CAVALCANTE, Cid Freitas. Estudo do efeito da fração não dialisável do látex de Calotropis procera (ait) R. Br em modelos experimentais de inflamação, com ênfase em artrite. 2007. 89 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-09T12:26:59Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_cfcavalcante.pdf: 571371 bytes, checksum: 9d6fb276b87dfaccfb5726f2ee96e864 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-03-12T12:13:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_cfcavalcante.pdf: 571371 bytes, checksum: 9d6fb276b87dfaccfb5726f2ee96e864 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-12T12:13:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_cfcavalcante.pdf: 571371 bytes, checksum: 9d6fb276b87dfaccfb5726f2ee96e864 (MD5) Previous issue date: 2007 / The objective of this dissertation was to investigate the effect of the latex from Calotropis procera in experimental models of inflammation, with special focus on arthritis. The plant belongs to Asclepiadaceae family and is largely found in Northeast of Brazil. The plant latex presents clear anti-inflammatory effects, which is kept by its non-dialyzable protein fraction (NDPF), a less toxic and rubber free fraction. NDPF was obtained according to a procedure established by our group, which, in short, involves several steps of centrifugation and dialysis. Male Wistar rats (230 – 280g) and Balb/c and Swiss male mice (18 – 35g) were organized in groups of 6 animals: a control group (no treatment), a sham group, in which only the inflammatory event was induced (arthritis by zymosan – AZy), an antigen-induced arthritis group (AIA), an infectious peritonitis group (IP) and an experimental group, treated with NDPF. The AZy group was submitted to an articular incapacitation test to measure the paw elevation time (PET, in seconds) and, after sacrifice, total and differential cell count in the intra-articular fluid, histopathological study of the articulation, vascular permeabilization, ADA and TNF-α assays. The results were expressed in means + S.E.M. and significative differences were accepted if p<0.05 (ANOVA/Bonferroni). NDPF inhibited PET in AZy with a maximum effect in the dose of 3mg/kg, at 4h after inflammation induction. There was also a significative reduction of vascular permeability, TNF-α and ADA serum levels and an improvement of the histopathological profile. NDPF also reduced the intra-articular influx of cells in AZy and AIA, especially of neutrophils. In IP, NDPF inhibited the cellular migration and the levels of ADA. So, the results confirmed the expected anti-inflammatory effect of NDPF in arthritis and peritonitis models and suggested a possible mechanism of action involving either an increase of adenosine concentration due to the reduction of ADA levels or an inhibition of TNF-α or both events. Finally, the NDPF chronical toxicity was evaluated confirming that the dose of 10mg/Kg presents well defined pharmacological effects without significant alterations on the animal parameters. The characteristics of NDPF open an interesting possibility for alternative therapy to substitute the toxic effects of steroidal and some non-steroidal drugs, used in rheumatoid diseases, so prevalent among our population. / Tendo em vista a prevalência de doenças inflamatórias reumáticas tais como a artrite reumatóide em nosso meio e a necessidade constante de novas terapias alternativas às drogas esteróides e não esteroidais, que apresentam tantos efeitos nocivos em uso prolongado, decidimos investigar a ação do látex de Calotropis procera em modelos experimentais de inflamação, com foco na artrite. O látex dessa planta da família Asclepiadaceae, vastamente encontrada no Nordeste brasileiro, tem efeitos sabidamente antiinflamatórios em algumas situações, notadamente a sua fração protéica majoritária, não dialisável (FNDL), menos tóxica e desprovida de borracha. A fração foi obtida a partir de um protocolo estabelecido por nossos colaboradores, que, em suma envolve várias etapas de centrifugação e diálise até o produto final liofilizado. Utilizamos ratos Wistar machos com peso entre 230 e 280g e camundongos, Balb/c e Swiss, pesando entre 18 e 35g, em grupos de seis indivíduos nos quais um controle, outro sham em que foi induzido o evento inflamatório (artrite por Zy - AZy, artrite induzida por antígeno - AIA ou peritonite infecciosa - PI) e o experimental no qual foi tratado com FNDL. O grupo AZy foi submetido a teste de incapacitação articular pelo modelo de tempo de suspensão da pata (TSP) e, após sacrifício, à contagem de células total e diferencial no lavado articular, estudo histopatológico da articulação, avaliação de permeabilidade vascular, dosagem de ADA e TNF-α. Os resultados foram expressos em média ± e.p.m. e comparados em testes estatísticos ANOVA/Bonferroni, admitindo-se P<0.05 para significância. A FNDL inibiu o TSP na AZy com efeito máximo na dose de 3mg/kg no t = 4h. Houve também redução significativa da permeabilidade vascular, nos níveis séricos de TNF-α e de ADA, e melhora no quadro histopatológico. Também reduziu o influxo celular sinovial na AZy e AIA, sobretudo de neutrófilos. Na PI, inibiu a migração celular e os níveis de ADA. Dessa forma, os resultados confirmaram o efeito antiinflamatório da FNDL nestes modelos de artrite e peritonite e sugeriram um possível mecanismo de ação relacionado a um aumento da adenosina, por conta da redução dos níveis de ADA, ou por inibição do TNF-α. Por fim procedemos a avaliação da toxicidade da droga em tratamento crônico, constatando que a dose de 10mg/Kg apresenta bons efeitos farmacológicos sem alterações significativas nos parâmetros selecionados.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ceilândia, Programa de Pós-Graduação em Ciências e Tecnologias em Saúde, 2017. / Texto parcialmente liberado pelo autor. Conteúdo liberado: Resumo e Abstract. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-03-21T20:28:28Z No. of bitstreams: 1 2017_MarinaLimaRodrigues_PARCIAL.pdf: 563027 bytes, checksum: 5f57207fd56e1e880920d8270b4611d4 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-03-26T18:15:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_MarinaLimaRodrigues_PARCIAL.pdf: 563027 bytes, checksum: 5f57207fd56e1e880920d8270b4611d4 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-26T18:15:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_MarinaLimaRodrigues_PARCIAL.pdf: 563027 bytes, checksum: 5f57207fd56e1e880920d8270b4611d4 (MD5) Previous issue date: 2018-03-26 / O encapsulamento de fármacos em sistemas micro e nanoestruturados tem se mostrado uma estratégia adequada para superar mecanismos de resistência celular e aumentar a seletividade da droga por sitio-específicos, diminuindo assim efeitos colaterais. Nesse trabalho foram produzidas partículas à base de poliéster (ácido polilático-co-glicólico) utilizadas para encapsular o látex da planta Euphorbia tirucalli, contendo o princípio ativo Eufol. Após o preparo das partículas, houve a avaliação dos parâmetros físico-químicos, morfológicos e citotóxicos. As partículas contendo o látex, apresentaram elevada eficiência de encapsulamento (>70 %), com um perfil de liberação lento e constante durante 6 horas. Através da técnica de espalhamento dinâmico de luz verificou-se que as partículas possuem diâmetro variando de 440 a 480 nm e uma tendência de agregação devido ao valor de potencial zeta (-6,44 a -21,7 mV). Na espectroscopia de FTIR, medidas das nanopartículas de PLGA apresentaram picos das vibrações que confirmaram composição do PLGA. Análise do pó da E. tirucalli no FTIR apresentou banda com deformação axial do grupo O-H ou N-H em comprimento de onda entre 3.500 e 3.200 cm-1, vibrações de estiramento do grupo C-H em 2.900 cm-1 e estiramento do grupo C=O próximo a 1.660 cm-1. E as medidas da nanopartículas contendo a droga apresentaram tanto as características da droga e quanto do PLGA. Na espectroscopia de fluorescência apresentaram três picos entre 200 e 350 nm. As análises termogravimétricas e a calorimetria exploratória diferencial mostram uma tendência para o processo endotérmico, como principal evento a fusão. / The encapsulation of drugs in micro and nanostructured systems has been a suitable strategy to overcome mechanisms of cell resistance and increase drug selectivity by site-specific sites, thus reducing side effects. In this work, polyester-based particles (polylactic-co-glycolic acid) were used to encapsulate the latex of the Euphorbia tirucalli plant, containing the Eufol active ingredient. After the preparation of the particles, the physical-chemical, morphological and cytotoxic parameters were evaluated. The particles containing the latex presented high encapsulation efficiency (> 70%), with a slow and constant release profile for 6 hours. Through of dynamic light scattering technique, the particles had a diameter varying from 440 to 480 nm and a tendency of aggregation due to the zeta potential value (-6.44 to -21.7 mV). In FTIR spectroscopy, measurements of PLGA nanoparticles showed vibration peaks that confirmed PLGA composition. Analysis of powder E. tirucalli in the FTIR showed a band with axial deformation of the OH or NH group at wavelengths between 3,500 and 3,200 cm-1, CH group stretching vibrations at 2,900 cm-1 and the stretching C = O group to about at 1660 cm-1. The measurements of nanoparticle containing the drug showed both the characteristics of the drug and the PLGA. In fluorescence, spectroscopy showed three peaks between 200 and 350 nm. The thermogravimetric analyzes and the differential exploratory calorimetry show a tendency for the endothermic process, as the main event the fusion.

Criptococose é uma levedurose que acomete o homem e vários animais, podendo ocorrer em indivíduos imunocompetentes, mas freqüentemente está associada a um estado de comprometimento imunológico. Atualmente a etiologia desta micose é atribuída a três espécies: Cryptococcus neoformans, C. grubii (isolados no solo rico em fezes de pombos), e C. gattii (isolado nos eucaliptos). A via mais freqüente de contaminação é a inalatória, com posterior colonização do trato respiratório superior, podendo atingir aos alvéolos e desenvolver a sintomatologia respiratória, ou ocorrer disseminação hematógena com possível comprometimento do Sistema Nervoso Central. É notável o aumento na procura de animais de companhia nos grandes centros urbanos e, também, se verifica uma significativa população de pombos nas cidades, alojados em igrejas, prédios, parques e praças. A exposição dos cães a locais possivelmente contaminados e a saúde destes animais constituise uma preocupação e, visto que existem relatos na literatura, ainda que poucos, sobre a criptococose em cães, realizamos uma pesquisa sobre a presença da levedura nesta espécie. Este trabalho teve como objetivo verificar a ocorrência do Cryptococcus em cães com sintomatologia respiratória e/ou neurológica, atendidos no Hospital de Clínicas Veterinárias da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), localizado na cidade de Porto Alegre, Brasil. A amostragem foi composta por 112 cães. Realizou-se o exame direto, com nigrosina, do líquido cefalorraquidiano (n=17); o cultivo da secreção nasal (112), do sangue total (112) e do líquido cefalorraquidiano (n=17) em ágar níger (Guizotia abissynica), com incubação a 370C durante dez dias; e o teste de aglutinação em látex, utilizando-se o teste Crypto-LA (Wampole), com o soro (n=112) e o líquido cefalorraquidiano (n=17) Para o teste de aglutinação em látex foi realizado, também, tratamento com Pronase em 32 (28,57%) amostras de soro e 4 (23,52%) amostras de líquido cefalorraquidiano. Os resultados do exame direto, do cultivo e do teste de aglutinação em látex foram negativos para o Cryptococcus em todas as amostras testadas. Não se excluiu a possibilidade de ter ocorrido resultados falsos negativos, por não ter sido realizado um lavado nasal para coleta de material para cultivo e, também, porque o Cryptococcus poderia estar presente em pequenas quantidades no organismo e/ou ser pouco capsulado e, portanto, não sendo detectado através do teste de aglutinação em látex. Apesar dos resultados desta amostragem, é plausível a suposição que deva existir a ocorrência da infecção pelo Cryptococcus, embora haja a falta de uma suspeita clínica desta enfermidade, posto que, na região de abrangência do estudo existe uma população canina constantemente exposta ao risco por coabitarem com uma grande população de pombos.

NISHI, Beatriz Caroline. Osmotina de Plumeria rubra: identificação, clonagem molecular, modelamento tridimensional e possível efeito mimético da adiponectina. 2016. 111 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-07-10T17:46:05Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_bcnishi.pdf: 6198229 bytes, checksum: 907d1b766e98e2a4ef1484116216b945 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-07-10T17:50:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_bcnishi.pdf: 6198229 bytes, checksum: 907d1b766e98e2a4ef1484116216b945 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-10T17:50:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_bcnishi.pdf: 6198229 bytes, checksum: 907d1b766e98e2a4ef1484116216b945 (MD5) Previous issue date: 2016 / Pathogenesis-related proteins (PRs) are expressed in response to pathogenic infections and abiotic stresses. PR-5 family includes proteins related to thaumatin and osmotin. In this study, the presence of an ~22 kDa osmotin-like protein in Plumeria rubra latex was confirmed by western blot assay using anti-CpOsm antibodies, as described by Freitas et al., 2015. The cDNA fragment encoding this osmotin (PrOsm) was cloned, and then the predicted protein was characterized and modeled in silico. The amplification of the cDNA fragment encoding the PrOsm was carried out by RTPCR. The PCR product was ligated into pGEM-T Easy vector and cloned in E. coli DH5α cells. Clones obtained were submitted to sequencing. The computational analysis of the deduced sequences of P. rubra osmotins (PrOsms) showed that the proteins have an apparent molecular weight about 22 kDa and contain 16 cysteine residues involved in 8 disulfide bonds, stabilizing the protein structure. The PrOsms structure exhibits a typical architecture of TLPs, composed by three domains. Mapping of the electrostatic potentials showed that PrOsms contain, on its surface, an acidic cleft, between domains I and II. The PrOsms were evaluated for their ability to interact with human adiponectin receptors (AdipoR1 and AdipoR2) in silico. Molecular docking suggests that PrOsms are able to interact with adiponectin receptors, similarly to AdipoQ, being potential therapeutic targets for the control of obesity-related diseases, including type 2 diabetes and metabolic syndrome. / Proteínas relacionadas à patogênese (PR proteínas) são expressas em resposta a infecções por patógenos e estresses abióticos. A família PR-5 inclui proteínas relacionadas à taumatina e a osmotina. Neste estudo, a presença de uma proteína do tipo osmotina de aproximadamente 22 kDa, no látex de Plumeria rubra, foi confirmada por meio de ensaios de western blot utilizando anticorpos anti-CpOsm (osmotina de C. procera), como descrito por Freitas e colaboradores (2015). O fragmento de cDNA codificando esta osmotina (PrOsm) foi clonado, a proteína predita foi caracterizada e sua estrutura foi modelada in silico. A amplificação do fragmento de cDNA codificante da PrOsm foi realizado por meio de RT-PCR. O fragmento amplificado, de aproximadamente 600 pb, foi ligado a um vetor de clonagem (pGEM-T Easy). Células de E. coli DH5α eletrocompetentes foram então transformadas com os plasmídeos recombinantes (pGEM-T Easy::PrOsm) e os insertos foram sequenciados. As sequências obtidas foram submetidas a análises in silico. As osmotinas de P. rubra (PrOsms) são proteínas de aproximadamente 22 kDa, apresentando 16 resíduos de cisteína, envolvidos na formação de 8 ligações dissulfeto. A estrutura das PrOsms exibe uma arquitetura típica de TLPs, composta por três domínios. O mapeamento dos potenciais eletrostáticos mostrou que as PrOsms apresentam, em sua superfície, uma fenda de natureza acídica, localizada entre os domínios I e II. A capacidade potencial das PrOsms de interagir com os receptores de adiponectina humana (AdipoR1 e AdipoR2) foi predita in silico. O docking molecular sugere que as PrOsms são capazes de interagir com os receptores de adiponectina, de forma similar a AdipoQ, sendo portanto potenciais alvos terapêuticos para o controle de doenças relacionadas à obesidade, incluindo diabetes tipo 2 e síndrome metabólica.

BEZERRA, Camila Freitas. Propriedades toxicológicas e imunomoduladoras de proteínas laticíferas de Calotropis procera. 2017. 145 f. Tese (Doutorado em Bioquímica)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Coordenação PGBioquímica (pg@bioquimica.ufc.br) on 2017-08-25T14:33:47Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_cfbezerra.pdf: 4291809 bytes, checksum: 5247178968ce0e96ccc0cdf45a51171b (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-09-25T20:15:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_cfbezerra.pdf: 4291809 bytes, checksum: 5247178968ce0e96ccc0cdf45a51171b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-25T20:15:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_cfbezerra.pdf: 4291809 bytes, checksum: 5247178968ce0e96ccc0cdf45a51171b (MD5) Previous issue date: 2017 / Calotropis procera (Ait.) R.Br is a lactiferous plant, recognized for its pharmacological properties. The latex soluble proteins (LP) of this plant present anti-inflammatory, antitumor, anti-arthritis, among others activities. Despite the studies carried out regarding the phytotherapic potential of LP, knowledge about its toxicological and immunomodulatory properties is still incipient. Preliminary study on the immunomodulatory potential of PL by subcutaneous and oral route showed that this fraction was able to induce immune response subcutaneously, with production of IgE and symptoms of anaphylaxis, but with almost no immune response orally. The objective of this study was to determine the toxicological and immunomodulatory potential of the latex of Calotropis procera. LP was processed and characterized for use in vivo assays. The toxicity tests were performed in oral and intraperitoneal Swiss mice, evaluating the behavioral, hematological, biochemical and histological profile. Immunomodulatory activity was determined by oral tolerance protocol in BALB / c mice, and the level of antibodies, cytokines, DTH and hematological and histological analyzes were quantified. Animals given up to 5000 mg/Kg orally exhibited almost no adverse effects on physiological, biochemical and hematological parameters, with LD 50 above 5000 mg/kg. Death (20%) was documented when LP (75 mg/Kg) was given in the peritoneum. Minor doses (35 and 15 mg / kg) were administered and deaths were not documented. Accordingly, PL was classified in category 3 with LD50 in the range of 50 to 300 mg / kg (OECD, No. 423). Suppression of the immune response through the oral tolerance process was confirmed by the lowering of IgE and IgG in the serum, IL-4 and IFN- in spleen homogenates and the absence of anaphylaxis signs. PL, orally, showed low toxicity and immunogenicity according to the toxicity and immunomodulation tests performed. By intraperitoneal route, however, it presented high toxicity mainly due to the proteolytic activity of the sample. Although oral tolerance has been achieved at the different doses studied, further studies should be performed to establish the safe use of PL. / Calotropis procera (Ait.) R.Br é uma planta laticífera, reconhecida por suas propriedades farmacológicas. As proteínas solúveis do látex (PL) desta planta apresentam atividades anti-inflamatórias, antitumoral entre outras. Apesar dos estudos realizados a respeito do potencial fitoterápico de PL, ainda são incipientes os conhecimentos sobre suas propriedades toxicológicas e imunomoduladoras. Estudo prévio a respeito do potencial imunomodulador de PL por via subcutânea e oral, mostrou que esta fração foi capaz de induzir resposta imune por via subcutânea, com produção de IgE e sinais de anafilaxia, entretanto quase sem resposta imune por via oral. O objetivo do trabalho foi determinar o potencial toxicológico e imunomodulador das proteínas do látex de Calotropis procera. PL foi processada e caracterizada para utilização de ensaios in vivo. Os ensaios de toxicidade foram realizados em camundongos Swiss, por via oral e intraperitoneal, avaliando o perfil comportamental, hematológico, bioquímico e histológico. A atividade imunomoduladora foi determinada através de protocolo de tolerância oral em camundongos BALB/c, sendo quantificado o nível de anticorpos, citocinas, DTH e realizado análises hematológicas e histológicas. Os animais que receberam doses de até 5000 mg/kg por via oral, não exibiram praticamente nenhum efeito adverso nos parâmetros fisiológicos, bioquímicos e hematológicos, apresentando uma DL50 acima de 5000 mg/kg. Entretanto, 20% de mortes foram registradas para a dose de 75 mg/kg por via intraperitoneal. Doses menores (35 e 15 mg/kg) foram administrada e mortes não foram registradas. Consequentemente, PL foi classificada na categoria 3, com DL50 na faixa de 50 a 300 mg/kg (OECD, N°423). Uma possível modulação supressora da resposta imune, através do processo de tolerância oral, foi observada com a redução da IgE e IgG no soro, IL-4 e IFN-γ em homogenato de baço e ausência de sinais de anafilaxia. PL, por via oral, apresentou baixa toxicidade e imunogenicidade de acordo com os ensaios de toxicidade e imunomodulação realizados. Por via intraperitoneal, entretanto, apresentou alta toxicidade devido, principalmente, a atividade proteolítica da amostra. Embora a tolerância oral tenha sido alcançada nas diferentes doses estudadas, mais estudos devem ser realizados para o estabelecimento do uso seguro de PL.

VIANA, C. A. Caracterização bioquímica da atividade pró-coagulante de proteases de fluidos laticíferos. 2011. 103 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2011. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-11-05T18:51:49Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_caviana.pdf: 8725116 bytes, checksum: 767aa06f3d14be0e807d03f424c5c370 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2014-11-11T21:27:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_caviana.pdf: 8725116 bytes, checksum: 767aa06f3d14be0e807d03f424c5c370 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-11T21:27:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_caviana.pdf: 8725116 bytes, checksum: 767aa06f3d14be0e807d03f424c5c370 (MD5) Previous issue date: 2011 / Latex proteases have grown in attention because of their ability to exhibit both thrombin and plasmin-like effects. In this study, the plant latex proteins Calotropis procera (CpLP), Cryptostegia grandiflora (CgLP) and Plumeria rubra (PrLP) were investigated in terms of these activities. For both samples were investigated for their fibrinogenolytic and fibrinolytic activity in human plasma and by incubation with human fibrinogen by measuring the clotting time, electrophoretic or spectrophotometric assays and diffusion in agarose gel. In vivo effect of CpLP on clot formation of plasma of healthy and septic mice that have been experimentally infected with Salmonella enterica serovar Typhimurium was also studied. Groups of five mice were treated with CpLP (30 mg/Kg), S. enterica (107 CFU/mL) or CpLP 24 h prior bacteria. After sacrificing animals, blood samples were examined for coagulation time, platelet content and protein profile. The protein fractions of C. procera exhibiting proteolytic activity were capable to hydrolyze fibrinogen similar to thrombin, while the protein fractions of Cr. grandiflora exhibiting proteolytic activity were capable to hydrolyze fibrinogen similar to plasmin. The samples exhibited fibrinogenolytic activity in a dose and time manner, but were not able to dissolve the fibrin clot. Procoagulant activity was eliminated by inhibition of latex proteases with cysteine proteinase inhibitor E-64. Pepstatin, PMSF and EDTA were not inhibitory. Time of clot formation of plasma in septic mice and platelet content were consistently reduced as compared to healthy animals. CpLP exhibited antagonistic effects. It statistically reversed the effects of sepsis on clot-time formation associated to preservation on platelet content. However, CpLP exhibited opposite effect on non-septic mice, inducing faster clot formation, compared to healthy animals but without changing platelet content. Results reported in this work confirm fibrinogenolytic activity associated to cysteine proteases of latex and show a very intriguing in vivo protective activity of CpLP on platelet content on septic animals with apparent benefit effect against disseminated vascular coagulation, a pivotal event associated to lethal sepsis. This effect was however not observed when CpLP was given to healthy animals. / As proteases de látex têm atraído atenção devido à habilidade de exibir atividades semelhantes à trombina e à plasmina. Neste estudo, as proteínas do látex das plantas Calotropis procera (CpPL), Cryptostegia grandiflora (CgPL) e Plumeria rubra (PrPL) foram avaliadas em termos destas atividades. Para tanto, as amostras foram investigadas quanto as suas atividades fibrinogenolíticas e fibrinolíticas, em plasma humano e por incubação com fibrinogênio humano através da medida do tempo de coagulação, ensaios eletroforéticos, espectrofotométricos, ou de difusão em gel de agarose. O efeito de CpPL in vivo, sobre o tempo de coagulação no plasma de camundongos saudáveis ou sépticos, que foram experimentalmente infectados com a bactéria Salmonella enterica sorotipo Typhimurium, também foi estudado. Grupos de cinco camundongos foram tratados com CpPL (30 mg/Kg), S. enterica (107 UFC/mL) ou CpPL 24 h antes da inoculação bacteriana. Depois do sacrifício dos animais, as amostras de sangue foram examinadas quanto ao tempo de coagulação, conteúdo de plaquetas e perfil protéico. As frações protéicas de C. procera exibindo atividade proteolítica foram capazes de hidrolisar o fibrinogênio de forma similar à trombina, enquanto que as frações protéicas de Cr. grandiflora exibindo atividade proteolítica foram capazes de hidrolisar o fibrinogênio de forma similar à plasmina. As amostras exibiram atividade fibrinogenolítica de forma dose e tempo dependente, mas não foram capazes de dissolver totalmente o coágulo de fibrina. As atividades fibrinogenolíticas foram eliminadas pela inibição das proteases dos látices com E-64, um inibidor de protease cisteínica. Pepstatina, PMSF e EDTA não se mostraram inibitórios. O tempo de formação do coágulo no plasma de camundongos sépticos e o conteúdo de plaquetas foram consistentemente reduzidos quando comparados aos animais saudáveis. CpPL exibiu efeitos antagonistas. Foi capaz de reverter, estatisticamente, o efeito da sepse no tempo de formação do coágulo associado à preservação do conteúdo de plaquetas. Contudo, CpPL exibiu efeito oposto em camundongos não sépticos, induzindo rápida formação do coágulo, comparado aos animais saudáveis, porém sem alterar o conteúdo de plaquetas. Os resultados relatados neste trabalho confirmam a atividade fibrinogenolítica associada a proteases cisteínicas de látex e mostram uma efeito protetor in vivo muito intrigante de CpPL no conteúdo de plaquetas em animais sépticos, com aparentes efeitos benéficos contra a coagulação intravascular disseminada, um evento crucial associado à sepse letal. Este efeito, porém, não foi observado quando CpPL foi dado aos animais saudáveis.

SOUZA, Tamiris de Fátima Goebel de. Modulação da resposta inflamatória e aceleração da cicatrização de feridas cutâneas experimentais pelas proteínas isoladas do látex de Himatanthus drasticus Mart. (PLUMEL). 2015. 107 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Maria Carvalho (lolitaprado@ufc.br) on 2015-04-16T14:35:27Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_tfgsouza.pdf: 3226851 bytes, checksum: 9e8ae1d683c4f025a28a474e33f884c8 (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Carvalho(lolitaprado@ufc.br) on 2015-04-16T14:36:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_tfgsouza.pdf: 3226851 bytes, checksum: 9e8ae1d683c4f025a28a474e33f884c8 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-16T14:36:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_tfgsouza.pdf: 3226851 bytes, checksum: 9e8ae1d683c4f025a28a474e33f884c8 (MD5) Previous issue date: 2015 / The treatment of chronic skin wounds results in high costs and risks of complications that could delay the resolution of the healing process. In this study, a pharmaceutical formulation (ointment) was developed containing an isolated protein fraction from Himatanthus drasticus latex (HdLP) in order to investigate its effect on the excisional wound healing in swiss mice (25±3,0 g). Inicially, the dermal irritation test in mice demonstrated that topical treatment with the ointment containing HdLP was not able to cause reactions of irritation in intact skin and the damaged skinreactions. The macroscopic analysis showed that HdLP 0,5%, 1,0% and 2,0% did not affect the inflammatory signs of edema and hyperemia in excisional wounds but treatment with 2,0% HdLP accelerated contraction of ulcers from 9th day after surgical induction of injury, anticipated the appearance of scar tissue and favored a complete re-epithelialization of wounds.After macroscopic analysis, the concentration of HdLP 2,0% was chosen for the histopathological study (leukocyte infiltration, mast cell degranulation, fibroplasia and collagenesis) and inflammatory mediators (myeloperoxidase (MPO), levels of nitrite and pro- and anti-inflammatory cytokines (TNF-α, IL-1β, IL-6 and IL-10). The treatment with HdLP 2,0% was able to decrease the polymorphonuclear infiltrate and increase the mononuclear on the 2nd day but had no effect on mast cell degranulation process in any period observed 2, 7 and 9 days. In the inflammatory phase, HdLP 2,0% decreased the MPO activity, confirming the reduction of migration of polymorphonuclear cells, and stimulated release of IL-1 β and IL-10 on day 2, moreover, the nitrite levels were reduced at 2 and 4 days and exalted on the 9th day. During the proliferative phase, HdLP 2,0% stimulated fibroplasia at 7 and 9 days after surgery, which probably contributed to increased collagen deposition observed in the 9th and 14th day. As the macroscopic analysis previously described, HdLP 2,0% favored the re-epithelialization process of excisional wounds but did not affect the thickness of newly formed epithelium. Therefore, all the results presented show that topical treatment with HdLP 2,0% modulates the inflammatory response of wound healing, influencing the subsequent phases and speeding up the tissue repair of experimental wounds excised. / O tratamento de feridas cutâneas crônicas resulta em altos custos e riscos de complicações que podem atrasar a resolução do processo de cicatrização. Neste estudo, uma formulação farmacêutica (pomada) foi desenvolvida contendo uma fração proteica isolada do látex de Himatanthus drasticus (HdLP) com o objetivo de investigar o seu efeito no processo de cicatrização de feridas excisionais em camundongos swiss machos (25±3,0 g). Primeiramente, o teste de irritabilidade dermal em camundongos demonstrou que o tratamento tópico com a pomada contendo HdLP não foi capaz de provocar reações de irritação na pele íntegra e na pele escarificada. A análise macroscópica de feridas excisionais constatou que HdLP 0,5%, 1,0 % e 2,0% não interferiu nos sinais flogísticos de edema e hiperemia, mas o tratamento com HdLP 2,0% acelerou a contração das úlceras a partir do 9º dia após a indução cirúrgica da lesão, antecipou o surgimento do tecido cicatricial e favoreceu a reepitelização completa das feridas. Após a análise macroscópica, a concentração de HdLP 2,0% foi escolhida para o estudo histopatológico (infiltrado leucocitário, degranulação de mastócitos, fibroplasia e colagênese) e de mediadores inflamatórios (mieloperoxidase (MPO), níveis de nitrito e citocinas pró- e anti-inflamatórias (TNF-α, IL-1β, IL-6 e IL-10). O tratamento com HdLP 2,0% foi capaz de diminuir o infiltrado polimorfonuclear e aumentar o mononuclear no 2º dia mas não interferiu no processo de degranulação de mastócitos em nenhum período observado 2º, 7º e 9º dias. Na fase inflamatória, HdLP 2,0% diminuiu a atividade de MPO, corroborando com a redução da migração de polimorfonucleares, e estimulou a liberação de IL-1β e IL-10 no 2º dia, além disso, os níveis de nitrito foram reduzidos no 2º e 4º dias e elevados no 9º dia. Durante a fase proliferativa, HdLP 2,0% estimulou a fibroplasia no 7º e 9º dias após a cirurgia, o que possivelmente contribuiu para uma maior deposição de colágeno observada no 9º e 14º dia. Conforme a análise macroscópica previamente descrita, HdLP 2,0% favoreceu o processo de reepitelização das feridas excisionais mas não interferiu na espessura do novo epitélio formado. Dessa forma, o conjunto dos resultados apresentados demonstram que o tratamento tópico com HdLP 2,0% modula a resposta inflamatória da cicatrização, influenciando nas etapas posteriores e acelerando a reparação tecidual de feridas cutâneas excisionais experimentais.

Criptococose é uma levedurose que acomete o homem e vários animais, podendo ocorrer em indivíduos imunocompetentes, mas freqüentemente está associada a um estado de comprometimento imunológico. Atualmente a etiologia desta micose é atribuída a três espécies: Cryptococcus neoformans, C. grubii (isolados no solo rico em fezes de pombos), e C. gattii (isolado nos eucaliptos). A via mais freqüente de contaminação é a inalatória, com posterior colonização do trato respiratório superior, podendo atingir aos alvéolos e desenvolver a sintomatologia respiratória, ou ocorrer disseminação hematógena com possível comprometimento do Sistema Nervoso Central. É notável o aumento na procura de animais de companhia nos grandes centros urbanos e, também, se verifica uma significativa população de pombos nas cidades, alojados em igrejas, prédios, parques e praças. A exposição dos cães a locais possivelmente contaminados e a saúde destes animais constituise uma preocupação e, visto que existem relatos na literatura, ainda que poucos, sobre a criptococose em cães, realizamos uma pesquisa sobre a presença da levedura nesta espécie. Este trabalho teve como objetivo verificar a ocorrência do Cryptococcus em cães com sintomatologia respiratória e/ou neurológica, atendidos no Hospital de Clínicas Veterinárias da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), localizado na cidade de Porto Alegre, Brasil. A amostragem foi composta por 112 cães. Realizou-se o exame direto, com nigrosina, do líquido cefalorraquidiano (n=17); o cultivo da secreção nasal (112), do sangue total (112) e do líquido cefalorraquidiano (n=17) em ágar níger (Guizotia abissynica), com incubação a 370C durante dez dias; e o teste de aglutinação em látex, utilizando-se o teste Crypto-LA (Wampole), com o soro (n=112) e o líquido cefalorraquidiano (n=17) Para o teste de aglutinação em látex foi realizado, também, tratamento com Pronase em 32 (28,57%) amostras de soro e 4 (23,52%) amostras de líquido cefalorraquidiano. Os resultados do exame direto, do cultivo e do teste de aglutinação em látex foram negativos para o Cryptococcus em todas as amostras testadas. Não se excluiu a possibilidade de ter ocorrido resultados falsos negativos, por não ter sido realizado um lavado nasal para coleta de material para cultivo e, também, porque o Cryptococcus poderia estar presente em pequenas quantidades no organismo e/ou ser pouco capsulado e, portanto, não sendo detectado através do teste de aglutinação em látex. Apesar dos resultados desta amostragem, é plausível a suposição que deva existir a ocorrência da infecção pelo Cryptococcus, embora haja a falta de uma suspeita clínica desta enfermidade, posto que, na região de abrangência do estudo existe uma população canina constantemente exposta ao risco por coabitarem com uma grande população de pombos.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade UnB Gama, Engenharia Biomédica, 2016. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-01-04T12:08:53Z No. of bitstreams: 1 2016_VonBraunRichte.pdf: 2192679 bytes, checksum: 4c4cd05ddc4015e3cb6f5c05a15b0c53 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-02-09T18:43:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_VonBraunRichte.pdf: 2192679 bytes, checksum: 4c4cd05ddc4015e3cb6f5c05a15b0c53 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T18:43:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_VonBraunRichte.pdf: 2192679 bytes, checksum: 4c4cd05ddc4015e3cb6f5c05a15b0c53 (MD5) / A cicatrização tecidual consiste um sério problema de saúde pública, principalmente nas feridas crônicas, tais como úlceras de pressão, úlceras vasculares e úlceras neuropáticas (úlcera plantar na Hanseníase e úlceras diabéticas), pois apresentam um tratamento longo e dispendioso. Segundo informações da Associação Nacional de Assistência ao Diabético e da Sociedade Brasileira de Diabetologia existem cerca de 5,4 milhões de diabéticos diagnosticados no país e no mundo a Organização Mundial de Saúde estima que 2% de toda a população têm problemas de cicatrização com feridas crônicas. Neste contexto a biomembrana de látex (BML), derivado do látex da seringueira (Hevea Brasiliensis) que foi descoberta em 1998 e colocada em experimentos a partir de 2000, surge como um material promissor, advindo de suas propriedades cicatrizantes, angiogênica e com baixo custo de obtenção. Assim, esta revisão integrativa, visa buscar evidências em tratamentos que envolvam cicatrização com uso da BML, através de constatações experimentais baseado em estudos científicos, a título de encorajar seu uso na prática clínica, além de facilitar a busca, a avaliação crítica e a síntese das evidências disponíveis no período de 2000 (início das publicações com BML) a 2016 (ano atual) aos profissionais da saúde. Para tanto, foram pesquisadas 23 publicações em fontes de dados que considerou os periódicos nas bases de dados CAPES, BIREME, Burns, LILACS, MEDLINE, PubMed e SciELO, com abrangência em atividades de uso direto da BML, ou seja, em cicatrização tecidual e, em aplicações indiretas com a BML sendo utilizada como biomaterial. Foram obtidos 678 resultados satisfatórios e 40 insatisfatórios, sendo 582 experimentos voltados ao uso direto da BML, evidenciando sua alta potencialidade na indução da cicatrização, aceleração da reconstituição celular de tecidos e na revascularização, ou seja, no reestabelecimento das funções angiogênica (criação de novos vasos sanguíneos), além do seu baixo custo em relação aos tratamentos convencionais. Também foram observados 136 experimentos em aplicação indireta da BML como biomaterial, onde demonstrou qualidades estruturais (adaptabilidade, elasticidade, impermeabilidade e possibilidade de sutura), ausência de toxidade, permite interação entre tecidos, não indutor de hipersensibilidade e efeito microbiano. Desta forma, a BML possibilita auxiliar no tratamento de feridas crônicas, com uma recuperação mais rápida, eficiente e acessível a todas as classes da população, além de contribuir para novas possibilidades de desenvolvimento dentro da medicina, tais como aplicações em regeneração de nervo ciático ou em próteses vasculares. / Tissue healing is a serious public health problem, especially in chronic wounds such as pressure ulcers, vascular ulcers and neuropathic ulcers (plantar ulcers in leprosy and diabetic ulcers), since they have a long and expensive treatment. According to information from the National Association of Diabetic Assistance and the Brazilian Society of Diabetology there are about 5.4 million diabetics diagnosed in the country and the world the World Health Organization estimates that 2% of the entire population have problems with healing chronic wounds . In this context the latex membrane (BML), derived from the latex of rubber trees (Hevea brasiliensis) that was discovered in 1998 and placed in experiments since 2000, emerged as a promising material, arising from its healing properties, angiogenic and cost obtaining. Thus, this integrative review, aimed at seeking evidence on treatments involving healing with use of BML, through experimental findings based on scientific studies, by way of encouraging its use in clinical practice, and to facilitate the search, critical evaluation and synthesis the evidence available from 2000 (start of publications BML) to 2016 (current year) to health professionals. Therefore, 23 publications were searched for data sources that considered the journals in CAPES databases, BIREME, Burns, LILACS, MEDLINE, PubMed and SciELO, with coverage of direct use activities of BML, or in tissue healing and in indirect applications with BML being used as a biomaterial. 678 satisfactory and 40 unsatisfactory were obtained, with 582 experiments focused on the direct use of the BML, demonstrating its high potential for induction of wound healing, acceleration of cell tissue repair and revascularization, or the reestablishment of angiogenic functions (creating new blood vessels), and its low cost compared to conventional treatments. 136 were also observed in experiments indirect application of BML as a biomaterial, which demonstrated structural qualities (adaptability, flexibility, impermeability and possibility of suture), absence of toxicity, allows interaction among tissues, and no hypersensitivity inducer microbial effect. Thus, the BML allows aid in the treatment of chronic wounds with a faster, more efficient and accessible to all classes of the population recovery, and contribute to new development possibilities in medicine, such as applications in sciatic nerve regeneration or in vascular prosthetics.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Tecnologia, Departamento de Engenharia Elétrica, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2014-02-18T13:14:21Z No. of bitstreams: 1 2013_MariaCarmoReis.pdf: 4035068 bytes, checksum: 809eb5a34afd89e507228afb6e57f90e (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-02-19T15:06:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_MariaCarmoReis.pdf: 4035068 bytes, checksum: 809eb5a34afd89e507228afb6e57f90e (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-19T15:06:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_MariaCarmoReis.pdf: 4035068 bytes, checksum: 809eb5a34afd89e507228afb6e57f90e (MD5) / O diabetes mellitus é uma doença crônica e se caracteriza por uma variedade de complicações, entre as quais se destaca o pé diabético, considerado um problema grave e com consequências muitas vezes devastadoras diante dos resultados das ulcerações. A formação de feridas que se infeccionam e de difícil cicatrização podem levar à gangrena e até a amputação de dedos, pés ou pernas. Desta forma, este trabalho tem como objetivo uma busca por uma nova possibilidade para o tratamento do pé diabético. Neste sentido, foi desenvolvido um sistema indutor de neoformação tecidual para pé diabético inédito, com circuito emissor de luz de LEDs e utilização do látex natural. Este sistema é composto por uma palmilha cicatrizante e um circuito eletrônico de regeneração tecidual. A palmilha cicatrizante é derivada do látex natural da seringueira Hevea Brasilienses e confeccionada de forma personalizada e individualizada. Este método inovador de cicatrização de úlceras pé diabético é composto pela ação conjunta e simultânea do biomaterial látex e da irradiação da luz de LEDs de baixa intensidade. O objetivo é avaliar a eficiência do sistema indutor de neoformação tecidual na cicatrização de úlceras pé diabético. Este sistema foi testado em pacientes com úlcera pé diabético. Foram selecionados 6 pacientes com 11 úlceras, atendidos no Centro do Pé Diabético do HRT – DF, os quais constituíram dois grupos distintos de tratamento e estudo: grupo controle e grupo experimental. Os achados clínicos foram analisados de forma qualitativa e quantitativamente, os quais demonstraram que os resultados obtidos pelo grupo experimental foram superiores aos do grupo controle. Este fato sugere que o sistema indutor de neoformação tecidual se caracteriza com uma eficaz opção de tratamento para a úlcera pé diabético, devido à alta potencialidade na indução da cicatrização. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Diabetes mellitus is a chronic disease and is characterized by a variety of complications, including diabetic foot stands, considered a serious and often devastating consequences on the results of ulcerations problem. The formation of sores that become infected and poorly healing can lead to gangrene and even amputation of toes, feet or legs. Thus, this work aims a search for a new possibility for the treatment of diabetic foot. Accordingly, an inductor system for new tissue formation novel diabetic foot with light emitting circuit LEDs and use of natural latex has been developed. This system consists of a healing insole and an electronic circuit for tissue regeneration. Cicatrizing insole is derived from the rubber tree Hevea natural latex Brasilienses and made a personalized and individualized. This innovative method of healing diabetic foot ulcers consists of the joint and simultaneous action of biomaterial latex and light irradiation of low intensity LEDs. The objective is to evaluate the efficiency of the inductor system neoformation tissue in the healing of diabetic foot ulcers. This system was tested on patients with diabetic foot ulcer. Were selected 6 patients with 11 ulcers treated at the Diabetic Foot Center the HRT - DF, which constituted two separate treatment groups and study: control group and experimental group. The clinical findings were analyzed qualitatively and quantitatively, which showed that the results obtained by the experimental group were higher than control group. This suggests that the inducing tissue neoformation system is characterized with an effective treatment option for diabetic foot ulcer due to high potentiality in inducing healing.