new clinical entity called co-infection of HIV/Leishmania has been described as a consequence of overlapping areas of occurrence of VL and HIV / AIDS in different countries including Brazil. The aim of this study was to define the process of periurbanization of the LV and describe a case series of co-infection HIV / Leishmania in Rio Grande do Norte. A new demographic pattern of VL was detected, with an increase in the number VL adult male subjects. Analysis of spatial distribution of VL in the state of Rio Grande do Norte showed that in the past 20 years VL tends to occur in larger cities and therefore the highest risk disease is greater in the eastern and western regions. The first region included Natal, the state capital, where the process of suburbanization began in 1990, and more recently the city of Mossor?, the second largest state, where periurbanization began in the last five years. In 1990, the emergence of co-infection HIV/Leishmania in the state was observed. Case-control study revealed that the new clinical entity affects adult males, who acquired HIV through sexual intercourse, 40% of those with a preivous history of leishmania infection Relapse and death from LV is increased in HIV positive compared with HIV-negative patients matched by sex and age. This pattern is similar to the observed in Europe, except of the route of transmission, where in Europe occured concomitantly, by parenteral route in drug users. Analysis of spatial distribution identified overlapping new areas of occurrence of HIV / AIDS and LV potentially signaling to increased risk of this new clinical entity as described above. Therefore, epidemiological surveillance for co-infection HIV / Leishmania should be adopted in all areas of risk of VL. At the same time, it is necessary to evaluate drug resistance currently used in the treatment of VL, as well as parenteral transmission of L infantum/ chagasi in areas where drug dependence is a risk factor for HIV acquisition / Leishmaniose visceral (LV) vem sofrendo modifica??es do ponto de vista cl?nico e epidemiol?gico mundialmente. Urbaniza??o foi descrita em diferentes regi?es do Brasil e do mundo, como tamb?m no estado do Rio Grande do Norte, influenciando sobremaneira no comportamento cl?nico da doen?a. Uma nova entidade cl?nica denominada co-infec??o HIV/leishmania vem sendo descrita, como conseq??ncia da sobreposi??o de ?reas de ocorr?ncia de LV e HIV/AIDS, em diferentes pa?ses incluindo o Brasil. O objetivo deste estudo foi definir o processo de periurbaniza??o da LV e descrever s?rie de casos da co-infec??o HIV/Leishmania no Rio Grande do Norte. Mudan?a no padr?o demogr?fico da LV no RN foi detectada, sendo observado aumento no n?mero de indiv?duos na idade adulta, do sexo masculino. An?lise da distribui??o espacial demonstrou que nos ?ltimos 20 anos LV tende a instalar-se em munic?pios de maior porte e, portanto, mais urbanizados do RN, sendo as regi?es leste e oeste as de maior risco para a doen?a. A primeira regi?o inclui Natal, capital do estado, onde o processo de periurbaniza??o iniciou-se, em 1990 e, a outra, inclui a cidade de Mossor?, segunda maior do estado, onde a periurbaniza??o iniciou-se nos ?ltimos 5 anos. Tamb?m em 1990 registra-se a emerg?ncia da co-infec??o HIV/ Leishmania no estado. Estudo tipo caso-controle revelou que a nova entidade cl?nica acomete indiv?duos adultos do sexo masculino, que adquirem HIV por via sexual; 40% destes com hist?ria de infec??o pr?via por leishmania. Reca?das e ?bito por LV ? maior em pacientes HIV positivos comparados com pacientes HIV negativos, pareados por sexo e idade. Esse padr?o ? bastante semelhante ao europeu, exceto, pela via de transmiss?o, que ocorre l? de modo concomitante, por via parenteral, em usu?rios de drogas il?citas. Adicionalmente, a an?lise de distribui??o espacial identificou sobreposi??o de ?reas de ocorr?ncia de HIV/AIDS e LV no RN apontando para risco aumentado da nova entidade cl?nica descrita acima. Portanto, vigil?ncia epidemiol?gica para co-infec??o HIV/Leishmania deve ser adotada em todas as ?reas de risco. Ao mesmo tempo, faz-se necess?rio avaliar resist?ncia ?s drogas utilizadas atualmente, no tratamento da LV, bem como, transmiss?o parenteral de L infantum/chagasi, nas ?reas onde a depend?ncia de droga ? fator de risco para aquisi??o de HIV

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:53:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 382603.pdf: 296807 bytes, checksum: 38261004e2920311f715efbf0e1c9850 (MD5) Previous issue date: 2005-12-16 / O Clostridium difficile (Cd) ? um bacilo Gram-positivo, anaer?bio, formador de esporos, amplamente distribu?do no ambiente hospitalar, fazendo parte da microbiota do trato gastrointestinal de humanos e animais. Est? associado com a colite pseudomembranosa (PMC) e outras desordens intestinais, tais como diarr?ia, em virtude do uso pr?vio de antimicrobianos. O objetivo deste estudo foi avaliar retrospectivamente a preval?ncia da toxina A do C. difficile em indiv?duos que realizaram exame no laborat?rio Weinmann no per?odo entre junho de 2003 e dezembro de 2004. Para a pesquisa da toxina A foi utilizado o sistema Vidas?CD Toxin A II (CDA2, Biom?rieux S.A.), que permite a detec??o da toxina A do Cd atrav?s do m?todo ELFA (Enzime Linked Fluorescent Assay). Foram analisados 288 resultados, sendo 91 (31,6%) de origem hospitalar e 197 (68,4%) de origem ambulatorial. A preval?ncia de Cd nas amostras hospitalares foi de 11,0% e nas de origem ambulatorias foi de 11,7%. Nos pacientes idosos (n=139), a m?dia de idade foi de 76,3 anos, com uma mediana de 76 anos, e preval?ncia de Cd de 9,4%. Entre os pacientes hospitalizados que fizeram uso de antibi?ticos, a preval?ncia de Cd foi de 11,5%. O tratamento dos pacientes hospitalizados com um ?nico tipo de antibi?tico mostrou uma rela??o significativa com a positividade para Cd (p=0,001), quando comparado com o uso de mais de uma classe de antibi?ticos. Foi pesquisada uma rela??o entre a preval?ncia de Cd e presen?a de febre, dor abdominal, hipoalbuminemia, desidrata??o, desequil?brio eletrol?tico, leuc?citos fecais e resultado de prote?na C-reativa, sendo verificada uma associa??o estatisticamente significativa somente entre hipoalbuminemia e positividade para Cd (p=0,048).

Submitted by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-30T18:29:48Z No. of bitstreams: 1 TES_LEONARDO_PEDRAZZA_PARCIAL.pdf: 9312449 bytes, checksum: e82cef97eb17ae6eefdb30bc5fe133ed (MD5) / Approved for entry into archive by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-30T18:29:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TES_LEONARDO_PEDRAZZA_PARCIAL.pdf: 9312449 bytes, checksum: e82cef97eb17ae6eefdb30bc5fe133ed (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-30T18:30:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_LEONARDO_PEDRAZZA_PARCIAL.pdf: 9312449 bytes, checksum: e82cef97eb17ae6eefdb30bc5fe133ed (MD5) Previous issue date: 2017-03-24 / Mesenchymal stem cells (MSC) were first identified by Friedenstein and Petrakova (1966), who isolated these progenitor cells from rat bone marrow and found that these cells are able to differentiate into connective tissue lineage including bone, adipose tissue, cartilage and muscle. MSCs have emerged in recent years as therapeutic tools based on four important features: differentiation potential, capacity to modulate immune responses, pro-angiogenic and repair promoting capacities, and low immunogenicity, the latter feature may allow allogeneic treatments. Based on their immunomodulatory properties and paracrine effects through trophic factors with anti-fibrotic, anti-apoptotic or pro-angiogenic properties, MSCs are considered a promising instrument for cell therapy, in particular for inflammatory diseases. MSCs regulate the function of a broad range of immune cells, and are activated by inflammatory mediators released from activated immune cells. The mechanisms involved in the immunoregulatory activity of MSCs are still under investigation. Therefore, MSCs become a potential treatment alternative for sepsis and for acute lung infection, which may lead to the interruption of the sequence in the pathogenesis and cause mortality reduction of both pathologies. The principal objective of this study was to evaluate the therapeutic and immunomodulatory effect of MSCs in the treatment of sepsis and acute lung injury and search for their possible mechanisms of action. Our results demonstrated for the first time that the reduction of inflammation in sepsis caused by treatment with MSCs is directly involved in the inhibition of the pathway of mitogen-activated proteins (MAPKs) and that MSCs were unable to modulate the expression of toll-like receptors. During acute lung injury (ALI), the immunomodulation caused by the treatment and the decrease of the oxidative stress that consequently led to a decrease in the formation of extracellular neutrophil network (NETs), leading to an increase in the survival of animals with LPA. The promising results obtained in these studies are encouraging and suggest that MSCs might be a therapeutic option to treat sepsis and acute lung infection in patients in the future. / As c?lulas-tronco mesenquimais (MSC) foram identificadas primeiramente por Friedenstein e Petrakova (1966), que isolaram estas c?lulas progenitoras a partir da medula ?ssea de rato e observaram serem capazes de se diferenciarem em linhagem de tecido conectivo, incluindo osso, tecido adiposo, cartilagem e m?sculo. As MSCs surgiram nos ?ltimos anos como ferramentas terap?uticas baseadas em quatro caracter?sticas importantes: potencial de diferencia??o, capacidade para modular a resposta imune, capacidades pr?-angiog?nicas promovendo regenera??o tecidual, e baixa imunogenicidade, sendo que esta ?ltima caracter?stica pode permitir tratamentos alog?nicos. Com base nas suas propriedades imunomoduladoras e efeitos par?crinos atrav?s de fatores tr?ficos com propriedades anti-fibr?ticas, anti-apopt?ticas ou pr?-angiog?nicas, as MSCs s?o consideradas um instrumento promissor para a terapia celular, em particular para doen?as inflamat?rias. As MSCs regulam as fun??es de uma ampla gama de c?lulas imunes, e s?o ativadas por mediadores inflamat?rios liberados de c?lulas imunes ativadas. Os mecanismos envolvidos na atividade imunorreguladora de MSCs est?o ainda sob investiga??o. Desta forma, as c?lulas-tronco mesequimais se tornam uma potencial alternativa de tratamento para a sepse e para infec??o pulmonar aguda, podendo levar a interrup??o do curso da patog?nese, e provocar a redu??o da mortalidade de ambas patologias. O principal objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito terap?utico e imunomodulador de c?lulas-tronco mesenquimais no tratamento da sepse e da les?o pulmonar aguda e buscar os seus poss?veis mecanismos de a??o. Nossos resultados demonstraram pela primeira vez, que a redu??o da inflama??o na sepse provocada pelo tratamento com c?lulas-tronco mesenquimais est? diretamente envolvido a inibi??o da via das prote?nas ativadas por mit?genos (MAPKs) e que as MSCs foram incapazes de modular a express?o de receptores do tipo toll. Durante a les?o pulmonar aguda (LPA) ficou evidente a imunomodula??o provocada pelo tratamento e a diminui??o do estresse oxidativo que consequentemente ocasionou a uma diminui??o da forma??o das redes extracelulares de neutr?filos (NETs), levando a um aumento na sobrevida dos animais com LPA. Os resultados promissores obtidos neste estudo s?o encorajadores e sugerem que as MSCs podem ser uma op??o terap?utica para tratar a sepse e a les?o pulmonar aguda em pacientes no futuro.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:50:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 406669.pdf: 310441 bytes, checksum: d1c730c8194f34c27f407777f4296a87 (MD5) Previous issue date: 2008-08-28 / Os Staphylococcus aureus resistentes ? meticilina (MRSA) encontram-se entre os principais agentes de infec??o hospitalar, para os quais h? grande dificuldade em se obter antimicrobianos para o seu controle. A resist?ncia ? meticilina ? codificada pelo gene mecA, que est? localizado em um elemento gen?tico m?vel denominado staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec). O SCCmec tamb?m possui o complexo g?nico ccr (ccrA e ccrB ou ccrC) e a regi?o J, que cont?m genes que conferem resist?ncia a drogas n?o beta-lact?micas. S?o conhecidos cinco tipos de SCCmec, os tipos I, II e III predominantes em infec??es nosocomiais, enquanto os tipos IV e V s?o, mais comumente, associados a infec??es adquiridas na comunidade. Neste contexto, este estudo se prop?s a realizar a caracteriza??o fenot?pica e genot?pica da resist?ncia ? meticilina de isolados de S. aureus e fenot?pica da resist?ncia ? vancomicina, bem como a determina??o dos subtipos de ccr associados. Para tanto, foram avaliadas 40 amostras de S. aureus obtidas no Servi?o de Microbiologia do Laborat?rio de An?lises Cl?nicas (LABIMED/Hospital de Caridade Astrogildo de Azevedo Santa Maria/RS). A concentra??o inibit?ria m?nima ?s drogas oxacilina e vancomicina foi determinada pelo m?todo de dilui??o em agar. A detec??o de mecA e dos al?tipos de ccr foi realizada atrav?s da rea??o em cadeia da polimerase (PCR). Todos os isolados testados foram considerados resistentes ? oxacilina. Nenhum dos isolados foi classificado como resistente ? vancomicina; no entanto, 25% (10/40) dos isolados apresentaram resist?ncia intermedi?ria ? vancomicina. O gene mecA foi detectado em todos os isolados. O ccrAB1 foi detectado em nove isolados (22,5%) e o ccrAB3 em 23 (57,5%). Oito isolados foram caracterizados como n?o ccrAB1 e n?o ccrAB3. A propor??o de al?tipos ccrAB3, associado a SCCmec tipo III, sugere que o clone epid?mico brasileiro (BEC) tamb?m possa estar presente nos hospitais do Estado do Rio Grande do Sul (Brasil). Considerando que a caracteriza??o do ccr nunca havia sido relatada a partir de isolados desta regi?o do Brasil, este trabalho pode contribuir para o estudo da din?mica do MRSA na Am?rica do Sul.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 437675.pdf: 3014292 bytes, checksum: 10c5c967edfd4e61677f7867c8186a73 (MD5) Previous issue date: 2011-12-09 / Tuberculosis (TB) is an infectious disease mainly caused by Mycobacterium tuberculosis, which currently infects one-third of the world s population. Despite the availability of the Bacille Calmette-Gu?rin vaccine and effective short-course chemotherapy, the increasing global burden of TB has been linked to the co-infection with HIV, the emergence of multi, extensively and now totally drug-resistant strains. Furthermore, the capacity of M. tuberculosis to remain viable within infected hosts in a long-term asymptomatic infection is an additional problem for the control of TB. Nucleotides biosynthesis pathways provide promising molecular targets for the development of new vaccines and therapeutic strategies to control the global incidence of TB. Uracil phosphoribosyltransferase (UPRT) catalyzes the conversion of uracil and 5'-phosphoribosyl-a- 1'-pyrophosphate (PRPP) to uridine 5'-monophosphate (UMP) and pyrophosphate (PPi). UPRT plays an important role in the pyrimidine salvage pathway since its product (UMP) is a common precursor of all pyrimidine nucleotides. This work presents cloning, recombinant expression in Escherichia coli, and purification of the upp-encoded M. tuberculosis UPRT (MtUPRT). Mass spectrometry analysis and N-terminal amino acid sequencing confirmed the identity of homogeneous MtUPRT. The molecular mass of the native MtUPRT was shown to follow a monomer-tetramer association model by analytical ultracentrifugation. This enzyme did not show a pronounced regulation by GTP as this nucleotide did not affect enzyme kinetic parameters, and its binding was not detected by isothermal titration calorimetry (ITC). Initial velocity and ITC studies suggested that catalysis proceeds through a sequential ordered mechanism, in which PRPP binds first, followed by uracil binding, and PPi is the first product to be released, followed by UMP. ITC also showed that PRPP and UMP binding are thermodynamically favorable processes. The pH-rate profiles indicated that groups with pK values of 5.7 and 8.1 are important for catalytic activity and a group with a pK value of 9.45 is involved in PRPP binding. Pre-steady-state kinetic data suggested that product release is not the rate-limiting step of the reaction catalyzed by MtUPRT. Kinetic fluorescence studies demonstrated two forms of enzyme in solution of which only one can bind to PRPP. Knockout of the upp gene showed that this gene is not essential for M. tuberculosis H37Rv in the employed experimental conditions and the absence of upp gene did not affect the mycobacterium growth. UPRT is expressed in both high and low oxygen conditions of M. tuberculosis H37Ra growth. MtUPRT is inhibited by an active metabolite of isoxyl, which does not seem to inhibit RNA polymerase, adenine phosphoribosyltransferase and hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase. Minimum inhibitory concentration of isoxyl for M. tuberculosis mutant for upp gene, complemented and wild type strains was 12.8 &#956;g/mL, meaning that the absence of the upp gene did not affect M. tuberculosis sensitivity to isoxyl. Altogether, these data may be useful for a better understanding about the nucleotide biosynthesis pathway in M. tuberculosis and as a framework on which to base efforts towards the development of efficient prophylactic and therapeutic strategies to decrease the global incidence of this pathogen. / A tuberculose (TB) ? uma doen?a infecciosa causada principalmente pelo Mycobacterium tuberculosis, o qual atualmente infecta um ter?o da popula??o mundial. Apesar da disponibilidade da vacina Bacille Calmette-Gu?rin e da eficaz quimioterapia de curta dura??o, o aumento na incid?ncia global da TB est? relacionado ? co-infec??o com o HIV e ao surgimento de cepas multi, extensivamente e agora totalmente resistente a drogas. Al?m disto, a capacidade do M. tuberculosis de permanecer vi?vel dentro do hospedeiro infectado por longo per?odo em uma infec??o assintom?tica ? um problema adicional para o controle da TB. As rotas de bioss?ntese de nucleot?deos fornecem alvos moleculares promissores para o desenvolvimento de novas vacinas e estrat?gias terap?uticas para controlar a incid?ncia global de TB no mundo. A uracil fosforribosil transferase (UPRT) catalisa a convers?o de uracil e 5 - fosforribosil-a-1 -pirofosfato (PRPP) a uridina 5 -monofosfato (UMP) e pirofosfato (PPi). A UPRT tem um papel importante na rota de salvamento das pirimidinas j? que seu produto (UMP) ? o precursor comum de todos os nucleot?deos pirim?dicos. Este trabalho apresenta a clonagem, express?o recombinante em E. coli, e a purifica??o da UPRT de M. tuberculosis codificada pelo gene upp (MtUPRT). Adicionalmente, foram realizadas an?lises de espectrometria de massas e sequenciamento N-terminal que confirmaram a identidade da MtUPRT homog?nea. A massa molecular da MtUPRT nativa seguiu um modelo de associa??o mon?mero-tetr?mero por ultracentrifuga??o anal?tica. Esta enzima n?o mostrou uma regula??o pronunciada por GTP j? que este nucleot?deo n?o afetou os par?metros cin?ticos da enzima, e a sua liga??o n?o foi detectada por calorimetria de titula??o isot?rmica (ITC). A velocidade inicial e os estudos de ITC sugeriram que a cat?lise procede atrav?s de um mecanismo ordenado sequencial, no qual o PRPP liga primeiramente, seguido pela liga??o de uracil, e PPi ? o primeiro produto a ser liberado, seguido pelo UMP. ITC tamb?m mostrou que a liga??o de PRPP e UMP s?o processos termodinamicamente favor?veis. O perfil de pH indicou que grupamentos com os valores de pK pr?ximos de 5,7 e 8,1 s?o importantes para a atividade catal?tica e um grupamento com valor de pK pr?ximo a 9,45 est? envolvido na liga??o do PRPP. Dados de cin?tica no estado pr?-estacion?rio sugeriram que a libera??o de produto n?o ? a etapa limitante da rea??o catalisada pela MtUPRT. Estudos de fluoresc?ncia demonstraram a exist?ncia de duas formas da enzima em solu??o, das quais apenas uma pode ligar ao PRPP. O nocaute do gene upp demonstrou que este gene n?o ? essencial para o M. tuberculosis H37Rv nas condi??es empregadas no experimento e a aus?ncia do gene upp n?o afetou o crescimento micobacteriano. A UPRT mostrou ser expressa tanto em altas como em baixas concentra??es de oxig?nio. A MtUPRT foi inibida por um metab?lito ativo do isoxyl, que n?o parece inibir as enzimas RNA polimerase, adenina fosforribosil transferase e hipoxantinaguanina fosforribosil transferase. A concentra??o inibit?ria m?nima de isoxyl para as cepas de M. tuberculosis mutante para o gene upp, complementada e tipo selvagem foi de 12,8 &#956;g/mL, o que significa que a aus?ncia do gene upp n?o afetou a sensibilidade do M. tuberculosis ao isoxyl. Assim, estes dados podem ser ?teis para um melhor entendimento sobre a via de bioss?ntese de nucleot?deos em M. tuberculosis e podem servir como base para o desenvolvimento de estrat?gias terap?uticas e preventivas eficientes para diminuir a incid?ncia global deste pat?geno.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 439219.pdf: 722099 bytes, checksum: 87b93549e65018c129416830692d4bfc (MD5) Previous issue date: 2012-03-30 / Stenotrophomonas maltophilia is an important opportunistic and emerging pathogen commonly related to nosocomial infections and found in different environmental sources, including hospital settings. This microorganism is recognized for presenting intrinsic resistance to a range of important antimicrobials as well as to acquire resistance by horizontal gene transfer, which reduces the effective options for the treatment of infections caused by this organism. Therefore, the aim of this study was to determine the presence of S. maltophilia in the nosocomial environment and characterize the resistance of the environmental isolates, as well as clinical isolates obtained in the same hospital. Then, environmental samples were collected in the general ICU and the Unified Health System hospitalization unit of the S?o Lucas Hospital, Porto Alegre, Brazil. In addition, 100 clinical isolates were sent by the Clinical Pathology Laboratory of the same hospital. All samples were analyzed using a specific protocol for S. maltophilia detection by PCR developed in this study targeting 23S rRNA gene. Subsequently, the antimicrobial resistance was evaluated against ceftazidime, chloramphenicol, levofloxacin, minociclin and trimethoprim/sulfamethoxazole (TMP/SMX). The presence of integrons was verified in all isolates and those that presented reduced susceptibility to TMP/SMX was evaluated the presence of sul1 and sul2 gene, as well as was determined the plasmid profile. All isolates were submitted to detection of smf-1 gene. Among the 936 samples collected in the nosocomial environment, S. maltophilia was identified in 28. High rates of susceptibility to minocycline, levofloxacin and chloramphenicol were observed, and all of the 19 isolates that presented reduced susceptibility to TMP/SMX carried the sul1 gene, 14 of them presented class 1 integron and nine isolates showed simultaneously sul1 and sul2. All isolates that carried the sul2 gene also presented the 7.3 kb plasmid. The smf-1 gene was detected in 31 S. maltophilia isolates. The presence of S. maltophilia in hospital environment and medical devices indicates the permanence of this microorganism in the nosocomial environment, what can constitute a risk to infection for other hospitalized patients. In addition, the data obtained in this study in relation to TMP/SMX susceptibility can suggest that the resistance to these drugs have the tendency to increase, especially due to resistance determinants to these drugs can be associated to mobile genetic elements, which may facilitate horizontal transfer and the spread of these resistance genes. / Stenotrophomonas maltophilia ? um importante pat?geno oportunista e emergente, comumente relacionado a infec??es nosocomiais e encontrado em diferentes locais, incluindo o ambiente hospitalar. Este microrganismo ? reconhecido por apresentar resist?ncia intr?nseca a uma gama importante de antimicrobianos, bem como por adquirir resist?ncia atrav?s de transfer?ncia g?nica horizontal, o que reduz as op??es efetivas para o tratamento de infec??es ocasionadas por este microrganismo. Desta forma, o objetivo deste estudo foi determinar a presen?a de S. maltophilia no ambiente hospitalar e caracterizar a resist?ncia a drogas antimicrobianas dos isolados ambientais, bem como dos isolados cl?nicos obtidos no mesmo hospital. Para tanto, amostras ambientais foram coletadas na UTI Geral e no andar referente ? interna??o pelo Sistema ?nico de Sa?de (SUS) do Hospital S?o Lucas, Porto Alegre, Brasil. Al?m disso, 100 isolados cl?nicos foram cedidos pelo Laborat?rio de Patologia Cl?nica do mesmo hospital. Todas as amostras foram analisadas utilizando um protocolo de detec??o espec?fica de S. maltophilia atrav?s de PCR desenvolvido neste estudo, tendo o gene RNAr 23S como alvo. Posteriormente, foi avaliada a resist?ncia dos isolados frente ? ceftazidima, cloranfenicol, levofloxacina, minociclina e trimetoprim/sulfametoxazol (TMP/SMX). A presen?a de integrons foi verificada em todos os isolados e naqueles com suscetibilidade reduzida a TMP/SMX foi avaliada a presen?a dos genes sul1 e sul2, bem como foi determinado o perfil plasmidial. Todos os isolados foram submetidos ? detec??o do gene smf-1. De um total de 936 amostras coletadas no ambiente hospitalar, S. maltophilia foi identificada em 28. Foram observadas elevadas taxas de suscetibilidade ? minociclina, levofloxacina e cloranfenicol e todos os 19 isolados que apresentaram suscetibilidade reduzida ? combina??o TMP/SMX carrearam o gene sul1, 14 destes apresentaram o integron de classe 1 e nove isolados apresentaram concomitantemente os genes sul1 e sul2. Todos os isolados que carrearam o gene sul2 apresentaram o plasm?deo de 7,3 kb. O gene smf-1 foi detectado em 31 isolados de S. maltophilia. A presen?a de S. maltophilia nos materiais e equipamentos hospitalares indica a perman?ncia destas bact?rias no ambiente hospitalar, podendo constituir risco para infec??o de outros pacientes internados. Al?m disso, os dados obtidos neste estudo em rela??o ? suscetibilidade ? TMP/SMX podem sugerir que a resist?ncia a esta combina??o de drogas possa estar em ascens?o, especialmente porque os determinantes de resist?ncia a estas drogas podem estar associados a elementos gen?ticos m?veis, o que facilitaria a transfer?ncia horizontal e a dissemina??o destes genes de resist?ncia.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 403122.pdf: 903344 bytes, checksum: 70a7a39d70ab86af4f6f685bcd848d0c (MD5) Previous issue date: 2005-09-06 / Introdu??o: As perfura??es esof?gicas possuem grande potencial de morbi-mortalidade. O progn?stico de tais les?es est? na depend?ncia de manejo diagn?stico e terap?utico r?pido e preciso. As complica??es infecciosas de s?tio cir?rgico est?o entre as mais comuns ap?s tratamento cir?rgico das les?es esof?gicas. Conhecer os aspectos epidemiol?gicos dessas les?es dentro de uma institui??o, assim como reconhecer os fatores de risco para complica??es, s?o fundamentais no sentido da diminui??o das mesmas. Objetivos: Identificar fatores de risco significativos para infec??o de s?tio cir?rgico (ISC) ap?s cirurgia por perfura??o esof?gica. M?todo: Estudo de coorte hist?rico, com amostra de 81 pacientes submetidos ? cirurgia para corre??o de perfura??o esof?gica n?o espont?nea, tendo como desfecho infec??es de s?tio cir?rgico (abscesso, mediastinite, empiema e infec??o de ferida operat?ria), no HPS-Porto Alegre. O presente estudo foi realizado no per?odo de junho/1994 a junho/2004. Os dados foram retirados de prontu?rios. As vari?veis preditoras foram a idade, mecanismo de les?o, localiza??o da les?o, tempo de evolu??o, les?es associadas em outras cavidades, les?es associadas na mesma cavidade, gradua??o da les?o, dura??o do procedimento, ISS, RTS e TRISS. As vari?veis foram submetidas ? an?lise bivariada e, ap?s, regress?o log?stica m?ltipla. Resultados: A m?dia de idade foi de 42,6 anos. O sexo masculino predominou com 56 indiv?duos, o que correspondeu a 69%. Em 44% dos pacientes o intervalo de tempo entre o momento da perfura??o e a cirurgia foi at? 6 horas , 15% acima de 6 at? 12 horas, 11% de 12 at? 24 horas e 30% acima de 24 horas. Les?es associadas em outras cavidades ocorreram, do n?mero total de pacientes, 17% no t?rax, 5% no abdome, 5% em extremidades, 4% em coluna e medula e 2% na face. Quanto ? gradua??o da les?o, les?es grau I ocorreram em 8 casos ( 10% ), grau II em 64 casos ( 79% ) e grau III em 9 casos ( 11%). O RTS apresentou uma m?dia de 7,62, com desvio padr?o de 0,58. O ISS teve m?dia de 7,99 e desvio padr?o de 6,54. A m?dia de tempo cir?rgico foi de 117,2 minutos. O TRISS, demonstrado numericamente como probabilidade de ?bito, apresentou m?dia de 2,59 e desvio padr?o de 6,0. O tempo m?dio de interna??o foi de 15,7 dias. Infec??es de s?tio cir?rgico ocorreram em 33 pacientes (41%). Em an?lise bivariada as vari?veis com signific?ncia, P < 0,02, foram a idade &#8805; 50 anos, tempo de evolu??o > 24 horas, les?o grau III, tempo de cirurgia > 120 minutos, les?o associada em outra cavidade e ISS &#8805; 15. Na an?lise por regress?o log?stica m?ltipla as vari?veis com signific?ncia estat?stica foram: idade 50 anos, tempo de evolu??o > 24 horas, les?o em outra cavidade e ISS &#8805; 15. Ocorreram 15 ?bitos, correspondendo a 19%. Conclus?es: Os fatores de risco para infec??o de s?tio cir?rgico, ap?s cirurgia por perfura??o esof?gica, que demonstraram signific?ncia, foram: Idade &#8805; 50 anos, tempo de evolu??o > 24 horas, les?o associada em outra cavidade e ISS &#8805; 15