Submitted by ROBERTO PAULO CORREIA DE ARAÚJO (ppgorgsistem@ufba.br) on 2017-05-24T12:09:41Z No. of bitstreams: 1 THAIANA DE OLIVEIRA SACRAMENTO.pdf: 2144147 bytes, checksum: da22bfec1bea19a06b5a5c97d15831fa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-24T12:09:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 THAIANA DE OLIVEIRA SACRAMENTO.pdf: 2144147 bytes, checksum: da22bfec1bea19a06b5a5c97d15831fa (MD5) / A esclerose múltipla é uma doença que afeta preferencialmente o sistema nervoso central de mulheres jovens, causando-lhes graus variáveis de incapacidades física e cognitiva. Etiologicamente associa fatores ambientais, biológicos, sócioeconômicos e genéticos, como por exemplo genes do MHC classe II, especialmente os alelos HLADRB1* 15. Seu diagnóstico é bastante difícil, mas níveis solúveis de IgG podem sugerir atividade da doença. Objetivo:Determinar a frequência dos alelos HLA DRB1* na população baiana em geral e em portadores de esclerose múltipla atendidos no centro de referência do CHUPES, UFBA, no período de outubro de 2014 a abril de 2015 e associá-las aos níveis séricos de IgG. Metodologia: Estudo do tipo caso-controle, aprovado pelo comitê de ética da Faculdade de medicina da Universidade Federal da Bahia (CAAE: 3517134.0.0000.5577), que envolveu uma amostra de conveniência composta por 197 indivíduos, cujos dados sócioclínico-demográficos foram coletados através de questionário desenvolvido para a pesquisa. A genotipagem dos alelos HLADRB1* foi realizada através da técnica “HLA-DR SSO Genotyping Test” e a determinação dos níveis séricos de IgG por nefelometria. Resultados: A análise quantitativa revelou um perfil genotípico do tipo HLA-DRB1*15 (20,5%) em mulheres (83,0%) das raças negra ou parda (75,0%), com faixa etária entre 30 e 39 anos (28,0%), que desenvolveram a forma surtorremissiva da doença (76,0%), nas fases mais avançadas da vida (55,0%), sem permanência de sequela clínica (70,0%) e que usavam algum tipo de Interferon (58,0%). O IgG sérico para o grupo de doentes alcançou valor médio de 1.410 ± 323 mg/dL, e nos controles, esta média foi de 1.532 ± 310 mg/dL. A análise qualitativa indicou maiores frequências, nas formas progressivas de esclerose múltipla dos grupos alélicos HLA-DRB1*12 (22,0%), e dos alelos HLA-DRB1*13 (12,6%) e HLA-DRB1*15 (22,0%) naqueles indivíduos com a forma surto-remissiva. Negros e pardos demonstraram maior prevalência do alelo HLA-DRB1*15 (24,0%), enquanto que nos brancos maior frequência do alelo HLA-DRB1*07 (20,0%) foi encontrada. Negros e pardos portadores da doença tenderam a apresentar maiores níveis séricos médios de IgG (25,4%). Conclusão: Houve forte associação entre as frequências alélicas encontradas e as variáveis raça/etnia e forma clínica da doença. Nesta população, os níveis séricos de IgG não parecem servir como marcadores de progressividade.

Trypanosoma evansi is a protozoan flagellate that affect cattle, sheep, goats, donkeys, cats and pigs. The disease is particularly important in horses, known as "Mal das Cadeiras", due to deficits characteristic of locomotion in animals infected. The disease has a worldwide distribution, with several reports of natural infections in different regions in Brazil. Several pharmaceutical drugs have been recommended for the prophylaxis and control of the parasite, but over the years, these drugs have lost their effectiveness and protozoan looks developing resistance. The production and use of avian antibodies has aroused great interest in the scientific community because of the diversity of diagnostic and therapeutic applications. Due to the phylogenetic distance, immune diversification mechanisms and transferability of serum immunoglobulin to the egg yolk, currently recognizes a number of advantages to using avian antibodies rather than antibodies of mammals. This study produced a specific immunoglobulin against Trypanosoma evansi from immunization of chickens using an isolate of the parasite. After extraction and purification from egg yolk, cytotoxicity and genotoxicity of these antibodies in cultures of human leukocytes were evaluated. The therapeutic efficacy was tested in Rattus norvegicus. The trial also assessed the use of avian antibody associated with imidocarb dipropionate and diaceturate of diminazene. The toxicity tests showed that immunoglobulin does not produce gene and cell injury. In vivo tests showed increased in longevity and pre-patent period, mainly in rats treated with avian immunoglobulin associated with pharmacological treatment. The immunization and the extraction protocol used in this study allowed obtaining specific antibodies against protozoan and innocuous to the host. Moreover, when administered for therapeutic purposes, strengthens the immune system and prolongs the survival of infected patients. / Trypanosoma evansi é um protozoário flagelado que acomete bovinos, ovinos, caprinos, asininos, felinos e suínos. A enfermidade tem especial importância em equinos, sendo conhecida como mal das cadeiras , devido aos déficits de locomoção característicos em animais infectados. A doença tem distribuição mundial, com vários relatos de infecções naturais em diversas regiões no Brasil. Várias drogas terapêuticas têm sido recomendadas para a profilaxia e controle do protozoário, porém ao longo dos anos estes medicamentos tem perdido a eficácia e o protozoário parece desenvolver resistência. A produção e uso de anticorpos aviários tem despertado grande interesse na comunidade científica devido à diversidade de aplicações diagnósticas e terapêuticas. Devido à distância filogenética, mecanismos de diversificação imune e capacidade de transferência das imunoglobulinas séricas para a gema do ovo, atualmente reconhece-se uma série de vantagens ao utilizar anticorpos aviários ao invés de anticorpos de mamíferos. Neste estudo foi produzido uma imunoglobulina específica contra o T. evansi a partir de imunização de galinhas usando um isolado do protozoário. Após a extração e purificação a partir da gema do ovo, foram avaliadas a citotoxicidade e genotoxicidade destes anticorpos em cultura de leucócitos humanos. A eficácia terapêutica foi testada em Rattus norvegicus. O ensaio também avaliou o uso do anticorpo aviário associado ao dipropionato de imidocarb e diaceturato de diminazene. Os testes de toxicidade mostraram que a imunoglobulina não produz lesões celulares e genéticas. Testes in vivo mostraram aumento da longevidade e período pré-patente, principalmente em ratos tratados com a imunoglobulina aviária associada ao tratamento farmacológico. O protocolo de imunização e extração usados nesta pesquisa permitiu a obtenção de anticorpos específicos contra o protozoário e inócuo para o hospedeiro. Além disso, ao ser administrado com fins terapêuticos, reforça o sistema imunológico e prolonga a sobrevida de pacientes infectados.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-12-14Bitstream added on 2014-06-13T18:50:30Z : No. of bitstreams: 1 komatsu_cg_me_arafcf_parcial.pdf: 79141 bytes, checksum: 0b4eb56ed80953314f75746a43311a53 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-09T14:35:40Z: komatsu_cg_me_arafcf_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-02-09T14:36:21Z : No. of bitstreams: 1 000706724.pdf: 336800 bytes, checksum: 23a7e4a01cf8ec0c9124706da993a93a (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-09T17:15:03Z: 000706724.pdf,Bitstream added on 2015-02-09T17:15:40Z : No. of bitstreams: 1 000706724.pdf: 336800 bytes, checksum: 23a7e4a01cf8ec0c9124706da993a93a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A deficiência da imunoglobulina A (IgA) é definida como níveis séricos de IgA menores que 7mg/dL na presença de níveis séricos normais de IgG e IgM em indivíduos com idade maior que 4 anos. Seus sintomas podem estar associados com doenças como alergias, auto-imunidade, neoplasias e infecções. Diversos nutrientes têm sido descritos por exercerem papel no sistema imunológico, entre eles os minerais zinco e selênio. A deficiência do zinco pode comprometer o sistema imunológico e aumentar a suscetibilidade para doenças graves. Há comprometimento tanto da imunidade inata quanto adaptativa, aumentando a suscetibilidade a infecções por vários patógenos.O selênio é essencial para o funcionamento eficiente de muitos aspectos do sistema imunológico em humanos, e suas funções provavelmente são derivadas das proteínas contendo selênio (selenoproteínas). O presente estudo teve por objetivo avaliar os perfis antropométrico, bioquímico, nutricional e o status de zinco e selênio de pacientes deficientes em IgA, bem como avaliar uma possível correlação entre os micronutrientes avaliados com o estado nutricional. Somente 1 indivíduo apresentou déficit nutricional em relação à antropometria. O consumo de zinco se mostrou adequado em quase toda a amostra (75% das crianças, adolescentes e adultos), assim como ocorreu com o selênio (87,5% de todos os indivíduos), o que condiz com os níveis plasmáticos dos minerais (com níveis adequados de selênio em todos os participantes e de zinco em quase todos). Entretanto, os níveis eritrocitários mostram deficiência de ambos os oligoelementos. Apesar de a amostra estudada não apresentar déficit nutricional relativo à antropometria, há deficiência dos minerais analisados nos eritrócitos / The deficiency of immunoglobulin A (IgA) is defined as serum IgA levels lower than 7mg/dL in the presence of normal serum IgG and IgM levels in individuals older than four years. Your symptoms may be associated with diseases such as allergies, autoimmunity, cancer and infections.Several nutrients have been described by exercising role in the immune system, including the minerals zinc and selenium.The zinc deficiency can compromise the immune system and increase susceptibility to serious illnesses. Both innate and adaptive immunity are compromised, increasing susceptibility to infection by various pathogens. Selenium is essential for the efficient operation of many aspects of the immune system in humans, and their functions are probably derived from proteins containing selenium (selenoproteins). The present study aimed to evaluate the anthropometric, biochemical, and nutritional profiles and the status of zinc and selenium in IgA-deficient patients, and to evaluate a possible correlation between the micronutrients assessed nutritional status.Only one subject showed malnutrition in relation to anthropometry. The zinc intake was adequate in almost the entire sample (75% of children, adolescents and adults), as with selenium (87.5% of all individuals), which is consistent with the plasma levels of minerals (with adequate levels of selenium in all participants and zinc in almost all). However, levels of both trace elements were deficient in the erythrocyte. Although the sample has not shown nutritional deficit based on anthropometry, there is a deficiency of minerals analyzed in erythrocytes

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EdnaMAS_TESE.pdf: 813256 bytes, checksum: 6c2788ba74c72a29680a0f392ee49282 (MD5) Previous issue date: 2013-08-20 / Universidade Federal do Rio Grande do Norte / Este trabalho objetivou estudar a imunoglobulina E total e espec?fica para A. lumbricoides e eosin?filos em crian?as de ?rea end?mica, a fim de avaliar a resposta imune do tipo Th2 e relacionar os dados obtidos com a idade, sexo e intensidade da infec??o numa popula??o formada por 205 crian?as com faixa et?ria de 1 a 10 anos, de ambos os sexos e baixo n?vel socioecon?mico. Foram analisadas amostras fecais das crian?as, pelos m?todos de Blagg e Cols. e Kato-katz, determinadas as dosagens s?ricas de IgE total, IgE espec?fica para A. lumbricoides, pelo m?todo ImmunoCAP e realizada a contagem relativa de eosin?filos no sangue perif?rico. Os resultados revelaram uma ocorr?ncia de 182 (88,8 %) para enteroparasitas, 168 (81,9%) para helmintos intestinais e 140 (68,3%) para A. lumbricoides. A mediana dos n?veis s?ricos de IgE total e espec?fica e o n?mero de eosin?filos se apresentaram acima dos valores de refer?ncia padr?o (mediana 480 kU/L, 0,74 kU/L e 8 %). Ocorreu uma diferen?a significante nos n?veis de IgE total, IgE espec?fica e no n?mero de eosin?filos entre as crian?as parasitadas por A. lumbricoides e as n?o parasitadas (p = 0,02; <0,01; < 0,03), no entanto, estes, n?o apresentaram diferen?a significativa com a idade e sexos das crian?as e intensidade da infec??o.Houve uma correla??o positiva entre os n?veis de IgE total e IgE espec?fica (r = 0,55). Conclu?mos, portanto, que a infec??o por enteroparasitas, em especial para o A. lumbricoides, induziu uma resposta imune do tipo Th2 com produ??o de IgE total e espec?fica e eosin?filos nas crian?as infectadas

Orientador: Anderson Marliere Navarro / Banca: Flávia Queiroga Aranha de Almeida / Banca: Telma Maria Braga Costa / Resumo: A deficiência da imunoglobulina A (IgA) é definida como níveis séricos de IgA menores que 7mg/dL na presença de níveis séricos normais de IgG e IgM em indivíduos com idade maior que 4 anos. Seus sintomas podem estar associados com doenças como alergias, auto-imunidade, neoplasias e infecções. Diversos nutrientes têm sido descritos por exercerem papel no sistema imunológico, entre eles os minerais zinco e selênio. A deficiência do zinco pode comprometer o sistema imunológico e aumentar a suscetibilidade para doenças graves. Há comprometimento tanto da imunidade inata quanto adaptativa, aumentando a suscetibilidade a infecções por vários patógenos.O selênio é essencial para o funcionamento eficiente de muitos aspectos do sistema imunológico em humanos, e suas funções provavelmente são derivadas das proteínas contendo selênio (selenoproteínas). O presente estudo teve por objetivo avaliar os perfis antropométrico, bioquímico, nutricional e o status de zinco e selênio de pacientes deficientes em IgA, bem como avaliar uma possível correlação entre os micronutrientes avaliados com o estado nutricional. Somente 1 indivíduo apresentou déficit nutricional em relação à antropometria. O consumo de zinco se mostrou adequado em quase toda a amostra (75% das crianças, adolescentes e adultos), assim como ocorreu com o selênio (87,5% de todos os indivíduos), o que condiz com os níveis plasmáticos dos minerais (com níveis adequados de selênio em todos os participantes e de zinco em quase todos). Entretanto, os níveis eritrocitários mostram deficiência de ambos os oligoelementos. Apesar de a amostra estudada não apresentar déficit nutricional relativo à antropometria, há deficiência dos minerais analisados nos eritrócitos / Abstract: The deficiency of immunoglobulin A (IgA) is defined as serum IgA levels lower than 7mg/dL in the presence of normal serum IgG and IgM levels in individuals older than four years. Your symptoms may be associated with diseases such as allergies, autoimmunity, cancer and infections.Several nutrients have been described by exercising role in the immune system, including the minerals zinc and selenium.The zinc deficiency can compromise the immune system and increase susceptibility to serious illnesses. Both innate and adaptive immunity are compromised, increasing susceptibility to infection by various pathogens. Selenium is essential for the efficient operation of many aspects of the immune system in humans, and their functions are probably derived from proteins containing selenium (selenoproteins). The present study aimed to evaluate the anthropometric, biochemical, and nutritional profiles and the status of zinc and selenium in IgA-deficient patients, and to evaluate a possible correlation between the micronutrients assessed nutritional status.Only one subject showed malnutrition in relation to anthropometry. The zinc intake was adequate in almost the entire sample (75% of children, adolescents and adults), as with selenium (87.5% of all individuals), which is consistent with the plasma levels of minerals (with adequate levels of selenium in all participants and zinc in almost all). However, levels of both trace elements were deficient in the erythrocyte. Although the sample has not shown nutritional deficit based on anthropometry, there is a deficiency of minerals analyzed in erythrocytes / Mestre

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-02-15T12:44:59Z No. of bitstreams: 1 RomeritoSostenesCanutoDeOliveira_DISSERT.pdf: 856521 bytes, checksum: ae17547f1ccf09e25f320eafa1835664 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-02-19T21:58:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RomeritoSostenesCanutoDeOliveira_DISSERT.pdf: 856521 bytes, checksum: ae17547f1ccf09e25f320eafa1835664 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-19T21:58:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RomeritoSostenesCanutoDeOliveira_DISSERT.pdf: 856521 bytes, checksum: ae17547f1ccf09e25f320eafa1835664 (MD5) Previous issue date: 2017-08-03 / O objetivo desse estudo foi de investigar o efeito de jogos competitivos em um calend?rio congestionado sobre a imunidade da mucosa em jovens jogadores de futebol. Para o desenvolvimento desta pesquisa foi realizado um estudo observacional, de car?ter descritivo, transversal, com uma abordagem quantitativa. Participaram dessa pesquisa doze jovens jogadores de futebol de campo do sexo masculino, pertencentes a uma mesma equipe (idade: 16,6?0,51 anos; estatura: 175?8cm; massa corporal: 65?7,9kg), da categoria sub 17, que jogaram quatro jogos competitivos (J1, J2, J3 e J4) com 24 horas de intervalos entre os jogos. Para quantifica??o da imunoglobulina A salivar (S-IgA), esse foi expresso como concentra??o absoluta de IgA (s-IgAabs), taxa de secre??o de IgA (s-IgAtaxa) e fluxo salivar (FS). Para a carga interna competitiva, a mesma foi determinada pela Percep??o Subjetiva de Esfor?o da sess?o (PSE). O tempo de jogo de cada atleta participante durante os quatro jogos foi registado para determinar a carga interna competitiva pela PSE da sess?o, assim como a monotonia e o esfor?o competitivo. Os dados est?o apresentados em de m?dia e desvio padr?o. Verificou-se a normalidade das vari?veis dependentes com o teste de Shapiro Wilk (p > 0,05). Utilizou-se o teste t de Student para an?lise do IgA salivar e taxa de fluxo salivar no primeiro e no quinto jogo da competi??o. ANOVA de medidas repetidas comparou a PSE da sess?o e a carga interna ao longo dos jogos, o post hoc de Bonferroni foi utilizado para identificar as diferen?as entre as medidas. O ?d? de Cohen foi utilizado para estimar a magnitudes das diferen?as (tamanho do efeito - TE) entre todas as compara??es. Foi utilizado o coeficiente de correla??o de Spearman para analisar a correla??o entre o ?ndice de monotonia e o esfor?o competitivo com o SIgA absoluto. Os valores de PSE da sess?o n?o foram diferentes ao longo dos jogos F(4,33) = 1,680, p < 0,1902, ??: 0,72. Os valores de carga interna diferiram ao longo da competi??o F(4,33) = 6,299, p = 0,001, ??:0,66. Sendo observado diferen?as nos jogos 2 e 4 em compara??o com o 3 (p<0,05). As concentra??es de IgA salivar absolutos e relativos diminu?ram ap?s a competi??o quando comparado com o momento pr? competi??o (IgA absoluto t (11) = 2,744 p = 0,01 e IgA relativo (t (11) = 2,744, p = 0,04). Diferentemente, a taxa de fluxo salivar pr? jogos foi semelhante ao momento p?s t (11) = 0,1010, p = 0,921). A associa??o entre os valores do delta de varia??o do IgA salivar absoluto com a monotonia da competi??o, verificou-se que houve uma alta correla??o significante com um (r = 0,62: p=0,031). Al?m disso foi encontrada uma correla??o quase significante entre o esfor?o competitivo e o delta de varia??o do IgA absoluto (r = 0,57: p=0,051). Os dados demonstraram que jogos competitivos em um calend?rio congestionado diminu?ram a imunidade da mucosa em respostas ao aumento da carga interna percebida. / The purpose of this study was to investigate the effect of competitive games on a congested schedules on mucosal immunity in young soccer players. For the development of this research, an observational, descriptive, cross-sectional study was conducted with a quantitative approach. Twelve young male soccer players from the same team (age: 16.6 ? 0.51 years, height: 175 ? 8cm, body mass: 65 ? 7.9kg), from the sub category 17, who played four competitive games (J1, J2, J3 and J4) with 24-hour breaks between games. For quantification of salivary immunoglobulin A (S-IgA), this was expressed as absolute concentration of IgA (s-IgAabs), IgA secretion rate (s-IgAtaxa) and salivary flow (FS). For the competitive internal load, it was determined by the Subjective Effort Perception of the session (PSE). The playing time of each participating athlete during the four games was recorded to determine the competitive internal load by the PSE of the session, as well as the monotony and the competitive effort. Data are presented as mean and standard deviation. Normality of the dependent variables was verified with the Shapiro Wilk test (p> 0.05). Student's t-test was used to analyze salivary IgA and salivary flow rate in the first and fifth games of the competition. Repeated measures ANOVA compared the session PSE and the internal load throughout the games, the Bonferroni post hoc was used to identify the differences between the measures. Cohen's "d" was used to estimate magnitudes of differences (effect size - TE) among all comparisons. The Spearman correlation coefficient was used to analyze the correlation between the monotony index and the competitive effort with the absolute SIgA. The PSE values of the session were not different throughout the games F (4,33) = 1,680, p <0,1902, ??: 0,72. The internal load values differed throughout the competition F (4,33) = 6.299, p = 0.001, ??: 0.66. Differences were observed in games 2 and 4 compared to 3 (p <0.05). Absolute and relative salivary IgA concentrations decreased after competition when compared to the pre-competition time (absolute IgA t (11) = 2.744 p = 0.01 and relative IgA (t (11) = 2.744, p = 0.04) The salivary flow rate pre-set was similar to the post-t (11) = 0.1010, p = 0.921). The association between the values of the absolute salivary IgA variation delta and the monotony of the competition showed that there was a significant high correlation with one (r = 0.62: p = 0.031). In addition, a quasi-significant correlation was found between the competitive effort and the absolute IgA variation delta (r = 0.57: p = 0.051). The data demonstrated that competitive games in a congested schedules decreased mucosal immunity in response to increased internal perceived load.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-11-26T13:02:51Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Douglas Oliveira Andrade - 2015.pdf: 6446684 bytes, checksum: a1e954faf14aff161dbc0af5f7db0cbb (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-11-26T13:38:57Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Douglas Oliveira Andrade - 2015.pdf: 6446684 bytes, checksum: a1e954faf14aff161dbc0af5f7db0cbb (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-26T13:38:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Douglas Oliveira Andrade - 2015.pdf: 6446684 bytes, checksum: a1e954faf14aff161dbc0af5f7db0cbb (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-09-18 / Leishmaniasis are a group of endemic diseases in 98 countries, with an estimated incidence up to 1.6 million cases per year (0.7-1.2 million of cutaneous leishmaniasis and 0.2 to 0.4 million visceral leishmaniasis). The criteria for the cure of american tegumentary leishmaniasis adopted nowadays is the complete healing of the lesion. IgG3 subclass anti-leishmania antibodies decrease faster than the total IgG antibodies in cured patients. This study was aimed to identify differences in the recognition pattern of L. (V.) braziliensis protein by total IgG or IgG3 antibodies obtained from cutaneous leishmaniasis infected patients’ serum before and after treatment. Sera of 15 patients infected with L. braziliensis attended at the Tropical Diseases Hospital Anuar Auadi were tested by ELISA against crude extracts of L. braziliensis. When all patients were analyzed, it was observed that anti-leishmania IgG3 absorbance levels measured by ELISA were similar to the controls levels at 6 month. The absorbance levels of total antibodies in control and infected patients reached similarity only at 12/18 months. After split patients into group A: healing of the lesion before one month and B: healing of the lesion after one month, it was observed that absorbance levels in ELISA for IgG3 in group A was similar to the controls levels at the time of diagnosis. It was also observed, by Western Blotting, that the IgG3 reactivity of IgG3 to 49 kDa protein waspresent mainly for group B patients. The 28 kDa protein showed IgG3 reactivity mainly in group B the healing os lesions and the 14 kDa protein showed IgG3 reactivity in some controls our data suggest that the use of 49 kDa protein in ELISA may be useful for diagnosis and following up of patients and the 14kDa protein may be important in false-positive results. / As leishmanioses constituem um grupo de doenças endêmicas em 98 países, com uma incidência estimada de até 1,6 milhões de casos por ano (0,7-1,2 milhão de leishmaniose tegumentar e 0,2 a0,4 milhão de leishmaniose visceral). O critério de cura da leishmaniose tegumentar americana adotado hoje é a cura completa da lesão. Anticorpos anti-Leishmania da subclasse IgG3 decaem mais rapidamente que os anticorpos IgG totais em pacientes curados. O presente trabalho tem objetivo de identificar diferenças no reconhecimento de proteínas de L. (V.) braziliensis por anticorpos IgG totais ou IgG3 obtidos de soro de pacientes com leishmaniose tegumentar americana antes e após o tratamento. Soros de 15 pacientes infectados com L. braziliensis atendidos no Hospital de Doenças Tropicais Anuar Auad foram testados por ELISA contra extratos brutos de L. braziliensis. Quando analisados todos os pacientes, foi possível observar que as absorbâncias no ELISA para a subclasse IgG3 anti-Leishmania ficou semelhante aos controles com 6 meses, o que só aconteceu para anticorpos totais com 12/18 meses. Com a separação dos pacientes em A: pacientes com cura clínica antes de um mês e grupo B: pacientes com cura clínica após um mês, observou-se que as absorbâncias no ELISA para IgG3 no grupo A era semelhante à dos controles no momento do diagnóstico. Identificamos, pelo Western Blotting, que a reatividade à proteína de 49 kDa pela IgG3 de pacientes era presente principalmente no grupo B. A proteína de 28 kDa reagiu com IgG3 de pacientes do grupo B antes da cura clínica e a proteína de 14 kDa reagiu com IgG3 de três soros controles. Nossos dados sugerem que a proteína de 49 kDa pode ser usada em ELISA para o diagnóstico e acompanhamento dos pacientes portadores de LTA e que a proteína de 14kDa pode ser responsável por reações falso positivas.

INTRODUÇÃO: Desde 1930, quando o primeiro caso de sensibilização alérgica a um veneno ofídico foi descrito na literatura, os venenos de todas as principais famílias de serpentes têm sido implicados como causadores de reações alérgicas. O desenvolvimento deste tipo de hipersensibilidade tem sido descrito após recorrentes exposições aos venenos através de picadas e, presumivelmente, de repetidas inalações ou contato desses venenos com a pele ou membranas mucosas. Esta condição tem sido observada entre os profissionais que manuseiam as serpentes e/ou os seus venenos. Entretanto, pouco se conhece a respeito da prevalência dessa doença entre esses trabalhadores, seus determinantes, e natureza molecular dos alérgenos envolvidos. Os objetivos deste estudo foram avaliar a prevalência da alergia ao veneno de Bothrops jararaca, apontando os fatores preditores para o seu desenvolvimento, entre trabalhadores expostos à serpente e/ou ao seu veneno, e demonstrar o envolvimento de um mecanismo IgE-mediado neste tipo de doença ocupacional. MÉTODOS: Sessenta e sete herpetologistas de um instituto de pesquisa, expostos à serpente Bothrops jararaca e/ou ao seu veneno, foram submetidos a um questionário e a testes imunológicos, para avaliar a presença de alergia ao veneno. A sensibilização ao veneno foi determinada pela quantificação de anticorpos da classe IgG e IgE, específicos ao veneno de Bothrops jararaca, através dos testes sorológicos ImmunoCAP e ELISA. Os alérgenos foram caracterizados através de Western blotting e de ensaios de inibição do ImmunoCAP. RESULTADOS: Doze dos 67 trabalhadores reportaram sintomas alérgicos variando desde urticária, rinoconjuntivite e asma, até anafilaxia. Sete indivíduos apresentaram anticorpos IgE específicos ao veneno de Bothrops jararaca (prevalência = 10,4%). Destes, seis apresentavam sintomas clássicos de reações alérgicas IgE-mediadas, quando expostos ao veneno botrópico. A presença de anticorpos IgG específicos também foi observada nos indivíduos com sensibilização alérgica ao veneno. O nível sérico elevado de IgE total (p=0,034), o tempo de exposição ocupacional (p=0,042), o manuseio de veneno em pó (p=0,014) e, possívelmente, a história pessoal de atopia (p=0,051), se constituíram em fatores preditores associados à sensibilização. Um componente do veneno de aproximadamente 32 kDa, que apresentou intensa ligação à IgE sérica de dois trabalhadores sensibilizados, pode ser um dos alérgenos principais desse veneno. Os ensaios de inibição do ImmunoCAP sugeriram a possibilidade de reações cruzadas ente os venenos de Bothrops jararaca e Crotalus durissus durissus. CONCLUSÕES: O veneno de Bothrops jararaca pode ser considerado uma importante fonte de alérgenos responsável pelo desenvolvimento de alergia ocupacional em trabalhadores que manuseiam as serpentes e/ou os seus venenos, através de mecanismo IgE-mediado. A prevalência da sensibilização alérgica a este veneno, neste grupo de trabalhadores, é da ordem de 10,4%, e o nível sérico elevado de IgE total, o tempo de exposição à serpente ou ao seu veneno, o manuseio do veneno em pó e, possívelmente, a história pessoal de atopia, são importantes fatores preditores. / BACKGROUND: Allergic sensitization to snake venom was first reported in 1930 and since that time, venoms from the major snake families have been implicated as cause of allergic reactions. The development of hypersensitivity to snake venom has been described after recurrent exposure through bites and, presumably, through repeated inhalations or repeated contact of the venom with skin or mucous membranes. This condition has been observed in amateur and professional snake handlers. However, only limited information is available on the prevalence of the disease among those workers, their determinants and the molecular nature of these allergens. The aim of this study was to evaluate the prevalence and the predictors of snake venom allergy among workers exposed to Bothrops jararaca venom and to demonstrate the involvement of IgE-mediated mechanisms in this occupational disease. METHODS: Sixty seven workers exposed to Bothrops jararaca snakes and/or their venoms in a research institute were assessed for snake venom-related allergy using questionnaires and immunological tests. Presence of snake venom sensitization was determined by quantification of specific IgE and IgG to Bothrops jararaca venom using the UniCAP® system and ELISA. Allergens were characterized by Western blotting and ImmunoCAP inhibition assays. RESULTS: Twelve of the 67 workers experienced symptoms ranging from urticaria, rhinoconjuctivitis and asthma to anaphylaxis. Seven individuals had specific IgE antibodies to Bothrops jararaca snake venom (prevalence = 10,4%). Six of them had typical symptoms of an IgE-mediated allergic reaction when exposed to Bothrops venom. Specific IgG antibodies could also be observed in sensitized individuals. High levels of total IgE (p=0,034), exposure level (p=0,042), handling of dried venom (p=0,014) and personal history of atopy (p=0,051) could be demonstrated as predictors for sensitization. A component of approximately 32 kDa which strongly bound to specific-IgE may be the major allergen present in this venom. Cross-reactivity between Bothrops jararaca snake venom and Crotalus durissus durissus snake venom was demonstrated using ImmunoCAP inhibition. CONCLUSIONS: Bothrops jararaca snake venom can be considered a potential source of allergens which may result in occupational allergy in snake handlers though IgE-mediated mechanisms. The prevalence rate of this condition is 10,4% among these workers and the handling of dried venom, high levels of total IgE, exposure level and probably personal history of atopy are important predictors.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-11T14:18:48Z No. of bitstreams: 1 Gilsan Aparecida de Oliveira.pdf: 332041 bytes, checksum: fe9d03ee3bf15e812cc2de031a88a236 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T14:18:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gilsan Aparecida de Oliveira.pdf: 332041 bytes, checksum: fe9d03ee3bf15e812cc2de031a88a236 (MD5) Previous issue date: 2008-02-28 / Despite its immunological properties for the newborn, milk is also considered a potential source of transmission of pathogens, and some of them cause zoonoses. The non-pasteurized goat milk has been implicated as an important source of infection of T. Gondii in children of rural areas which are feeding habit of eating raw milk. .Serological studies carried out in the Zona da Mata of the state of Pernambuco - Brazil shown that Toxoplasma gondii is widely disseminated in the goat herd in the region. The objective of this work was to find the presence of IgG immunoglobulin against T. Gondii in milk and to conduct an epidemiological investigation of the infection in lactating goats from creations of subsistence of the municipality of Jaboatão dos Guararapes – State of Pernambuco - Brazil. Samples of blood and milk were collected of 68 lactanting goats of various ages and races, in five rural properties of the said council. An investigative questionnaire was applied to each property. Samples were processed and tested by indirect immunofluorescence test for search of IgG, adopting the cut-off of 1:16 for both, followed by dilutions in factor 2 up to the dilution of1:516 for the serum and 1:64 for milk, for samples seropositive in the previous dilution. It was obtained seropositivity of 88.23%, 77.94%, 76.47%, 70.58%, 58.82% and 50% for dilutions of 1:16, 1:32, 1:64, 1:128, 1:256 and 1:512 respectively. Positivity in the samples of milk was 39.70%, 29.41% and 7.35% for dilutions of 1:16, 1:32, 1:64, respectively. Concluding that there is a statistical correlation between the result of association found in milk and in serum and in milk goats that are capable of eliminating the class IgG antibodies through milk at different times of lactation. / Apesar de suas propriedades imunológicas para o recém-nascido, o leite também é considerado como uma via potencial de transmissão de patógenos, sendo alguns deles causadores de zoonoses. O leite caprino não pasteurizado tem sido implicado como importante via de transmissão de T. gondii em crianças das áreas rurais as quais têm hábito alimentar de ingerir leite cru. Estudos sorológicos realizados na Zona da Mata do estado de Pernambuco demonstraram que Toxoplasma gondii encontra-se amplamente disseminado no rebanho caprino dessa região. Objetivou-se, neste trabalho, pesquisar a presença de imunoglobulinas da classe IgG contra T. gondii em leite e realizar inquérito soroepidemiológico da infecção em cabras lactantes de criações de subsistência do município de Jaboatão dos Guararapes - PE - Brasil. Foram coletadas, por amostragem de conveniência, 68 amostras de sangue e leite de cabras de idade e raças variadas, em cinco propriedades rurais do referido município. Um questionário investigativo foi aplicado em cada propriedade. As amostras foram processadas e submetidas ao teste de imunofluorescência indireta para pesquisa de IgG, adotando-se o ponto de corte de 1:16 para ambas, seguindo-se com diluições em fator 2 até a diluição de 1:516 para o soro e 1:64 para o leite, nas amostras sororreagentes na diluição anterior. Obteve-se soropositividade de 88,2%, no título de 1:16. A positividade nas amostras de leite foi de 39,7%, para o ponto de corte de 1:16. Conclui-se que existe a presença de anticorpos da classe IgG no leite associada a presença de anticorpos no soro e que cabras em diferentes tempos de lactação são capazes de eliminar esses anticorpos da classe IgG pelo leite, sendo ainda a soropositividade dos animais associado a relato de aborto e filho nascido com deficiência visual.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_juliana_alcoforado_diniz.pdf: 1026827 bytes, checksum: f7e6dae0a1eabce2f815ea02d01d8e6a (MD5) Previous issue date: 2012-09-12 / Leptospirosis is a zoonosis caused by bacteria of the Leptospira genus. In recent years, efforts to identify immunogenic components of leptospires have resulted in the characterization of several outer membrane lipoproteins that are expressed during infection. Previously, our group had produced polyclonal IgY antibodies against whole-cell leptospires strain Fiocruz L1-130, which were used in different forms of capture ELISAs. In this study we produced and characterized IgY antibodies against LipL32 in recombinant form (rLipL32), the most abundant lipoprotein in the proteome of pathogenic leptospires, in order to use they in diagnostic assays and prophylaxis of leptospirosis. For this, two 22-week-old hens were immunized on day 0 with rLipL32 and oil adjuvant by intramuscular route. Three booster immunizations on days 14, 28 and 42 were held, and the eggs were collected daily from day 45. The yolks were processed and the antibodies purified with polyethylene glycol, and monitored by SDS-PAGE. Specificity of purified antibodies was assessed through indirect ELISA and Western blot (WB) using both rLipL32 and whole-cell Fiocruz L1-130. After standardization of the first batch of IgY, antibodies were conjugated with horseradish peroxidase and fluorescein (FITC). In addition, we conducted a passive immunoprotection assay in hamster model, using homologous and heterologous challenge. SDS-PAGE confirmed the successful purification of IgY and a batch with a concentration of 13μg.μL-1 was stored at -20ºC until use. Both IgY and IgY conjugated with horseradish peroxidase recognized the recombinant and native protein in ELISA and WB. In this study we produced and characterized successfully IgY against rLipL32. Although these antibodies have not been tested with clinical samples from humans or animals, they have antigen detecting potential for use in the diagnosis of leptospirosis. / A leptospirose é uma zoonose causada por bactérias do gênero Leptospira. Nos últimos anos, esforços para a identificação de componentes imunogênicos nas leptospiras resultaram na caracterização de várias lipoproteínas de membrana externa que são expressas durante a infecção. Anteriormente, nosso grupo havia produzido IgY contra Leptospira interrogans cepa Fiocruz L1-130 inteira, a qual foi usada em diferentes formatos de ELISA de captura. No presente estudo, objetivamos produzir e caracterizar anticorpos IgY contra a proteína LipL32 na forma recombinante (rLipL32), a lipoproteína mais abundante no proteoma das leptospiras patogênicas, com intuito de utilizá-los posteriormente, no diagnóstico e na imunoprofilaxia da leptospirose. Para isso, duas galinhas com 22 semanas de idade foram imunizadas no dia 0 com rLipL32 e adjuvante oleoso, através da via intramuscular. Três outras imunizações foram realizadas nos dias 14, 28 e 42 e os ovos coletados diariamente a partir do dia 45. Os anticorpos foram obitidos através do processamento das gemas, purificados com polietilenoglicol e monitorados por SDS-PAGE. A especificidade dos anticorpos foi avaliada através de ELISA indireto e Western blot (WB), ambos utilizando rLipL32 e Fiocruz L1-130 inteira. Após a padronização do primeiro lote de IgY, os anticorpos foram conjugados com peroxidase e fluoresceína (FITC), e avaliados em um ensaio de imunização passiva em hamsters, com desafio homólogo e heterólogo. O SDS-PAGE confirmou o sucesso de purificação, e um lote de IgY com a concentração de 13μg.μL-1 foi estocado a -20ºC até o uso. A IgY pura e conjugada com peroxidase reagiram com as proteínas recombinante e nativa no ELISA e no WB. Nesse estudo, produzimos e caracterizamos com sucesso IgY contra rLipL32. Embora esses anticorpos não tenham sido testados com amostras clínicas de humanos e animais, eles possuem potencial para compor ensaios que visem a detecção do antígeno no diagnóstico da leptospirose.