Reproduction de : Thèse d' exercice : Médecine générale : Nancy 1 : 2002. / Thèse : 2002NAN11155. Titre provenant de l'écran-titre.

Thèse de doctorat : Biologie Moléculaire. ARN : Biogenèse et structure / fonction : Nancy 1 : 2008. / Titre provenant de l'écran-titre.

L'insuffisance cardiaque (IC) est une pathologie évolutive avec une forte morbi-mortalité suggérant que les traitements actuels ne modifient que peu les mécanismes physiopathologiques responsables de la maladie. L'inflammation et la réponse immune inappropriée sont récemment apparues comme de nouveaux acteurs de la progression de l'insuffisance cardiaque (IC). La réponse inflammatoire lors d'un stress tissulaire semble initiée par la néo-synthèse ou la libération de protéines normalement non présentes ou non accessibles dans le tissu. Ces molécules, appelées " damage associated molecular pattern " ou DAMPs, sont des ligands des récepteurs Toll like capable d'induire l'expression de cytokines et de chimiokines pro-inflammatoires. La ténascine-C (TNC), une protéine présente dans la matrice extracellulaire lors d'état inflammatoire est considérée comme une DAMP car elle est capable d'induire l'expression de cytokines pro-inflammatoires via TLR4. Bien que l'expression de la TNC soit augmentée lors de pathologies cardiaques, son rôle exact dans les processus inflammatoires au cours d'une surcharge de pression cardiaque est encore peu défini. Nous avons montré que la TNC est exprimée dans le cœur hypertrophié où elle se concentre en foyers associés à un fort infiltrat monocytaire. L'utilisation de chimères hématopoïétiques a permis de montrer que la TNC est exprimée exclusivement par les cellules stromales du compartiment cardiaque et notamment les fibroblastes et non les cellules inflammatoires. Grâce à l'utilisation de souris dont le gène codant pour la TNC a été invalidé (TNCKO), nous avons mesuré l'impact de l'absence de TNC sur la fonction et le remodelage cardiaques après constriction de l'aorte transverse (TAC). L'analyse des paramètres échocardiographiques a montré une meilleure fonction contractile cardiaque chez les souris TNCKO par rapport aux souris WT après TAC. De plus la réponse inflammatoire cardiaque induite par la constriction est fortement atténuée chez les souris TNCKO par rapport aux WT. En effet, l'expression cardiaque des cytokines et des chimiokines pro-inflammatoires ainsi que l'infiltration monocytaire sont prévenues chez les souris TNCKO après TAC. Le développement d'un lentivecteur recombinant pour la TNC (LV-TNC), a permis de montrer que cette protéine stimule, in vitro, l'expression de cytokines et de chimiokines pro-inflammatoires (CCL2, CCL5) par les fibroblastes cardiaques. De plus, le microenvironement produit par la TNC induit un effet attractant sur les monocytes in vitro et in vivo et favorise la polarisation des macrophages vers un phénotype pro-inflammatoire. En plus de son effet sur le chimiotactisme monocytaire, nous avons observé que la TNC modifie également la clairance des macrophages du tissu cardiaque hypertrophié. Le suivi des monocytes/macrophages après marquage par des billes fluorescentes nous a permis de montrer que leur migration vers les ganglions lymphatiques drainants le cœur est augmentée chez les souris KO après TAC. En effet la TNC semble inhiber l'expression de CCR7 par les macrophages cardiaques, récepteur majeur impliqué dans le processus de drainage des cellules immunes dans les vaisseaux lymphatiques. En conclusion, la TNC aggrave le remodelage cardiaque et la transition vers l'IC dans un modèle murin de surcharge de pression. Elle entraine un état inflammatoire en induisant l'expression de gènes pro-inflammatoires par les fibroblastes cardiaques favorisant ainsi l'infiltration monocytaire dans le tissu. La TNC maintient l'inflammation en polarisant les macrophages vers un phénotype pro-inflammatoire. Enfin, la TNC inhibe le drainage des macrophages cardiaques vers les ganglions lymphatiques en diminuant l'expression de CCR7. Cette accumulation de cellules inflammatoires dans le tissu cardiaque induite par la TNC semble favoriser la dysfonction contractile et pourrait participer à l'apparition de l'IC. / Sustained pressure overload leads to myocardial hypertrophy and subsequent heart failure, a leading cause of morbidity and mortality. Several studies suggest a potential role of inflammation induced by the Danger Associated Molecular Patterns (DAMPs) in the development of heart failure. These molecules are able to induce pro-inflammatory cytokines synthesis through Toll like receptors (TLRs). Tenascin-C (TNC), an extracellular matrix glycoprotein considered as DAMP is slightly present in adult tissue but highly expressed in various cardiac diseases. We investigated the prospective role of TNC on inflammation in a cardiac remodeling induced by pressure overload. An experimental model of pressure overload (transverse aortic constriction or TAC) was established in WT and knockout mice for TNC (TNCKO). TNC was greatly expressed after transverse aortic constriction in cardiac tissue of WT animals. TNCKO mice displayed no ventricular dilatation and a preserve cardiac function compared with wild type animals after TAC. In absence of TNC, mice showed a blunted cardiac inflammatory response and a decreased myocardial remodeling. Bone marrow transplantation from wild-type mice into TNCKO animals and vice versa indicated that TNC is exclusively synthesized by cardiac cells and not by hematopoietic cells. Furthermore, immunostaining experiments showed that TNC was found in areas where infiltration of monocytes/macrophages was abundant. To better understand the role of TNC, cardiac fibroblasts were transduced by a lentivector encoding for GFP (LV-GFP) or TNC (LV-TNC). TNC production by fibroblasts stimulated their expression of pro-inflammatory cytokines and chemokines (CCL2, CCL5). In vitro chemotaxis assays showed that conditioned medium from LV-TNC transduced cardiac fibroblasts exhibited chemoattractant properties for bone marrow derived monocytes. Moreover, TNC production by cardiac fibroblasts increased macrophages phagocytic activity, pro-inflammatory markers expression and nitrite release suggesting a pro-inflammatory polarization of macrophages. The administration of a recombinant TNC lentivector in the myocardium was sufficient to induce monocyte infiltration, promote cytokine and chemokine expression and a contractile dysfunction. Finally, TNC did not modify macrophage apoptosis and proliferation but hindered cardiac macrophage clearance by reducing their migration into lymph nodes. In presence of TNC, expression of CCR7 on monocyte/macrophage was down-regulated. CCR7 has been described as the major receptor controlling immune cells migration to lymph nodes. In vivo tracking of monocytes/macrophages by the injection of fluorescents phagocytic beads confirmed a higher number of bead-positive macrophages in lymph nodes of TNCKO mice than in WT mice after TAC. Our results identified cardiac TNC as a monocyte chemoattractant factor increasing chemokines synthesis, decreasing emigration signals and thus promoting the maintenance of monocyte/macrophage in pathological heart. By promoting chronic inflammation, TNC accentuated cardiac dilation and deleterious outcome of cardiac remodeling and function during pressure overload.

Titre de l'écran-titre (visionné le 26 avril 2023) / L'insuffisance cardiaque à fraction d'éjection préservée (HFpEF) est un syndrome caractérisé par un ensemble d'anomalies menant à une dysfonction diastolique du myocarde. Elle représente plus de 50 % de tous les patients atteints d'insuffisance cardiaque et est définie par des symptômes cliniques (dyspnée, œdème, intolérance à l'effort) et une fraction d'éjection ≥50±5%. L'arsenal thérapeutique reste réduit et peu efficace pour stopper la progression. Cependant, l'entraînement physique semble être l'une des pistes prometteuses pour ralentir la progression de l'HFpEF et les hospitalisations fréquentes associées. Malgré son incidence de plus en plus élevée, les modèles animaux n'ont pas toujours été adéquats. De nouveaux modèles sont maintenant explorés combinant des composantes métaboliques, inflammatoires, hémodynamiques ainsi que l'âge ou le sexe biologique, afin de mieux reproduire et étudier ce type d'insuffisance cardiaque. Dans cette étude, nous proposons une combinaison d'angiotensine II (AngII) et/ou une diète riche en gras (DRG) sur des souris mâles et femelles C57Bl6/J pendant 4 semaines pour reproduire les phénotypes HFpEF. Nous chercherons aussi à savoir si la cessation de cette combinaison et l'introduction de l'entraînement volontaire via l'introduction d'une soucoupe dans les cages des souris pendant 4 semaines additionnelles, pourront corriger les dysfonctionnements diastoliques observés. Notre modèle présente des similarités avec les patients HFpEF. Il montre entre autres, une hypertrophie cardiaque et auriculaire à la suite des 4 semaines d'AngII + DRG, un remodelage concentrique du ventricule gauche ainsi qu'une fraction d'éjection préservée et une intolérance à l'effort. L'AngII seule entraine une hypertrophie cardiaque et auriculaire et augmente la pression artérielle chez les mâles. La DRG n'a pas d'influence sur la pression artérielle mais une hypertrophie cardiaque est observée seulement chez les femelles. L'arrêt des interventions couplé avec l'entrainement volontaire entraine une normalisation de la majorité des dysfonctionnements constatés. / Heart failure with preserved ejection fraction (HFpEF) is a syndrome characterized by a set of abnormalities leading to diastolic myocardial dysfunction. It accounts for more than 50% of all patients with heart failure and is defined by several clinical symptoms (dyspnea, oedema, exercise intolerance) and an ejection fraction ≥50±5%). The therapeutic arsenal remains small and not very effective in stopping the progression. However, physical training seems to be one of the promising avenues for slowing the progression of HFpEF and the frequent associated hospitalizations. Despite its increasing incidence, animal models have not always been adequate. New models are now being explored combining metabolic, inflammatory, hemodynamic components as well as age or biological sex, in order to better reproduce and study this type of heart failure. In this study, we propose a combination of angiotensin II (AngII) and/or a high-fat diet (HFD) on male and female C57Bl6/J mice for 4 weeks to reproduce HFpEF phenotypes. We will also investigate whether the cessation of this combination and the introduction of voluntary exercise via the introduction of a running saucer in the cages of mice for an additional 4 weeks, will be able to correct the diastolic dysfunctions observed. Our model has similarities with HFpEF patients. It shows, among other things, cardiac and atrial hypertrophy following the 4 weeks of AngII + HFD, concentric remodeling of the left ventricle as well as a preserved ejection fraction and exercise intolerance. AngII alone causes cardiac and atrial hypertrophy and increases blood pressure in males. HFD has no influence on blood pressure but cardiac hypertrophy is observed only in females. The cessation of interventions coupled with voluntary exercise leads to a normalization of most of dysfunctions observed.

Dans les stades tardifs de l’insuffisance cardiaque, le pronostic de la maladie est très difficile à établir. Les médecins hésitent à aborder ce sujet en raison de l’incertitude du pronostic et du risque de provoquer des réactions négatives chez les patients. De plus, ce ne sont pas tous les patients qui souhaitent en parler. La présente étude qualitative a pour objectifs d’explorer le type de communication qui devrait être instauré entre le personnel soignant et la personne atteinte d’insuffisance cardiaque en ce qui regarde le pronostic de la maladie et la préparation de la fin de vie ainsi que de proposer de nouvelles ressources facilitant la communication. S'appuyant sur les données recueillies lors d'une entrevue de groupe avec sept des membres de l’équipe de la clinique d’insuffisance cardiaque du Centre hospitalier universitaire de Sherbrooke (CHUS) et sur des entrevues individuelles avec douze patients qui y sont traités, une analyse thématique a permis de connaître le contenu et les modalités de la communication qui répondent le mieux aux besoins des deux partenaires de la communication. Les résultats ont révélé l'importance du concept de disponibilité psychologique du patient pour déterminer avec qui et quand, devraient être abordées le pronostic et la préparation de la fin de vie. En plus de mettre en évidence le rôle que pourrait jouer un psychologue au sein de l'équipe de soignants, l’étude a permis d'élaborer des outils : deux livrets d’information sur le pronostic et la fin de vie en insuffisance cardiaque ainsi qu’une fiche-questionnaire sur les besoins de communication des patients de la clinique.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

L'allongement de l'espérance de vie a fait de l'insuffisance cardiaque (IC) l'un des problèmes majeurs de santé publique. Le syndrome métabolique (SMet) et l'hypertension sont deux facteurs conduisant à l'IC. Les modifications qui interviennent au niveau structural et cellulaire de la paroi artérielle dans le SMet, l'hypertension et l'IC pourraient entraîner des anomalies de l'hémostase qui aggravent ces tableaux cliniques. Nous avons montré au cour de ce travail les modifications du phénotype de l'hémostase dans différents modèles animaux de pathologies impliquées dans la mise en place de l'IC. L'altération de l'hémostase précède les modifications de la paroi et pourrait favoriser le développement de l'IC chez le rat Zucker. Le modèle de rat spontanément hypertendu SHR présente une hypercoagulablité de la paroi via les cellules musculaires lisses. Ces résultats ne permettent pas d'impliquer uniquement l'hypertension artérielle dans l'hypercoagulabilité plasmatique trouvée chez le rat Zucker. L'activation du récepteur à l'aldsotérone au niveau endothélial chez la souris induit un phénotype antithrombotique provoqué par une augmentation de la réactivité du système anticoagulant de la protéine C, via son récepteur, l'EPCR. L'étude d'une cohorte de patients insuffisants cardiaques a permis de distinguer des paramètres de fonction cardiaque et de rigidité artérielle. Cette caractérisation est indispensable pour comprendre les mécanismes des événements thrombotiques associés à l'IC. La conclusion de ce travail est que les pathologies pouvant conduire à la mise en place d'une IC modifient l'hémostase vers un état d'hypercoagulabilité qui fait intervenir la paroi artérielle / Increasing life span has made heart failure (HF) a major issue for public health. The metabolic syndrome (MetS) and hypertension are two important factors which can lead to HF. Structural and cellular modification occurring in the arterial wall in the MetS, hypertension and HF may provoke hemostasis alterations that can worsen the clinical situation. We have shown in this work, hemostasis modifications in animal models of pathologies implicated in HF development. Hemostasis alterations were shown to precede functional modifications of the arterial wall and could favor HF development in Zucker rats. Spontaneously hypertensive rats showed an arterial wall hypercoagulability via smooth muscle cells. These results don't permit the implication of hypertension in the hypercoagulable state found in the Zucker rat. A mouse model with aldosterone receptor activation in the endothelium lead to a hypocoagulable state by increasing the protein C anticoagulant system via his receptor, the EPCR. Studying a human HF patient cohort permitted the measurement of cardiac function and of arterial stiffness parameters. This characterization is important to understand thrombosis events associated with HF in humans. The general conclusion of this work is that, in pathologies leading to HF, modification of hemostasis to a procoagulable state, implicates the arterial wall

Le réseau lymphatique permet le drainage des liquides interstitiels, le transport des cellules immunitaires et intervient dans le métabolisme lipidique. La dérégulation de ce système est impliquée dans de nombreuses pathologies comme les lymphœdèmes, le rejet de greffe ou encore l'échappement tumoral. Le cœur est pourvu d'un réseau lymphatique abondant dont l'importance n'est apparue que très récemment dans les pathologies ischémiques. En effet, suite à un infarctus du myocarde, la dysfonction lymphatique observée favorise l'œdème et l'inflammation tissulaire, révélant le réseau lymphatique comme un acteur majeur du développement de cette pathologie. Les processus régulant la formation de vaisseaux lymphatiques chez l'adulte sont largement dépendants de facteurs de croissance aux effets pro- ou anti- lymphangiogéniques. Les cellules immunes et plus particulièrement les macrophages sécrètent un grand nombre de ces facteurs et leur importance dans la réponse lymphangiogénique a été montrée dans différentes conditions physio-pathologiques, telles que la lymphangiogenèse tumorale et inflammatoire. Il a longtemps été admis que les macrophages tissulaires provenaient exclusivement de la différenciation de monocytes sanguins. Cependant, l'existence de macrophages provenant de progéniteurs embryonnaires a été récemment mise en évidence. Dorénavant, les macrophages tissulaires résidents sont perçus comme des populations hétérogènes pouvant prétendre à des différences fonctionnelles. A ce jour, les modifications du réseau lymphatique et les mécanismes permettant sa régulation, au cours de pathologies non ischémiques, n'ont pas été abordées. Ainsi, nous avons entrepris d'identifier et de caractériser les différentes populations de macrophages cardiaques participant à la régulation du réseau lymphatique suite à une surcharge barométrique. Nos résultats ont montré une diminution précoce du réseau lymphatique cardiaque dans le cœur murin hypertrophié au cours d'une surcharge de pression induite par constriction de l'aorte transverse. Cette réduction du réseau est associée à la perte d'une population majoritaire de macrophages cardiaques portant le récepteur 1 à l'acide hyaluronique (Lyve-1). Cette population résidente diminue dans le cœur insuffisant, au profit de macrophages infiltrants dérivés de monocytes sanguins. Par ailleurs, en plus d'être corrélée à la baisse du réseau lymphatique cardiaque, la diminution du nombre de macrophages Lyve-1 est proportionnelle à la détérioration de la fonction cardiaque. La prévention de l'infiltration monocytaire a permis de maintenir le pool de macrophages exprimant Lyve-1, le réseau lymphatique et la fonction cardiaques lors d'une surcharge de pression. La caractérisation par RT-PCR des différentes populations de macrophages récupérés par tri cellulaire nous a permis de montrer que les macrophages Lyve-1 présentent des caractéristiques particulières, avec une forte expression de VEGFR3 et NRP2, molécules de signalisation lymphangiogène. De plus, ces macrophages Lyve-1 à la polarisation mixte et à l'activité phagocytaire importante, expriment de nombreux facteurs pro-lymphangiogéniques (VEGFc, VEGFd, IGF1). Ils ont montré une activité pro-lymphangiogène in vitro sur des explants de canal thoracique et sur des cellules endothéliales lymphatiques et in vivo avec la formation de vaisseaux lymphatiques naissants lors de l'injection de ces macrophages Lyve-1 dans le cœur. Leur localisation à proximité des vaisseaux lymphatiques et leur capacité pro-lymphangiogène leurs confèrent un rôle évident dans le maintien du réseau lymphatique lors d'un remodelage cardiaque de surcharge de pression. Ces travaux ont permis l'identification d'une population originale de macrophages cardiaques pouvant entrer dans la régulation du système lymphatique au cours d'une surcharge de pression. / The lymphatic system has recently emerged as an important regulator of the cardiac interstitial fluid compartment and function. Experimental obstruction of lymphatic vessel leads to cardiac œdema, myocardial stiffness, fibrosis and ventricle dysfunction. Following myocardial infarction, stimulation of lymphangiogenesis was found to reduce fibrosis and inflammation and to improve cardiac function. Macrophages have been largely described as important contributors of lymphangiogenesis in inflammatory situations such as cancer. Recently, genetic fate mapping demonstrated that distinct populations of macrophages coexist in the adult heart. In addition to monocyte derived-macrophages that massively colonize injured heart, a subpopulation of tissue-resident macrophages that originates from embryonic precursors persists into adulthood by means of local self- renewal. To date the distinct involvement of cardiac macrophage subpopulations in cardiac lymphatic remodeling and heart failure progression induced by pressure overload is largely unknown. In our study, we observed that expression of Lyve-1 identifies a resident macrophage subset abundant in mouse heart. This Lyve-1 positive macrophage subset decreased rapidly in cardiac remodeling induced by chronic pressure overload. In addition, the number of cells found in heart was positively correlated with the preservation of cardiac lymphatic network and function after transverse aortic constriction (TAC). Blocking recruitment of monocyte derived macrophages expanded Lyve-1 positive macrophages, attenuated cardiac lymphatic remodeling and contractile dysfunction of pressure overloaded heart. Lyve-1 positive macrophages express pro-lymphangiogenic factors and sustain lymphangiogenesis in vitro and in vivo. In conclusion, resident macrophage subset expressing the Lyve-1 receptor participates to maintain cardiac function after chronic pressure overload by mechanisms that may involve the preservation of cardiac lymphatic system. These results provide insight into the regulation of lymphatic homeostasis by tissue resident macrophage during heart failure induced by pressure overload.

Thèse d'exercice : Médecine. Médecine générale : Paris 12 : 2005. / Titre provenant de l'écran-titre. Bibliogr. f. 58-64.

Thèse de doctorat : Biologie cellulaire et moléculaire : Paris 12 : 2006. / Titre provenant de l'écran-titre. Pagination : 224 f. Bibliogr. f. 193-221.