A endocrinologia reprodutiva do muriqui do sul B. arachnoides foi avaliada em quatro fêmeas adultas pela dosagem de metabólitos fecais de estrógenos e em quatro machos adultos e um macho subadulto pela dosagem de metabólitos de testosterona e glicocorticóides durante um período de onze meses em duas diferentes condições restritivas, ilha de 600m2, Curitiba (PPC) e viveiro (15,40x5,85x4,70m) Rio de Janeiro (CPRJ). As fêmeas apresentaram grande variação individual nas concentrações de estrógenos e progestinas fecais ao longo do período de estudo, três não apresentaram atividade ovariana no período de outubro-dezembro e apenas uma apresentou atividade durante todos os períodos amostrados. Mesmo com níveis baixos de esteróides as fêmeas apresentaram comportamento perceptivo e cópulas. Os machos do PPC apresentaram níveis significativamente mais altos de glicocorticóides e níveis significativamente mais baixos de testosterona do que os machos do CPRJ (p<0,05) apresentaram. O macho subadulto apresentou níveis significativamente mais baixos para metabólitos de testosterona. Nos machos as cópulas ocorreram próximo às elevações das concentrações de testosterona. Em três situações grandes elevações dos níveis de glicocorticóides fecais puderam ser relacionadas a situações estressantes. Nosso estudo comprovou a eficácia do método empregado para monitoramento reprodutivo bem como para avaliar situações estressantes. / The reproductive endocrinology of the southern muriqui (Brachyteles. Arachnoids) was evaluated through the dosage of fecal metabolites steroids for 04 adult females and fecal metabolites of testosterone and glucocorticoids for 04 adult males and 01 subadult male. The study was conducted over an eleven month period at two environmental conditions: a) an island of 600 m2, with natural vegetation, at Curitiba Zoo (PPC) and b) a large cage of 15,40X5,85X4,70m at Rio de Janeiro Primatological Centre (CPRJ). It was observed that females had large strogen interindividual variation and fecal progestins: three females did not show ovarian activity over a partial period of the study, while ovarian activity was observed for all sample periods for one female. Despite the detection of low levels of steroids, proceptive behaviour and copulations were observed. The PPC males showed significant levels of glicorticoids and testosteorne when compared to the CPRJ males (p<0.05). The subadult male exhibited the lowest level of testosterone metabolites and those differences were significant when compared to the adult males (p<0.05). For all males, copulations occurred when testosterone levels were highest and peaks of glucorticoids were linked to stressfull situations. This study have shown that the method used was effective for reproductive monitoring as well as for evaluating stressfull situations.

A investigação de produtos naturais tem sido cada vez mais direcionada para o estudo de microrganismos, com destaque para aqueles do ambiente marinho. Neste trabalho foram estudadas linhagens bacterianas isoladas de tecidos da esponja Arenosclera brasiliensis, como parte de um estudo que tinha o objetivo de encontrar novas moléculas bioativas. O cultivo da linhagem bacteriana Pseudovibrio denitrificans Ab134 permitiu o isolamento e identificação de três compostos derivados de dibromotirosina, a fistularina-3 (26), o ácido verongidoico (27) e a 11-hidroxiaerotionina (28). Outros cinco compostos derivados de dibromotirosina foram detectados, em frações ainda impuras, através de análises por CLUE-qTOF e tiveram suas estruturas propostas de acordo com os íons de fragmentação observados no espectro de EMAR: aerotionina (29), um éster do ácido purpurocerático B (30), purealidina L (31) e aplisinamisina II (32). Este é o primeiro relato da produção dos derivados de dibromotirosina a partir de uma linhagem bacteriana e representa um forte indício de que tais compostos, comumente isolados de esponjas, são na verdade produzidos pela microbiota associada destes animais. O cultivo da linhagem fúngica Biatriospora sp. permitiu o isolamento e identificação de nove compostos diterpênicos da classe das fomactinas, sendo seis deles inéditos. As fomactinas são conhecidas por apresentarem potente atividade como inibidoras de receptores do PAF. As fomactinas S, P, U e I apresentaram bons resultados na inibição da ligação do PAF aos seus receptores. As fomactinas S e P foram também avaliadas em ensaio de re-população tumoral pós irradiação e foram capazes de inibir o fenômeno de re-população em concentração molar equivalente a antagonistas comerciais. Tal resultado sugere que a associação da radioterapia com antagonistas do PAF-R pode ser uma nova e eficiente alternativa terapêutica para inibição do crescimento de tumores. / Research on natural products is increasingly focusing on the study of microorganisms, especially those from the marine environment. In the present investigation, bacterial strains isolated from tissues of the sponge Arenosclera brasiliensis were studied in order to find new bioactive molecules. Cultivation of the bacterial strain P. denitrificans allowed the isolation and identification of three dibromotyrosine-derived compounds: fistularin-3 (26), verongidoic acid (27) and 11-hydroxyaerothionin (28). Another five dibromotyrosine-derived compounds were detected in still impure fractions by UPLC-qTOF analysis and had their structures proposed according to the fragmentation ions observed in the HRMS spectrum: aerothionin (29), the methyl ester of purpuroceric acid B (30), purealidin L (31) and aplisinamysin II (32). This is the first report of the production of dibromotyrosine derivatives by a bacterial strain and represents a strong indication that such compounds, commonly isolated from sponges, are actually produced by the associated microbiota of these animals. Cultivation of the fungal strain Biatriospora sp. allowed the isolation and identification of nine fomactin diterpenes, six of wich are new. Fomactins are known as inhibitors of PAF receptors. Fomactins S, P, U and I have shown good results in inhibiting the binding of PAF to their receptors. The fomatins S and P were also evaluated in the post-irradiation tumor re-population assay and were able to inhibit the re-population phenomenon at micromolar concentration equivalent to commercial antagonists. Such a result suggests that the association of radiotherapy with PAF-R antagonists may be a new and efficient therapeutic alternative in tumors.

O carcinoma epidermoide de cavidade oral (CECO) é um dos tumores mais comuns em câncer de cabeça e pescoço, com aproximadamente 300.000 novos casos e 145.000 mortes em todo o mundo. Apesar da intensa pesquisa e dos avanços recentes no diagnóstico e terapia, a taxa de sobrevivência dos pacientes ainda é baixa. Os estudos da metabolômica levaram a uma melhor compreensão do metabolismo do câncer, no seu desenvolvimento e progressão. Essas descobertas possibilitaram a identificação de biomarcadores metabólicos que podem auxiliar na identificação de doenças e tratamentos. O presente estudo buscou três objetivos: (1) Identificar e quantificar os metabólitos plasmáticos em portadores de CECO e em controles, utilizando técnicas de ressonância magnética nuclear (RMN); (2) Comparar a concentração plasmática de metabólitos de pacientes com CECO com a de seus controles estratificados por variáveis clínicas, patológicas, sociodemográficas e características de estilo de vida; (3) Avaliar se as concentrações de metabólitos estão relacionadas com a presença da doença (CECO), ajustadas pelas variáveis epidemiológicas e características de estilo de vida. Para a análise dos metabólitos, amostras de plasma sanguíneo de 47 casos e de 49 controles foram identificadas, quantificadas e comparadas com variáveis clínicas, patológicas, sociodemográficas e características de estilo de vida por meio de análises estatísticas. Os resultados mostram que todos os indivíduos portadores de CECO estiveram expostos em algum momento da vida aos fatores de risco (álcool, tabaco e má higiene bucal). Além disso, as variáveis mostraram interferir na concentração dos metabólitos, estes que apresentaram-se alterados, principalmente os que possuem relação com as vias metabólicas de obtenção de energia, sugerindo que o metabolismo de pacientes com CECO difere dos indivíduos sem a doença (controles) / Squamous cell carcinoma of the oral cavity (SCCOC) is one of the most common tumors in head and neck cancer, with approximately 300,000 new cases and 145,000 deaths worldwide each year. Despite intense research and recent advances in diagnosis and therapy, the patient\'s survival rate is still low. Metabolism studies have led to a better understanding of the metabolism of cancer in its development and progression. Theses findings allowed the identification of metabolic biomarkers that may aid to identificate diseases and treatments. This current study aimed at three objectives: (1) To identify and quantify plasma metabolites in SCCOC patients and controls using nuclear magnetic resonance (NMR) techniques; (2) To compare plasma concentration of metabolites of patients with SCCOC and its stratified controls by clinical, pathological, sociodemographics, and lifestyle characteristics; (3) To evaluate whether the metabolic concentrations are related to the presence of SCCOC, adjusted by epidemiological variables and lifestyle characteristics. In order to analyze the metabolites, blood plasma samples from 47 cases and 49 controls were identified, quantified and compared with clinical, pathological, sociodemographic, and lifestyle variables by means of statistical analysis. The results show that all subjects with SCCOC were exposed eventually to risk factors (alcohol consumption, smoking and bad oral hygiene). Furthermore, the variables showed to interfere in the concentration of metabolites, which have been altered, especially those that are related to metabolic pathways of obtaining energy, suggesting that the metabolism of patients with SCCOC differs from the individuals without the disease (controls)

Orientadora: Dulce Helena Siqueira Silva / Banca: Cintia Duarte de Freitas Milagre / Banca: Mariana Helena Chaves / Resumo: Sabe-se que os fungos exercem importantes papéis no cotidiano, sendo utilizados na produção de alimentos fermentados e de enzimas de interesse industrial, em processos de biodegradação e tratamento biológico de efluentes, além de auxiliar na agricultura como parte do corpo de decompositores, e ainda na defesa e crescimento de plantas em que vivem em simbiose. Adicionalmente, nos últimos anos, as pesquisas com fungos e outros micro-organismos têm-se intensificado pelo surgimento de evidências crescentes de seu potencial como fonte de substâncias bioativas para o desenvolvimento de agentes terapêuticos, como as penicilinas e cefalosporinas - antibióticos, a mevastatina e lovastatina - redutores de colesterol, ciclosporina e rapamicina-imunossupressores, entre outros. Muitos fungos endofíticos possuem potencial farmacológico, demonstrando atividades como citotóxica, antibacteriana, anticolinesterásica, antifúngica, antiplasmódica, entre outras. Além de indicarem ser fonte de uma grande variedade de novos metabólitos secundários, decorrente de sua quimiodiversidade marcante. Este contexto levou à investigação de uma linhagem fúngica isolada da alga marinha Asparagopsis taxiformis (Delile) Trevisan, identificada como Microascus intricatus. O cultivo desta linhagem em meio PDB por 28 dias, 65 frascos de Erlenmeyer forneceu o extrato AT-07, que foi submetido a partição com acetato de etila. As frações AT-07 F3, AT-07 F4 e AT-07 F6 foram submetidas a procedimentos cromatográficos e l... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fungi play important roles in our daily life as in the production of fermented food and enzymes for industrial applications, biodegradation processes and biological treatment of effluents, in addition to its roles in agriculture, enhancing decomposition, and defense and growth of plants living in symbiosis.Research involving fungi and other microorganisms has been intensified in the last decades owing to growing evidence of their potential as important sources of novel bioactive compounds for the development of therapeutic agents as penicillins, cephalosporins (antibiotics), mevastatin and lovastatin (cholesterol lowering agents), cyclosporine and rapamycin (immunosuppressors), among others.Several endophytic fungal strains exhibit pharmacological potential as cytotoxic, antibacterial, anticholinesterase antifungal, antiplasmodial activities, which has been markedly associated to the huge chemodiversity of their secondary metabolites.Such context prompted us to investigate one fungal strain isolated from marine red alga Asparagopsis taxiformis (Delile) Trevisan, which has been identified as Microascus intricatus.Cultivation of the fungal strain in PDB media for 28 days, Erlenmeyr flasks yielded extract AT-07 partition with etoac extract which was submitted to chromatographic procedures and led to the isolation of natural products belonging to diketopiperazines classes and one isoflavone.The isolated compounds were identified as cyclo-(Pro-Tir), cyclo-(ProPhe), cyclo-(Phe-Phe)... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Flávio Dutra de Resende / Resumo: O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito da suplementação de extrato de taninos (ET) e a inclusão de diferentes níveis de ureia na alimentação de bovinos Nelores na fase de crescimento durante o período da seca. A área de pastejo era formada por forrageira Urochloa brizantha cv. Marandu (PB = 5,9% e FDN = 74,8%). Os suplementos proteico energéticos eram ofertados, diariamente, na quantidade de 3 g/kg PC (PB = 26%). O arranjo dos tratamentos foi em fatorial 2 × 2: Fator 1 - baixa (3%) e alta (5%) de inclusão de ureia; Fator 2 - inclusão ou não de ET (0,7 g/kg MS de suplemento; SilvaFeed ByPro®). No primeiro experimento (n = 8, 293 kg ± 5,6 duplo quadrado latino), foi observada tendência de aumento da digestibilidade da PB com a inclusão de ET (P = 0,06). A alta ureia no suplemento promoveu uma tendência de aumento da ureia sérica nas primeiras horas após a suplementação (P = 0,08). Além disso, o tratamento com ureia interagiu com o tempo para N-NH3 no rúmen (P < 0,01), sendo maior às 6 horas pós-suplementação para alta ureia. O ET aumentou a riqueza e reduziu a diversidade bacteriana. A análise de componentes principais indicou que a variação da microbiota ocorreu principalmente em função das diferentes inclusões de ureia nos suplementos. No segundo experimento, [n = 64, 294 kg ± 15,2, delineamento em blocos casualizados, blocagem por peso corporal (PC)], verificou-se que o desempenho não foi influenciado pelos tratamentos (P ≥ 0,21). Em conclusão, o desempenho e os parâme... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of tannins extracts (ET) supplementation and different levels of urea inclusion in Nellore cattle feed in the growing phase during the dry season. The grazing area was constituted by Urochloa brizantha cv. Marandu (CP = 5.9% and NDF = 74.8%). The energy protein supplements were offered daily in the amount of 3 g/kg BW (CP = 26%). The treatment arrangement was in factorial 2 × 2: Factor 1 - low (3%) and high (5%) inclusion of urea; Factor 2 – With or without inclusion of ET (0.7 g / kg MS of supplement, SilvaFeed ByPro®). In the first experiment (n = 8, 293 kg ± 5.6 double latin square), a trend of increased digestibility of PB was observed with the inclusion of ET (P = 0.06). High supplemental urea promoted a tendency for serum urea to increase in the first hours after supplementation (P = 0.08). In addition, treatment with urea interacted with time for N-NH3 in the rumen (P <0.01), being greater at 6 hours post-supplementation for high urea. ET increased richness and reduced bacterial diversity. Principal component analysis indicated that microbiota variation occurred mainly due to the different urea inclusions in the supplements. In the second experiment, [n = 64, 294 kg ± 15.2, randomized block design, blocking by body weight (PC)], it was found that performance was not influenced by treatments (P ≥ 0.21). In conclusion, performance and digestive parameters were not affected by higher urea inclusion in the dry period and ET ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Maria Lucia Gonsales da Costa Araujo / Banca: Daniela Alonso Bocchini Martins / Banca: Rosineide Gomes da Silva Cruz / Resumo: Streptomyces clavuligerus é uma espécie produtora de múltiplos metabólitos secundários de interesse terapêutico: ácido clavulânico, um potente inibidor de beta-lactamases, e outras vinte clavamas, várias delas com atividade antifúngica; cefamicina C, um antibiótico beta-lactâmico usado para produzir vários antibióticos semissintéticos com ação contra bactérias anaeróbias; tunicamicina, uma mistura de homólogos de nucleosídeos inibidores da glicosilação de proteínas em procariotos e eucariotos; holomicina, uma ditiolopirrolona com atividades bacteriostática e citotóxica em mamíferos. Neste projeto foram estudadas as linhagens de S. clavuligerus ATCC 27064 (selvagem) e Hol.80 (mutante) em cultivos submersos. Os dados experimentais dos cultivos foram utilizados para análise cinética, na qual foram determinados parâmetros cinéticos e coeficientes de rendimento, e para simulação de distribuição de fluxos metabólicos, empregando-se modelo metabólico previamente construído em Tese de Doutorado e com o auxílio de programa computacional designado para esta finalidade. Cultivos da linhagem selvagem em biorreator convencional operado em batelada utilizando-se a combinação de maltose e lisina resultaram em produções de cefamicina C e ácido clavulânico de, respectivamente, 90 e 100 mgL-1, sem produção de holomicina. Sob mesmas condições, a linhagem mutante produziu 50 e 60 mgL-1 de cefamicina C e holomicina, respectivamente. Por outro lado, a combinação maltose, lisina e glutamato estimulou a produção de holomicina pela linhagem selvagem (95 a 110 mgL-1) e reduziu a produção tanto de cefamicina C como de ácido clavulânico em cerca de 65%. O mutante cultivado neste mesmo meio produziu cerca de 120 mgL-1 de cefamicina C e 75 mgL-1 de holomicina, com produção desprezível de ácido clavulânico. Estes resultados mostraram que diferentes fontes de... / Abstract: Streptomyces clavuligerus is a species that produces multiple secondary metabolites of therapeutic interest: clavulanic acid, a potent inhibitor of beta-lactamases, and other twenty clavams, several of them with antifungal activity; cephamycin C, a beta-lactam antibiotic used to produce various semi synthetic antibiotics with activity against anaerobic bacteria; tunicamycin, a mixture of homologues nucleoside that inhibits protein glycosylation in prokaryotes and eukaryotes; holomycin, a dithiolopyrrolone with bacteriostatic and cytotoxic activities in mammals. In this project we compared the behavior of strains ATCC 27064 of S. clavuligerus and Hol.80 mutant, non producer of clavulanic acid in submerged cultures. Kinetic parameters and yield coefficients were determined. The experimental data of the cultures were used to simulate the metabolic fluxes distribution for each strain. It was employed a metabolic model previously built up in a Doctoral Thesis and the simulation was carried on with the aid of a computer program designed for this purpose. Batch cultivations with the wild strain in conventional bioreactor using a combination of maltose and lysine resulted in a production of 90 mgL-1 of cephamycin C and 100 mgL-1 of clavulanic acid, without holomycin production. At same conditions, the mutant produced 50 and 60 mgL-1 of cephamycin C and holomycin, respectively. The same combination (maltose and lysine) supplemented with glutamate stimulated the production of holomycin by the wild strain (95 to 110 mgL-1), with a production of cephamycin C and clavulanic acid 65% lower. The mutant produced in the same medium approximately 120 mgL-1 of cephamycin C and 75 mgL-1 of holomycin. These results showed that different nitrogen sources promote the production of various bioactives. The most significant data obtained from the model simulations indicated that the holomycin biosynthesis... / Mestre

Orientador: Américo Garcia da Silva Sobrinho / Banca: Sarita Bonagurio Gallo / Banca: Cledson Augusto Garcia / Banca: Otávio Rodrigues Machado Neto / Banca: Carla Joice Härter / Resumo: Foram utilizadas cinquenta ovelhas Ile de France submetidas à programação fetal, que consistiu no fornecimento de dietas com dois níveis de energia, uma dieta controle para atender as exigências nutricionais do terço final de gestação (D0), e outra acrescida em 20% das exigências de energia para a categoria (D20). Avaliou-se a influência nutricional no escore de condição corporal, peso corporal, espessura de gordura e perfil metabólico das ovelhas, no momento do parto e aos 15, 30, 45 e 60 dias de lactação, assim como a repercussão nos cordeiros, tais como desempenho, características quantitativas da carcaça e de seus não-componentes, qualitativas da carne e na morfometria dos componentes gastrintestinais. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com dois tratamentos e 20 repetições (experimento com as ovelhas) e dois tratamentos e 10 repetições (experimento com os cordeiros), nível de significância de 5% e auxiliado pelo programa do SAS (versão 9.2). Nas comparações entre dietas e as variáveis respostas das ovelhas utilizou-se contrastes ortogonais polinomiais (1º, 2º, 3º e 4º grau). As médias das características corporais das ovelhas foram semelhantes (P>0,05), com decréscimo gradual ao longo dos 60 dias de lactação, para peso corporal, escore condição corporal e espessura de gordura. Observou-se efeito quadrático (P<0,05) nos valores médios de glicose, triglicerídeos e betahidroxibutirato, no decorrer dos 30 dias após o parto. O acréscimo em 20... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fifty Ile de France ewes were subjected to fetal programming, which consisted of feeding them diets with two levels of energy: one control diet formulated to meet the nutritional requirements of the last third of gestation (D0) and another with an additional 20% of the energy requirements of the category (D20). We evaluated the nutritional influence on the body condition score, body weight, fat thickness, and metabolic profile of ewes at calving and at 15, 30, 45, and 60 days in milk, as well as the impacts on their lambs; e.g., performance, quantitative traits of carcass and of noncarcass components, qualitative traits of their meat, and morphometry of their gastrointestinal components. A completely randomized design with two treatments and 20 replicates (experiment with the ewes) and two treatments and 10 replicates (experiment with the lambs) was adopted at a significance level of 5%, with analyses run in SAS software (version 9.2). Orthogonal polynomial contrasts (1st-, 2nd-, 3rd-, and 4th-degree) were used in the comparison between diets and the response variables of the ewes. Mean values for the body traits of the ewes were similar (P>0.05), decreasing gradually along the 60 days in milk for body weight, body condition score, and fat thickness. A quadratic effect was observed (P<0.05) for mean glucose, triglycerides, and beta-hydroxybutyrate values over the 30 days after calving. The additional 20% of the energy required for the last third of gestation in the ewe diets ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Derlene Attili de Angelis / Banca: Daiane Cristina Sass / Banca: Simone Possedente de Lira / Resumo: Passiflora incarnata encontra-se entre as plantas medicinais mais estudadas no âmbito farmacológico, cujas propriedades medicinais são atribuídas principalmente aos seus fitoconstituintes, tais como compostos fenólicos, alcalóides e flavonoides. Já foi constatado que os fungos endofíticos, aqueles vivem no interior de plantas, compartilhando com as mesmas uma interação simbiótica. Estes endófitos estão presentes em todas as plantas e muitas vezes partilham dos mesmos metabólitos que sua hospedeira. Devido ao seu enorme potencial de exploração, os fungos endofíticos são considerados um dos mais importantes recursos para a obtenção de novos agentes terapêuticos, pois um grande número de metabólitos estruturalmente novos e biologicamente ativos tem sido relatado para esses organismos. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi isolar fungos endofíticos presentes em folhas de P. incarnata e avaliar seu potencial biotecnológico, quanto à presença de compostos fenólicos, flavonoides e atividade antioxidante. Das 120 folhas analisadas, um total de 315 fungos endofíticos foi obtido; foi possível identificar 16 táxons distintos, dentre eles Aspergillus spp., Fusarium spp., Penicillium spp., Curvularia spp., Phoma spp., Neurospora spp., Trichoderma spp e representantes dos Mucoromycotina. A maioria dos isolados não apresentou esporulação. Os 60 endófitos utilizados nos ensaios produziram ao menos um composto fitoquímico, 60% (n=36) foram positivos para saponinas, 76% (n=46) para flavonoides, 93% (n=56) para compostos fenólicos, apenas 3% (n=2) para taninos, e nenhum fungo apresentou alcalóides no filtrado. O teor de flavonoides e fenóis totais do extrato de n-Butanol, determinado espectrofotometricamente revelou que a maioria dos fungos analisados foram bons produtores destes compostos, com destaque para os isolados ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Passiflora incarnata is among the most studied medicinal plants in the pharmacological field, whose medicinal properties are attributed mainly to its phytochemicals, such as phenolic compounds, alkaloids and flavonoids. It has been found that endophytic fungi, which are those living inside plants, share a symbiotic interaction with their hosts. These endophytes are present in all plants and often share the same metabolites as the plants they live. Due to their enormous potential for exploitation, endophytic fungi are considered one of the most important resources for obtaining new therapeutic agents, since a large number of structurally new and biologically active metabolites have been reported from these microorganisms. In this context, the objective of this work was to isolate endophytic fungi present in leaves of P. incarnata and to evaluate their biotechnological potential, regarding the presence of phytochemicals, phenolic compounds, flavonoids and antioxidant activity. From a total of 120 leaves analyzed 315 endophytic fungi were obtained. It was possible to identify 16 distinct taxa, among them Aspergillus spp., Fusarium spp., Penicillium spp., Curvularia spp., Phoma spp., Neurospora spp., Trichoderma spp. and Mucoromycotina representatives. Many showed no sporulation at all. All 60 endophytes used in the trials produced at least one phytochemical compound, 60% (n = 36) were positive for saponin, 76% (n = 46) for flavonoids, 93% (n = 56) for phenolic compounds, only 3% (n = 2) for tannins, and no one presented alkali in the filtrate. The total flavonoid and phenol contents of the n-Butanol extract, spectrophotometrically determined, showed that most of the analyzed fungi were good producers of these compounds, especially the isolate Trichoderma sp./LMA 1684 and Aspergillus sp. 1/LMA 1720 213.69 mg.g-1 and 187.3 mg.g-1 respectively, ... Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Fernando Broetto / Coorientador: Glyn Mara Figueira / Banca: Rogerio Lopes Vieites / Banca: José Abramo Marchese / Banca: Marco Antonio Martns Biaggioni / Banca: Pedro de Magalhães Padilha / Resumo: A malária é considerada uma doença infecciosa grave que atinge milhares de pessoas, principalmente em países tropicais e subtropicais. O controle dessa doença pode ser feito através de alguns tipos de medicamentos semissintéticos e bioativos naturais, entre eles os derivados da espécie Artemisia annua L.. Os principais derivados bioativos de A. annua L. são a artemisinina, diidroartemisinina, deoxiartemisinina, ácido artemisínico e arteanuina B. Com o aumento do valor dos princípios ativos naturais, estudos relacionados à pós-colheita e secagem de material vegetal tornam-se importantes para melhor conservação de suas propriedades fitoterápicas. O presente estudo teve como objetivos avaliar o efeito de diferentes tipos de processamento pós-colheita sobre a qualidade do fármaco e seus derivados. Folhas de A. annua L. foram submetidas a quatro tratamentos de desidratação sendo eles: campo em pleno Sol, campo na sombra, estufa de circulação de ar a temperatura de 28°C +/-2 e câmara de crescimento 15°C +/-2, por 29 dias. Foram realizadas as análises de teor de umidade, flavonoides, rendimento e quantificação de óleo essencial, avaliação do teor de artemisinina, diidroartemisinina, deoxiartemisinina, ácido artemisínico e arteanuina B. Cada tratamento apresentou influência distinta sobre o acúmulo de bioativos estudados. Entretanto, quando a biomassa foi processada em estufa com temperatura controlada, houve maior estabilidade para a maioria dos princípios ativos avaliados, com exce... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Malaria is considered a serious infectious disease that affects thousands of people, occurring in tropical and subtropical countries. Disease control can be done through some types of semi-synthetic and bioactive natural drugs, including them the derivatives of the species Artemisia annua L.. Some major bioactive derivatives of A. annua L. are artemisinin, dihydroartemisinin, deoxiartemisinin, artemisinic acid and arteanuin B. With the increase in the value of the natural active principles, studies related to post-harvesting and drying of plant material become important for better conservation of its phytotherapic properties. The present study aims to evaluate the effect of different types of post-harvest processing on the quality of the drug and its derivatives. The leaves of A. annua L. were submitted to 4 post-harvest treatments: Leaves of A. annua L. were submitted to 4 post-harvest treatments: field in full sun, field shaded, air circulation oven dry at 28 °C +/-2 and grown chamber 15 °C +/-2 for 29 days. The analysis of moisture content, flavonoids, quantification of essential oil yield, evaluation of the artemisinin, dihydroartemisinin, deoxiartemisinin, artemisinic acid and arteanuin B contents were carried out. Were analyzed treatment had a different influence on the bioactives under study, however, the oven dry demonstrated to have greater stability in most of the active principles with the exception of artemisinin ... / Doutor

Fungos filamentosos produzem uma ampla diversidade de metabólitos secundários que tem significativo impacto na sociedade. Alguns metabólitos são explorados pela sua atividade como antibióticos e fármacos e outros estão envolvidos em doenças, na interação dos fungos com plantas e animais. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi obter metabólitos secundários como pigmentos e metabólitos biologicamente ativos produzidos por fungos filamentosos. Foram selecionadas cinco linhagens sendo elas Diplodia sp, Fusarium graminearum, Monascus purpureus, Penicillium expansum e Penicillium sp. Estes fungos foram selecionados devido à sua capacidade de produzir e secretar pigmentos em meio ágar batata dextrose. Para confirmação ou identificação em nível de espécie dos fungos, foram utilizados o sequenciamento parcial da região intergênica (ITS) do DNA ribossomal e uma região do gene da β-tubulina. Quatro dos cinco fungos foram identificados como Fusarium graminearum, Monascus purpureus e duas linhagens de Penicillium chrysogenum (linhagens 1 e 2), sendo os primers para região ITS mais adequados para a identificação em nível de espécie. As quatro linhagens produziram pigmentos em resíduos agroindustriais sob cultivo submerso. Devido à diversidade de metabólitos com atividades antibióticas produzidos por fungos filamentosos, estes filtrados coloridos foram testados contra fungos e bactérias, sendo que de quinze filtrados testados onze apresentaram inibição contra fungos e bactérias de importância médica, alimentar e agronômica. Os filtrados de resíduo de uva e soro de queijo do fungo Penicillium chrysogenum 1 se destacaram, apresentando, também, atividade amebicida contra linhagem de Acanthamoeba polyphaga ATCC 30461. Utilizando a técnica ESI-MS, foi realizado um perfil metabólico do filtrado de soro de queijo, sendo confirmada a presença de penicilina G, pela massa molar protonada e pelo perfil de fragmentação por ESI-MS/MS. Além disso, foi sugerida a presença dos metabólitos penicilina V e rugulosina, com comprovada atividade antibiótica. Portanto, o fungo Penicillium chrysogenum 1 foi selecionado para estudos futuros de caracterização dos pigmentos produzidos e análise mais detalhada dos metabólitos ativos, devido ao status GRAS atribuído a essa espécie, aos poucos estudos relacionados à produção de pigmentos e ao potencial de produzir metabólitos ativos em resíduos agroindustriais. / Filamentous fungi produce a diverse array of secondary metabolites that have a remarkable impact on society. Some metabolites are exploited for their antibiotic and pharmaceutical activities, other are involved in diseases, due to the fungi interactions with plants or animals. In this context, the goal of this work was the obtention of secondary metabolites as pigments and biologically active metabolites produced by filamentous fungi. Five strains were selected Diplodia sp, Fusarium graminearum, Monascus purpureus, Penicillium expansum and Penicillium sp. These fungi were selected due to the ability to produce and secrete pigments on potato dextrose agar. To confirm and/or identify the fungi at species level, we used the partial sequencing of the intergenic region (ITS) of the ribosomal DNA and a region of the β-tubulin gene. Four of the five fungi were identified as Fusarium graminearum, Monascus purpureus and two strains of Penicillium chrysogenum (strains 1 and 2) and the primers to the ITS region were more suitable for the identification at species. The four strains produced pigments on agro-industrial residues under submerged culture. Because of the diversity of antibiotic activity metabolites produced by fungi, these coloured filtrates were tested against fungi and bacteria. From the fifteen tested filtrates, eleven showed inhibition against bacteria and fungi with medical, food and agronomical importance. The filtrates of grape waste and cheese whey of the fungus Penicillium chrysogenum 1 showed higher activity, including, amoebicidal activity against a strain of Acanthamoeba polyphaga ATCC 30461. Using an ESI-MS approach, a metabolic profile was obtained for the cheese whey filtrate, being confirmed the presence of penicillin G, because of the protonated molar mass and the fragmentation profile by ESI-MS/MS. In addition, was suggested the presence of the metabolites penicillin V and rugulosin, all with proven antibiotic activity. Therefore, the fungus Penicillium chrysogenum 1 was selected for future studies as the characterization of the produced pigments and more detailed analysis of the active metabolites, due to the GRAS status attributed to this specie, to the few studies related to the pigments production and to the potential to produce active metabolites on agro-industrial residues.