Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-06-16T14:41:07Z No. of bitstreams: 1 1999_dis_mjteixeira.pdf: 1341860 bytes, checksum: c8cd31688c0bfbd199b1921fc84414de (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-06-16T15:42:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 1999_dis_mjteixeira.pdf: 1341860 bytes, checksum: c8cd31688c0bfbd199b1921fc84414de (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-16T15:42:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1999_dis_mjteixeira.pdf: 1341860 bytes, checksum: c8cd31688c0bfbd199b1921fc84414de (MD5) Previous issue date: 1999 / Antimonials, drugs of choice for the treatment of leishmaniasis, provide good results but have side effects and cases of resistance have been reported. In recent years, there has been an increase in the search for new antiparasitic drugs developed from plants extracts. This study aims to evaluate the leishmanicidal effects, both in vitro and in vivo, of two chemicals isolated from medicinal plants, tymol and lapachol, and compare that effect with the one obtained by antimonials. As well as to compare the results obtained in vitro with the therapeutical response in vivo. These compounds (0,008 to 4,0mg/ml) were evaluated in vitro against intracellular amastigotes of Leishmania (Viannia) braziliensis (LVb), then tested in an animal model (hamster) to confirm the leishmanicidal activity. In vitro, both tymol and lapachol, exhibited an anti-amastigote effect whereas in vivo these substances were not able to stop the development of LVb-induced lesions in the concentrations of 14mg/kg/day/i.m and 300mg/kg/day/p.o, respectively. These results suggest that they might be getting transformed into non-active metabolite(s) or is neutralized, losing their leishmanicidal activity. The antimonials demonstrated efficacy in vitro as well in vivo. But, in spite of presenting a significant anti-amastigote effect in vitro for LVb and apparent clinical cure in vivo, these drugs (60mg/kg/day/i.m) could not completely eradicate the parasites from the tissues of LVb-infected animals. In the histopathological findings disclosed that, lapachol induced a severe lymph node necrosis and apoptosis, although it didn’t reduce the parasitic load in that site. We also found out the spleen and lymph node respond differently to Leishmania infection, since in the spleen an intense withe pulp hypoplasia occurred whereas in the lymph node a remarkable follicular hyperplasia was the rule. LVb-induced tegumentary leishmaniasis in the hamster showed an unresolved pattern of infection, characterized by lymphadenopathy, hepatosplenomegaly, weight loss and absence of granulomas in the lymph node and spleen. Since the substance effects were not similar in the two models studied, in vitro and in vivo, the in vivo model appears to better reflect the therapeutic potencial of the drugs, therefore being more adequate for the screening of new substances for the treatment of leishmaniasis. / Os antimoniais, drogas de escolha no tratamento da leishmaniose, apresentam bons resultados, porém com vários efeitos colaterais e registros de resistência. Nos últimos anos, vem ocorrendo um aumento na busca por novas drogas antiparasitárias a partir de extrações de plantas. Este trabalho teve o objetivo de avaliar o efeito leishmanicida in vitro e in vivo, de duas substâncias isoladas de plantas medicinais, timol e lapachol, em relação aos antimoniais. Bem como comparar os resultados obtidos in vitro com a resposta terapêutica in vivo. As drogas, em concentrações que variaram de 0,008 a 4,0mg/ml, foram avaliadas contra amastigotas intracelulares de Leishmania (Viannia) braziliensis (LVb) in vitro e, em seguida, testadas em um modelo animal susceptível (hamster) para confirmar a ação leishmanicida. In vitro, ambos, timol e lapachol, apresentaram efeito anti-amastigota, entretanto, in vivo, não foram capazes de conter o desenvolvimento de lesões por LVb, nas concentrações de 14mg/kg/dia/i.m e 300mg/kg/dia/v.o, respectivamente. Tais resultados sugerem que possam ser convertidas em metabólitos inativos ou neutralizadas, perdendo sua ação leishmanicida. Os antimoniais apresentaram significante efeito anti-amastigota para LVb in vitro, entretanto, in vivo, apesar da aparente cura clínica, estas drogas (60mg/kg/dia) não foram capazes de erradicar os parasitas dos tecidos. Na histopatologia, foi visto que lapachol induziu intensa necrose e apoptose no linfonodo, no entanto, não reduziu a carga parasitária neste sítio. Encontramos ainda que, baço e linfonodo respondem de maneira diferente à infecção por Leishmania, uma vez que no baço ocorreu hipoplasia da polpa branca e no linfonodo, hiperplasia folicular. A leishmaniose tegumentar por LVb, no hamster, apresentou um padrão de infecção não resolutivo, com linfadenopatia, hepatoesplenomegalia, perda de peso e ausência de granulomas no linfonodo e baço. Como a ação das drogas não foi semelhante nos modelos in vitro e in vivo utilizados, o modelo in vivo parece refletir melhor o potencial terapêutico das drogas, sendo, portanto, mais adequado à triagem de novas substâncias para o tratamento da leishmaniose.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-graduação em Medicina Tropical, 2016. / Texto parcialmente liberado pelo autor. Conteúdo restrito: Capítulos 3 Métodos, 4 Resultados, 5 Discussão, 6 Conclusão e 7 Referências. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-08-16T17:52:01Z No. of bitstreams: 1 2016_GetúlioBernardoMoratoFilho_PARCIAL.pdf: 280428 bytes, checksum: a2054acb11f5c4a32675ba0355b09442 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-08-22T21:06:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_GetúlioBernardoMoratoFilho_PARCIAL.pdf: 280428 bytes, checksum: a2054acb11f5c4a32675ba0355b09442 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-22T21:06:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_GetúlioBernardoMoratoFilho_PARCIAL.pdf: 280428 bytes, checksum: a2054acb11f5c4a32675ba0355b09442 (MD5) Previous issue date: 2017-08-22 / Os antimoniais pentavalentes continuam como primeira opção para o tratamento da leishmaniose cutânea (LC) em crianças e adultos no Brasil. Estudos têm mostrado diferenças de resposta clínica ao tratamento da LC entre adultos e crianças em diferentes cenários. Poucos são os estudos comparando a taxa de falha entre adultos e crianças abaixo de 10 anos em pacientes infectados pela Leishmania (Viannia) braziliensis. Foi realizado um estudo com análise de registros de dados secundários do tipo coorte clínica para avaliar a influência da idade no prognóstico da leishmaniose cutânea entre 2000 e 2005 em Corte de Pedra, Bahia, Brasil. Foram incluídas 987 fichas de pacientes com leishmaniose cutânea tratados com antimonial pentavalente. A taxa de falha no estudo foi 45,8% (452/987) (IC95% 42,7 a 48,9%. As crianças abaixo de 10 anos apresentaram uma taxa de falha terapêutica superior (60%) ao dos adultos (43,6%) com risco relativo de falha de 1,37 (IC95% 1,17 a 1,61). A idade menor que 10 anos e o diâmetro da IDRM menor que 10 mm foram fatores associados à falha terapêutica. A forma mucosa da doença foi verificada em 4,2% dos pacientes durante o acompanhamento. No presente estudo, crianças abaixo de 10 anos apresentaram um maior risco de falha terapêutica após o uso de 20 dias de antimoniais pentavalentes se comparado a indivíduos com 10 anos ou mais de idade. A maior taxa de falha terapêutica em crianças pode estar relacionada a fatores relacionados ao metabolismo dos antimoniais pentavalentes e à qualidade da resposta imune nessa faixa etária. / Pentavalent antimonies are still the first-line treatment for cutaneous leishmaniasis (CL) in children and adults in Brazil. Different studies have shown differences in clinical response to treatment of CL between adults and children in different settings. There are few studies comparing the failure rate among adults and children under 10 years old in patients infected with Leishmania (V.) braziliensis. We conducted a study with secondary data records from clinical cohorts to evaluate the influence of age in the prognosis of cutaneous leishmaniasis between 2000 and 2005 in Corte de Pedra, Bahia, Brazil. 987 files were included from patients with cutaneous leishmaniasis treated with pentavalent antimony. The overall failure rate in the study was 45.8% (452/987) with a 95% CI 42,7 a 48,9%. Children below 10 years had a higher therapeutic failure rate (60%) compared to adolescents and adults (43.6%) with relative failure risk of 1.37 (95% CI 1.17 to 1.61). Children below 10 years and the MST smaller than 10 mm were prognostic factors for treatment failure. 4.2% of patients had mucosal form during the monitoring period. In this study, children below 10 years had a higher risk of treatment failure after using 20 days of pentavalent antimony compared to individuals aged 10 or more years old. The higher treatment failure rate in children may be related to factors related to the metabolism of pentavalent antimony and quality of the immune response.

Submitted by Tatiana Silva (tsilva@icict.fiocruz.br) on 2012-11-19T16:43:27Z No. of bitstreams: 1 carolina_om_aguiar_ioc_bp_0029_2010.pdf: 1531544 bytes, checksum: df1c3ac611efc557a24493255fa19eff (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-19T16:43:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 carolina_om_aguiar_ioc_bp_0029_2010.pdf: 1531544 bytes, checksum: df1c3ac611efc557a24493255fa19eff (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz.Instituto Oswaldo Cruz. Rio de janeiro, RJ, Brasil / A leishmaniose tegumentar americana é uma doença infecciosa causada, no Brasil, principalmente pela Leishmania (Viannia) braziliensis, onde ocorre o acometimento de pele e mucosas. A resposta imune protetora na leishmaniose é mediada por células T antígenos específicos. A freqüência destas células é muito mais elevada nas lesões do que no sangue periférico, o que demonstra que os eventos imunopatogênicos mais importantes devem estar ocorrendo no sítio infeccioso. O infiltrado inflamatório é do tipo granulomatoso, composto predominantemente por linfócitos, macrófagos e plasmócitos, com padrão de distribuição heterogêneo, o que não tem possibilitado uma boa correlação com o prognóstico da doença. As análises in situ também vêm mostrando resultados controversos em relação à distribuição das subpopulações CD4+ e CD8+. Entretanto, pouco se sabe sobre os mecanismos que determinam a formação do infiltrado inflamatório das lesões e como a função efetora influencia a patogênese ou a cura da leishmaniose. Assim, o presente trabalho teve como objetivo estudar o perfil fenotípico dos linfócitos das lesões cutâneas de leishmaniose em termos de migração, memória e ativação celular. Os resultados apresentados neste trabalho mostram que há um menor percentual de linfócitos T CLA+ no sangue periférico de pacientes de leishmaniose do que indivíduos sadios. A estimulação com antígenos de Leishmania aumenta o percentual de células T CLA+ nos pacientes de leishmaniose, mas o mesmo não ocorre com o percentual de células T CD62L+, sugerindo que os antígenos parasitários podem modular positivamente a migração de células para o sitio cutâneo. Corroborando com a hipótese de migração dos linfócitos para o sitio da infecção, foi demonstrado que há um maior percentual de células T CLA+ nas lesões do que sangue periférico. Uma vez que os linfócitos imigraram para as lesões, as células presente nesse sítio infeccioso demonstram ter um fenótipo de células de memória efetora, de células ativadas e expressam molécula associada à citotoxicidade. Os diferentes perfis imunológicos encontrados foram correlacionados com os dados clínicos dos pacientes (tempo de evolução, área da lesão e tamanho da IDRM), a fim de avaliar a influência dessas células na patogênese da leishmaniose. Os percentuais de linfócitos T e de células T CD8+ associadas à função citotóxica, e a freqüência de células T de lesão específicas a Leishmania, assim como os percentuais de células TCD4+CD69+ e TCD3+CD244+ parecem influenciar na patogênese da doença, por se correlacionarem com a área e com tempo de evolução das lesões, respectivamente. Os dezenove pacientes estudados pertenciam a áreas endêmicas diferente, sendo assim divididos: Rio de Janeiro (RJ) e Bahia (BA). Os pacientes das áreas endêmicas da BA e RJdiferiam no tempo de evolução das lesões, onde: pacientes da BA foram classificados como lesões recentes por terem tempo mediano de evolução de 30 dias, e pacientes do RJ com lesões tardias por terem tempo mediano de evolução de 81 dias. Os pacientes BA e RJ exibem diferentes moléculas de ativação células TCD4 ativadas, onde os pacientes BA têm maiores percentuais de células TCD4+CD25+ e os pacientes RJ tem maiores percentuais de células TCD4+CD69+, mas o mesmo não ocorre com as células TCD8+ ativadas. Esses dados sugerem lesões de pacientes BA e RJ devem ser influenciadas diferentemente por células TCD4 ativadas. É possível que células TCD4+CD69+ e TCD4+CD25+ devam ter funcionalidades diferentes, mas essa hipótese deve ser futuramente avaliada nos pacientes citados acima. As quimiocinas CCL2/MCP-1, CCL3/MIP-1α e CCL5/RANTES estão presentes nas lesões de leishmaniose causadas pela L.braziliensis. Em conjunto, esses resultados demonstram que a infecção por Leishmania influencia a migração de linfócitos para a pele, com a modulação de moléculas de migração na superfície celular e com a produção de quimiocinas capazes de atrair essas células para o local da infecção. E que linfócitos presentes no infiltrado inflamatorio com fenótipo de ativação e citotoxicidade podem influenciar napatogênese da leishmaniose cutânea / American tegumentary leishmaniasis is an infectious disease, and in Brazil, is caused mainly by Leishmania (Viannia) braziliensis. The disease manifests as localized cutaneous leishmaniasis or mucosal leishmaniasis. Immune protector response is mediated by specific T cells. The frequency of these cells is high in lesions than in peripheral blood, and suggests that more important immunological events occur in the infectious site. The inflammatory infiltrate is granulomatous type, and compose mainly by macrophages, plasmocytes and lymphocytes, with heterogeneous distribution. The histopathological pattern has no correlation with disease prognostic. In situ analyses have shown controversial results about TCD4+ and TCD8+ cells. Although, little is known about the mechanism that lead the inflammatory infiltrate formation and how effector cells influence in leishmaniasis pathogenesis or cure. The objective of present work was analysed leishmaniasis lesions T cell composition in terms of homing, memory and activation molecules expression. Lower levels of CLA T cells were observed in blood of LC patients than in healthy subjects. Leishmanial antigens upregulated CLA in T cells from cutaneous leishmaniasis patients but not from healthy subjects. In contrast, CD62L is not affected. Corroborating with T cell migration to infection sites, an enrichment of CLA+ cells was observed lesion in comparison with blood. Once infiltrate to lesions, T cells express activation and citotoxic molecules, and effector memory phenotype. The frequency of Leishmania specific T cell lesions, percentual of TCD3+ cells and TCD8+CD244+ cells are associated with lesion area. The percentual of TCD4+CD69+ cells and TCD3+CD244+ cells are correlated with duration of illness. The patients analysed were grouped by endemic area of study, Bahia or Rio de Janeiro. Different endemic area patients have different duration of illness: recent lesion was observed in Bahia´s patients and late lesion was evaluated in Rio de Janeiro´s patients. Bahia and Rio de Janeiro patients´ had different TCD4 activation pattern, where Bahia patients had higher levels of TCD4CD25 T cells and Rio de Janeiro patients had higher levels of TCD4CD69 T cells. In this work, was proposed TCD4/TCD8 ration classification, where than patients with similar levels of TCD4 and TCD8 cells have a equilibrated response with less activated and citotoxic T cells. CCL2/MCP-1, CCL3/MIP-1α and CCL5/RANTES are present is cutaneous leishmaniasis lesions caused by L.braziliensis. All these results showed Leishmania infection can influence the migration pattern to skin, modulating the homing moleculesand chemokine production.Activated and citotoxic T lymphocytes can influence the leishmaniasis pathogenesis

Leishmania (Leishmania) amazonenses está associada à leishmaniose cutânea difusa (DCL) e localizada (LCL). LCL se apresenta como uma lesão única com cura espontânea e DCL apresenta nódulos não ulcerativos que se espalham pela pele. Até o momento não se conhecem os fatores que influenciam na apresentação destas manifestações. A virulência do parasito tem sido associada com a capacidade de sobreviver no macrófago ativado. CD200 é uma glicoproteína reguladora que ativa o CD200R, gerando a inibição da resposta próinflamatória do macrófago. Recentemente foi demonstrado que no processo de infecção por L. (L.) amazonenses, há indução de CD200 no começo da infecção, aumentando a supervivência do parasito. O objetivo principal foi determinar a associação da expressão de CD200 na infecção de macrófagos com isolados de L. (L.) amazonenses associados à LCL ou DCL. Observamos que o aumento da expressão da proteína nos tempos avançados de infecção está relacionado com um aumento na infectividade dos isolados e um maior número de parasitos por célula infectada. / Leishmania (Leishmania) amazonenses is one of the etiologic agents of two forms of leishmaniasis: diffuse (DCL) and localized (LCL) cutaneous leishmaniasis. LCL is presents a unique ulcerated lesion and DCL multiple non-ulcerative nodules. Until now, it is not well known which factors influence the development of LCL or DCL. The parasites virulence has been associated with the ability to survive inside the activated macrophage. CD200 is a glycoprotein that interacts with CD200R inhibiting the proinflammatory response of the cell. Recently it was revealed during the infection process in macrophages L. (L.) amazonenses enhances CD200 expression in the early stages of infection resulting in the intracellular survival of amastigotes. The aim of this study was to determine the association between the induction of CD200 during infection with L. (L.) amazonenses isolates associated with LCL or DCL. An increase in CD200 expression was noteworthy in the late stages of infection, which was also related to a higher infectivity rate of L. (L.) amazonenses isolates.

De 12 casos de leishmaniose tegumentar (LT) em AIDS, em São Paulo, sete do levantamento retrospectivo (1990 a 2001) e cinco do prospectivo (2001 a 2004), com contato prévio com área endêmica para leishmanioses, 50% eram usuários de drogas injetáveis (1990-2001). Apresentavam média de linfócitos T CD4+ de 77 células/mm3, um era C2 e 11, C3 (classificação de HIV, segundo CDC) e 70% tinha sorologia positiva para leishmanioses. As manifestações de LT em mucosa e pele eram diversificadas: úlcera única ou lesões múltiplas e polimórficas ou disseminadas, incluindo comprometimento genital em 4 casos. Todos receberam tratamento específico para leishmaniose e 50%, HAART. 50% recidivaram e 50% foram a óbito no período, independentemente do uso do HAART / From 12 cases of tegumentary leishmaniasis (TL) in AIDS, from São Paulo, seven from retrospective (1990 a 2001) and five from prospective studies (2001 a 2004), with previous contact with endemic areas for leishmaniasis, 50% were endovenous drug users (1990-2001). Presenting mean 77 CD4+ T cells/mm3, one was C2 and 11 were C3 (HIV classification, according to CDC) and 70% had positive serology for leishmaniasis. Presentation of TL in the skin and mucosa were diversified: single or multiple ulcers and polymorphic or disseminated lesions, including lesions in genital area in 4 cases. All were treated with anti-leishmanial drugs and 50% with HAART. 50% presented relapse and 50% died during follow up period, independently of use of HAART

Considerando a importância do perfil do macrófago na infecção por Leishmania e o potencial papel de CD100 na modulação da ativação do m<font face=\"Symbol\">j, postulamos que essa molécula pode afetar a infectividade dessa célula por este parasita. Portanto, analisou-se e comparou-se a expressão de CD100 em diferentes tipos de m<font face=\"Symbol\">j (BALB/c e C57BL/6) e seus efeitos em termos de ativação e infecção com L. amazonensis. Avaliamos a expressão de CD100 e observamos que m<font face=\"Symbol\">js peritoneais de BALB/c expressam mais CD100 do que os de C57BL/6 e que esta expressão diminui ao longo da infecção. M<font face=\"Symbol\">j de BALB/c pré-tratados com sCD100 antes da infecção tem maior índice no tempo de 4h e quando em contato com o sCD100 antes, durante e após a infecção, o índice aumenta em 4 e 24h. Em m<font face=\"Symbol\">j de C57BL/6 pré-tratados com sCD100 ou no período de infecção, o índice aumenta em 4h. Quando permanecem durante todo o tempo em contato com o sCD100 o índice aumenta nos períodos de 4 e 24h. Concluímos que o CD100 pode estar relacionado com a modulação da infecção, e que a infecção afeta a expressão dessa molécula pelo m<font face=\"Symbol\">j. / Considering the importance of m<font face=\"Symbol\">j in Leishmania´s infection and the potential role of CD100 in the modulation of m<font face=\"Symbol\">j activation, we postulated that this molecule may affect m<font face=\"Symbol\">j infectivity. Therefore, we analyzed and compared the expression of CD100 on different types of m<font face=\"Symbol\">j (BALB/c and C57BL/6) and their effects in terms of m<font face=\"Symbol\">j activation and infectivity by L. amazonensis. We analyzed the expression of CD100 and the results suggest that m<font face=\"Symbol\">j from BALB/c express more CD100 than C57BL/6 and this expression decrease along the infection. M<font face=\"Symbol\">j from BALB/c pre-treated with sCD100 have augmented infection rates in 4h and in contact with the sCD100 before, during and after infection, increase rates in periods of 4 and 24h. In m<font face=\"Symbol\">j from C57BL/6 pre-treated with sCD100 or infection period, the rates increase in 4h. When macrophages remained in contact with sCD100 throughout the infection, rates increase after 4 and 24h. We can therefore conclude that CD100 may be related to modulation of Leishmania´s infection and that the infection itself affects CD100 expression in m<font face=\"Symbol\">j.

Leishmania (Leishmania) amazonenses está associada à leishmaniose cutânea difusa (DCL) e localizada (LCL). LCL se apresenta como uma lesão única com cura espontânea e DCL apresenta nódulos não ulcerativos que se espalham pela pele. Até o momento não se conhecem os fatores que influenciam na apresentação destas manifestações. A virulência do parasito tem sido associada com a capacidade de sobreviver no macrófago ativado. CD200 é uma glicoproteína reguladora que ativa o CD200R, gerando a inibição da resposta próinflamatória do macrófago. Recentemente foi demonstrado que no processo de infecção por L. (L.) amazonenses, há indução de CD200 no começo da infecção, aumentando a supervivência do parasito. O objetivo principal foi determinar a associação da expressão de CD200 na infecção de macrófagos com isolados de L. (L.) amazonenses associados à LCL ou DCL. Observamos que o aumento da expressão da proteína nos tempos avançados de infecção está relacionado com um aumento na infectividade dos isolados e um maior número de parasitos por célula infectada. / Leishmania (Leishmania) amazonenses is one of the etiologic agents of two forms of leishmaniasis: diffuse (DCL) and localized (LCL) cutaneous leishmaniasis. LCL is presents a unique ulcerated lesion and DCL multiple non-ulcerative nodules. Until now, it is not well known which factors influence the development of LCL or DCL. The parasites virulence has been associated with the ability to survive inside the activated macrophage. CD200 is a glycoprotein that interacts with CD200R inhibiting the proinflammatory response of the cell. Recently it was revealed during the infection process in macrophages L. (L.) amazonenses enhances CD200 expression in the early stages of infection resulting in the intracellular survival of amastigotes. The aim of this study was to determine the association between the induction of CD200 during infection with L. (L.) amazonenses isolates associated with LCL or DCL. An increase in CD200 expression was noteworthy in the late stages of infection, which was also related to a higher infectivity rate of L. (L.) amazonenses isolates.

De 12 casos de leishmaniose tegumentar (LT) em AIDS, em São Paulo, sete do levantamento retrospectivo (1990 a 2001) e cinco do prospectivo (2001 a 2004), com contato prévio com área endêmica para leishmanioses, 50% eram usuários de drogas injetáveis (1990-2001). Apresentavam média de linfócitos T CD4+ de 77 células/mm3, um era C2 e 11, C3 (classificação de HIV, segundo CDC) e 70% tinha sorologia positiva para leishmanioses. As manifestações de LT em mucosa e pele eram diversificadas: úlcera única ou lesões múltiplas e polimórficas ou disseminadas, incluindo comprometimento genital em 4 casos. Todos receberam tratamento específico para leishmaniose e 50%, HAART. 50% recidivaram e 50% foram a óbito no período, independentemente do uso do HAART / From 12 cases of tegumentary leishmaniasis (TL) in AIDS, from São Paulo, seven from retrospective (1990 a 2001) and five from prospective studies (2001 a 2004), with previous contact with endemic areas for leishmaniasis, 50% were endovenous drug users (1990-2001). Presenting mean 77 CD4+ T cells/mm3, one was C2 and 11 were C3 (HIV classification, according to CDC) and 70% had positive serology for leishmaniasis. Presentation of TL in the skin and mucosa were diversified: single or multiple ulcers and polymorphic or disseminated lesions, including lesions in genital area in 4 cases. All were treated with anti-leishmanial drugs and 50% with HAART. 50% presented relapse and 50% died during follow up period, independently of use of HAART

Considerando a importância do perfil do macrófago na infecção por Leishmania e o potencial papel de CD100 na modulação da ativação do m<font face=\"Symbol\">j, postulamos que essa molécula pode afetar a infectividade dessa célula por este parasita. Portanto, analisou-se e comparou-se a expressão de CD100 em diferentes tipos de m<font face=\"Symbol\">j (BALB/c e C57BL/6) e seus efeitos em termos de ativação e infecção com L. amazonensis. Avaliamos a expressão de CD100 e observamos que m<font face=\"Symbol\">js peritoneais de BALB/c expressam mais CD100 do que os de C57BL/6 e que esta expressão diminui ao longo da infecção. M<font face=\"Symbol\">j de BALB/c pré-tratados com sCD100 antes da infecção tem maior índice no tempo de 4h e quando em contato com o sCD100 antes, durante e após a infecção, o índice aumenta em 4 e 24h. Em m<font face=\"Symbol\">j de C57BL/6 pré-tratados com sCD100 ou no período de infecção, o índice aumenta em 4h. Quando permanecem durante todo o tempo em contato com o sCD100 o índice aumenta nos períodos de 4 e 24h. Concluímos que o CD100 pode estar relacionado com a modulação da infecção, e que a infecção afeta a expressão dessa molécula pelo m<font face=\"Symbol\">j. / Considering the importance of m<font face=\"Symbol\">j in Leishmania´s infection and the potential role of CD100 in the modulation of m<font face=\"Symbol\">j activation, we postulated that this molecule may affect m<font face=\"Symbol\">j infectivity. Therefore, we analyzed and compared the expression of CD100 on different types of m<font face=\"Symbol\">j (BALB/c and C57BL/6) and their effects in terms of m<font face=\"Symbol\">j activation and infectivity by L. amazonensis. We analyzed the expression of CD100 and the results suggest that m<font face=\"Symbol\">j from BALB/c express more CD100 than C57BL/6 and this expression decrease along the infection. M<font face=\"Symbol\">j from BALB/c pre-treated with sCD100 have augmented infection rates in 4h and in contact with the sCD100 before, during and after infection, increase rates in periods of 4 and 24h. In m<font face=\"Symbol\">j from C57BL/6 pre-treated with sCD100 or infection period, the rates increase in 4h. When macrophages remained in contact with sCD100 throughout the infection, rates increase after 4 and 24h. We can therefore conclude that CD100 may be related to modulation of Leishmania´s infection and that the infection itself affects CD100 expression in m<font face=\"Symbol\">j.

Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-05-28T18:06:05Z No. of bitstreams: 1 giselle_af_silva_ioc_bp_0017_2010.pdf: 1838288 bytes, checksum: 8de949a35ec6e17274c973a923f9e69e (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-28T18:06:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 giselle_af_silva_ioc_bp_0017_2010.pdf: 1838288 bytes, checksum: 8de949a35ec6e17274c973a923f9e69e (MD5) Previous issue date: 2010 / CNPq / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / O perfil de citocinas tipo 1, tipo 2 e reguladoras parece ser determinante para a cura clínica da leishmaniose tegumentar americana. No entanto, pouco se sabe sobre a resposta imune (RI) duradoura responsável pelo controle da infecção por Leishmania em indivíduos curados de leishmaniose cutânea (LC). É provável que o perfil da RI efetora e/ou reguladora desencadeada nesses indivíduos contribua para o desenvolvimento de estratégias vacinais promissoras. O T-bet, GATA-3 e Foxp3 são fatores transcricionais (FT), envolvidos na diferenciação de células T, apontados como moduladores da expressão de genes que codificam citocinas efetoras e reguladoras. Baseado nisso, nosso objetivo foi avaliar se os níveis de expressão gênica de citocinas do tipo 1 (IFNG, IL12A, IL18), tipo 2 (IL4, IL5), reguladoras (IL10) e, respectivamente, dos FT TBET, GATA3 e FOXP3, em resposta aos antígenos de Leishmania estavam associados ao tempo de cura clínica da LC. Foram estudados: pacientes de LC curados há menos de dois anos (LCC<2a; n=11), curados há mais de dois anos (LCC>2a; n=10), ou que evoluíram para a cura espontânea (CE; n=05). O grupo controle foi constituído de indivíduos saudáveis, sem histórico de leishmaniose (IS; n=08). O RNAm foi extraído das células mononucleares de sangue periférico (CMSP) estimuladas in vitro com antígenos de L. braziliensis. Para a amplificação gênica, foram utilizadas placas de 96 poços contendo simultaneamente todos os iniciadores dos genes alvo, além dos genes constitutivos. O número de cópias de genes foi quantificado pela da técnica de PCR em tempo real. Os resultados demonstraram que não houve alteração nos níveis de expressão de TBET, GATA3, FOXP3 nos grupos de LCC estudados, mas os CE apresentaram níveis significativamente mais elevados para todos os FT analisados. Os LCC>2a tiveram redução na expressão de IL12A em comparação aos LCC<2a (p<0,01), mas não houve alteração em relação ao IFNG. Embora o número de cópias de IL18, IL4 e IL10 fosse mais baixo nos LCC>2a em relação aos LCC<2a, esta diferença não foi significativa. Além dos FT, os CE apresentaram expressão estatisticamente mais elevada de IFNG, IL12A, IL4, IL5, e IL10. Os resultados acima sugerem que os pacientes que curaram espontaneamente apresentaram uma maior capacidade de expressar citocinas do tipo 1, tipo 2 e reguladoras comparadas aos curados que receberam o tratamento. A redução da expressão de genes de citocinas efetoras e inibitórias com o aumento do tempo de cura sugere que este padrão esteja associado com uma resposta protetora bem modulada. / The profile of Type 1 and Type 2 cytokines in addition to the expression of transcriptional regulators are determinant for the clinical cure of American tegumentary leishmaniasis (ATL). Despite of all investigation in the field, little is known about the progression of the immune response (RI) after the clinical cure (CL), when the parasite burden and excess inflammation is kept in check by a well regulated immune response. It is probable that the RI profile involving the expression of effector and regulatory molecules contributes to ensure the successful strategy for the immune response against the parasite. T-bet, GATA-3 and Foxp3 are transcriptional factors (TF), involved in differentiation of T cells, these molecules are modulators of gene expression that control effector and regulatory cytokines. Based on that, our aim was to associate the levels of cytokines gene expression of type 1 (IFNG, IL12A, IL18), type 2 ( IL4, IL5) and regulatory molecules (IL10, TBET, GATA3 and FOXP3) in response to Leishmania antigen, to clinical time of cure in CL. Were investigated patients of CL with less than two years of cure (CCL<2y; n=11), more than two years of cure (CCL>2y; n=10), or that evolved to spontaneous healing without intervention (SH; n=05). The control group was composed by healthy individuals, with no history of leishmaniasis (HI; n=08). Total RNA was extracted from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) stimulated in vitro with L. braziliensis antigens. The extracted RNA was used to quantify specific gene expression by Real Time PCR using customized assay kits. The experiments showed that there is no change in transcription for TBET, GATA3 or FOXP3 at studied CCL groups, however SH patients have significantly higher gene copy number for all analyzed TF. LCC>2a patients showed reduced expression of IL12A in comparison with LCC<2a (p<0,01), but yet the expression of IFNG was identical in both groups. There is a trend for lower gene copy numbers of IL18, IL4 e IL10 in LCC>2a in comparison with LCC<2a patients, but this difference was not statistically relevant. Besides increased expression of transcriptional regulators, CE patients showed significant increase in gene copy numbers for IFNG, IL12A, IL4, IL5, e IL10. Taken together, our results suggest that patients with spontaneous cure of leishmaniases present a stronger Type 1, Type 2 and regulatory responses when compared to patients that developed progressive disease and received treatment. With increased time of cure, we observed a reduction on gene expression of effector and inhibitory cytokines. This phenomena may represent a pattern of well modulated protective immune response against the parasite.