Orientador: Maria Cecília Rui Luvizotto / Resumo: O objetivo desta pesquisa foi avaliar o comportamento dos biomarcadores renais dimetilarginina simétrica (SDMA), creatinina sérica (CRs) e a relação proteína:creatinina urinária (UPC) em gatos aparentemente saudáveis (n: 20) e gatos portadores de doença renal crônica (n:10). No grupo de gatos com doença renal crônica (DRC) os valores médios de SDMA, CRs e UPC foram 20,4 ± 3,1 µg/dL, 2,4 ± 0,7 mg/dl e 0,6 ± 0,23, respectivamente. Para o grupo aparentemente saudável a SDMA, CRs e UPC obtidos foram 9,8 ± 1,8 µg/dL, 0,9 ± 0,4 mg/dl e 0,28 ± 0,08. Para o grupo positivo para DRC, o coeficiente de correlação entre a SDMA e CRs foi r = 0,52, indicando ser correlação moderada entre estes marcadores renais. Pelo exposto conclui-se que os gatos sintomáticos para DRC necessitam serem subestadiados pelos critérios da IRIS (2017) (UPC, CRs, PAS e SDMA) e execução de medidas de renoproteção como tentativa de controle da progressão da DRC presente. Para os gatos aparentemente saudáveis o comportamento da SDMA deu-se dentro da normalidade para a espécie, com um valor de UPC limítrofe, sugerindo monitoramento e acompanhamento trimestral ou semestral, conforme avaliação clínica. / Abstract: The objective of this study was to evaluate the behavior of the renal biomarkers dimethylarginine symmetric (SDMA), serum creatinine (CRs) and protein: urinary creatinine ratio (UPC) in apparently healthy cats (n: 20) and cats with chronic kidney disease (10). In the group of cats with chronic kidney disease (CKD) the mean values of SDMA, CRs and UPC were 20,4 ± 3,1μg / dL, 2,4 ± 0,7 mg / dl and 0,6 ± 0,23, respectively. In the apparently healthy group the SDMA, CRs and UPC obtained were 9,8 ± 1,8 μg / dL, 0,9 ± 0,4 mg/dl and 0,28 ± 0,08. In the group of cats with chronic kidney disease the correlation of SDMA and CRs was r = 0.52, indicating a moderate correlation between these renal biomarkers. Based on those findings concluded that cats with CKD require a detailed diagnosis by IRIS (2017) (UPC, CRs, PAS and SDMA) to perform kidney protection and attempt to control the progression of CKD. For apparently healthy cats, the behavior of SDMA was the normal range for the species, with a borderline UPC value, suggesting monitoring and quarterly or semi-annual follow-up, according to clinical evaluation. / Doutor

Orientador: Denis Moledo de Souza Abessa / Resumo: Centenas de compostos são detectados nos diferentes compartimentos ambientais podendo ser de origem natural ou antrópica. Em muitos casos, pouco se sabe a respeito desses compostos, não havendo regulações sobre seu uso, e por isso são denominados compostos de interesse emergente. Dentre eles podem ser citados os biocidas das tintas anti-incrustantes. Tais tintas são utilizadas para proteger e combater a formação e o estabelecimento de comunidades bioincrustantes sobre superfícies expostas à água do mar. Elas são aplicadas em diversas estruturas, tais como embarcações, plataformas petrolíferas, tubulações submarinas, comportas de represas, tanques destinados à aquicultura, entre outras. Assim, essas tintas são utilizadas com o intuito de preservar as estruturas, bem como, a manter a navegabilidade, no caso das embarcações. O composto de interesse para este estudo é um dos biocidas utilizados nas tintas anti-incrustantes, a diclofluanida. Devido as suas características físico-químicas, parte da diclofluanida liberada na coluna d’água tenderá a adsorver ao material particulado e se depositará nas camadas sedimentares. Desta forma este estudo teve o objetivo de avaliar a toxicidade e efeitos subcrônicos da diclofluanida em exposições realizadas em água e sedimento com espécies marinhas. Além disso, experimentos utilizando sedimento também tiveram o objetivo de comparar a influência de diferentes concentrações de matéria orgânica sobre a toxicidade de sedimentos contendo dicloflua... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Hundreds of compounds have been detected in different environmental compartments, which may be natural or anthropogenic origin. In many cases, little is known about these compounds, thus there is not regulations for them, leading them be considered effective contaminants and so are called emerging. Among these compounds can be cited the biocides of antifouling paints. They are used to protect and combat the formation and establishment of biofouling communities on surfaces exposed to seawater. They are applied in various structures, such as vessels, oil platforms, submarine pipelines, tanks for aquaculture, among others. Thus, these paints are used with the intention of preserving the structures, as well as maintaining navigability in the case of vessels. The compound of interest for this study is one of the biocides used in antifouling paints, dichlofluanid. Due to its physico-chemical characteristics, part of the dichlofluanid released in the water column tended to adsorb to the particulate material and then deposit in the sedimentary layers. In this way, this study aimed to evaluate the toxicity and subchronic effects of dichlofluanid exposures, after in water and sediment with marine species. In addition, sediment experiments also aimed to evaluate how different concentrations of organic matter in the sediments could influence on their responses. Embryos of the sea urchin Echinometra lucunter and ovigerous females of the copepod Nitocra sp for the ecotoxicological tests in... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Márjorie de Assis Golim / Resumo: O vírus da hepatite C (VHC) é responsável por causar hepatite C nas formas aguda ou crônica, sendo a fibrose hepática uma possível consequência da evolução da lesão. Na avaliação da fibrose o método considerado padrão ouro é a biópsia hepática. Com a necessidade de se desenvolver metodologias alternativas à biópsia hepática, escores utilizando biomarcadores séricos têm sido validados, de modo que possam servir para o acompanhamento de indivíduos infectados pelo vírus da hepatite C. Realizou-se estudo retrospectivo, incluindo 94 pacientes portadores crônicos do VHC, genótipo 1, pré-tratamento (naive) ou retratados. Os pacientes foram separados em grupos conforme os resultados da classificação METAVIR dos graus de fibrose (F0 à F4), seja por biópsia hepática ou por elastografia hepática por quantificação de ponto. Além disso, os pacientes foram classificados em grupos de fibrose leve G1 (F1-F2) e fibrose avançada G2 (F3-F4). Metodologias não-invasivas como FIB-4 e APRI foram comparadas ao método denominado FibMaster desenvolvido neste estudo através de análises multivariadas e aprendizado de máquina para elaborar um modelo preditivo de fibrose hepática baseado em variáveis sanguíneas possivelmente associadas ao dano hepático. Os parâmetros estatisticamente mais significantes foram alfa-fetoproteína (AFP), apresentando AUROC de 0.890 para a classificação de fibrose F3-F4 e 0.772 para classificação dos grupos G1-G2, ureia com AUROC de 0.723 para fibrose F2-F3, FIB-4 (AUROC de 0.8... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Hepatitis C virus (HCV) is responsible for causing both acute hepatitis C and chronic form, where the last is commonly associated with liver fibrosis. The evaluation of fibrosis is currently performed mainly through liver biopsy, which is the methodology considered as gold standard in the classification of fibrosis stages. With the necessity of developing new alternative methodologies to hepatic biopsy, scores using serum biomarkers have been validated, thus they can be used to monitor infected individuals with the hepatitis C virus. A retrospective study was carried out including 94 chronic HCV, genotype 1, pre-treatment (naive) or retreated patients. Patients were separated into groups according to the METAVIR classification of degrees of fibrosis (F0 to F4), either by hepatic biopsy or point shear wave-elastography exam. Moreover, patients were classified into groups of mild fibrosis G1 (F1-F2) and advanced fibrosis G2 (F3- F4). Non-invasive methodologies such as FIB-4 and APRI were compared to the method named FibMaster, which was proposed in this study through multivariate analyzes and machine learning, in order to elaborate a predictive model for hepatic fibrosis based on blood biomarkers possibly associated with hepatic injury. The most statistically significant parameters were alpha-fetoprotein (AFP), presenting AUROC of 0.890 for fibrosis classification F3-F4 and 0.772 for the classification of groups G1- G2, urea with an AUROC of 0.723 for fibrosis F2-F3, FIB-4 (AUR... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Priscylla Tatiana Chalfun Guimarães-Okamoto / Resumo: A dimetilarginina simétrica (SDMA) é um aminoácido formado da metilação da arginina, liberada na corrente sanguínea durante a degradação proteica e excretada principalmente pela urina. Este aminoácido foi descoberto há 45 anos, presente na urina humana e estudado como possível biomarcador pela sua aparente estrita excreção renal e por suas concentrações serem altamente correlacionadas com a da taxa de filtração glomerular (TFG) em animais e seres humanos. Recentemente, este biomarcador foi validado e inserido na Medicina Veterinária pelo seu rico valor no diagnóstico precoce da doença renal crônica (DRC), assim como na sua monitoração ao longo da doença e também como um biomarcador alternativo na avaliação da TFG. Este trabalho visou avaliar o comportamento da SDMA em pacientes com DRC classificados no estádio 4 submetidos à terapia de hemodiálise intermitente e no grupo controle, bem como comparar e correlacionar seus valores com a creatinina sérica (sCr) em ambos os grupos. Foram avaliados 24 animais, todos previamente diagnosticados e classificados no estádio 4. SDMA e sCr foram avaliados antes e após os protocolos terapêuticos. Os resultados obtidos foram a diminuição da concentração sérica de SDMA e sCr após o tratamento dialítico. Já no grupo fluído houve a diminuição dos valores de sCr e inversamente, o aumento das concentrações séricas de SDMA. Assim, apesar do SDMA ser um excelente biomarcador de TFG e de diagnóstico precoce da DRC, este não pode ser utilizado para a... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Symmetrical dimethylarginine (SDMA) is an amino acid formed from the methylation of arginine, released into the bloodstream during protein degradation and excreted primarily by urine. This amino acid was discovered 45 years ago in human urine and studied as a possible biomarker due to be strictly eliminated by renal excretion and its concentrations highly correlates with glomerular filtration rate (GFR) in animals and humans. Recently, this biomarker was validated and inserted in Veterinary Medicine for its rich value in the early diagnosis of chronic kidney disease (CKD) as well as its monitoring throughout the disease and as an alternative biomarker in the evaluation of GFR. This study aimed to evaluate the behavior of SDMA in dogs with CKD in stage 4 submitted to intermittent hemodialysis therapy and in the control group, as well as to compare and correlate their values with serum creatinine (sCr) in both groups. We evaluated 24 animals, all previously diagnosed and classified in stage IV. SDMA and sCr were evaluated before and after the therapeutic protocol. The results obtained were lower serum concentrations of SDMA and sCr after the dialytic treatment. However, in the fluid therapy group, inversely sCr levels lowered while SDMA serum concentrations increased . Thus, despite SDMA is an excellent biomarker of GFR and early diagnostic CKD, we do not recommend its use for diagnosis and follow up in dogs undergoing intermittent hemodialysis. / Mestre

Orientador: Renata de Britto Mari / Resumo: As zonas costeiras são ambientes altamente sensíveis aos impactos causados pelas atividades antropogênicas, e o uso desenfreado destas áreas vem gerando grande preocupação, uma vez que tais impactos estão reduzindo drasticamente a biodiversidade destes ecossistemas. O monitoramento destas áreas é de grande valia para detectar os principais impactos e, assim, criar medidas de prevenção e mitigação, sendo realizado através da utilização de biomarcadores, uma vez que estas ferramentas proporcionam a análise das respostas biológicas dos organismos a exposição a contaminação ambiental. Desta forma, este trabalho objetivou avaliar a qualidade ambiental de dois estuários da costa do estado de São Paulo que diferem quanto a densidade demográfica e políticas de preservação ambiental. Para tanto, exemplares de Sphoeroides testudineus foram coletados em três regiões, sendo estas: AR – Estuário do Rio Una (Área Referência - Mosaico Juréia Itatins), A1 – Estuário de Cananéia (Complexo Estuarino Lagunar de Cananéia Iguape) e A2 – Estuário de Santos (Complexo Estuarino de Santos – São Vicente). Os animais foram analisados quanto a biomarcadores de diferentes órgãos (fígado, brânquias, sangue, musculo e intestino) e níveis de organização biológica a fim de proporcionar uma resposta integrada quanto a saúde do organismo. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a qualidade ambiental dos estuários através da utilização de biomarcadores amplamente utilizados em estudos ecotoxicológicos (fígad... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Coastal zones are highly sensitive to the impacts caused by anthropogenic activities, and the unrestrained use of these areas is of great concern since such impacts are drastically reducing the biodiversity of such ecosystems. The monitoring of these areas is of great value to detect the main impacts and, thus, to create prevention and mitigation measures. The use of biomarkers is widely used in studies that evaluate environmental quality since this tool provides the analysis of organisms' biological responses to exposure to environmental contamination. In this way, this work aimed to evaluate the environmental quality of two estuaries located at the coast of the state of São Paulo that differ in terms of population density and environmental preservation policies. In order to do so, specimens of Sphoeroides testudineus were collected in three regions: AR- Rio Una Estuary (Reference Area - Juréia Itatins Mosaic), A1 - Cananéia Estuary (Lagunar Estuary Complex of Cananéia Iguape) and A2 - Santos Estuary (Estuarine Complex of Santos - São Vicente). The animals were analyzed for biomarkers of different organs (liver, gills, blood, muscle, and intestine) and levels of biological organization in order to provide an integrated response to the health of the organism. Thus, the objective of this study was to evaluate the environmental quality of the estuaries using biomarkers widely used in ecotoxicological studies (liver, gills, muscle, and blood), as well as to evaluate the response... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Camilo Dias Seabra Pereira / Resumo: O amplo uso de fármacos na medicina humana e veterinária tem resultado em problemas ambientais, uma vez que a ocorrência dessas substâncias em ecossistemas aquáticos têm sido demonstrada em regiões que recebem efluentes domésticos e industriais. Embora a ocorrência dessas substâncias no ambiente marinho e estuarino tenha sido amplamente observada, há poucos estudos que abordem a avaliação dos efeitos nocivos em organismos não-alvos, principalmente de áreas tropicais. Dada a importância de conhecer as concentrações ambientais de fármacos em zonas costeiras e estimar os efeitos biológicos adversos em organismos marinhos, o presente estudo visou identificar e quantificar por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas (LC/MS/MS) os fármacos losartan, fluoxetina, metformina, 17 -etinilestradiol, amoxicilina e o antimicrobiano triclosan em amostras de água coletadas na Baía de Santos (SP); avaliar as respostas metabólicas (fases I (etoxiresorufina-O- desetilase/ EROD; dibenzilfluoresceína/ DBF) e II (glutationa-S-transferase/ GST)) do processo de biotransformação; a atividade antioxidante (glutationa peroxidase/ GPx) e estimar os efeitos subletais (lipoperoxidação (LPO), dano em DNA, colinesterase (ChE) e estabilidade da membrana lisossomal (EML)) associados à exposição a essas substâncias (48 e 96 horas), nos tecidos brânquia, glândula digestiva e hemolinfa do molusco bivalve Perna perna. Com o antimicrobiano triclosan foi realizada uma avaliação de risco ambiental ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The widespread use of drugs in human and veterinary medicine has resulted in environmental problems, as the occurrence of these substances in aquatic ecosystems has been demonstrated in regions receiving domestic and industrial effluents. Although the occurrence of these substances in the marine and estuarine environment has been widely observed, there are few studies that approach the evaluation of harmful effects in non-target organisms, mainly in tropical areass. Given the importance of knowing the environmental concentrations of pharmaceuticals in coastal zones and the adverse biological effects on organisms of these regions, the present study aimed to identify and quantify by mass spectrometry (LC/MS/MS) the pharmaceuticals losartan, fluoxetine, metformin, 17α- ethynylestradiol, amoxicillin and the antimicrobial triclosan in marine water samples collected in Santos Bay, evaluate the metabolic responses (phases I (ethoxyresorufin-O-deethylase/EROD, dibenzylfluorescein/DBF) and II (glutathione S-transferase/GST), antioxidant activity (glutathione peroxidase/GPx) and estimate sub-lethal effects (lipoperoxidation (LPO), DNA damage, cholinesterase (ChE) and lysosomal membrane stability (VN)) associated with the exposure to these substances (48 and 96 hours), in the gill tissues (BR), digestive gland (GD) and hemolymph of the marine bivalve Perna perna. With the antimicrobial triclosan, an environmental risk assessment was performed using marine invertebrate toxicity data. All... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Patricia Pintor dos Reis / Resumo: Introdução: O carcinoma hepatocelular (CHC) está entre as neoplasias de alta complexidade no diagnóstico, determinação do prognóstico e tratamento, sendo o sexto tipo de câncer mais comum no mundo e a segunda causa mais comum de morte por câncer. Uma variedade de genes alterados foram relatados, revelando heterogeneidade genética entre tumores de diferentes pacientes. Portanto, o insucesso terapêutico da terapia convencional pode ser parcialmente atribuído a essa heterogeneidade associada ao comportamento biológico tumoral. Sendo assim, justifica-se a necessidade de identificação de vias moleculares as quais podem conter biomarcadores clinicamente aplicáveis para a melhoria do diagnóstico e tratamento dos pacientes com CHC. Os resultados podem ter futuras aplicações clínicas utilizando miRNAs e os genes-alvo regulados por miRNAs como biomarcadores com valor diagnóstico, prognóstico e terapêutico. Objetivos: Identificar o perfil global de expressão de miRNAs (microRNoma) e os mRNAs-alvo potencialmente regulados por miRNAs em CHC. Pacientes e Métodos: Foram incluídas 18 amostras de tecido, fixadas em formalina e emblocadas em parafina (FFPE) de carcinoma hepatocelular, sendo 18 amostras tumorais e 18 amostras de tecido hepático histologicamente normal, adjacente ao tumor, dos mesmos pacientes. O perfil de expressão de miRNAs das amostras tumorais foi determinado utilizando o ensaio TaqMan Array Human MicroRAN Cards (TLDA) (card A) (Life Technologies). A análise dos dados util... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Orientador: Carlos Alan Dias-Junior / Resumo: O fipronil é um inseticida fenilpirazol amplamente utilizado na Medicina Veterinária, na agricultura e domesticamente para o controle de pragas. O mecanismo responsável pela sua ação tóxica consiste na inibição seletiva dos receptores do ácido gama amino butírico GABA associado a canais de cloreto. Estudos recentes mostram que fipronil afeta organismos não-alvo, incluindo populações de espécies ambiental e, potencialmente, os seres humanos. O presente estudo verificou se a exposição a fipronil afeta a pressão arterial sistólica e biomarcadores relacionados. Assim, fipronil foi administrado oralmente a ratos (30 mg / kg / dia) durante 15 dias (grupo Fipronil) ou solução fisiológica (grupo controle). Fipronil aumentou significativamente a pressão arterial sistólica (158 ± 13 mmHg), em relação ao grupo controle (127 ± 3 mmHg). Significativamente, níveis mais elevados de fipronil no plasma foram observados no grupo Fipronil (0,46 ± 0.09μg / mL contra 0,17 ± 0.11μg / mL no grupo de controle). O grupo exposto ao Fipronil apresentou ganho de peso menor em comparação com o grupo controle. Enquanto o fipronil resultou num aumento das concentrações de endotelina-1, a redução da capacidade antioxidante e níveis menores de metaloproteinase de matriz 2 (MMP-2) e Nitrito/Nitrato em relação ao grupo controle, não foram observadas alterações em marcadores séricos renal e hepáticos. Portanto, este estudo sugere que o fipronil provoca hipertensão e a endotelina-1 desempenha um papel importante... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Recent reports show that fipronil affects non-target organisms, including environmental species populations and potentially humans. We aimed to examine if fipronil exposure affects the systolic blood pressure and related biomarkers. Thus, fipronil was orally administered to rats (30 mg/kg/day) during 15 days (Fipronil group) or physiological solution (Control group). While fipronil increased significantly the systolic blood pressure (158 ± 13 mmHg), no significant changes were observed in Control group (127 ± 3 mmHg). Significantly, higher levels of fipronil in plasma were observed in Fipronil group (0.46 ± 0.09 μg/mL versus 0.17 ± 0.11 μg/mL in Control group). Fipronil group showed lower weight gain compared with Control group. While fipronil resulted in higher concentrations of endothelin-1, reduced antioxidant capacity and lower levels of circulating matrix metalloproteinase 2 (MMP-2) and nitric oxide (NO) metabolites compared to Control group, no alteration was observed in serum biomarkers of renal and hepatic/biliary functional abilities. Therefore, this study suggests that fipronil causes hypertension and endothelin-1 plays a key role. Also, these findings suggest that reductions of both MMP-2 and NO may contribute with the elevation of systolic blood pressure observed with fipronil. / Mestre

Orientador: Priscylla Tatiana Chalfun Guimarães Okamoto / Resumo: A doença do trato urinário inferior de felinos (DTUIF) corresponde a uma série de afecções que podem acometer a bexiga e a uretra desses animais. A forma obstrutiva é a consequência mais prevalente e mais grave dentre outras DTUIF, podendo levar o animal a azotemia pós-renal, redução da taxa de filtração glomerular (TFG) e a lesão renal aguda (LRA), que caso não seja tratada de forma eficiente, pode evoluir para doença renal crônica (DRC), uma doença frequente na população geriátrica felina. A creatinina sérica (sCr) é o biomarcador de TFG mais utilizado na clínica veterinária, porém apresenta baixa sensibilidade e diversos fatores que podem afetar seus valores. A dimetilarginina simétrica (SDMA) é um biomarcador mais recente na medicina veterinária que vem apresentado maior precocidade na detecção da perda da função renal e menor interferência de fatores extrarrenais, porém poucos são os trabalhos que determinam valores de SDMA em lesão renal de gatos. Este trabalho visou avaliar os valores de SDMA e compará-los com a sCr, ureia, dados hemogasométricos, escore clínico e tempo de obstrução de gatos com DTUIF obstrutiva. Os animais foram alocados em dois grupos experimentais, sendo 17 animais do grupo obstruído (GO) e 13 animais sadios para grupo controle (GC). As amostras foram coletadas antes da desobstrução (M0) e durante o tratamento clínico, nos momentos 12, 24 e 48 horas (M12, M24 e M48). Resultados obtidos demonstraram que no M48 do GO, 50% dos gatos obstruídos apresent... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Feline lower urinary tract disease (FLUTD) is a series of conditions that can affect the bladder and urethra of these animals. The obstructive form is the most prevalent and most serious consequence among other FLUTD, which can lead to post-renal azotemia and reduced glomerular filtration rate (GFR) and acute kidney injury (AKI), which if not treated effectively, can progress to chronic kidney disease (CKD), a common disease in the feline geriatric population. Serum creatinine (sCr) is the biomarker of GFR most commonly used in veterinary pratice, but it has low sensitivity and there are several factors that may affect its values. Symmetrical dimethylarginine (SDMA) is a newer biomarker in veterinary medicine that has been shown to be more precocious in detecting loss of renal function and less interference of extrarenal factors, but there are few studies determining SDMA values in feline kidney injury. This work aimed to evaluate SDMA values and to correlate them with sCr, urea, hemogasometric data, clinical score and duration of obstruction of felines with obstructive DTUIF. The animals were allocated into two experimental groups, 17 animals from the obstructed group (GO) and 13 healthy animals for control group (GC). Samples were collected before clearance (M0) and during clinical treatment at 12, 24 and 48 hours (M12, M24 and M48). The results obtained were that in GO M48, 50% of obstructed cats had SDMA values above normal, while for sCr only 29.41% of cats were elevated... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Tesis para optar al grado de Magíster en Bioquímica. Área de especialización: Bioquímica Clínica / El cáncer ovárico representa la segunda causa de muerte de origen ginecológico, y el 80-90% corresponde a carcinoma ovárico epitelial (COE), del cual el 40% es de tipo seroso. Esta patología se caracteriza por presentar un transcurso silente, una detección tardía, responder pobremente a terapias, ser altamente angiogénico y de sobrevida muy baja. La etiología del COE no está clara y se postulan varias hipótesis al respecto. En carcinoma de páncreas, colon, tiroide papilar y medular, próstata y neuroblastoma, se ha reportado una sobreexpresión del receptor tirosina kinasa (trkA). En cuanto a su ligando, el factor de crecimiento nervioso (NGF) se ha reportado su participación directa e indirecta a través de su receptor trkA, en la angiogénesis, evento crucial para el desarrollo y progresión del tumor. El factor angiogénico más estudiado es el factor de crecimiento de endotelio vascular (VEGF) y se ha encontrado una sobreexpresión de las isoformas 121, 165 y 189, las cuales aumentan por efecto de NGF en explantes de cáncer ovárico epitelial. Si bien, ya se sabe que el receptor trkA y su ligando NGF participan en la angiogénesis del ovario, no hay antecedentes claros que indiquen si el receptor trkA y su ligando NGF están involucrados en la génesis y progresión del COE. Por lo que nos planteamos la siguiente Hipótesis:trkA modifica su expresión durante la carcinogénesis ovárica constituyendo un nuevo marcador tumoral. Para desarrollar este estudio nos propusimos el siguiente Objetivo General: Evaluar los niveles del receptor trkA y de NGF, durante las distintas etapas de transición del epitelio ovárico (desde el tejido ovárico normal al cáncer ovárico epitelial) y si esta expresión se relaciona con la expresión de VEGF. Metodología: En 30 muestras de ovarios: ovarios inactivos (OV-I), tumores benignos (T.Ben), borderline (T.Bord) y COE grados I, II y III (n=5 para cada grupo), se evaluó la localización celular y niveles proteicos del receptor trkA total, trkA-p, NGF y VEGF mediante inmunohistoquímica (IHQ). Para la semicuantificación se sumaron los porcentajes de las intensidades 2 y 3 y se expresó como el porcentaje de células con tinción positiva en el epitelio. Además, en tejidos congelados se analizaron los niveles de mRNA del receptor trkA, NGF y VEGF por RT-PCR, los resultados por PCR fueron normalizados con el gen constituivo β – actina. Resultados: Se encontró un aumento discreto en los niveles de mRNA de NGF durante la progresión carcinogénica, y estos aumentos fueron significativos entre OV-I vs COE I, COE II COE III (p<0,05). En cuanto a la expresión proteica de NGF, también se encontró un aumento significativo entre OV-I vs COE II y COE III (p<0,01). Los productos de splicing alternativos que codifican para las isoformas de VEGF 121, 165 y 189 aumentaron significativamente durante la progresión carcinogénica. VEGF 121 aumentó significativamente entre OV-I vs COE I, II y III vs (p<0,001). VEGF 165 aumentó significativamente entre OV-I vs COE I, II y III (p<0,001), y para VEGF 189 entre OV-I vs COE I, COE II y III (p<0,01). En cuanto a la expresión proteica de VEGF, se encontró un aumento durante la progresión, el cual fue significativo entre OV-I vs COE I, II y III (p< 0,001). Se encontró un aumento gradual y significativo en los niveles de mRNA de trkA, a medida que se va perdiendo la diferenciación celular. Este aumento fue significativo entre T.Bord vs COE I, COE II y III (p<0,01), COE I vs COE III (p<0,001) y COE II vs COE III (p<0,01). En las muestras de ovario normal inactivo y tumores benignos no fue posible encontrar la expresión génica de trkA, en parte por la poca cantidad de epitelio que encontramos en estos grupos. En cuanto a la expresión proteica del receptor trkA total, se observó un aumento gradual y significativo durante la progresión; principalmente entre OV-I vs COE I, II y III (p<0,001). De igual forma, los niveles proteicos del receptor activo p-trkA, aumentaron significativamente durante la progresión del COE, entre COE I vs COE III (p<0,01). En los grupos de OV-I, T.Ben y T.Bord, no se encontró tinción positiva para p-trkA. Discusión: Tanto la expresión proteica del receptor trkA total y p-trkA, como los niveles de mRNA de trkA, aumentan durante la progresión carcinogénica, principalmente entre los COE, y dichos aumentos se elevan significativamente con la indiferenciación del tejido, lo que confirmaría su posible uso como marcador de progresión del COE y también como marcador de mal pronóstico, ya que la proteína p-trkA se detectó desde COE I en adelante y a nivel de mRNA no fue detectado en los grupos de ovario inactivo y tumor benigno, sólo a partir de los tumores borderline comienza a detectarse pero muy débilmente, a diferencia de lo que ocurre en COE donde su expresión génica como proteica es muy alta. Este aumento en la expresión proteica de trkA durante la progresión se correlaciona positiva y significativamente con la expresión proteica de NGF y VEGF. Estos últimos corresponden a factores proangiogénicos, importantes para el desarrollo, progresión y metástasis tumoral