Orientadores: Everardo Magalhães Carneiro, Licio Augusto Velloso / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T11:25:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_ElianaPereirade_M.pdf: 5130344 bytes, checksum: e073f749cf91df021a29deea28d18ceb (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: As flutuações da secreção de insulina estimulada por glicose dependem de vários sinais neurais, hormonais e bioquímicos. O papel dos efeitos autócrinos e parácrinos da insulina sobre sua própria secreção é pouco conhecido em parte devido à restrita informação disponível a respeito dos fenômenos moleculares que participam da sinalização da insulina em ilhotas pancreáticas. No presente estudo, demonstra-se que há alta concentração do receptor de insulina (IR) e do substrato 1 do receptor de insulina (IRS1), localizados preferencialmente em células da periferia de ilhotas pancreáticas de rato, e que o bloqueio parcial da expressão da proteína IRS1 através do tratamento de ilhotas isoladas com oligonucleotídeo antisense, leva a um aumento da secreção de insulina induzida pela glicose, a qual é acompanhada pela inversão no padrão de secreção de glucagon e pela queda da expressão de RNAm de somatostatina. Estes dados reforçam o papel inibitório da insulina sobre sua própria secreção em ilhotas pancreáticas íntegras, e explora um novo conhecimento que pode ser empregado como método terapêutico para melhorar a secreção de insulina em diabetes mellitus tipo 2 / Abstract: Several neural, hormonal and biochemical inputs participate actively in the balance of insulin secretion induced by blood glucose fluctuations. The role of insulin as an autocrine and paracrine participant of the control of its own secretion has been understudied mostly due to the insufficient knowledge about the molecular phenomena that govern insulin signaling in pancreatic islets. In the present experiments we demonstrate that higher insulin receptor and insulin receptor substrate-1 (IRS1) concentrations are encountered in cells of the periphery of rat pancreatic islets, and that partia I blockade of IRS1 protein expression byantisense oligonucleotide treatment leads to improved insulin secretion induced by glucose overload, which is accompanied by lower steady-state glucagon secretion and blunted glucose-induced glucagon fali. These data reinforce the inhibitory role of insulin upon its own secretion in isolated, undisrupted pancreatic islets, and explores a novel approach that may be employed as therapeutic method for improving insulin secretion in type 2 diabetes mellitus / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientadores: Antonio Carlos Boschero, Licio Augusto Velloso / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T06:15:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bertelli_DanielaFaleiros_M.pdf: 2670943 bytes, checksum: 0c7fe0a5d8c81ba916663fec3bf76e24 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A desnervação aguda é um modelo reprodutível de resistência à insulina. Músculos soleus de ratos controles e de ratos submetidos à desnervação foram utilizados para investigar as bases moleculares da resistência à insulina. A desnervação aguda induziu uma redução significativa na taxa de captação de glicose (62%) analizada pelo clamp euglicêmico hiperinsulinêmico de membro isolado, a qual foi associada à diminuição significativa da fosforilação em tiro sina do IR (73%), IRSl (69%), IRS2 (82%) e fosforilação em serina da Akt (39%), estimuladas pela insulina. Além disso, a desnervação reduziu a associação entre IRS1/IRS2 e p85/PI3kinase, induzida pela insulina. No entanto, a desnervação causou um aumento da atividade da PI3-kinase associada ao IRSl (275%) e IRS2 (180%), embora o conteúdo de fosfoinositóis fosforilados, detectados por HPLC, fosse significativamente reduzido em fIações lípides. Diante dessa aparente discrepância, avaliamos a expressão e atividade da fosfatase SIllP2 e a fosforilação em serina da p85/PI3-kinase. Não houve diferença na expressão da SIDP2 entre músculos controles e desnervados. Entretanto, a fosforilação em serina da p85/PI3-kinase foi reduzida no músculo desnervado, enquanto que o bloqueio da expressão da SIllP2 pelo tratamento com oligonucleotídeo antisense específico restaurou parcialmente o conteúdo de fosfoinositóis fosforilados e normalizou a captação da glicose. Concluindo, alterações no estado funcional da SIllP2 podem contribuir para a resistência à insulina induzida pela desnervação / Abstract: Short-term muscle denervation is a reproducible model of tissue specific insulin resistance. To investigate the molecular basis of insulin resistance in denervated muscle the downstream signaling molecules of the insulin-signaling pathway were examined in intact and denervated soleus muscle of rats. Short-term denervation induced a significant fall in glucose c1earance rates (62% of control, p<O.OS) as detected by euglycemic hyperinsulinemic clamp, and was associated with significant decrease in insulin-stimulated tyrosine phosphorylation of IR (73% of control, p<O.O5), IRSl (69% of control, p<O.05) and IRS2 (82% of control, p<0.05) and serine phosphorylation of Akt (39% of control, p<O.OS). Moreover, denervation reduced insulin-induced association between IRSl/IRS2 and p85/PI3-kinase. Notwithstanding, denervation caused an increase in IRSl (275%, p<O.05) and IRS2 (180%, p<O.OS) associated PI3-kinase activity, but the contents of phosphorylated phosphoinositides detected by HPLC were significantly reduced in lipid fractions. In face of the apparent discrepancy we evaluated the expression and activity of the S-inositol, lipid phosphatase SHIP2 and the serine phosphorylation of p85/PI3-kinase. No major differences in SHIP2 expression were detected between intact and denervated muscle. However, serine phosphorylation of p85/PI3-kinase was reduced in denervated muscle, while the blockade of SHIP2 expression by antisense oligonuc1eotide treatment led to partial restoration of phosphorylated phosphoinositide contents and to improved glucose uptake. Thus, modulation of the functional status of SHIP2 may be a major mechanism of insulin resistance induced by denervation / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Elza Olga Ana Muscelli Berardi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:35:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_JulianoAlves_D.pdf: 1010719 bytes, checksum: bb151ccbc53c64f8ced5c4ffad35c299 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A obesidade é uma doença com alta prevalência nos países ocidentalizados e, do ponto de vista metabólico, é caracterizada por resistência a várias ações da insulina e hiperinsulinemia. A hiperinsulinemia em obesos parece relacionada à hipersecreção hormonal compensatória à reduzida ação insulínica.A significativa redução de peso observada em pacientes submetidos à cirurgia bariátrica permite avaliar o impacto do emagrecimento, em várias alterações patológicas encontradas em pacientes obesos. Os mecanismos, o grau de emagrecimento necessário e quais das alterações se modificam não estão totalmente esclarecidos. Treze pacientes obesos classe III, 4 homens e 9 mulheres, IMC = 56,3 ± 2,7 kg.m-2 foram estudados antes, durante e após a estabilização do peso e os resultados foram comparados a um grupo de indivíduos controle com peso normal (5M/8F; IMC = 22,4 ± 0,5 kg.m-2). IMC final dos obesos - 34.7 ± 2.1 kg/m2 . Após um primeiro estudo metabólico, os obesos foram submetidos à gastroplastia vertical com bandagem e derivação gastrojejunal (técnica de Capella). Foram reavaliados depois do emagrecimento em torno de 20% do peso inicial e depois de estabilização do peso corporal (~-40%). A composição corporal avaliada por impedância bioelétrica melhorou, verificando-se uma redução maior de massa magra que de massa adiposa. Os pacientes obesos apresentaram níveis plasmáticos altos de insulina em jejum (6 vezes maior que a do grupo controle) e durante o teste de tolerância oral à glicose. Após o emagrecimento, a concentração de insulina em jejum foi semelhante à encontrada no grupo de indivíduos magros. A hiperinsulinemia era decorrente de hipersecreção, uma vez que, os níveis de peptídeo C circulantes também eram altos e o clearance de insulina, avaliado durante clamp euglicêmico hiperinsulinêmico, discretamente aumentado, comparado ao dos magros. A sensibilidade à insulina foi avaliada através do clamp euglicêmico hiperinsulinêmico (infusão de insulina ¿ 40 mU/m2.min). Antes da cirurgia, era reduzida em obesos (M ¿ obesos = 19.7 ± 1.5 vs. magros = 51.5 ± 2.4 umol/min.kg MM; p<0.001) e aumentou significativamente após o final da fase de emagrecimento (35,5 ± 3,7 umol/min.kg MM; p<0.05 vs. pré-cirurgia), mas ainda foi menor que aquela medida no grupo de indivíduos magros (p<0.0001). O uso associado da calorimetria indireta permitiu verificar que tanto a via oxidativa quanto a não oxidativa foram pouco estimuladas pela infusão de insulina nos obesos. Depois do emagrecimento, apenas a resposta da via não oxidativa melhorou de maneira significativa, atingindo valores semelhantes aos observados no grupo controle. A oxidação protéica era menor que a dos magros e aumentou de forma similar durante o clamp. A oxidação lipídica em jejum, ao contrário, era maior nos obesos comparados aos magros e não foi inibida pela insulina no clamp realizado antes da cirurgia. Depois do emagrecimento, permaneceu alta em jejum e foi inibida discretamente durante o clamp. Estas repostas foram significativamente diferentes das observadas nos magros. No grupo controle, ocorreu uma inibição da secreção endógena de insulina, atribuída à própria insulina e avaliada pelos níveis plasmáticos de peptídeo-C. Esta auto-inibição da insulina estava diminuída nos obesos e foi totalmente recuperada após o emagrecimento. Em conclusão, este estudo permitiu confirmar várias alterações metabólicas relacionadas à secreção ou à ação da insulina em obesos. Além disto, demonstrou a falta da auto-inibição da secreção de insulina e sua recuperação pelo emagrecimento rápido e importante após cirurgia bariátrica. Demonstrou ainda, que a via metabólica que melhor respondeu ao emagrecimento foi a não oxidativa da glicose. Os efeitos do emagrecimento na sensibilidade à insulina e na secreção de insulina foram desproporcionais e ocorreram em tempos distintos da evolução pós-cirúrgica / Abstract: Obesity has a high prevalence and an increasing incidence, being considered epidemic. It is characterized by hyperinsulinemia and insulin resistance, important early metabolic changes in the obese patient. The first has been reported as an independent cardiovascular risk factor. The mechanisms underlying hyperinsulinemia are not clear and it has been associated to a compensatory beta cell mechanism for insulin resistance. The pos-hepatic insulin delivery rate is a result of the rate of insulin secretion and of its metabolic clearance rate. The main sites of insulin resistance in the obese patient are the liver and the muscle. Both insulin action pathways, oxidative and non oxidative glucose utilization - NOGD, seem to be affected. These metabolic changes are more frequent in class III obese patients, responsible, in part, for the high mortality. Weight reduction improves metabolic and cardiovascular parameters, although it is not clear which amount of weight loss is necessary, neither which insulin effects are modified by this procedure. Bariatric surgery has been report as an efficient tool for the weight, reduction and maintain. A group of 13 class III obese patients (4M/9F; BMI=56.3±2.7 kg.m-2) and 13 lean subjects (5M/8F; BMI=22.4±0.5 kg.m-2) were submitted to a metabolic evaluation including euglycemic hyperinsulinemic clamp, oral glucose tolerance test (OGTT) and indirect calorimetry. The obese patients were submitted to a bariatric surgery (Capella¿s technique) and the metabolic studies repeated after ~ 20 % of weight loss relative to their initial body weight (study II) and after weight stabilization (study III ¿ BMI=34.7±02.1 kg.m-2). Insulin secretion during fasting state and under insulin infusion during the euglycemic clamp was assessed using the C-peptide plasma measurements. It was higher in the obese in the first study (6 folders than control) and the decrease, after weight loss, was statistically significant even in the second study, with further reduction in the third study. The hyperinsulinemia was a result of insulin hyper-secretion since pos-hepatic metabolic clearance rate during the clamp was similar to that of the control group and did not change after weight loss. The insulin sensitivity was significantly impaired in the obese (study I: 19.7 ? 1.5 vs. 51.5 ? 2.4 umol/min.kgFFM; p< 0.0001) and it increased significantly after weight loss (35.5 ? 3.7 umol/min.kgFFM; p< 0.05 vs. CT and study I), but it was still lower than that of lean group (p<0.0001). The insulin stimulated glucose oxidation was lower in the obese group compared to lean and improved slightly after weight loss but it was still lower than that of the former group. The non oxidative glucose disposal was reduced in the obese group and after weight loss it improved significantly reaching levels similar to those of the lean group. Fasting protein oxidation and suppression of protein oxidation by insulin infusion were similar between lean and obese and they were not influenced significantly after weight reduction. The higher fasting lipid oxidation in obese did not change by weight reduction. The insulin infusion did not suppress the lipid oxidation in the first study, but after weight reduction a slight suppression, similar to that of the control group was observed. Insulin infusion under euglycemic conditions at steady state inhibited its own secretion in lean subjects but this insulin action was blunted in the obese group. After weight loss, inhibition of its own secretion was completely reversed to values very similar to those observed in lean controls (about 40% relative to fasting values). In summary, the rapid weight loss in obese class III, after surgery, induced a normalization of the insulin secretion and only an improvement of the insulin sensitivity, almost entirely dependent of glucose storage. The high lipid oxidation did not change with weight loss. The changes in insulin secretion and sensitivity induced by weight loss displayed different degrees and time courses / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientadores: Denise Engelbrecht Zantut Wittmann, Marcos Antonio Tambascia / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:05:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Garmes_HeraldoMendes_D.pdf: 21645590 bytes, checksum: a4b38d6d73ba2bba38173c083329660d (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O hiperandrogenismo da Síndrome dos Ovários Policísticos (SOPC) pode resultar de hiperinsulinemia decorrente da resistência periférica à ação da insulina. Assim, as drogas sensibilizadoras da ação da insulina tornam-se possível opção terapêutica para as pacientes. A relação entre hormônio luteinizante e hormônio folículo-estimulante (LH/FSH) encontra-se aumentada na SOPC, ocorrendo hiper-resposta do LH ao estímulo com hormônio liberador das gonadotrofinas hipofisárias (GnRH). Entretanto, permanece sem elucidação como a hiperinsulinemia induz ao hiperandrogenismo e se as ações da insulina na hipófise alterariam a liberação de gonadotrofinas. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do tratamento com pioglitazona sobre a resposta de insulina ao teste oral de tolerância à glicose (GTTO), o perfillipídico, os níveis séricos de andrógenos e globulina transportadora de hormônios sexuais (SHBG) e a resposta das gonadotrofinas hipofisárias frente ao estímulo com GnRH. Para detectar possíveis efeitos colaterais da droga avaliaram-se os perfis hepático, renal e hematológico.Foram selecionadas 15 pacientes obesas com SOPC, tratadas com pioglitazona 30mg/dia por 58 dias, submetidas a avaliações clínicas e laboratoriais antes, durante e ao final do tratamento. Verificou-se, de modo estatisticamente significativo, diminuição de 34,9% na resposta de insulina ao GTT, redução dos níveis séricos de testosterona total (1,48 ± 0,47vs 0,83 ± 0,27) e livre (8,94 ± 5,2 vs 3,69 ± 2,03), elevação de SHBG (21 ,87 ± 8,68 vs 25,62 ± 10,06) e diminuição de 14,8% na resposta do LH ao estímulo com GnRH. Resultados semelhantes são descritos utilizando-se metformina e troglitazona, porém não se encontraram na literatura avaliações com a pioglitazona ou estudos sobre alteração da resposta de LH ao teste de estímulo com GnRH. Concluindo, observou-se diminuição da resposta de insulina ao GTT acompanhada por redução significativa nos níveis de testosterona livre e total e aumento na concentração sérica de SHBG com o uso da pioglitazona. Adicionalmente, houve queda significativa na resposta do LH ao estímulo com GnRH. Novas investigações com o uso da pioglitazona devem ser conduzidas para que sejam estabelecidos os riscos e beneficios, auxiliando no entendimento fisiopatológico da SOPC / Abstract: The hyperandrogenism found in Polycystic Ovarian Syndrome(PCOS) can be a consequence of hyperinsulinemia as a result of peripheral resistance to insulin. Therefore, drugs used to induce insulin sensitizationhave become a possible therapeutic option for these patients. The relationship between luteinizing hormone/follicle-stimulating hormone (LH/FSH) is increased in PCOS and there is hyperresponsivity of LH to stimulation with gonadotropin-releasing hormone (GnRH). However, the reason why hyperinsulinemia produces hyperandrogenism and whether insulin action on the hypophysis alters gonadotropin liberation remains unknown. Our objective was to evaluate the resultsof treatment with pioglitazone on insulin response to the oral glucose tolerance test (GTT), serum levels of androgens and sexual hormone binding globulin (SHBG), lipidic profile and hypophyseal gonadotropin response to GnRH stimulation. In order to detect possible side effects of the drug the hepatic, renal and hematologic profiles were evaluated. We selected 15 obese patients with PCOS treated with pioglitazone 30mg/day for 58 days who had clinical and laboratorial evaluations before, during and after treatment. The outcome was a statistically significant decrease in insulin response to GTT by 34,9%, serum levels of total testosterone (1.48 ± 0.47vs 0.83 ± 0.27)and free testosterone (8.94 ± 5.2vs 3.69 ± 2.03), increase of SHBG (21.87 ± 8.68 vs 25.62 ± 10.06) and decrease in LH response to GnRH stimulation by 14,8%. Similar results are described using metformin and troglitazone, but we did not find in the literature pioglitazone evaluations or studies on alteration of LH response to GnRH stimulation test. In conclusion, a decrease in insulin response to GTT, accompanied by a significant reduction in free and total testosterone levels as well as increase in serum concentration of SHBG with pioglitazone was observed. In addition, there was a significant reduction in LH responseto GnRH stimulation. Further research with pioglitazone should be carried out to establish risks and benefits, assisting in the pysiopathologic comprehension of PCOS / Doutorado / Medicina Interna / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Laura Sterian Ward / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:22:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dias_MarciaReginaMessaggiGomes_M.pdf: 3529772 bytes, checksum: b04313ec6622e2cc1a2afe5efd67d027 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A obesidade é uma doença considerada como uma epidemia mundial. Apresenta altas taxas de morbidade e mortalidade associadas a várias causas diretas, como hipertrofia cardíaca, arritmias e aumento do débito cardíaco, além de estar intimamente associada à hipertensão arterial e ao diabetes mellitus. É vista como uma doença poligênica e multifatorial, e um número crescente de mutações e polimorfismos gênicos populacionais vem sendo a ela associados. o gene do Receptor Ativado Proliferador de Peroxisomo Gama (PP ARy), um fator de transcrição implicado na diferenciação do adipócito e no metabolismo de lipídeos e glicose, está claramente envolvido na regulação do metabolismo do tecido adiposo em seres humanos. Ristow et ai descreveram uma mutação Pro115Gln no PPARy2 restrita a indivíduos com obesidade mórbida e que aceleraria a diferenciação do adipócito, podendo ser, portanto, um fator causal da obesidade. Também se sabe que a resistência à insulina induzi da pela deficiência do receptor de insulina de tipo 1 (IRS-l) conduz a um aumento da pressão arterial e dos níveis plasmáticos de triglicérides. Um polimorfismo no gene do IRS-l, com substituição de glicina (GGG) por arginina (AGG) no códon 972, foi implicado na resistência à insulina. o objetivo deste trabalho foi avaliar a relação da obesidade e dos distúrbios metabólicos a ela relacionados com mutações e/ou polimorfismos para os genes IRS-l e PPARy2. Para tanto, estudamos 67 indivíduos eutróficos, 37 obesos moderados e 27 obesos mórbidos, totalizando 40 homens e 91 mulheres, de 18 a 67 anos ( 29,2 :t 1,7 anos de idade para o sexo masculino e 32,9 :!: 1,2 anos de idade para o sexo feminino). Foram analisados Parâmetros antropométricos, hemodinâmicos, bioquímicos, bioimpedanciometria (BIA), calorimetria indireta e o índice HOMA-IR para avaliação de resistência insulínica. O estudo genético foi realizado através da pesquisa de mutações em DNA extraído de sangue periférico de todos os casos, usando-se PCR-restrição enzimática. Os indivíduos obesos possuíam maiores níveis de pressão arterial diastólica e sistólica (p<O,OOl), além de freqüência cardíaca mais elevada do que os eutróficos (p=O,003). Também apresentavam níveis mais elevados de colesterol total e triglicérides (p=O,Ol, p<O,03, respectivamente) do que os eutróficos, assim como de ácido úrico (p<O,OOOl). A análise genética mostrou que apenas 5 (3,8 %) indivíduos possuíam a mutação no gene PPARy2, todos homozigotos, enquanto que polimorfismo do gene IRS-I foi encontrado em 12 (9,1 %) casos em heterozigose. Não houve correlação entre o perfil genético e nenhum dos parâmetros antropométricos, hemodinâmicos, bioquímicos ou indicadores de resistência insulínica medidos / Abstract: Obesity is a complex, multifactorial disease that develops from the interaction between genotype and environment. It may be defined as a syndrome characterized by an increase in body fat storage and its prevalence has increased dramatically in industrialized and developing nations. There are several reasons for medical concern regarding overweight and obesity. It increases the risk for several diseases, especially cardiovascular diseases, type 2 Diabetes Mellitus and hypertension. The Peroxisome Proliferator-Activated Receptor (PPAR)-y is a transcription factor that belongs to the same family of nuclear receptors as steroid and thyroid hormone receptors. PP AR-y is a nuclear ligand-dependent transcription factor that promotes adipocyte differentiation and influences insulin sensitivity. A number of genetic variants in the PPARy gene have been identified. These include a very rare gain-of-function mutation (proI15Gln) that was associated by Ristow et al with obesity. The Insulin Receptor Substrate -1 (IRS-l) functions as a key proximal signaling molecule for both insulin receptor and insulin-like growth factor-l receptor signaling pathways. IRS-l is the principal substrate for insulin and insulin-like growth factor-l (IGF-1) receptors; it is present throughout tissues that are insulin sensitive, including sites responsible for glucose production, glucose clearance, and pancreatic j3-cells. A Gly~Arg substitution at codon 972 of IRS-l has been described as associated with obesity, particularly visceral obesity, with which insulin resistance is predominantly associated. The purpose of this study was to evaluate the presence of IRS-l G972R and PP ARy2 Pro 115Gln mutations in the Brazilian population. Sixty-seven lean and 64 obese/severely obese subjects (91women (32.9 i: 1.2 y) and 40 men (29.2 i: 1.7y) between 18 and 67 years of age) participated in the study. BM], waist circumference, fat mass (electrical bioimpedance), indirect calorimetry, blood pressure, fasting plasma glucose and insulin, serum uric acid, plasma lipids and HOMA-IR were evaluated. Genomic DNA was extracted from peripheral blood leukocytes and amplified by polymerase chain reaction (PCR) and restriction enzyme digestion. Men presented larger waist circumference and larger waist-hip ratio than women (p=0.04 and p= 0.0001, respectively). Women presented larger fat percentage and lesser lean mass percentage in comparison with men (p< 0.0001). In relation to biochemical parameters, the female sex presented larger HDL-cholesterol values (p=0.03) and the male sex, a larger value for uric acid (p<O.OOOl). Obese subjects had larger levels ofdiastolic and systolic arterial pressure (p<O,OOI), in addition to more elevated cardiac frequency than lean subjects (p=0.003). They also presented more elevated levels of total cholesterol and triglyceride (p= 0.01, p<0.03, respectively), as well as uric acid, than thin subjects (p<O.OOOl). Genetic analysis showed that only 5 (3.8 %) individuals presented mutation in the PPARy2 gene, all of them homozygote, whereas polymorphism of the IRS-l gene was found in 12 (9.1 %) cases of heterozygosis. There was no correlation between the genetic profile and any of the anthropometric, hemodynamic and biochemical parameters or measured indicators of insulin resistance / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Antonio Carlos Boschero / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:30:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Amaral_MariaEsmeriaCorezolado_D.pdf: 3942946 bytes, checksum: 8e4dd04c438e05bd4b43ba8e9eda71c1 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Durante a prenhez, as ilhotas de Langerhans dos mamíferos passam por modificações estruturais e funcionais em resposta a uma demanda maior de insulina. Essas modificações são orquestradas por diferentes hormônios, incluindo GIl, lactogênios placentários e prolactina (pRL). Muitas das alterações observadas durante a prenhez podem ser reproduzidas in vitro, especialmente se forem usadas ilhotas de Langerhans de neonatos como modelo biológico. O tratamento prolongado de ilhotas de ratos neonatos in vitro com prolactina (pRL) aumenta a síntese de insulina, a expressão do GLUT2, a atividade da glicoquinase, o metabolismo da glicose, a formação de ATP, a atividade iônica (representada por maior habilidade da glicose em reter K+ e Ca2+ pelas células insulares) e, finalmente, a secreção de insulina. Desta forma, considerando a ação pleiotrófica da PRL sobre as ilhotas pancreáticas e levando-se em conta que os efeitos da PRL nos tecidos se manifestam predominantemente através da via JAK2/STATs, este trabalho visou estudar outras possíveis vias de estimulação da PRL em ilhotas isoladas de ratos neonatos e de ratas prenhes. Além disso, diante da importância da insulina na manutenção da massa e funcionalidade das células f3 pancreáticas, buscou-se a existência de um possível cross-talk entre as vias de sinalização desses dois hormônios. O tratamento de ilhotas de ratos neonatos com PRL por 7 dias potencializou a secreção de insulina induzida por glicose, sendo este efeito abolido pela wortmannin, um bloqueador da PI 3 quinase. O tratamento com PRL também reduziu a apoptose em ilhotas de ratos neonatos. Este efeito foi acompanhado por aumento da fosforilação da Bad em serina 112 e foi abolido pela wortmannin. O tratamento com PRL não alterou a expressão do mRNA de proteínas apoptóticas tais como Bax, Bad, Bcl-XL. A exemplo do observado para a insulina, a exposição de ilhotas de ratos neonatos à PRL por 5 e 15 mino aumentou, de maneira dose-dependente, a fosforilação do IRS 1/2, a associação destes com a PI 3-quinase e a atividade desta enzima. Contudo, esses efeitos não foram aditivos aos da insulina. A PRL também estimulou a fosforilação da JAK2, SHC e ERK1/2 em ilhotas de neonatos. Em ilhotas isoladas de ratas prenhes (15°-18° dias de prenhez) houve aumento da fosforilação em tiro sina do IRS 1/2, SHC e ERK, em serina da AKT e em serina-treonina da p70 S6-quinase, quando comparado a ilhotas de ratas-controle. A administração nas ratas prenhes de oligonucleotídeo antisense (mas não do sense) para o receptor de PRL (pRLR) reduziu a expressão do PRLR no útero e nas ilhotas, a fosforilação em tiro sina de proteínas insulares com peso molecular entre 250-160, 160-105 e 105-75 kDa, a fosforilação da p70 S6 quinase e, finalmente, a secreção de insulina. Concluindo, esses resultados indicam que a PRL pode estimular as vias da PI 3-quinase e da MAPK em ilhotas de ratos neonatos e que essas vias estão mais ativas nas ilhotas de ratas prenhes. O fato de a PRL ter induzido fosforilação da Bad serina 112, um substrato da via da MAPK, e este efeito ter sido abolido pela wortmannin, sugere a existência de um possível cross-talk entre as cascatas da PI 3-quinase e da MAPK em ilhotas de ratos neonatos / Abstract: During pregnancy, panereatie islets undergo a number of structural and functional changes in response to an increased demand for insulin. These changes are orchestrated by several hormones including GH, plaeental lactogens, and prolactin (pRL). Many ofthe alterations observed during pregnancy ean be reproduced in vitro, especially if one uses neonatal islets as a model. The treatment of neonatal islets with PRL inereases: insulin synthesis, GLUT2 expression, glueokinase activity, glucose metabolism, eAMP metabolism, ATP produetion, ionic activity (represented by higher ability of the glueose in retaining K+ and Ca2+ inside the islet eells), and finally insulin secretion. Thus, taking into aeeount the pleiotropie effects of PRL on panereatie islets and reconsidering that PRL acts mainly via the JAK2/STATs pathways in most of the target tissues, we have studied here if PRL stimulates also the PI 3 kinase and MAPK pathways in islets ITom neonatal and ITom pregnant rats. Sinee insulin is important for the maintenance of the mass and functionality of adult islets, we have also analyzed a possible eross-talk between the signaling pathways of these two hormones. PRL signifieantly potentiated glueose-induced insulin secretion in islets cultured for 7 days. This effect was bloeked by the speeifie PI 3-kinase inhibitor, wortmannin. PRL treatment also reduced apoptosis that was accompanied by an inerease in Bad Ser 112 phosphorylation. These effects were abolished by wortmannin. PRL did not affeet mRNA expression of apoptotie protein sueh as Bad, Bax, and Bcl-XL. Similar to what was observed for insulin, the exposure of neonatal islets for short period of time (5 and 15 min) to PRL inereased, in a dose-dependent manner, IRS 1/2 tyrosine phosphorylation, their association with, and activation of PI 3-kinase. However, these effects were not additive to the effects of insulin. PRL also increased JAK2, SHC, ERK1/2 phosphoryIation in neonatal isIets. In pregnant rats (17th -19th days of pregnancy) higher IeveIs of tyrosine (IRS1, IRS2, SHC, ERK), serine (AKT), and serine-threonine (p70 S6-kinase) phosphorylation were found, compared to controIs. The treatment of pregnant rats with PRL receptor antisense (pRLR), but not sense oligonucIeotides, significantly reduced the expression of PRLR in uterus and islets, the expression of islet tyrosine phosphorylated proteins with molecu1ar masses of 250-160, 160-105 and 105-75 kDa, phosphorylation of the p70 S6-kinase and, finally, the glucose-induced insulin secretion. In conclusion, PRL treatment activates PI 3-kinase and MAPK pathways in neonatal islets. These pathways seem to be more active in islets ITom pregnant than controI rats. Since PRL induced phosphoryIation of Bad Ser 112, a preferential target for MAPK, was abolished by wortmannin, some earIy cross talk between the PI 3-kinase and MAPK cascades may occur during stimulation with PRL / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Antonio Carlos Boschero / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:28:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_Fabiano_D.pdf: 6716031 bytes, checksum: 7a322dacafc8b91a5a991abd76e64422 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A regulação da secreção de insulina em resposta à alimentação é determinada pela ação direta de nutrientes sobre as células B pancreáticas e pelos efeitos indiretos mediados pela ativação hormonal e neural. Sabe-se que 5()o,Io da insulina secretada no período pós-prandial imediato depende da estimulação colinérgica e que no diabetes tipo 2, a fase rápida da secreção de insulina é a primeira a desaparecer. llhotas de ratos desnutridos também apresentam perfil de secreção de insulina sem o padrão bifãsico. Sabe-se que a regulação da secreção de insulina estimulada por glicose pode ser modulada pelas vias que envolvem a ativação das proteínas quinas e C e A (pKC e PKA). Assim, o presente trabalho teve como objetivo estudar a participação das proteínas PKA e PKC na modulação do processo secretório de insulina em ilhotas isoladas de ratos submetidos à restrição protéica. Os animais foram divididos em dois grupos experimentais, um grupo controle tratado com dieta normoprotéica (NP) (17%) e outro grupo desnutrido tratado com dieta hipoprotéica (LP) (6%). Após dois meses de desnutrição os animais foram sacrificados para o início dos experimentos. llhotas isoladas do pâncreas destes animais foram utilizadas para protocolos de secreção estática e dinâmica de insulina, imunohistoquímica para as enzimas PKA e PKC e análise da expressão gênica para as proteínas em questão. Nossos resultados demonstraram que a dieta LP reduziu a massa corpórea e a albuminemia dos animais. O grupo de animais submetidos a dieta LP mostrou níveis !elevados de ácidos graxos livres no plasma e redução dos níveis de proteínas totais em relação ao grupo NP, caracterizando o quadro de desnutrição. A insulinemia no período alimentado apresentou-se reduzida nos animais LP e a glicemia mantida, sugerindo uma maior sensibilidade dos animais LP ao hormônio insulina.. A resposta secretória de insulina pelas ilhotas LP foi menor que a resposta das ilhotas NP, quando estimuladas com o forbol éster (PMA), um potente estimulador da PKC e Forskolin, um potente estimulador da PKA .Quando ilhotas foram estimuladas com PMA (400 11M) o aumento da secreção de insulina foi significativamente maior no grupo NP quando comparado ao grupo LP. A técnica de imunohistoquímica, revelou uma diminuição na quantidade das enzimas PKA e PKC, estes resultados foram confirmados utilizando-se a técnica de Westem Blotting, onde foram encontrados níveis reduzidos da PKC e PKA em aproximadamente 30% no grupo LP (p<0.05). RT -PCR mostrou uma diminuição também na quantidade de mRNA para ambas as enzimas em estudo, o que nos sugeriu uma possível relação entre a restrição protéica, a qual o animal foi submetido, e alterações na transcrição de genes que codificam enzimas relacionadas com o processo secretório. Até o momento podemos concluir que, a alteração no conteúdo destas enzimas neste modelo experimental permite explicar, pelo menos em parte, a diminuição na resposta secretória encontrada na estimulação com glicose, PMA e F orskolin. Mais ainda, a restrição protéica no período pós-desmame induziu modificações transcricionais para enzimas chave no processo secretório de insulina / Abstract: The effects of carbamylcholine (CCh) and phorbol12-myristate 13-acetate (PMA) on insulin secretion were studied in pancreatic islets from rats maintained on a normal (17%; NP) or low (6%; LP) protein diet. Isolated islets were incubated for 1 h in Krebs-bicarbonate solution containing 8.3 mmol/L glucose, with orwithoutPMA (400 J.UI1ol/L) and CCh. Increasing concentrations ofCCh (0.1-1 000 _mol/L) dose dependent1y increased the insulin secretion by islets from both groups of rats. However, the dose--response curve to CCh was shifted to the right in LP islets with an ECso of2.15 :t: 0.7 and 4.64:t: 0.1 _mol CCh/L in NP and LP islets, respectively (P < 0.05). The PMA-induced insulin secretion was three-fold higher in NP compared to LP islets. Western bloting revealed that the PKCa. and PLCJ31 contents ofLP islets were 300,10 lower than in NP islets (P < 0.05). In addition, PKCa. mRNA expression was reduced by 50% in islets from LP rats. In conclusion, a reduced expression ofPKCa. and PLCJ31 may be involved in the decreased insulin secretion by islets from LP rats following stimulation with CCh and PMA. We also investigated the efIects offorskolin, a stímulator ofadenylyl cyc1ase, on insulin secretíon by pancreatic islets from rats fed a normal (17%; NP) or low (6%; LP) protein diet for 8 weeks. Isolated islets were incubated for 1 h in Krebs-bicarbonate solution containing 8.3 mmol glucose/L, with or without 10 J.UI101 forskolin/L. The forskolin-induced insulin secretion was higher in NP than in LP islets (P < 0.05). Western Iblotting revealed that the amount of the alpha cata1ytic subunit of protein kinase A (pKAa.) was 35% lower in LP compared with NP islets (P < 0.05). Moreover, PKAa. MRNA expression was reduced by 300.10 in islets from LP rats (P < 0.05). Our results indicated a possible relationship between a low protein diet and a reduction ofPKAa. expression. These alterations in PKAa. may be partly responsible for the decreased insulin secretion by islets from rats fed a low protein diet / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Everardo Magalhães Carneiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:28:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Filiputti_Eliane_M.pdf: 3931644 bytes, checksum: 067460cd3f30591368f8a82bd8d1986f (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo estudar alguns dos possíveis determinantes da resposta pancreática deficiente à estimulação com leucina (L) e a associação com agente colinérgico carbacol (CCh), tendo os ratos submetidos à dieta hipoprotéica como modelo experimental. Os sinais de desnutrição tais como: baixo peso corporal, hipoalbuminemia, teores elevados de glicogênio e de gordura hepática, estiveram presentes nos animais que receberam dieta hipoprotéica. Esses animais apresentaram ainda menores níveis de insulina plasmática. A análise do aminograma mostrou que aminoácidos importantes com leucina, valina, arginina e taurina estão reduzidos neste modelo experimental, tanto no jejum como no alimentado. Por outro lado, os estudos "in vitro" demonstraram menor oxidação de leucina em ilhotas de rato hipoprotéicos. A monitorização do efluxo de cálcio mostrou aumentado em ilhotas LP em presença de L e CCh. Contudo a resposta secretória de insulina das ilhotas LP foi menor, comparada com a dos animais NP quando estimulada com leucina, potássio na ausência ou na presença de CCh. O mesmo resultado foi observado quando foram utilizados os agentes potencializadores tais como: gliceraldeído, cetoisocaproato, IBMX e PMA em presença de leucina. Com o uso da técnica de Westem Blotting observamos redução na quantidade de proteína p70S6K e AKT e por RT-PCR diminuição da quantidade de mRNA para a p70S6K. Diante disso o período de restrição protéica a que foram submetidos esses animais alterou em ilhotas pancreáticas a oxidação da leucina, o movimento de cálcio, e conseqüentemente a secreção de insulina frente à leucina, potássio, agentes potencializadores e CCh. Por fim, a associação destes resultados com a redução de proteínas como a p70S6K e AKT em ilhotas desses animais pode explicar, pelo menos em parte, a pobre secreção de insulina observada neste modelo experimental / Abstract: The aim of the present work was to study the effect of low protein diet (LP), m particular the role of reduced intake of the amino acid leucine (L) m the mechanism of pancreatic islet insulin secretion. Male Wistar rats submitted to LP (6% protem) were compared to age and gender matched controls maintamed with normal protein diet (NP) (17% protein). Pancreatic islets isolated from NL and LP groups were submitted to various glucose concentrations and stimulatory drugs to compare the amount of the insulin secretion. The insulin was measured by radioimunoassay. The level of leucine oxidation and 45Ca outflow were also compared by 14(:02 output and 45Ca efflux, respectively. Western Blottillg was applied to compare the levels of p70S6k.l and Akt and RT- PCR to evaluate the levels ofp70S6k.1 mRNA in both groups. LP rats presented with significantly lower body weight, serum protein and albumin, but higher glycogen and liver fat. No differences in serum glucose levels were observed. The aminogram analysis from serum demonstrated that LP groups either fasted or fed had significantly lower levels of leucine, valine, arginine, taurine compared to NP. In vitro insulin secretion in the LP group was significantly lower in the basal situation and in response to stimulation with carbachol, potassium, gliceraldeid, PMS, KIC, IBMX. The addition of the amino acids leucine in the media did not elevated the insulin secretion in the LP group to levels comparable to NP group. In addition, leucine oxidation and calcium out flow from pancreatic islets of LP group were significantly lower. The p70S6k-l and Akt protein expression and p70S6k-1 mRNA levels were lower in LP group as revealed by Westem Blotting and RT-PCR analysis, respectively. These findings indicate that LP diet let to pancreatic islets dysfunction and that correlated with reduced calcium outflow and decreased leucine oxidation in those cells. The mechanisms may involve lower systemic leucine levels, and lower expression of the signaling elements p70S6k.1 and Akt / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Antonio Carlos Boschero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:16:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cunha_DanielAndradeda_M.pdf: 2697533 bytes, checksum: d12b9062280cdcb4fda2b4e21d0f6529 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Muitas proteínas estão envolvidas no processo de extrusão de grânulos e fusão de membranas nas células ß pancreáticas, e entre estas se destacam as proteínas da família SNARE, composta pela sintaxina, VAMP, SNAP-25 e as sinaptotagminas. Durante a prenhez e o período pós-natal, a prolactina (PRL) e os lactogênios placentários induzem a maturação do processo secretório nas ilhotas pancreáticas por um mecanismo que não está totalmente conhecido. Assim, o objetivo deste trabalho foi analisar se o aumento na resposta secretória frente à glicose observado durante a prenhez envolve alterações na expressão das proteínas SNARE e das sinaptotagminas 1 e 4. Observamos aumento na expressão gênica e protéica da sintaxina 1A, SNAP-25, VAMP-2 e da sinaptotagmina 4 nas ilhotas de neonatos (1 ¿ 2 dias de vida) tratadas com PRL. Demonstramos também que ilhotas de ratas prenhes (17 ¿ 18 dias após cópula) apresentam maior expressão da sintaxina 1A, SNAP-25 e sinaptotagmina 4 que ilhotas controle. Além disso, a inibição das vias da PI3-cinase pela wortmanina ou da MAP-cinase pelo PD098059, não alterou a transcrição destes genes. Desta forma, podemos concluir que prolactina modula a expressão gênica e protéica de parte dos componentes ligados aos passos finais da extrusão dos grânulos de insulina e que este efeito não é mediado pelas vias da PI3- ou da MAPcinase / Abstract: The soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attached protein receptor (SNARE) molecules SNAP-25, syntaxin and VAMP-2 as well as synaptotagmins participate in the extrusion of insulin containing granules in pancreatic ß-cells. During pregnancy and the perinatal periods of life, prolactin (PRL) and other lactogenic substances induce maturation of the stimulus-secretion coupling in the pancreatic islets by a mechanism that is still unclear. In the present study, we investigated whether the improvement in the secretory response to glucose during those periods involves alteration in the expression of syntaxin 1A, SNAP-25, VAMP-2 and synaptotagmins 1 and 4. In islets from pregnant rats (17th ¿ 18th days of pregnancy) and islets from neonatal rats (1-2 days old) treated with PRL for five days, the expression of syntaxin, SNAP-25 and synaptotagmin 4 genes and their encoded proteins was increased compared with controls. VAMP-2 gene and protein was increased in PRL treated-islets from neonatal rats but not in islets from pregnants rats. Wortmannin, a PI3-kinase inhibitor, and PD098059 (PD), a MAP-kinase inhibitor, failed to abrogate the effect of treatment with PRL on the expression of the above proteins. In conclusion, these data indicate that PRL modulates the final steps of insulin secretion by increasing the expression of proteins involved in membrane fusion. These experiments also indicate that effects of PRL occur mainly through a signaling cascade distinct from the PI3-kinase or MAP-kinase pathways / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Rui Curi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T11:16:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_Benedito_D.pdf: 2811562 bytes, checksum: 6c865f6a7c5878a7e2af001ba77f1f56 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: O efeito da insulina, hormônios tiroidianos, glicocorticóides (dexametasona) e catecolaminas na atividade de enzimas antioxidantes (CuZn- e Mn- superoxido dismutase SOD, catalase e glutatione peroxidase - GPX) em macrófagos intraperitoneais residentes de ratos e órgãos linfóides (linfonodo mesentérico - LNM, timo e baço) foi investigado. Para tanto, ratos adultos foram submetidos à várias disfunções hormonais: diabetes, hiper e hipotiroidismo, tratamento com dexametasone e adrenodesmedulação. O efeito dos hormônios em macrófagos cultivados também foi avaliado. Além dos estudos sobre atividade de enzimas antioxidantes, a produção de peróxido de hidrogênio (H202) por macrófagos foi determinada in vivo e in vitro. Em macrófagos: 1) a insulina aumentou a atividade da CuZn-SOD, catalase e GPX mas reduziu a da Mn-SOD, 2) os hormônios tiroidianos elevaram a atividade da CuZn- e Mn-SOD mas diminuiu a da GPX, enquanto que a dexametasona reduziu a da Mn-SOD e GPX, 3) a remoção da medula adrenal promoveu diminuição da atividade da Mn-SOD e GPX, 4) a produção de H202 foi aumentada pela insulina mas reduzida pelos hormônios tiroidianos e dexametasona. A indução do diabetes causou as seguintes mudanças de atividade das enzimas antioxidantes em órgãos linfóides: redução (exceto para GPX) no baço, aumento (exceto para a Mn-SOD) no timo, queda da Mn-SOD e catalase mas aumento da GPX no LNM; todas essas alterações foram revertidas pelo tratamento com insulina e permaneceu inalterada pela normoglicemia. O hipertiroidismo provocou elevação das atividades da CuZn- e Mn-SOD e diminuição da atividade da catalase nos órgãos linfóides. O tratamento com dexametasona causou: 1) queda da atividade da CuZn-SOD em todos os órgãos linfóides e da Mn-SOD no LNM, 2) redução da atividade da catalase no LNM e timo e aumento no baço, 3) aumento da atividade da GPX no LNM, timo e baço. A adrenodesmedulação elevou a atividade da CuZn-SOD em todos os órgãos linfóides, diminuiu a atividade da Mn-SOD no LNM e baço mas elevou no timo, enquanto que a atividade da catalase foi reduzida no LNM e timo e a atividade da GPX tornou-se indetectável nestas condições. Esses dados indicam que a atividade das enzimas antioxidantes é alterada pela insulina, hormônios tiroidianos, glicocorticóides e adrenalina. Essas alterações enzimáticas e metabólicas são tecidoespecíficas e podem desempenhar papel importante nas modificações da funcionalidade imunitária que geralmente acompanham as disfunções endócrinas envolvendo esses hormônios / Abstract: The effect of insulin, thyroid hormones, glucocorticoids (dexamethasone) and catecholamines on the activity of antioxidant enzymes (CuZn- and Mn-superoxide dismutase - SOD, catalase, and glutathione peroxidase - GPX) in rat resident intraperitoneal macrophages and lymphoid organs (mesenteric lymph nodes - MLN, thymus, and spleen) was investigated. For this purpose, aduIt rats were submitted to various hormonal disfunctions such as diabetes, hyper and hypothyroidism, dexamethasone treatment and adrenodemedullation. The effect of the hormones on macrophage cuItures was also examined. In addition to the antioxidant enzyme assays, the production of hydrogen peroxide (H202) by macrophages was determined both in vivo and in vitro. In macrophages: 1) Insulin raised the activity of CuZn-SOD, catalase and GPX but reduced that of Mn-SOD, 2) Thyroid hormones increased the activity of CuZn- and Mn-SOD but decreased that of GPX, whereas dexamethasone diminished both Mn-SOD and GPX activities, 3) The removal of adrenal medulla caused a marked decrease of Mn-SOD and GPX activities, 4) H202 production was increased by insulin but reduced by thyroid hormone and dexamethasone treatment. The induction of diabetes caused the following changes in antioxidant enzyme activities of the lymphoid organs: Reduction (except for GPX) in the spleen, increase (except for Mn-SOD) in the thymus, decrease of Mn-SOD and catalase but increase of GPX in the MLN; all these changes were reversed by insulin treatment and remained unchanged under normoglycemia. The hyperthyroidism provoked an elevation of CuZn- and Mn-SOD activities and decrease of catalase in all lymphoid organs. Dexamethasone treatment caused: 1) A decrease of CuZn-SOD activity in all lymphoid organs and of Mn-SOD in the MLN, 2) A reduction of catalase activity in the MLN and thymus and an increase in the spleen, 3) An augmentation of GPX activity in the MLN, thymus and spleen. Adrenodemedullation raised CuZn-SOD activity in all lymphoid organs, decreased the activity of Mn-SOD in the MLN and spleen but increased the latter activity in the thymus, whereas catalase activity was reduced in the MLN and thymus and GPX activity became undetectable under these conditions. These findings support the proposition that the antioxidant enzyme activities are aItered by insulin, thyroid hormones, glucocorticoids and adrenalin. These metabolic changes are tissue-specific and might play a role in the impairment of the immune function under endocrine disfunctions involving these hormones / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Ciências