Orientador: Marco-Aurelio De Paoli / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-12T02:38:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maia_DenisonRicardoJustino_M.pdf: 5659981 bytes, checksum: 9ffd39a2d7f89050f1be4a3f02262851 (MD5) Previous issue date: 2000 / Mestrado

Orientador: Roney J. Poppi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:55:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Balbinot_Leoberto_M.pdf: 4559423 bytes, checksum: ae1594b628c06ed33d229de50ee4b67b (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Redes neurais artificiais são algoritmos que tentam imitar o comportamento do cérebro humano. Mapas auto-organizáveis (SOM) de Kohonen consistem de um tipo de rede neural artificial não-supervisionada constituída por uma única camada de neurônios. Seu objetivo é projetar dados de alta dimensão num espaço de dimensão reduzida, sendo útil na classificação e visualização de dados de alta dimensão. Neste trabalho foram realizadas três aplicações de SOM: algas, polímeros e solos. Na primeira aplicação, um conjunto de 11 amostras de algas abrangendo 11 espécies e 2 grupos taxonômicos foi estudado. Os sinais analíticos usados são as concentrações de metais das algas, obtidos por ICP OES. Utilizaram-se dois métodos de abertura das algas: digestão sob microondas e por ultra-som. A classificação distinguiu as algas em função de seus grupos taxonômicos, assim como demonstrou que os dois métodos de abertura são diferentes. Na segunda aplicação foi estudada a degradação de poliolefinas pigmentadas (empregadas na confecção de pára-choques automotivos) através de dados obtidos por FTIR. Analisou-se o efeito de um dos constituintes da formulação quanto à sua natureza fotoquímica: negro de fumo comum (NFcm) e condutor (NFcd). O estudo indicou a formulação mais fotoestável e sugeriu uma sinergia entre o NFcd e o pigmento TiO2, presentes na formulação mais estável. Na terceira aplicação parâmetros físicos, químicos e biológicos de solos foram utilizados para avaliar as suas qualidades e o efeito sobre eles dos manejos orgânico e convencional. No manejo convencional emprega-se defensivos e fertilizantes sintéticos, enquanto que na agricultura orgânica utilizam-se materiais naturais. O uso de SOM permitiu a distinção dos solos em função do emprego ou não do manejo e do seu tipo. O estudo mostrou maior conservação dos solos cujo manejo é orgânico, assim como correlações entre parâmetros, e entre parâmetros e tipos de manejos / Abstract: Artificial neural networks (ANN) attempt to imitate the human brain behaviour. Kohonen self-organizing maps (SOM) consist of a kind of unsupeNised ANN formed by a single layer of neurons. It projects high-dimensional data into a low-dimensional space; it is used for classification and visualization of high-dimensional data sets. This work reports three SOM applications: algaes, injection molded copolymers and soils. In the first application, an 11 samples algae set belonging to 11 species and two taxonomíc groups were analyzed. The data used correspond to the algaes metal concentratíons, obtained by means of ICP OES. Two different methods to extract metais were tested: microwave digestion and ultra-sound. Classification has distinguished algaes by considering their taxonomic groups and demonstrated that the two sample preparation methods are, in fact, different. The second application is a study of the photostabilization of injection molded co-polymers containing Ti02, whose formulation is used on car bumpers, with data generated by FTIR. One ana/ysed the effect of a constituent with relation to its photochemistry nature: conducting (CCB) and non conducting (CB) carbon black. It was found the more photostable formulation, as well as the results has pointed to a synergism effect between CCB and Ti02 present in the more stable formulation. In the third application chemica/, physical and biological soil parameters were used to evaluate its quality and the organic and conventional practices of management. Conventional practices use synthetic defensives and fertilizers, while organic agriculture employs only natural materiais. SOM has allowed the distinction between presence or absence of soil management, and their types. The results showed better conservation of soils with organic management, as well as correlations among parameters and among parameters and managements were identified. / Mestrado / Mestre em Química

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:07:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo7925_1.pdf: 1184307 bytes, checksum: 2503378983f5e07ea3147d8bde83ec7f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / O álcool combustível, por ser uma fonte renovável de energia e menos poluente que os combustíveis fósseis, está se tornando uma das principais alternativas para substituição destes. Novas tecnologias e principalmente o Protocolo de Kyoto vêm incentivando o aumento na produção e consumo do álcool. O Brasil, por ter grande capacidade de produção e suficiência nesta área, pode vir a ser um dos maiores exportadores de álcool combustível. Para isto, além de aumentar sua produtividade, o álcool produzido deve também ter uma qualidade que atenda às exigências do mercado exterior. Sendo assim, um processo de produção que seja controlado de forma eficiente, utilizando metodologias analíticas confiáveis, rápidas e que possam determinar simultaneamente vários parâmetros de qualidade é de fundamental importância. A espectroscopia na região do infravermelho próximo (NIR) e intermediário (MID), por ser rápida, não destrutiva, de relativo baixo custo e possibilitar a determinação de vários constituintes simultaneamente em um curto espaço de tempo, em conjunto com métodos quimiométricos para tratamento dos dados, vem sendo amplamente empregada no controle de processos e produtos, inclusive em usinas de produção de açúcar. Com o objetivo de caracterizar, classificar e prever algumas propriedades do álcool combustível produzido na região foram coletadas amostras de álcool etílico anidro e hidratado em três usinas de Pernambuco e uma de Sergipe e determinados 15 parâmetros de qualidade. Foram também obtidos os seus espectros na região do infravermelho próximo e intermediário. A técnica estatística multivariada de análise de componentes principais (ACP) foi empregada na análise exploratória dos dados obtidos, com o objetivo de avaliar existência de possíveis agrupamentos referentes a alguma característica específica. Os melhores resultados foram as ACP dos espectros de MID que mostraram uma melhor separação dos agrupamentos por usinas. Foi investigada a possibilidade de utilizar a espectroscopia MID como alternativa para a determinação de algumas propriedades e contaminantes do álcool combustível, através de modelos de regressão por mínimos quadrados parciais (PLS - Partial Least Squares). Os resultados para o álcool anidro não foram satisfatórios, apenas a densidade foi bem prevista, com erro de previsão comparável ao valor estimado para a precisão intermediária do método de referência. Para o álcool hidratado, parâmetros como metanol, densidade, acetato de etila, álcool n-propílico e pH, apresentaram correlações satisfatórias, sendo que para a densidade, pH e álcool n-propílico forma obtidos erros de previsão equivalentes aos valores de precisão intermediária dos métodos de referência. Além disso, foi investigada a possibilidade de utilização da espectroscopia na região MID, aliada a técnica de classificação multivariada SIMCA (Soft Independent Modeling of Class Analogies), para a identificação da fraude em que o álcool anidro é rehidratado (álcool molhado) e vendido como álcool hidratado, sem pagamento de impostos. Os resultados mostraram-se promissores para a identificação deste tipo de fraude. Através do modelo construído, nenhuma das amostras de teste foi classificada incorretamente. Entretanto, 15% foram classificadas como pertencentes às duas classes (molhado e hidratado)

Orientador: Pedro L. Rosalen / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-25T08:15:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lucio_ElisabethMariaRochadeAlbuquerque_D.pdf: 3791298 bytes, checksum: d43e9b28a732ea139bd405761aa12818 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi identificar e determinar a estrutura química do alcalóide secundário de maior concentração encontrado no Pilocarpus microphyllus Stapf (jaborandi) e seus efeitos farmacológicos. As folhas de jaborandi foram coletadas de 7 regiões dos Estados Brasileiros Maranhão (MA) e Piauí (PI) (Nordeste), onde o teor de pilocarpina é baixo e o de alcalóide secundário é alto. Os alcalóides dessas folhas foram extraídos segundo descrito por Lucio et al., 1997. A estrutura do cloridrato de alcalóide secundário - AS puro foi determinada por faixa de fusão, espectrometria no infravermelho e R.M.N. protônica e carbono-13. O alcalóide secundário foi submetido a testes farmacológicos utilizando camundongos {Mus musculus SPF) para determinação da DL50 calculados pelo método Litchfield & Wilcoxon (1949), determinação do peso corporal dos arrimais sobreviventes da DL50 e a avaliação ou "screening" Hipocrático. As melhores folhas de jaborandi com mais alta porcentagem de A.S. foram encontradas na Represa da Boa Esperança [entre Uruçuí (PI) e Benedito Leite (MA)], a qual mostrou baixa porcentagem de pilocarpina e alta porcentagem de alcalóides secundários pela determinação de alcalóides totais (% A.T. = 0,61; Püocarpina/AS = 20/80). A faixa de fusão para o AS base (184° C -186° C). As freqüências de absorção obtidos no espectro de IV para o AS apresentaram uma banda de estiramento OH (3117 cm'1) e o valor da freqüência obtido para C=0 foi 1750 cm"1. Os valores de RMN de *H e carbono-13 para o AS apresentaram 16 sinais de carbono e deslocamento químico para os grupos CHOH (õ 5,20) e anel fenil (ó 7,36). Esses dados levam a sugerir a fórmula molecular Ci6Hi8N203 para o AS. O espectro de (*H) RMN do AS mostrou semelhança com o espectro da epiisopilosina encontrado na literatura. O valor de DL50 para o cloridrato de pilocarpina foi de 253,2 mg/kg, e para o cloridrato de AS foi de 540,9 mg/kg. Todos os animais que sobreviveram a determinação da DL50 ganharam em peso no período de 14 dias de observação, e nenhuma diferença foi encontrada entre os grupos que receberam o cloridrato de pilocarpina e o AS. Na avaliação ou "screening" Hipocrático o AS demonstrou ser um estimulante periférico do sistema nervoso parassimpático, semelhante a pilocarpina, porém somente em altas doses. Provavelmente isto pode estar relacionado com o tamanho do grupo substituinte do AS que talvez cause um impedimento estérico na ligação droga-receptor. Concluímos que o AS das folhas do jaborandi provenientes da Represa da Boa Esperança [entre Uruçuí (PI) e Benedito Leite (MA)] é a epiisopilosina a qual apresentou menor toxicidade que a pilocarpina / Abstract: Chemical and Pharmacological study of. the secondary alkaloid of Pilocarpus microphyllus Stapf. The aim of this study was to identify and determine the chemical structure of the secondary alkaloid in the highest product found in the Pilocarpus microphyllus Stapf (jaborandi) and its pharmacological effects. The leaves of jaborandi were collected from 7 regions of the Brazilian states of Maranhão (MA) and Piauí (PI) (Northwest) where the level of pilocarpine is low and the level of the second alkaloid is high. The alkaloids were extracted as described by Lucio et al.; 1997. The structure of the purified-secondary-hydrochloride alkaloid (SA) was determined by fusion range, infrared absorption spectra (IR) and nuclear magnetic resonance NMR proton and carbon-13. The SA was submitted to pharmacological test by using mice (Mus musculus, SPF) to determine: DL50by Litchfield & Wilcoxon (1949) methods, gain of body weight of the surviving animals from DL50 and hippocratic screen. The best leaves of jaborandi with the highest percentage of SA were found in Represa da Boa Esperança [between Uruçuí (PI) and Benedito Leite (MA)]S which showed low percentage of pilocarpine and high percentage of SA by determination of total alkaloids (TA) (%TA= 0,61%; Pilocarpine/SA- 20/80). The fusion range for the SA base was 184 - 186 °C. The frequencies of absorption found in the spectra of IR to the SA showed an assignment of stretching of OH (3117 cm"1), and the value of the frequency for C=0 was 1750 cm"1. The NMR values of JH and carbon-13 for the SA presented 16 signs of carbon and the chemical shift for groups CHOH (Õ 5,20), and ring fenil (õ 7,36). These data suggest that the molecular formula for the SA is C16H18N2O3. Moreover, the spectra of (!H) NMR of the SA showed similarity to the epiisopilosine spectra found in the literature. The value of DL50 for the hydrochloride pilocarpine was 253,2mg/kg and for the secondary hydrochloride alkaloid was 540,9 mg/kg. All the animals that survived from DL50 determination gained weight during fourteen days of. observations and no difference was found between the pilocarpine and SA groups. In the hippocratic screen, the SA group showed effects as peripheral-stimulant of the parasympathetic nervous system, such as pilocarpine but only in high doses. Probably this could be related to the size of the replacing group of the SA, which probably causes a sterically hinder on the drug-receptor connection. Concluding that the SA leaves of the jaborandi from Represa da Boa Esperança [between Uruçuí (PI) and Benedito Leite (MA)] is epiisopilosine, and showed lower toxicity when compared with pilocarpine / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Ciências

Orientador: Munir Salomão Skaf / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-25T18:29:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Borin_IvanaAparecida_D.pdf: 759366 bytes, checksum: 11b83c1479a8df407a3bf3d8bf1b38c3 (MD5) Previous issue date: 1999 / Doutorado

Orientador : Adalberto B. M. S. Bassi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-14T10:17:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_MarciaMiguelCastro_D.pdf: 4900383 bytes, checksum: 6831245c4ca70e75cc1de27f4e497df2 (MD5) Previous issue date: 1984 / Doutorado

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:14:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4322_1.pdf: 2370514 bytes, checksum: 51ed8b9f823cd67ef877e1162f322d27 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Os métodos espectroscópicos baseados em sensores ópticos para detecção de contaminantes em águas utilizam, em geral, a pré-concentração do analito em uma fase sensora. Dentro dessa abordagem, o objetivo desse trabalho foi avaliar filmes de poli(cloreto de vinila) - PVC para a determinação de benzeno, tolueno, etilbenzeno e xilenos (BTEX) e hidrocarbonetos clorados (clorobenzeno, tricloroetileno e triclorobenzeno) em meio aquoso utilizando a espectroscopia no infravermelho médio. Os efeitos da quantidade de plastificante (25 % ou 40 %) e do tipo de plastificante (di-2-etilhexilftalato (DOP), di-2-etilhexilsebacato (DOS) e 2-nitrofeniloctil éter (NPOE)) na fase sensora foram avaliados. Os dados espectrais foram usados sem pré-tratamento, com correção de linha de base, normalizados e também os espectros derivativos (1a derivada com suavização Savitzky-Golay com janela de 11 pontos). Como aplicação do sensor, investigou-se uma contaminação de água por gasolina A, gasolina C, diesel puro e diesel com 2% de biodiesel através da análise por componentes principais. Possíveis efeitos de interferências e interações na determinação de BTEX foram avaliados ajustando-se um modelo cúbico especial aos dados obtidos, empregando-se um planejamento de misturas centróide simplex. Para a preparação da fase sensora foi utilizada uma mistura de PVC com plastificante e 0,3 % de estabilizante Tinuvin P (2- (2-hidroxi-5-terc-octilfenil)benzotriazol), dissolvida em THF. As medidas foram realizadas inserindo-se, inicialmente, a fase sensora e 3,0 g de NaCl em um frasco de 35 mL, completamente preenchido com a solução contendo o analito e mantendo-se agitação constante por um tempo determinado. Em seguida, a fase sensora foi removida do frasco, seca com papel absorvente e levada ao percurso óptico do espectrofotômetro para medidas da transmitância, tomando-se a própria fase sensora como referência. Os espectros foram obtidos na região de 12820 a 650 cm-1 em um espectrotofotômetro spectrum GX FTIR da Perkin-Elmer. O estudo cinético mostrou que os filmes de PVC alcançam a saturação em torno de 180 min para os BEX e 90 min para o tolueno. Para os organoclorados este tempo foi reduzido para 80 min. Observou-se também que os filmes com 40 % de plastificante apresentaram, em relação às fases sensoras com 25 %, maior sensibilidade e menores limites de detecção. No estudo do efeito do plastificante, os resultados mostram que os plastificantes NPOE e DOP apresentam um desempenho similar, enquanto que o DOS fornece melhores valores de sensibilidade e limite de detecção para todos os compostos. Com o uso de DOS e 60 minutos de extração, os limites de detecção foram de 2,4; 0,4; 1,5 e 1,2 mg L-1 para os BTEX, respectivamente. Para os hidrocarbonetos clorados foram de 1,4; 2,0 e 0,8 mg L-1 para clorobenzeno, tricloroetileno e triclorobenzeno, respectivamente. Na análise da contaminação da água por combustíveis, observou-se, nos gráficos dos escores das componentes principais, agrupamentos bem distintos para cada tipo de contaminação. Com relação ao estudo das interações multicomponentes, observou-se que benzeno e xilenos não sofrem interferência dos outros analitos na mistura nos números de onda de 676 e 1522 cm-1, respectivamente. Realizando-se uma calibração univariada nestes picos, erros relativos médios de 4 % para os xilenos e 22 % para o benzeno foram obtidos analisando-se três misturas teste. O etilbenzeno e o tolueno sofrem interferências espectrais e efeitos de interação em todos os picos avaliados, necessitando empregar estratégias de calibração multivariada. Estes resultados demonstram a potencialidade do método proposto, empregando a fase sensora de PVC com medidas de transmitância na região do infravermelho médio, para determinação da contaminação de águas por hidrocarbonetos aromáticos e clorados

Orientador: Roy Edward Bruns / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:09:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Borges_CleberNogueira_M.pdf: 1387457 bytes, checksum: ce0ce2f697f4f0cc4d74355461ceecbf (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A exatidão das estimativas teóricas de intensidades e freqüências experimentais no infravermelho é limitada por diversos fatores. Um método para calcular fatores de escala de grupos característicos é proposto aqui. Fatores de escala para as intensidades e freqüências vibracionais de grupos característicos para três moléculas pequenas de referência: HCN, CzHz e CZH6 foram obtidos de resultados experimentais conhecidos e valores teóricos calculados. Estes fatores foram aplicados às freqüências das moléculas maiores: HC3N, C4Hz, C6Hz, CzNz, C4N2 e C6Nz. Além disso, fatores foram também aplicados às intensidades teóricas do HC3N. Melhor concordância entre freqüências vibracionais teóricas escaladas e seus valores experimentais correspondentes foi obtida pelo método proposto para os estiramentos C-H, C=C e C=N do que a determinada usando a técnica do cálculo da média relatada recentemente na literatura. Entretanto a técnica do cálculo da média fornece estimativas com maior exatidão para freqüências de deformação. Isto pode ser explicado pelo fato de que as deformações, ao contrário dos estiramentos, não são bons grupos característicos, pois sua forma varia muito entre moléculas diferentes. Os fatores de escala aplicados às intensidades foram menos eficazes em corrigir os valores teóricos. Além disso, estudos usando a análise de componentes principais na correção das intensidades não parecem promissores / Abstract: The accuracy of theoretical estimates of experimental frequencies and infrared intensities is limited by several factors. Here a method for calculating group characteristic scale factors is proposed. Scale factors for the vibrational frequencies and intensities of characteristic group for three small reference molecules: HCN, C2H2 and C2H6 are obtained from know experimental results and ca1culated theoretical values. These escale factors were applied to frequencies of larger molecules: HC3N, C4H2, C6H2, C2N2, C4N2 and C6N2. Furthermore scale factors were applied also to the theoretical intensities of HC3N. Better agreement between scaled theoretical vibrational frequencies and their corresponding experimental values were obtained by proposed method for the C-H, C=C and C=N stretches than are determine using averaged technique recent1y reported in the literature. However the averaged technique provides more accurate estimates for bending frequencies. This can be explained by the fact of that the bending, in contrast of the stretchings, are not good characteristic groups, therefore its form varies very between different molecules. The scale factors applied to intensities were less effective in correcting theoretical values. Furthermore studies using principal component analysis for correcting intensities does not seems promising / Mestrado / Mestre em Química

Orientadores: Everson Alves Miranda, Kris Arvid Berglund / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:24:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tamagawa_RosanaEmi_D.pdf: 5093658 bytes, checksum: 8e5057fa7c6667bdb3a480e77001d14a (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Neste trabalho as espectroscopias ATR-FTIR ("Attenuated Total Reflectance - Fourier Transform Infrared Radiation") e Raman foram utilizadas no monitoramento e controle de supersaturação de proteínas. Nos estudos utilizando A TR-FTIR foi desenvolvida uma célula para cristalização por difusão de vapor adaptada a um elemento de reflectância interna ATR de germânio (Ge), possibilitando assim o monitoramento in situ nesse sistema. O monitoramento da concentração de soluções de lisozima no interior dessa célula se baseou em um modelo de calibração PLS ("Partial Least Squares") construído a partir de espectros de soluções com concentrações conhecidas dessa proteína. Esse aparato foi aplicado com sucesso na concentração lenta e gradual de soluções de lisozima e o monitoramento da concentração protéica ao longo do tempo se mostrou bastante preciso. Na presença de cristais, entretanto, houve influência dos mesmos sobre o monitoramento da solução, causado pela decantação e suposta interação dos cristais com a superfície do elemento de Ge. Embora não tenha ocorrido adsorção protéica a partir da solução no elemento A TR, a disposição das moléculas no hábito cristalino parece favorecer a adsorção dos cristais de proteína no Ge. Além desse sistema, foi avaliada uma sonda A TR de sele neto de zinco (ZnSe) que apresentou a vantagem de não sofrer influência significativa da temperatura na predição de concentrações de lisozima, gerando a possibilidade de ser aplicada no controle da supersaturação por temperatura. Essa sonda, entretanto, apresentou deficiência no monitoramento ao longo do tempo, de soluções de lisozima e tripsina, devido à provável adsorção protéica no elemento ATR. A espectroscopia AT -FTIR foi assim inadequada para o monitoramento de supersaturação nas condições estudadas. A espectroscopia Raman, apesar de não ser tradicionalmente utilizada para quantificações, permitiu o monitoramento in sftu da supersaturação com relativa precisão. Um modelo de calibração PLS desenvolvido a partir de soluções padrão de aprotinina e (NH4):zSO4 possibilitou medidas simultâneas de suas concentrações durante cristalizações em gota suspensa ("hanging-drop"). Através dessa possibilidade determinou-se a solubilidade de aprotinina na presença de NaCI e (NH4hSO4 a partir de gotas de 10 _l de solução e demonstrou-se o controle da supersaturação propiciando aumento do tamanho dos cristais de aprotinina em cerca de três vezes em relação à cristalização sem controle de supersaturação. O monitoramento simultâneo da concentração de proteína e sal, trouxe evidências da co-cristalização de aprotinina e (NH4)2S04, isto é, de que ambas as moléculas participaram na formação dos cristais. Dessa forma, apesar do potencial da espectroscopia infravermelho, verificou-se a superioridade da metodologia de monitoramento baseado na espectroscopia Raman. Uma das principais vantagens desse segundo método foi a aplicação da sonda de fibra óptica que permitiu medidas remotas e de modo não invasivo, tendo em vista que a interação de proteínas com diferentes materiais pode ser um problema crítico no monitoramento in situ de suas soluções / Abstract: In this study, Raman and ATR-FTIR (Attenuated Total Reflectance - Fourier Transform Infrared Radiation) spectroscopies were employed for the in situ monitoring and control of protein supersaturation. A germanium (Ge) ATR accessory adapted to a vapour diffusion crystallization cell allowed the ín situ monitoring of solutions inside this cell. The monitoring of Iysozyme concentrations was based on a PLS (Partial Least Squares) calibration of spectra trom solutions with known concentrations of this protein. This apparatus was successfully apllied for the gradual increasing of Iysozyme concentration, which was monitored over time with good accuracy. H oweve r, when this system was used to monitor the liquid phase in the presence of crystals, the prediction was affected by a hypothetical interaction between Iysozyme crystals and Ge surface. Although any interaction of protein from liquid phase and the A TR element was observed, it seems that some features of the crystal surface favoured its adsorption onto the Ge element. Besides the Ge based system, a zinc selenide (ZnSe) immersion probe was also evaluated for the monitoring purpose. Lysozyme concentrations measured with this probe were demonstrated to not being significantly affected by temperature, meaning that it could be applied for the supersaturation control by temperature. This probe, however, was not adequate for the monitoring of Iysozyme and trypsin solutions over time, due to the protein adsorption onto the A TR element. Therefore, the A TR-FTIR methods were not suitable for the measuring of supersaturation in the studied conditions. In spite of not being traditionally applied as a reliable quantification technique, Raman spectroscopy allowed the ín situ measurement of aprotinin and (NH4)2S04 concentrations with reasonable precision. A PLS calibration model, based on spectra of aprotinin and (NH4)_O4 solutions with known concentrations allowed the simultaneous monitoring of these species during hanging drop crystallizations. This calibration model was employed in the determination of aprotinin solubility in the presence of NaCI and (NH4hSO4 carried out in the hanging drop mode using 10 _I drops. Monitoring of the drop compositional change over time allowed the control of supersaturation, accomplished by vapourdiffusion control, leading to an increase of crystal size three fold when compared to crystals obtained without supersaturation control. The observed decrease of protein and salt concentrations during the growth process was an indicative of the co-crystallization of aprotinin and (NH4)2S04: both molecules were taken into the crystal structure. Therefore, despite the potential of ATR-FTIR spectroscopy, Raman technique was considered superior for the present purpose. Certainly the non-invasive nature of Raman data collection should be pointed out as its main advantage over A TR-FTIR technique, considering that the sticky nature of proteins can be a critica I problem for immersion probes / Doutorado / Desenvolvimento de Processos Biotecnologicos / Doutor em Engenharia Química

Orientador: Isabel Cristina Sales Fontes Jardim / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-24T01:41:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melo_LucioFlavioCosta_M.pdf: 2630353 bytes, checksum: 4c2f798e472fbf4b2cd2f1232b1b89b0 (MD5) Previous issue date: 1998 / Mestrado