Orientador: Jorge Fernando Brandão Pereira / Coorientador: Valéria de Carvalho dos Santos Ebinuma / Banca: João Vitor Dutra Molino / Banca: Marcel Otavio Cerri / Resumo: A proteína verde fluorescente (GFP, do inglês Green Fluorescent Protein) é um biomarcador utilizado na produção de proteínas de fusão, amplamente empregado in vivo e in vitro. Este trabalho avaliou a produção da GFP expressa em Escherichia coli BL21 (DE3) [pLysS; pET28(a)] em mesa incubadora rotativa e biorreator, e sua posterior extração utilizando Sistemas Micelares de Duas Fases Aquosas (SMDFA). Na etapa de produção em mesa incubadora rotativa, estudou-se a influência da taxa de agitação, tempo de indução e concentração do composto indutor, isopropil-β-1-D-tiogalactopiranosídeo (IPTG), sobre a produção da GFP, e apenas a variação da taxa de agitação e o tempo de indução alteraram a produção de GFP. A melhor produção de GFP (314,59 mg/L) foi obtida a 30°C após 22 h de cultivo a uma agitação de 150 rpm, induzindo com 0,5 mM de IPTG realizada 10 h após o início do cultivo (meio da fase exponencial de crescimento). Posteriormente, avaliou-se menores concentrações de IPTG (0,25; 0,125 mM) na produção de GFP e observou-se que os níveis de produção foram mantidos. Estes estudos iniciais, foram a base para as condições empregadas em biorreator tanque agitado, que operou no modo batelada a uma agitação de 200 rpm, aeração de 2 vvm (volume de ar/ volume de meio) e indução com 0,125 mM de IPTG após 6 h de cultivo. Nas condições citadas, obteve-se apenas uma produção de 128,13 mg/L de GFP, desse modo, apesar da potencialidade da ampliação de escala na produção desta biomolécula, estud... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Green Fluorescent Protein (GFP) is a in vivo and in vitro biomarker widely used in the production of fusion proteins. This work evaluated the production of GFP expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) [pLysS; pET28 (a)] in shaker and bioreactor, and its subsequent extraction using Aqueous Micellar Two-Phase Systems (AMTPS). The influence of the agitation rate, induction time and concentration of the inductor, isopropyl-β-1-D-thiogalactopyranoside (IPTG), on GFP production, was studied using a shaker. The results shown that only the agitation rate and the induction time have affect the GFP production. The best GFP production (314.59 mg/L) was obtained at 30°C after 22 h of culture at 150 rpm, induced with 0.5 mM IPTG after 10 h after of the start of cultivation (at half of exponential growth). Subsequently, lower IPTG concentrations (0.25, 0.125 mM) were evaluated for the GFP production, being maintained the production levels. From these conditions, a cultivation using agitated tank bioreactor was then carried out. The bioreactor operated in batch mode at 200 rpm with a 2 vvm aeration (air volume / volume of medium), being the GFP production induced with 0.125 mM IPTG after 6 h of microorganism' growth. Under that conditions, a production of 128.13 mg/L of GFP was obtained. Thus, despite the potential of scale-up in the production of this biomolecule, further studies are still required. After the GFP production studies, the bacterial cells were disrupted using continuous freezing / thawing cycles. GFP recovered from the cell lysate was then used to perform stability studies at different pHs (3 - 12) and temperatures (25°, 37° and 50°C). The stability studies shown that GFP was stable between pHs 7 to 11 and at temperatures of 25°C and 37°C, but not stable at a temperature of 50°C. Afterwards, liquid-liquid extraction... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Iracema de Mattos Paranhos Calderon / Banca: Roseli Mieko Yamamoto Nomura / Banca: Tamara Beres Lederer Goldberg / Resumo A inadequação do estado nutricional materno influencia o resultado da gestação. Especificamente as gestantes com sobrepeso e obesidade têm risco aumentado para intercorrências clínicas na gestação e consequente resultado adverso perinatal, que podem influenciar na saúde da mãe e do seu filho, não só durante a gestação e no pós-parto, como na vida adulta. OBJETIVO  Avaliar resultados maternos, do parto e dos recém-nascidos de gestações associadas a sobrepeso e obesidade. Avaliar resultados maternos, do parto e dos recém-nascidos de gestações associadas a sobrepeso e obesidade. Estudo prospectivo e descritivo, de uma coorte de 258 gestantes, que iniciaram o pré-natal antes da 20ª. semana. Não foram incluídas ou foram descontinuadas as gestantes classificadas como baixo peso, as gestações múltiplas e aquelas com malformações fetais. De acordo com o IMC pré-gestacional, as gestantes foram alocadas em três grupos: EUTROFIA  IMC pré-gestacional entre 18,5 e 24,9 Kg/m2 (N = 65); SOBREPESO  IMC pré-gestacional entre 25,0 e 29,9 Kg/m2 (N = 66) e OBESIDADE  IMC pré-gestacional ≥ 30,0 Kg/m2 (N = 127). Variáveis maternas, do parto e placenta e dos recém-nascidos foram comparadas entre os grupos. Na análise estatística foram empregados teste do Qui-quadrado, análise de variância (ANOVA), seguida do teste de Tukey e análise de regressão logística, com cálculo de odds ratio e respectivo IC95%. Adotou-se 95% como intervalo de confiança (p < 0,05). As adolescentes ( 19 anos) eram mais eutróficas e as gestantes com idade ≥ 35 anos tinham mais sobrepeso e obesidade (p < 0,001). O DM pré-gestacional apresentou associação significativa com a obesidade (15,74%). O ganho de peso foi menor nas gestantes classificadas como obesas (9,56  7,50 Kg) e maior proporção dessas gestantes (45,6%) apresentou GP < 8 Kg (p < 0,001) e aquelas com sobrepeso e obesidade praticaram mais exercício (p = 0,0100). ... / Abstract: Overweight and obesity are associated with increased risks of pregnancy complications and adverse perinatal outcomes, as well as short- and long-term risks for maternal and child health. To assess delivery, maternal and child outcomes in pregnancies associated with overweight and obesity. This descriptive prospective study included 258 pregnant women who started receiving prenatal care at 20 weeks of gestation. Cases of maternallow weight during pregnancy, multiple gestation, and fetal malformation were excluded. According to prepregnancy body mass index (BMI), study participants were allocated into three groups: EUTROPHY- 18.5 < prepregnancy BMI< 24.9 Kgfm2 (n= 65); OVERWEIGHT - 25.0< prepregnancy BMI < 29.9 Kgfm2 (n = 66); and OBESITY- prepregnancy BMI ~ 30.0 Kgfm2 (n = 127). Statistical analyses were performed using the Chi-square test and analysis of variance (ANOVA) followed by the test of Tukey and logistic regression analysis calculating odds ratio and 95%CI (p < 0.05). Most eutrophic women were adolescents (:-;;;19 years) whereas overweight and obesity were mostly observed in women aged ~ 35 years (p < 0.001). Pregestational DM showed a significant association with obesity (15.74%). Weight gain (WG) was lower among women classified as obese (9.56 ± 7.50 Kg). In largest proportion (45.6%) of women with GP < 8 Kg was found in the obesity group, (p < 0,001). Exercising was more frequent in the overweight and obesity groups (p = 0.0100). A greater proportion of obese mothers (13.39%) had large for gestational age babies (p = 0.0209), and highest mean chest perimeter, abdominal perimeter, placental weight, and placental index. Overweight and obesity increased the risk of gestational hypertension, gestational diabetes mellitus, and mild hyperglycemia. The infants born to obese mothers stayed in hospital for a longer time (3.86 ± 3.93) (p = 0.005). Our results confirm adverse outcomes and underscore the importance of identifying and ... / Mestre

Orientador: Marcone Lima Sobreira / Resumo: Introdução: Os eventos cardiovasculares são as principais causas de mortalidade no mundo, conforme dados da Organização Mundial de Saúde. Predisposição genética, bem como fatores de risco clínico como hipertensão arterial, tabagismo, idade, dislipidemias, diabetes melito e obesidade são as bases para o desenvolvimento de doença aterosclerótica. A detecção da aterosclerose em sua fase pré-clínica, por meio da avaliação da espessura do complexo médio-intimal (CMI) e da variação da distensibilidade arterial (DART) após teste de hiperemia reativa poderia contribuir para a redução da morbidade e mortalidade por causa cardiovascular. Objetivos:compreender as relações entre biomarcadores ecográficos precoces (CMI e DART) em mulheres pós- menopausa e os principais fatores de risco para doenças cardiovasculares: idade, hipertensão arterial sistêmica (HAS), diabetes melito tipo 2 (DM-2), dislipidemias, índice de massa corpórea, tabagismo. Assim como avaliar a possível correlação entre os biomarcadores de aterosclerose precoce e disfunção endotelial mensurados pela ultrassonografia. Materiais e Métodos: clínico, analítico e transversal, com 217 mulheres atendidas, submetidas a questionário e exame físico padronizado, bem como avaliação ecográfica da espessura do CMI e DART. A análise estatística foi realizada por meio de regressão logística múltipla e quando necessário, o Teste de Tukey para análise de variância, por meio do software SAS 9.3. Foram considerados resultados com significân... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: cardiovascular events are the main causes of mortality in the world, according to data from the World Health Organization. Genetic predisposition, as well as clinical risk factors such as hypertension, smoking, age, dyslipidemias, diabetes mellitus and obesity are the bases for development of atherosclerotic disease. The detection of atherosclerosis in its preclinical phase, through the evaluation of the thickness of the medial-intimal complex (MIC) and the variation in arterial distensibility (DART) after a reactive hyperemia test could contribute to the reduction of cardiovascular morbidity and mortality. Objectives: To understand the relationships between early ultrasound biomarkers (IMC and DART) in postmenopausal women and the main risk factors for cardiovascular diseases: age, systemic arterial hypertension (SAH), type 2 diabetes mellitus (DM-2), dyslipidemias, body mass index, smoking. As well as evaluating the possible correlation between the biomarkers of early atherosclerosis and endothelial dysfunction measured by ultrasonography. Materials and Methods: clinical, analytical and transversal, with 217 women attended, submitted to a questionnaire and standardized physical examination, as well as ultrasound evaluation of the thickness of the IMC and DART. Statistical analysis was performed through multiple logistic regression and, when necessary, the Tukey test for analysis of variance, using SAS 9.3 software. Results were considered statistically signifi... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:22:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:28:25Z : No. of bitstreams: 1 000850009_20170226.pdf: 1029581 bytes, checksum: 69e812dad32c76a53500967a80a8c187 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-03-03T11:01:36Z: 000850009_20170226.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-03T11:02:43Z : No. of bitstreams: 1 000850009.pdf: 2777836 bytes, checksum: 2500fb48a204b51b3ba5201d7d6a82c9 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Desde o advento da nova era da abordagem proteômica, a identificação de assinaturas moleculares individuais em vários sistemas biológicos pela pesquisa básica tem impulsionado a descoberta de biomarcadores diretamente relacionados a aplicações terapêuticas, promovendo desenvolvimento de testes diagnósticos clínicos mais específicos. Neste contexto, a necessidade da aplicação clínica estimula a pesquisa de bancada, sendo que novas tecnologias permitem novas descobertas e podem se transformar em prognósticos efetivos, medicamentos inéditos ou mais eficazes e/ou testes diagnósticos mais específicos. Os bubalinos tem sido alvo de muitas iniciativas econômicas e de pesquisas translacionais. Uma vez que, seu plasma sanguíneo é rico em fibrinogênio, búfalos da espécie Bubalus bubalis raça Murrah, se tornaram doadores primordiais de matéria-prima para o desenvolvimento de insumos biológicos, como por exemplo, o selante de fibrina derivado do veneno de serpentes e do sangue de bubalinos produzido pelo Centro de Estudos de Venenos e Animais Peçonhentos (CEVAP). Para tal, se fez necessário melhor compreender a composição do plasma sanguíneo e do crioprecipitado destes bubalinos, a fim de dar suporte à pesquisas futuras que envolverão a identificação de marcadores moleculares de doenças infecciosas que podem acometer estes animais doadores. Este trabalho foi dividido em duas partes: a primeira destaca-se os achados prévios e significância da bubalinocultura, a utilização do sangue de animais para o desenvolvimento de bioinsumos na saúde animal e humana, a produção e aplicação de diversos selantes de fibrina, o uso da abordagem proteômica como estratégia investigativa para a prospecção de biomarcadores moleculares de doenças infecciosas e uma breve descrição das principais técnicas analíticas empregadas pela abordagem proteômica. A segunda parte deste trabalho, destaca-se a caracterização proteica do... / Since the advent of the new era of proteomics approach, the identification of individual molecular signatures in various biological systems for basic research has driven the discovery of biomarkers directly related to therapeutic applications, promoting the development of more specific clinical diagnostic tests. In this context, the need for clinical application stimulates the bench study, which new technologies and new discoveries can become effective prognostic, or novel drugs more effective and/or more specific diagnostic tests. The bubaline have been targets of several economic initiatives and translational research. Since its plasma is rich in fibrinogen, Bubalus bubalis water buffalos (Murrah) have became main donors of raw material for the development of biological insumes, as example, the fibrin sealant from snake venoms and water buffalos blood produced by The Center for the Studies of Venoms and Venomous Animals (CEVAP) at UNESP. Then, it was necessary to better understand the composition of the blood plasma and cryoprecipitate these buffalo, in order to support future research will involve the identification of molecular markers of infectious diseases that can affect these donor animals. This study was divided into two parts: the first stands up the previous findings and significance of buffalo, the use of animal blood for developing bioinsumes in animal and human health, the production and application of several fibrin sealants, the use proteomics approach as a research strategy for the discovery of molecular biomarkers of infect diseases and a brief description of the analytical methods used by proteomics approach. The second part of this work brings the protein characterization of blood plasma and cryoprecipitate of B. bubalis healthy buffalo, where have evidenced 17 groups of major proteins involved in the signaling pathway of the complement system and the cascade coagulation

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:24:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-09. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:28:14Z : No. of bitstreams: 1 000851689_20160630.pdf: 376120 bytes, checksum: 32fc16e2c5bbb863dfa1379cc26f22ee (MD5) Bitstreams deleted on 2016-07-01T13:02:22Z: 000851689_20160630.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:03:18Z : No. of bitstreams: 1 000851689.pdf: 831381 bytes, checksum: b7033baffb4ed0be7668f5c935297807 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do consumo regular do suco de laranja nos parâmetros nutricionais, hemodinâmicos e bioquímicos de pacientes com hepatite C crônica. Participaram do estudo 66 indivíduos adultos de ambos os sexos, divididos em quatro grupos: Grupo com tratamento medicamentoso e com suco de laranja (MedSuco), Grupo sem tratamento medicamentoso e com suco de laranja (Suco), Grupo com tratamento medicamentoso e sem suco de laranja (Med) e Grupo sem tratamento medicamentoso e sem suco de laranja (Controle). Os participantes dos grupos Suco e MedSuco receberam 500 mL/dia de suco de laranja pasteurizado durante 8 semanas. As variáveis antropométricas utilizadas foram: peso, altura, dobras cutâneas do tríceps, bíceps, subescapular e supra ilíaca e circunferência da cintura. Para a avaliação hemodinâmica foram verificadas a pressão arterial sistólica e a diastólica, e para a avaliação dietética foi utilizado o registro alimentar, durante três dias alternados. Para a avaliação bioquímica foram realizadas dosagens de colesterol total, colesterol de HDL, triglicérides, glicemia de jejum, insulina, proteína C reativa, peroxidação lipídica, capacidade antioxidante, TNF-, interleucinas 6 e 10 e carga viral. Todas as avaliações foram realizadas antes e após o consumo do suco de laranja. Os resultados mostraram que após o consumo do suco de laranja, os pacientes do grupo Suco tiveram redução significativa do LDL-C (-9,9%), pressão arterial sistólica (-4.5%), insulina (-26.5%), índice HOMA (-32.0%), peroxidação lipídica (-68.5%), proteína C reativa (-48.8%) e TNF- (-11.7%), e aumento da capacidade antioxidante (1.2%); e os pacientes do grupo MedSuco tiveram redução significativa do LDL-C (-13.7%), pressão arterial sistólica (5.1%), HDL-C (-12.2%), peroxidação lipídica (-39.1%), proteína C reativa (-74.9%), TNF- (-8.8%) e carga viral (26.5%), e aumento da capacidade... / This study aimed to evaluate the effect of regular orange juice consumption on nutritional parameters, hemodynamics and biochemicals of patients with chronic hepatitis C. The study included thirty-six adults of both sexes, divided into four groups: Group with drug treatment and orange juice (MedJuice), Group without drug treatment and with orange juice (Juice), Group with drug treatment and no orange juice (Med) and Group without drug treatment and no orange juice (Control). The participants of groups Juice and MedJuice received 500 mL / day of pasteurized orange juice for 8 weeks. The anthropometric variables were studied: weight, height, skin folds of the triceps, biceps, subscapular and suprailiac and waist circumference. For hemodynamic evaluation were found systolic and diastolic blood pressure, and for dietary assessment was used food records for three alternate days. For the biochemical evaluation were performed in total cholesterol, HDL cholesterol, triglycerides, fasting glucose, insulin, C-reactive protein, lipid peroxidation, antioxidant capacity, TNF-α, interleukins 6 and 10 and viral load. All evaluations were performed before and after consumption of orange juice. The results showed that after the consumption of orange juice, patients of Juice group had significant reduction in LDL-C (-9.9%), systolic blood pressure (-4.5%), insulin (-26.5%), HOMA index (-32.0%), lipid peroxidation (-68.5%), C-reactive protein (-48.8%) and TNF-α (-11.7%) and increase in antioxidant capacity (1.2%); and patients of MedJuice group had significant reduction in LDL-C (-13.7%), systolic blood pressure (5.1%), HDL-C (-12.2%), lipid peroxidation (-39.1%), C-reactive protein (-74.9% ), TNF-α (-8.8%) and viral load (26.5%) and increase in antioxidant capacity (2.5%). There was no significant decrease in anthropometric variables. Consumption of orange juice increased by 334.0% to intake of vitamin C and 63.6% folate intake of participants in the ...

Orientador: Marcelo da Costa Ferreira / Coorientador: Manoel Victor Franco Lemos / Banca: Francisco Jorge Cividanes / Banca: Ricardo Antonio Polanczyk / Banca: Roberto Manoel Pereira / Banca: Fernando Luis Cônsoli / Resumo: A espécie Periplaneta americana (Linnaeus, 1758) é uma praga urbana capaz de carrear patógenos para habitações humanas, depreciar alimentos, vestimentas e documentos. Estratégias de controle do organismo com menor risco ambiental podem ser utilizadas, como os fungos entomopatogênicos, com potencial no controle de suas ootecas, que são a fase de maior propagação do inseto. A estrutura geográfica em que as baratas vivem pode levar a subdivisões populacionais, com efeitos na patogenicidade e virulência dos entomopatógenos. O objetivo deste trabalho foi verificar o nível de divergência genética de populações de P. americana de duas cidades do Estado de São Paulo e avaliar a eficiência de controle de fêmeas e ootecas de P. americana após o tratamento com inseticidas sintéticos e fungos entomopatogênicos. As duas populações apresentaram alto nível de segregação, com diferenças em sua mortalidade. O uso dos fungos Metarhizium anisopliae (Metschnikoff, 1879) e Beauveria bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. (1912) foi menos eficaz no controle de fêmeas de P. americana do que calda inseticida contendo lambdacialotrina na primeira aplicação em campo. M. anisopliae apresentou resultados promissores no controle de ootecas e fêmeas de P. americana, indicando seu potencial de uso em programas de manejo integrado deste inseto / Abstract: Periplaneta americana's (Linnaeus, 1758) species is an urban pest capable of carrying pathogens to human habitations, depreciating food, clothing and documents. Control strategies of the organism with less environmental risk can be used, such as entomopathogenic fungi with potential in control of their oothecae, which is the stage of higher spreading of the insect. The geographical structure in which the cockroaches live can lead to population subdivisions, with effects on pathogenicity and virulence of entomopathogenic. The objective of this study was to determine the level of genetic diversity of P. americana's populations of two cities of São Paulo and evaluate the control efficiency of P. americana's females and ootheace after treatment with synthetic insecticides and entomopathogenic fungi. Both populations showed a high level of segregation, with differences in their mortality. The use of fungi Metarhizium anisopliae (Metschnikoff, 1879) and Beauveria bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. (1912) was less effective in the control of P. americana's females than spraying containing insecticide lambdacyhalothrin in the first field application. M. anisopliae showed promising results in control of P. americana's oothecae and females, indicating its potential use in integrated pest management programs for this insect / Doutor

Made available in DSpace on 2016-06-07T17:12:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-11-08. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-07T17:17:08Z : No. of bitstreams: 1 000865594.pdf: 2201183 bytes, checksum: 6b859e26d53e27fcb4ef0d604d1d7052 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do consumo crônico de diferentes concentrações de álcool nos tecidos periodontais e na evolução da periodontite experimental (PE). Foram utilizados 160 animais divididos em 4 grupos experimentais: Grupo PE-NT (n= 40): Ratos normais, com PE; Grupo PE-A14° (n= 40): Ratos com PE e expostos ao álcool à 14%; Grupo PE-A25° (n= 40): Ratos com PE e expostos ao álcool à 25%; Grupo PE-A36° (n= 40): Ratos com PE e expostos ao álcool à 36%. Os animais dos Grupos PE-A14°, PE-A25° e PE-A36° foram submetidos às diferentes concentrações de álcool 30 dias antes da instalação da ligadura. Foram obtidas amostras sanguíneas previamente ao inicio da administração das soluções alcoólicas em todos os períodos experimentais. Dez animais de cada grupo foram eutanasiados aos 3, 7, 15 e 30 dias após a indução da PE. Foram obtidos cortes semi seriados de 4 μm de espessura no sentido mésio-distal e corados com Hematoxilina e Eosina ou Tricrômico de Masson. A porcentagem de osso na furca (POF) foi avaliada por análises histomorfométricas e foram realizadas analises histológicas, imunoistoquímicas e bioquímicas. As análises histológicas, histométricas e imunoistoquímicas demostraram que no grupo PE-NT a ligadura foi capaz de induzir perda óssea alveolar (p<0,05). Nos grupos PE-NT, PE-A14°, PE-A25° e PE-A36° o álcool exacerbou a perda óssea alveolar nos diferentes períodos experimentais (p<0,05). Na analise bioquímica, observou-se uma diminuição nos níveis da FA em todos os grupos experimentais após a PE, quando comparado ao baseline de cada grupo experimental, e na analise da ALT e AST, os níveis destes marcadores expressaram um incremento significativo em todos os grupos experimentais após a PE, quando comparado a seus respetivos baseline. Dentro dos limites... / Aim: The aim of this study was to evaluate the influence of chronic intake of different alcohol concentrations on periodontal tissues and the evolution of experimental periodontitis (EP). One hundred sixty male rats were set into four experimental groups: GROUP EP-NT: normal rats with EP; GROUP EP-A14° (n=40): rats with EP exposed to alcohol with 14% concentration; GROUP EP-A25 (n=40): rats with EP exposed to alcohol with 25% concentration; GROUP Ep-A36% (n=40) rats: rats with EP exposed to alcohol with 36% concentration. The animals from groups EP-A14°, EP-A25° and EP-A36° were subjected to each respective alcohol concentration 30 days before the ligature placement. Blood samples were collected before beginning the administration of the alcoholic solutions in all experimental periods. Ten animals from each group were euthanized at 3, 7, 15 and 30 days after EP induction. Were obtained semi-serial sections with 4m thickness in mesio-distal direction and stained with hematoxylin-eosin or Masson Trichrome. The percentage of bone in the furcation area (PBF) was evaluated by histomorphometric analysis, and were realized histological, immunohistochemical and biochemical analyzes. The histological, histometrical and immuhistochemical analyzes showed that on EP-NT group the ligature was able to induce alveolar bone loss (p<0,05). On groups EP-NT, EP-A14, EP-A25 and EP-A36 the alcohol exacerbated the alveolar bone loss at each experimental periods (p<0,05). The biochemical analysis showed decreased levels of alkaline phosphatase (AP) in all experimental groups after EP when compared to the baseline of each experimental group. In ALT and AST analyzes, was observed that these markers expressed a significant increase in all experimental groups after EP when compared to each respective baselines. Within...

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-25. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:18Z : No. of bitstreams: 1 000868699.pdf: 5387925 bytes, checksum: 158053d9b7e2b3318bfcbcaa3c1943a4 (MD5)

Orientador: Fábio Porto Foresti / Coorientador: Paulino Martinez Portela / Banca: Daniela Cristina Ferreira / Banca: Fernanda Simões de Almeida / Banca: Fernando Fernandes Mendonça / Banca: Roberto Ferreira Artoni / Resumo: Astyanax altiparanae, é uma espécie de pequeno porte e de grande interesse econômico. É considerada uma ótima opção para a piscicultura brasileira por suas características biológicas favoráveis ao cultivo e produção. É amplamente distribuída na bacia do Alto rio Paraná, tanto em número de indivíduos, como também em biomassa. Além de comercialmente interessante, A. altiparanae é um excelente modelo para estudos ecológicos, genéticos e evolutivos. Este trabalho teve como objetivos isolar e caracterizar marcadores moleculares microssatélites para A. altiparanae; testar a transferabilidade dos marcadores desenvolvidos em espécies relacionadas; quantificar a variabilidade genética dentro e entre as populações; verificar a possível estruturação genética das populações e averiguar se a estruturação ou a falta dela pode estar relacionada com atividades antrópicas. O isolamento e a caracterização resultaram em 11 locos polimórficos, que foram testados em dez espécies da mesma família. Apenas para as espécies do mesmo gênero, a transferabilidade foi eficaz. Em etapa posterior, foram selecionados oito locos microssatélites para analisar 419 indivíduos de 13 localidades das principais bacias do Alto rio Paraná. As populações de A. altiparanae apresentaram uma elevada variabilidade genética, e as bacias que apresentaram maior diversidade genética foram a do Tietê, seguida do Paranapanema, Ivinhema e Grande, esta última com a menor diversidade genética encontrada. No geral, não foi detectada estruturação genética, e a distribuição das populações foi relacionada com a atividade antrópica que por vários anos vem misturando os estoques, por razões de repovoamento após a construção de hidrelétricas e por liberação indiscriminada de indivíduos em locais distantes de sua origem durante a pesca esportiva, ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Astyanax altiparanae, is a small species and of large economic interest. It is considered a great option for Brazilian fish-farming by its biological characteristics favorable to the cultivation and production. It is widely distributed in the the Upper Paraná River basin, both in number of individuals, as well as biomass. In addition to commercially interesting A. altiparanae is an excellent model for ecological, genetic and evolutionary studies. This study aimed to isolate and characterize microsatellite markers for A. altiparanae, test the transferability of the markers developed in related species, to quantify the genetic variability within and among populations; verify the possible genetic structure of populations and determine whether the structure or the lack of it may be related to anthropic activities. The isolation and characterization resulted in 11 polymorphic loci, which were tested in 10 species of the same family. Just for the species of the same genus, transferability was effective. In a next step, we selected eight microsatellite loci in the analysis of 419 individuals from 13 localities of the Upper Paraná River main basin. The populations of A. altiparanae showed a high genetic variability in the Upper Paraná River basin, and the basin with the highest genetic diversity were Tietê, then the Paranapanema, Ivinhema, and Grande, the latter one with lower genetic diversity. Overall, it was not detected genetic structure and distribution of populations was related to human activity that for several years has been blending stocks for reasons of restocking after the construction of dams and indiscriminate release of individuals in far places from their origin during sport fishing, widely practiced in the rivers of the Upper Paraná basin. Only populations P3, P4, and G2 showed moderate genetic differentiation, probably because these three locations...(Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Lucilene Delazari dos Santos / Coorientador: Rui Seabra Ferreira Junior / Banca: Mario Sérgio Palma / Banca: Marília Afonso Rabelo Buzalaf / Resumo: Desde o advento da nova era da abordagem proteômica, a identificação de assinaturas moleculares individuais em vários sistemas biológicos pela pesquisa básica tem impulsionado a descoberta de biomarcadores diretamente relacionados a aplicações terapêuticas, promovendo desenvolvimento de testes diagnósticos clínicos mais específicos. Neste contexto, a necessidade da aplicação clínica estimula a pesquisa de bancada, sendo que novas tecnologias permitem novas descobertas e podem se transformar em prognósticos efetivos, medicamentos inéditos ou mais eficazes e/ou testes diagnósticos mais específicos. Os bubalinos tem sido alvo de muitas iniciativas econômicas e de pesquisas translacionais. Uma vez que, seu plasma sanguíneo é rico em fibrinogênio, búfalos da espécie Bubalus bubalis raça Murrah, se tornaram doadores primordiais de matéria-prima para o desenvolvimento de insumos biológicos, como por exemplo, o selante de fibrina derivado do veneno de serpentes e do sangue de bubalinos produzido pelo Centro de Estudos de Venenos e Animais Peçonhentos (CEVAP). Para tal, se fez necessário melhor compreender a composição do plasma sanguíneo e do crioprecipitado destes bubalinos, a fim de dar suporte à pesquisas futuras que envolverão a identificação de marcadores moleculares de doenças infecciosas que podem acometer estes animais doadores. Este trabalho foi dividido em duas partes: a primeira destaca-se os achados prévios e significância da bubalinocultura, a utilização do sangue de animais para o desenvolvimento de bioinsumos na saúde animal e humana, a produção e aplicação de diversos selantes de fibrina, o uso da abordagem proteômica como estratégia investigativa para a prospecção de biomarcadores moleculares de doenças infecciosas e uma breve descrição das principais técnicas analíticas empregadas pela abordagem proteômica. A segunda parte deste trabalho, destaca-se a caracterização proteica do... / Abstract: Since the advent of the new era of proteomics approach, the identification of individual molecular signatures in various biological systems for basic research has driven the discovery of biomarkers directly related to therapeutic applications, promoting the development of more specific clinical diagnostic tests. In this context, the need for clinical application stimulates the bench study, which new technologies and new discoveries can become effective prognostic, or novel drugs more effective and/or more specific diagnostic tests. The bubaline have been targets of several economic initiatives and translational research. Since its plasma is rich in fibrinogen, Bubalus bubalis water buffalos (Murrah) have became main donors of raw material for the development of biological insumes, as example, the fibrin sealant from snake venoms and water buffalos blood produced by The Center for the Studies of Venoms and Venomous Animals (CEVAP) at UNESP. Then, it was necessary to better understand the composition of the blood plasma and cryoprecipitate these buffalo, in order to support future research will involve the identification of molecular markers of infectious diseases that can affect these donor animals. This study was divided into two parts: the first stands up the previous findings and significance of buffalo, the use of animal blood for developing bioinsumes in animal and human health, the production and application of several fibrin sealants, the use proteomics approach as a research strategy for the discovery of molecular biomarkers of infect diseases and a brief description of the analytical methods used by proteomics approach. The second part of this work brings the protein characterization of blood plasma and cryoprecipitate of B. bubalis healthy buffalo, where have evidenced 17 groups of major proteins involved in the signaling pathway of the complement system and the cascade coagulation / Mestre