Atualmente, a produtividade da cultura da batata (Solanum tuberosum L.) pode ser reduzida devido à ocorrência de doenças em todo o território nacional, destacando-se a pinta preta, causada por Alternaria spp. Historicamente se acreditava que A. solani (AS) era a principal causadora mas, atualmente, descobriram outras espécies associadas, sendo predominante hoje, em território nacional a espécie A. grandis (AG). O objetivo deste trabalho foi avaliar a sensibilidade in vitro de três isolados de A. grandis e um isolado de A. solani frente a onze fungicidas amplamente utilizados no manejo desta doença em campo. Foi avaliado o efeito dos fungicidas sobre o crescimento micelial dos isolados, utilizando-se do método da incorporação do fungicida no meio de cultura fundente. As diluições dos fungicidas foram realizadas em água destilada e esterilizada, de acordo com a metodologia descrita por Camargo (2013) e Ishizuka (2016). Para os fungicidadas com mistura de ingrediente ativo, considerou-se a soma das concentrações no cálculo. Inicialmente, as concentrações do meio de cultura, foram 100, 10, 1, 0,1, 0,01 e 0,001 mg L-1. Após, as doses foram ajustadas conforme a CI50 de cada fungicida. Quantificou-se também a inibição sobre a germinação dos conídios nas contrações discriminatórias de 0; 0,1; 1; 10 e 100 mg.L-1 .24 horas após o preparo do meio as placas foram observadas em microscópio óptico, determinando-se a germinação dos conídios em 300 unidades observadas por placa de Petri. Todos os isolados testados foram altamente sensíveis aos ingredientes ativos fluazinam, pirimetanil, procimidona e piraclostrobina. Não houve diferenças de comportamento de sensibilidade entre as espécies de A. solani e A grandis que possam caracterizar uma perda de sensibilidade por conta da predominância da espécie de A. grandis associada à pinta preta da batata no Brasil. Encontraram-se evidências de insensibilidade dos isolados de A. grandis e A. solani aos ingredientes ativos Clorotalonil e Boscalida. / Currently, the productivity of potato crop (Solanum tuberosum L.) may be reduced due to the occurrence of disease throughout the country, especially due to early blight, caused by Alternaria spp. Historically it was believed that A. solani (AS) was the main cause, most currently was founded others associated species, being predominant today the occurrence of the disease associated with the species A. grandis (AG). The objective of this study was to evaluate the in vitro susceptibility of three isolates of A. grandis and one isolate of A. solani for eleven fungicides widely used in the management of this disease in the field, was evaluated the effect of fungicides on mycelial growth using the fungicidal method that incorporate it in the medium culture. Dilutions of fungicides were performed in sterile distilled water according to the methodology described by Camargo (2013) and Ishizuka (2016). For the fungicidates with active ingredient mixture, was considered the sum of the both concentrations in the calculation.The concentrations of the culture medium were 100, 10, 1, 0.1, 0.01 and 0.001 mg L-1. The doses were adjusted according to the CI50 of each fungicide, was quantified also the inhibition of spore germination, and the fungicides were incorporated into the agar medium - water in discriminatory contractions of 0; 0.1; 1; 10 and 100 mg.L-1 . Then, 24 hours after preparation of the medium the plates were observed under an optical microscope, determining the spore germination observed at 300 units per plate. All tested isolates were highly sensitive to the active ingredients fluazinam, pyrimethanil, procymidone and pyraclostrobin. There was no sensitivity behavioral differences between species of A. solani and A. grandis which may characterize a loss of sensitivity due to the predominance of species of A. grandis associated with early blight in Brazil, was found evidences of insensitivity of isolates of A. grandis and A. solani to the active ingredients Chlorothalonil and Boscalida.

Made available in DSpace on 2015-04-11T13:55:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Flavio Freires.pdf: 2001581 bytes, checksum: 9175dab7eab2065c034ec514e2244675 (MD5) Previous issue date: 2012-04-27 / Astrocaryum aculeatum Meyer (Arecaceae), popularly known by tucumã, is a palm tree that occurs in the Amazon and presents a potential market of food and crafts. Has great economic importance, mainly the different products that it can be extracted and used. The specie is characterized by delay in germination, a fact that discourages their cultivation. Thus, information that enable methods and techniques that accelerate the seedlings production is important as a stimulus to the specie cultivation. The aimed of this study was to establish protocols for tucumã in vitro germination and development of zygotic embryos through tissue culture techniques. The tests were performed at the Centro de Biotecnologia da Amazônia. We evaluated the effects of different antioxidants (activated charcoal, ascorbic acid and polyvinylpyrrolidone), the means were tested semi solid MS and Y3 with 0.0 mg L-1 and 2.0 mg L-1 indolylacetic acid (IAA) in the elongation phase, while in the rooting phase, the treatments consisted of four concentrations of naphthalene acetic acid (NAA) (0, 2.5, 5, 10 mg L-1). The cultures remained in a growth chamber with temperature set at 25 ± 1 ° C, light intensity of 30.0 μmols.m-2.s-1 and 16-hour photoperiod. During the acclimatization plants were kept in a greenhouse with intermittent misting system for 60 days. The substrates used were sand, coconut fiber, Vivato®, coconut fiber x sand, coconut fiber x Vivato®, sand and Vivato®, sand x coconut fiber x Vivato®, all in the same proportions. The antioxidant assay results showed that there is no need for the use of antioxidants as MS medium (control) showed 86% germination and absence of oxidation. In stretching phase, MS medium supplemented with 2.0 mg L-1 IAA, was superior to other treatments, developing plants with an average height of 6.18 cm. For rooting, the treatment with 10.0 mg L-1 NAA was higher, with an average production of 9.0 roots per plant, with a rooting percentage of 75.0%. During the acclimatization phase, the substrate Vivato® showed superior results to the other, with an average increase in height of 10.25 cm and launch of five new leaves / Astrocaryum aculeatum Meyer (Arecaceae), popularmente conhecido por tucumã, é uma palmeira que ocorre na Amazônia e apresenta potencial para o mercado de alimento e artesanato. Tem grande importância econômica, principalmente, pelos diferentes produtos que dela podem ser extraídos e usados. A espécie tem como característica a demora na germinação, fato que desestimula o seu cultivo. Deste modo, informações que viabilizem métodos e técnicas que acelerem a produção de mudas são importantes como estímulo para o cultivo da espécie. O presente trabalho teve como objetivo estabelecer protocolos de germinação e desenvolvimento in vitro de embriões zigóticos de tucumã através da técnica de cultura de tecidos. Os ensaios foram realizados no Centro de Biotecnologia da Amazônia. Foi avaliada os efeitos de diferentes antioxidantes (carvão ativado, ácido ascórbico e polivinilpirrolidona); foram testados os meios semi sólidos MS e Y3 com 0,0 mg.L-1 e 2,0 mg.L-1 de ácido indolilacético (AIA), na fase de alongamento; já em fase de enraizamento, os tratamentos consistiram de quatro concentrações de ácido naftaleno acético (ANA) (0, 2,5, 5, 10 mg.L-1). As culturas permaneceram em sala de crescimento com temperatura ajustada em 25 ± 1ºC, intensidade luminosa de 30,0 μmols.m-2.s-1 e fotoperíodo de 16 horas. Na fase de aclimatização as plantas foram mantidas em casa de vegetação com sistema de nebulização intermitente por 60 dias. Os substratos utilizados foram areia, fibra de coco, Vivato®, fibra de coco x areia, fibra de coco x Vivato®, areia x Vivato® e areia x fibra de coco x Vivato®, todos nas mesmas proporções. O ensaio com antioxidantes os resultados demonstraram que não há a necessidade de utilização de antioxidantes, pois o meio MS (controle) apresentou 86% de germinação e ausência de oxidação. Já na fase de alongamento o meio MS suplementado com 2,0 mg.L-1 de AIA apresentou superioridade aos demais tratamentos, desenvolvendo plantas com altura média de 6,18 cm. Para o enraizamento, o tratamento com 10,0 mg.L-1 de ANA, foi superior, com uma produção média de 9,0 raízes por planta, com um percentual de enraizamento de 75,0%. Na fase de aclimatização, o substrato Vivato® apresentou resultados superiores aos demais, com incremento médio em altura de 10,25 cm e lançamento de cinco novas folhas

Atualmente, a produtividade da cultura da batata (Solanum tuberosum L.) pode ser reduzida devido à ocorrência de doenças em todo o território nacional, destacando-se a pinta preta, causada por Alternaria spp. Historicamente se acreditava que A. solani (AS) era a principal causadora mas, atualmente, descobriram outras espécies associadas, sendo predominante hoje, em território nacional a espécie A. grandis (AG). O objetivo deste trabalho foi avaliar a sensibilidade in vitro de três isolados de A. grandis e um isolado de A. solani frente a onze fungicidas amplamente utilizados no manejo desta doença em campo. Foi avaliado o efeito dos fungicidas sobre o crescimento micelial dos isolados, utilizando-se do método da incorporação do fungicida no meio de cultura fundente. As diluições dos fungicidas foram realizadas em água destilada e esterilizada, de acordo com a metodologia descrita por Camargo (2013) e Ishizuka (2016). Para os fungicidadas com mistura de ingrediente ativo, considerou-se a soma das concentrações no cálculo. Inicialmente, as concentrações do meio de cultura, foram 100, 10, 1, 0,1, 0,01 e 0,001 mg L-1. Após, as doses foram ajustadas conforme a CI50 de cada fungicida. Quantificou-se também a inibição sobre a germinação dos conídios nas contrações discriminatórias de 0; 0,1; 1; 10 e 100 mg.L-1 .24 horas após o preparo do meio as placas foram observadas em microscópio óptico, determinando-se a germinação dos conídios em 300 unidades observadas por placa de Petri. Todos os isolados testados foram altamente sensíveis aos ingredientes ativos fluazinam, pirimetanil, procimidona e piraclostrobina. Não houve diferenças de comportamento de sensibilidade entre as espécies de A. solani e A grandis que possam caracterizar uma perda de sensibilidade por conta da predominância da espécie de A. grandis associada à pinta preta da batata no Brasil. Encontraram-se evidências de insensibilidade dos isolados de A. grandis e A. solani aos ingredientes ativos Clorotalonil e Boscalida. / Currently, the productivity of potato crop (Solanum tuberosum L.) may be reduced due to the occurrence of disease throughout the country, especially due to early blight, caused by Alternaria spp. Historically it was believed that A. solani (AS) was the main cause, most currently was founded others associated species, being predominant today the occurrence of the disease associated with the species A. grandis (AG). The objective of this study was to evaluate the in vitro susceptibility of three isolates of A. grandis and one isolate of A. solani for eleven fungicides widely used in the management of this disease in the field, was evaluated the effect of fungicides on mycelial growth using the fungicidal method that incorporate it in the medium culture. Dilutions of fungicides were performed in sterile distilled water according to the methodology described by Camargo (2013) and Ishizuka (2016). For the fungicidates with active ingredient mixture, was considered the sum of the both concentrations in the calculation.The concentrations of the culture medium were 100, 10, 1, 0.1, 0.01 and 0.001 mg L-1. The doses were adjusted according to the CI50 of each fungicide, was quantified also the inhibition of spore germination, and the fungicides were incorporated into the agar medium - water in discriminatory contractions of 0; 0.1; 1; 10 and 100 mg.L-1 . Then, 24 hours after preparation of the medium the plates were observed under an optical microscope, determining the spore germination observed at 300 units per plate. All tested isolates were highly sensitive to the active ingredients fluazinam, pyrimethanil, procymidone and pyraclostrobin. There was no sensitivity behavioral differences between species of A. solani and A. grandis which may characterize a loss of sensitivity due to the predominance of species of A. grandis associated with early blight in Brazil, was found evidences of insensitivity of isolates of A. grandis and A. solani to the active ingredients Chlorothalonil and Boscalida.

Protea cynaroides L. (King Protea) is a well known cutflower. Seeds and stem cuttings are commonly used to propagate P. cynaroides. However, the success rate and rooting rate of seeds and cuttings, are inconsistent and slow. The potential of in vitro propagation as an alternative method to produce P. cynaroides plantlets was investigated. In vitro studies consisted of in vitro germination of mature zygotic embryos, micrografting and direct somatic embryogenesis of zygotic embryos and excised cotyledons. In the germination study, temperature was the most important factor in obtaining a high germination percentage. Alternating temperatures of 21±2ºC/12±2ºC (light/dark) was suitable for germination and over 90% of embryos germinated, while the germination percentage of embryos at 25±2ºC was poor. Plantlets were successfully established in ex vitro conditions when planted in a peat/coir/sand mixture. Micrografting of P. cynaroides was done by grafting microshoots (microscion), which was taken from in-vitro-established nodal explants, onto roots of decapitated in-vitro-germinated seedlings. After the graft union formed, buds on the microscion sprouted. A protocol to induce direct somatic embryogenesis was developed. Direct somatic embryogenesis was achieved on both P. cynaroides mature zygotic embryos and excised cotyledons. The addition of auxins such as NAA and 2,4-D singly or in combination with TDZ, BAP or kinetin suppressed the formation of somatic embryos. Formation of somatic embryos was observed in medium lacking growth regulators. Germination of somatic embryos was highest in medium containing GA3. The roles of starch and phenolic compounds in the rooting of P. cynaroides cuttings were also studied. Starch and total soluble phenol analyses results revealed a positive correlation between high root formation and increased starch and phenolic content. NMR and MS analyses identified high amounts of 3,4-dihydroxybenzoic acid in stems of P. cynaroides. In vitro bioassay showed that 3,4-dihydroxybenzoic acid stimulated and inhibited root growth of P. cynaroides explants, depending on the concentration. A link was made between the endogenous concentration levels of 3,4-dihydroxybenzoic acid and rooting of P. cynaroides stem cuttings. Findings of this study contribute towards a better understanding of the roles starch and phenolic compounds play in the rooting of P. cynaroides. / Thesis (PhD (Horticulture))--University of Pretoria, 2006. / Plant Production and Soil Science / unrestricted

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:22:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Ciane_ Xavier_ Goncalves.pdf: 6437123 bytes, checksum: b433321a77238daeb8ea8ae563d42e6b (MD5) Previous issue date: 2008-07-07 / Pear is a fruit tree that belongs to the family Rosaceae, subfamily Pomoideae and genus Pyrus. In Brazil, the pear production lays around 20 thousand ton, and this fact occurs mainly due to the lack of adapted cultivars to the climate conditions.The present work was developed with the objective to study the pollen viability and compatibility of different cultivars, selections and rootstocks for the pear culture. This work was divided into five batches: in the experiment 1 it was evaluated the in vitro germination of 14 genotypes of pear at different incubation times (2, 4 and 6 hours) in BOD incubator and in lightless condition at 25°C. In the experiment 2, the incubation time was set for each genotype according the best results obtained in the previous experiment and it was assessed different temperatures of incubation (20, 30 and 40 °C) on in vitro germination of 14 pear genotypes. The basic germination medium consisted of 100 g L-1 sucrose and 10 g L-1 agar. In the third experiment, time and temperature of in vitro incubation of the pollen grains were chosen conform to the previous experiments. It was evaluated the germination of ten pear genotypes under the influence of the increase of different combinations of boric acid and calcium nitrate to the basic germination medium. In the experiment 4 it was assessed the in vitro germination of pollen grains of pear genotypes (varying temperature and time of incubation) in BOD incubator, lightless and boric acid in three concentrations added to the basic germination medium. Experiment 5 evaluated the gametic compatibility in pear genotypes through pollen tube growth in pistil of flower 120 hours after pollination. Therefore, to the assessed genotypes it was evaluated the self-pollination either in the field or laboratory, cross-pollination or open-pollination. The germination percentage of the pear genotypes studied in the first experiment depends on time and sample. Among the pear genotypes assessed in the second experiment the temperature of incubation at 20°C is recommended and at 40°C is damaging for germination. In the third experiment, in general, either basic culture medium or enriched with 200 mg L-1 boric acid promote higher rates of in vitro germination of pollen grains of the pear genotypes; the germination percentage decreased whether enriched with 1200 mg L-1 of calcium nitrate, independently of boric acid concentration. For the pear genotypes evaluated in the fourth experiment it is recommended to germinate the pollen grains in either basic culture medium or enriched with 100 mg L-1 of boric acid. In the fifth experiment the ovule fecundation did not occur for most genotypes and pollination type; therefore, cross-pollination benefits fecundation. / A pereira é uma frutífera que pertencente à família Rosaceae, subfamília Pomoideae e ao gênero Pyrus. No Brasil, a produção de peras é somente de, aproximadamente, 20 mil toneladas e este fato ocorre, principalmente, pela falta de cultivares adaptadas às condições climáticas. O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo de verificar a viabilidade e compatibilidade de pólen de diferentes genótipos de pereira no Rio Grande do Sul. Este trabalho foi dividido em cinco experimentos: No experimento 1, avaliou-se a germinação in vitro de 14 genótipos de pereira, em diferentes tempos de incubação (2, 4 e 6 horas) em incubadora tipo BOD, em ausência de luz, a 25°C. Para o experimento 2, o tempo de incubação foi fixado para cada genótipo conforme os melhores resultados obtidos no experimento anterior, avaliando-se as diferentes temperaturas de incubação (20, 30 e 40°C), na germinação in vitro de 14 genótipos de pereira. O meio de germinação básico foi composto de 100 g L-1 de sacarose e 10 g L-1 de ágar. No terceiro experimento, o tempo e a temperatura de incubação dos grãos de pólen in vitro foram fixados, conforme os experimentos anteriores; avaliou-se a germinação de dez genótipos de pereira sob a influência do acréscimo de diferentes combinações de ácido bórico e nitrato de cálcio ao meio de germinação básico. No experimento de número 4 avaliou-se a germinação in vitro de grãos de pólen de genótipos de pereira (variando-se a temperatura e o período de incubação) em estufa tipo BOD, em ausência de luz, e ainda, o ácido bórico em três concentrações adicionado ao meio de germinação básico. No quinto experimento, avaliou-se a compatibilidade gametofítica em genótipos de pereira, através do desenvolvimento do tubo polínico no pistilo da flor, 120 horas após a polinização; para os genótipos em estudo avaliou-se a autopolinização de campo, autopolinização de laboratório, polinização cruzada e a polinização aberta. Conclui-se que, para os genótipos de pereira estudados no primeiro experimento a percentagem de germinação depende do tempo e da amostra. Para o segundo experimento, entre os genótipos de pereira estudados, a temperatura de incubação a 20°C é recomendável e a 40°C é prejudicial para a germinação. Para o terceiro experimento, de maneira geral, em meio de cultura básico ou acrescido de 200 mg L-1 de ácido bórico promove elevados índices de germinação in vitro de grãos de pólen dos genótipos de pereira; e a percentagem de germinação é dimunuída quando acrescenta-se a concentração de 1200 mg L-1 de nitrato de cálcio, independente da concentração de ácido bórico. No quarto experimento, para os genótipos de pereira estudados, é recomendável a germinação de grãos de pólen in vitro em meio de cultura básico ou acrescido de 100 mg L-1 de ácido bórico. Para o quinto experimento, a fecundação dos óvulos não ocorreu na quase totalidade de genótipos e tipos de polinização; de modo geral, a polinização cruzada beneficia a fecundação.

Mimosa scabrella Benth. is a tree from Brazil, growing from Minas Gerais to Rio Grande do Sul. Its wood is used for energy like firewood and coal. The round wood is also very sought for props in civil architecture. Furthermore, since it is an aggressive pioneering species, its plantation is recommended for protection and recovering of weak and erosive soil. The Brazilian plantations of Mimosa scabrella Benth. present reduced productivity, which can be improved by the introduction of trees with larger diameter. The increase of the diameter can be obtained by the manipulation of the levels of vegetable hormones in the cells during the micropropagation. Aiming at contributing for this purpose, the overall goal of this work was to study the Mimosa scabrella Benth. in vitro regeneration considering isolated explants from germinated seeds. The surpassing of the seeds' quiescence was tested by mechanical scarification, immersion in water at environment temperature during 24 h, immersion in hot water (80ºC) during 5 minutes. The disinfestation consisted of the immersion of sodium hypochlorite to 2% during 5, 10 or 15 minutes and inoculation of the seeds in ½ MS or MS agent (Murashige & Skoog). Nodal segments cultivated in MS agent added of benzylaminopurine - BAP (0; 2,5; 5; 7,5 and 10 μM) and of alpha-aceticnaphtalene acid - ANA (0 and 2,2 μM), in the absence or in the presence of estreptomicine, were evaluated according to their multiplication in vitro. The mechanical scarification was the quiescence surpassing method which provided the largest germination percentage. The disinfestation with sodium hypochlorite at 2% during 10 minutes resulted in more than 60% of germinated seeds. The biggest in vitro germination of Mimosa scabrella Benth. s seeds was observed at ¼ MS dilution. In the absence of BAP, there was more formation of buds (1,39) and of leaves (1,62) per explant. There was not any contamination by bacteria in the absence of BAP, independently of the presence of estreptomicine. Calli were not formed in the absence of estreptomicine and of BAP. With the increase of BAP concentrations at the medium of culture, there was a reduction in the fenolic oxidation. For the in vitro multiplication of nodal segments of Mimosa scabrella Benth., it is not necessary to add either ANA or BAP. / A bracatinga (Mimosa scabrella Benth.) é uma árvore nativa do Brasil, ocorrendo desde Minas Gerais até o Rio Grande do Sul. A madeira é usada para energia como lenha e carvão. A madeira roliça é também muito procurada para escoras na construção civil. Além disso, como é uma espécie pioneira agressiva, seu plantio é recomendado para proteger e recuperar solos fracos e erodidos. Os bracatingais brasileiros apresentam reduzida produtividade, que pode ser melhorada pela introdução de árvores com maior diâmetro. O aumento do diâmetro pode ser obtido pela manipulação dos níveis de hormônios vegetais nas células durante a micropropagação. Com a finalidade de contribuir para esse propósito, neste trabalho, o objetivo geral foi estudar a regeneração in vitro da bracatinga por meio de explantes isolados a partir de sementes germinadas. A superação de dormência das sementes foi testada por escarificação mecânica, imersão em água à temperatura ambiente por 24 h, imersão em água quente (80ºC) por 5 minutos. A desinfestação consistiu da imersão em hipoclorito de sódio a 2% por 5, 10 ou 15 minutos e inoculação das sementes em meio ½ MS ou MS (Murashige & Skoog). Foi avaliada também a germinação sob diferentes concentrações do meio MS (1/8, ¼, ½ e integral). Segmentos nodais cultivados em meio MS acrescido de benzilaminopurina - BAP (0; 2,5; 5; 7,5 e 10 μM) e de ácido alfa naftalenoacético - ANA (0 e 2,2 μM), na ausência ou presença de estreptomicina, foram avaliados quanto à multiplicação in vitro. A escarificação mecânica foi o método de superação de dormência que proporcionou a maior porcentagem de germinação. A desinfestação com hipoclorito de sódio a 2% durante 10 minutos resultou em mais de 60% de sementes germinadas. A máxima germinação in vitro de sementes de bracatinga foi observada na diluição ¼ MS. Na ausência de BAP, houve maior formação de gemas (1,39) e de folhas (1,62) por explante. Não houve contaminação por bactérias na ausência de BAP, independente da presença de estreptomicina. Não foram formados calos na ausência de estreptomicina e de BAP. Com o aumento das concentrações de BAP no meio de cultura, houve uma redução na oxidação fenólica. Para a multiplicação in vitro de segmentos nodais de bracatinga, não é necessário adicionar ANA e BAP.

O Brasil é um dos principais produtores mundiais de Eucalyptus spp., mas a produção dessa cultura tem sido comprometida por perdas causadas pelo fungo Puccinia psidii Winter, agente causal da ferrugem do eucalipto. Compreender os mecanismos moleculares da patogenicidade desse fungo, conhecer a composição química de variedades de Eucalyptus spp. resistentes e suscetíveis ao fitopatógeno e ter em mãos uma ferramenta de diagnóstico precoce da doença são conhecimentos de fundamental importância para o desenvolvimento de estratégias de controle do fitopatógeno. Uma das principais barreiras que limitam o estudo molecular de P. psidii é o fato dessa espécie ser biotrófica obrigatória, tendo seu desenvolvimento in vitro limitado. Estudos de investigação a respeito de fungos biotróficos obrigatórios são realizados principalmente in planta e em estágios tardios da doença, deixando grande parte do conhecimento dos processos iniciais de infecção desconhecidos. Informações a respeito dos estágios iniciais da infecção, nos quais diversas estruturas típicas são formadas e podem indicar importantes características sobre fungos biotróficos, são de difícil acesso em estudos in planta em função da grande quantidade de material vegetal em relação à quantidade de material do fitopatógeno, que não é passível de ser removido completamente das amostras analisadas. Dessa forma, o presente projeto de pesquisa foi realizado com os objetivos de desenvolver um protocolo para induzir a germinação e a morfogênese estrutural in vitro de P. psidii, identificar genes candidatos relacionados à diferenciação das estruturas de infecção e de fatores de virulência, caracterizar os metabólitos presentes nas ceras cuticulares de folhas de Eucalyptus grandis resistentes e suscetíveis à ferrugem do eucalipto e desenvolver uma metodologia sensível e eficaz para detectar, quantificar e monitorar a presença de P. psidii em folhas de Eucalyptus grandis assintomáticas. Os dados obtidos no presente trabalho podem auxiliar a compreensão da interação planta-patógeno durante os estágios iniciais de infecção da ferrugem e colaboram para o entendimento da biologia do fitopatógeno para que no futuro sejam desenvolvidas melhores estratégias de controle de P. psidii em plantios de eucalipto. / Brazilian production of Eucalyptus spp. is one of the greatest in the world but it has been affected by Puccinia psidii Winter, the causal agent of eucalyptus rust. The comprehension of molecular mechanisms of pathogenicity and chemical composition of resistant and susceptible eucalyptus plants as well as having a molecular tool for early detection of the disease in field can be used for the development of improved control strategies against this phytopathogen. Molecular studies of P. psidii is limited because it is an obligate biotrophic fungus with limited in vitro development. Biotrophic fungi investigations are made mainly in planta at late developmental stages of the disease. This way, most information of early stages of infection as the development of specialized structures of biotrophic fungi are little understood. The study of early stages of the infection process of biotrophic fungi in planta is hampered by the high amount of plant material in relation to fungi material which is difficult to be obtained in an isolated form for analysis. In this work we developed a protocol to increase in vitro germination and structural differentiation of P. psidii and used this protocol to obtain isolated fungi material for the identification of candidate genes related with virulence factors and initial structural morphogenesis. Moreover, we analyzed the composition of metabolites present in the cuticular wax of leaves from resistant and susceptible E. grandis plants and developed a methodology for the detection of P. psidii in asymptomatic leaves of Eucalyptus grandis. Data obtained in this work help the comprehension of E. grandis-P.psidii interaction at early stages of the infection process and can be used for the development of improved control strategies of eucalyptus rust.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:55:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RafaelaMFB_DISSERT.pdf: 2000574 bytes, checksum: c72aa51b49be48bfd2402d6136436b13 (MD5) Previous issue date: 2013-03-01 / The Caatinga biome has a high diversity of potential and their conservation constitutes one of the greatest challenges of Brazilian science. The sustainable management of the Caatinga emerges as an alternative that through the formation of systems agrossilvipastoris, enables the use of forest resources sustainably, ensuring their conservation, regeneration and recovery. In RN this technique has been developed mainly in settlements of Agrarian Reform, such as P. A. Moaci Lucena, and their impacts go beyond the environmental aspect and reverberate socially and economically on the quality of life of family farmers. Despite the efficiency of the Sustainable Management of the Caatinga in the conservation of native species, many forests species of this biome faces serious problems of propagation and for this reason have become vulnerable to extinction, as is the case of Mimosa caesalpiniifolia Benth . Thus , it is evident the need to use sustainable alternatives to overcome the difficulties of propagation of this species and enable their replacement in areas where their existence is threatened. The Plant Biotechnology is considered as a promising alternative in this sense, considering that by micropropagation enables the large-scale production of seedlings with high health genetics status. This work has the following objectives: evaluate the perception of family farmers of P. A. Moaci Lucena in relation to social, environmental and economic impacts of the Sustainable Management of the Caatinga and check the conditions of germination and in vitro propagation of Mimosa caesalpiniifolia Benth that enabling the production of seedlings of this specie on a large scale. To achieve the first objective, semi-structured interviews showed that in the perception of farmers PA Moaci Lucena, the Sustainable Management of the Caatinga was responsible for generating many social, environmental and economic impacts that affected directly in the improvement in the quality of life of the families of the Settlement Project Moaci Lucena. Have to achieve the second objective, were investigated the influence of different substrates and concentrations of growth regulator BAP in the germination and shoot induction in vitro of Mimosa caesalpiniifolia Benth. The vermiculite was presented as the most suitable substrate for germination of this species, because it provided a more rapid germination, higher growth rates and higher dry matter accumulation. Regarding micropropagation, the concentration of 17.76 μmol/L of BAP presented a more responsive in relation to multiplication rate and the number of shoots in M. caesalpiniifolia, thus constituting the most suitable concentration for the in vitro propagation of this specie / O bioma Caatinga apresenta elevada diversidade de potenciais e a sua conserva??o constitui-se um dos maiores desafios para a ci?ncia brasileira. O Manejo Sustent?vel da Caatinga surge como uma alternativa que mediante a forma??o de sistemas agrossilvipastoris, viabiliza a utiliza??o dos recursos florestais de forma sustent?vel, assegurando a sua conserva??o, regenera??o e recupera??o. No Rio Grande do Norte essa t?cnica tem sido desenvolvida principalmente em Projetos de Assentamentos de Reforma Agr?ria, como ? o caso do P. A. Moaci Lucena, e seus impactos ultrapassam a vertente ambiental e repercutem social e economicamente na qualidade de vida de agricultores familiares. Apesar da efici?ncia do Manejo Sustent?vel da Caatinga na conserva??o de esp?cies nativas, muitas esp?cies florestais nativas deste bioma enfrentam s?rios problemas de propaga??o e por este motivo encontram-se vulner?veis ? extin??o, como ? o caso da Mimosa caesalpiniifolia Benth. Deste modo, fica evidente a necessidade de se utilizar alternativas sustent?veis que permitam contornar as dificuldades de propaga??o dessa esp?cie e viabilizem a sua reposi??o em ?reas onde a sua exist?ncia encontra-se amea?ada. A Biotecnologia Vegetal ? considerada como uma alternativa promissora nesse sentido, haja vista que mediante a micropropaga??o viabiliza a produ??o em larga escala de mudas com elevada qualidade fitossanit?ria e gen?tica. Este trabalho possui os seguintes objetivos: avaliar a percep??o dos agricultores familiares do P.A. Moaci Lucena em rela??o aos impactos socioambientais e econ?micos advindos do Manejo da Caatinga e verificar as condi??es de germina??o e propaga??o in vitro de Mimosa caesalpiniifolia Benth que viabilizem a produ??o de mudas dessa esp?cie em larga escala. Para se alcan?ar o primeiro objetivo, foram realizadas entrevistas semiestruturadas que permitiram concluir que na percep??o dos agricultores familiares do P.A. Moaci Lucena, o Manejo Sustent?vel da Caatinga foi respons?vel pela gera??o de diversos impactos socioambientais e econ?micos positivos que repercutiram diretamente na melhoria da qualidade de vida das fam?lias desse assentamento. J? para se alcan?ar o segundo objetivo, foi verificada a influ?ncia de distintos substratos e concentra??es do regulador de crescimento BAP na germina??o e indu??o de brota??es in vitro de Mimosa caesalpiniifolia Benth. A vermiculita apresentou-se como o substrato mais adequado para germina??o de sementes desta esp?cie, pois proporcionou uma germina??o mais r?pida, maiores taxas de crescimento e 9 o maior ac?mulo de mat?ria seca. Em rela??o ? micropropaga??o, a concentra??o de 17,76 μmol/L de BAP apresentou-se mais responsiva em rela??o ? taxa de multiplica??o e ao n?mero de brota??es em M. caesalpiniifolia, constituindo-se, portanto, a concentra??o mais indicada para a propaga??o in vitro dessa esp?cie

O Brasil é um dos principais produtores mundiais de Eucalyptus spp., mas a produção dessa cultura tem sido comprometida por perdas causadas pelo fungo Puccinia psidii Winter, agente causal da ferrugem do eucalipto. Compreender os mecanismos moleculares da patogenicidade desse fungo, conhecer a composição química de variedades de Eucalyptus spp. resistentes e suscetíveis ao fitopatógeno e ter em mãos uma ferramenta de diagnóstico precoce da doença são conhecimentos de fundamental importância para o desenvolvimento de estratégias de controle do fitopatógeno. Uma das principais barreiras que limitam o estudo molecular de P. psidii é o fato dessa espécie ser biotrófica obrigatória, tendo seu desenvolvimento in vitro limitado. Estudos de investigação a respeito de fungos biotróficos obrigatórios são realizados principalmente in planta e em estágios tardios da doença, deixando grande parte do conhecimento dos processos iniciais de infecção desconhecidos. Informações a respeito dos estágios iniciais da infecção, nos quais diversas estruturas típicas são formadas e podem indicar importantes características sobre fungos biotróficos, são de difícil acesso em estudos in planta em função da grande quantidade de material vegetal em relação à quantidade de material do fitopatógeno, que não é passível de ser removido completamente das amostras analisadas. Dessa forma, o presente projeto de pesquisa foi realizado com os objetivos de desenvolver um protocolo para induzir a germinação e a morfogênese estrutural in vitro de P. psidii, identificar genes candidatos relacionados à diferenciação das estruturas de infecção e de fatores de virulência, caracterizar os metabólitos presentes nas ceras cuticulares de folhas de Eucalyptus grandis resistentes e suscetíveis à ferrugem do eucalipto e desenvolver uma metodologia sensível e eficaz para detectar, quantificar e monitorar a presença de P. psidii em folhas de Eucalyptus grandis assintomáticas. Os dados obtidos no presente trabalho podem auxiliar a compreensão da interação planta-patógeno durante os estágios iniciais de infecção da ferrugem e colaboram para o entendimento da biologia do fitopatógeno para que no futuro sejam desenvolvidas melhores estratégias de controle de P. psidii em plantios de eucalipto. / Brazilian production of Eucalyptus spp. is one of the greatest in the world but it has been affected by Puccinia psidii Winter, the causal agent of eucalyptus rust. The comprehension of molecular mechanisms of pathogenicity and chemical composition of resistant and susceptible eucalyptus plants as well as having a molecular tool for early detection of the disease in field can be used for the development of improved control strategies against this phytopathogen. Molecular studies of P. psidii is limited because it is an obligate biotrophic fungus with limited in vitro development. Biotrophic fungi investigations are made mainly in planta at late developmental stages of the disease. This way, most information of early stages of infection as the development of specialized structures of biotrophic fungi are little understood. The study of early stages of the infection process of biotrophic fungi in planta is hampered by the high amount of plant material in relation to fungi material which is difficult to be obtained in an isolated form for analysis. In this work we developed a protocol to increase in vitro germination and structural differentiation of P. psidii and used this protocol to obtain isolated fungi material for the identification of candidate genes related with virulence factors and initial structural morphogenesis. Moreover, we analyzed the composition of metabolites present in the cuticular wax of leaves from resistant and susceptible E. grandis plants and developed a methodology for the detection of P. psidii in asymptomatic leaves of Eucalyptus grandis. Data obtained in this work help the comprehension of E. grandis-P.psidii interaction at early stages of the infection process and can be used for the development of improved control strategies of eucalyptus rust.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:59:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_cristina_cuchiara.pdf: 54838030 bytes, checksum: 080d5f9c1d6101f82e129f93588c1a24 (MD5) Previous issue date: 2010-03-19 / The castor bean (Ricinus communis L.) it is known by the high adaptation capacity to the different climate conditions and soil, characteristics these that it possible be her cultivated commercially in different areas of Brazil. Consequently, researches about conservation and germination of the pollen are indispensable to the programs of genetic improvement. The purpose is to evaluate the viability and conservate grains of castor bean pollen. For the study, were used floral buttons of the cultivars IAC 80, AL Guarany 2002 and Lara. In the first experiment, were selected appropriate parameters of pH (5, 6, 7 and 8), temperature (15, 20, 25 and 30 ºC), sucrose (0; 5; 10 and 20%) and combinations of 4, 8 and 10 mgL-1 boron with sucrose. In the second experiment, the storage of pollen was evaluated of the cultivars IAC 80 and AL Guarany 2002 in four places (liquid nitrogen (-196 ºC); ultrafreezer (-72 ºC); freezer (-18 ºC) and refrigerator (4 ºC)) being analyzed week after week to complete thirty days and in the sixty days. The third experiment was evaluated the effect about the time of defreezing of pollen cultivars IAC 80 and AL Guarany 2002, submitted to the same places and storage periods (15, 30 and 60 days) analyzed of hour after hour to complete six hours and after twenty-four hours. The viability test was constituted preparing ideal culture medium for each experiment, after that it was deposited in excavated plates, where the pollen was distributed on the surface of the medium, the plates were put in humid camera and taken for incubation. In random delineation, were analyzed a hundred pollens per repetitions in a total of four repetitions for the first experiment and six for the others. I In the first experiment was observed that pH values above 6,0 cause decrease in the amount of germinated pollens. The temperature of 20 ºC and 5% and 10% of sucrose were appropriate for the germination. Sucrose and 4 and 8 boron mgL-1 increased the germination, however 10 mgL-1 didn't favor. It was observed in the second experiment that the storage in 4 and -18 ºC is not efficient, the number of germinated pollens falls quickly causing unviability after the fifth week, in -72ºC the pollens of the cultivar IAC 80 stayed viable even the fourth week and the cultivar AL Guarany 2002 presented viability the sixty days and -196 ºC was very efficient even to fifth week. With the third experiment can be verified that for the cultivars IAC 80, to the 15 and 30 days of storage, the temperature of the -72 ºC presented around 50% of germination needing five and six hours of incubation for the defreezing, respectively; for the cultivar AL Guarany 2002, the best result was reached to -196 ºC and the sixty days was occurred the unviability. Therefore, the cultivars answered in a different way the best methodology of evaluation of pollen viability and conservation, however, the one that suggests be species-specific. / A mamoneira (Ricinus communis L.) é conhecida pela alta capacidade de adaptação às diferentes condições de clima e solo, características estas que a possibilita ser comercialmente cultivada em diferentes regiões do Brasil. Consequentemente, pesquisas sobre conservação e germinação do pólen são indispensáveis aos programas de melhoramento genético. O objetivo deste estudo foi avaliar a viabilidade e a conservação de grãos de pólen de mamoneira. Para tanto, foram utilizados botões florais das cvs. IAC 80, AL Guarany 2002 e Lara. No 1º experimento, foram selecionados parâmetros adequados de pH (5, 6, 7 e 8), temperatura (15, 20, 25 e 30 ºC), sacarose (0; 5; 10 e 20%) e combinações de 4, 8 e 10 mgL-1 boro com sacarose. No 2º experimento, foi avaliado o armazenamento de pólen das cvs. IAC 80 e AL Guarany 2002 em 4 ambientes (nitrogênio líquido (-196 ºC); ultrafreezer (-72 ºC); freezer (-18 ºC) e refrigerador (4 ºC)) sendo a análise realizada de semana em semana até completar 30 dias e aos 60 dias. No 3º experimento foi avaliado o efeito do tempo de descongelamento de pólen das cvs. IAC 80 e AL Guarany 2002, submetidas aos mesmos ambientes e períodos de armazenamento (15, 30 e 60 dias) analisados de hora em hora até completar 6h e após 24h. O teste de viabilidade foi constituído do preparo do meio de cultura ideal para cada experimento, após depositado em placas de lâmina escavada, onde o pólen foi distribuído sobre a superfície do meio e após as placas foram colocadas em câmara úmida e levadas para incubação. Em delineamento inteiramente casualizado, foram analisados 100 polens/repetição num total de 4 repetições para o 1º experimento e 6 para os demais. No 1º experimento foi verificado que valores de pH acima de 6,0 provocam diminuição na quantidade de polens germinados. A temperatura de 20 ºC com 5% e 10% de sacarose foram adequadas para a germinação. Sacarose com 4 e 8 mgL-1 de boro aumentaram a germinação, porém 10 mgL-1 não favoreceu. Observou-se no 2º experimento que o armazenamento em 4 e -18 ºC não é eficiente, pois o número de polens germinados cairam rapidamente causando inviabilidade após a 5ª semana. Em -72 ºC os polens da cv. IAC 80 permaneceram viáveis até a 4ª semana e os da cv. AL Guarany 2002 apresentaram viabilidade aos 60 dias e -196 ºC foi muito eficiente até a 5ª semana. Com o 3º experimento foi possivel verificar que para a cv. IAC 80, aos 15 e 30 dias de armazenamento, a temperatura de -72 ºC apresentou em torno de 50% de germinação necessitando de 5 e 6h de incubação para o descongelamento, respectivamente; para a cv. AL Guarany 2002, o melhor porcentual foi alcançado a temperatura de -196 ºC sendo observado aos 60 dias a ocorrência de inviabilidade. Portanto, as cultivares responderam de forma diferente a melhor metodologia de avaliação de viabilidade polínica e conservação, no entanto, o que sugere ser espécie-específico.