Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-01-13Bitstream added on 2014-06-13T20:27:54Z : No. of bitstreams: 1 siloto_ev_dr_botfmvz.pdf: 494737 bytes, checksum: 2225a359b9e80a74e8528c9b0ea4cfd8 (MD5) / O presente estudo avaliou o efeito da suplementação do cromo e dois níveis de energia sobre o desempenho e a qualidade de ovos de poedeiras leves. Foram utilizadas 192 poedeiras da linhagem Bovans com 47 semanas de idade. As aves foram distribuídas em um delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 4x2, com quatro níveis de suplementação de cromo (0, 200, 400 e 800 μg Cr/kg) e dois níveis energéticos (2.780 e 2.900 kcal EM/kg de ração). Cada tratamento continha seis repetições de quatro aves cada. O cromo utilizado foi o derivado de levedura. O experimento teve a duração de 112 dias, divididos em 4 períodos de 28 dias. Os parâmetros de desempenho não foram influenciados pelos níveis de cromo e de energia da dieta. Houve aumento linear no percentual de gema com o aumento da suplementação de cromo em dietas contendo 2.780 kcal/kg. As aves alimentadas com dietas contendo 2.780 kcal de EM/kg e isentas de suplementação de cromo, apresentaram redução no percentual de gema. Quando as aves foram suplementadas com 800 μg Cr/kg de dieta, foi observada uma maior deposição de gema. A suplementação de 800 μg Cr/kg na dieta com 2.780 kcal EM/kg provocou aumento no percentual de gema sem afetar o desempenho das poedeiras / This study aimed to evaluate the performance and egg quality in laying hens receiving diets supplemented with crescent levels of Chromium yeast and two different dietary energy levels. One hundred and ninety-two 47-week-old Bovans laying hens were distributed in a completely randomized design with 4x2 factorial arrangement: 4 levels of chromium yeast supplementation (0, 200, 400, 800 μg/kg feed) and two energy levels (2,780 and 2,900 kcal ME / kg of feed). Each treatment consisted of 6 replications of 4 birds each. The experiment lasted 112 days (four 28-day periods). The following performance parameters were evaluated: feed intake, egg weight, egg production, percentage of whole eggs, egg mass, feed: gain ratio (kg feed/dozen eggs and kg feed/kg eggs). The egg quality was accessed through the weight of total egg, shell, yolk and albumen and their proportions, Haugh unit, the specific gravity, and the shell thickness. The performance parameters were not influenced by the levels of chromium and dietary energy. There was a linear increase in the percentage of yolk with increasing chromium supplementation in diets containing 2.780kcal/kg. Laying hens fed with diets containing 2.780kcal/kg ME and without chromium supplementation showed reduced percentage of yolk. When birds were supplemented with 800 mg Cr / kg diet a greater deposition of yolk was observed. Dietary supplementation of 800 mg Cr / kg with 2.780kcal of ME/kg induced an increase in the percentage of yolk without affecting performance of laying hens

Cinco membros da família das Acil-CoA sintetases de cadeia longa (ACSL) são responsáveis por ativar ácidos graxos, produzindo acil-CoA, e distribuí-los entre diversas vias metabólicas no interior da célula, tais como a síntese de triacilglicerol (TAG) e ?- oxidação mitocondrial. Apesar das disfunções nas ACSLs contribuirem para muitas doenças metabólicasa função de algumas isoformas de ACSL em tecidos específicos permanece ainda sem descrição na literatura. Aqui mostramos pela primeira vez a presença de mRNA da ACSL6 no músculo esquelético de seres humanos. Além disso, indivíduos obesos apresentaram menores níveis de mRNA de ACSL6 quando comparados à indivíduos magros. Após refeição hiperlipídica aguda (high fat meal, HFM, 90% de gordura) a expressão ACSL6 aumentou 2,5 vezes em relação aos níveis de jejum. Nós também verificamos as condições metabólicas que controlam a expressão ACSL6 em ratos: o jejum de 48h modulou negativamente a expressão gênica de ACSL6 e de outros genes de síntese de lipídeos tais como SREBP-1c e DGAT1, enquanto que a ingestão aguda de HFM (80% de gordura saturada , 10 mL/kg) teve o efeito oposto; Após o treinamento aeróbio (6 semanas, 5 dias /semana, uma vez por dia, 60 min a 70% da capacidade aeróbica máxima) o mRNA da ACSL6 foi reduzido em 35%. Em células primárias de músculo esquelético de ratos, a transfecção com siRNA de ACSL6 diminuiu a expressão de ACSL6, DGAT1 e SREBP-1c e o acúmulo de TAGs e gotas lipídicas. O silenciamento gênico da ACSL6 também aumentou o conteúdo dos ácidos graxos C16:0 e C18:0, AMPK-fosforilada, capacidade respiratória mitocondrial, a oxidação de palmitato e mRNA de PGC-1?, UCP2 e UCP3, mas diminuiu a produção de espécies 11 reativas de oxigênio. Em células primárias de músculo esquelético de seres humanos, a superexpressão da ACSL6 não alterou o conteúdo de TAG e da proteína DGAT1, mas aumentou as espécies lipídicas esfingomielina e fosfatidilcolinas, e reduziu a oxidação de 1-14C-palmitato e a expressão do PGC1?. Em conclusão, ACSL6 está envolvida na síntese e distribuição de acil-CoA para a síntese de lipídeos. A inibição gênica da ACSL6 melhora a capacidade de respiração mitocondrial e oxidação lipídica, através da ativação da via AMPK/PGC1?. / Five members of long-chain acyl-CoA synthetase (ACSL) family activate fatty acids providing acyl-CoA for several metabolic pathways within the cell, such as synthesis of triacylglycerol (TAG) and mitochondrial ?-oxidation, and their dysfunctions contribute to many metabolic diseases. Despite this, the existence and function of some ACSL isoforms in specific tissues remains unclear. Here we show for the first time the presence of ACSL6 mRNA and protein in skeletal muscle (SM) of humans. Obese subjects had lower levels of ACSL6 mRNA when compared to leans, and acute high fat meal (HFM, 90% fat) increased ACSL6 expression 2.5 times over fasted levels in both. We also verify the metabolic conditions that control ACSL6 expression in rats: fasting (48h) negatively modulated the ACSL6 mRNA and the expression of other genes of lipid synthesis SREBP-1c and DGAT1 in rat SM, while acute ingestion of HFM (80% saturated fat, 10 mL/Kg) had the opposite effect; After aerobic training (6 weeks, 5 days/week, once a day, 60 min at 70% of maximal aerobic capacity) ACSL6 mRNA was reduced 35%. In primary skeletal muscle cells (PSMC) of rats, ACSL6-specific siRNA oligo transfection (20 nM) decreased ACSL6, DGAT1 and SREBP-1c mRNA and the accumulation of TAGs and lipid droplets (LD). The knockdown also increased the content of C16:0 and C18:0 fatty acids, AMPK-Phosphorylated, mitochondrial content and respiratory rates, palmitate oxidation and PGC-1?, UCP2 and UCP3 mRNA, but decreased reactive oxygen species production. In PSMC of humans, ACSL6 overexpression did not change the contents of TAG or DGAT1 mRNA, but increased sphingomyelin and phosphatidylcholines and reduced 14C-palmitate oxidation and PGC1? mRNA expression. In conclusion, ACSL6 drives acyl-CoA toward lipid synthesis and its 13 downregulation improves mitochondrial capacity of respiration, lipid oxidation and biogenesis, which involves the activation of AMPK/PGC1-? pathway.

Orientador: Antonio Carlos Cicogna / Banca: Marcos Ferreira Minicucci / Banca: André Soares Leopoldo / Resumo: A obesidade, doença crônica metabólica caracterizada pelo acúmulo excessivo de tecido adiposo em relação à massa magra tecidual, é considerada uma epidemia global e um importante problema de saúde pública, que afeta tanto países desenvolvidos quanto subdesenvolvidos. O adipócito recebe influência de diversas substâncias e secreta inúmeros peptídeos, como leptina, angiotensina I e II, TGF-β, entre outros, que atuam diretamente ou indiretamente no sistema cardiovascular. Assim, o tecido adiposo não é simplesmente um reservatório de energia, mas um ativo órgão endócrino, parácrino e autócrino com múltiplas funções, capaz de sintetizar e liberar mediadores que participam de diversos processos biológicos, incluindo os que ocorrem no coração. O coração é composto por miócitos, nervos, vasos e matriz extracelular. O principal componente da matriz é o colágeno, com predomínio dos tipos I e III, sendo que, o tipo I é o mais abundante, correspondendo á aproximadamente 80% do colágeno total miocárdico. O colágeno é produzido, principalmente, pelos fibroblastos e degradado pelas metaloproteinases (MMPs). O colágeno, em situação estável, contribui para a manutenção da arquitetura e função cardíaca; entretanto, em resposta a estímulos desencadeados por agentes neuro-hormonais e/ou mecânicos, pode sofrer alterações; esta mudança pode ser resultante do aumento da síntese e/ou diminuição da degradação ou vice-versa. Em pesquisa recente realizada em nosso laboratório foi encontrado diminuição dos níveis protéicos de colágeno tipo I miocárdico em ratos Wistar obesos, por dieta hiperlipídica insaturada por 30 semanas, em relação ao grupo controle. Em razão, dos resultados encontrados em nosso laboratório e da literatura mostrar que a leptina aumenta a atividade das MMP-2 e a síntese da expressão gênica da MMP-9, a proposta deste estudo foi testar a hipótese ... / Abstract: Obesity is a chronic metabolic disorder characterized by excessive adipose tissue accumulation in relation to lean tissue. Currently, it is a global epidemic and a major public health problem that affects both developed as well as undeveloped countries. The adipocyte receives influence of several substances and secretes numerous peptides, such as leptin, angiotensin I and II, TGF-β, among others, that act directly or indirectly on the cardiovascular system. Thus, adipose tissue is not simply an energy reservoir, but an active endocrine, paracrine and autocrine organ with multiple functions, able to synthesize and release mediators that participate in many biological processes, including those that occur in the heart. The heart is composed of myocytes, nerves, vessels and extracellular matrix. The main component of matrix is collagen, predominantly type I and III, being type I the most abundant, corresponding to approximately 80% of total myocardial collagen. Collagen is mainly produced by fibroblasts and degraded by metalloproteinases (MMPs). Collagen, in a stable condition, contributes to the maintenance of cardiac architecture and function, however, in response to stimuli triggered by neuro-hormonal and/or mechanical agents, it may change, and this change can be due to increased synthesis and/or decreased degradation, or vice versa. In recent research conducted in our laboratory, we found decreased protein levels of myocardial type I collagen in obese Wistar rats by unsaturated high-fat diet for 30 weeks. Due to the results found in our laboratory and because the literature shows that leptin increases MMP-2 activity and MMP-9 gene expression, the purpose of this study was to test the hypothesis that the reduction of myocardial type I collagen is associated with increased MMPs 2 and 9 activities in obese rats by unsaturated high-fat diet. Thirty-day-old male Wistar rats were randomized into to two groups: control ... / Mestre

Resumo: Objetivos: dois estudos prospectivos comparativos de intervenção foram realizados para avaliar o efeito do tratamento periodontal não-cirúrgico sobre parâmetros clínicos periodontais e imunológicos do fluido sulcular gengival e do plasma sanguíneo de pacientes com periodontite crônica portadores ou não de Diabetes mellitus Tipo 2. Material e Método: Vinte e três indivíduos com Diabetes mellitus Tipo 2 com controle metabólico inadequado e periodontite crônica (grupo diabetes) e 26 indivíduos sistemicamente saudáveis com periodontite crônica (grupo controle) foram avaliados quanto a parâmetros periodontais, marcadores inflamatórios do fluido sulcular gengival (interleucinas, metaloproteinases de matriz e atividade de elastase), marcadores inflamatórios no plasma sanguíneo (interleucinas, fator de necrose tumoral alfa, proteína C-reativa e fibrinogênio) e perfil lipídico, antes e após 3 meses do tratamento periodontal. Adicionalmente foi avaliada a influência do tratamento periodontal no controle glicêmico do grupo com diabetes. Resultados: houve redução significativa de todos os marcadores inflamatórios avaliados no fluido gengival, exceto a interleucina 18, após tratamento periodontal, associado a uma melhora da condição clínica periodontal em ambos os grupos. Sistemicamente, o grupo diabetes apresentou maiores níveis de proteina C reativa e triglicérides em ambos os períodos ao se comparar com o grupo controle. O tratamento periodontal foi efetivo em reduzir os níveis de TNF-_ e fibrinogênio no grupo diabetes. Houve melhora no controle glicêmico embora não significativa. Conclusão: os resultados do presente estudo sugerem que os pacientes portadores de Diabetes mellitus Tipo 2 com controle metabólico inadequado apresentam boa resposta ao tratamento periodontal nãocirúrgico, com redução de marcadores inflamatórios no fluido gengival. / Abstract: Objetive: Two prospective comparative interventional studies were performed in order to evaluate the effect of non-surgical periodontal therapy on periodontal clinical and immunological parameters in gingival crevicular fluid (CGF) and plasma of patients with chronic periodontitis with or without type 2 Diabetes mellitus (T2DM). Material and Method: Twenty three individuals with inadequately controlled T2DM and chronic periodontitis (diabetes group) and 26 systemically healthy individuals with periodontitis (control group) were assessed for clinical parameters, inflammatory biomarkers in GCF (interleukins, matrix metalloproteinases and elastase activity), circulating markers of inflammation (interleukins, tumor necrosis factor alpha, C-reactive protein and fibrinogen and lipid profile before and 3 months after periodontal therapy. Additionally, the influence of periodontal treatment on glycemic control was evaluated in the diabetes group. Results: There was a significant reduction of all inflammatory biomarkers in GCF after therapy, except for interleukin 18 levels, and it was associated with improvement on periodontal status in both groups. Systemically, the diabetes group showed high levels of C-reactive protein and triglycerides compared with the control group in both periods. The periodontal therapy was effective in reducing TNF-_ circulating and fibrinogen in the diabetes group. The treatment did not change the glycemic control significantly. Conclusion: The results of the present study suggest that patients with inadequately controlled T2DM present a good response to nonsurgical periodontal treatment, with reduction of inflammatory biomarkers in GCF. However, 3 months after therapy, its influence on systemic inflammatory condition is limited. / Orientador: Silvana Regina Perez Orrico / Coorientador: Carlos Marcelo S. Figueiredo / Banca: Adriana Campus Passanezi Sant'ana / Banca: Ricardo Guimarães Fischer / Banca: Elaine Maria Sgavioli Massucato / Banca: Joni Augusto Cirelli / Doutor

Orientador: Francisco Eduardo Martinez / Coorientador: Patricia Fernanda Felipe Pinheiro / Banca: Sérgio Luis Felisbino / Banca: Renée Laufer Amorim / Banca: Ismael Forte Freitas Junior / Banca: Olga Cristina de Mello Malheiro / Resumo: O consumo de etanol está associado a alterações metabólicas e reprodutivas, causando doenças, como o câncer de próstata. Umas das medidas que pode amenizar a manifestação do câncer, incluindo o da próstata, é o exercício físico regular. Nosso trabalho tem o objetivo de avaliar a influência do exercício físico resistido e do etanol no metabolismo da próstata ventral de ratos adultos. Vinte ratos Wistar sem a preferência ao etanol, 20 ratos UChB, consumo alto de etanol e 20 ratos UChB abstinentes foram divididos em seis grupos. Tres grupos foram submetidos ao treinamento físico com uma semana de adaptação e 13 semanas de treinamento, realizando quatro séries de 10 saltos com sobrecarga crescente de 50-70% do peso corporal preso ao tórax, com 60 segundos de descanso entre cada série, três vezes por semana. Os demais grupos permaneceram sedentários. Dois dias após a última sessão de treinamento, os animais foram submetidos à eutanásia por decaptação, o sangue e as regiões intermediária e distal da próstata ventral foram coletados e processados para análises imunohistoquímicas, Western Blot, hormonais e bioquímicas. Nossos resultados sugerem que o exercício físico altera o metabolismo prostático através das interações parácrinas prevenindo as lesões prostáticas / Abstract: Ethanol consumption is associated with reproductive and metabolic changes, causing diseases such as prostate câncer. The ethanol chronic consumption of is associated with prostate cancer. One of the measures that can lessen the manifestation of cancer, including prostate, is regular exercise. Our work aims to evaluate the influence of resistive exercise and metabolism of ethanol in the ventral prostate of adult rats. Twenty rats without preference to ethanol, 20 UChB rats, ethanol high consumption and 20 UChB abstinent rats were divided into six groups. Three groups were subjected to physical training consisted of one week for adaptation and 13 weeks of physical training, performing four sets of 10 jumps with increasing overload of 50-70% body weight attached to the chest with 60 seconds rest between each series, three times per week. The other groups remained sedentary. Two days after the last training session, rats were euthanized by decapitation, blood and the intermediate and distal ventral prostate regions were collected and processed for immunohistochemical, western blot, biochemical and hormonal analysis. Our results suggest that exercise alters the metabolism of the prostate through paracrine interactions preventing prostate lesions / Doutor

Alguns estudos experimentais têm sugerido um importante papel do baço no metabolismo lipídico. Poucas análises, entretanto, avaliam o impacto que diferentes fontes de gordura possam exercer sobre os níveis de lipídios plasmáticos. O objetivo deste trabalho foi analisar o efeito de uma dieta nutricionalmente equilibrada (NE) e de uma dieta com gordura suína (GS) como fonte lipídica nos níveis de lipídios plasmáticos em ratos submetidos a esplenectomia total (ET) isolada ou combinada com implante esplênico autógeno (IEA). Foram utilizados 60 ratos Wistar machos adultos, distribuídos em seis grupos, cada um com dez animais: Grupo 1 controle operação simulada, com oferta de ração NE; Grupo 2 controle operação simulada, com oferta de ração GS; Grupo 3 submetidos a ET, com oferta de ração NE; Grupo 4 submetidos a ET, com oferta de ração GS; Grupo 5 submetidos a ET combinada com IEA e com oferta de ração NE; e Grupo 6 submetidos a ET combinada com IEA e com oferta de ração GS. Foram coletadas amostras sangüíneas imediatamente antes da operação (D0), e após 12 semanas de experimento (D+12), para verificação do perfil lipídico, quando os animais foram mortos, com retirada dos implantes esplênicos nos grupos 5 e 6. Houve regeneração morfológica de todos os tecidos esplênicos implantados, não se observando diferença no percentual de regeneração entre os grupos 5 e 6. Não houve diferença no ganho de peso e no consumo de ração entre os grupos de animais, assim como no lipidograma dos animais alimentados com dieta NE quando comparados os níveis plasmáticos em D0 e em D+12, enquanto nos grupos com modificação da fonte lipídica houve elevação das concentrações de colesterol total (CT), lipoproteína de baixa densidade (LDL), lipoproteína de muito baixa densidade (VLDL), triglicerídeos (TGL) e diminuição da concentração de lipoproteína de alta densidade (HDL). Quando comparados os seis grupos de animais, em D+12, apenas os níveis plasmáticos de HDL dos animais dos grupos 2, 4 e 6 apresentaram-se significativamente menores que os do grupo 3. Os resultados deste estudo permitem concluir que a dieta nutricionalmente equilibrada mantém os níveis de lipídios plasmáticos, enquanto a dieta à base de gordura suína provoca alterações no perfil lipídico de ratos alimentados com este tipo de ração, independentemente do procedimento cirúrgico realizado sobre o baço. / An important role of the spleen in lipid metabolism has been suggested by clinical and experimental studies. Few studies, however, have evaluated the impact of different sources of fat in plasma lipid levels. The purpose of the present investigation was to analyze the effect of a nutritionally balanced (NB) diet and a diet containing pork fat (PF) as sources of lipids on the lipid profile of rats submitted to total splenectomy (TS) alone or combined with splenic autotransplantation (SA). Sixty adult male Wistar rats were divided into six groups of 10 animals each: Group 1 sham-operated, fed the NB diet; Group 2 sham-operated, fed the PF diet; Group 3 TS, fed the NB diet; Group 4 TS, fed the PF diet; Group 5 SA, fed the NB diet; and Group 6 SA, fed the PF diet. Blood samples were collected immediately before the operation (D0) and 12 weeks after the beginning of the experiment (D+12) for plasma lipid determination. On D+12, the animals were killed and the splenic implants of groups 5 and 6 were removed. Morphologic regeneration of splenic tissues was observed, with no difference in percent regeneration between these two groups. Weight gain and chow intake were similar among all groups of animals. When D+12 plasma lipid levels were compared to D0, there were no differences in groups 1, 3, and 5, while in groups 2, 4, and 6 total cholesterol (TC), low density lipoprotein (LDL), very low density lipoprotein (VLDL), and triglycerides (TGL) levels had increased and high density lipoprotein (HDL) levels had decreased. At the end of the experiment, only the HDL levels of groups 2, 4, and 6 were lower than group 3 levels. Our results lead us to conclude that, regardless of the surgical spleen procedure to which the rats were submitted, a nutritionally balanced diet maintained plasma lipid levels, while a diet containing pork fat as a source of lipids led to alterations in lipid profile.

Os n-3 e n-6 são duas famílias de ácidos graxos poli-insaturados. Os ácidos graxos de cadeia longa como o ácido araquidônico (AA) e docosahexaenoico (DHA) apresentam importantes funções no desenvolvimento e funcionamento do cérebro. Os produtos de oxidação dos ácidos graxos poli-insaturados estão presentes ou aumentados ao longo do desenvolvimento de doenças neurodegenerativas. A caracterização de tais produtos é crítica para o estudo que busca entender o seu papel fisiopatológico no desenvolvimento de tais doenças. No presente trabalho, buscou-se o desenvolvimento de uma ferramenta analítica sensível e específica para a detecção e quantificação dos hidroperóxidos e hidróxidos do AA (HpETE e HETE), do seu precursor, o ácido linoleico (HpODE e HODE) e do DHA (HpDoHE e HDoHE). Estes hidroperóxidos foram sintetizados por fotooxidação e os hidróxidos correspondentes foram obtidos através da redução com o NaBH4. Os isômeros isolados foram caracterizados por LC-MS/MS. Os íons produto específicos de cada isômero foram escolhidos para a construção do método de monitoramento de reação selecionada (selected reaction monitoring - SRM) para a realização da análise quantitativa dos analitos de interesse. Cabe salientar que os dados obtidos poderão ser utilizados em bibliotecas de análise lipidômica e oxi-lipidômica pois serão essenciais para a identificação e quantificação dos analítos de interesse do presente estudo em diversas doenças. Utilizando o método padronizado, buscamos investigar o papel dos hidroperóxidos e hidróxidos do DHA, LA e AA em um modelo animal para a esclerose lateral amiotrófica (ELA), uma doença neurodegenerativa que acomete neurônios motores. Foi observado um aumento nos níveis de 13-HpODE, 9-HpODE e 12-HETE no córtex motor dos animais avaliados. Adicionalmente, foram observadas alterações nas taxas lipólica e lipogênica no tecido adiposo para os animais ELA em relação aos respectivos controles. Em conjunto, os dados apresentados no presente trabalho corroboram com os trabalhos da literatura que associam alteração dos níveis dos produtos de oxidação dos ácidos graxos poli-insaturados em doenças neurodegenerativas e o metabolismo energético alterado em ELA. Futuramente é necessária uma investigação mais ampla dos níveis dos hidroperóxidos e hidróxidos lipídicos em diferentes tecidos e do metabolismo lipídico, e os conhecimentos gerados poderão ser uma importante fonte de novas opções terapêuticas para os pacientes portadores de ELA. / The n-3 and n-6 are two olyunsaturated fatty acids families. The long chain fatty acids such as arachidonic (AA) and docosahexaenoic acid (DHA) have important roles in the development and function of the brain. Polyunsaturated fatty acids (PUFAs) oxidation products are present or increased during the progression of neurodegenerative diseases. The characterization of DHA oxidation products is critical to understand their roles in the development of such diseases. In the present study, we sought to develop a sensitive and specific analytical tool for the detection and quantification of AA hydroperoxides and hydroxides (HPETE and HETE), its precursor linoleic acid (HPODE and HODE) and DHA (HpDoHE and HDoHE). These hydroperoxides were synthesized by photooxidation and the corresponding hydroxides were obtained by reduction with NaBH4. The isolated isomers were characterized by LC-MS/MS, and unique and specific fragment ions were chosen to construct a selected reaction monitoring (SRM) method for the targeted quantitative analysis. It should be emphasized that the data obtained - in the form of lipidomics and oxy-lipidomics libraries - may be used to assist in several diseases. Using the standardized method, we investigated the role of hydroperoxides and hydroxides of DHA, LA and AA in an animal model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS), a neurodegenerative disease that affects motor neurons. Increased levels of 13-HPODE, 9-HPODE and 12-HETE were observed in the animals motor cortex. Additionally, results show changes in lipogenic and lipolytic rates in adipose tissue for ALS animals when compared to their respective controls. Altogether, the data presented herein corroborate with the literature by linking altered levels of PUFAs oxidation products in neurodegenerative diseases with altered energetic metabolism in ALS. In the future, a more extensive investigation of the hydroperoxide and hydroxide level in different tissues as well as the lipid metabolism must be done, which could lead to new therapeutic options for ALS patients

Orientador: Adriana Souza Torsoni / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Aplicadas / Made available in DSpace on 2018-08-24T18:35:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_RafaelaBenatti_M.pdf: 1191668 bytes, checksum: 30188f35804e6016d9ee2cffa54ee9d5 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O consumo materno de uma dieta rica em gordura (HFD) durante a gestação e lactação está intimamente relacionada ao acúmulo de lipídios no fígado, a resistência à insulina e ao aumento de citocinas no soro, na prole jovem e na idade adulta. MicroRNAs (miRNAs) têm sido relacionados com a biossíntese do colesterol e no metabolismo dos ácidos graxos. Nós avaliamos a modulação da síntese hepática de ácidos graxos (de novo), as vias da beta-oxidação e a expressão dos microRNAs miR-122 e miR -370 em prole recém desmamados (d28) de mães alimentadas com HFD (grupo HFD-O) ou ração padrão (grupo SC-O) durante a gestação e lactação. Comparado com os camundongos SC-O, os camundongos HFD-O apresentaram um maior peso corpóreo, maior massa de tecido adiposo e eram intolerantes à glicose e insulina. HFD-O camundongos também apresentaram níveis séricos elevados de colesterol, triglicérides, ácidos graxos não esterificados e maior fosforilação hepática de IKK e JNK em comparação com camundongos SC-O. Os níveis das proteínas FAS, ACC e HMGCR foram semelhantes entre os camundongos HFD-O e SC-O, enquanto os níveis de RNAm e proteína da SCD1 foram mais abundantes nos camundongos HFD-O comparados com camundongos SC-O. Curiosamente, a expressão de RNAm de genes relacionados com a ?-oxidação, como a ACADVL CPT1 estavam diminuídos em camundongos HFD-O. Embora não observamos uma diferença nos níveis de HNF4? hepáticas, a expressão de miR -122 estava diminuída, e a expressão de miR-370 estava aumentada em HFD-O em comparação com camundongos SC-O. Alterações no metabolismo lipídico hepático foram acompanhados pelo aumento da deposição de triglicerídes em camundongos HFD-O. Em conjunto, os nossos resultados sugerem fortemente que o consumo materno de HFD afeta precocemente o metabolismo lipídico da prole de camundongos através da modulação da expressão de genes e miRNAs relacionados com a ?-oxidação hepática e que podem contribuir para as alterações metabólicas na vida adulta / Abstract: Maternal consumption of high-fat diet (HFD) during pregnancy and lactation is closely related to liver lipid accumulation, insulin resistance, and increased serum cytokines in offspring and into adulthood. MicroRNAs (miRNAs) have been implicated in cholesterol biosynthesis and fatty acid metabolism. We evaluated the modulation of hepatic fatty acid synthesis (de novo), beta-oxidation pathways and miR-122 and miR-370 expression in recently weaned offspring (d28) of mice dams fed HFD (group HFD-O) or standard chow (group SC-O) during pregnancy and lactation. Compared with SC-O mice, HFD-O mice weighed more, had a larger adipose tissue mass and were more intolerant to glucose and insulin. HFD-O mice also presented more serum cholesterol, triglycerides, non-esterified fatty acids and hepatic IKK and JNK phosphorylation compared with SC-O mice. Protein levels of FAS, ACC and HMGCR were similar in HFD-O and SC-O mice, whereas SCD1 mRNA and protein were more abundant in HFD-O mice compared with SC-O mice. Interestingly, mRNA expression of ?-oxidation-related genes ACADVL and CPT1 was decreased in HFD-O mice. Although we did not observe a difference in hepatic HNF4? levels, the expression of miR-122 was reduced but that of miR-370 was increased in HFD-O mice compared with that in SC-O mice. Changes in hepatic lipid metabolism were accompanied by increased triglyceride deposition in HFD-O mice. Taken together, our results strongly suggest that maternal consumption of HFD affects the early lipid metabolism of offspring by modulating the expression of hepatic ?-oxidation-related genes and miRNAs that can contribute to metabolic disturbances in adult life / Mestrado / Metabolismo e Biologia Molecular / Mestra em Ciências da Nutrição e do Esporte e Metabolismo

Abstract α-Methylacyl-CoA racemase (Amacr) is an enzyme at the merging point of two important pathways of lipid metabolism: elimination of methyl-branched fatty acids and synthesis of bile acids. Amacr is regarded as obligatory for these processes. Patients with Amacr-deficiency suffer from adult onset sensory motor neuropathy and/or severe neonatal cholestasis with coagulopathy and fat-soluble vitamin malabsorption. Amacr is also linked to cancer and so far has been proposed as a new marker for diagnosis of at least prostate and colon cancers. Common sources of phytol derived branched-chain fatty acids for man are ruminant fats, meat and dairy products. The bile acid synthesis is the main pathway for cholesterol catabolism. Amacr is considered to be a member of family III of the CoA transferases (L-carnitine dehydratase - bile acid inducible protein F (CaiB-BaiF) family) and localized to two subcellular compartments, mitochondria and peroxisomes. In this work the mouse gene encoding Amacr was characterized, the gene was inactivated and mutational and structural studies were used to determine the loop and the active site structure of the enzyme. It was shown that mouse Amacr which locates both to mitochondria and peroxisomes, is an identical product of a single gene, which is located at chromosome 15, region 15B1. Neither alternative replication, splicing, or any post-translational modifications of the enzyme occur. The mouse model for Amacr-deficiency indicated a role of Amacr in detoxification of methyl-branched fatty acids, and suggested that a diet free from these phytol metabolites may function as a treatment for the deficiency. Furthermore, major changes were observed in the bile acid pool of the knock-out mice compared to wild type mice. However, the study suggests that there is an Amacr-independent pathway for synthesis of bile acids albeit of low capacity, which provides a way for Amacr-deficient individuals to survive. The mutational and structural studies confirmed Amacr as a member of family III of the CoA transferases. Furthermore, according to comparisons of the structural data of Amacr and other members of the family (FRC, YfdW), the superfamily can be divided into two subgroups, racemases and transferases. Proteins in the subfamilies share the CoA-binding mode, but the substrate specificities as well as the catalysed reaction differ greatly.

Choline is necessary for the synthesis of phosphatidylcholine (PC), the predominant phospholipid species and an important lipid intermediate. Macrophages, critical mediators of innate immunity, have been implicated in lipid dysregulation associated with metabolic disease. Despite the importance of choline in lipid metabolism, few studies have investigated the relationship between choline metabolism and inflammation. My research revealed that macrophage polarization increased choline metabolism and the expression of the choline transporter CTL1. In addition, choline deficient macrophages showed altered cytokine secretion, suggesting choline metabolism may play an important role in regulating the immune response. This study also describes the generation of a novel CTL1-/- mouse, which showed decreased choline uptake and incorporation into lipids. As an in vivo model for choline deficiency, CTL1-/- mice represent an important model for the future study of choline metabolism. Altogether, these findings suggest an important relationship exists between choline metabolism and inflammation.