Orientador: Gustavo Antonio de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:05:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bianchessi_PriscillaTrigo_M.pdf: 953115 bytes, checksum: dcba97c9e29d799c9d26d11c2fcb4260 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A biópsia de fragmento de lesões mamárias não palpáveis vem ganhando espaço como uma alternativa para biópsia cirúrgica com localização préoperatória. Este estudo avaliou o desempenho da biópsia de fragmento guiada por ultra-sonografia, bem como seu impacto no seguimento de pacientes com lesões mamárias suspeitas. Foram realizadas 54 biópsias guiadas por ultrasonografia, sendo que 42 pacientes tem confirmação anatomopatológica e 12 estão em seguimento por imagem. Das 42 pacientes que foram submetidas à localização com exérese da lesão houve concordância dos resultados anatomopatológicos em 41 delas e todas as pacientes em seguimento não apresentaram evolução no período, que variou entre um e três anos. Vinte e três dos 24 casos de neoplasia maligna foram diagnosticados pela biópsia de fragmento. O custo médio da biópsia de fragmento foi avaliado em 942 coeficientes de honorários e o da biópsia cirúrgica em 3.120 coeficientes de honorários. Desta forma, o uso da biópsia de fragmento guiada por ultra-sonografia permite um diagnóstico confiável e econômico das lesões mamárias suspeitas / Abstract: The core needle biopsy for non-palpable breast lesions is an alternative for pre-operative localization and open biopsy. We evaluate the accuracy of USguided large core needle biopsy (LCNB), as well as it's impact on the follow up of these pacients. 54 biopsies were performed, 42 of those had pathology confirmation after open biopsy and 12 of them are on clinical follow-up. In 41 of the 42 pacients who had the lesion excised, the LCNB reached the same results as the open biopsy. All the 12 pacients in follow-up had benign diagnosis in LCNB and non of them showed progression by this time (between 6 months and 2 years of follow-up). 23 of the 24 cases of breast cancer were correctly diagnosed by LCNB. The average cost of the LCNB was 942CH and of the open biopsy 3120CH, therefore, the LCNB is an accurate and cost-effective method for sampling breast lesions when used in a selective fashion / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Tocoginecologia

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Pós-Graduação em Nanociência e Nanobiotecnologia, 2018. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-05-15T18:36:29Z No. of bitstreams: 1 2018_ThamaraRodriguesAlexandre.pdf: 3734253 bytes, checksum: 8a160917cc8a88b7cbe6b926e2e2238a (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-05-28T17:30:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_ThamaraRodriguesAlexandre.pdf: 3734253 bytes, checksum: 8a160917cc8a88b7cbe6b926e2e2238a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-28T17:30:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_ThamaraRodriguesAlexandre.pdf: 3734253 bytes, checksum: 8a160917cc8a88b7cbe6b926e2e2238a (MD5) Previous issue date: 2018-05-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). / A neoplasia que apresenta maior incidência entre as mulheres em âmbito mundial é o câncer de mama. O Euterpe oleracea Mart., conhecido popularmente como açaí, vem sendo muito estudado nos últimos anos, devido sua elevada quantidade de polifenóis, que apresentam atividades antiproliferativa, pró-apoptótica, supressão tumoral e prevenção a adipogênese, estresse oxidativo e inflamação. O Anacardium occidentale, conhecido popularmente como caju, deriva de sua castanha um líquido escuro com característica viscosa denominada LCC, nele se encontra um composto chamado de ácido anacárdico (AA), no qual tem sido utilizado em diversas pesquisas, devido suas atividades antitumorais, antioxidante, moluscicida, antimicrobianas, gastroprotetoras e antioxidantes. A biodiversidade brasileira apresenta uma grande variedade de fitoquímicos, que como estes, são pouco solúveis em soluções aquosas, o que apresenta complicações para sua administração e também a absorção pelo organismo. Tendo em vista este quadro, a utilização de compostos nanoestruturados demonstra ser uma alternativa promissora para contornar estas variáveis e potencializar os efeitos biológicos. Perante o exposto, o objetivo deste presente projeto foi avaliar os efeitos terapêuticos do tratamento associado com nanoemulsões à base de óleo de açaí (AçNE) e ácido anacárdico livre em células de câncer de mama com potencial metastático (4T1), in vitro. Testes de estabilidade avaliaram que as nanogotículas presentes nas nanoemulsões à base de óleo de açaí (AçNE) possuem diâmetro hidrodinâmico de ± 170 nm, com índice de polidespersão de 0,220, potencial de superfície de ± 17,5 mV, pH 7, e estabilidade de suas propriedades físico-químicas por 120 dias. Para realização dos experimentos, foram empregadas AçNE à base de óleo de açaí e também foram utilizadas as AçNE com alteração em sua superfície, sendo adicionado polímeros de quitosana (CH) ou polietileno glicol (PEG). Estas nanoformulações apresentaram efeito citotóxico na linhagem de adenocarcinoma murino 4T1. No entanto, a nanoformulação com PEG, independentemente da associação a nanoformulação com AçNE, mostrou citotoxicidade, sendo desconsiderada para ensaios subsequentes. As nanoemulsões de AçNE e AçNE com CH apresentaram similaridade na redução de viabilidade celular em ensaios com a adição de AA, não demonstrando efeito combinatório. No entanto, o efeito combinatório foi observado no emprego do tratamento seriado (intervalo de 24 horas para cada tratamento). Apesar da AçNE e AçNE CH ainda apresentarem efeitos similares, a AçNE foi escolhida devido ao custo mais vantajoso e ao protocolo de formulação mais simples. Dados adquiridos na citometria de fluxo sugeriram a morte celular por apoptose no tratamento seriado com AçNE e AA. Resultados analisados no ensaio de wound healing (migração celular) monstraram o efeito inibitório e combinatório da AçNE e AA. Desta forma, o presente estudo sugere que o efeito combinatório entre nanoemulsão à base de óleo de açaí e AA possa ser uma alternativa para futuras terapêuticas antineoplásicas a serem melhor fundamentadas em estudos futuros. / The neoplasia with the highest incidence among women worldwide is breast cancer. Euterpe oleracea Mart., Commonly known as açaí, has been extensively studied in recent years due to its high polyphenols, which have antiproliferative, pro-apoptotic, tumor suppression and adipogenesis, oxidative stress and inflammation activities. Anacardium occidentale, commonly known as cashew, derives from its chestnut a dark liquid with a viscous characteristic called LCC, in it is a compound called anacardic acid (AA), in which it has been used in several researches due to its antitumor activities, antioxidant, molluscicide, antimicrobials, gastroprotectives and antioxidants. The Brazilian biodiversity presents a great variety of phytochemicals, which like these, are little soluble in aqueous solutions, which presents complications for its administration and also the absorption by the organism. In view of this, the use of nanostructured compounds proves to be a promising alternative to circumvent these variables and potentiate the biological effects. In view of the above, the objective of this present project was to evaluate the therapeutic effects of the treatment associated with açaí oil-based nanoemulsions (AçNE) and free anacardic acid in breast cancer cells with metastatic potential (4T1) in vitro. Stability tests evaluated that the nanoglobes present in açaí oil-based nanoemulsions (AçNE) have a hydrodynamic diameter of ± 170 nm, with polydispersion index of 0.220, surface potential of ± 17.5 mV, pH 7, and stability of its physical-chemical properties for 120 days. To perform the experiments, AçNE based on açaí oil was used and the AçNE with change in its surface were also used, being polymers of chitosan (CH) or polyethylene glycol (PEG). These nanoformulations had a cytotoxic effect on the murine adenocarcinoma 4T1 lineage. However, PEG nanoformulation, regardless of the association to nanoforming with AçNE, showed cytotoxicity and was disregarded for subsequent assays. The nanoemulsions of AçNE and AçNE with CH presented similarity in the reduction of cell viability in tests with the addition of AA, showing no combinatorial effect. However, the combinatorial effect was observed in the use of serial treatment (24-hour interval for each treatment). Although AçNE and AçNE CH still have similar effects, AçNE was chosen because of the more cost-effective and simpler formulation protocol. Data acquired in flow cytometry suggested cell death by apoptosis in serial treatment with AçNE and AA. Results analyzed in the wound healing assay showed the inhibitory and combinatorial effect of AçNE and AA. Thus, the present study suggests that the combinatorial effect between açaí oil-based nanoemulsion and AA may be an alternative for future antineoplastic therapies to be better informed in future studies.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Nutrição, 2011. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2012-05-08T18:45:29Z No. of bitstreams: 1 2011_ClarissaHoffmanIrala_Parcial.pdf: 1045680 bytes, checksum: cb5b9787dabd3eaca8ccfd1d93cd031f (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2012-05-10T12:04:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_ClarissaHoffmanIrala_Parcial.pdf: 1045680 bytes, checksum: cb5b9787dabd3eaca8ccfd1d93cd031f (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-10T12:04:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_ClarissaHoffmanIrala_Parcial.pdf: 1045680 bytes, checksum: cb5b9787dabd3eaca8ccfd1d93cd031f (MD5) / O câncer de mama é o segundo tipo de câncer mais frequente no mundo e o mais comum entre as mulheres. É também o principal responsável pela mortalidade do sexo feminino. Tanto a doença, quanto a terapêutica deste tipo de neoplasia acarretam alterações no estado nutricional, modificações na alimentação, sintomas gastrointestinais e o comprometimento da qualidade de vida. Evidências de que nutrientes, como as gorduras e o ácido graxo -3 podem interferir no desenvolvimento, na prevenção e durante o tratamento do câncer de mama têm direcionado variadas pesquisas. O objetivo do estudo foi investigar se o consumo de lipideos -3 estão relacionados com o padrão de resposta imunológica, o estado nutricional e a qualidade de vida de pacientes recém- diagnosticadas com câncer de mama ainda sem tratamento clínico; além de fazer a comparação com mulheres sem câncer. Tratou-se de um estudo transversal, prospectivo descritivo, tipo caso-controle no qual foram avaliadas18 mulheres com câncer de mama (GM) e 29 sem a doença (GC). Foram coletados dados socioeconômicos, estadiamento da doença, peso, altura, circunferência da cintura, percentual de gordura corporal, consumo alimentar por dois recordatórios de 24h, avaliações laboratoriais (hemograma, albumina, colesterol total e frações), avaliação da qualidade de vida, da linfoproliferação, contagem de linfócitos totais e dosagem de citocinas (IL-12, TNF, IL-10, IL--6).A média de idade foi semelhante entre os grupos sendo 47 para o GC e 45 para o GM (p=0,38). O GC apresentou maior renda, com prevalência de mais de 10 salários mínimos (p<0,05), e maior escolaridade, com de mais de 9 anos de estudo (p<0,05). A prevalência de comorbidades foi semelhante nos dois grupos, bem como a da menopausa. A obesidade e o sobrepeso foram mais prevalentes no GM: 83% em comparação aos 77% do GC. Segundo a avaliação da composição de gordura o GM evidenciou 83% de excesso de gordura corporal e menor consumo de lipídeos totais (p=0,05). Ainda no GM foi observado menor contagem de linfócitos, bem como menor percentual de linfoproliferação. Não foi observada diferença significativa entre os exames laboratoriais, dosagem de citocinas e escore geral de qualidade de vida. As pacientes com câncer de mama apresentaram menor consumo de carboidratos, lipídeos -6, bem como menor contagem de linfócitos no sangue periférico e baixa linfoproliferação. Entretanto, não foi evidenciada relação entre o tipo de lipídeo consumido e o padrão de respostaimunológica, o estado nutricional ou a qualidade de vida de pacientes recém-diagnosticadas com câncer de mama. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Breast cancer is the second most common cancer worldwide and the most common among women. It is also the leading cause of death in women. Both, the disease and the therapy of this type of cancer, results in alterations in nutritional status, changes in diet, gastrointestinal symptoms and impaired quality of life. Evidence that nutrients such as fats and -3 fatty acids may interfere with the development, prevention and treatment for breast cancer have directed various research. The aim of this study was to investigate whether the consumption of total lipid and fatty acid -3 are related to the pattern of immune response, nutritional status and quality of life of patients newly or not diagnosed with breast cancer, without medical treatment. It was a cross-sectional study, prospective, descriptive, case-control in which they were evaluated 18 women with breast cancer (GM) and 29 without the disease (GC). We collected socioeconomic data, disease stage, weight, height, waist circumference, percentage body fat, food intake by two 24-hour records, laboratory assessments (complete blood count, albumin, total cholesterol and fractions), assessment of quality of life, lymphoproliferation, total lymphocyte count and cytokine (IL-12, TNF, IL-10, IL-1and IL-6). The average age was similar between groups, 47 for CG and 45 for GM (p = 0.38). The GC had a higher income, with a prevalence of more than 10 minimum wages (p <0.05), and higher education, with over 9 years (p <0.05). The prevalence of comorbidities was similar in both groups, as well as menopause. Obesity and overweight were more prevalent in GM: 83% compared to 77% GC. The assessment of the fat composition of the GM showed 83% of excess body fat and lower consumption of total lipids (p = 0.05). While GM showed lower lymphocyte count and a lower percentage of lymphoproliferation. There was no significant difference between the laboratory tests, cytokine and overall score of quality of life. Patients with breast cancer had a lower intake of carbohydrates, lipids, monounsaturated and -6 fatty acids, as well as lower lymphocyte counts in peripheral blood and lower lymphoproliferation. However, no relationship was observed between the type of lipid consumed and the pattern of immune response, nutritional status or quality of life of patients newly diagnosed with breast cancer.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2011. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-07-06T16:07:05Z No. of bitstreams: 1 2011_MarcellaLemosBrettasCarneiro.pdf: 10578887 bytes, checksum: 2f4b4e91f2df92953b622b4e334757e4 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-10-06T16:19:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_MarcellaLemosBrettasCarneiro.pdf: 10578887 bytes, checksum: 2f4b4e91f2df92953b622b4e334757e4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-06T16:19:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_MarcellaLemosBrettasCarneiro.pdf: 10578887 bytes, checksum: 2f4b4e91f2df92953b622b4e334757e4 (MD5) Previous issue date: 2017-10-06 / O aumento da incidência do câncer de mama e suas limitações terapêuticas, atualmente empregadas, suscitam a busca de alternativas terapêuticas mais eficazes. Dentre compostos com potencial terapêutico, o citrato de ródio (II) (Rh2(H2 cit)4 ), um membro da família dos carboxilatos de ródio, é promissor por apresentar atividade citotóxica, citostática e antitumoral em células de carcinoma de origem mamária (Ehrlich) e em células tumorais (Y-1) e normais da adrenocortical (AR-1(6)). Contudo, a introdução deste composto em estudos pré-clínicos tem sido limitada devido à sua toxicidade. Nanopartículas de maghemita (NPM) e magnetolipossomas (ML) representam uma plataforma atrativa como sistemas carreadores para entrega de drogas, pois podem agir de forma específica em células tumorais. Portanto, a associação entre Rh2 (H2 cit)4 e NPM ou ML representa uma estratégia potencial para reduzir a toxicidade de Rh2 (H2 cit)4 e, assim, melhorar sua ação terapêutica. Nesta pesquisa, reportamos efeitos biológicos de Rh2 (H2 cit)4 livre e do Rh2 (H2 cit)4 associado a NPM ou ML sobre carcinoma mamário tanto em cultura de células (MCF-7 e 4T1) como em camundongos Balb/c portadores de carcinoma. Células normais (MCF-10A) e camundongos sadios também foram utilizados neste estudo para fins comparativos. O efeito citotóxico de Rh2 (H2 cit)4 livre foi dependente da dose, do tempo e do tipo de linhagem celular. De uma forma geral, este efeito foi mais intenso após 72 h com doses acima de 500 pM e em células normais da mama (MCF-10A) (p<0.05). Os efeitos citotóxicos de Rh2 (H2 cit)4 livre foram evidenciados por alterações morfológicas, como condensação e fragmentação nuclear, formação de blebbing, exposição de fosfatidilserina na membrana plasmática, redução dos filamentos de actina e condensação mitocondrial. Nos tratamentos com 50 pM de Rh2 (H2 cit)4 associado a NPM (Magh-Rh2 (H2 cit)4 ) e a ML (LÍp-Magh-Rh2 (H2 cit)4 ) houve um efeito citotóxico mais pronunciado em células de carcinoma (MCF-7 e 4T1) do que em células normais (MCF-10A) (p<0.05). Além disso, verificou-se que as composições de Rh2 (H2 cit)4 e Magh-Rh2 (H2 cit)4 apresentaram atividade antitumoral em camundongos portadores de carcinoma mamário e no grupo de animais tratados com Magh-Rh2 (H2 cit)4 houve maior sobrevida em relação aos animais tratados com Rh2 (H2 cit)4 . Por meio das análises histopatológicas e ultraestruturais, observou-se que os tratamentos com Rh2 (H2 cit)4 e Magh-Rh2 (H2 cit)4 induziram apoptose, necrose e fibrose no tecido tumoral. Também foram notados nestes tecidos NPM no citoplasma e no núcleo celular. Em relação às análises de toxicidade, observou-se linfocitopenia no grupo de animais tratados com MaghRh2 (H2 cit)4 e aumento da fragmentação do DNA de células da medula óssea em animais tratados com Rh2 (H2 cit)4 , mas alterações citostáticas nestas células e bioquímicas (creatinina, ferro sérico, transaminase pirúvica) não foram notadas entre todos os grupos experimentais. De uma forma geral, concluímos que os tratamentos com as composições Rh2 (H2 cit)4 , Magh-Rh2 (H2 cit)4 e Lip-Magh-Rh2 (H2 cit)4 apresentaram potencial terapêutico para carcinoma mamário. / The increase incidence of breast cancer and its therapeutic limitations, currently employed, demand the search for alternative therapies. Among compounds with therapeutic potential, the rhodium (II) citrate (Rh2 (H2 cit)4 ), a member of the family of rhodium carboxylates, is promising due to its cytotoxic, cytostatic and antitumor activity in mammary carcinoma cells (Ehrlich) and in adrenocortical tumor (Y-1) and normal cells (AR-1(6)). However, the introduction of this compound in preclinical studies has been limited due to its toxicity. Maghemite nanoparticles (NPM) and magnetoliposomes (ML) represent an attractive platform as carrier systems for drug delivery because they can act specifically on tumor cells. Therefore, the association between Rh2 (H2 cit)4 with NPM or ML represents a potential strategy to reduce the Rh2 (H2 cit)4 toxicity and to improve its therapeutic action. In this research, we report the biological effects of free Rh2 (H2 cit)4 and Rh2 (H2 cit)4 associated with NPM or ML on breast cancer both in cultured cells (MCF-7 and 4T1) and in Balb/c mice bearing carcinoma. Normal cells (MCF-10A) and healthy mice were also used in this study for comparison purposes. The cytotoxic effect of Rh2 (H2 cit)4 was more intense after 72 h with doses above 500 pM and in normal breast cells (MCF-10A) (p<0.05). The cytotoxic effects of free Rh2 (H2 cit)4 were evidenced by morphological changes such as nuclear condensation and fragmentation, formation of blebbing, phosphatidylserine exposure on the plasma membrane, reduction of actin and mitochondrial condensation. In treatments with 50 pM Rh2 (H2 cit)4 associated with NPM (Magh-Rh2 (H2 cit)4 ) and ML (Lip-Magh-Rh2 (H2 cit)4 ) the cytotoxic effect was more pronounced in carcinoma cells (MCF-7 and 4T1) than in normal cells (MCF-10A) (p <0.05). Moreover, it was found that Rh2 (H2 cit)4 and Magh-Rh2 (H2 cit)4 showed antitumor activity in mice bearing breast carcinoma, with increased survival rate in animals treated with Magh-Rh2 (H2 cit)4 . By histopathological and ultrastructural analysis, we found that treatment with Rh2 (H2 cit)4 and Magh-Rh2 (H2 cit)4 induced apoptosis, necrosis and fibrosis in tumor tissue. Also, NPM were found in these tissues both in the cytoplasm and in the nucleus. Regarding the toxicity analysis, lymphocytopenia was observed in animals treated with Magh-Rh2 (H2 cit)4 . Besides, a slight increase of DNA fragmentation of bone marrow cells was also noted in animals treated with Rh2 (H2 cit)4 , although biochemical and cytostatic alterations were not seen among all groups. In summary, we conclude that treatments with Rh2 (H2 cit)4 , Magh-Rh2 (H2 cit)4 and Lip-Magh-Rh2 (H2 cit)4 compositions showed therapeutic potential for breast carcinoma.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-07-27T16:14:54Z No. of bitstreams: 1 2017_NataliaGurgeldoCarmo.pdf: 2103011 bytes, checksum: 717c638c359f77a76fc1856d6eb60f1a (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-08-31T19:05:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_NataliaGurgeldoCarmo.pdf: 2103011 bytes, checksum: 717c638c359f77a76fc1856d6eb60f1a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-31T19:05:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_NataliaGurgeldoCarmo.pdf: 2103011 bytes, checksum: 717c638c359f77a76fc1856d6eb60f1a (MD5) Previous issue date: 2017-08-31 / Exossomos e microvesículas fazem parte das vesículas extracelulares. Estas são produzidas e liberadas por uma variedade de tipos celulares, inclusive em sobrenadante do meio celular, e estão presentes em diferentes fluidos biológicos. Elas podem carregar mRNA e miRNA, dentre outras moléculas. No câncer, os miRNA associados às vesículas extracelulares estão relacionados com a comunicação entre as células tumorais e o microambiente tumoral. Este estudo avaliou a presença das proteínas relacionadas com a maquinaria de processamento de miRNA, nas vesículas extracelulares secretadas pelas linhagens celulares MDA-MB231 (câncer de mama humano) e fibroblasto humano no tempo de crescimento celular de 72 horas. Para purificar estas partículas foi utilizado o método de centrifugação diferencial e ultracentrifugação. Após isto, caracterizou-se as vesículas pelo seu tamanho e distribuição de partículas utilizando a resistência de pulso, pelo sistema qNANO. Para a detecção de proteínas, a técnica de western blot foi realizada a fim de se identificar a presença das proteínas de interesse. Como resultado, as vesículas extracelulares provenientes dos sobrenadantes das linhagens celulares foram purificadas e caracterizadas pelo seu tamanho adequadamente. Observou-se também que a quantidade de partículas de vesículas extracelulares da linhagem tumoral obtida pelo sistema qNANO, foi superior quando comparada à amostra não-tumoral. Os resultados da detecção de proteínas por western blot demonstram que as proteínas Dicer, Ago2 e TRBP2 estão presentes na amostra proveniente da linhagem tumoral MDA-MB231. Confirmou-se a presença de proteínas TSG101, Alix, CD63 - marcadoras moleculares de vesículas extracelulares. Confirmou-se também ausência nas amostras, da proteína Calnexina, a qual é controle negativo e é indicativo de contaminação nas vesículas extracelulares. Por fim, foram identificadas em ambas as amostras as proteínas ApoA-IV, AQP2 e IL-6, as quais estão associadas ao microambiente tumoral na sinalização do miRNA. Conclui-se que as proteínas Dicer, Ago2 e TRBP2, pertencentes a maquinaria de processamento de miRNA, bem como proteínas ainda não discutidas pela literatura em vesículas extracelulares na linhagem tumoral estudada, estão presentes no sobrenadante da linhagem tumoral MDA-MB231, sugerindo um papel para essas moléculas na biologia tumoral. / Exossomes and microvesicles are part of the extracellular vesicles. There are produced and released by a variety of cell types, including cell media supernatant, and be present in different biological fluids. They can carry mRNA and miRNA, among other molecules. In cancer, miRNAs associated with extracellular vesicles are related to the communication between tumor cells and the tumor microenvironment. This study evaluated the presence of proteins related to the miRNA processing machinery in the extracellular vesicles secreted by cell lines MDA-MB231 (human breast cancer) and human fibroblast at cell growth time of 72 hours. Purification of the culture medium supernatant was carried out by the differential ultracentrifugation method. After this, the vesicles were characterized by their size and particle distribution using the pulse resistance by qNANO system. For the detection of proteins, the western blot technique was performed to identify the presence of the proteins of interest. As a result, extracellular vesicles from cell line supernatants were purified and characterized by their size appropriately. It was also observed that the number of extracellular vesicles particles of the tumor lineage obtained by qNANO system was superior when compared to the nontumor sample. The results of western blot detection of proteins demonstrate that Dicer, Ago2 and TRBP2 proteins, related to miRNA processing machinery, are present in the sample from the MDA-MB231 tumor line. We confirmed the presence of TSG101, Alix, CD9 – which are extracellular vesicle molecular marker proteins. Also, we confirmed in both samples the absence of Calnexin, which is a negative control, it is indicative of contamination in the extracellular vesicles. Lastly, we identified in both samples ApoAIV, AQP2 and IL-6 proteins which are associated with tumor microenvironment in miRNA signaling. In conclusion, Dicer, Ago2 and TRBP2 proteins belonging to miRNA processing machinery, as well as proteins not yet discussed in the literature in extracellular vesicles from tumor cell, were present in the supernatant of the MDAMB231 tumor cell, suggesting a role for these molecules in tumor biology.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2015. / Submitted by Cristiane Mendes (mcristianem@gmail.com) on 2015-07-08T15:01:58Z No. of bitstreams: 1 2015_JoaoNunesDeMatosNeto.pdf: 8778671 bytes, checksum: 63017cd0d75960e2a52ce5f3e7f9c5f8 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2015-07-28T12:32:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_JoaoNunesDeMatosNeto.pdf: 8778671 bytes, checksum: 63017cd0d75960e2a52ce5f3e7f9c5f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-28T12:32:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_JoaoNunesDeMatosNeto.pdf: 8778671 bytes, checksum: 63017cd0d75960e2a52ce5f3e7f9c5f8 (MD5) / O câncer de mama ainda continua sendo uma epidemia mundial, com taxas importantes de incidência e prevalência no mundo todo. De forma geral, a taxa de mortalidade do câncer de mama gira em torno de 15% nos países desenvolvidos e em torno de 40% nos países em desenvolvimento em 05 anos. Vários fatores de risco tem sido identificados na gênese do câncer de mama. Nenhuma isolada, porém, explica de forma completa, a carcinogênese do câncer de mama. A classificação do câncer de mama em subtipos moleculares, baseada no perfil de expressão de receptores hormonais e no receptor do HER-2 trouxe uma base racional para o tratamento desta doença. Mutações em alguns genes supressores tumorais, como o BRCA-1 e BRCA-2, além do p53 e PTEN, tem papel relevante conhecido na transformação tumoral da célula mamária normal. Vários tumores, porém, não apresentam alterações nestes genes. Por outro lado, alterações epigenéticas têm se mostrado cada vez mais relevantes na gênese de vários tumores. Estas alterações têm como característica básica não causar modificações na sequência do DNA, mas promover expressão seletiva dos genes dependente do nível do empacotamento do DNA, com áreas de eucromatina frouxa, que permitem mais facilmente a transcrição gênica, e áreas de heterocromatima, que dificultam a transcrição. Dentre os efetores epigenéticos de maior relevância estão as enzimas metiltransferases, capazes de promover a metilação das histonas. Desregulação na expressão ou atividade destas enzimas estão entre as principais alterações epigenéticas envolvidas na carcinogênese. A família SETD é uma família de metiltransferases composta por 10 genes que codificam proteínas com domínio SET. Este domínio está envolvido na metilação de resíduos de lisina em histonas e proteínas não-histonas. Até o momento, pouco se sabe sobre a relação de genes da família SETD com a carcinogênese mamária. No presente estudo foi realizada a avaliação de expressão relativa de todos os genes da família SETD em amostras de tecidos tumorais e normais de pacientes portadoras de câncer de mama através de técnica de PCR em tempo real. O perfil de expressão comparativa desta família de genes foi correlacionado com as informações clínico-patológicas de maior relevância prognóstica, disponíveis das pacientes. Posteriormente realizamos avaliação imunohistoquímica em lâmina de microarranjo de tecidos. Notamos que o gene SETMAR encontra-se significativamente hiperexpresso nas amostras tumorais quando comparadas às amostras normais de pacientes com câncer de mama. Quando avaliamos apenas as pacientes com perfil imuno-histoquímico do tipo triplo negativo, comparadas com as amostras normais, há novamente uma hiperexpressão relativa do gene SETMAR. Os genes SETD5 e SETD8 encontram-se hiperexpressos em tumores com mais de 10 linfonodos positivos para metástase de câncer de mama, além de estarem também hiperexpressos nas pacientes com estadiamento acima do estádio IIB. Além disso, há uma significativa correlação na expressão de ambos os genes no pool de amostras tumorais. O gene SETD8 encontra-se ainda hiperexpresso em pacientes que apresentam invasão angiolinfática. Outro gene que se apresentou significativamente alterado é o SETD1B, cuja expressão está aumentada nos tecidos tumorais comparados aos tecidos normais em amostras pareadas. Entre as amostras tumorais pareadas também foi verificada uma estreita correlação de co-expressão dos genes SETD1B, SETD5, SETD8, SETMAR. Analisados em conjunto, estes dados apontam para o provável papel dos genes SETMAR e SETD1B na carcinogênese mamária, com implicações clínicas relevantes, além de um possível envolvimento dos genes SETD5 e SETD8 em estádios mais avançados da doença. A correlação da expressão gênica de alguns membros da família SETD com fatores clínicos prognósticos em câncer de mama abre o caminho para explorá-los não só como alvos terapêuticos, mas também como novos marcadores prognósticos. / Breast cancer still remains a global epidemic, with significant rates of incidence and prevalence worldwide. Overall, their mortality rate is around 15 % in developed countries and around 40 % in developing countries in 05 years. Several risk factors have been identified in the genesis of breast cancer, but no one alone, explains the carcinogenesis of breast cancer. The classification of breast cancer in molecular subtypes based on the expression profile of hormone receptors and HER -2 receptor has brought a rational basis for treatment of this disease. Mutations in tumor suppressor genes, such as BRCA 1 and BRCA-2, p53 and PTEN, plays an important role in the tumor transformation of normal breast cells. However, not all breast tumors carry changes in these genes. Epigenetic alterations have recently been recognized to play an important role in the genesis of many tumor types. These changes are characterized by not causing any kind of mutations in the DNA sequence but by inducing selective expression of genes dependent on the the DNA packaging level, with areas of loose euchromatin, allowing more easily gene transcription, and areas of heterocromatin, that hamper transcription. Among the most relevant epigenetic effectors, the methyltransferases enzymes are capable of promoting histone methylation. Dysregulation in the expression or activity of these enzymes is among the major epigenetic alterations involved in carcinogenesis. The SETD family is a family of methyltransferases composed of 10 genes encoding proteins with SET domain. This domain is involved in the methylation of lysine residues on histones and non-histone proteins. So far, little is known about the relation of SETD family genes with mammary carcinogenesis. In the present study we evaluated the relative expression of all SETD family genes in breast tumor samples and non-tumor breast tissues of patients with breast cancer by real time q-PCR. The comparative expression profile of each gene of this family was correlated with the most relevant clinicopathologic prognostic information, available from patients. We note that there is a significant overexpression of the gene SETMAR in tumor samples compared to normal samples from patients with breast cancer. When we evaluated only patients with immunohistochemical profile of the triple negative type, compared with the normal samples, we observed again a significant overexpression of SETMAR. The SETD5 and SETD8 genes are overexpressed in tumors with more than 10 positive lymph nodes for breast cancer metastasis, and also are overexpressed in patients with advanced stage. Furthermore, there is a significant correlation in expression of both genes in pool of tumor samples. The SETD8 gene is still overexpressed in patients with angiolymphatic invasion. Another gene that is significantly changed is the SETD1B, whose expression is increased in tumor tissues compared to corresponding normal tissues samples. The paired tumor samples also showed a close correlation of co-expression of genes SETD1B, SETD5, SETD8, SETMAR. Taken together, these data point to the likely role of SETMAR and SETD1B genes in mammary carcinogenesis, with relevant clinical implications, and possible involvement of SETD5 and SETD8 genes in more advanced stages of the disease. The correlation of gene expression of some members of the SETD family with clinical prognostic factors in breast cancer opens the way to exploit them not only as therapeutic targets, but also as a new prognostic markers.

Orientador: Sérgio Vicente Serrano / Banca: Maria Inês de Moura Campos Pardini / Banca: Carlos Eduardo Paiva / Resumo: A presença de alterações das funções cognitivas é uma das queixas frequentemente relatadas por mulheres com câncer de mama que recebem quimioterapia adjuvante. Neste estudo foram comparadas prospectivamente as características e as diferenças de fluxo sanguíneo cerebral regional (FSCr) em pacientes portadoras de câncer de mama, antes e após serem submetidas à quimioterapia adjuvante (QTadj), através da análise de imagens geradas por exame de Single Photon Emission Computed Tomography (SPECT) cerebral empregando técnica de quantificação automatizada Statistical Parametric Mapping (SPM). Foram incluídas 41 pacientes tratadas no Hospital de Câncer de Barretos da Fundação Pio XII no período de abril de 2008 a dezembro de 2010 com idades entre 25 e 70 anos, portadoras de câncer de mama com estadiamento clínico I a III, com ausência de hiperexpressão de c-erb-B2. As imagens foram obtidas no período de aproximadamente 4 semanas após a cirurgia e repetidas com três meses após o término da quimioterapia adjuvante. Os esquemas quimioterápicos empregados foram: FAC (fluorouracil, doxorrubicina e ciclofosfamida) em 75,6% das pacientes, AC-T (doxorrubicina, ciclofosfamida e paclitaxel) em 14,6%, AC (doxorrubicina e ciclofosfamida) em 9,6% e CMF (ciclofosfamida, metotrexato e fluorouracil) também em 9,6% das pacientes. A comparação das imagens pré-QTadj e pos-QTadj mostrou redução significativa do fluxo sanguíneo cerebral regional na região do cingulado anterior do lobo límbico no hemisfério cerebral direito (p<0,0001) e na área do giro temporal médio no hemisfério esquerdo (p<0,0001). Por outro lado, observou-se forte aumento significativo de perfusão sanguínea (p<0001) em quatro regiões distintas: (1) cérebro esquerdo, giro parahipocampal, lobo límbico; (2) cérebro... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cognitive dysfunctions are among the most frequent complains remarked by women treated with adjuvant chemotherapy for breast cancer. The present study prospectively compared the characteristics and regional cerebral blood flow changes among women diagnosed with breast cancer before and after they were submitted to adjuvant chemotherapy (AdjCHEMO), using Single Photon Emission Computed Tomography (SPECT) technique combined with the automated quantification method, Statistical Parametric Mapping (SPM). 41 recently diagnosed breast cancer patients treated by Hospital do Câncer de Barretos - Fundação Pio XII, aged 25 to 70 years old previously operated, and presenting with breast cancer clinical stage I to III and without c-erb-B2 expression were included between April 2008 to December 2010. Images were obtained both 4 weeks after surgery and 3 months after completion of adjuvant chemotherapy. The FAC chemotherapeutic regimen (Fluorouracil, doxorubicin and cyclophosphamide) was used in 75,6 % of patients, followed by AC-T (doxorubicin, cyclophosphamide and paclitaxel) in 14,6 %.AC and CMF combinations (cyclophosphamide, methotrexate and fluorouracil) were used equally in 9,6 % of cases. Comparison of pre-AdjCHEMO and pos-AdjCHEMO images showed significant reduction of cerebral blood flow at the cingulated anterior region of the limbic lobe on the right cerebral hemisphere (p<0,0001) and at the medium temporal gyros located on the left hemisphere (p<0,0001). On the other hand, an increased blood flow (p<0,0001) was observed in 4 areas: (1) left hemisphere, parahippocampal, limbic lobe; (2) right hemisphere, sub lobar area, insular posterior; (3) right hemisphere, cingulated gyros, limbic lobe; (4) left hemisphere, frontal lobe, pre central gyros. Overall a trend for reduction in cerebral... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-27Bitstream added on 2014-06-13T19:49:50Z : No. of bitstreams: 1 correia_nc_me_botfm.pdf: 216439 bytes, checksum: b25b9cedb4a596833c717c3f23f7ead7 (MD5) / Fundação Pio Xii - Barretos / A presença de alterações das funções cognitivas é uma das queixas frequentemente relatadas por mulheres com câncer de mama que recebem quimioterapia adjuvante. Neste estudo foram comparadas prospectivamente as características e as diferenças de fluxo sanguíneo cerebral regional (FSCr) em pacientes portadoras de câncer de mama, antes e após serem submetidas à quimioterapia adjuvante (QTadj), através da análise de imagens geradas por exame de Single Photon Emission Computed Tomography (SPECT) cerebral empregando técnica de quantificação automatizada Statistical Parametric Mapping (SPM). Foram incluídas 41 pacientes tratadas no Hospital de Câncer de Barretos da Fundação Pio XII no período de abril de 2008 a dezembro de 2010 com idades entre 25 e 70 anos, portadoras de câncer de mama com estadiamento clínico I a III, com ausência de hiperexpressão de c-erb-B2. As imagens foram obtidas no período de aproximadamente 4 semanas após a cirurgia e repetidas com três meses após o término da quimioterapia adjuvante. Os esquemas quimioterápicos empregados foram: FAC (fluorouracil, doxorrubicina e ciclofosfamida) em 75,6% das pacientes, AC-T (doxorrubicina, ciclofosfamida e paclitaxel) em 14,6%, AC (doxorrubicina e ciclofosfamida) em 9,6% e CMF (ciclofosfamida, metotrexato e fluorouracil) também em 9,6% das pacientes. A comparação das imagens pré-QTadj e pos-QTadj mostrou redução significativa do fluxo sanguíneo cerebral regional na região do cingulado anterior do lobo límbico no hemisfério cerebral direito (p<0,0001) e na área do giro temporal médio no hemisfério esquerdo (p<0,0001). Por outro lado, observou-se forte aumento significativo de perfusão sanguínea (p<0001) em quatro regiões distintas: (1) cérebro esquerdo, giro parahipocampal, lobo límbico; (2) cérebro... / Cognitive dysfunctions are among the most frequent complains remarked by women treated with adjuvant chemotherapy for breast cancer. The present study prospectively compared the characteristics and regional cerebral blood flow changes among women diagnosed with breast cancer before and after they were submitted to adjuvant chemotherapy (AdjCHEMO), using Single Photon Emission Computed Tomography (SPECT) technique combined with the automated quantification method, Statistical Parametric Mapping (SPM). 41 recently diagnosed breast cancer patients treated by Hospital do Câncer de Barretos – Fundação Pio XII, aged 25 to 70 years old previously operated, and presenting with breast cancer clinical stage I to III and without c-erb-B2 expression were included between April 2008 to December 2010. Images were obtained both 4 weeks after surgery and 3 months after completion of adjuvant chemotherapy. The FAC chemotherapeutic regimen (Fluorouracil, doxorubicin and cyclophosphamide) was used in 75,6 % of patients, followed by AC-T (doxorubicin, cyclophosphamide and paclitaxel) in 14,6 %.AC and CMF combinations (cyclophosphamide, methotrexate and fluorouracil) were used equally in 9,6 % of cases. Comparison of pre-AdjCHEMO and pos-AdjCHEMO images showed significant reduction of cerebral blood flow at the cingulated anterior region of the limbic lobe on the right cerebral hemisphere (p<0,0001) and at the medium temporal gyros located on the left hemisphere (p<0,0001). On the other hand, an increased blood flow (p<0,0001) was observed in 4 areas: (1) left hemisphere, parahippocampal, limbic lobe; (2) right hemisphere, sub lobar area, insular posterior; (3) right hemisphere, cingulated gyros, limbic lobe; (4) left hemisphere, frontal lobe, pre central gyros. Overall a trend for reduction in cerebral... (Complete abstract click electronic access below)

Resumo: O carcinoma mucinoso da mama é um tipo histológico raro e de prognóstico favorável, sendo classificado em puro e misto. A proposta deste trabalho foi estudar os aspectos anatomoclínicos do carcinoma mucinoso da mama, identificando os fatores prognósticos nos tipos puros e mistos. Foi conduzido estudo clínico, descritivo e transversal, tendo como base de dados os prontuários e respectivos laudos de carcinoma mucinoso de mama, arquivados no Instituto Brasileiro de Controle do Câncer (IBCC) no período 1990-2005. Por meio de protocolo foram avaliados: idade, menopausa, paridade, antecedentes, estadiamento, tempo de seguimento, tipo de cirurgia, adjuvância, tamanho do tumor, linfonodos, assim como o intervalo livre de doença (ILD) e a sobrevida global. Na análise estatística foram empregados teste t-student, teste do Qui-Quadrado ou Exato de Fisher e o teste de Wilcoxon. Resultados: Dos 71 casos analisados, 44 foram classificados como carcinomas mucinosos puros (CMP) e 27, como mistos (CMM). O tempo médio de seguimento foi 59,25 meses (1-155meses). O CMP associou-se a maior faixa etária quando comparado ao CMM (69,2±13 vs 58,7±17anos) (p<0,05). Quanto ao estadiamento clínico, 31,8% das pacientes com CMP estavam no estádio IIA, enquanto 51,8% daquelas com CMM encontravam-se no estádio IIB. Na avaliação da axila evidenciou-se metástase em 27,8% dos CMP e em 76% dos CMM (p=0,0001)). Não houve diferença quanto à sobrevida e ao ILD entre o CMP e o CMM. No CMP observou-se correlação negativa entre a celularidade e o ILD. No CMM, a correlação entre o percentual de mucina e o ILD foi positiva. Conclusões: O carcinoma mucinoso do tipo puro associou-se a maior faixa etária e menor comprometimento...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Mucinous breast cancer is a rare histologic type with a favorable prognosis. It is classified into pure (PMC) and mixed (MMC). The purpose of this study is to assess the clinicopathological characteristics of this tumor and identify prognostic features in pure and mixed subtypes. It was conducted a descriptive, transverse, clinical study in the Brazilian Institute of Control of the Cancer's (IBCC) database between 1990-2005. The protocol included: age at diagnosis, age of menarche and menopause, number of pregnancies, family history of breast cancer, clinical stage, follow up, surgery, adjuvant therapy, tumor size, nodal status, disease free survival and overall survival. In the statistical analysis, were used t-student test, chi-square test or Fisher's exact test and Wilcoxon test. Out of 71 cases analysed; 44 were classified as pure mucoid carcinoma and 27, as mixed mucoid carcinoma. The mean follow up was 59,25months (range 1-155months) Pure mucinous carcinoma was more prevalent in older patients than the mixed subtype (69,2±13 vs 58,7±17years)(p<0,05). About clinical stage, 31,8% of the PMCs were in IIA stage and 51,8% of the MMCs were in IIB stage. Axillary nodal metastases were present in 27,8% of the PMCs and 76% of the MMCs (p= 0,0001). There was no difference in relapse-free and overall survival between pure and mixed tumors. In the PMCs was found a negative correlation between cellularity and relapse-free; and in the MMCs the correlation between mucoid component and relapse-free was positive. Conclusions: The PMC presented in older patients and axillary nodal disease was less frequent than in MMC, showing a better prognosis. / Orientador: Eliana Aguiar Petri Nahás / Coorientador: Heloísa M. De Luca Vespoli / Banca: José Costa de Andrade / Banca: Mariângela Esther Alencar Marques / Mestre

Resumo: Comprovar a eficácia da estimulação fisioterapêutica (EF) precoce na progressão do fluxo linfático em pacientes com câncer de mama submetidas ao esvaziamento axilar. Estudo experimental randomizado de 22 pacientes submetidas à linfocintilografia de membros superiores em dois momentos, sendo o primeiro sem estimulação e o segundo randomizado em dois grupos: sem estimulação fisioterapêutica - SEF(n=10) e com estimulação fisioterapêutica - CEF (n=12). A linfocintilografia foi realizada com administração de fitato-99m Tc no segundo espaço digital da mão homo-lateral à axila esvaziada, em três etapas: dinâmica, estática e varredura tardia. A EF foi realizada segundo a técnica de Foldi. A comparação das imagens foi realizada nos dois estudos das pacientes dos dois grupos. A progressão do fluxo foi considerada positiva quando o radiofármaco alcançou locais mais distantes do ponto de injeção no segundo estudo. Estatística com análise de freqüência e porcentagem e medidas de tendência central e testes não paramétricos. A análise descritiva evidencia grupos CEF e SEF semelhantes em relação à média da faixa etária, do peso, da altura, do IMC e do número de linfonodos retirados. Houve associação estatisticamente significativa entre a EF e a progressão do radiofármaco nas três etapas da linfocintilografia (p<0,001). Este estudo comprova a eficácia da EF precoce em pacientes com câncer de mama submetidas ao esvaziamento axilar radical, indicando esse procedimento na prevenção do linfedema. / Abstract: To confirm the effectiveness of the precocious physiotherapy stimulation (PS) in the progression of the lymphatic flow in patients with breast cancer submitted to axillary dissection. randomized experimental study with 22 patients who were submitted to lymphoscintigraphy of the arms at two different moments, being the first one without stimulation while in the second there was randomization into two groups: without physiotherapy stimulation - WPS (n=10) and with physiotherapy stimulation - PS (n=12). The lymphoscintigraphy scan was performed with the administration of phytate-99mTc in the second digital space of the hand in the same side of the dissected axilla, in three steps: dynamic, static and delayed whole body imaging. The PS was carried out according to Foldi's technique. Images comparison was accomplished in the two studies of each patient in both groups. The progression of the flow was considered positive when the radiopharmaceutical reached more distant places from the site of injection in the second study. Statistics were performed with analysis of frequency, percentage, measure of central trend and not parametric tests. The descriptive analysis shows PS and WPS as similar groups in relation to the mean of age, weight, height, BMI and the number of removed lymph nodes. It was seen statistical significance in the association between PS and radiopharmaceutical progression in the three steps of the study(p<0,0001). This study proves the effectiveness of the precocious PS in patients with breast cancer submitted to radical axillary dissection, indicating this procedure as a prevention measure for lymphoedema. / Orientador: Rogério Dias / Coorientador: Sonia Marta Moriguchi / Banca: Beatriz Lotufo Griva / Banca: José Humberto Tavares Guerreiro Fregnani / Mestre