OBJETIVOS: Estudio de la prevalencia de enfermedades del tejido conectivo así como de síntomas, signos y alteraciones de laboratorio de conectivopatía en portadores de implantes mamarios de silicona comparada con un grupo control así como la prevalencia de complicaciones locales. Estudio de anticuerpos antisilicona en la población obtenida y su especificidad mediante su determinación en enfermedades autoinmunes definidas. METODOS: PACIENTES: Pacientes con diagnóstico de reconstrucción mamaria entre 1980 y 1995 del Servicio de Cirugía Plástica. Controles: pacientes mastectomizadas no reconstruidas del Servicio de Oncología del Hospital Valle Hebron y un grupo de mujeres sanas donantes de sangre. METODOS: Se realizó una historia clínica y exploración física y se analizó en todos los casos los ANA, anti LKM, anti mucosa gástrica y anti músculo liso, anticuerpos antitiroglobulina y anti microperoxidasa y en los pacientes ANA positivo, los anticuerpos anti dsDNA, anti Jo1, anti Scl 70, U1-RNP, anti La, anti Ro y anti Sm. En todos los sueros se determinó los anticuerpos anti polidimetilsiloxano, anti silicato sódico y anti acrilamida parcialmente polimerizada mediante ELISA e inmunoblot. También en 75 sueros de pacientes con conectivopatías definidas. RESULTADOS: Se obtuvo una muestra de 247 individuos, 100 % mujeres, de 123 portadoras de prótesis --83 por reconstrucción postmastectomía y 40 por estética --.y 124 controles --71 mastectomizadas y 53 mujeres sanas. Se analizaron 151 prótesis (133 de silicona, 6 de suero fisiológico, 4 doble luz y 8 desconocidas). La edad media fue de 45.9 años (49.2 años en el grupo de expuestas a silicona y de 42.5 años en el control) (p=0.003). El tiempo medio de exposición a las prótesis fue de 4.5 años para el total de la población estudiada, (4.37 años para el grupo de mastectomizadas reconstruidas y 4.88 años para el grupo de estética) (p=0.4). Solamente una paciente, del grupo de estética, presentó una conectivopatía definida que cumplía criterios de síndrome de Sjögren. Los signos y síntomas más frecuentemente hallados en las mujeres portadoras de silicona fueron parestesias (22.7%) artralgias (20.32%), síndrome depresivo (17%), astenia (14.6%) y mialgias (13%). Se identificó un total de 104 complicaciones locales, siendo la más frecuente la contractura capsular con un 45% global y siendo significativamente más prevalente en las mastectomizadas que en las pacientes de estética (p= 0.009). Se hallaron resultados positivos para anticuerpos antinucleares (ANA), anticuerpos antitiroideos y anti acrilamida parcialmente polimerizada (APA). No hubo diferencias significativas para ningún parámetro de laboratorio con excepción de los anticuerpos antiacrilamida parcialmente polimerizada (APA). Las pacientes expuestas a silicona presentaron un riesgo mayor de resultados positivos (RR 3.36, IC al 95% 0.94-11.91, p 0.044). La prevalencia de APA en expuestas a silicona no fue significativamente distinta a la hallada en los sueros de conectivopatías definidas (p=0.97). El 34.5% de los sueros fue ANA positivo. El grupo que dio resultados positivos con mayor frecuencia fue el de mastectomizadas sin prótesis (50%), seguido del de mastectomizadas con prótesis (36.2%). No se observó diferencias entre expuestas a silicona y sus controles (p=0.68). No se obtuvo resultados positivos para anti polidimetilsiloxano ni para anti silicato sódico en ningún caso. CONCLUSIÓN: No se halló mayor prevalencia de conectivopatías en las pacientes expuestas a silicona que en sus controles. La prevalencia de complicaciones locales fue muy importante en su conjunto. / OBJETIVES: We analyse the prevalence of connective tissue diseases or related symptoms, local complications and laboratory features in women with silicone breast implants in a controlled study including anti silicone antibodies and a specificity study by determination in defined connective tissue diseases. METHODS: Patients with mammary reconstruction between 1980 and 1995. Controls: patients who undergone mastectomy without reconstruction from the oncology service from Hospital Valle Hebron and a healthy control group. METHODS: All patients were interviewed and physically explored. We analysed in all cases ANA, LKM, gastric mucose, smooth muscle, tyroglobuline and microperoxidase antibodies. In ANA positive we determined dsDNA, Jo1, Scl 70, U1-RNP, La, Ro and Sm antibodies. In all sera collected and in 75 sera from defined connective tissue diseases we determined poly dimethyl siloxane, sodium silicate and acrilamida partially polymerised antibodies by an ELISA and inmunoblot test. RESULTS: We obtained 247 individuals, 100 % women, 123 with silicone breast implants --83 post mastectomy y 40 by aesthetic reasons --and 124 controls --71 mastectomy and 53 healthy controls. We analysed 151 breast prostheses (133 silicone, 6 saline, 4 double lumen and 8 unknown). The media of age was 45.9 year (49.2 year in silicone exposed and 42.5 year in controls) (p=0.003). The medium time of exposure to silicone was 4.5 year (4.37 year in mammary reconstruction group and 4.88 year in the aesthetic group) (p=0.4). Only one patient, from the aesthetic group, met criteria of a defined connective disease, a Sjögren syndrome. The symptoms more frequently shown exposed to silicone were paresthestesia (22.7%) join tenderness (20.32%), depression (17%), fatigue (14.6%) and myalgia (13%). A total of 104 local complication were found with capsular contracture as the most frequent (45%) and statistically significant more prevalent in the post mastectomy group (p= 0.009). Positive results were found for nuclear antibodies (ANA), thyroid antibodies and acrilamida partially polymerised antibodies (APA). No statistically significant differences were found in any laboratory marker with the exception of (APA). A relative risk of 3.36 (CI 95% 0.94-11.91, p=0.044) was found in exposed to silicone. No statistically significant differences were found for APA test results between exposed to silicone and sera of defined connective tissue (p=0.97). We found 34.5% ANA positive result (50% in mastectomy, 36.2% in reconstructed post mastectomy). No differences were found between exposed to silicone and controls (p=0.68). None of the sera was found to be positive for poly dimethilsiloxane nor sodium silicate antibody test. CONCLUSION: We did not find connective tissue disease more prevalent in patient exposed to silicone than in controls. Local complications were very numerous and the most relevant pathologic finding.

La hipótesis de los estudios que constituyen esta tesis es que las bacterias no patógenas interactúan de manera cepa-específica con la mucosa intestinal humana induciendo un cambio o modulación en el patrón de secreción de citoquinas tanto en tejido normal como inflamado y que en el tejido intestinal inflamado, determinadas bacterias ejercen un efecto antiinflamatorio. Para ello se han realizado dos estudios que han sido publicados en revistas del área de gastroenterología.Estudio 1:"Effects of nonpathogenic bacteria on cytokine secretion by human intestinal mucosa." N.Borruel, F.Casellas, M.Antolín, M.Llopis, M.Carol, E.Espín, J.Naval, F.Guarner, J.R.Malagelada. American Journal of Gastroenterology 2003;98:865-870.El objetivo de este estudio fue estudiar el efecto "ex vivo" de diferentes bacterias no patógenas sobre la secreción de citoquinas pro y anti-inflamatorias en la mucosa colónica normal.Estudio 2:"Increased mucosal tumor necrosis factor ? production in Crohn's disease can be downregulated ex-vivo by probiotic bacteria." N.Borruel, M.Carol, F.Casellas, M.Antolín, F.De Lara, E.Espín, J.Naval, F.Guarner, J.R.Malagelada. Gut 2002;51:659-664.El objetivo del segundo estudio fue estudiar el efecto antiinflamatorio de diferentes bacterias no patógenas en la mucosa intestinal de pacientes con enfermedad de Crohn. Las conclusiones de los estudios son las siguientes:-Las bacterias no patógenas interactúan con la mucosa colónica normal e inducen cambios en la secreción de citoquinas que son cepa-específicos. Así: Lactobacillus casei DN 114 001 induce una disminución de la liberación de TNF? e IL-8; Lactobacillus casei DN 114 056 induce una disminución de la liberación de TNF?, ningún cambio en la liberación de IL-8 y una estimulación TNF?-independiente de la IL-10;Lactobacillus casei ATCC 334 induce una disminución de la liberación de TNF? sin cambios en el resto de citoquinas; Lactobacillus bulgaricus LB10 no induce cambios en la liberación de citoquinas y Escherichia coli ECOR-26 induce un incremento en la liberación de TNF? y un estímulo de la liberación de IL-10 TNF?-independiente.-La mucosa ileal inflamada de pacientes con enfermedad de Crohn presenta una producción aumentada de TNF? cuando se compara con ileon normal o no inflamado. Lactobacillus casei DN 114 001 y Lactobacillus bulgaricus LB10 inducen un potente efecto antiinflamatorio en la mucosa ileal inflamada mediante la inhibición de la liberación de TNF?.La incubación de la mucosa ileal inflamada con L.casei DN114 001 y L. bulgaricus LB10 induce además una disminución del número de linfocitos intraepiteliales y de la proporción de linfocitos activados tanto en el compartimiento intraepitelial como en la lámina propia. / The hypothesis of the studies that constitute this thesis is that nonpathogenic bacteria interact in a strain-specific manner with human intestinal mucosa inducing a change or modulation in the cytokine secretion profile both in normal and inflamed tissue and that in inflamed intestinal tissue, certain bacteria exert an anti-inflammatory effect. To this purpose, it has been performed two studies published in gastroenteroloy area journals. Study 1:"Effects of nonpathogenic bacteria on cytokine secretion by human intestinal mucosa." N.Borruel, F.Casellas, M.Antolín, M.Llopis, M.Carol, E.Espín, J.Naval, F.Guarner, J.R.Malagelada. American Journal of Gastroenterology 2003;98:865-870.The aim of this study was to investigate the effect "ex vivo" of different nonpathogenic bacteria on pro and antiinflammatory cytokine secretion by normal colonic mucosa. Study 2:"Increased mucosal tumor necrosis factor ? production in Crohn's disease can be downregulated ex-vivo by probiotic bacteria." N.Borruel, M.Carol, F.Casellas, M.Antolín, F.De Lara, E.Espín, J.Naval, F.Guarner, J.R.Malagelada. Gut 2002;51:659-664.The aim of the second study was to investigate the anti-inflammatory effect of different nonpathogenic bacteria on the intestinal mucosa from patients with Crohn's disease. The conclusions of both studies were:-Nonpathogenic bacteria interact with normal colonic mucosa and induce changes on cytokine secretion that are strain-specific: Lactobacillus casei DN 114 001 induces an inhibition on TNF? and IL-8 release; Lactobacillus casei DN 114 056 induces an inhibition of TNF? release, no changes on IL-8 release and a TNF?-independient stimulation of IL-10 release; Lactobacillus casei ATCC 334 induces an inhibition of TNF? release without changes in other cytokines; Lactobacillus bulgaricus LB10 does not induce any changes on cytokine release and Escherichia coli ECOR-26 induces a stimulation on TNF? release and a TNF?-independent increase on IL-10 release.-Inflamed ileal mucosa from patients with Crohn´s disease has an increased production of TNF? as compared with normal ileal mucosa or non-inflammed mucosa. Lactobacillus casei DN 114 001 and Lactobacillus bulgaricus LB10 induce a potent anti-inflammatory effect on inflamed ileal mucosa by the inhibition of TNF? release.Incubation of ileal inflamed mucosa with L.casei DN114 001 and L. bulgaricus LB10 induces a decrease in the number of intraepithelial lymphocytes and in the rate of activated lymphocytes both in the epithelium and in the lamina propria.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La adquisición de inmunidad pasiva por el ternero es fundamental para su posterior desarrollo. Se han estudiado extensamente los efectos del nivel de inmunidad pasiva en la salud de terneros de lechería, pero es escasa la información que se tiene sobre cómo ésta afecta la salud y desempeño en terneros de carne. El objetivo de este estudio fue evaluar la influencia de los niveles de proteínas séricas totales (PST), adquiridos por terneros para producción de carne después del consumo de calostro, sobre parámetros sanitarios y productivos. Además, se evaluó la relación de los niveles de PST de los terneros con variables maternas. Se recolectó una muestra de sangre dentro de la primera semana de vida de cada ternero (n=159), para determinar la concentración de PST a través de refractometría. Los niveles de PST fueron de 9,2±1,09 g/dL (rango 5,6 a 11,6 g/dL). Además, se registró la CC de la madre al parto y su condición de primípara o multípara. Durante el periodo del nacimiento al destete, no se registró ningún ternero enfermo. Al destete (n=131), se calculó la ganancia diaria de peso (GDP) desde el nacimiento al destete. Al relacionar los niveles de PST con la GDP, el coeficiente de correlación fue de -0,11 y el de determinación de 0,01, por lo que el nivel de PST no influiría mayormente en la GDP al destete. Al evaluar la concentración de PST de los terneros con características maternas, el coeficiente de determinación fue de 0,002, por lo que se concluyó que la concentración de PST en los terneros estaría escasamente influenciada por las variables maternas estudiadas. Según estos resultados se puede indicar que los niveles de PST en los terneros de carne usados en este estudio, difieren en relación a los niveles medidos en general en terneros de lecherías. Además la tasa de morbilidad en este estudio fue cero, lo que se podría explicar, al menos parcialmente, por los altos niveles de inmunidad pasiva alcanzados por los terneros, situación que se contrapone con la observada en lecherías, donde las tasas de morbilidad y mortalidad son habitualmente mayores. / Passive transfer of immunity in calves is essential for their subsequent development. The effects of passive immunity levels on the health of dairy calves have been extensively studied, but little information is available on how it affects health and performance of beef calves. The aim of this study was to evaluate the influence of total serum protein levels (TSP), acquired by beef calves after consumption of colostrum, on health and production parameters. Furthermore, the relation between PST of calves with maternal variables was evaluated. Blood samples were collected within the first week of life of each calf (n=159), to determine TSP concentration by means of refractometry. TSP levels were 9.2±1.09 g/dL (range 5.6 to 11.6 g/dL). In addition, maternal body condition (BC) at calving and parity (primiparous or multiparous) were recorded. From birth to weaning, no sick calves were recorded. At weaning (n=131), the average daily gain (ADG) from birth to weaning was calculated. When correlating TSP levels with ADG, the correlation coefficient was -0.11 and the coefficient of determination was 0.01, so that the level of TSP did not influence the ADG at weaning. When evaluating the relation between TSP concentrations with maternal traits, the coefficient of determination was 0.002. It was concluded that TSP concentration in calves were only slightly influenced by the maternal traits studied. These results may indicate that TSP levels in beef calves differ with those measured generally in dairy calves. Besides, the morbidity rate in this study was zero, which could be explained, at least partially, by the high levels of passive immunity achieved by the calves. This situation contrasts with that observed in dairy farms, where morbidity and mortality are usually higher.

El presente trabajo académico, servirá para determinar como ha venido funcionando la prerrogativa constitucional de inmunidad parlamentaria de los congresistas de la República, cuando éstos cometen delitos comunes; para ello se abordará desde una perspectiva histórica esta institución jurídica, así como también se analizará su tratamiento legal y procedimientos establecidos tanto en la Constitución Política del Perú y en el Reglamento del Congreso de la República, como también se revisará las cifras de cuantas solicitudes de levantamiento de inmunidad parlamentaria, han sido aprobadas por el Congreso de la República, a fin de determinar si estas instituciones generan o no impunidad para los congresistas y si se han convertido en privilegios personales, que generan riesgos o focos de corrupción dentro del Parlamento Peruano. Por ello, se podrá evidenciar que existen diferentes modelos de cómo se regulan estas instituciones constitucionales en el Derecho Comparado, siendo los más importantes el modelo de control ex post del Congreso, el modelo de control ex ante por parte del Poder Judicial y el modelo abolicionista. Por lo cual, dentro de la presente investigación, se ha concluido que los fundamentos por lo cual nació esta prerrogativa constitucional, ha perdido vigencia con el advenimiento de un Estado constitucional y democrático de derecho, por lo cual el mantenimiento de la misma ya no es necesario ni fundamental, y más bien por el contrario, en la actualidad esto ha provocado un clima de impunidad a favor de los congresistas, una desigualdad ante la ley y ha generado riesgos importantes de corrupción dentro del Parlamento Peruano, en la cual se negocia a través de prebendas políticas o consignas partidarias, el voto a favor o en contra de determinado pedido de levantamiento de inmunidad parlamentaria. / Trabajo académico

El objetivo del estudio fue determinar la transmisión de anticuerpos maternos de cerdas inmunizadas con el antígeno Tsol18 expresado en la pichia pastoris (vacuna Tsol18 IIL) hacia sus lechones y la persistencia de estos anticuerpos contra la oncósfera de la Taenia solium. Para este trabajo se usaron 50 lechones que fueron divididos en 4 grupos. Los grupos 1, 2 y 3 con 11, 12 y 11 lechones que procedían de cerdas inmunizadas con dos dosis de la vacuna Tsol18 IIL a las 6 y 2 semanas antes del parto. El grupo 4 con 16 lechones que procedían de cerdas no inmunizadas. La inmunización de las crías fue con la misma vacuna que recibió la madre. El grupo 1 fue vacunado da los 8 y 12 semanas, el grupo 2 fue vacunado a los 12 y 16 semanas, el grupo 3 y grupo 4 fueron los controles. Las muestras de sangre fueron tomadas a las 2, 8, 12, 16 y 20 semanas de edad de la cual se obtuvieron los sueros que fueron evaluados con la prueba de ELISA indirecta estandarizada con el antígeno Tsol18. El valor de la densidad óptica (DO) representan los niveles de anti-Tsol18 en el suero de los cerdos, que posteriormente este valor fue expresado en función al porcentaje de positividad para evaluar los niveles de anticuerpos. Al inicio del estudio, Los lechones procedentes de cerdas inmunizadas poseen niveles altos de anticuerpos maternos IgG, cuando pasaron las semanas, estos anticuerpos descendieron debido a los procesos metabólicos normales del animal, se comparó la diferencia en el incremento en los niveles de anticuerpos entre el grupo 1 y 2, obteniendo como resultado que entre la semana 8 y 12 permanecen los anticuerpos maternos, pero en niveles bajos con la capacidad de interferir en el efecto de la vacuna con el antígeno Tsol18. Palabras claves: Taenia solium, Cysticercus cellulosae, Tsol 18 IIL, inmunidad materna, Anticuerpos Maternos, ELISA. / --- The aim of this study was to determine maternal antibodies transmission from Tsol18 immunized with antigen expressed in Pichia pastoris (vaccine Tsol18 IIL) sows to piglets and the persistence of these antibodies in piglets against oncosphere of Taenia solium. To do this study it was necessary to use fifty piglets with two doses of the vaccine Tsol18 IIL at 6 and 2 weeks before birth, which were divided into 4 groups. Group 1, 2 and 3 containing 11, 12 and 11 piglets respectively came from vaccinated sows. Group 4 containing 16 piglets came from unvaccinated sows. The first group was vaccinated at 8 and 12 weeks old, the group 2 at 12 and 16 weeks and group 3 and 4 were control groups. Blood samples were taken at 2, 8, 12, 16 and 20 weeks old. Were obtained serums that were assessed with standardized indirect ELISA with antigen Tsol18The results were expressed according to the percentage of positive individuals, The value of antibody titers were expressed according to the percentage of positive which was obtained from the optical density (OD) of each serum sample between the OD of a standard positive control. At the beginning of the study, piglets from immunized sows had high levels of maternal antibodies Ig G. As the weeks passed, these antibodies were decreasing due to normal metabolic process. comparing the difference in the increase in antibody levels between groups 1 and 2, the result being that between week 8 and 12 remain maternal antibodies, but at low levels, with the ability to interfere with the effect of vaccination with antigen Tsol18. Keywords: Taenia solium, Cysticercus cellulosae, Tsol 18 IIL, maternal immunity, maternal antibodies, ELISA. / Tesis

TESIS DOCTORALDoctorando: José Moralejo BeneitezDirector de tesis: Profesor Ricardo Closa MonasteroloUniversidad Rovira y Virgili. Departamento de Medicina y CirugíaGRUPOS DE DIFERENCIACIÓN LINFOCITARIA EN NEONATOS DE BAJO PESO PARA LA EDAD GESTACIONAL (BPEG)Los neonatos de BPEG son un grupo específico de neonatos con características definidas, diferentes de los neonatos de peso adecuado para la edad de gestación, PAEG.La inmunidad se desarrolla a lo largo de la gestación.La afectación fetal que conlleva a ser neonato de BPEG podría afectar también el desarrollo de la inmunidad.La inmunidad específica, responsabilidad de los linfocitos, adquieren sus características durante la gestación.Hipótesis: los neonatos BPEG que tiene afectado el desarrollo somático también pueden tener afectada la inmunidad.Objetivos:Conocer el estado de la inmunidad celular en una población de neonatos de BPEG.Detectar diferencias en la inmunidad celular de los BPEG respecto a los PAEG.Determinar si existen variables clínicas asociadas con las características de la inmunidad de los BPEG.Se estudiaron de manera prospectiva neonatos de BPEG - casos - y neonatos de PAEG - controles - todos ellos sanos, con gestación y periodo neonatal inmediato normal, nacidos en el Hospital Universitario "Joan XXIII" de Tarragona.Se determinaron poblaciones leucocitarias, con citometría de flujo y AcMo y características clínicas y su posible relación con las variables inmunológicas.Se hallaron diferencias significativas en cuanto los neonatos de BPEG presentan en comparación con los neonatos de PAEG depresión de la inmunidad reflejada en varios grupos celulares. También que la edad materna y la paridad parecen influir en la inmunidad de los neonatos de BPEG. Todo sugiere que probablemente los mismos factores que inducen a un BPEG alteran la inmunidad. / THESIS DOCTORALDoctorate: José Moralejo Beneitez Director of thesis: Profesor Ricardo Closa MonasteroloUniversity Rovira y Virgili. Departament of Medicine & SurgeryLYMPHOCYTE SUBSETS IN SMALL-FOR-GESTATIONAL AGE NEONATES Small-for-gestational age (SGA) neonates share particular characteristics, group identity and evolution which turn them into a differentiated group. We have studied some immune characteristics of 82 full-term SGA neonates (study group) and 35 full-term appropriate-for-gestational age (AGA) neonates (control group). SGA have a significant deficiency in absolute number of total leukocytes, lymphocytes and B-lymphocytes as well as in the percentage of B-cells. Leukocytes, lymphocytes and total CD8 values decrease with maternal age and with the number of gestation, increasing the ratio CD4/CD8. These results confirm that SGA neonates are a differentiated and specific group more prone to infections.

Memoria para optar el título de Bioquímico / Los receptores tipo Toll (TLR) son proteínas de transmembrana que reconocen patrones moleculares asociados a patógenos (PAMPs). El TLR2 reconoce PAMPs de bacterias gram positivas, los cuales activan una vía de señalización clásica que involucra el reclutamiento de la proteína MyD88 y una alternativa donde participa la Fosfoinositol 3-Quinasa (PI3K). A su vez, los glucocorticoides (GCs) son moléculas que suprimen la inflamación y la inmunidad adaptativa, que recientemente han sido reportadas como potenciadoras de la expresión de ciertas moléculas de la inmunidad innata, tales como el TLR2. La importancia de PI3K y los GC en la regulación de la vía alternativa del TLR2 no ha sido estudiada aún. El objetivo general fue determinar la participación de PI3K en la producción de TNFα inducida por agonistas del TLR2 y GCs. Los objetivos específicos fueron: 1) Analizar el efecto de Pam3Cys-Ser-Lys4 un lipopéptido sintético análogo a la porción NH2-terminal de lipoproteínas de bacterias gram positivas, y Dexametasona, sobre la secreción de TNFα y la activación transcripcional de NFκB, en células A549. 2) Estudiar la participación de PI3K-Akt en la ruta de señalización del TLR2 inducida por Pam3Cys-Ser-Lys4 y Dexametasona. 3) Determinar la interacción entre TLR2-PI3K y GR-PI3K. Los resultados obtenidos muestran que la activación del TLR2 por Pam3Cys-Ser- Lys4 provocó un aumento en la expresión de TNFα y la activación transcripcional del TLR2, sin embargo el co-tratamiento con Dexametasona no alteró el efecto del agonista del TLR2. Al mismo tiempo, PI3K aumenta la expresión de TNFα e inhibe la transcripción del TLR2, al usar un dominante negativo para PI3K (p85-DN). PI3K activa la transcripción de genes que responden a la movilización de NFκB y AP-1, ya que células expuestas a Pam3Cys-Ser-Lys4 y que expresan el constructo p85-DN, presentan una disminución significativa de la activación transcripcional de NFκB y APLos resultados indicaron que Pam3Cys-Ser-Lys4 aumentó significativamente la fosforilación de Akt, como un indicador indirecto de la actividad de PI3K, y Dexametasona la revirtió. Por otra parte, se determinó la interacción entre p85 con el GR o el TLR2, siendo la primera modulada exclusivamente por Dexametasona. Estos resultados demuestran que PI3K presenta diversos mecanismos de regulación en la vía de señalización del TLR2 y además proponen mecanismos por los que los GCs intervienen en la ruta transduccional / Toll-like receptors (TLRs) are transmembrane proteins that recognize pathogenassociated molecular patterns (PAMPs). TLR2 identify PAMPs from gram positive bacteria, which activate a classical signaling pathway involving MyD88 recruitment to the receptor intracellular domain, and an alternative signaling pathway, which comprises the activation of the phosphoinositol 3-kinase (PI3K). Moreover, glucocorticoids (GCs) suppress the inflammation and adaptive immune responses, and have been recently reported to enhance the TNFα-induced expression of TLR2. The relevance of GCs in the regulation of the alternative pathway has not yet been described. The general aim of this thesis was to determine PI3K participation on TNFα production induced by TLR2 agonists in the presence or absence of GCs. The specific aims were: 1) To analyze the effect of Pam3Cys-Ser-Lys4, a specific synthetic ligand analogue to the NH2-terminal portion of gram positive bacterial lipoproteins, and Dexamethasone, a synthetic GC, on TNFα expression and NFκB transcriptional activation,in A549 cells. 2) To study the role of PI3K-Akt in the TLR2 signaling pathway induced by Pam3Cys-Ser-Lys4 in the presence or absence of Dexamethasone. 3) To determine the interaction between TLR2-PI3K and GR-PI3K. The results show that TLR2 activation by Pam3Cys-Ser-Lys4 promotes TNFα expression and TLR2 transcriptional activity, however co-treatment of cells with Pam3Cys-Ser-Lys4 and Dexamethasone did not revert TNFα increase. In relation to this pathway, we investigated if PI3K was involved in TNFα expression and TLR2 transcription activity regulation. Pam3Cys-Ser-Lys4 significantly increased Akt phosphorylation, as an indicator of PI3K activity, and Dexamethasone reverted to it. Moreover, by using a PI3K regulatory subunit dominant negative mutant cDNA (p85-DN) transiently expressed in cells, a remarkably decrease in NFκB and AP-1 transcriptional activation was observed. On the other hand, we determined p85 regulatory PI3K subunit interaction with GR or TLR2, and we were able to identify interaction between p85-GR in the presence of Dexamethasone. These results demonstrate that PI3K shows different mechanism of regulation in the TLR2 signaling and propose pathways in which GCs may be participating

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / Se evaluó un producto elaborado a partir de inmunoglobulinas específicas de huevo en la prevención de la diarrea neonatal del ternero, Protimax®, Trow Nutrition International. Se asignaron aleatoriamente 68 terneras Holstein manejadas en un sistema de crianza artificial a dos grupos equivalentes de 34 animales cada uno. Al grupo tratado se agregó el producto en estudio en el sustituto lácteo en dosis de cinco gramos diarios por animal, desde el primer y hasta los 21 días de vida, en el grupo control no se agregó el producto. Se evaluaron los indicadores medico-productivos: incidencia, mortalidad, duración de los signos clínicos y severidad de la diarrea, además del peso a los 30 días. No se evidenciaron diferencias en ninguno de los parámetros analizados a excepción de la intensidad de los signos clínicos, en el que el grupo tratado presentó diarreas menos severas que el grupo control. Durante el transcurso del estudio se presento un brote de diarrea con anormalmente alta incidencia y mortalidad de animales, lo cual puede haber influido en los resultados obtenidos, lo anterior sugiere realizar nuevos estudios en condiciones epidemiológicas mas controladas

Tesis (Magister en Derecho del Trabajo y de la Seguridad Social) / Actividad formativa equivalente a Tesis (AFET) / La presente actividad formativa pretende plantear una visión crítica acerca de la inmunidad de jurisdicción y de ejecución en materia laboral, el tratamiento dado en la materia tanto por los tribunales chilenos como la legislación comparada. Para dicho efecto se realizará un análisis comparativo en cuanto al infractor corresponda a un Estado o a una organización internacional, así como en materia jurisdiccional como ejecutiva. Para lograr dicho objetivo se mencionará y analizará situaciones resueltas tanto por tribunales argentinos, colombianos, españoles, Alemanes y uruguayos y cómo se ha afrontado la problemática en nuestra jurisprudencia nacional, asimismo se analizará los diferentes instrumentos que han resuelto el conflicto en sede internacional.

Las agrupaciones de repeticiones CRISPR (clustered regularly interspaced short palindromic repeats) junto con las proteínas Cas (CRISPR associated) forman los sistemas CRISPR-Cas que constituyen una barrera adaptativa a la entrada de material genético en Bacteria y Archaea. Esta tesis se centra en los sistemas CRISPR-Cas de Escherichia coli, y en especial en el perteneciente al subtipo I-F. En el presente trabajo se ha analizado la secuencia de la región CRISPR I-F de una variedad de cepas de E. coli, lo cual ha permitido una descripción pormenorizada de los componentes del sistema y de su diversidad. La ausencia de genes cas I-F (codificantes de las proteínas Cas I-F) en la mayor parte de las cepas analizadas, cuestiona la relevancia de estos sistemas a nivel de la especie, aun cuando la invariable conservación de repeticiones sugiere que incluso los sistemas aparentemente vestigiales deben desempeñar un papel importante. Por otro lado, análisis in silico de los loci CRISPR-Cas I-E y I-F han permitido reconstruir la historia evolutiva de ambos sistemas y poner de manifiesto la existencia de dos variantes de genes cas asociados al subtipo I-E que podrían diferir en aspectos particulares de su mecanismo de acción. Finalmente, estudios de expresión y análisis de interferencia del sistema I-F de la cepa E. coli LF82 han revelado que dicho sistema es activo en condiciones de crecimiento óptimas en el laboratorio, siendo responsables de una reducción significativa en la eficiencia de transformación del plásmido portador de la secuencia diana (denominada protoespaciador). Dicha actividad de interferencia está muy influenciada por la identidad de motivos de secuencia adyacentes a la región protoespaciadora. Sorprendentemente, la mayor interferencia se observó para los motivos que difieren de aquellos normalmente asociados a los protoespaciadores nativos de este sistema. Esta discrepancia entre motivos implica que el sistema I-F analizado supone una barrera parcialmente tolerante con la entrada de DNA foráneo. Probablemente, esta restricción en la eficacia del sistema es consecuencia de un compromiso entre la prevención de infección por virus líticos y la adquisición de material genético potencialmente beneficioso.