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Identificação e caracterização molecular e transcricional de crustinas do tipo I no camarão Litopenaeus vannamei

Vieira, Cairé Barreto January 2016 (has links)
Dissertação (mestrado) - Univesidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Biociências, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-02-07T03:09:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 343939.pdf: 2144518 bytes, checksum: 0409fa15111c9e032fff249eda4f6ba4 (MD5) Previous issue date: 2016 / Peptídeos antimicrobianos (AMPs) são moléculas essenciais do sistema imune de diversos organismos, participando eficientemente no combate a uma ampla variedade de microrganismos patogênicos. Em camarões, quatro principais famílias de AMPs foram descritas, dentre as quais se destacam as crustinas. Essa família encontra-se distribuída em diversas espécies de crustáceos e apresenta atividades antimicrobianas e antiproteolíticas. Classicamente, as crustinas estão divididas em 5 principais grupos, referidos como Tipos I a V. No camarão Litopenaeus vannamei, apesar de terem sido reportadas crustinas dos Tipos II, III e IV, até o presente ainda não foram descritas crustinas do Tipo I. Neste contexto, o objetivo do presente trabalho foi identificar e caracterizar, em nível molecular e transcricional, crustinas do Tipo I em L. vannamei. Sequências de crustinas do Tipo I foram buscadas em bancos transcriptômicos não anotados de L. vannamei (GenBank), submetidas a reconstruções filogenéticas para confirmação de sua autenticidade e usadas no desenho de iniciadores para análises de expressão gênica. Doze sequências de L. vannamei foram resgatadas utilizando-se 41 sequências de crustinas do Tipo I de 22 espécies de crustáceos como referência. As análises filogenéticas indicaram a existência de, pelo menos, dois Subtipos de crustinas do Tipo I em L. vannamei: LvCrus Ia (10 sequências) e LvCrus Ib (2 sequências). Os dois subtipos compartilharam uma alta identidade aminoacídica (>80%) e uma estrutura condizente com as crustinas do Tipo I: um peptídeo sinal seguido de um peptídeo maduro contendo doze resíduos de cisteína, oito dos quais compondo o domínio conservado WAP (Whey Acidic Protein), característico desses AMPs. As análises moleculares mostraram um ponto isoelétrico teórico de 5,01-5,64 para LvCrus Ia (massa molecular de 9,6 kDa) e 7,66 para LvCrus Ib (massa molecular de 11,5 kDa). A expressão de crustinas do Tipo I mostrou um perfil similar de expressão em diferentes tecidos dos animais após um estímulo bacteriano. Interessantemente, LvCrus Ia e LvCrus Ib mostraram-se altamente expressos nas brânquias de animais estimulados e não estimulados, mas não nos hemócitos que são as células imuncompetentes de camarões. Para fins comparativos, a distribuição das demais crustinas de L. vannamei também foi investigada. As crustinas do Tipo II (IIa e IIb) mostraram uma distribuição idêntica, estando presentes em hemócitos e brânquias e as crustinas dos Tipos III e IV foram unicamente hemocitárias. Os níveis transcricionais deLvCrus Ia foi analisado no intestino médio de animais 48 horas após uma infecção experimental por dois patógenos de camarões: o vírus da síndrome da mancha branca (WSSV) ou a bactéria Vibrio harveyi. A expressão de LvCrus Ia apresentou um aumento superior a 50 vezes em animais inoculados com água do mar estéril e com a bactéria V. harveyi, mas não houve diferença entre esses dois tratamentos. Analogamente, não houve modulação na expressão de LvCrus Ia após o desafio viral. Nos hemócitos, apenas as crustinas do Tipo IV (LvSLPI) foram induzidas após a infecção bacteriana. As crustinas do Tipo I de camarões peneídeos compõem, portanto, um grupo diverso de AMPs tanto em termos de estrutura primária, características bioquímicas e no perfil de expressão gênica. Ademais, este trabalho representa o primeiro relato de crustinas aniônicas e de um grupo de AMPs não hemocitários em L. vannamei.<br> / Abstract : Antimicrobial peptides (AMPs) are essential molecules of the immune system of different organisms, participating effectively in the combat to a wide range of pathogenic microorganisms. In shrimp, four main AMP families were described, including the crustins. This AMP family is largely distributed among crustaceans and displays both antimicrobial and antiproteolytic activities. Crustins are classically divided in 5 groups, referred as Types I to V. In L. vannamei shrimp, despite the report of crustins from Types II, III and IV, Type I crustins were not still identified in this species. In this context, the aim of the present study was to identify and characterize at molecular and transcriptional levels Type I crustins in L. vannamei. Sequences coding for Type I crustins were searched in non-annotated transcriptomic libraries from L. vannamei (available in GenBank), submitted to phylogenetic reconstructions for the confirmation of their authenticity and then used for the design of specific primers for gene expression analyses. Twelve sequences were identified in L. vannamei libraries by using as query 41 Type I crustin sequences from 22 crustaceans. Phylogenetic analysis indicated the presence, at least, of two Subtypes of Type I crustins in L. vannamei: LvCrus Ia (10 sequences from nerve cord libraries) e LvCrus Ib (2 sequences from hemocyte libraries). The two Subtypes shared a high amino acid identity (>80%) and a primary structure consistent with other Type I crustins: a leader sequence followed by a mature peptide containing twelve cysteine residues, eight of them comprising a conserved WAP (Whey Acidic Protein) domain, typical of this AMP family. Molecular analysis showed a theoretical isoelectric point of 5.01-5.64 for LvCrus Ia (molecular weight = 9.6 kDa) and 7.66 for LvCrus Ib (molecular weight = 11.5 kDa). The gene expression of both Type I crustins showed to be similar in the different tissues of bacterial-challenged shrimp. Interestingly, LvCrus Ia and LvCrus Ib showed to be highly expressed in gills of both stimulated and non-stimulated animals, but not in hemocytes that are the shrimp immunocompetent cells. For comparative purposes, the gene expression distribution of other L. vannamei crustins was also evaluated. The gene expression distribution of Type II crustins (IIa and IIb) were identical, which were detected in hemocytes and gills, whereas the expression of crustins from Types III and IV showed to be restrict to hemocytes. The transcriptional levels of LvCrus Ia were analyzed in the midgut at 48 hours after an experimental infection with two shrimp pathogens: the White Spot Syndrome Virus(WSSV) or the Gram-negative Vibrio harveyi. The expression of LvCrus Ia increased more than 50-fold in seawater-injected shrimp and animals infected with V. harveyi, but no differences were observed between treatments. Besides, no differences in gene expression modulation were observed for LvCrus Ia in response to the viral infection. In hemocytes, only the expression of Type IV crustins (LvSLPI) was induced in response to the bacterial infection. Type I crustins from penaeid shrimp comprise a diverse group of AMPs in terms of primary structure, biochemical features and gene expression profile. Additionally, the present study represents the first report of anionic crustins and the first identification of non-hemocytic AMPs in L. vannamei.
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Influência da densidade e idade no transporte de pós-larvas do camarão marinho Litopenaeus vannamei

Moraes, Rafael da Cunha January 2004 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-graduação em Aquicultura / Made available in DSpace on 2012-10-22T05:56:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 210165.pdf: 616379 bytes, checksum: 5207ab6b39b95a8239a3527594b588ac (MD5) / Os efeitos da idade e da densidade no transporte de pós-larvas de Litopenaeus vannamei foram avaliados através de quatro experimentos. Foram testadas as densidades de 500, 750 e 1.000 PL/l em pós-larvas nos estágios de PL12, PL16, PL20 e PL24. As pós-larvas foram submetidas, antes e após os experimentos, a um teste de estresse salino, visando avaliar sua qualidade. Após os experimentos, 100 indivíduos de cada unidade experimental eram mantidos por mais 48 horas, para avaliar a ocorrência de uma possível mortalidade subseqüente ao transporte. Uma amostra de 100 ml de água foi coletada de cada unidade experimental ao final dos experimentos de transporte, e da água utilizada para preenchê-las, para posterior análise de amônia (NH3 + NH4+). Os valores de amônia não-ionizada (NH3) foram obtidos através da transformação das concentrações de amônia e dos valores de temperatura, salinidade e pH da água. Ao contrário do fator densidade, a idade das pós-larvas mostrou influenciar a taxa de sobrevivência durante o transporte. As taxas de sobrevivência mais baixas foram obtidas no experimento de transporte em PL24. As taxas de sobrevivência no teste de estresse variaram entre 95 e 100%, e não apresentaram diferença em relação às três densidades testadas, nem tampouco em função de serem realizadas antes ou depois dos experimentos de transporte. Também não foram observadas mortalidades consideráveis 48 h após os experimentos de transporte. O acúmulo de NH3 ao final dos experimentos apresentou uma relação direta com a densidade, e com a idade da pós-larva entre os estágios de PL12 e PL20. A concentração média máxima observada deste composto foi de 0,109 mg/l. Os resultados obtidos no presente trabalho sugerem que pós-larvas de L. vannamei em PL16 podem ser transportados com segurança em uma densidade de 1.000 PL/l, durante 8h a 22°C, enquanto que em PL20, devem ser utilizadas densidades inferiores a 1.000 PL/l. A densidade de transporte para o estágio de PL24 não pôde ser determinada, todavia foi possível concluir que este valor encontra-se abaixo do nível de 500 PL/l. Já o transporte em PL12 deve ser evitado, dando preferência para a realização do envio das pós-larvas em idades um pouco mais adiantadas.
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Fungos isolados de cultivos do camarão Litopenaeus vannamei Boone e caracterização quanto a produção de quitinase, protease e aflatoxina

Roberta Cruz da Silva, Lidiane 31 January 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T15:03:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1701_1.pdf: 775812 bytes, checksum: 91da0a9d15c99a497c6075216d668136 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Na carcinicultura Litopenaeus vannamei é a espécie mais cultivada no Nordeste brasileiro. Os objetivos desta pesquisa foram avaliar a capacidade quitinolítica e proteolítica e produção de aflatoxinas por fungos isolados da água de viveiros e dos camarões L. vannamei cultivados em duas fazendas no Rio Grande do Norte, Brasil. Para o isolamento, amostras de água e do camarão foram plaqueadas em ágar Sabouraud acrescido de cloranfenicol contido em placas de Petri. Após 72 horas, as colônias foram transferidas para meios de cultura específicos para identificação. Foram obtidos 146 isolados, pertencentes a 46 espécies. Os gêneros mais representativos foram Aspergillus e Penicillium, além de Phaeoannellomyces werneckii, Rhinocladiella aquaspersa, Syncephalastrum racemosum e outros fungos oportunistas. Foram avaliadas a capacidade quitinolítica, proteolítica e produção de aflatoxina B1. A maioria das espécies apresentou capacidade proteolítica. Dentre os substratos utilizados para detecção da capacidade em degradar quitina o que apresentou melhores resultados foi a carapaça de camarão adicionada de sais, sendo uma importante alternativa para selecionar fungos quitinolíticos. A. fumigatus, A. niveus, A. parasiticus, Penicillium lividum e S. racemosum foram excelentes decompositoras de quitina em meio líquido, liberando Nacetilglicosamina após 96h de fermentação, sendo indicadas para serem aplicadas em processos biotecnológicos. Dentre trinta e três isolados testados, vinte e um de A. flavus e três de A. parasiticus foram capazes de produzir aflatoxina B1, sendo todas procedentes da fazenda com sistema de cultivo inorgânico
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Dieta experimental inerte e biomassa seca de Artemia sp. adulta para substituição de náuplios de Artemia sp. na alimentação de pós-larvas de Litopenaeus vannamei (Boone, 1931) (Decapoda, Penaeidae)

VALENÇA, Anita Rademaker January 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T23:01:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8141_1.pdf: 856940 bytes, checksum: 7ce08fe6a85e90627e54a6d9fb9f214d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / A completa substituição de alimentos vivos por dietas artificiais é um dos principais objetivos de pesquisas relacionadas ao cultivo larval e pós-larval de camarões marinhos. Oscilações na oferta de cistos de Artemia sp. e o conseqüente aumento de preço demonstram a necessidade de reduzir a dependência das larviculturas comerciais deste alimento vivo. Este trabalho avaliou a substituição dos náuplios de Artemia sp. por uma ração experimental formulada no Laboratório de Aqüicultura da UFPE e por biomassa seca de Artemia adulta (RN, Brasil). Foram realizados dois experimentos. O primeiro experimento avaliou o efeito da substituição do náuplio de Artemia sp. por uma dieta experimental e/ou biomassa seca de Artemia adulta em diferentes concentrações no crescimento de pós-larva 1 (PL 1) a PL 10 de Litopenaeus vannamei. O experimento 2 analisou se o crescimento destas pós-larvas no período berçário (PL 11 a PL 20) foi afetado devido aos diferentes tratamentos alimentares utilizados no experimento 1. Os resultados demonstraram que sobrevivências semelhantes, porém com taxas de crescimento menores foram obtidas com o decréscimo da concentração de náuplios de Artemia. Porém, quando comparadas ao tratamento controle, as taxas de crescimento dos tratamentos que utilizaram a dieta experimental em conjunto com a biomassa seca de Artemia e 25, 50 e 75% da concentração de náuplios de Artemia utilizadas no tratamento controle foram iguais estatisticamente. As sobrevivências de PL 11 a PL 20 foram maiores que 80%, porém os dados de crescimento divergiram dos resultados do experimento de PL 1 a PL 10, indicando não existir uma relação entre o alimento dado no primeiro experimento e o desenvolvimento das pós-larvas no experimento de PL 11 a PL 20. A dieta experimental foi formulada com ingredientes de baixo custo e de fácil acesso na região, e as sobrevivências e crescimentos obtidos utilizando-a em conjunto com o alimento vivo foram equivalentes às do tratamento controle, sugerindo a viabilidade da dieta experimental para substituição parcial dos náuplios de Artemia sp. Além disso, os resultados também indicaram a potencialidade do uso de biomassa seca de Artemia sp. como complemento à dieta experimental na substituição dos náuplios vivos de Artemia na produção de pós-larvas do camarão marinho Litopenaeus vannamei
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Análise dos perigos associados ao camarão Litopenaeus vannamei no Brasil / Analysis of hazards associated with Litopenaeus vannamei in Brazil

Nascimento, Marcela Leite do 10 September 2013 (has links)
O objetivo deste trabalho foi identificar na cadeia produtiva do camarão Litopenaeus vannamei os perigos à saúde animal e à saúde pública e as respectivas medidas de controle, a partir de levantamentos bibliográficos. Os principais perigos à saúde animal identificados foram os vírus da Mancha Branca, Cauda Amarela, Mionecrose Infecciosa, síndrome da Taura e bactérias hepatonecrosantes dos camarões, que ocasionam grandes prejuízos para a cadeia produtiva, devido à queda da produtividade e às elevadas taxas de mortalidade. Esses perigos apresentam riscos à saúde animal, quando se mantêm viáveis nas plantas de cultivo, decorrente das práticas inadequadas de manejo sanitário e da queda de qualidade da água nos viveiros. Quanto aos riscos à saúde humana, alguns patógenos como: Vibrio spp, Salmonella spp e Staphylococcus aureus apresentam perigo se presente e viável no camarão contaminado. O uso abusivo e indiscriminado de metabissulfito de sódio em diferentes concentrações nas plantas de processamento, de contaminantes inorgânicos e resíduos de medicamentos veterinários nas criações podem resultar em níveis elevados de toxicidade aos animais e ao ambiente, precisando, consequentemente ser corrigido com a adoção de boas práticas de manejo do ambiente, implantação de vazio sanitário e estabelecimento de parâmetros microbiológicos e ambientais nos viveiros. Por ser uma atividade promissora para o desenvolvimento socioeconômico do país, é de extrema importância a adoção de medidas de controle destes perigos, que incluem a aplicação dos princípios das &quot;Boas Práticas&quot; e da &quot;Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle&quot; no manejo ambiental e sanitário em todos os elos da cadeia produtiva, dos criatórios até o consumo. / The objetive of this study was to identify in the production chain of shrimp Litopenaeus vannamei the hazards to animal health and public health and their control measures, from the literature. The main hazards to animal health were identified: viruses White Spot, Yellow Tail, Infectious Myonecrosis, Taura syndrome and Hepatonecrotysing bacteria of prawns, which promote large losses in the supply chain due to a drop in productivity and high mortality rates. They are considered dangerous to animal and human health, because they maintain viable pathogens in crop plants, resulting from inadequate health management practices and falling water quality in the ponds. In relation to chemical hazards, the indiscriminate use of sodium metabisulphite, inorganic contaminants and residues of veterinary drugs and pesticides can result in situations of high toxicity to animals and the environment, and must be controlled by adopting good environmental management practices, implementation of depopulation and the establishment of microbiological parameters and environmental conditions in nurseries. Physical hazards can be related to any failure in the process of industrialization and commercialization, in which the detection of foreign objects should be checked by visual inspection and the use of metal detectors. Since it is a promising socio-economic development of the country, it is extremely important to adopt measures to control these hazards, including the principles of &quot; Good Practice&quot; and &quot;Hazard Analysis and Critical Control Points &quot; in the management of environment and health in all links in the production chain, from the farms to the consumers.
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Análise dos perigos associados ao camarão Litopenaeus vannamei no Brasil / Analysis of hazards associated with Litopenaeus vannamei in Brazil

Marcela Leite do Nascimento 10 September 2013 (has links)
O objetivo deste trabalho foi identificar na cadeia produtiva do camarão Litopenaeus vannamei os perigos à saúde animal e à saúde pública e as respectivas medidas de controle, a partir de levantamentos bibliográficos. Os principais perigos à saúde animal identificados foram os vírus da Mancha Branca, Cauda Amarela, Mionecrose Infecciosa, síndrome da Taura e bactérias hepatonecrosantes dos camarões, que ocasionam grandes prejuízos para a cadeia produtiva, devido à queda da produtividade e às elevadas taxas de mortalidade. Esses perigos apresentam riscos à saúde animal, quando se mantêm viáveis nas plantas de cultivo, decorrente das práticas inadequadas de manejo sanitário e da queda de qualidade da água nos viveiros. Quanto aos riscos à saúde humana, alguns patógenos como: Vibrio spp, Salmonella spp e Staphylococcus aureus apresentam perigo se presente e viável no camarão contaminado. O uso abusivo e indiscriminado de metabissulfito de sódio em diferentes concentrações nas plantas de processamento, de contaminantes inorgânicos e resíduos de medicamentos veterinários nas criações podem resultar em níveis elevados de toxicidade aos animais e ao ambiente, precisando, consequentemente ser corrigido com a adoção de boas práticas de manejo do ambiente, implantação de vazio sanitário e estabelecimento de parâmetros microbiológicos e ambientais nos viveiros. Por ser uma atividade promissora para o desenvolvimento socioeconômico do país, é de extrema importância a adoção de medidas de controle destes perigos, que incluem a aplicação dos princípios das &quot;Boas Práticas&quot; e da &quot;Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle&quot; no manejo ambiental e sanitário em todos os elos da cadeia produtiva, dos criatórios até o consumo. / The objetive of this study was to identify in the production chain of shrimp Litopenaeus vannamei the hazards to animal health and public health and their control measures, from the literature. The main hazards to animal health were identified: viruses White Spot, Yellow Tail, Infectious Myonecrosis, Taura syndrome and Hepatonecrotysing bacteria of prawns, which promote large losses in the supply chain due to a drop in productivity and high mortality rates. They are considered dangerous to animal and human health, because they maintain viable pathogens in crop plants, resulting from inadequate health management practices and falling water quality in the ponds. In relation to chemical hazards, the indiscriminate use of sodium metabisulphite, inorganic contaminants and residues of veterinary drugs and pesticides can result in situations of high toxicity to animals and the environment, and must be controlled by adopting good environmental management practices, implementation of depopulation and the establishment of microbiological parameters and environmental conditions in nurseries. Physical hazards can be related to any failure in the process of industrialization and commercialization, in which the detection of foreign objects should be checked by visual inspection and the use of metal detectors. Since it is a promising socio-economic development of the country, it is extremely important to adopt measures to control these hazards, including the principles of &quot; Good Practice&quot; and &quot;Hazard Analysis and Critical Control Points &quot; in the management of environment and health in all links in the production chain, from the farms to the consumers.
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Suplementação dietária com mananoproteína no cultivo do camarão branco do Pacífico em sistema de bioflocos

Rodrigues, Marysol Santos January 2015 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aqüicultura, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-11-03T03:06:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 335988.pdf: 1033249 bytes, checksum: 4f543ee934f93831d5609d0f1608bcc1 (MD5) Previous issue date: 2015 / O camarão marinho Litopenaeus vannamei em 2013 foi o responsável por 74% da produção mundial de camarão, porém o seu cultivo sofre grandes perdas na produção causada por doenças virais e bacterianas. Para diminuir a incidência de doenças tem se buscado por novas formas de cultivo mais biosseguros, como o uso de aditivo alimentar que melhorem a resposta imune e os parâmetros zootécnicos. Este estudo tem como objetivo avaliar o uso do aditivo alimentar mananoproteína (MP) na dieta de Litopenaeus vannamei cultivado em sistema superintensivo com bioflocos. Foram formuladas três dietas com diferentes concentrações de MP (0,2g. kg-1; 0,8g. kg-1; 1,2g. kg-1) e o grupo controle sem a suplementação de MP. O experimento consistiu em uma engorda na densidade de 400 camarões. m3, sendo que o peso médio inicial dos camarões era de 3,64 ± 0,07g. Foram avaliados os parâmetros de qualidade de água, microbiota intestinal, histologia do intestino médio e índices zootécnicos. O delineamento experimental foi totalmente casualizado em triplicata. Os camarões foram alimentados quatro vezes ao dia durante 65 dias. Ao final do experimento, não foi observada diferença nos parâmetros de qualidade de água em nenhum tratamento (p<0,05). As vilosidades intestinais apresentaram maior área de superfície interna nos animais alimentados com dieta suplementada com 0,08% e 0,12% de MP (p<0,05). Os camarões que receberam a dieta contento MP, obtiveram cerca de 10% a mais na sobrevivência em relação aos camarões alimentados com a dieta controle (p<0,05). Não foi observada diferença estatística nos demais parâmetros zootécnicos avaliados (peso final, ganho de peso semanal, biomassa final, eficiência alimentar). Sendo assim a suplementação da dieta com mananoproteína nas diferentes concentrações, ocasionou uma melhora na sobrevivência dos camarões e aumento na área de superfície do intestino médio.
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Exigência proteica para fase inicial do camarão-branco-do-pacífico cultivado em sistema de bioflocos

Henriques, Fernanda Morais January 2016 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-05-02T04:06:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 345498.pdf: 1248450 bytes, checksum: 3a780be593787a136d4407a458942777 (MD5) Previous issue date: 2016 / Este estudo foi conduzido para avaliar a exigência proteica na dieta para o camarão-branco-do-pacífico durante a fase inicial de cultivo em sistema de bioflocos, e relacionar o efeito destas dietas sobre os parâmetros de qualidade de água e índices produtivos. Para o cultivo, foram utilizados quinze tanques circulares (400 L), mantidos em sala isolada com sistema de aquecimento de água e aeração constante. Os camarões foram alimentados com cinco dietas práticas formuladas com os níveis 31,28; 36,29; 41,57; 46,34 e 51,74 g 100 g-1 de proteína bruta (PB). Pós-larvas (PL) (0,16±0,01g) foram cultivadas durante 38 dias na densidade de 450 PL m-3, em um delineamento inteiramente ao acaso. Os parâmetros de qualidade de água mantiveram-se dentro dos limites adequados para o cultivo. Camarões alimentados com dietas contendo 31,28 a 46,34g 100 g-1 PB tiveram comportamento crescente de peso final (1,52 ? 2,61 g), produtividade (0,69 ? 1,10 Kg m-³), ganho em peso (1,38 ? 2,44 g) e eficiência alimentar (77,28 ? 101,68 %), com decréscimo em 51,74 g 100 g-1 PB. A sobrevivência média foi superior a 80%, sem diferença (P<0,05) entre os tratamentos. Foi possível determinar a faixa entre 44,26 e 47,12 g 100 g-1 PB para um melhor desempenho zootécnico na fase inicial do cultivo do L. vannamei em bioflocos.<br> / Abstract : This study evaluated the dietary protein requirement for Pacific white shrimp in biofloc system during the initial phase of rearing, as well as the effect of these diets on water quality and growth performance parameters. During the rearing period, fifteen circular tanks (400 L) were maintained in an isolated room with water heating system and constant aeration. Shrimps were fed using five practical diets, formulated with the increasing crude protein (CP) levels 31.28; 36.29; 41.57; 46.34 and 51.74 g 100g-1. Post-larvae (PL) (0.16 ± 0.01 g) were reared for 38 days at stocking density of 450 PL m-3 in a completely randomized design. All the water quality parameters remained within the appropriate limits for rearing. Shrimp fed diets containing 31.28 to 46.34 g 100g-1CP had increasing final weight (1.52 - 2.61 g), yield (0.69 - 1.10 kg m-3), weight gain (1.38 - 2.44 g) and feed efficiency (77.28 - 101.68 %), which, on the other hand, decreased in 51.74 g 100g-1 CP treatment (P<0.05). Mean survival was over 80%, with no difference (P>0.05) between treatments. In conclusion, the range between 44.26 and 47.12 g 100g-1 PB provided better growth performance of L. vannamei at the initial phase of rearing in biofloc system.
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Desempenho e resistência imunológica do camarão Litopenaueus vannamei alimentado com uma dieta rica em B-1, 3/1,6-glucano e ácido L-ascórbico-2-monofosfato frente ao vírus da mionecrose infecciosa (IMNV) / Performance and immune resistance Litopenaueus vannamei shrimp fed a diet rich in B-1, 3 / 1,6-glucan and L-ascorbic acid-2-monophosphate front of infectious myonecrosis virus (IMNV)

Sabry Neto, Hassan January 2007 (has links)
SABRY NETO, Hassan. Desempenho e resistência imunológica do camarão Litopenaueus vannamei alimentado com uma dieta rica em B-1, 3/1,6-glucano e ácido L-ascórbico-2-monofosfato frente ao vírus da mionecrose infecciosa (IMNV). 2007. 66 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Marinhas Tropicias) - Instituto de Ciências do Mar - LABOMAR, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2007. / Submitted by Debora Oliveira (deby_borboletinha@hotmail.com) on 2011-11-29T14:30:14Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_hsabryneto.pdf: 1987915 bytes, checksum: ed1d62fbf3cfa72c133dc6f64e1d183f (MD5) / Approved for entry into archive by Nadsa Cid(nadsa@ufc.br) on 2011-12-02T20:42:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_hsabryneto.pdf: 1987915 bytes, checksum: ed1d62fbf3cfa72c133dc6f64e1d183f (MD5) / Made available in DSpace on 2011-12-02T20:42:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_hsabryneto.pdf: 1987915 bytes, checksum: ed1d62fbf3cfa72c133dc6f64e1d183f (MD5) Previous issue date: 2007 / Since 2002, a new pathogen agent named Infectious Myonecrosis Virus (IMNV) has been causing significant economical losses in shrimp farms in NE Brazil. Contrary to vertebrates, shrimp do not possess an immunological system with an adaptative memory. However, they are equipped with an innate immune system with less complex defense responses. The present study aimed at determining the efficacy of high dosages of L-ascorbyl 2-monophosphate acid (VitC) in combination with a ß-1,3/1,6-glucan (BetG) on the survival, growth and immune responses of the shrimp Litopenaeus vannamei challenged with IMNV. The study was conducted in 30 tanks of 500 l, operated with clear water conditions and constant water renewal and aeration. Shrimp of 2.58 ± 0.39 g were stocked at 100 animals/m2 and reared for 10 weeks. The experimental design consisted of three treatments and three controls. Five tanks were designated for each treatment and control, as follows: Ref, IMNV- (IMNV negative) fed a commercial feed; Neg and Pos, IMNV- and IMNV+ (IMNV positive), fed an experimental feed with normal levels of L-ascorbyl 2-monophosphate (VitC, 250 mg/kg) deprived of BetG; VitC, IMNV+, fed an experimental feed with 1,160 mg/kg of VitC; VitCBetG, IMNV+, fed an experimental feed with 1,160 mg/kg of VitC and 600 mg/kg of BetG; and, BetG, IMNV+, fed an experimental feed with 1,000 mg/kg of BetG and normal levels of VitC. Experimental feeds were manufactured with laboratory equipment, while shrimp viral challenge occurred through oral administration of IMNV+ inoculum (1.82 x 103 copies of IMNV/μl RNA) during three consecutive days, twice a day. Per os challenge began on the 27th day of exposure to the experimental feeds when animals had reached between 4.93 g and 6.92 g in body weight. The total haemocyte count (THC), the total protein concentration and the relative activity of the phenoloxidase enzyme (PO) were evaluated in L. vannamei two days prior to the oral challenge (27th day of rearing), 17 days after the challenge (48th day of rearing) and at harvest (70th day of rearing). Reared shrimp were effectively contaminated with IMNV. Although 100% mortalities were not observed, animals were highly susceptible to the virus 29 days after the first day of infection. At harvest, shrimp reached a body weight between 9.07 ± 1.48 g (BetG) and 11.11 ± 1.86 g (Pos). Survival varied from a minimum of 22.8 ± 4.9% (VitC) to a maximum of 69.5 ± 5.7%. Shrimp body weight gains were continuous with weekly growth ranging from 0.56 g on the 14th day of culture to 0.77 g in the last week of culture. Shrimp weekly growth did not vary statistically between treatments. Survival reduced throughout the culture period, regardless of the treatment adopted. The THC showed a significant increase in all treatments after the per os challenge with IMNV (i.e., 48th day of culture). On this sampling day, the highest number of cells/mm3 were observed in treatments that were voluntarily challenged with IMNV, which were the ones that achieved the lowest final shrimp survival (Pos and VitC). Similarly, the non-challenged treatment (Ref) also displayed a significant increase in THC during the post-infection viral period. In general, the protein concentration and the relative activity of the phenoloxidase activity in shrimp serum did not change significantly throughout the culture period or between treatments. By this study it can be concluded that an inclusion of 600 mg/kg of ß- 1,3/1,6-glucan in a diet for the shrimp L. vannamei provided a significant increase in the species survival when exposed to IMNV. Conversely, the inclusion of 1,160 mg/kg of L-ascorbyl 2-monophosphate acid in diets for this species infected with IMNV did not result in a better growth or survival. In the present study, no signs of immunological fatigue or a detriment in growth could be detected when the species was continually exposed to a diet containing 600 mg/kg of ß-1,3/1,6-glucan. / Desde 2002 que um novo agente patogênico denominado de Vírus da Mionecrose Infecciosa (IMNV) vem causando significativas perdas econômicas em fazendas de camarão na Região Nordeste do Brasil. Ao contrário dos vertebrados, os camarões não possuem um sistema imunológico com memória adaptativa, no entanto possuem um sistema imune inato, apresentando respostas de defesa menos complexas. O presente estudo teve como objetivo determinar a eficácia de uma dieta com dosagens elevadas de ácido L-ascórbico-2-monofosfato (VitC) em combinação com um ß-1,3/1,6-glucano (BetG) sobre a sobrevivência, o crescimento e as respostas imunológicas do camarão Litopenaeus vannamei desafiado com o IMNV. O estudo foi realizado em 30 tanques de 500 l, operados com água clara e submetidos a aeração e renovação de água constante. Camarões com 2,58 ± 0,39 g foram povoados com 100 animais/m2 e cultivados por um período de 10 semanas. O desenho experimental foi composto por três tratamentos e três controles. Para cada tratamento foram designados cinco tanques, assim denominados: Ref, IMNV negativo e ração comercial; Neg e Pos, IMNV negativo e positivo respectivamente, alimentados com uma ração experimental contendo níveis normais de ácido L-ascórbico-2-monofosfato (VitC, 250 mg/kg) e sem ß-1,3/1,6-glucano; VitC, (IMNV positivos, alimentados com uma ração experimental contendo 1.160 mg/kg de ácido L-ascórbico-2-monofosfato), VitCBetG, (IMNV positivos, alimentados com uma ração experimental contendo 1.160 mg/kg de VitC e 600 mg/kg de BetG); e, BetG, (IMNV positivos, alimentados com uma ração experimental contendo 600 mg/kg de ß- 1,3/1,6-glucano e níveis normais de VitC). As rações experimentais foram fabricadas em laboratório e a infecção dos camarões se deu através da administração per os de tecido infectado por IMNV (1,82 x 103 copias de IMNV/μl RNA) durante três dias consecutivos, duas vezes ao dia. O desafio per os teve início no 27º dia de exposição dos camarões às rações, quando os animais alcançaram entre 4,93 g e 6,92 g. A contagem total de hemócitos (CTH), a concentração de proteínas totais do soro e a atividade específica da enzima fenoloxidase (PO) foram avaliadas no L. vannamei dois dias antes do desafio oral (27º dia de cultivo), 17 dias após o desafio per os (48º dia de cultivo) e na despesca (70º dia de cultivo). Os camarões cultivados foram efetivamente contaminados com o IMNV. Embora mortalidades de 100% não tenham sido observadas, os animais mostraram-se altamente susceptíveis ao vírus 29 dias após o primeiro dia do desafio. Na despesca, os camarões alcançaram um peso entre 9,07 ± 1,48 g (BetG) e 11,11 ± 1,86 g (Pos). A sobrevivência variou de um mínimo de 22,8 ± 4,9% (VitC) a um máximo de 69,5 ± 5,7% (Ref). O ganho de peso dos camarões foi progressivo e o crescimento semanal variou de 0,56 g no 14º dia de cultivo para 0,77 g na última semana, não havendo diferença estatística significativa entre tratamentos. A sobrevivência decresceu ao longo do cultivo, independente do tratamento adotado. A CTH apresentou um aumento em todos os tratamentos após o desafio per os com IMNV (i.e., 17 dias após), entretanto nem todos foram significativos. Neste dia de amostragem, um maior número de células/mm3 foi observado nos tratamentos voluntariamente infectados, os quais alcançaram uma menor sobrevivência final de camarões (Pos e VitC). Igualmente, o tratamento não infectado, Ref, também exibiu um aumento significativo na CTH no período de pós-infecção viral. De um modo geral, a concentração protéica do soro dos camarões e a atividade relativa da enzima fenoloxidase não se alteraram ao longo do cultivo ou entre os tratamentos avaliados. Através do presente estudo pode-se concluir que a inclusão de 600 mg/kg de ß-1,3/1,6- glucano em uma dieta para o camarão L. vannamei proporcionou um aumento significativo na sobrevivência da espécie quando exposto ao IMNV. Ao contrário, a inclusão de 1.160 mg/kg de ácido L-ascórbico-2-monofosfato em dietas para espécie infectada com IMNV não resultou em um maior crescimento ou sobrevivência da espécie. No presente estudo, não foram detectados indícios de fadiga imunológica ou diminuição no crescimento da espécie quando exposta de forma contínua a uma dieta contendo 600 mg/kg de ß-1,3/1,6-glucano.
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Estratégias de fertilização e manipulação microbiana no cultivo superintensivo de camarão marinho em sistema de bioflocos

Ferreira, Natália Locks January 2017 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2018-02-06T03:15:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 350249.pdf: 730022 bytes, checksum: f3d2484d1f9af08dad0e6e09c444b609 (MD5) Previous issue date: 2017 / O objetivo deste trabalho foi avaliar a atuação da levedura marinha Meyerozyma guilliermondii sob os parâmetros de qualidade de água, microbiológicos e zootécnicos de Litopenaeus vannamei quando adicionada na água de cultivo do camarão cultivado em sistema sem renovação de água, mediante diferentes estratégias de fertilização para formação do sistema de bioflocos. A cepa de levedura foi isolada do solo do estuário da Lagoa da Conceição e foi avaliada in vitro quanto à cinética de crescimento em diferentes salinidades e quanto à capacidade de inibição de patógenos. Nos testes in vitro levedura não apresentou características inibitótias frente ao patógeno Vibrio alginolitycus e tolerou os diferentes níveis de salinidade. Já no ensaio in vivo a levedura foi adicionada na água de cultivo na concentração de 1,0x104 UFC·mL-1 semanalmente para avaliar a manutenção e formação de flocos microbianos no cultivo de pós-larvas e estimar o seu efeito sobre o desempenho zootécnico de L. vannamei durante 30 dias. Para o ensaio in vivo a levedura foi suplementada na água de cultivo do camarão marinho cultivado sob diferentes sistemas de fertilização com reutilização parcial de água de biofloco maduro e fertilização orgânica da água anterior ao povoamento para formação do sistema de bioflocos. Foi observada diferença significativa (p<0,05) na interação tempo e sistemas de fertilização nos parâmetros de qualidade de água (amônia, nitrito, SST, SSV e SSed) e no ganho de peso semanal, bem como no direcionamento microbiano na concentração de sólidos e na sobrevivêcia. Os grupos tratados com M. guilliermondii apresentaram menor concentração de sólidos na água de cultivo ao final do período experimental e maior sobrevivência, com isso, conclui-se que a levedura M. guilliermondii pode ser aplicada no cultivo superintensivo de camarão sem renovação de água, apresentando efeitos imediatos na redução de sólidos gerados no sistema e na sobrevivência de L. vannamei. / Abstract : The aim of this work was to evaluate the performance of the marine yeast Meyerozyma guilliermondii on the water quality, microbiological and zootechnical parameters of Litopenaeus vannamei when added in the culture water of shrimp cultivated in zero exchange system using different fertilization strategies to form biofloc system. The yeast strain was isolated from the soil of the Lagoa da Conceição estuary and was evaluated in vitro regarding its growth kinetics at different salinities and the ability to inhibit pathogens. In the in vitro assay M. guilliermondii did not present inhibitory characteristics against the pathogen Vibrio alginolitycus and tolerated the different levels of salinity. In the in vivo tests, the yeast was added in the culture water at the concentration of 1.0x104 CFU·mL-1 weekly to evaluate the maintenance and formation of microbial flakes in post-larvae culture and to estimate its effect on the zootechnical performance of L. vannamei for 30 days. Therefore the yeast was supplemented in the culture water of marine shrimp grown under different fertilization systems, partial reuse of mature biofloc water and organic fertilization of the water prior to the stand for formation of the biofloc system. Weekly weight gain and water quality parameters (ammonia, nitrite, TSS, VSS and SS) have presented significant difference (p <0.05) in the interaction time and fertilization system as well as microbial targeting in solids concentration and survival. The groups treated with M. guilliermondii showed lower solids concentration at the end of the experimental period and higher survival rate. Therewith, concluding that the yeast M. guilliermondii can be applied in superintensive shrimp cultivation without water renewal, presenting immediate effects on the reduction of solids generated in the system and on the survival of L. vannamei.

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