A cana-de-açúcar (Saccharum sp.) chegou ao Brasil com a implementação das primeiras capitanias. Hoje ela é cultivada em praticamente todos os estados brasileiros, sendo processada para a produção de açúcar e álcool combustível. Para suprir este mercado crescente com plantas de alta qualidade é necessária a utilização da técnica de cultura de tecidos aplicada à microprogação in vitro para produzir mudas livres de doenças e em larga escala. Porém a contaminação microbiana é um fator determinante no sucesso da produção de plantas micropropagadas, sendo responsável por grandes perdas no processo. Dentro deste contexto, o presente trabalho teve como principal objetivo encontrar antibióticos capazes de reduzir as perdas por contaminação bacteriana no processo produtivo de plantas micropropagadas de cana-deaçúcar sem afetar o desenvolvimento vegetal. Para tanto, foram realizados o isolamento e identificação dos contaminantes bacterianos presentes no material micropropagado, a seleção dos principais antibióticos capazes de inibir o crescimento destes contaminantes e posteriormente um processo de antibioticoterapia foi estabelecido. Os resultados obtidos através da identificação evidenciaram que a maioria dos contaminantes bacterianos é composta por microrganismos endofíticos, sendo o gênero Gluconacetobacter o contaminante encontrado com mais frequência. Os resultados dos testes de suscetibilidade mostraram que nenhum antibiótico é 100% eficaz no controle geral do crescimento bacteriano, porém o antibiótico rifampicina se mostrou mais eficiente quando usado na concentração mínima de 50 g/mL e quando realizada a antibioticoterapia não afetou o crescimento das plantas micropropagadas. / Sugarcane (Saccharum sp.) arrived in Brazil with the first captaincy implementation. Nowadays, it is cultivated in almost all Brazilian states, processed to produce sugar and alcohol as fuel. In order to supply this growing market with high quality plants, it is necessary to use the technique of tissue culture applied to in vitro micropropagation to produce seedlings free of disease in large scale. But the microbial contamination is a determinant factor for the success of micropropagated plants production; it is responsible for great losses in the process. Within this context, the present work aimed to find antibiotics that can reduce losses by bacterial contamination in the production process of sugarcane micropropagated plants without affecting its development. Therefore, we have performed the isolation and identification of bacterial contaminants present in micropropagated material, the selection of the main antibiotics capable of inhibiting the growth of these contaminants and then a process of antibiotic therapy was established. The results obtained through the identification evidenced that most of the bacteria contaminants is composed of endophytic microorganisms, and the genus Gluconacetobacter was the contaminant found more often. The results of susceptibility tests showed that no antibiotic is 100% effective in the general control of bacterial growth, but the antibiotic rifampicin was more efficient when used at the minimum concentration of 50 g/mL and when performed with antibiotic therapy did not affect the growth of micropropagated plants.

O E. benthamii apresenta grande aptidão de cultivo no Brasil, principalmente em regiões de clima frio e com geadas frequentes, isso se deve a sua origem a oeste de Sydney na Austrália, onde as temperaturas são muito baixas, com ocorrência de geadas. Levando-se em conta o seu ótimo desempenho silvicultural, genótipos selecionados certamente representam uma excelente alternativa para plantios futuros. A clonagem de genótipos superiores é realizada através da propagação vegetativa de árvores adultas, e requer material fisiologicamente juvenil ou rejuvenescido. Técnicas especiais são necessárias para reverter árvores adultas a juvenilidade e resgatar condições favoráveis para promover o enraizamento e crescimento. Dentre as técnicas de propagação utilizadas para o resgate de plantas adultas destacam-se o corte raso (decepa), anelamento, estaquia, miniestaquia, enxertia e micropropagação. No caso específico dos eucaliptos para obtenção de brotações, o método de resgate mais utilizado pelas empresas florestais é o corte raso da árvore ou anelamento, técnicas que proporcionam uma alta taxa de enraizamento de estacas, devido à eficiente reversão a juvenilidade. Porém, quando existe a necessidade de preservação do indivíduo, justifica-se o uso de técnicas não destrutivas, evitando dessa forma a morte da árvore matriz. O Presente trabalho objetivou após a seleção in loco de fenótipos com características silviculturais superiores, resgatar (através de técnicas não destrutivas), conservar e multiplicar matrizes adultas de E. benthamii, avaliando-se qual(is) técnica(s) apresenta(m) melhor(es) resultado(s) para a clonagem das mesmas. Para tanto, utilizou-se brotações dos primeiros galhos da copa, brotações epicórmicas (megaestaca), brotações que surgiram provenientes do anelamento e brotações oriundas da poda dos galhos da copa, as quais foram submetidas às técnicas de estaquia, enxertia e micropropagação para cada tipo de broto. Apesar de ter ocorrido variação da porcentagem entre os clones, a megaestaca mostrou ser a melhor alternativa para o estabelecimento in vitro de plantas adultas de E. benthamii, sendo recomendada sua utilização para o resgate de material genético adulto, estabelecido em condições de campo. Todas as matrizes de E. benthamii foram resgatadas com sucesso, e no intuito de formar um banco de germoplasma, um minijardim clonal foi instalado com as mudas que apresentaram melhor qualidade, que poderá ser utilizado para futuros testes e formação de mudas. / The E. benthamii presents a great aptitude for cultivation in Brazil, especially in cold climates and with frequent frosts, this is due to your west of Sydney origin in Australia, where temperatures are very low, with frosts. Taking into account their optimal silvicultural performance, selected genotypes will certainly represent an excellent alternative for future plantings. The cloning of superior genotypes is accomplished by vegetative propagation of mature trees, and requires physiologically juvenile or rejuvenated material. Special techniques are necessary to reverse the juvenile and adult trees recover favorable conditions to promote rooting and growth. Among the propagation techniques used for the rescue of mature plants stand out clear-cutting (coppicing), annealing, cutting, minicutting, grafting and micropropagation. In the specific case of eucalyptus to obtain propagules, the most rescue method used for the forestry companies are clearcutting or annealing, techniques that provide a high rate of rooting, due to efficient reversion to juvenility. However, when there is a need to protect the individual, justifies the use of non-destructive techniques, thus avoiding the death of the tree array. The present study aimed to spot after the selection of phenotypes with characteristics superior silvicultural, rescue (through non-destructive techniques) to retain and multiply matrices adult the E. benthamii, evaluating which technique that present the best result for the cloning of the same. So we used to shoot the first cup of twigs, shoots, epicormic shoots that emerged from the annealing and shoots arising from the pruning of the branches of the crown, which were submitted to the techniques of cutting, grafting and micropropagation for each type of bud. Considering the percentage variation between the clones, the epicormic shoots showed to be the best alternative for the in vitro establishment to the E. benthamii adult plants, being recomended its utilization to the adult genetic material rescue, All the tested E. benthamii plants were rescued with sucess, and in the aim to stablish germoplasm bank, a clonal mini garden was instaled with the plantlets that present the best quality.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da enxertia seriada e micropropagação no rejuvenescimento de matrizes adultas de Tectona grandis. A experimentação foi realizada nas empresas Floresteca S.A e Bioteca Ltda, Mato Grosso, utilizando três materiais genéticos diferente, sendo dois clones, com 35 anos idade e mudas de semente. Como técnica de macropropagação optou-se pela enxertia seriada com delineamento inteiramente aleatorizado com três tratamentos representados pelos materiais genéticos com sete repetições. Para micropropagação, utilizou-se meio MS modificado. O experimento in vitro foi dividido em etapas: resgate do meristema com delineamento inteiramente aleatorizado, com os tratamentos sendo três materiais genéticos com trinta repetições; estabelecimento da cultura com os tratamentos arranjados em fatorial 3x5 sendo três materiais genéticos com cinco concentrações de BAP, totalizando quinze tratamentos com cinco repetições; multiplicação/rejuvenescimento com delineamento inteiramente aleatorizado, com os tratamentos arranjados em fatorial 3x5 sendo três materiais genéticos com cinco subcultivos, totalizando quinze tratamentos com três repetições e enraizamento das microestacas. Para macroprogação, o parâmetro avaliado foi a percentagem de pega dos enxertos. Para micropropagação, na fase de resgate, avaliou-se o número de meristemas viáveis; na fase de estabelecimento da cultura, avaliou-se o tamanho, número de nós e número de folhas dos explantes; e na fase de multiplicação/rejuvenescimento, avaliou-se o desenvolvimento de brotos nos sucessivos subcultivos. Os enxertos das mudas obtidas por semente apresentaram brotação aos sete dias de enxertados comparados aos clones que iniciaram as brotações aos quinze dias de enxertados. A sobrevivência dos meristemas apicais introduzidos que não apresentaram oxidação ou contaminação foi superior a 84%. A concentração de 1,5 mg.L-1 de BAP foi a mais significativa na fase de estabelecimento da cultura. O número de brotação e o rejuvenescimento do material adulto aumentaram à medida que aumentou o número de subcultivos, bem como a percentagem de enraizamento. O estabelecimento de minijardim clonal de Tectona grandis é possível mediante uso de brotações rejuvenescidas in vitro. / The aim of this study was to evaluate the effect of serial grafting and micropropagation in rejuvenation of Tectona grandis. The experiments were carried out in Floresteca SA and Bioteca Ltda. companies, Mato Grosso, using two clones and seedlings. The clones were 35 years old and the seedlings were six months old. Serial grafting was chosen for macropropagation technique on a completely randomized statistical design, with three treatments corresponding to genetic material with seven replications. For micropropagation, solid modified MS medium was used. The in vitro experiment was divided into stages: meristem rescue on a completely randomized design with the treatments corresponding to three genetic material with seven replications; establishment in vitro culture on completely randomized design arranged in 3x5 factorial scheme, corresponding to three genetic material with five concentrations of BAP resulting in fifteen treatments with five replications; multiplication/rejuvenation on completely randomized design arranged in 3x5 factorial scheme, corresponding to three genetic material with five subcultures concentrations of resulting in fifteen treatments with three replications on a completely randomized 3x5 and microcuttings rooting. For macropropagation, the parameter evaluated was the percentage of grafting takes. For micropropagation, in the rescue phase, it was evaluated the number of viable meristems. In the establishment phase of culture, the parameters evaluated were the size, number of nodes and number of leaves of the explants; and in the phase of multiplication/rejuvenation it was evaluated the development of the shoots in successive subcultures. The shoots sprouting from seedlings grafts at seventh day compared with grafted clones that started sprouting on the fifteenth day after grafting. The survival of apical meristems without oxidation or contamination was above 84%. The concentration of BAP (1.5 mg.L-1) that was the most significant in the establishment phase of culture. The number of shoots produced and the rejuvenation process increases with increasing number of subcultures, as well as the percentage of rooting. The establishment of clonal minigarden of Tectona grandis coud be possible through rejuvenation of trees in vitro.

O gênero Eucalyptus tem se mostrado um dos mais vantajosos na produção de bens e serviços florestais pela silvicultura brasileira, principalmente por sua rapidez no crescimento. A propagação vegetativa de Eucalyptus spp. permite a rápida multiplicação de genótipos selecionados alcançando aumento imediato na produtividade dos plantios clonais. Com o objetivo de avaliar o efeito do "pulse" na propagação in vitro de Eucalyptus grandis, testou-se as interações entre concentrações de BAP (Benzilaminopurina), tempo de exposição e pH, bem como as alterações morfológicas que esses fatores causam na estrutura interna dos explantes. O trabalho foi realizado na Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz" - ESALQ/USP. Doses crescentes de BAP (0, 200, 400 e 600 mg.L-1) expostas durante três tempos (1, 2 e 3 horas) com dois valores de pH (3,0 e 5,8) representavam os tratamentos. Após 21 dias de cultivo avaliou-se o número de brotos por tratamento, taxa de multiplicação e biomassa produzidas para cada tratamento. As análises histológicas também foram realizadas após o fim do experimento. O fator pH não apresentou nenhuma interação com os demais fatores. A concentração 200 mg.L-1 de BAP durante 1 e 2 horas apresentaram os tratamentos mais significativos na multiplicação do E. grandis. Doses com 600 mg L-1 de BAP apresentaram-se tóxicas aos explantes. Houve intensificação da divisão celular no parênquima cortical e procâmbio na região basal do explante representada pelo surgimento de meristemóides evidenciando a maior capacidade de resposta organogênica desses tecidos em resposta aos tratamentos 200 mg.L-1 de BAP durante 1 e 2 horas. O uso de "pulse" como ferramenta na micropropagação de Eucalyptus grandis representa uma alternativa viável para redução de tempo e custos. / The genus Eucalyptus has proved to be one of the most profitable means of producing goods and supplying forestry services used by Brazilian silviculture, mainly because of its fast growth. The vegetative propagation of Eucalyptus spp. allows the fast reproduction of selected genotypes aiming at the immediate increase of cloned plantations. By analyzing the pulse treatment effect in vitro propagation of Eucalyptus grandis the evaluation between the concentrations of Bensylaminopurine (BAP), time exposure and pH interaction such as its morphological changes that those factors caused in the internal structure of the explants. This work has been carried out at Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz" - ESALQ/USP. The treatments consisted of increasing doses of Benzylaminopurine (0, 200, 400 and 600 mg.L-1), three exposure time (1, 2 and 3 hours) with two values of pH (3,0 e 5,8). The results were taken after 21-day of cultivation. The number of sprouts per treatment, the reproduction rate and the produced biomass for each treatment were recorded. In addition the histological analyses were aslo carried out at the end of the experiment. The pH did not present any form of interaction with the other factors but he most significant treatments of E. grandis reproduction was found in the concentration 200 of BAP during the 1st and 2nd hour. The dose 600 mg.L-1 of BAP turned out to be toxic for the explants. It was observed that there was an increase of cell division in the cortical parenchyma and procambium represented by the arising of meristems resulting to a greater capacity of organogenetic answer of these tissues due to the response of 200 mg.L-1 of BAP treatment during 1st and 2nd hours. The use of pulse treatment as a tool of micropropagation of Eucalyptus grandis represented a feasible alternative for the reduction of time and cost.

O presente trabalho teve por objetivo avaliar a atuação de biorreguladores (ANA, BAP, TDZ e 2iP) no desenvolvimento morfogenético de microplantas de pupunheiras. Para tanto, a cada 28 dias aferiram-se o número de propágulos, o desenvolvimento radicular, o comprimento e a taxa de crescimento da parte aérea, número de folhas, oxidação, número de centros meristemáticos na região basal dos explantes e nas bainhas e/ou nos primórdios foliares dos propágulos, número de complexos celulares pró-embriogênicos e as rotas e padrões morfogênicos. Todos os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado. Os dados qualitativos foram apresentados como porcentagens e médias gerais e os dados quantitativos foram submetidos à análise de regressão polinomial ou exponencial. As avaliações morfofisiológicas evidenciaram que o TDZ isoladamente favoreceu o desenvolvimento de gemas adventícias, embora curtas e por vezes, com acúleos. Embriões somáticos somente não se desenvolveram em tratamentos contendo a presença isolada de BAP, TDZ e 2iP, nos demais tratamentos observou-se um comportamento exponencial, cujo número foi reduzido e variou apenas em função do período de cultivo. Maior número de raízes foi observado no tratamento contendo ANA em associação ao BAP, embora o tratamento controle tenha induzido maior porcentagem de explantes enraizados e com maior comprimento, sendo o único a evidenciar ramificação. A presença isolada do TDZ promoveu maior comprimento da parte aérea e sua associação ao ANA promoveu a maior taxa de crescimento. O melhor desenvolvimento da parte aérea de microplantas e explantes de pupunheiras ocorreu em meio de cultura MS isento de biorreguladores ou em meio constituído pela associação entre ANA/TDZ aos 140 dias de cultivo, sendo que o acréscimo isolado das citocininas BAP, TDZ e 2iP no meio de cultura MS promoveu tardiamente a taxa máxima de crescimento. A adição isolada do 2iP no meio de cultura promoveu intensa oxidação nas primeiras folhas desenvolvidas das microplantas em explantes de pupunheiras e a aplicação isolada do TDZ ou associada à ANA promoveu anomalias como dobramento foliar e desenvolvimento de acúleos. O monitoramento das rotas e padrões morfogênicos evidenciou que embriões somáticos com origem multicelular originaramse diretamente na região central da base dos explantes nos tratamentos isentos de biorreguladores, na presença isolada de ANA e de TDZ ou na associação de ambos. Pró-embriões com origem unicelular foram induzidos também na presença isolada de ANA ou TDZ e nas associações ANA/BAP ou ANA/TDZ, sendo que pró-embriões com origem multicelular foram induzidos na presença isolada do TDZ a partir da atividade meristemática apical caulinar e a partir da (bi) polarização de elevado número de centros meristemáticos presentes na extremidade distal da base destes explantes. Gemas adventícias com origem multicelular diretamente da extremidade proximal da base dos explantes foram induzidas em maior freqüência no tratamento isento de biorreguladores e no tratamento contendo ANA/TDZ. Entre os primórdios foliares dos explantes, estas estruturas foram freqüentemente induzidas em tratamentos contendo a presença isolada de ANA. / This study aimed to evaluate the role of bioregulators (NAA, BAP, TDZ and 2iP) on the morphogenetic development of pejibaye microplants. For this, every 28 days, the number of propagules, the root development, the length and the growth rate of shoots, the number of leaves, the oxidation, the number of meristematic centers in the explants basal region and in the leaf sheaths and/or in the propagules leaf primordia, the number of pro-embryogenic cell complex and the morphogenic routes and patterns were measured. All experiments were conducted in a randomized design. Qualitative data were presented as percentages and general averages, and quantitative data were subjected to polynomial regression or exponential analysis. The morphophysiological evaluations showed that the TDZ alone favored the development of adventitious buds, although short, and sometimes with thorns. Only in the treatments with the isolated presence of BAP, TDZ and 2iP, somatic embryos were not developed. For the other treatments there was an exponential behavior, in which the number of somatic embryos was reduced and varied according only to the cultivation period. Although a greater number of roots was observed in the treatment, in which NAA was associated with BAP, the control treatment has induced the highest rate of rooted explants and with greater root length, and has been the single one that produced branches. The isolated presence of TDZ promoted the greater shoot length, and its association with ANA promoted the highest growth rate. The best shoot development of pejibaye microplants and explants occurred in the MS bioregulator-free culture medium of or in the medium with NAA/TDZ association, at140 days of cultivation. Moreover, the isolated addition of the cytokinins BAP, TDZ and 2iP in the medium, later promoted the highest growth rate. In pejibaye explants the addition of 2iP alone promoted intense oxidation of the first developed leaves and the application of TDZ alone or associated with ANA promoted anomalies such as folding leaf and thorn development. The monitoring of the morphogenetic routes and patterns showed that in the treatments that were bioregulator-free, or with the isolated presence of NAA and TDZ, or the association of both, somatic embryos, from multicellular origin, raised up directly in the central region of the explants base. Pro-embryos from unicellular origin were also induced in the isolated presence of NAA or in NAA/BAP and NAA/TDZ associations. Moreover, in the isolated presence of TDZ, pro-embryos from multicellular origin were induced from shoot apical meristem activity and from the (bi) polarization of a large number of meristematic centers in the distal extremity of the explants base. Adventitious buds with multicellular origin from the proximal extremity of the explants base were induced more frequently in the bioregulator-free treatment and in the treatment with NAA/TDZ. Between the leaf explants primordia, adventitious buds were often induced by the treatments with the isolated presence of ANA.

As atividades que envolvem a floricultura vêm se destacando positivamente no cenário econômico do agronegócio brasileiro. Dentre as espécies de plantas utilizadas para este fim ressaltam-se as espécies pertencentes à família botânica Asteraceae, principalmente as do gênero Chrysanthemum. A espécie C. cinerariaefolium Vis. (Piretro da Dalmácia) é mundialmente cultivada visando à produção de aleloquímicos que apresentam atividades de inseticidas naturais (piretrinas). No Brasil chegou a ser produzida para esse fim em larga escala, no município de Taquara-RS na década de 30 a 40. Recentemente o interesse de seu cultivo tem aumentado como uma alternativa natural de manejo de pragas como planta ornamental, principalmente para jardins. Contudo, o fato de não produzir sementes férteis limita sua capacidade de propagação massal. Visando aperfeiçoar sua micropropagação foram realizados dois experimentos. No experimento 1 foi avaliado aos 30 dias de cultivo a influência de cinco concentrações de hipoclorito de sódio (10, 20, 30, 40 e 50% do produto comercial Mazzarolo) e cinco tempos de permanência na solução durante a desinfestação dos explantes (5, 10, 15, 20, 25 min.). Ao todo foram isolados 125 meristemas totalizando 25 tratamentos com cinco repetições. Os explantes isolados foram inoculados no meio de isolamento, o qual foi constituído de MS + 1,0 mg.L-1 de BAP + 0,1 mg.L-1 de GA3 + 0,01 mg.L-1 ANA + 30 g.L-1 de Sacarose em 7,0 g.L-1 de Agar. No experimento 2 foi avaliado a influência das diferentes concentrações de hipoclorito e dois tempos de permanência na solução desinfetante sobre a porcentagem de necrose, estruturas amorfas, plântulas formadas e comprimento de brotos. As plântulas regeneradas do experimento 1 foram inoculadas no meio de multiplicação que constou do MS + 0,4 mg.L-1 de Thiamina HCl + 100 mg.L-1 de Mio-Inositol + 0,05 mg.L-1 de ANA + 1,0 mg.L-1 de BAP + 40 g.L-1 de Sacarose e 7,0 g.L-1 de Agar. O pH dos meios foi ajustado em 5,9 antes da autoclavagem. Os resultados obtidos no experimento 1 indicaram que quanto maior o tempo de permanência na solução, maior a porcentagem de necrose. Porém, quanto menor a permanência maior a taxa de contaminação microbiana. No experimento 2, observou-se que a porcentagem de necrose é maior na concentração de 50%. Não houve influência dos fatores analisados na produção de estruturas amorfas. Para o número de brotos/explante e comprimento de brotos, o melhor desempenho se deu na solução 30%. Porém, a taxa de brotos por explante diminuiu à medida que aumentou o tempo de permanência na solução. Com relação ao comprimento dos brotos, os melhores resultados foram observados até o tempo de 15 minutos de permanência. Assim conclui-se que C. cinerariaefolium Vis. responde positivamente ao cultivo in vitro. A taxa de necrose aumenta à medida que aumenta a concentração de hipoclorito. Por outro lado, a taxa de contaminação aumenta à medida que diminui a concentração da solução desinfetante. A concentração de hipoclorito de sódio e o tempo de permanência na solução desinfetante afetam o número e o comprimento de brotos produzidos nos subcultivos. / The activities that involve floriculture have distinguished positively in the economic scenario of the Brazilian agribusiness. Among the plant species used for that purpose it can be distinguished the species belonging to the botanical family Asteraceae, mainly from the genus Chrysanthemum. The species C. cinerariaefolium Vis. is worldwide cultivated in order to produce the alelochemicals, which have activities of natural insecticides (pyretrine). In Brazil it was produced in large scale, in the Taquara-RS County in the decade of 30 to 40. Recently the interest on its cultivation has increased as natural alternative of pest management as ornamental plant, mainly in yards. However, the fact of no seed is produced by the plant that limits its capacity of massal production. In order to optimize its micropropagation two experiments were developed. In the experiment 1 it was evaluated 30 days after cultivation the influence of five concentrations of sodium hipochlorine (10, 20, 30, 40 and 50% of the commercial product Mazzarolo), and five time lengths of the explants permanence in the disinfecting solution (5, 10, 15, 20 and 25 min.). It was isolated 125 meristems, 25 treatments with five replications. The isolated explants were inoculated in isolation media, that was constituted of MS + 1.0 mg.mL-1 of BAP + 0.1 mg.L-1 of GA3 + 0.01 mg.L-1 ANA + 30 g.L- 1 of sucrose in 7.0 g.L-1 of Agar. In the experiment 2 it was evaluated the influence of different concentrations of hipochlorine and two length of time in disinfection solution measuring the percentage of necrosis, amorphous structures, seedlings formed and length of the sprouts. The regenerated seedlings from experiment 1 were inoculate in a medium of multiplication that was of MS + 0.4 mg.L-1 of Thiamine HCl + 100 mg.L-1 of Mio-Inositol 0.05 mg.L-1 of ANA + 1.0 mg.L-1 of BAP + 40 g.L-1 of sucrose and 7.0 g.L-1 of Agar. The pH of the medium was adjusted to 5.9 before the autoclaving process. The results obtained in the experiment 1 indicated that the higher the time length in the solution, the higher is the percentage of necrosis. However, the higher is the permanence of higher rate of microbial contamination. In the experiment 2; it was observed that the percentage of necrosis is higher at the concentration of 50%. There was no influence of the analyzed factors in the yield of amorphous structures. For the number of sprouts/explants and length of sprouts, the better performance was in the solution of 30%. However, the rate of sprouts per explants diminished as the length of time in the solution increased. The best results for sprout length were obtained up to 15 minutes of permanence. Therefore, it can be concluded that C. cinerariaefolium Vis. responds positively to in vitro culture. The rate of necrosis increases as the hipochlorine concentration is higher. On the other hand, the contamination rate increases as the disinfection solution diminishes. The concentration o hipochlorine sodium as the length of time of permanence in the initial disinfecting solution used during the explants disinfection affects the number and the sprout length produced during the subculture.

O crescente aumento no uso da micropropagação de teca como forma de produção de clones com qualidades genotípicas e fenotípicas selecionadas a partir de árvores de elite, determinou a importância desse método, pois origina plantações com maior qualidade e uniformidade, agregando maior valor ao preço da madeira no mercado. O uso de sementes para a obtenção de mudas é uma técnica menos onerosa, porém resulta em plantas com tamanhos desiguais e não há um padrão na qualidade da madeira, essa técnica depende também da época de produção de sementes e, portanto é restrita a um período do ano. A micropropagação permite a clonagem em larga escala das árvores de elite em tempo e espaço reduzidos, podendo ser realizada em qualquer época do ano, além disso, permite a formação de mudas totalmente livres de pragas e patógenos. Faz-se necessário, maiores estudos com meio de cultura para Tectona grandis, pois os materiais relacionados a esse assunto são escassos. Para que a técnica do cultivo in vitro da teca seja incrementada, objetivou-se nesse experimento, otimizar o crescimento dos explantes de três clones diferentes, testando a eficiência de 6 meios de cultura com diferentes formulações nutricionais e constatar qual deles apresenta a melhor resposta para cada clone. O estudo contou com 6 tratamentos (MS, Básico, M1, M2, M3 e M4), durante oito épocas de avaliação (0, 7, 14, 21, 28, 35, 42 e 49 dias), para três clones de Tectona grandis (61, 62 e 68), com três repetições por tratamento/clone, utilizando o delineamento experimental inteiramente casualizado. A avaliação do crescimento foi feita por meio do peso de matéria fresca (PMF), matéria seca (PMS) e a taxa de crescimento relativo (TCR) proporcionado pelos meios. O PMF foi usado para obtenção do PMS e cálculo da TCR. Baseado nos valores do PMS obtidos, para o clone 61, constatou-se a formulação do meio Básico (PMS = 0,38 g), como a mais eficiente. Para o clone 62, o meio mais responsivo foi M4 (PMS = 0,47 g) e no clone 68, destacou-se o meio M3 (PMS = 0,71 g). Quanto a TCR, não foi encontrada diferença estatística significativa para nenhum dos 6 meios de cultura levando-se em conta os três clones. / The increasing use of teak micropropagation as a way of producing clones with genotypic and phenotypic qualities selected from elite trees, established the importance of this method, it leads to higher crop quality and consistency, adding more value to the price of wood business. The use of seeds to obtain seedlings has a less cost, but it results in plants with unequal sizes and wood quality without a pattern. This technique also depends on the time of seed production and therefore is restricted to a year period. Micropropagation allows cloning elite trees in large-scale and reduced time and space. It can be performed at any time of year, in addition, allows the formation of plants totally free of pests and pathogens. It is necessary more studies with culture medium for Tectona grandis, because the materials related to this subject are scarce. To increase the technique of teak in vitro cultivation, this experiment aimed to optimize the growth and development of explants from three different clones, testing the effectiveness of six culture media with different nutritional formulations and find which one offers the best answer to each clone. The study included six treatments (MS, Basic, M1, M2, M3 and M4) for eight periods (0, 7, 14, 21, 28, 35, 42 and 49 days) for three clones of Tectona grandis (61, 62 and 68) with three replicates per treatment/clone, in a randomized experimental design. The growth assessment was performed by the fresh matter weight (FMW), dry matter weight (DMW) and relative growth rate (RGR) provided by the media. The FMW was used to obtain the DMW and to calculate RGR. Based on DMW values obtained for clone 61, was found that the formulation of Basic medium (DMW = 0.38 g) was the most efficient. For clone 62, the most responsive medium was M4 (DMW = 0.47 g) and to clone 68, M3 (DMW = 0.71 g) was the highlighted medium. As the RGR, it was found no statistically significant difference for any of the six culture media taking into account the three clones.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da enxertia seriada e micropropagação no rejuvenescimento de matrizes adultas de Tectona grandis. A experimentação foi realizada nas empresas Floresteca S.A e Bioteca Ltda, Mato Grosso, utilizando três materiais genéticos diferente, sendo dois clones, com 35 anos idade e mudas de semente. Como técnica de macropropagação optou-se pela enxertia seriada com delineamento inteiramente aleatorizado com três tratamentos representados pelos materiais genéticos com sete repetições. Para micropropagação, utilizou-se meio MS modificado. O experimento in vitro foi dividido em etapas: resgate do meristema com delineamento inteiramente aleatorizado, com os tratamentos sendo três materiais genéticos com trinta repetições; estabelecimento da cultura com os tratamentos arranjados em fatorial 3x5 sendo três materiais genéticos com cinco concentrações de BAP, totalizando quinze tratamentos com cinco repetições; multiplicação/rejuvenescimento com delineamento inteiramente aleatorizado, com os tratamentos arranjados em fatorial 3x5 sendo três materiais genéticos com cinco subcultivos, totalizando quinze tratamentos com três repetições e enraizamento das microestacas. Para macroprogação, o parâmetro avaliado foi a percentagem de pega dos enxertos. Para micropropagação, na fase de resgate, avaliou-se o número de meristemas viáveis; na fase de estabelecimento da cultura, avaliou-se o tamanho, número de nós e número de folhas dos explantes; e na fase de multiplicação/rejuvenescimento, avaliou-se o desenvolvimento de brotos nos sucessivos subcultivos. Os enxertos das mudas obtidas por semente apresentaram brotação aos sete dias de enxertados comparados aos clones que iniciaram as brotações aos quinze dias de enxertados. A sobrevivência dos meristemas apicais introduzidos que não apresentaram oxidação ou contaminação foi superior a 84%. A concentração de 1,5 mg.L-1 de BAP foi a mais significativa na fase de estabelecimento da cultura. O número de brotação e o rejuvenescimento do material adulto aumentaram à medida que aumentou o número de subcultivos, bem como a percentagem de enraizamento. O estabelecimento de minijardim clonal de Tectona grandis é possível mediante uso de brotações rejuvenescidas in vitro. / The aim of this study was to evaluate the effect of serial grafting and micropropagation in rejuvenation of Tectona grandis. The experiments were carried out in Floresteca SA and Bioteca Ltda. companies, Mato Grosso, using two clones and seedlings. The clones were 35 years old and the seedlings were six months old. Serial grafting was chosen for macropropagation technique on a completely randomized statistical design, with three treatments corresponding to genetic material with seven replications. For micropropagation, solid modified MS medium was used. The in vitro experiment was divided into stages: meristem rescue on a completely randomized design with the treatments corresponding to three genetic material with seven replications; establishment in vitro culture on completely randomized design arranged in 3x5 factorial scheme, corresponding to three genetic material with five concentrations of BAP resulting in fifteen treatments with five replications; multiplication/rejuvenation on completely randomized design arranged in 3x5 factorial scheme, corresponding to three genetic material with five subcultures concentrations of resulting in fifteen treatments with three replications on a completely randomized 3x5 and microcuttings rooting. For macropropagation, the parameter evaluated was the percentage of grafting takes. For micropropagation, in the rescue phase, it was evaluated the number of viable meristems. In the establishment phase of culture, the parameters evaluated were the size, number of nodes and number of leaves of the explants; and in the phase of multiplication/rejuvenation it was evaluated the development of the shoots in successive subcultures. The shoots sprouting from seedlings grafts at seventh day compared with grafted clones that started sprouting on the fifteenth day after grafting. The survival of apical meristems without oxidation or contamination was above 84%. The concentration of BAP (1.5 mg.L-1) that was the most significant in the establishment phase of culture. The number of shoots produced and the rejuvenation process increases with increasing number of subcultures, as well as the percentage of rooting. The establishment of clonal minigarden of Tectona grandis coud be possible through rejuvenation of trees in vitro.

O gênero Eucalyptus tem se mostrado um dos mais vantajosos na produção de bens e serviços florestais pela silvicultura brasileira, principalmente por sua rapidez no crescimento. A propagação vegetativa de Eucalyptus spp. permite a rápida multiplicação de genótipos selecionados alcançando aumento imediato na produtividade dos plantios clonais. Com o objetivo de avaliar o efeito do “pulse” na propagação in vitro de Eucalyptus grandis, testou-se as interações entre concentrações de BAP (Benzilaminopurina), tempo de exposição e pH, bem como as alterações morfológicas que esses fatores causam na estrutura interna dos explantes. O trabalho foi realizado na Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz” – ESALQ/USP. Doses crescentes de BAP (0, 200, 400 e 600 mg.L-1) expostas durante três tempos (1, 2 e 3 horas) com dois valores de pH (3,0 e 5,8) representavam os tratamentos. Após 21 dias de cultivo avaliou-se o número de brotos por tratamento, taxa de multiplicação e biomassa produzidas para cada tratamento. As análises histológicas também foram realizadas após o fim do experimento. O fator pH não apresentou nenhuma interação com os demais fatores. A concentração 200 mg.L-1 de BAP durante 1 e 2 horas apresentaram os tratamentos mais significativos na multiplicação do E. grandis. Doses com 600 mg L-1 de BAP apresentaram-se tóxicas aos explantes. Houve intensificação da divisão celular no parênquima cortical e procâmbio na região basal do explante representada pelo surgimento de meristemóides evidenciando a maior capacidade de resposta organogênica desses tecidos em resposta aos tratamentos 200 mg.L-1 de BAP durante 1 e 2 horas. O uso de “pulse” como ferramenta na micropropagação de Eucalyptus grandis representa uma alternativa viável para redução de tempo e custos. / The genus Eucalyptus has proved to be one of the most profitable means of producing goods and supplying forestry services used by Brazilian silviculture, mainly because of its fast growth. The vegetative propagation of Eucalyptus spp. allows the fast reproduction of selected genotypes aiming at the immediate increase of cloned plantations. By analyzing the pulse treatment effect in vitro propagation of Eucalyptus grandis the evaluation between the concentrations of Bensylaminopurine (BAP), time exposure and pH interaction such as its morphological changes that those factors caused in the internal structure of the explants. This work has been carried out at Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz” – ESALQ/USP. The treatments consisted of increasing doses of Benzylaminopurine (0, 200, 400 and 600 mg.L-1), three exposure time (1, 2 and 3 hours) with two values of pH (3,0 e 5,8). The results were taken after 21-day of cultivation. The number of sprouts per treatment, the reproduction rate and the produced biomass for each treatment were recorded. In addition the histological analyses were aslo carried out at the end of the experiment. The pH did not present any form of interaction with the other factors but he most significant treatments of E. grandis reproduction was found in the concentration 200 of BAP during the 1st and 2nd hour. The dose 600 mg.L-1 of BAP turned out to be toxic for the explants. It was observed that there was an increase of cell division in the cortical parenchyma and procambium represented by the arising of meristems resulting to a greater capacity of organogenetic answer of these tissues due to the response of 200 mg.L-1 of BAP treatment during 1st and 2nd hours. The use of pulse treatment as a tool of micropropagation of Eucalyptus grandis represented a feasible alternative for the reduction of time and cost.

O E. benthamii apresenta grande aptidão de cultivo no Brasil, principalmente em regiões de clima frio e com geadas frequentes, isso se deve a sua origem a oeste de Sydney na Austrália, onde as temperaturas são muito baixas, com ocorrência de geadas. Levando-se em conta o seu ótimo desempenho silvicultural, genótipos selecionados certamente representam uma excelente alternativa para plantios futuros. A clonagem de genótipos superiores é realizada através da propagação vegetativa de árvores adultas, e requer material fisiologicamente juvenil ou rejuvenescido. Técnicas especiais são necessárias para reverter árvores adultas a juvenilidade e resgatar condições favoráveis para promover o enraizamento e crescimento. Dentre as técnicas de propagação utilizadas para o resgate de plantas adultas destacam-se o corte raso (decepa), anelamento, estaquia, miniestaquia, enxertia e micropropagação. No caso específico dos eucaliptos para obtenção de brotações, o método de resgate mais utilizado pelas empresas florestais é o corte raso da árvore ou anelamento, técnicas que proporcionam uma alta taxa de enraizamento de estacas, devido à eficiente reversão a juvenilidade. Porém, quando existe a necessidade de preservação do indivíduo, justifica-se o uso de técnicas não destrutivas, evitando dessa forma a morte da árvore matriz. O Presente trabalho objetivou após a seleção in loco de fenótipos com características silviculturais superiores, resgatar (através de técnicas não destrutivas), conservar e multiplicar matrizes adultas de E. benthamii, avaliando-se qual(is) técnica(s) apresenta(m) melhor(es) resultado(s) para a clonagem das mesmas. Para tanto, utilizou-se brotações dos primeiros galhos da copa, brotações epicórmicas (megaestaca), brotações que surgiram provenientes do anelamento e brotações oriundas da poda dos galhos da copa, as quais foram submetidas às técnicas de estaquia, enxertia e micropropagação para cada tipo de broto. Apesar de ter ocorrido variação da porcentagem entre os clones, a megaestaca mostrou ser a melhor alternativa para o estabelecimento in vitro de plantas adultas de E. benthamii, sendo recomendada sua utilização para o resgate de material genético adulto, estabelecido em condições de campo. Todas as matrizes de E. benthamii foram resgatadas com sucesso, e no intuito de formar um banco de germoplasma, um minijardim clonal foi instalado com as mudas que apresentaram melhor qualidade, que poderá ser utilizado para futuros testes e formação de mudas. / The E. benthamii presents a great aptitude for cultivation in Brazil, especially in cold climates and with frequent frosts, this is due to your west of Sydney origin in Australia, where temperatures are very low, with frosts. Taking into account their optimal silvicultural performance, selected genotypes will certainly represent an excellent alternative for future plantings. The cloning of superior genotypes is accomplished by vegetative propagation of mature trees, and requires physiologically juvenile or rejuvenated material. Special techniques are necessary to reverse the juvenile and adult trees recover favorable conditions to promote rooting and growth. Among the propagation techniques used for the rescue of mature plants stand out clear-cutting (coppicing), annealing, cutting, minicutting, grafting and micropropagation. In the specific case of eucalyptus to obtain propagules, the most rescue method used for the forestry companies are clearcutting or annealing, techniques that provide a high rate of rooting, due to efficient reversion to juvenility. However, when there is a need to protect the individual, justifies the use of non-destructive techniques, thus avoiding the death of the tree array. The present study aimed to spot after the selection of phenotypes with characteristics superior silvicultural, rescue (through non-destructive techniques) to retain and multiply matrices adult the E. benthamii, evaluating which technique that present the best result for the cloning of the same. So we used to shoot the first cup of twigs, shoots, epicormic shoots that emerged from the annealing and shoots arising from the pruning of the branches of the crown, which were submitted to the techniques of cutting, grafting and micropropagation for each type of bud. Considering the percentage variation between the clones, the epicormic shoots showed to be the best alternative for the in vitro establishment to the E. benthamii adult plants, being recomended its utilization to the adult genetic material rescue, All the tested E. benthamii plants were rescued with sucess, and in the aim to stablish germoplasm bank, a clonal mini garden was instaled with the plantlets that present the best quality.