Imagem por ressonância magnética tem sido um dos principais métodos para a aquisição de imagens para diagnósticos na medicina, em especial para a obtenção de medidas do cérebro. Apesar de se mostrar muito eficiente, o método atualmente utilizado para a realização da ressonância em hospitais e centros de diagnósticos, em alguns casos, necessita da aplicação de um contraste de gadolínio intravenoso. Essa injeção do contraste pode mostrar-se um tanto quanto invasivo, podendo em alguns casos resultar em algumas reações indesejadas nos pacientes. Em vista disso, um método que tem sido bastante estudado recentemente e muito promissor é o de Arterial Spin Labeling (ASL). Este método tem como sua principal vantagem o fato de não ser invasivo e de possibilitar a quantificação da perfusão sanguínea cerebral (CBF). No presente trabalho, foi feita uma otimização do contraste na aquisição das fases mais tardias da metodologia de ASL em múltiplas fases. Isso foi feito através de uma modulação do angulo de flip e é particularmente importante para a análise das imagens de pacientes com problemas neurovasculares, principalmente aqueles associados ao retardo nos tempos de trânsito do sangue arterial. Também, foi realizada toda a obtenção e processamento de dados para a avaliação da perfusão sanguínea cerebral utilizando o método proposto. / Magnetic resonance imaging has been one of the major methods to acquire images for medical diagnoses, specially, for obtaining brain images. Although the major method using magnetic resonance used today has high efficiency, in some cases it needs an injection of intravascular contrast agent, like gadolinium. This contrast agent application can be a lot invasive for the patient, in extremes cases resulting to allergic reactions the patient. Therefore, a method that has been studied recently and is very promising is the Arterial Spin Labeling (ASL). This method has the major advantage the feature that it is completely non invasive for the patient and it allows to quantify the perfusion value. In this work, it was implemented an optimization of the contrast in the late phases of ASL multiphase acquisition. It was made using a modulation of the flip angle and it is critical to analyze images from patients with some neurovascular disease, especially those associated with arterial blood transit time delay. Besides that, it was made all data acquisition and data processing for the brain perfusion evaluation using the proposed method.

Au cours des dernières années, de nombreux progrès ont été réalisés dans le domaine de la chimie du fluor. Diverses équipes ont contribué au développement de nouvelles méthodologies ainsi qu'à la mise au point de réactifs de fluoration trouvant de larges applications au sein de la communauté scientifique. Au cours de ces travaux, nous nous sommes intéressés à l'association du fluor à des hétéroatomes. Cet intérêt s'explique par les propriétés de ces groupements. En effet, ils permettent ainsi d'augmenter la lipophilie des molécules sur lesquelles ils sont introduits, en particulier le motif SCF3. Durant les dernières années, nous avons développé trois réactifs de trifluorométhylthiolation stables qui ont pu être par la suite utilisé en synthèse aussi bien par notre groupe que par d'autres équipes.A partir de ces résultats, nous avons récemment étendu cette thématique vers le développement de réactifs de fluoroalkylthiolation en conditions électrophiles. Ainsi, deux réactifs portant le motif SCF2FG (FG=groupe fonctionnel) ont été développés et utilisés avec succès dans diverses réactions. Aux vues de ces résultats, ces réactifs permettent l'accès à de nouvelles molécules fluoroalkylthiolées fonctionnalisées ; mais également à leur post-transformation.Nous avons également étudié l'association du fluor avec un autre élément de la famille des chalcogènes ; le sélénium. Les composés fluoroalkylséléniés sont moins étudiés que leurs analogues soufrés. Dans ces travaux, nous reportons une nouvelle stratégie monotopique pour accéder à diverses molécules trifluorométhylséléniés via la formation in situ de l'intermédiaire CF3SeCl à partir d'un pré-réactif facile à manipuler, le trifluorométhylséléniure de benzyle. Des analogues et homologues de ce pré-réactif ont été synthétisés et utilisés pour conduire à des composés SeCF2R. Certains des produits synthétisés ont été employés comme réactifs de départ dans des réactions nucléophiles de radiomarquage au fluor-18. Ainsi, nous avons pu accéder pour la première fois à des molécules comportant le groupement (18F)F3CSe offrant la possibilité d'utiliser le sélénium dans des molécules marquées au fluor-18 / During the last years a lot of progress has been done in the fluorine field. Various groups contributed by developing methodologies or fluorinated reagents that find a wide use nowadays within the scientific community. Among them, we were concentrated in exploiting the association of fluorine with heteroatoms. Such an interest is totally comprehensible considering the changes that fluorine is able to organic compounds. Fluorine is well known for increasing the lipophilicity of the compounds bearing it and one of the most lipophilic motifs is the SCF3 motif. During the last years we have developed three bench-stable trifluoromethylthiolating reagents that were used in synthetic chemistry from us and other groups as well. Starting from the results obtained in this field, recently we expanded our interest towards the development of reagents that act as fluoroalkylthiolating compounds in electrophilic reactions. Thus, two reagents bearing a SCF2FG (FG= functional group) motif were developed and successfully used in SEAr reactions. Thus, such reagents not only opened the way to access various new fluoroalkylthiolated molecules, but also the obtained compounds could be post-functionalized.In this dissertation we also studied the association of fluorine with another chalcogen, Selenium. Fluoroalkylselenolated compounds are less studied respect to the thiolated analogs. Herein, we report a new one-pot strategy to access various trifluoromethylsalenolated compounds through in situ formation of F3CSeCl starting from the easy-to-handle pre-reagent trifluoromethyl benzyl selenide. Also analogs and homologs of the reagent were synthesized and successfully used in reactions leading RCF2Se-addcuts. Some of the synthesized adducts were also used as starting materials innucleophilic 18F-labeling reactions. Thus we accessed for the first time [18F]F3CSe molecules opening the way to selenium in 18F radiolabeling

Diss. (sammanfattning)--Göteborg : University, 2002. / Härtill 4 uppsatser.

Imagem por ressonância magnética tem sido um dos principais métodos para a aquisição de imagens para diagnósticos na medicina, em especial para a obtenção de medidas do cérebro. Apesar de se mostrar muito eficiente, o método atualmente utilizado para a realização da ressonância em hospitais e centros de diagnósticos, em alguns casos, necessita da aplicação de um contraste de gadolínio intravenoso. Essa injeção do contraste pode mostrar-se um tanto quanto invasivo, podendo em alguns casos resultar em algumas reações indesejadas nos pacientes. Em vista disso, um método que tem sido bastante estudado recentemente e muito promissor é o de Arterial Spin Labeling (ASL). Este método tem como sua principal vantagem o fato de não ser invasivo e de possibilitar a quantificação da perfusão sanguínea cerebral (CBF). No presente trabalho, foi feita uma otimização do contraste na aquisição das fases mais tardias da metodologia de ASL em múltiplas fases. Isso foi feito através de uma modulação do angulo de flip e é particularmente importante para a análise das imagens de pacientes com problemas neurovasculares, principalmente aqueles associados ao retardo nos tempos de trânsito do sangue arterial. Também, foi realizada toda a obtenção e processamento de dados para a avaliação da perfusão sanguínea cerebral utilizando o método proposto. / Magnetic resonance imaging has been one of the major methods to acquire images for medical diagnoses, specially, for obtaining brain images. Although the major method using magnetic resonance used today has high efficiency, in some cases it needs an injection of intravascular contrast agent, like gadolinium. This contrast agent application can be a lot invasive for the patient, in extremes cases resulting to allergic reactions the patient. Therefore, a method that has been studied recently and is very promising is the Arterial Spin Labeling (ASL). This method has the major advantage the feature that it is completely non invasive for the patient and it allows to quantify the perfusion value. In this work, it was implemented an optimization of the contrast in the late phases of ASL multiphase acquisition. It was made using a modulation of the flip angle and it is critical to analyze images from patients with some neurovascular disease, especially those associated with arterial blood transit time delay. Besides that, it was made all data acquisition and data processing for the brain perfusion evaluation using the proposed method.

Denna studie utforskar återanpassningsprocessen och upplevelsen av stämpling bland före detta fängelsedömda individer i Sverige, med fokus på hur dessa erfarenheter påverkar deras återinträde i samhället. Genom kvalitativ analys av intervjuer från podcasten ”Utanför Murarna”, som innehåller intervjuer med före detta fängelsedömda, visar studien hur stämplingsteorin tar sig uttryck i deras vardagsliv. Studien belyser svårigheterna med att hitta boende och arbete som före detta fängelsedömd, samtidigt som den tar upp den dubbla stämpling som är relaterad till diagnoser som adhd och utmaningar som fängelsedömda mammor möter. Metodologiskt bygger studien på kvalitativ innehållsanalys av transkriberade podcastintervjuer, där fokus ligger på återanpassningsstrategier och påverkan av samhällelig stämpling. Resultaten pekar på strategier som ärlighet och undvikande, samt betydelsen av stöd från familj, vänner och rehabiliteringsprogram. Studien understryker behovet av en mer inkluderande och förstående samhällssyn gentemot före detta fängelsedömda för att understödja en effektiv återanpassning. Slutsatserna betonar vikten av att riktade stödinsatser och individanpassade program tillämpas för att adressera de specifika behov och utmaningar som före detta fängelsedömda individer möter. / This study explores the reintegration challenges that former prison inmates in Sweden face, especially caused by societal labeling through the lens of labeling theory. Using qualitative analysis, this study explores podcast interviews with former prison inmates, revealing their perceptions and experiences of reintegration. Previous research highlights the difficulties of finding housing and employment as an ex-convict, while addressing the double stigmatization as a consequence of labeling for diagnoses such as adhd and challenges faced by formerly incarcerated mothers. Accordingly, the findings of this study highlight the complexities of societal reentry, where former prison inmates struggle with societal labeling, employment, and housing issues. Strategies used by former prison inmates, such as honesty, avoidance, and earning their place in society, are examined. Additionally, the positive influence of support systems like family, housing assistance, and rehabilitation programs is highlighted. The study contributes to understanding the reintegration process, suggesting implications for policy development and interventions in criminal justice and social services. The findings also indicate areas for further research, particularly around societal labeling and effective reintegration practices.

The purpose of this research is to advance development of a photochemical tool designed to probe the role of ionotropic glutamate receptor signaling in neurodegenerative processes, and to delve more deeply into the biological processes underlying the role of these receptors in signaling and memory formation. This ligand-targeted nanoprobe was designed and developed in our lab to label endogenous calcium-permeable AMPARs (CP-AMPARs) in live cells with minimal disruption to native receptor activity. Nanoprobe is designed to use naphthyl acetyl spermine (NASPM) as a photocleavable ligand to target and covalently label native CP-AMPARs with a non-perturbing, fluorescent marker that then allows observation of these receptors using standard epifluorescence microscopy. My contribution to this work, outlined in the aims below, is the characterization of nanoprobe using electrophysiology and fluorescent imaging to evaluate its effectiveness as an endogenous CP-AMPAR label on live neurons. Aim 1: To use whole cell patch clamp electrophysiology to test the labeling of CP-AMPARs with nanoprobe by recording changes in glutamate-evoked current through heterologously expressed GluA1-L497Y homomultimers during, pre- and post- nanoprobe labeling. Aim 2: To use fluorescent imaging to evaluate nanoprobe labeling of glutamate receptors endogenously expressed in hippocampal neurons by co-labeling nanoprobe-treated neurons with traditional antibodies to AMPAR and synaptic targets. Aim 3: To use nanoprobe to detect endogenously expressed CP-AMPARs on live neurons during the course of neuron development. Live neuronal cultures will be imaged before and after labeling with nanoprobe in young dissociated cultures (DIV 1-2) and in maturing cultures (DIV 14-17). Conclusions: Whole cell patch clamp electrophysiology results provide evidence that nanoprobe will label CP-AMPARs in a minimally-perturbing fashion that allows the receptors to resume normal activity after photolytic-release of ligand as designed. Fixed cell imaging of CP-AMPAR nanoprobe labeling was largely ineffective, and live cell imaging was not conclusive, but provided supporting evidence that nanoprobe targets and labels NASPM-sensitive endogenous glutamate receptors on live dissociated hippocampal neurons

Mikrobielle Hotspots zeichnen sich durch erhöhte mikrobielle Biomasse und Aktivität im Vergleich zum Gesamtboden aus. Sie umfassen nur einen sehr kleinen Teil des Bodenvolumens, indem jedoch die meisten für Stoffkreisläufe relevanten mikrobiellen biogeochemischen Prozesse ablaufen. In mikrobielle Hotspots sind Prozessraten erhöht, wie beispielsweise verkürzte Umsatzzeiten der organischen Substanz und eine erhöhte Nährstoffmobilisierung im Vergleich zum Gesamtboden. Eine verbesserte Verfügbarkeit von niedermolekularen organischen Substanzen im Vergleich zum Gesamtboden stimuliert das Wachstum und die Aktivität von Bodenmikroorganismen. Mikrobielle Hotspots entstehen in Bodenkompartimenten, die durch Rhizodeposition, den Eintrag von Wurzelstreu, den Eintrag von nährstoffreichem Material von der Bodenfauna und die Auswaschung von organischen Verbindungen aus dem Oberboden einen erhöhten Substrateintrag aufweisen. Im Boden stellen die Rhizosphäre sowie Bioporen wichtige mikrobielle Hotspots dar. Speziell im nährstoffarmen Unterboden sind mikrobielle Hotspots wichtig, da die Nährstoffe in den Hotspots im Vergleich zum Gesamtboden für Pflanzen besser verfügbar sind. Im Rahmen dieser Dissertation wurden 1) mikrobielle Hotspots anhand molekularer Proxies unterschieden; und 2) das Potential von Vorfrüchten mit Pfahlwurzelsystem zur Ausbildung und Aufrechterhaltung von mikrobiellen Hotspots im Unterboden untersucht; darüber hinaus wurde 3) die mikrobielle Umsetzung des wurzelbürtigen Kohlenstoffs entlag eines Teifengradienten bis in 105 cm Tiefe bestimmt; und 4) die räumliche Ausdehnung der mikrobiellen Hotspots im Ober- und Unterboden anhand der Verteilung und anhand des Umsatzes von wurzelbürtigem Kohlenstoff, sowie anhand von sich ausbildenden pH, Sauerstoff- und Redoxpotentialgradienten von der Wurzeloberfläche in den Gesamtboden bestimmt. Im Rahmen eines Feldexperimentes wurde Luzerne (Medicago sativa L.) zwei Jahre lang auf einem Haplic Luvisol angebaut. Drilsophäre, Rhizosphäre und der Gesamtboden wurden in 15 cm Intervallen bis in eine Tiefe von 105 cm beprobt, um mikrobielle Hotspots anhand von molekularen Proxies zur unterscheiden. Die Proben wurden auf ihre Gehalte an freien extrahierbaren Fettsäuren untersucht. Dafür wurden aus dem Gesamtlipidextrakt die Fettsäuren durch Festphasenextraktion abgetrennt. Die Differenzierung des organischen Materials aus der Drilosphäre, der Rhizosphäre und dem Gesamtboden wurde mittels einer linearen Diskriminanzanalyse durchgeführt. Desweiteren wurde auf der Versuchsfläche neben Luzerne auch Wegwarte (Cichorium intybus L.) angebaut. Um den Kohlenstoffeintrag von Luzerne und Wegwarte in den Boden entlag eines Tiefengradientens zu vergleichen, wurden je drei Luzerne und drei Wegwarteparzellen nach 110 Tage Wachstum in situ mittels 13CO2 pulsmarkiert. Die Verteilung des assimilierten 13C in Spross, Wurzeln und Bodenkohlenstoffpools sowie die Bestimmungen der jeweiligen Kohlenstoffpoolgrößen ermöglichte es, den Kohlenstoffeintrag bis in eine Bodentiefe von 105 cm zu quantifizieren. In einer Laborstudie wurde die räumliche Ausdehnung mikrobieller Hotspots untersucht. Zu diesem Zweck wurde Luzerne in T-förmigen Gefäßen mit drei Kompartimenten zwei Monate lang kultiviert. Die Gefäße waren entweder mit Ober- oder Unterboden gefüllt. Die Wurzeln konnten nur im mittleren Teil der Gefäße wachsen, da eine Nylongaze sie daran hinderte in die seitlichen Rhizosphärenkompartimente vorzudringen. Unterschiedliche Maschenweiten der Gaze verhinderten entweder nur das Wurzelwachstum oder sowohl das Wurzelwachstum als auch das Eindringen der Hyphen von arbuskulären Mykorrhizapilzen in die Rhizosphärenkompartimente. Die Dynamik und Verteilung von wurzelbürtigem Kohlenstoff in der Rhizosphäre, wurde durch die Markierung der Luzerne mit 14CO2 und anschließende Messung der 14C-Aktivität im gelösten organischen Kohlenstoff und im gesamten organischen Kohlenstoff ermittelt. Um Unterschiede im mikrobiellen Abbau der abgegebenen Substanzen in der Ober- und Unterbodenrhizosphäre zu bestimmen, wurden die Aktivitäten extrazellulärer Enzyme gemessen. Zur Messung von Sauerstoff- und Redoxpotentialgradienten bei unterschiedlichem Matrixpotenzial in der Ober- und Unterbodenrhizosphäre wurden ein Sauerstoffmikrosensor und Platinelektroden verwendet. Während die relativen Gehalte an ungesättigten Fettsäuren von Drilosphäre, über Rhizosphäre bis zum Gesamtboden abnahmen, verhielten sich die Dicarbonfettsäuren genau umgekehrt. Da diese Unterschiede unabhängig von der Bodentiefe waren, konnten diese Proxies zur Unterscheidung der Herkunft des organischen Materials verwendet werden. Mittels einer linearen Diskriminanzanalyse konnte so das organsiche Material mikrobieller Hotspots von dem des Gesamtbodens durch eine lineare Kombination der relativen Gehalte an ungesättigten Fettsäuren und Dicarbonsäuren unterschieden werden. Die unterschiedlichen Quellen des organischen Materials und dessen intensive mikrobielle Überformung veranschaulichen die Komplexität der Prozessse, die zur Entstehung von mikrobiellen Hotspots beitragen. Um diese Prozesse zu untersuchen, wurde das Potential von Vorfrüchten mit Pfahlwurzelsystem zur Ausbildung und Aufrechterhaltung mikrobieller Hotspots im Unterboden analysiert. Dafür wurde der Kohlenstoffeintrag über die Wurzelbiomasse und durch Rhizodeposition sowie die mikrobielle Aufnahme bis in eine Tiefe von 105 cm quantifiziert. Die Ergebnisse zeigten, dass die Ausbildung mikrobieller Hotspots im Unterboden während der ersten Vegetationsperiode durch Luzerne stärker ist als durch Wegwarte. Die Gründe hierfür waren: 1) Ein höherer Biomassezuwachs von Luzerne und 2) eine 8 fach höherere Verlagerung des assimilierten Kohlenstoffs in das Wurzelwachstum sowie in Rhizodeposite im Unterboden durch Luzerne. Unter Luzerne wurde durch den erhöhten Eintrag von leichtverfügbarem Kohlenstoff das mikrobielle Wachstum und der Umsatz an mikrobiellem C im Unterboden erhöht. Dies weist auf höhere Nährstoffumsatzraten und damit auf deren höhere Pflanzenverfügbarkeit hin. Das könnte zu einer verbesserten Nährstoffversorgung der Hauptfrüchte beitragen, wenn deren Wurzeln durch die ehemaligen Luzernewurzelporen im Unterboden wachsen. Im Gegensatz zur Luzerne bildete die Wegwarte den größten Teil ihrer Wurzelbiomasse im Oberboden aus wohin sie auch den größten Teil ihrer Rhizodeposite exsudierte. Aus diesem Grund ist die Wegwarte zumindest in der ersten Vegetationsperiode nicht als Vorfrucht zu empfehlen, um die Nährstoffverfügbarkeit im Unterboden zu verbessern. Um die Relevanz von mikrobiellen Hotspots für Nährstoffkreisläufe besser zu verstehen, ist es notwendig die Ausdehnung des Bodenvolumens mit erhöhten Prozessraten und die Gradienten mit denen diese Prozessraten zum Gesamtboden hin abnehmen zu untersuchen. Dies ermöglichte das oben beschriebene Experiment, bei dem Luzerne in den kompartimentierten Wachstumsgefäßen angezogen wurde. Hierbei zeigte sich, dass die Wurzelexsudation in die Oberbodenrhizosphäre verglichen mit der Exsudation in die Unterbodenrhizosphäre deutlich höher war. Allerdings waren die Gradienten der 14C markierten Wurzelexsudate im gelösten organischen Kohlenstoff von der Wurzeloberfläche in Richtung Gesamtboden steiler als im Unterboden. Da zusätzlich zu dem erhöhten Eintrag und den steileren Gradienten auch die Enzymaktivitäten im Oberboden höher waren, kann von einem erhöhtem mikrobiellem Abbau der Wurzelexsudate im Vergleich zur Unterbodenrhizosphäre ausgegeangen werden. Obwohl erwartet wurde, dass erhöhter mikrobieller Abbau zu einer geringeren diffusiven Ausdehnung der Wurzelexsudate in der Oberbodenrhizosphäre führen würde, war dies nicht der Fall. Sowohl in der Oberboden- als auch in der Unterbodenrhizosphäre wurde 14C aus Exsudaten bis in eine Entfernung von 28 mm im DOC und 20 mm im TOC zur Wurzeloberfläche nachgewiesen. Die Sauerstoffkonzentration nahm in Richtung zur Wurzeloberfläche ab, wobei der Gradient in Ober- und Unterbodenrhizosphäre identisch war. Ein Rhizosphäreneffekt auf die Sauerstoffkonzentration konnte bis in 20 mm Entfernung zur Wurzeloberfläche gemessen werden. Das Matrixpotenzial war ausschlaggebend für die diffusive Nachlieferung von Sauerstoff, und damit für die Aufrechterhaltung der aeroben Respiration in der Rhizosphäre. Bei einem Matrixpotenzial von -200 hPa oder weniger fand keine Hemmung der Respirationsprozesse durch mangelnde O2 Nachlieferung zur Wurzeloberfläche statt. Die auf der Sauerstoffkonzentration beruhenden Veränderungen des Redoxpotentials konnten bis in eine Entfernung von 2 mm zur Wurzeloberfläche erfasst werden. Nur unter ständiger Wassersättigung wurden in der Rhizosphäre schwach reduzierende Bedingungen erreicht. Im Rahmen dieses Dissertation konnte gezeigt werden, dass mikrobielle Hotspots im Boden eine größere laterale Ausdehnung erreichen als bislang angenommen. Darüber hinaus konnte gezeigt werden, dass diese Hotspots eine Schlüsselfunktion bei der Erhöhung von Kohlenstoff- und Nährstoffumsätzen besitzen. Daher empfiehlt sich der Anbau von tiefwurzelnden Vorfrüchten mit ausgeprägter C-Verlagerung in den Unterboden, wie beispielsweise Luzerne, um die Nährstoffverfügbarkeit aus dem Unterboden in Agrarökosystemen zu verbessern.

A novel non-invasive imaging method of unique k-space trajectory named “3D center-out EPI with cylindrical encoding” was developed and implemented for fast imaging of the human brain. The method based on a variant of 3D hybrid EPI combines advantages of the Cartesian and the radial encoding to achieve ultra-short echo time independent of spatial resolution and reasonably short echo train length yielding a quality image of high signal-to-noise ratio. Unlike rectilinear sampling, the method offers not only less motion and flow artifacts but enables also the undersampling capability. As a result, the method improves temporal resolution by shortening the measurement time. Nonetheless, artifacts induced from long-term drifts of the magnetic field as well as geometrical distortions caused by B0 inhomogeneity were removed with the average phase of the k-space center lines and an additional field map scan. Compared to other cylindrical k-space trajectories based on echo-planar imaging, which lead to progressively increasing echo time upon increasing the spatial resolution, the proposed method offers more benefits. As a significant application, imaging readout of the novel technique was applied to true 3D cine imaging which was later used in the combination of pseudo-continuous arterial spin labeling module in order to track a short arterial spin labeling (ASL) bolus of well-defined length along the fast passage through the large vessel compartment of the brain. Parametric maps of ASL signal change, estimated time-to-peak and ASL bolus width were extracted in order to characterize the macrovascular compartments of the brain-feeding arteries. Consequently, bolus dispersion within a single arterial branch was also assessed.

Nicht-codierende RNAs sind ein bedeutender Bestandteil genregulatorischer Prozesse. Ihre Fehlregulierung wird mit zellulärer Dysfunktion und der Entstehung von Krankheiten in Zusammenhang gebracht. Ziel dieser Arbeit war die Entwicklung verschiedener Testsysteme zur Untersuchung nicht codierender RNAs mit dem Schwerpunkt microRNA (miRNA), precursor miRNA (pre-miRNA) und circular RNA (circRNA). Für eine Zyklisierung und Funktionalisierung von circRNA mittels Cu-katalysierter Click-Chemie zur Identifizierung zellulärer Interaktionspartner und zugehöriger Wirkmechanismen wurden die Termini linearer RNA-Template modifiziert. Mit Hilfe enzymatischer Techniken wie Transkription und Ligation konnte in vitro die Inkorporation Azid- und Alkin-funktionalisierter Nukleotid-Bausteine am 5‘- und 3‘-Terminus gezeigt werden. Zur Untersuchung der miRNA-Reifung in cellulo wurde die pre-miRNA-134 unter Verwendung chemo-enzymatischer Methoden mit einem Fluorophor/Quencher-Paar an den Termini ausgestattet. Durch intrazelluläre Reifung der gelabelten pre-miRNA mit einhergehender Fluoreszenzfreisetzung sollte die Visualisierung und damit die Lokalisierung des miRNA-Reifungsortes innerhalb von Neuronen realisiert werden. Zudem gelang die Entwicklung eines auf branched rolling-circle amplification (BRCA) basierenden Argonaute2(Ago2)-vermittelten Spaltungsassays. Ein Enzymkomplex aus rekombinantem, humanem Ago2 und der miRNA miR 122, genannt minimal RISC, wurde dabei zur Substrat-Spaltung eingesetzt. Zur Etablierung des BRCA-basierenden Ago2-vermittelten Spaltungsassays als Screening-Tool für die Identifizierung potentieller Inhibitoren der mRNA-Spaltung wurden exemplarisch sechs Testsubstanzen aus der Gruppe der Aminoglykoside untersucht. Der BRCA-basierende Ago2-vermittelte Spaltungsassay stellte eine einfache und zuverlässige Detektionsmethode dar, der die Untersuchung einer größeren Probenzahl mit geringem Aufwand und ohne Verwendung von fluorogen gelabeltem Substrat ermöglichte. / Non-coding RNAs are an important factor in gene regulation in which their deregulation is associated with cellular dysfunction and disease. Here, the development of different test systems for the investigation of non-coding RNAs, namely microRNA (miRNA), precursor miRNA (pre-miRNA), and circular RNA (circRNA), was on focus. In order to circularize and functionalize circRNA with the purpose of identifying cellular interaction partners and possible mechanisms of action, 5‘- and 3‘-terminal modifications were added to a linear RNA template. This was accomplished by using azide- and alkyne-functionalized nucleotides which were incorporated by enzymatic approaches like transcription and ligation to be followed by Cu-catalyzed click chemistry for circularization. For investigating miRNA maturation in neuronal cells, pre-miR-134 was modified by chemo-enzymatic approach with fluorophore and quencher at its 5‘ and 3‘ ends, respectively. Intracellular maturation of labeled pre-miRNA would produce a fluorescent signal upon cleavage, thus enabling visualization and localization of miRNA maturation in neuronal cells. Furthermore, the development of Ago2-mediated mRNA cleavage assay based on branched rolling-circle amplification (BRCA) was accomplished. A complex of recombinant human Ago2 and miRNA miR-122, called minimal RISC, was used for substrate cleavage. To establish this assay as adequate screening method for identifying potential inhibitors of mRNA cleavage, a group of six aminoglycosides was tested. The BRCA-based Ago2-mediated cleavage assay showed to be a simple and reliable detection method and screening tool for small molecule binders with little effort and without fluorescent labeling of substrate.

本研究探討深思的可能性模型（Elaboration Likelihood Model）在設計推廣使用營養標籤的廣告中的適用性。香港的一所中學的169位學生參與了一個2 x 2 x 3（健康意識：高vs. 低 x 論據：數據 vs. 經驗 x 代言人：專家vs. 名人 vs. 普通人）的實驗。 部分假設得到支持。 健康意識的主效果明顯。 具有較高健康意識的青少年更易被廣告說服。 健康意識和代言人具有交叉效應。對於健康意識較高的人來說，營養師更有說服力， 而對於健康意識較低的人來說，名人更有影響力。論據和代言人的搭配影響了資訊的處理路徑。如果以數據為主的論據是由普通人提供的，則更易推動青少年使用營養標籤。而如果以個人經驗為主的論據是由名人提供的，則更有效。統計結果將在深思的可能性模型下得以展開討論。 本文還會對開展針對青少年的公共健康傳播運動提出建議。 / This study tested the utility of the Elaboration Likelihood Model in creating effective Public Service Announcements (PSAs) of nutrition label use. Students (N=169) from a secondary school in Hong Kong participated in a 2x2x3 (Health consciousness: High vs. Low x Argument: Informational vs. Testimonial x Source: Expert vs. Celebrity vs. Ordinary Person) factorial design experiment. Hypotheses were partially supported. Main effect was located for health consciousness. Adolescents with high health consciousness were more persuaded by the PSAs. There was an interaction effect between health consciousness and source. A dietitian as the source was most persuasive to people with high health consciousness, while low health conscious people were most influenced by a celebrity. The information processing route was biased by the match of argument and source. Informative argument made by an ordinary person was more likely to motivate adolescents to use nutrition label, while testimonial argument made by a celebrity was the most effective. The findings are discussed in light of ELM and match-up hypotheses. Recommendations are also offered for public health communication campaigns. / Detailed summary in vernacular field only. / Dong, Zhuowen. / Thesis (M.Phil.)--Chinese University of Hong Kong, 2013. / Includes bibliographical references (leaves 72-84). / Abstracts also in Chinese; appendixes in Chinese. / Abstract --- p.i / Acknowledgements --- p.iii / Table of Content --- p.vi / Chapter Chapter 1: --- Introduction --- p.1 / Publicity Campaign of Nutrition Labelling Scheme in Hong Kong --- p.1 / Adolescent and Nutrition Label (NL) --- p.3 / Significance of the Research --- p.4 / Organization of Thesis --- p.7 / Chapter Chapter 2: --- Literature Review --- p.9 / Adolescents and Preventive Health Behavior --- p.9 / Health Consciousness --- p.10 / Information Processing of Adolescents --- p.12 / Informative or Testimonial Argument --- p.13 / Expert vs. Celebrity vs. Ordinary person --- p.15 / Source credibility --- p.20 / Initial attitude --- p.24 / Self-efficacy --- p.25 / Chapter Chapter 3: --- Theoretical Framework --- p.28 / The Elaboration Likelihood Model of Persuasion --- p.28 / Chapter Chapter 4: --- Research questions and Hypothesis --- p.34 / Chapter Chapter 5: --- Methodology --- p.39 / Subjects and Design --- p.40 / Procedure --- p.40 / Materials and Manipulations --- p.41 / Independent variables --- p.44 / Dependent variables --- p.46 / Chapter Chapter 6: --- Results --- p.49 / Health Consciousness Assessment --- p.49 / General results --- p.49 / Covariate --- p.56 / Predictors of Behavioral Intention --- p.56 / Hypothesis Testing and Answers to Research Questions --- p.57 / Chapter Chapter 7: --- Discussion --- p.59 / Chapter Chapter 8: --- Implication --- p.66 / Chapter Chapter 9: --- Limitation and Direction for Future research --- p.69 / References --- p.72 / Lists of Appendices / Chapter Appendix A --- :Experiment Questionnaire --- p.85 / Chapter Appendix B --- :Experiment Masterial--- PSA --- p.87 / Chapter Appendix C --- :Experiment Masterial--- PSA --- p.88 / Chapter Appendix D --- :Experiment Masterial--- PSA --- p.89 / Chapter Appendix E --- :Experiment Masterial--- PSA --- p.90 / Chapter Appendix F --- :Experiment Masterial--- PSA --- p.91 / Chapter Appendix G --- :A Proposed PSA of Nutrition Labels --- p.92