Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-20T18:26:23Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 899599 bytes, checksum: 6cb5d0eb2fc69c24761a203f60e8006c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-20T18:26:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 899599 bytes, checksum: 6cb5d0eb2fc69c24761a203f60e8006c (MD5) Previous issue date: 2012-07-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Foram isoladas bactérias da rizosfera de plantas-escape ou apresentando baixa seve- ridade de doenças em cultivo de tomateiro convencional e orgânico, de floresta de eucalipto e de floresta nativa. Utilizando metodologias para o isolamento de actino- micetos e de rizobactérias totais e endosporogênicas foram obtidos um total de 635 isolados bacterianos, sendo 590 obtidos no presente trabalho e 45 selecionados em outros trabalhos. Sementes de tomate foram microbiolizadas com suspensão bacte- riana de cada um dos isolados. Vinte e nove isolados (4,56%) foram capazes de reduzir as doenças do tomateiro causadas por Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol) e Xanthomonas gardneri (Xg) em 50% ou mais e em 60% ou mais, respectiva- mente em substrato esterilizado. No ensaio realizado em substrato não esterilizado, as plantas tratadas com os antagonistas foram novamente desafiadas contra Xg e Fol e também foi testado se os isolados seriam eficientes no biocontrole do fungo Alternaria solani (As). No ensaio realizado em solo não esterilizado, os antagonista foram dispensados no tomateiro por microbiolização de sementes e encharcamento de solo cinco dias antes da inoculação com o patógeno desafiante. Alguns isolados não foram eficientes em promover o biocontrole da mancha-bacteriana e da murcha- de-fusário em solo não esterilizado. Quinze dos isolados selecionados contra Xg e Fol também foram eficientes no biocontrole da pinta-preta. Todos os 29 isolados foram capazes de colonizarar o sistema radicular das plântulas de tomateiro. Os três isolados que mais reduziram as severidades de Fol, Xg e As, em percentagem média, foram os isolados UFV252 (não identificado), UFV618 (Streptomyces setonii) e UFV592 (Bacillus cereus) em 47,91, 46,32 e 42,02%, respectivamente. Esses três isolados e o ácido jasmônico (AJ) foram testados contra Xg, Fol e As e na atividade de enzimas de defesa: β-1,3-glucanases (GLU), quitinases (QUI), peroxidases (POX), polifenoloxidases (PFO), lipoxigenases (LOX) e fenilalanina amônia-liases (FAL), além da concentração de aldeído malônico (MDA). Os isolados foram aplicados nas plantas por microbiolização de sementes e também por encharcamento de solo cinco dias antes da inoculação dos patógenos desafiantes e o AJ foi pulverizado nas plantas 48 horas antes da inoculação. Mesmo nas plantas não inoculadas, os tratamentos tiveram maior atividade de algumas enzimas em relação ao tratamento-controle não inoculado. Esses resultados sugerem que as rizobactérias podem estar induzindo resistência sistêmica no tomateiro, uma vez que mesmo na ausência do patógeno ocorreu aumento na atividade enzimática. No patossistema tomateiro-Xg as maiores atividades das enzimas de defesa nas plantas inoculadas com Xg em comparação ao controle que resultaram em menor severidade da mancha-bacteriana foram: QUI e LOX, para o tratamento UFV618; PPO, QUI e LOX, para os tratamentos UFV592 e UFV252; e GLU, QUI, POX, PPO e FAL, para o tratamento AJ. Para o patossistema tomateiro-Fol, as maiores atividades das enzimas de defesa nas plantas inoculadas com Fol em comparação ao controle, que resultaram em menor severidade da murcha-de-fusário foram as enzimas QUI e LOX, para os tratamentos UFV618; e UFV592, para o tratamento AJ. Além dessas enzimas houve aumento na atividade da POX e PAL. No tratamento UFV252 houve aumento na atividade das enzimas PFO, FAL e QUI. Já no patossistema tomateiro-As foi observado que não houve aumento da atividade de nenhuma enzima para o tratamento UFV618, entre as plantas inocu- ladas com As e o tratamento-controle; também não ocorreu redução da severidade da pinta-preta. Entretanto, no tratamento UFV592 houve aumento na atividade das enzi- mas QUI e FAL e no tratamento UFV252 ocorreu aumento na atividade da PFO e FAL. Além da PFO, QUI e FAL houve aumento na atividade LOX no tratamento AJ. A maior atividade dessas enzimas parece ter contribuído para a redução da severi- dade da pinta-preta pelos tratamentos UFV592, UFV252 e AJ. Em todos os patossis- temas em pelo menos uma época de coleta a concentração de MDA foi maior no tratamento-controle, inoculado em comparação com os tratamentos UFV618, UFV592, UFV252 e AJ, indicando maior dano nas membranas no tratamento- controle, o que corrobora com os maiores valores de severidade observados nesse tratamento. / Bacteria were isolated from the rhizosphere of plants escape or showing low disease severity in tomato cultivation of conventional and organic eucalyptus forest and native forest. Using methodologies for isolating actinomycetes, rhizobacterias, and endosporogenic bacterias. This gave a total of 635 bacterial isolates, 590 isolates were obtained in this study and 45 isolates were selected for further work. Tomato seeds were microbiolized with bacterial suspension of each isolate. Twenty-nine isolates (4.56%), were able to reduce the tomato diseases caused by Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol) and Xanthomonas gardneri (Xg) in 50% or more and 60% or more, respectively, in sterile substrates. In the assay accomplished in substrate unsterile, plants treated with the antagonists were again challenged against Xg and Fol and also tested whether these isolates would be effective in the biocontrol fungus Alternaria solani (As). In the test carried out in non-sterile soil, the antagonist were dispensed by microbiolization in tomato seeds and soil drenching, five days before inoculation with the pathogen challenging. Some isolates were effective in promoting the biocontrol of bacterial spot and fusarium wilt in unsterilized soil. Fifteen of selected isolates against Xg and Fol were also effective in biocontrol of early blight. All 29 isolates were able to colonizarar the root system of tomato seedlings. The three isolates that most reduced the severities of Fol, Xg, and As, average percentage, the isolates were UFV252 (unidentified), UFV618 (Streptomyces setonii) e UFV592 (Bacillus cereus) at 47.91, 46.32, and 42.02%, respectively. These three isolates and jasmonic acid (JA) were tested agains Xg, Fol, and As and activity of defense enzymes: β-1,3-glucanases (GLU), chitinases (CHI), peroxidases (POX), polyphenoloxidases (PPO), lipoxygenases (LOX), and phenylalanine ammonia lyase (PAL), in addition the concentration of malondialdehyde (MDA). The strains were applied in plants by seed microbiolization and also by soil drenching, five days before inoculation of challenging pathogens and the JA was sprayed on plants 48 h before inoculation. Even in non-inoculated plants treatments had higher activity of some enzymes in relation to the control uninoculated. These results suggest that rhizobacteria may be inducing systemic resistance in tomato, since even in the absence of the pathogen caused an increase in enzyme activity. In pathosystem tomato-Xg the highest activities of defense enzymes in plants inoculated with Xg compared to the control that resulted in lower bacterial spot severity were: CHI and LOX for the treatment UFV618; PPO, CHI, and LOX for the treatments UFV592 and UFV252, and GLU, CHI, POX, PPO e PAL for the treatment JA. In pathosystem tomato - Fol the highest activities of defense enzymes in plants inoculated with Fol compared to the control, that resulted in lower fusarium wilt severity were the enzymes CHI and LOX for the treatments UFV618 and UFV592, for the treatment JA beyond these enzymes increased in activity of POX and PAL. In UFV252 treatment increased the activity of enzymes PPO, PAL e CHI. Already in the pathosystem tomato- As was noted that there was no increase in the activity of the enzyme for the UFV618 treatment, between inoculated plants with As and control treatment, there was also no reduction in severity of early blight. However, the UFV592 treatment was no increase in enzyme activity CHI and FAL, and UFV252 treatment occurred increase in PPO activity and FAL. Besides the PPO, CHI, and PAL there was an increase in LOX activity in JA treatment. The increased activity of these enzymes appears to have contributed to reducing the severity of early blight by UFV592, AJ, and UFV252 treatments. In all pathosystems at least one collection time the concentration of MDA in control treatment was higher in comparison to UFV618, UFV592, AJ, and UFV252 inoculated treatments. Indicating greater damage membranes in control treatment which corroborates with the highest severity observed in these treatments. / Tese liberada do sigilo pelo Orientador em 06 de junho de 2017. Documento anexado ao Termo de Autorização.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:37:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 494315 bytes, checksum: ae779e1b9f8fc13a152740edf2e2b595 (MD5) Previous issue date: 2009-02-12 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The fusarium wilt caused by Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol), is one of the major problems in tomato cultivation especially in green house crop. The soil infestation with this pathogen can make the green house cultivation unviable, therefore periodic fumigation is recommended to maintain low inoculum level in soil. This study was done to evaluate the fumigant effect of the mustard essential oil (MEO), containing 90% allyl isothiocyanate, to control Fol. In vitro bioassays were done to determine its effect on mycelial growth, sporulation and germination of conidia and clamydospores, with use of a wild Fol and benomyl resistant mutant (Folm). The fungal cultures in Petri plates were fumigated with different concentration of the MEO for 24 or 48 h, and then incubated in MEO free atmosphere. For all fungal propagules, the estimated DE50 was lowest if the fumigation was done for 48 h. The mycelium and conidia of the Fol were more susceptible to MEO than chlamydospores. The MEO did not affect sporulation. Fumigation with MEO was also evaluated for eradication of the chlamydospores of Folm in soil. Initially, the interaction between dose (0, 50, 100 or 150μL/L) and exposure time was determined (2, 4, 6 or 8 days). The soil infested with 2000 ±200 chlamydospores/g was placed in flasks, and after adding the requited amount of MEO the flasks were hermetically sealed. After each exposure period, the inoculum density of the fungus was determined by plating the soil dilutions on benomyl enriched galactosenitrate agar. The regression equation revealed that at dose of 125μL/L an exposure period of 5.4 days was required to eradicate Folm. To determine the fumigant effect of MEO in the green house, 20L of soil infested with 4000 ±250 chlamydospores/g was placed in the plastic bags of 30L, and treated with 0, 50, 100 or 150μL/L of MEO. The bags were then sealed and stored. After 7-days exposure period, the soil was distributed into 4L-plastic pots, and one 20-day old tomato seedling was transplanted into each pot. At 15-day interval, soil from each pot was sampled at 15-day interval to follow the population dynamic of the fungus. The disease progress was accompanied by leaf chlorophyll analysis leaves, and the final severity was evaluated by use of a numerical at the end of 60 days. It was found that the soil fumigation with 150μL/L of MEO reduced the Folm inoculum density by 95% and the disease severity was less than 15%. / A murcha de fusário, causada por Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol), é um problema comum em campos de produção de tomate, especialmente quando o cultivo é realizado em ambiente protegido. Solos infestados por este patógeno podem inviabilizar a produção em estufas, sendo recomendada a fumigação periódica, visando à manutenção de um baixo nível de inóculo no solo. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito fumigante do óleo essencial de mostarda, que é composto por 90% de isotiocianato de alila (ITCA), na redução de inóculo e no controle da murcha vascular causada por Fol. Foram realizados bioensaios in vitro de crescimento micelial, formação de conídios e germinação de conídios e de clamidósporos. Para os testes, foram utilizados um isolado selvagem (Fols) e um mutante resistente ao benomil (Folm), os quais foram fumigados com ITCA, em diferentes doses, dentro de recipientes plásticos vedados, por períodos de 24 ou 48 horas. Após a fumigação, as placas contendo as culturas foram incubadas na ausência dos vapores do produto até a avaliação. Os menores valores de DE50 foram estimados para o período de 48 horas de exposição, tanto para o bioensaio de crescimento micelial como para os de germinação de conídios e de clamidósporos. Verificou-se que os conídios foram os propágulos de Fol mais sensíveis ao produto e os clamidósporos os mais resistentes. O ITCA não afetou significativamente a formação de conídios pelos isolados. Avaliou-se também a eficiência do produto na erradicação de clamidósporos de Folm no solo. Inicialmente, foi estudada a interação entre doses (0, 50, 100 e 150μL/L) e tempo de exposição (2, 4, 6 e 8 dias) ao ITCA. Solo infestado com 2000 ±200 clamidósporos/g foi transferido para erlenmeyers, que receberam a dose desejada, sendo, em seguida, hermeticamente vedados. Após exposição, a população do fungo foi determinada por meio de plaqueamento de diluições em série em meio seletivo para F. oxysporum acrescido de benomil. A partir da equação de regressão gerada, pôde-se estimar que seria necessária uma fumigação de solo com 125μL/L por períodos superiores a 5,4 dias para erradicação de Folm no solo. Para determinar o efeito de ITCA em casa de vegetação, 20L de solo infestado com 4000 ±250 clamidósporos/g foram colocados em sacos de polietileno de 30L, os quais receberam as doses de 0, 50, 100 ou 150μL/L sendo, posteriormente, vedados, permitindo a fumigação por 7 dias. Decorrido este período, o solo foi transferido para vasos de 4L, os quais receberam uma muda de tomate com 20 dias de idade. As plantas foram cultivadas por 60 dias, sendo retiradas amostras quinzenais de solo para acompanhamento da dinâmica populacional do fungo no solo. Através de análise do conteúdo de clorofila nas folhas, acompanhou-se o desenvolvimento da doença e a severidade final foi avaliada por meio de escala de notas. Foi verificado que a fumigação com 150μL/L de ITCA reduziu em mais de 95% a população de Folm no solo e que a severidade da doença aos 60 dias foi inferior a 15%.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:37:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 330706 bytes, checksum: 9be020e5be4feef0a4967a862388b2b0 (MD5) Previous issue date: 2009-10-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / To base the cultivation of Cylindrocladium pteridis and inoculation of the fungus under controlled conditions, was evaluated in this study sporulation in culture, conidial germination, mycelial growth and defoliation of eucalyptus at different temperatures. In preliminary experiments, we evaluated the effect of light and incubation time on germination of conidia. The presence of continuous light significantly reduced germination, resulting in higher germination of conidia in the dark. In assessing the germination under different incubation periods, it was observed that the germination of C.pteridis is very fast, and obtained 100% conidia germinated after 4 h of incubation. In assessing the germination under different temperatures, the optimum for germination was 25 ° C (84.6%). The mycelial growth also varied with temperature, and the maximum was 25 ° C. Aiming to solve the problem of low production of conidia in vitro were evaluated three methods of sporulation of C. pteridis in culture. We compared three methods, and the method of scraping the aerial mycelium followed by flood water was the most sporulation in media AVDA, MEA, PDA and GAA, after 10 days of incubation. We obtained the greatest number of conidia on PDA, with an average of 14.13 x 104 conidia / mL. With half SNA was no significant difference between the methods studied. Subsequently, to study the effect of temperature on leaf eucalyptus, is inoculated plants were kept in a moist chamber at 18, 26, 28 and 30 º C. After 48 h, were transferred to a greenhouse (25 ± 5 º C). The temperature significantly influenced the leaf classes in the base of the crown 50 days after inoculation, and the highest percentage of defoliation occurred at 26 º C. / A fim de embasar o cultivo de Cylindrocladium pteridis e a inoculação do fungo em condições controladas, avaliou-se neste trabalho a esporulação em cultura, a germinação de conídios, o crescimento micelial e a desfolha causada em eucalipto sob diferentes temperaturas. Em experimentos preliminares, avaliou-se o efeito da luminosidade e o tempo de incubação na germinação de conídios. A presença de luz contínua reduziu significativamente a germinação, obtendo-se maior germinação de conídios no escuro. Ao avaliar a germinação sob diferentes períodos de incubação, observou-se que a germinação de C.pteridis é muito rápida, sendo obtido 100% de conídios germinados após 4 h de incubação. Ao avaliar a germinação sob diferentes temperaturas, o ótimo para germinação foi 25 °C (84,6%). O crescimento micelial também variou com a temperatura, e o máximo foi a 25 ºC. Objetivando-se solucionar o problema da baixa produção de conídios in vitro, avaliaram-se três métodos de esporulação de C. pteridis em cultura. Compararam-se três métodos, e com o método de raspagem do micélio aéreo seguido de inundação em água obteve a maior esporulação do fungo nos meios AVDA, MEA, BDA e GAA, após 10 dias de incubação. Obteve-se a maior produção de conídios em BDA, com média de 14,13 x 104 conídios/mL. Com o meio SNA não houve diferença significativa entre os métodos estudados. Posteriormente, para se estudar o efeito da temperatura na desfolha em eucalipto, inocularam-se plantas que foram mantidas em câmara úmida a 18, 26, 28 e 30 ºC. Após 48 h, foram transferidas para casa de vegetação (25±5 ºC). A temperatura influenciou significativamente a desfolha em ramos da base da copa aos 50 dias após inoculação, e o maior percentual de desfolha ocorreu a 26 ºC.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:37:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 372194 bytes, checksum: 1ce7a898936fa3c0ddc79d75753c89e2 (MD5) Previous issue date: 2009-07-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The main objectives of this work were to identify the causal agent of the maize White Spot, to obtain preliminary information on the disease dispersal in the field and to characterize the reaction of maize hybrids and inbreds to the disease. For the etiological studies, isolations were performed from white spot lesions the anasarca phase, resulting in the development of bacterial colonies. Maize hybrids BRS2022, BRS1010, 1D2195, BRS1040, BRS1035, BRS1031, BRS3025, BRS1030, 2B710 e P30F35 and inbred lines L3, L228-3, 521274, 521236 e 262841-1-4-1 were evaluated under natural epidemic in a randomized block design with three replications. Cultivars were planted in single row plots, separated by two rows of the resistant hybrid BRS1010. Spreader rows were formed by planting the susceptible genotype DAS657 0,5 m apart and in front of each block. Disease severity was evaluated at a weekly internal starting 60 days after planting, through a 1 to 9 scale of disease severity where 1= no disease and 9= 100% of leaf area affected. Ratings were taken at three different locations within each plot: 1, 2, 3, 4, 5 and 6 meters inoculum source. Data were used for the calculation of the area under disease progress curve (AUDPC), disease severity at 50% of epidemic development (Y50), disease severity at the end of the epidemic, and the rate of disease progress. Inoculations on the susceptible hybrid DAS657, in the greenhouse, reproduced the typical symptoms of the disease. Re-isolations from theses lesions confirmed the presence of the same bacteria isolated from the field, which identified as Pantoea ananatis, confirming previous reports on the involvement of this bacteria in the initial lesions of this disease. No disease gradient was observed based on the disease severity observed in each point of evaluation within each plot. A better distinction between the level of resistance of maize genotypes was obtained through AUDPC and Ymáx values. Maize hybrids BRS1030, BRS1035 and BRS1010 and inbreds L3, and L228-3 were the most resistant genotypes. These inbred lines may be useful in breeding programs for resistance to maize white spot. / Este trabalho objetivou confrimar o agente causal da mancha-branca do milho, obter informações preliminares sobre a dispersão do patógeno e caracterizar a reação de genótipos de milho a doença. Para o estudo etiológico, isolados foram obtidos de lesões de manchabranca em fase de anasarca, resultando em desenvolvimento de colônias bacterianas. Híbridos de milho, BRS2022, BRS1010, 1D2195, BRS1040, BRS1035, BRS1031, BRS3025, BRS1030, 2B710 e P30F35 e as linhagens L3, L228-3, 521274, 521236 e 262841-1-4-1 foram avaliados sob epidemia natural em delineamento de blocos ao acaso e três repetições. Os cultivares foram plantados em fileiras de cinco metros, separadas por uma linha do híbrido resistente BRS1010. A cortina suscetível (fonte de inóculo) formada pelo híbrido DAS657, foi plantada na parte frontal de cada bloco, afastada 0,5 m. A severidade da doença foi avaliada em intervalos semanais a partir dos 60 dias do plantio, utilizando uma escala de 1 a 9, onde: 1= sem doença e 9= 100% de área foliar afetada. As avaliações foram realizadas em 6 pontos dentro da parcela afastados 1, 2, 3, 4, 5 e 6 metros da fonte de inóculo. Os dados de severidade foram usados para o calculo da área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD), severidade da doença na metade da epidemia (Y50), severidade da doença no final da epidemia (Ymáx), e taxa de progresso da doença. Com inoculações em híbrido suscetível DAS657, em casa de vegetação, foi possível reproduzir os sintomas típicos da doença. Reisolamento a partir dessas lesões confirmou a presença da mesma bactéria isolada do campo, identificada como Pantoea ananatis, corroborando relatos do envolvimento desta bactéria nos sintomas iniciais da doença. Não foi observada a formação de um gradiente de dispersão baseado na severidade da doença observada em cada ponto de avaliação dentro da parcela. A melhor distinção entre os níveis de resistência de genótipos de milho foi obtida pelos valores de AACPD e Ymáx. Os híbridos de milho BRS1030, BRS1035 e BRS1010 e as linhagens L3, e L228-3 foram os genótipos mais resistentes. Essas linhagens podem ser usadas em programas de melhoramento visando resistência a mancha-branca.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV12MA063.pdf: 46944968 bytes, checksum: 6b8d53259f4109a052b1401a704602a0 (MD5) Previous issue date: 2012-02-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The macrospora spot, caused by the fungus Stenocarpella macrospora, has become one of the most important maize diseases in Brazil in recent years. The objectives of the study were: a) evaluate the resistance of maize hybrids macrospora spot b) determine the sensitivity of S. macrospora to fungicides by inhibition of mycelial growth and conidial germination c) evaluate the protective and curative control of the disease in young corn plants d) quantify the effect of fungicides on control the expansion macrospora spot. The resistance was evaluated on 52 hybrids and two isolates of the fungus. The inoculation was made at the V2 developmental stage, placing each plant in 0.2 mL of the suspension of 7x104 conidia mL-1. Disease severity was evaluated 14 days after inoculation. The sensitivity of S. macrospora in vitro were evaluated 12 fungicides, six concentrations and two isolates of the fungus. The percentage of inhibition of mycelial growth and conidial germination was calculated in comparison with control, estimation of 50% inhibitory concentration (IC50). The efficiency of fungicides to control protective and curative was determined in a greenhouse, with the isolated SC and the hybrid AS1565. We evaluated 16 fungicides, applied at V2. Preventive control the inoculation was made depositing 0.2 mL of the suspension of 7x104 conidia mL-1 48 hours after application. In the curative control the inoculation was made 48 hours before application. Disease severity was determined 21 days after inoculation. In control the expansion of macrospora spot seven fungicides were evaluated, applied directly to leaves of maize with leaf lesions with hybrid AS 1565. The lesions were measured every three days for a period of 27 days. In each lesion was also quantified the number of pycnidia cm2-1. There was significant difference in severity leaf among the hybrids. There was no significant effect of isolates of the fungus on the severity of the disease. Resistant hybrids were not found. The disease severity ranged from 8.88% for hybrid 30A30HX to 17.76% for the AO 1050. The fungicides tested were effective in inhibiting the growth of the mycelium, and the IC50 was less than 1 ppm for all fungicides. There was no difference between isolates. The strobilurins had higher fungitoxicity in inhibition of germination of the conidia, and the IC50 was between 0.0035 and 0.03 ppm, and the isolated SC showed a higher sensitivity to the fungicides. In preventive aplication, all fungicides differed from the control, reducing the average 85% the severity macrospora spot compared to control. In the curative control all fungicides differed from the control, but mixtures of triazole + strobilurin showed greater efficiency, reducing an average of 75% disease severity, whereas the isolated products as the strobirulins reduced 62%, benzimidazoles 55% and triazoles 38% . The fungicide tebuconazole, and mixtures of triazoles + strobilurins, reduced on average 68% expansion of the macrospora spot, and 58.7% the formation of pycnidia cm2-1. It although no resistant hybrid was found genetic variability exists among the hybrids tested and that the application of fungicides significantly reduced the severity of the macrospora spot / A mancha-de-macrospora, causada pelo fungo Stenocarpella macrospora, tem se tornado uma das doenças mais importantes na cultura do milho nos últimos anos no Brasil. Os objetivos do trabalho foram: a) avaliar a resistência de híbridos de milho a mancha-demacrospora; b) determinar a sensibilidade de S. macrospora a fungicidas pela inibição do crescimento do micélio e germinação de conídios; c) avaliar o controle protetor e curativo da doença em plantas jovens de milho; d) quantificar o efeito de fungicidas na expansão da mancha-de-macrospora. Quanto a resistência foram avaliados 52 híbridos e dois isolados do fungo. A inoculação foi feita no estádio fenológico V2, depositando em cada planta 0,2 mL da suspensão de 7x104 conídios mL-1. A severidade da doença foi avaliada aos 14 dias após a inoculação. Quanto à sensibilidade de S. macrospora in vitro foram avaliados 12 fungicidas, seis concentrações e dois isolados do fungo. A porcentagem de inibição do crescimento micelial e germinação de conídios foi calculada em relação à testemunha, estimando-se valores de concentração inibitória de 50% (CI50). A eficiência de fungicidas no controle protetor e curativo foi determinada em casa-de-vegetação, com o isolado de SC e o híbrido AS1565. Foram avaliados 16 fungicidas, aplicados no estádio V2. No controle preventivo a inoculação de 0,2 mL da suspensão de 7x104 conídios mL-1 foi realizada 48 horas depois da aplicação. No controle curativo a inoculação foi realizada 48 horas antes da aplicação. A severidade da doença foi determinada 21 dias após a inoculação. No controle da expansão da mancha-de-macrospora foram avaliados sete fungicidas aplicados diretamente em folhas de milho AS 1565 com lesões foliares. As lesões foram mensuradas a cada três dias por um período de 27 dias. Em cada lesão também foram quantificados o número de picnídios cm2-1. Houve diferença significativa na severidade entre os híbridos. Não houve efeito significativo dos isolados do fungo sobre a severidade da doença. Não foi encontrado nenhum híbrido resistente. A severidade da doença variou de 8,88% para o híbrido 30A30HX a 17,76% para o AO 1050. Foi constatado que os fungicidas testados foram eficazes na inibição do crescimento do micélio, sendo que a CI50 foi menor que 1 ppm para todos os fungicidas, não havendo diferença entre isolados. Na inibição da germinação de conídios as estrobilurinas apresentaram maior fungitoxicidade, pois a CI50 ficou entre 0,0035 e 0,03 ppm, sendo que o isolado de SC mostrou maior sensibilidade aos fungicidas. Na aplicação preventiva todos os fungicidas diferiram da testemunha, reduzindo em média 85% à severidade da mancha-demacrospora em relação à testemunha. No controle curativo todos os fungicidas diferiram da testemunha, contudo as misturas de triazóis + estrobilurinas mostraram maior eficácia, reduzindo em média 75% a severidade da doença, enquanto que os produtos isolados como as estrobilurinas reduziram 62%, benzimidazóis 55% e triazóis 38%. O fungicida tebuconazole e as misturas de triazóis + estrobilurinas, reduziram em média 68% a expansão da mancha-demacrospora, e 58,7% a formação de picnídio cm2 -1. Foi constatado que apesar de não haver híbridos resistentes existe variabilidade genética entre os híbridos testados e que a aplicação de fungicidas reduz significativamente a severidade da mancha-de-macrospora

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV08MA071.pdf: 1225933 bytes, checksum: cac05331f9f8408e3041c9d8b75dd641 (MD5) Previous issue date: 2008-06-27 / In this work were used 3 isolates of C. gloeosporioides from different apple producer places, and 245 access belong to the Active Germoplasm Banc Apple Tree Estação Experimental da EPAGRI de Caçador, Santa Catarina . Among the tested access, 185 were resistant and 32 susceptible. From those susceptible, there was not difference in the severity degree of the MFG attack. The data obtained in this study can help in the choice of resistant access, what could be used like parentage in the genetic breeding programs of the apple tree, in order to obtain the resistance to this pathogen.The genetic diversity characterization of the access by means of molecular marker studies, has been used like an important tool to maximize the maintenance work of the germoplasm banks. In this way, the objective of this study was characterize genetically the active germoplasm bank of the apple tree making use of 12 primers of SSR. The analysis of genetic diversity was realized through the DNA extraction of the 169 access, using young leafs. The extraction protocol used was the CTAB, and the estimation of the DNA concentration was done in agarose gel 0,8% coloured with bromide ethidium (0,3 μg/ml), with DNA Fago Lambda (20, 50, 100 e 200 ng/μl) like pattern. A total of 197 alleles were encountered, and the medium number of alleles by locus of SSR was 16,4. The medium heterozigosity expectation was 84%, and the revealed polimorphism by number of the alleles by locus had a high percentage (82%). The genetic similarity analysis showed two distinct groups. The gotten results had demonstrated the existence of high genetic variability in the bank of germoplasma of apple trees, salient for the raised number of alelos for I lease and high level of heterozigosidade. This knowledge will contribute with the improvement in the efficiency of the identification of combinations that will serve of base for the genetic improvement of the apple tree / No presente trabalho foram utilizados 245 genótipos pertencentes ao Banco de Germoplasma de macieira BGM, da Epagri / Estação Experimental de Caçador - EECd, SC. Para identificar os genótipos portadores de resistência à mancha foliar de glomerela - MFG, doença essa causada principalmente pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides. Os genótipos foram inoculados com 3 isolados de C. gloeosporioides provenientes de diferentes regiões produtoras de maçã. Entre os genótipos testados, 187 (76,3%) manifestaram resistência e 58 (23,7%) manifestaram suscetibilidade à MFG. Entre as cultivares suscetíveis, não houve diferença no grau de severidade de ataque da MFG. Os resultados obtidos neste estudo têm, dentre outras, a finalidade de subsidiar os programas de melhoramento genético da macieira na seleção de parentais, objetivando a incorporação de resistência genética à MFG nas futuras novas cultivares. Para caracterizar os genótipos do Banco de Germoplasma de macieiras foram utilizados 12 primers de SSR. A análise de diversidade genética foi realizada através da extração do DNA de 169 genótipos, utilizando-se folhas jovens. O método de extração utilizado foi CTAB e a estimativa da concentração de DNA extraído foi feita em gel de agarose 0,8% com brometo de etídeo (0,3 μg/ml), tendo como padrão DNA Fago Lambda (20, 50, 100 e 200 ng/μl). Foi obtido um total de 197 alelos, sendo que o número médio de alelos por loco SSR foi de 16,4. A expectativa média de heterozigosidade foi de 84%, o polimorfismo revelado pelo número de alelos por loco teve uma percentagem alta de 82%. Pela análise de similaridade genética foram observados dois grupos. Os resultados obtidos demonstraram a existência de alta variabilidade genética no banco de germoplasma de macieiras, ressaltado pelo elevado número de alelos por loco e alto nível de heterozigosidade. Esse conhecimento contribuirá com a melhora na eficiência da identificação de combinações que servirão de base para o melhoramento genético da macieira

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-03-23T15:39:15Z No. of bitstreams: 1 Valter Alexandre Vieira da Silva.pdf: 281801 bytes, checksum: 0bb776ffcea4e506c269e4726b3eafa8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T15:39:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Valter Alexandre Vieira da Silva.pdf: 281801 bytes, checksum: 0bb776ffcea4e506c269e4726b3eafa8 (MD5) Previous issue date: 2005-02-23 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / One of the main diseases occurring in melon fields in Brazilian Northeastern is the bacterial fruit blotch caused by the bacterium Acidovorax avenae subsp. citrulli. This study aimed to survey the bacterial fruit blotch incidence in 12 melon planting areas in Juazeiro (BA), in two consecutive plantings, and determine the ability of A. avenae subsp. citrulli to survive epiphytically and endophytically on the leaves and roots, and also in the rhizosphere of melon by using a mutant resistant to rifampicin (Aac1Rif). The surveys were conducted to determine the disease incidence and prevalence in 12 commercial melon areas chosen randomly with plants at harvesting time. In each area 25 sub-plots with 100 m2 were marked and 20 fruits evaluated in a diagonal line. In the first survey performed in January 2004, the prevalence of bacterial blotch was 33.33% and there was low incidence in the four areas where the diseaseoccurred, ranging from 0.2 to 4.4%. In the second survey performed in the same areas in April 2004 the disease was not detected. For the survival study on leaves, melon plants with 18-day, grown in greenhouse and field, were sprayed with mutant suspensions at concentrations 3.4 x 102, 3.4 x 103 and 3.4 x 104 CFU mL-1. To determine survival on roots and rhizosphere, seeds of melon type Yellow were sown in soil infested with suspensions of Aac1Rif at 3.4 x 105, 3.4 x 106 and 3.4 x 107 CFU mL-1. At 6-day intervals samples of leaves, roots and rhizosphere soil were collected and processed for isolation on NYDA medium amended with refampicin. Bacterial populations were then determined as UFC g-1 of sample and the data were transformed to log10 for regression analysis. On melon leaves, in greenhouse and field Aac1Rifsurvived epiphytically for 54 days. These epiphytic bacterial populations increasedinitially and decreased after certain time. The final populations were similar in the two conditions and ranged from 103 to 104 CFU g-1 leaf. On the roots and rhizosphere in greenhouse bacterial populations decreased according to the inoculum concentration and at 60 days after planting ranged from 102 to 103 CFU g-1 roots and 101 to 102 CFU g-1 soil. AacRif was not detected as endophytic in leaves or roots of melon. / Uma das principais doenças que vem ocorrendo em campos de meloeiro do Nordeste brasileiro é a mancha-aquosa, causada pela bactéria Acidovorax avenae subsp. citrulli. Este trabalho teve por objetivos realizar o levantamento epidemiológico da incidência da mancha-aquosa em 12 áreas comerciais de meloeiro em Juazeiro (BA), em dois plantios sucessivos, e determinar a capacidade de sobrevivência de A. avenae subsp. citrulli como epifítica e endofítica nas folhas e raízes, e na rizosfera de meloeiro, através da utilização de um mutante resistente a rifampicina (Aac1Rif). Levantamentos foram conduzidos para determinar a prevalência e a incidência da mancha-aquosa em 12 áreas comerciais de meloeiro, escolhidas ao acaso, com plantas em estádio de colheita. Em cada área foram demarcadas 25 subparcelas de 100 m2 e avaliados 20 frutos/subparcela ao longo da diagonal. No primeiro levantamento, realizado em janeirode 2004, a prevalência da mancha-aquosa foi de 33,33%, com baixa incidência nas quatro áreas em que foi registrada, variando de 0,2 a 4,4%. No segundo levantamento, realizado nas mesmas áreas em abril de 2004, a doença não foi constatada. Para o estudo de sobrevivência em folhas, meloeiros com 18 dias, cultivados em casa de vegetação e no campo, foram pulverizados com suspensões do mutante nas concentrações (3,4 x 102, 3,4 x 103 e 3,4 x 104 UFC mL-1). Para determinar a sobrevivência em raízes e na rizosfera, sementes de melão Amarelo foram semeadas em solo infestado com suspensões de Aac1Rif a 3,4 x 105, 3,4 x 106 e 3,4 x 107 UFC mL-1. A intervalos de seis dias, amostras de folhas, raízes e solo rizosférico foram coletadas e processadas para isolamento em meio ágar nutritivo-extrato de levedura-dextrosecontendo rifampicina. As populações bacterianas foram determinadas em UFC g-1 deamostra e os dados transformados em log10 para análise de regressão. Nas folhas de meloeiro, em casa de vegetação e campo, o mutante Aac1Rif sobreviveu epifiticamente durante 54 dias, observando-se inicialmente aumento da população bacteriana epifítica, com posterior declínio, sendo as populações finais semelhantes nas duas condições estudadas, com valores variando de 103 a 104 UFC g-1 de folha. Nas raízes e rizosfera, em casa de vegetação, a população bacteriana decresceu variando em função da concentração utilizada até atingir aos 60 dias após o plantio, níveis de 102 a 103 UFC g-1 de raiz e 101 a 102 UFC g-1 de solo. AacRif não foi detectado sobrevivendo endofiticamente em folhas ou raízes de meloeiro.

Made available in DSpace on 2015-04-11T13:55:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Francy Mary Sousa.pdf: 1356959 bytes, checksum: a7db48bf3163f386db3bca96f187f815 (MD5) Previous issue date: 2010-11-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Corynespora cassiicola has been related causing damages in several crops of economic importance in Amazonas State, principally Solanaceae and Cucurbitaceae families affecting production by significative form. This study aimed to characterize C. cassiicola isolates through colony morphology, sporulation, mycelial growth and spore dimension on culture media PDA, PSA, OEA and CA. Five mm-diameter disks taken from colonies grown on PDA medium for 15 days were transferred to Petri dishes containing each medium under room temperature and continuous light. The study was installed using randomized block design in a factorial 4 x 5 x 3 (culture media x isolates x hosts) with five replications. The effects of culture media varied to isolates of same host and among different hosts. Mycelial growth was observed in CA. The most spore production was observed in PDA and PSA media. A high variation of aspect and colonies coloration was observed among same host isolates and isolates of different hosts in all culture media. Variation trough spore dimension of C. cassiicola isolates was observed in all culture media tested. / O fungo Corynespora cassiicola já foi relatado causando danos em diversas culturas de interesse comercial no Estado do Amazonas, principalmente das famílias Solanaceae e Cucurbitaceae, afetando de forma significativa a produção. Este estudo teve como objetivo caracterizar isolados de C. cassiicola quanto a morfologia das colônias, esporulação, crescimento micelial e dimensão dos conídios nos meios de cultura BDA, BSA, AvA e CA. Discos de 5mm de diâmetro retirados de colônias crescidas em meio BDA por 15 dias, foram transferidos para o centro de placas de Petri contendo os meios de cultura e mantidas à temperatura ambiente sob luz contínua. O estudo seguiu esquema fatorial 4 x 5 x 3 (meios de cultura x isolados x hospedeiros) com cinco repetições. Os efeitos dos meios de cultura variaram para isolados do mesmo hospedeiro e entre hospedeiros diferentes. Maior crescimento micelial foi observado no meio CA. A maior produção de esporos foi observada nos meios BDA e BSA. Foi verificado uma ampla variação de aspecto e coloração das colônias entre os isolados do mesmo hospedeiro e entre isolados de hospedeiros diferentes em todos os meios de cultura. Também houve variação quanto às dimensões dos conídios dos isolados de C. cassiicola em todos os meios de cultura testados.

A produção brasileira de laranjas destina-se à indústria de suco concentrado, principal produto citrícola, sendo o estado de São Paulo o maior produtor e exportador do país. Devido à diminuição da variabilidade genética causada pela multiplicação de plantas cítricas por enxertia, esta cultura se tornou alvo constante de inúmeras pragas e doenças. Dentre estas doenças que vem causando crescentes prejuízos para a citricultura brasileira destaca-se a pinta preta causada pelo fungo Guignardia citricarpa Kiely. O combate desta doença é feito por inúmeras pulverizações de fungicidas que aumenta significativamente o custo para os produtores. Uma possível alternativa para o combate a este patógeno seria a produção de plantas cítricas resistentes a doença, através de transformação gênica. Mas para isto, é necessário conhecer os mecanismos de respostas de defesa da planta e identificar quais genes podem estar relacionados com a defesa. Na tentativa de elucidar as respostas de defesa deste hospedeiro foram feitas análises anatômicas de frutos de laranja doce (Citrus sinensis Osbeck cv. Pêra) inoculados com o patógeno e análise transcricional de duas bibliotecas de cDNA, uma de albedo de frutos sadios(BAFS) e outra de albedo de frutos inoculados com o patógeno (BAFC). As análises anatômicas mostraram que os danos causados pelo patógeno na planta iniciam-se 24 horas após a inoculação com as lesões das células do epicarpo, e continuam gradativamente até 72 horas apresentando a diminuição na quantidade de amido e acúmulo de compostos fenólicos. Foi obtido 184 ESTs válidas da BAFS e 370 da BAF. A anotação e categorização destas sequencias apresentaram que o perfil transcricional encontrado nas duas bibliotecas foi semelhante, porém, na BAFC, foram encontrados transcritos pertencentes à defesa da planta como a catalase, a glutationa e monooxygenases. Está analise mostrou que a resposta de defesa da planta inicia-se com lesões nas células, que a interação é custo-intensiva (redução da reserva de amido) para o hospedeiro, e que a defesa da planta está relacionada a muitos genes de defesa. / The Brazilian production of oranges is mainly for the industry of concentrated juice, it is the most important citrus product, and the state of São Paulo is the largest producer and exporter of the country. Due to the low genetic variability caused by the multiplication of citrus plants by grafting, this culture became constant target of many pests and diseases. Among all the diseases that lead to elevated damage to the Brazilian citrus plantation, one is very relevant, the Black Spot disease caused by the fungus Guignardia citricarpa Kiely. The control of this disease is done by many sprays of fungicides that significantly increase the production cost to the producers. A possible alternative to control this pathogen is the development of resistant citrus plants to disease through genetic transformation. To that, it is necessary to understand the mechanisms of plant defense response and identify the genes related to the defense. In an attempt to elucidate the responses of this host both,anatomical analysis of sweet orange fruits (Citrus sinensis Osbeck cv. Pêra) inoculated with the pathogen and transcriptional analysis of two cDNA libraries of albedo section were done. One was from health fruits (BAFS) and another from albedo of fruits inoculated with the pathogen (BAFC). The analysis showed that the anatomical damage caused by the pathogen in the plant shall begin 24 hours after inoculation showing lesions on epicarp cells, and continue gradually until 72 hours also showing a decrease in the amount of starch and accumulation of phenolic compounds. It was obtained 184 valid ESTs of the BAFS and 370 from BAFC. The annotation and categorization of these sequences showed that the transcriptional profile in the two libraries were similar, however, in BAFC, were found transcripts belonging to plant defense such as catalase, the glutathione and monooxygenases. These analyses showed that the plant defense response begins with lesions in the cells, being it cost-intensive interaction for the host, (with reduction of starch reserves) and the plant defense to resistance is related to many genes.

A mancha preta dos citros (MPC), causada por Phyllosticta citricarpa, é uma doença de importância econômica devido à redução na produtividade ocasionada pela queda prematura dos frutos e ao aumento dos custos da produção devido ao uso intensivo de fungicidas. As lesões restringem-se praticamente ao flavedo dos frutos, depreciando-os para a comercialização e restringindo a exportação de frutas in natura. A MPC causa danos em todas as espécies cítricas de valor comercial, com exceção da Citrus aurantium (laranja azeda) e do Citrus latifólia (lima ácida Tahiti). Phyllosticta citricarpa causa infecções latentes e diferentes tipos de sintomas nos frutos. Essas características podem estar relacionadas com o estádio fenológico do fruto no momento da infecção. Os objetivos desse trabalho foram avaliar a influência da idade dos frutos de laranja doce na germinação dos conídios e no período de incubação de P. citricarpa e identificar compostos fenólicos pré ou pós-formados no flavedo de frutos de laranja doce inoculados com P. citricarpa. Frutos de laranjeira das variedades Hamlin, Valência e Pêra com 1,5, 3,0, 5,0 e 7,0 cm de diâmetros foram inoculados com suspensão de conídios de P. citricarpa na concentração de 103 e 105 conídios.mL-1 e avaliados mensalmente. O primeiro sintoma observado foi o da falsa melanose e não foram observadas diferenças no período de incubação entre as variedades. O período de incubação da falsa melanose foi afetado pela concentração de inóculo e pelo diâmetro dos frutos. Frutos de 1,5 e 3,0 cm de diâmetro inoculados com suspensão de conídios de P. citricarpa, na concentração de 103 conídios.mL-1, apresentaram sintomas entre 70 e 116 dias respectivamente, enquanto que os frutos de 1,5, 3,0 e 5,0 cm de diâmetro, inoculados com suspensão de 105 conídios.mL-1, expressaram sintomas entre 40, 65 e 156 dias respectivamente. A expressão dos sintomas de mancha dura não diferiu entre as concentrações de inóculo, mas diferiu entre os diâmetros e entre as variedades avaliadas. A variedade Valência apresentou os menores tempos para o aparecimento dos sintomas quando comparado com as variedades Hamlin e Pêra. Os tempos médios para a expressão da mancha dura nos frutos (todas as variedades) inoculados com 1,5, 3,0, 5,0 e 7,0 cm de diâmetro foram 240, 217, 176 e 197 dias respectivamente. Sintomas de falsa melanose e mancha dura se expressaram independente um do outro. Não foi observado diferenças nas quantidades dos compostos fenólicos entre os frutos inoculados e não inoculados após 48 h de câmara úmida. As maiores quantidades de compostos fenólicos foram encontradas nos frutos menores e à medida que estes aumentaram de tamanho, observou-se a diminuição nas quantidades destes compostos. Não foram observadas diferenças no padrão de germinação do fungo em relação aos diferentes diâmetros inoculados, porém foram observadas placas de cera na superfície dos frutos de 7,0 cm de diâmetro. Os sintomas de falsa melanose parecem estar relacionados com a defesa da planta, e os sintomas de mancha dura estão relacionados com o estádio fenológico dos frutos. / Citrus black spot (CBS), caused by Phyllosticta citricarpa, is a disease of economic importance due to the reduction in yield, caused by premature fruit drop, and high production costs, due to the intensive fungicide spraying. The lesions are restricted to the fruit flavedo, decreasing market prices and restricting exports of fresh fruits. CBS causes damage in all commercial citrus species with exception of Citrus aurantium (sour orange) and Citrus latifolia (Tahiti acid lime). Phyllosticta citricarpa causes latent infections and different types of symptoms on fruit. These characteristics may be related to the phenological stage of the fruit at the time of infection. The objectives of this study were to evaluate the influence of fruit age of sweet orange on conidia germination and on the incubation period of P. citricarpa and identify phenolics pre or post-formed in the flavedo of sweet orange inoculated with P. citricarpa. Orange fruits of varieties Hamlin, Valencia and Pera with 1.5, 3.0, 5.0 and 7.0 cm of diameters were inoculated with a conidia suspension of P. citricarpa at the concentration of 103 and 105 conidia.mL-1 and were evaluated monthly. The first symptom observed was false melanose and no differences were found in the incubation period among the varieties. The incubation period of false melanose was affected by the inoculum concentration and fruit diameters. Fruits with 1.5 and 3.0 cm of diameter inoculated with a conidia suspension of P. citricarpa, at a concentration of 103 conidia.mL-1, showed symptoms between 70 and 116 days, respectively. On the other hand, fruits with 1.5, 3.0 and 5.0 cm in diameter, inoculated with suspension of 105 conidia.mL-1, expressed symptoms between 40, 65 and 156 days, respectively. The period for symptom expression of hard spot did not differ between inoculum concentrations. The incubation period differed between the diameters and varieties evaluated. The Valencia variety presented symptoms in a shorter time than Hamlin and Pera. The average times for hard spot expression in fruits (all varieties together) inoculated with 1.5, 3.0, 5.0 and 7.0 cm of diameter were 240, 217, 176 and 197 days, respectively. Symptoms of false melanose and hard spot were expressed independently from each other. No differences were observed in the amounts of phenolic compounds between inoculated and non-inoculated fruits after 48 h of incubation in a humid chamber. The highest amounts of phenolic compounds were found in smaller fruits and, as fruits increased size, there was a decrease in the amounts of these compounds. No differences were found in the germination pattern of fungus on the inoculated fruits, but wax plates were observed on the surface of fruits with 7.0 cm in diameter. Symptoms of false melanose seem to be related to the plant defense mechanism, and symptoms of hard spot appeared to be related with phenological stages of the fruits.