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Perfil bioquímico dos soros lácteo e sanguíneo de cabras com mastite de ocorrência natural

Sanchez, Diana Consuelo Cifuentes [UNESP] 08 December 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2016-08-12T18:48:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-08. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T18:51:05Z : No. of bitstreams: 1 000864826.pdf: 2067883 bytes, checksum: e9cd26ecf95e177b6e9775d4abb56c7d (MD5) / O estudo teve como objetivo avaliar as alterações da secreção láctea de cabras com mastite mediante o uso do teste da caneca de fundo escuro, California Mastitis Test (CMT), contagem de células somáticas (CCS) e perfil microbiológico, bem como determinar o perfil bioquímico, em especial de proteínas de fase aguda, do soro sanguíneo e soro lácteo de cabras com mastite clínica ou subclínica, de ocorrência natural. Foram constituídos três grupos experimentais compostos de 30 metades mamárias de cabras sadias, com secreção láctea negativa na prova da caneca de fundo escuro, CMT e no exame microbiológico (grupo controle - G1), 30 metades mamárias com secreção láctea negativa ao teste da caneca de fundo escuro, reação moderada (2+) ou intensa (3+) no CMT e positividade no exame microbiológico (Grupo mastite subclínica - G2) e 12 metades mamárias com secreção láctea positiva na prova da caneca de fundo escuro e no exame microbiológico (grupo mastite clínica - G3). Após antissepsia dos tetos foram colhidas amostras de leite para CCS, cultura microbiológica e determinação do perfil bioquímico do soro lácteo, inclusive o proteinograma mediante fracionamento em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), e amostras de sangue venoso para determinação do perfil bioquímico sérico. A contagem automática de células somáticas (CCS) e por contagem microscopia direta foi maior nas amostras de secreção láctea das cabras com mastite subclínica (G2: 4.500.000 células/mL e 20.830.000 células/mL, respectivamente) e com mastite clínica (G3: 7.500.000 células/mL e 39.100.000 células/mL, respectivamente). Staphylococcus aureus, Staphylococcus coagulase negativa (SCN), Staphylococcus coagulase positiva (SCP), Corynebacterium spp. e Streptococcus spp. foram os microrganismos isolados nas amostras de leite das cabras do G2 e G3. As amostras de soro lácteo das cabras do G2 e G3 apresentaram maiores atividades das enzimas... / The study aimed to evaluate the changes in milk from goats with mastitis by using the strip cup test, California Mastitis Test (CMT), somatic cell count (SCC) and microbiological profile as well as to determine the biochemical profile, especially acute phase proteins, in blood serum and whey from goats with naturally occurring clinical or subclinical mastitis. Three experimental groups were formed by 30 mammary glands from healthy goats with milk samples negative to strip cup test, CMT and microbiological examination (control group - G1); 30 mammary glands with milk samples negative to strip cup test but with moderate (2+) or intense (3+) reaction in CMT and microbiological examination (group with subclinical mastitis - G2), and 12 mammary glands with positive results to strip cup test and microbiological examination (group with clinical mastitis - G3). After asepsis of the teats milk samples were collected for SCC, microbiological culture, and to determine the biochemical profile in whey, including proteinogram by fractionation in poliacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). At the same time, blood samples were obtained to determine the serum biochemical profile. Automatic and microscopic methods were higher in milk samples from goats with subclinical mastits (G2: 4,500.000 cells/mL e 20,830,000 cells/mL, respectively) e with clinical mastitis (G3: 7,500,000 células/mL e 39,100,000 cells/mL, respectively). Staphylococcus aureus, Coagulase-negative Staphylococcus (CNS), Coagulase-positive Staphylococcus (CPS), Corynebaterium spp. and Streptococcus spp. were the microorganisms isolated in milk samples from goats of G2 and G3. Whey samples from goats of G2 and G3 showed higher activity of alkaline phosphatase (G2: 122 U/L and G3: 207 U/L) and gamma-glutamyltransferase (G2: 483 U/L and G3: 571 U / L), and higher concentrations of albumin (G2: 0.18 g/dL and G3: 0.29 g/dL), total protein (G2: 1.50 g/dL and G3: 1.67 g/dL), chlorides ...
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Caracterização genotípica de linhagens de Prototheca zopfii isoladas do leite de vacas e sensibilidade "in vitro"a antimicrobianos e anti-sépticos /

Salerno, Tatiana. January 2007 (has links)
Orientador: Márcio Garcia Ribeiro / Coorientador: Hélio Langoni / Banca: Antônio Carlos Paes / Banca: Alice Maria Melville Paiva Libera / Resumo: Nos últimos anos, Prototheca zopfii tem sido considerada uma das causas mais importantes de mastite de origem ambiental, refratária a terapia convencional. As infecções mamárias por P. zopfii acarretam alterações na composição do leite e redução na produção leiteira. O presente estudo avaliou a sensibilidade "in vitro" de 27 linhagens de P. zopfii isoladas do leite de vacas no Brasil frente a diferentes antimicrobianos e anti-sépticos, aliado a caracterização genotípica dos isolados. Nistatina (100,0%) e gentamicina (66,7%) foram as drogas mais efetivas para as 27 linhagens estudadas. A multi-resistência a três ou mais antimicrobianos foi observada em 100,0% das estirpes, principalmente frente a ampicilina, cefoperazona, cloxacilina, enrofloxacina, florfenicol, neomicina e tetraciclina. Hipoclorito de sódio (0,03-0,15%) e iodo (0,15-0,62%) revelaram efetividade "in vitro" para todos os isolados em baixas concentrações. A caracterização genotípica pela técnica de PCR baseada no fragmento 18S rDNA mostrou similaridade à cepa controle de P. zopfii SAG 2021T, caracterizando todos os isolados como pertencentes ao genótipo 2. O presente estudo descreve pela primeira vez no Brasil, a caracterização genotípica de linhagens de P. zopfii isoladas de leite obtido de vacas com mastite clínica, subclínica e de tanque de expansão. / Abstract: In last years, Prototheca zopfii has been considered one of the most important causes of mastitis from environmental origin, refractory to conventional therapy. The mammary infections caused by Prototheca zopfii lead to severe alterations in composition of the milk, and reduction in production. The present study evaluate the "in vitro" antimicrobials and anti-septic susceptibility, of 27 P. zopfii strains isolated from milk in cattle raised in Brazil, allied to the genotypic characterization of isolates. Nystatin (100.0%) and gentamicin (66.7%) were the most-effective drugs for 27 P. zopfii strains. Multiple drug resistance for three or more antimicrobials was observed in 100.0% of strains predominantly for ampicilin, cefoperazone, cloxacillin, enrofloxacin, florfenicol, neomycin e tetracycline. Sodium hypochlorite (0.03-0.15%) and iodine (0.15-0.62%) revealed "in vitro" efficacy in all isolates in low concentrations. The genotypic characterization using PCR technique based on the 18S rDNA displayed similarity to the strain-control of P. zopfii SAG 2021T characterizing all isolates belonging to the genotype 2. The present study describe by first time in Brazil the genotype characterization of P. zopfii strains isolated from milk, obtained in clinical and subclinical bovine mastitis and bulk tank milk. / Mestre
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Associação de agentes patogênicos isolados em análise microbiológica da água, com a presença de mastite clínica ou subclínica, em propriedades leiteiras da região de Cerqueira César-SP /

Medeiros, Maria Izabel Merino de. January 2005 (has links)
Orientador: Luiz Carlos de Souza / Resumo: Este trabalho objetivou pesquisar a relação entre os microrganismos patogênicos isolados e identificados em água utilizada na ordenha, com o isolamento e identificação dos mesmos em amostras de leite, de quartos mamários apresentando mastite clínica ou subclínica nas mesmas propriedades. Foram utilizadas 16 propriedades rurais leiteiras, escolhidas aleatoriamente, na região de Cerqueira César - SP, que utilizavam ordenha mecânica. A água utilizada na ordenha foi classificada em relação à presença de coliformes totais e fecais, como: dentro dos padrões ou fora dos padrões de potabilidade humana. Nos resultados obtidos, 94% das amostras foram classificadas como fora dos padrões em relação a coliformes totais e fecais. Os microrganismos identificados foram: Escherichia coli (51%), Enterobacter spp (25%), Enterobacter cloacae (8%) Edwardsiella tarda (8%) e Klebsiella oxytoca (8%). Em relação ao leite, foram analisadas 373 amostras provenientes de vacas em lactação, com mastite clínica (n=19; 5%) e subclínica (n=354; 95%). Os animais com mastite subclínica foram identificados pela contagem de células somáticas (CCS), utilizando-se o aparelho eletrônico (Somacount 300, Bentley), onde a média observada foi de 1.631 x 103 células/mL. Os principais microrganismos identificados foram: Staphylococcus aureus (30%), Corynebacterium bovis (23%) e Staphylococcus spp (15%). Conforme os dados obtidos, os agentes coliformes encontrados na água, utilizada na ordenha, não estavam presentes nas análises das amostras de leite dos quartos mamários com mastite clínica ou subclínica das respectivas propriedades, demonstrando não haver associação entre a qualidade da água e a ocorrência de mastite. / Abstract: The aim of present study was to research the relation between isolated and identified pathogenic microorganisms on the water utilized in milking with isolation and identification of the ones on milk samples of teats showing clinic or subclinic mastitis. Sixteen milk farms were chose in a randomized way, in Cerqueira Cesar - SP town, that used mechanical milking. Water of the farms was classified in relation to presence of totals and fecal coliforms such as: in the standard or out of the standard of human potability. On the results obtained, 94% of the samples were classified as being out of the standards related to total and fecal coliforms. The identified microorganisms were Escherichia coli (51%), Enterobacter spp (25%), Enterobacter cloacae (8%), Edwardsiella tarda (8%) and Klebsiella oxytoca (8%). Related to the milk samples, 373 samples by cows in sukling were analyzed, presenting clinic mastitis (n=19; 5%) and subclinic mastitis (n=354; 95%). Animals presenting subclinic mastitis were identified by count of somatic cells (CSC), utilizing electronic equipment (Somacount 300 - Bentley), where the mean found was 1.631 thousand cells/mL. The main identified microorganisms were Staphylococcus aureus (30%), Corynebacterium bovis (23%) and Staphylococcus spp (15%). As according to the resulted obtained, coliforms agents found on the water, used in the milking, weren't present on the analysis of the milk samples of quarter presenting clinic or subclinic mastitis on the respective farms, showing that there wasnþt an association between water quality and mastitis occurrence. / Mestre
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Características genotípicas de Staphylococcus coagulase-negativos e taxas de cura da mastite ovina /

Pilon, Lucas Eduardo. January 2016 (has links)
Orientador: Luiz Francisco Zafalon / Banca: Alice Maria Melville Paiva Della Libera / Banca: Luiz Augusto do Amaral / Banca: Andréia Cristina Nakashima Vaz / Banca: Karina Paes Bürguer / Resumo: A mastite em ovelhas de dupla aptidão é reconhecida por afetar a qualidade do leite. Staphylococcus coagulase-negativos (SCN) são os principais micro-organismos responsáveis pela doença, e o tratamento ao final da lactação, pode contribuir para a cura e prevenção de casos subclínicos na lactação consecutiva. Entretanto, fatores de virulência e mecanismos de resistência apresentados por SCN podem reduzir as taxas de cura. Os objetivos deste trabalho foram identificar no leite de ovelhas tratadas e não tratadas à secagem com antimicrobianos, as espécies de SCN antes e após o tratamento e identificar nesses micro-organismos a presença dos genes mecA, icaA, icaC, icaD, bap, bhp, sea, seb, sec, sed e tsst-1, determinar o perfil clonal das principais espécies identificadas e relacionar os casos de cura após o tratamento com a presença/ausência dos respectivos genes. Sessenta ovelhas foram divididas em três grupos experimentais: G1, controle, metades mamárias que não receberam antimicrobiano; G2, metades mamárias em que foram administrados 10 mL de cloxacilina-benzatina 100 mg via intramamária / estrutura convencional; G3, metades mamárias em que foram administrados 86 mL de cloxacilina-benzatina 50 mg via intramamária / estrutura nanoencapsulada. As amostras de leite foram coletadas à secagem e aos 15 e 30 dias pós-parto da lactação seguinte. As análises para identificação das espécies de SCN foram realizadas por meio de testes bioquímicos e Internal Transcribe Spacer (ITS-PCR), e a pesquisa dos genes responsáveis pelos fatores de virulência e pela resistência à oxacilina foram realizados por meio da técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR). Dentre as espécies identificadas S. warneri prevaleceram nos três grupos experimentais. Nenhuma amostra foi positiva para o gene mecA. O único gene relacionado com a produção de enterotoxinas encontrado foi... / Abstract: Mastitis in dual-purpose sheep is recognized to affect their milk quality. Coagulase-negative Staphylococcus (CNS) is the main microorganism responsible for this disease and treatment at the end of lactation may contribute towards curing it and preventing subclinical cases during the consecutive lactation. However, virulence factors and resistance mechanisms presented by CNS may reduce the cure rates. The aims of this study were to identify CNS species in sheep's milk with and without treatment with antimicrobials at the time of drying off and, in these microorganisms, to identify presence of the genes mecA, icaA, icaC, icaD, bap, bhp, sea, seb, sec, sed and tsst-1, determine clonal profile of the main species identified and correlate the cases of cure after treatment with the presence or absence of the respective genes. Sixty sheep were divided into three experimental groups: G1 (control), mammary glands that did not receive antimicrobials; G2, mammary glands to which 10 mL of cloxacillin-benzathine (100 mg) was administered via the intramammary route in a conventional structure; and G3, mammary glands to which 86 mL of cloxacillin-benzathine (50 mg) was administered via the intramammary route in a nanoencapsulated structure. Milk samples were collected at the time of drying off and 15 and 30 days after lambing in the next lactation. The analyses to identify the CNS species were performed by means of biochemical tests and internal transcribe spacer polymerase chain reaction (ITS-PCR), and the genes responsible for the virulence factors and resistance to oxacillin were investigated by means of the PCR technique. Among the species identified, Staphylococcus warneri was most prevalent in the three experimental groups. None of the samples were positive for the gene mecA. The only gene relating to production of enterotoxins that was found was sec. Among the genes relating to biofilm production ... / Doutor
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Associação de agentes patogênicos isolados em análise microbiológica da água, com a presença de mastite clínica ou subclínica, em propriedades leiteiras da região de Cerqueira César-SP

Medeiros, Maria Izabel Merino de [UNESP] January 2005 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T19:19:05Z : No. of bitstreams: 1 medeiros_mim_me_botfmvz.pdf: 365649 bytes, checksum: 3760bb0be00006a38f4bc2722ba441ef (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Este trabalho objetivou pesquisar a relação entre os microrganismos patogênicos isolados e identificados em água utilizada na ordenha, com o isolamento e identificação dos mesmos em amostras de leite, de quartos mamários apresentando mastite clínica ou subclínica nas mesmas propriedades. Foram utilizadas 16 propriedades rurais leiteiras, escolhidas aleatoriamente, na região de Cerqueira César - SP, que utilizavam ordenha mecânica. A água utilizada na ordenha foi classificada em relação à presença de coliformes totais e fecais, como: dentro dos padrões ou fora dos padrões de potabilidade humana. Nos resultados obtidos, 94% das amostras foram classificadas como fora dos padrões em relação a coliformes totais e fecais. Os microrganismos identificados foram: Escherichia coli (51%), Enterobacter spp (25%), Enterobacter cloacae (8%) Edwardsiella tarda (8%) e Klebsiella oxytoca (8%). Em relação ao leite, foram analisadas 373 amostras provenientes de vacas em lactação, com mastite clínica (n=19; 5%) e subclínica (n=354; 95%). Os animais com mastite subclínica foram identificados pela contagem de células somáticas (CCS), utilizando-se o aparelho eletrônico (Somacount 300, Bentley), onde a média observada foi de 1.631 x 103 células/mL. Os principais microrganismos identificados foram: Staphylococcus aureus (30%), Corynebacterium bovis (23%) e Staphylococcus spp (15%). Conforme os dados obtidos, os agentes coliformes encontrados na água, utilizada na ordenha, não estavam presentes nas análises das amostras de leite dos quartos mamários com mastite clínica ou subclínica das respectivas propriedades, demonstrando não haver associação entre a qualidade da água e a ocorrência de mastite. / The aim of present study was to research the relation between isolated and identified pathogenic microorganisms on the water utilized in milking with isolation and identification of the ones on milk samples of teats showing clinic or subclinic mastitis. Sixteen milk farms were chose in a randomized way, in Cerqueira Cesar - SP town, that used mechanical milking. Water of the farms was classified in relation to presence of totals and fecal coliforms such as: in the standard or out of the standard of human potability. On the results obtained, 94% of the samples were classified as being out of the standards related to total and fecal coliforms. The identified microorganisms were Escherichia coli (51%), Enterobacter spp (25%), Enterobacter cloacae (8%), Edwardsiella tarda (8%) and Klebsiella oxytoca (8%). Related to the milk samples, 373 samples by cows in sukling were analyzed, presenting clinic mastitis (n=19; 5%) and subclinic mastitis (n=354; 95%). Animals presenting subclinic mastitis were identified by count of somatic cells (CSC), utilizing electronic equipment (Somacount 300 - Bentley), where the mean found was 1.631 thousand cells/mL. The main identified microorganisms were Staphylococcus aureus (30%), Corynebacterium bovis (23%) and Staphylococcus spp (15%). As according to the resulted obtained, coliforms agents found on the water, used in the milking, weren't present on the analysis of the milk samples of quarter presenting clinic or subclinic mastitis on the respective farms, showing that there wasnþt an association between water quality and mastitis occurrence.
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Tipagem molecular de Staphylococcus aureus isolados de casos de mastite bovina no Estado de Pernambuco

da Mota Silveira Filho, Vladimir January 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T18:05:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6212_1.pdf: 6931212 bytes, checksum: 017a662001da24d39f9c629d562f17e5 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Dentre os agentes etiológicos da mastite contagiosa dos bovinos, o Staphylococcus aureus apresenta maior prevalência no mundo. Neste estudo foi investigada a diversidade genética de 94 isolados de S. aureus obtidos de leite de vacas com mastite subclínica (87), queijo cru tipo coalho (06) e equipamentos de ordenha (01) em 12 rebanhos leiteiros do Estado de Pernambuco (Brasil), através da análise do polimorfismo da região 3 -terminal do gene da coagulase (PCR/RFLP-coa) e da região intergênica 16S-23S dos operons ribossomais (ribotipagem-PCR), associados à análise de macrorrestrição do DNA genômico, digerido por SmaI, através da eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE). A PCR/RFLP-coa revelou dois coagulotipos: Coa1 (~720 pb) que agrupou 62,5% dos isolados, e Coa2 (~950 pb) com 37.2%. O Coa1 foi subtipado em Coa1A (59,6%) e Coa1B (3,2%) após restrição com AluI e HhaI. A ribotipagem-PCR revelou dez ribotipos (R1 R10), dos quais R1 R6 (62,77%) agruparam os coagulotipos Coa1A/Coa1B, e os ribotipos R7 R10 (37,23%) agruparam o coagulotipo Coa2. Na análise do PFGE, considerando 80% de similaridade entre as amostras, foram identificados dez perfis de macrorrestrição (A J). Os índices discriminatórios desses métodos foram de 0.510, 0.741 e 0.836, respectivamente. Vinte e cinco perfis genotípicos (GI GXXV) foram obtidos com a associação desses resultados (índice discriminatório = 0.910). O genótipo predominante foi o GIII, encontrado em três rebanhos (20,21% das amostras). O PFGE foi mais discriminatório que os métodos baseados em PCR. Entretanto, a ribotipagem-PCR é mais rápida, barata e altamente reprodutível e poderá ser útil em investigações epidemiológicas. A presença de S. aureus em amostras de leite mastítico, queijo cru e em equipamentos de ordenha com o mesmo perfil genotípico evidencia o risco da transmissão deste patógeno aos consumidores e a vacas não-infectadas. A identificação de clones prevalentes dentro de um rebanho ou região pode ser usada como base para o desenvolvimento de medidas profiláticas específicas no controle das mastites estafilocócicas
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Prevalência Staphylococcus aureus em leite de lactantes com em sem mastite no município de Vitória de Santo Antão-PE

Janayna Mota Vidal Duarte, Hebe 31 January 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T23:13:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9519_1.pdf: 1411821 bytes, checksum: a13d197e45c98cda482e7ab8a29fe326 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / O leite humano é o alimento ideal para o lactente e nenhum outro alimento poderá substituí-lo com vantagem. A amamentação forma uma base biológica e emocional tanto para a saúde da mãe quanto para da criança. Apesar da excelência do leite humano, o desmame precoce é muito freqüente no Brasil, principalmente na região Nordeste. A mastite puerperal ou da lactação é um processo inflamatório das glândulas mamárias que acomete mulheres em fase de lactação, que devido ao desconforto e à dor torna-se importante causa de desmame precoce e quando não tratada corretamente pode evoluir para abscessos. Os principais agentes etiológicos das mastites puerperais são os Staphylococcus aureus (S. aureus, micro-organismos importantes e que vêm apresentando resistência a antibióticos administrados na clínica médica. Diante destes aspectos, este estudo teve como objetivo Investigar a prevalência da mastite de lactação e dos principais agentes etiológicos a fim de fortalecer o estímulo à amamentação no município de Vitória de Santo Antão, no período de agosto de 2010 a março de 2011 a fim de subsidiar os profissionais de saúde à prevenção, detecção e intervenção precoce das mastites.Trata-se de um estudo descritivo do tipo transversal e para concretização do estudo foram coletadas e avaliadas amostras de leite em frasco estéril, amostras da microbiota da pele das mãos das lactantes através do toque das polpas digitais em placas de Agar Manitol Sal e fossas nasais de lactentes e lactantes através de swabs em 67 mulheres de zona rural e urbana e seus respectivos filhos. Utilizou-se os testes de qui-quadrado e teste Exato de Fisher pelo SPSS na versão 13.0 para avaliação das variáveis. Todas as amostras foram devidamente encaminhadas ao Laboratório de Microbiologia dos Alimentos do Centro Acadêmico de Vitória. Para isolamento e identificação de S. aureus, foi realizado o teste de coloração pelo método de Gram e testes bioquímicos como os de catalase, coagulase, DNase e fermentação de glicose e manitol em aerobiose e anaerobiose. Realizou-se o testes de sensibilidade antimicrobiana (TSA) in vitro para as cepas de S.aureus, pelo método de disco-difusão, utilizou-se os antibióticos disponíveis na rede de saúde do SUS para uso em lactantes. Foi aplicado um questionário estruturado com questões fechadas com intuito de conhecer os principais fatores de risco associados às mastites e obter informações completares para a pesquisa. O estudo mostrou uma prevalência de 17,9% de mastite, tendo como principal agente etiológico Staphylococcus Coagulase Negativa SCN com 50,8%. Em 8,3% das mastites não houve crescimento microbiano. Com 16,7% o S.aureus representou o terceiro micro-organismo mais prevalente nas mastites. Quanto as amostras de mão e fossas nasais o SCN apresentou maior freqüência seguido de S.aureus. O S.aureus apresentou maior resistência a Penicilina G com 93,9% e maior sensibilidade a amicacina com 96,3%. Foi comprovado que a dor no mamilo, ingurgitamento mamário e fissura mamilar são aspectos relacionados com a mastite puerperal. Ao fim do estudo foi elaborado um instrumento de informação sobre casos de mastite para acompanhamento da incidência e elaboração de políticas de prevenção a doença
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Prevalência de Staphylococcus aureus em Leite de Lactantes Com e Sem Mastite no Município de Vitoria de Santo Antão- PE

DUARTE, Hebe Janayna Mota Vidal 31 January 2012 (has links)
Submitted by Nayara Passos (nayara.passos@ufpe.br) on 2015-03-04T13:23:34Z No. of bitstreams: 2 2012-Dissertação-Hebe-Duarte.pdf: 1411800 bytes, checksum: 25c5fd3543df1c83001eb97f6172b7ac (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-04T13:23:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 2012-Dissertação-Hebe-Duarte.pdf: 1411800 bytes, checksum: 25c5fd3543df1c83001eb97f6172b7ac (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
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Avaliação microbiológica e molecular de isolados de Mycoplasma spp. a partir do leite de mastite clínica bovina

Salina, Anelise. January 2018 (has links)
Orientador: Helio Langoni / Resumo: O gênero Mycoplasma inclui mais de 200 espécies responsáveis por causar doenças nos animais. Apresenta células de tamanho reduzido e em formatos variáveis. Ocasiona mastite em bovinos, podendo também, estar relacionado a outras manifestações como artrite e pneumonia em bezerros e novilhas. Neste estudo, objetivou-se o isolamento de espécies de micoplasmas a partir de amostras de leite de mastite clínica bovina, bem como, a detecção de Mycoplasma (M.) bovis pelas técnicas moleculares de PCR convencional e PCR em tempo real. Um total de 1166 amostras de leite de casos de mastite clínica, provenientes de nove propriedades leiteiras da região da bacia leiteira ABCW – Paraná e de uma propriedade situada na região de São Pedro – São Paulo foram avaliadas para a presença do DNA de Mollicutes. Desse total, em 100 amostras de leite que foram positivas à PCR para a classe Mollicutes, realizou-se a PCR para detecção de M. bovis obtendo-se positividade de 13% (13/100). Na análise pela PCR em tempo real obteve-se 11% (11/100) de amostras positivas para M. bovis. No cultivo microbiológico, obteve-se 6% (6/100) de crescimento ao se utilizar o meio Hayflick e, 11% (11/100) de crescimento ao se utilizar o meio SP4 (incluindo as positivas ao primeiro). A partir desses isolados em caldo PPLO, nove deles foram positivos à PCR convencional para M. bovis e dois, negativos. Na análise filogenética dos isolados, a partir dos resultados do sequenciamento, obteve-se 100% de M. bovis para todos os isol... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Mycoplasma genus includes more than 200 species responsible for causing diseases in animals. It presents cells of reduced size and in variable shapes. It may cause mastitis in cattle, and may also be related to other manifestations such as arthritis and pneumonia in calves and heifers. The objective of this study was to isolate mycoplasma species from bovine clinical mastitis milk samples, as well as the detection by molecular techniques of conventional PCR and real-time PCR of M. bovis. A total of 1166 milk samples from clinical mastitis cases from nine dairy farms in the ABCW - Paraná dairy region and from a property located in the São Pedro region - São Paulo were evaluated for the presence of Mollicutes DNA. From this total, 100 milk samples that were PCR positive for the Mollicutes class, the PCR was performed to detect the M. bovis, obtaining 13% positivity (13/100). Real-time PCR analysis yielded 11% (11/100) of positive samples for M. bovis. In the microbiological culture, 6% (6/100) of growth was obtained when using the Hayflick medium and 11% (11/100) growth when using SP4 medium (including positive ones in the first one). From these isolates in PPLO broth, nine of them were positive to conventional PCR for M. bovis and two, negative. In the phylogenetic analysis of the isolates, from the results of the sequencing, 100% of M. bovis was obtained for all the isolates. In view of the results obtained, the importance of further studies for the elucidation of other s... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Fatores fisiológicos, clínicos e farmacológicos, determinantes de resíduos de antimicrobiano no leite, avaliados em protocolos terapêuticos de mastite em bovinos leiteiros / Evaluation of some physiological, clinical and pharmacological factors to antimicrobials residues in milk under different management and therapeutic protocols

Roberto Bellizia Raia Junior 04 April 2006 (has links)
Atualmente a terapia e as práticas de manejo da mastite estão baseadas na administração de agentes antimicrobianos com ampla atividade contra os microrganismos mais comuns desta doença. Os fármacos são administrados diretamente no canal da teta e/ou por sistêmica. Os tratamentos com antimicrobianos são realizados durante o período seco como terapia preventiva, ou durante o período de lactação como terapia curativa. O leite produzido por animais tratados pode conter resíduos do medicamento. A presença de resíduos de antimicrobianos no leite constitui um risco para a saúde pública devido ao fenômeno de múltipla resistência, bem como uma causa de perdas econômicas, considerando a fabricação de queijo e iogurte, entre outros derivados lácteos. A proposta deste estudo foi avaliar alguns fatores que contribuem para a ocorrência de resíduos em vacas tratadas além do período recomendado para descarte. Os fatores avaliados foram: fisiológico, como a produção leiteira; clínico, como a mastite e farmacológico como a via de administração e o fármaco utilizado. Foi usado um teste comercial para a detecção de resíduos (Delvotest®) por inibição microbiológica. Entre os fatores estudados, foi demonstrada a influência da produção leiteira, ou seja, animais com produção leiteira maior do que 20L/dia apresentaram menor ocorrência de resíduo (39,5%), quando comparado com aqueles com produção menor do que 20L/dia (70,7%) e a diferença foi significante (P < 0,0001). Entre os fatores clínicos foi determinado que a presença e intensidade do processo inflamatório contribuem para a ocorrência de resíduos. Deste modo, entre os quartos com mastite clínica tratados o nível de resíduo foi 47,7%, os quartos com mastite subclínica tratados apresentaram 34,9% e os controles 9,5% (quartos sem mastite tratados) e a diferença entre os três grupos foi significante (P = 0,0381, P = 0,0008, P = 0,0209). Ao se comparar a ocorrência de resíduos no leite de quartos tratados durante a lactação (41,9%) com os resíduos nos quartos que receberam a terapia de vaca seca (23,2%) foi observado um maior nível entre os grupos tratados durante a lactação e a diferença foi significante (P < 0,0001). Em relação aos fatores farmacológicos, a via de aplicação bem como o grupo farmacológico do antimicrobiano utilizado no tratamento foram demonstradas diferenças estatísticas tanto para os diversos antimicrobianos, quanto para as vias de administração. Um maior nível de resíduo foi observado entre os grupos farmacológicos em quartos tratados por via intramamária com aminoglicosídeos (gentamicina) (66,7%). E o maior nível de resíduo foi observado quando ambas as vias foram utilizadas simultaneamente, tanto para aminoglicosídeos (93,7%), quanto para betalactâmicos (100%). O conhecimento de que o pKa dos antimicrobianos irá determinar diferentes níveis de distribuição nos órgãos e tecidos sustenta a hipótese que a via de administração pode influenciar a presença de resíduos de antimicrobianos no leite. Conseqüentemente, o uso simultâneo das duas vias de administração, uma prática comum, contribuiu também para um alto risco da ocorrência de resíduos de antimicrobianos. Deve-se ressaltar que a redução da presença de resíduos no leite não depende apenas de normas e regulamentos, mas envolve uma orientação aos produtores e aos veterinários para controlar e/ou prevenir os fatores de risco. Assim, os resultados deste estudo irão contribuir para esclarecer alguns aspectos importantes para um melhor entendimento da ocorrência de resíduo no leite além do período recomendado para descarte. / Current mastitis therapy and management practices are base on the administration of antimicrobial agents with high activity against most common mastitis bacterial pathogens. Drugs are administrated directly into the teat canal and/or systemically. Antibiotic treatments are performed during the dry period as preventive therapy, or during the lactating periods as therapeutic cure. Milk produced from treated animals may contain drug residues. The presence of antibiotic residues in milk constitutes a public health risk due to the multi-resistance phenomenon, as well as, a source of economical losses, considering the industries of cheese and yogurts, among others dairy products. The purpose of this study was evaluated some factors that contribute to the occurrence of residues in treated cows beyond the recommended discarded period. The evaluated factors were: physiological, as milk production, clinical, as mastitis and pharmacological, as routes and antimicrobials. It was used a commercial test for residues detection (Delvotest®) by microbiological inhibition. Among the clinical factors it was demonstrated the influence of the milk production, so animals with milk production higher than 20 L/day showed lower occurrence of residues (39.5%), compared to the ones with less than 20 L/day (70.7%) the difference was significant (P<0.0001). Among the clinical factors it was determinated that the presence of inflammatory process and the intensity of it, contributes to the presence of residues. Therefore, among the clinical mastitis treated quartes the level of residues was 47.7%, while the subclinical treated quartes showed 34.9% and, the control ones 9.5% (i.e. treated quartes without mastitis) and the difference among the three groups was significant (P=0.0381, P=0.0008, P=0.0209).Comparing the residues in milk from treated quartes during lactation (41.9%) with the quartes that received the dry cow therapy (23.2%) it was observed a higher level of residues among the groups treated during the lactation and the difference was significant (P<0.0001). Among the pharmacological factors, the routes as well the pharmacological group of the antimicrobials used in the treatment showed statistical differences either among the antimicrobials as well as the administration routes. A high level of residues was observed among pharmacological groups in quartes treated by intramammarian route with aminoglicosides (gentamicin) (66.7%). And, the highest level of residues was observed when both route where used simultaneously, either with aminoglicosides (93.7%) as well as with betalactamics (100%). The knowledge that different pKa among the antimicrobials will determine the level of distribution in different organs and tissues, support the hypothesis that the administration route could influence the presence of residues of antibiotics in milk. Consequently, the simultaneous use of both administration routes, a very usual practice, could also contributes to a higher risk of antimicrobial residue occurrence. To reduce this possibility, it is not only a matter of Regulatory Affairs, but also involves the dairy farmers and veterinarians\' proper orientation about how to avoid and to control the risk factors, therefore, the results of this study will contribute to clarify some important aspects to a better understanding of the occurrence of residues in milk beyond the recommend discard period.

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