Orientador: Adriana Vitorino Rossi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-09T10:06:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinheiro_TaniaAparecidaLopes_M.pdf: 1079209 bytes, checksum: 7315b8210dfb843979f6a17ba083ed67 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Acetato de medroxiprogesterona (AMP) é um derivado da progesterona que vem sendo usado para contracepção por cerca de 30 milhões de mulheres e também vem aplicado em tratamentos de câncer. Como em alguns casos, AMP gera efeitos colaterais desfavoráveis, sua dosagem deve ser bem controlada. Neste trabalho, foi desenvolvido um método espectrofotométrico para quantificação de AMP em fármacos pela reação com Mo(VI) em meio fortemente ácido. Testes preliminares como avaliação do ponto de fusão e spot test com ácido sulfúrico foram introduzidos para identificar o AMP de outros compostos, como derivados de cortisona que também podem reagir com Mo(VI). A reação foi otimizada a partir da avaliação de algumas variáveis do sistema reacional: tempo e temperatura de aquecimento, solvente e concentração de ácido. Os resultados obtidos indicaram que as melhores condições para o sistema reacional são: solução 9 mol L de H2SO4, 70 minutos de aquecimento a 90 °C e uso de AMP em acetonitrila. Nestas condições, foram obtidas curvas analíticas com a absorbância em 406 nm do produto formado cuja concentração é diretamente proporcional à concentração de AMP na faixa de 5,87x10 a 10,00x10 mg mL, com coeficiente de correlação linear = 0,9972 e limite de detecção = 1,77x10 mg mL. A precisão foi avaliada por intra (repetibilidade) e inter (precisão intermediária) testes, tendo sido obtidos desvios máximos de + 1,9%. Quando comparado com um método de quantificação de AMP em medicamentos comerciais por cromatografia líquida de alta eficiência, os resultados com o método proposto não apresentaram diferenças estatisticamente significativas com 95 % de confiança, indicando bom desempenho do método baseado na reação colorimétrica, que tem favoráveis características de simplicidade instrumental / Abstract: Acetate of medroxiprogesterona (AMP) is one derivative of the progesterone, that have been used used as contraceptive method for about 30 million women. And in treatments of cancer. In some cases, AMP cause favorable collateral effect, therefore its dosage must be well controlled. In this work, a spectrophotometric method for quantification of AMP in pharmaceutical preparation using the reaction with Mo(VI) in strong acid was developed. Preliminary tests as evaluation of the fusing point and spot test with H2SO4 had been introduced in order to identify the AMP from other compounds, as corticoids, that ca also react with Mo(VI). The reaction was optimized from the evaluation of some reaction variable: time and temperature of heating, AMP solvent, acid concentration. The optimized conditions are 9 mol L H2SO4; heating for 70 minutes at 90 °C and acetonirile solvent for AMP. In these conditions, analytical curves of absorbance at 406 nm of the product formed whose concentration is directly proportional to the initial concentration of AMP were obtained from 5,87x10 a 10,00x10 mg mL , with linear coefficient = 0,9972 and detection limit = 1,77x10 mg mL. The precision was evaluated by intra (repeatability) and inter (intermediate precision) tests, having been achieved maximum relative deviation = + 1,9 %. When compared with a HPLC method of quantification of AMP in commercial medicines, the results achieved with this method did give statistical significant differences at 95 % confidence level, indicating good performance of the colorimetric method, which has the advantage of instrumental simplicity / Mestrado / Quimica Analitica / Mestre em Química

Orientador: Luis Guillermo Bahamondes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T05:05:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Viola_AlexandredeSouza_D.pdf: 11179010 bytes, checksum: b640fe59edc62c7e4656a85dd2252e89 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Objetivos: Avaliar a densidade mineral óssea (DMO) em usuárias por pelo menos um ano e ex-usuárias na pós-menopausa do contraceptivo injetável com acetato de medroxiprogesterona de depósito (AMP-D). Sujeitos e métodos: Foram realizados dois estudos, ambos de corte transversal com usuárias atuais em idade reprodutiva de AMP-D e outro com mulheres na pós-menopausa que usaram AMP-D até a menopausa. Cada usuária foi comparada com uma mulher nunca usuária de AMP-D, da mesma idade (± 1) e mesmo índice de massa corporal (kg/m2) (± 1). Nelas, foram medidas a DMO nas porções distal e ultradistal do rádio do antebraço não dominante pela técnica de DXA (double X-ray absoptiometry). No primeiro estudo foram incorporadas 232 mulheres usuárias do AMP-D e igual número que usavam dispositivo intrauterino (DIU) TCu380A como grupo de controle. As mulheres foram divididas em 5 grupos (1-5) de acordo com o tempo de uso do AMPD: 1-3; 4-6; 7-9; 10-12 e 13-15 anos, respectivamente. No segundo estudo foram incorporadas 79 mulheres com até 5 anos desde a menopausa, sendo 24 ex-usuárias de AMP-D até a menopausa e 55 ex-usuárias de DIU TCu380A também até a menopausa e que tinham avaliado previamente a DMO aos 1-2 e 3 anos após a menopausa. Resultados: No primeiro estudo, a média da idade (± EPM) das usuárias de AMP-D e DIU foi 38,3±0,5 e 38,1±0,57 anos e a média do IMC (índice de massa corporal) (kg/m2) (± EPM) foi de 26,4±0,3 e 26,3±0,3 (kg/m2) para cada grupo, respectivamente. As usuárias de ambos os grupos com pouco tempo de uso dos métodos eram mais jovens que aquelas que os usavam por longo período de tempo, e ambos os grupos apresentavam menor IMC nos primeiros 5 anos de uso. Paridade, cor, prática de atividade física manualmente foram significativamente maiores no grupo das usuárias de DIU (p<0,053, p<0,040 e p<0,012), e o ato de lavar roupas, nas usuárias de AMP-D (p<0,025). Os outros dados sociodemográficos, antropométricos e obstétricos não apresentaram diferenças significantes. As médias da DMO nas regiões distal e ultradistal do rádio foram similares entre as usuárias de AMP-D e DIU, exceto nas usuárias de AMP-D com mais de 13 anos de uso, e que apresentaram DMO significativamente menor (p<0,041 e 0,042, respectivamente). Houve relação direta nos dois grupos entre a DMO e o IMC (kg/m2) e relação inversa entre DMO e idade, nas regiões distal e ultradistal do rádio. No segundo estudo, o tempo de uso de ambos contraceptivos foi de 9,4 ± 3,8 e 14,7 ± 6,2 anos para o AMP-D e DIU, respectivamente. A DMO na região distal nos anos 1; 2-3 e 5-6 após a menopausa foi de 0,426 e 0,445; 0,421 e 0,434 e 0,437 e 0,427 nas usuárias de AMP-D e DIU, respectivamente. Na região ultradistal os valores foram: 0,350 e 0,380; 0,360 e 0,367 e 0,388 e 0,373, respectivamente, todos sem significância estatística. Conclusão: Não foi detectado efeito deletério na DMO do antebraço nas usuárias de AMP-D, com exceção daquelas que o usaram por mais de 13 anos, ou ex-usuárias de AMP-D que estavam na pós-menopausa, quando comparadas às usuárias de DIU. Também foi observada uma relação direta entre DMO e IMC (kg/m2) e indireta entre DMO e idade / Abstract: Objectives: Assess bone mineral density (BMD) in users for at least a year and ex-users in injectable contraceptive postmenopausal with medroxyprogesterone acetate depot (DMPA). Subjects and methods: Two studies have been conducted, both transversal cutting with current users of reproductive age of DMPA and another with postmenopausal women who have used DMPA until menopause. Each user was compared with a woman never using DMPA, the same age (± 1) and the same body mass index (2kg/m) (± 1). In them, were measures the DMO in distal portion and ultra-distal of non-dominant forearm radio technique by DXA (double X-ray absoptiometry). In the first study were incorporated into 232 women users of DMPA and an equal number who used intrauterine device (IUD) TCu380A as control group. Women were divided into 5 groups (1-5) in accordance with the usage time of DMPA: 1 -3; 4-6; 7-9; 10-12 and 13-15 years, respectively. In the second study were incorporated into 79 women with up to 5 years since menopause, being 24 ex-users of DMPA until menopause and 55 ex-users IUD TCu380A also until menopause and who had previously evaluated the DMO to 1-2 and 3 years after menopause. Results: in the first study, the average age (± EPM) of users of DMPA and IUD was 38.1 and 38.3 ± 0.5 ± 0.57 years and average BMI (body mass index) (kg/m2) (± EPM) was 0.3 ± ± 26.3 and 26.4 0.3 (kg/m2) for each group, respectively The users of both groups with little time using the methods were younger than those who used over a long period of time, and both groups had lower BMI in the first 5 years of use. Parity, color, physical activity practice manually were significantly higher in the Group of IUD users (p <0.053, p< 0.040 and p<0.012), and the Act of washing clothes, in the users of DMPA (p < 0.025). The other demographic and anthropometric data partners did not show significant differences obstetric. The average of the DMO in the distal region of the ultra-distal and radio were similar between the users of DMPA and IUD users, except for DMPA with more than 13 years of use with DMO had significantly lower (p < 0.041 and 0.042, respectively). There was no direct relation in two groups between the DMO and the BMI (kg/m2) and inverse relationship between DMO and age, in the region and distal radio ultra-distal. In second study, the time using both contraceptives was 9.4 ± 3.8 and 14.7 ± 6.2 years for DMPA and IUD, respectively. The DMO in distal region in the years 1; 2-3 and 5-6 after menopause was 0.426 and 0.445; 0.434 and 0.421 and 0.437 and requirements in 0.427 DMPA and IUD, respectively. In the ultra-distal region the figures were: 0.350 and 0.380; 0.360 and 0.367 and 0.388 0.373, respectively, and all without statistical significance. Conclusion: No deleterious effects on the DMO requirements in forearm DMPA, with the exception of those who have used for over 13 years, or DMPA ex-users were in post-menopausal women, compared the IUD users. Also we see a direct relationship between the DMO and BMI (kg/m2) and indirectly between DMO and age / Doutorado / Fisiopatologia Ginecológica / Doutor em Ciências da Saúde

Background: HSV-2 was estimated to infect 491 million people worldwide, with women disproportionately affected by HSV-2. Understanding factors that influence susceptibility to HSV-2 in women is important in preventing infections. Through various studies, the progestin-based contraceptive DMPA exhibited immunosuppressive effects, and has shown increased susceptibility to HIV and HSV-2. Studies comparing DMPA to other contraceptives like NET suggest that NET may be safer. In vivo NET effects have not been characterized thoroughly to better understand the effect of NET on susceptibility to HSV-2. Therefore, this study aimed to compare the effects of NET and DMPA in mouse models that affect susceptibility to HSV-2. We hypothesized that NET treated mice will have decreased susceptibility to HSV-2 compared to DMPA but elevated compared to normal mice. Method of study: Ovariectomized mice were treated with DMPA (2mg) and NET (2 mg injections, 2.5 mg pellets or 5 mg pellets) for 10 days and intravaginally immunized with HSV-2 TK-, then intravaginally challenged with WT HSV-2 ~4-7 weeks later. Primary intravaginal WT HSV-2 challenges were conducted in ovariectomized and normal mice after 10 days of DMPA and NET treatment. Viral titers, pathology and survival were examined. Mucus production in the vagina was investigated through immunohistology. Effects of hormones on immune cells were explored in the lymph nodes, spleens, and vaginal tracts through flow cytometry. Results: Increased mucus was consistently observed in the vaginal tracts of mice after treatment with NET 2.5 mg and 5 mg treated mice, but not with DMPA Therefore, NET treated mice displayed reduced viral shedding and delayed pathology compared to DMPA treated mice. No significant changes occurred in immune cells analyzed post DMPA and NET treatment, although there were trends of increased T cells in progestin treated mice. However, more experiments need to be conducted to confirm observed trends. Conclusion: NET treatment in mice results in mucus production in the vaginal tract, a potential mechanism impeding intravaginal HSV-2 infection and could be applied to other STIs. This provides insight into protective effects of NET compared to DMPA allowing women to make informed decisions regarding hormonal contraceptives. / Thesis / Master of Science in Medical Sciences (MSMS)

Thesis (PhD)--Stellenbosch University, 2012. / Bibliography / ENGLISH ABSTRACT: Most individuals latently infected with Mycobacterium tuberculosis (Mtb) contain the infection by a balance of effector and regulatory immune responses. However, this balance can be influenced by steroid hormones such as glucocorticoids (GCs), which are known to increase the risk of reactivation of TB. The contraceptive medroxyprogesterone acetate (MPA), which also possesses selective glucocorticoid activity, is widely used in developing countries with approximately 60% of women on contraceptives using MPA in our study cohort. Therefore, our aim was to investigate the effect of this hormone on protective immune responses to BCG in HIV negative household contacts of active TB patients. When PBMCs of TB household contacts were stimulated with BCG in the presence of 10 μM MPA; this hormone displayed both glucocorticoid as well as progestogenic properties. Similarly to cortisol, MPA suppressed antigen specific expression of a range of cytokines including IL-1α, IL-1ra, IL- 17, TNFα, IL-5 and IFNγ. Dose response curves showed that MPA can also alter expression of some cytokines at lower contraceptive doses (in the nano molar range). To assess whether this effect of MPA in vitro also occurs in women using this hormone as contraceptive the PBMCs of MPA users and controls were stimulated with BCG and the levels of up to 29 different cytokines measured by luminex analysis. PBMCs of MPA users produced significantly lower levels of cytokines involved in immune responses against Mtb such as IL-12p40, IL-1α, IL-10, IL-13 and G-CSF, which corresponds with lower numbers of circulating monocytes observed in these women. These findings warrant further investigation and clinical trials should investigate the risk of progression from latent to active TB disease in women using this contraceptive. These trials, however, require a large number of participants and are prohibitively expensive; therefore it was decided to setup an Mtb/MPA mouse model to determine the effect of MPA on the disease outcome. BALB/c and C57BL/6 mice were injected with a weekly dose of one mg MPA or PBS and infected with 30 colony forming units of Mtb H37Rv one week after commencing the hormonal treatment. Both strains were included to establish which strain best represents the human model. Three and eight weeks post infection the MPA treated C57BL/6 mice had a significantly higher bacterial load in their lungs compared to untreated mice, whereas no difference was found in the bacterial loads of the BALB/c mice. MPA treated C57BL/6 mice had significantly lower serum levels of IL-10 and G-CSF and MPA treated BALB/c mice lower serum levels of IFNγ, when compared to untreated mice. Furthermore, cells isolated from the MLNs of MPA treated C57BL/6 mice, produced significantly less TNFα, significantly more IP-10 and less IL-10 in response to PPD, while MLN cells of MPA treated BALB/c mice produced significantly less IFNγ, IL-2, IL-17, GM-CSF and MCP-1. Data of the C57BL/6 mouse strain correlated with our human data and can it therefore be said that the C57BL/6 mouse strain, together with the serum concentration of MPA used in these experiments, is a good model to determine the effect of MPA in the context of a low dose Mtb infection. To conclude MPA use could therefore alter susceptibility to TB, TB disease severity as well as change the efficacy of new BCG-based vaccines, especially prime-boost vaccine strategies which may be administered to adult of adolescent women in the future. / AFRIKAANSE OPSOMMING: Die meeste mense wat latent met Mycobacterium tuberculosis (Mtb) geïnfekteer is, hou die infeksie onder beheer deur ʼn balans te handhaaf tussen effektor en regulatoriese immuunresponse. Hierdie balans kan egter beïnvloed word deur steroïedhormone soos glukokortikoïede (GCs), wat bewys is om die risiko van die heraktivering van TB te verhoog. Die voorbehoedmiddel medroksiprogesteroon-asetaat (MPA), wat ook selektiewe glukokortikoïed-aktiwiteit toon, word wyd gebruik in ontwikkelende lande en omtrent 60% van die vrouens in ons studie-bevolking wat voorbehoedmiddels gebruik, gebruik MPA. Om dié rede wou ons die effek van hierdie hormoon op die beskermende immuun-response teenoor M.bovis Bacilli Calmette-Guérin (BCG) in HIV negatiewe huishoudelike kontakte (HHKe) van pasiënte met aktiewe TB ondersoek. Ons het gevind dat wanneer perifere bloed mononukleêre selle (PBMSe) met BCG gestimuleer word in die teenwoordigheid van 10 μM MPA, hierdie hormoon beide glukokortikoïede en progesterogeniese eienskappe toon. Soos kortisol het MPA die antigeenspesifieke-uitdrukking van ʼn reeks sitokiene, insluitend IL-1α, IL-1ra, IL-17, TNFα, IL-5 en IFNγ, onderdruk. Respons kurwes wat verskillende konsentrasies van hormoon insluit, het getoon dat MPA ook by laer (nano-molare) dosisse die uitdrukking van sommige sitokiene kon verander. Om te bepaal of hierdie in vitro effek van MPA ook in vrouens wat MPA as voorbehoedmiddel gebruik voorkom, het ons PBMSe van MPA-gebruikers and kontroles met BCG gestimuleer en die vlakke van tot 29 verskillende sitokiene met behulp van Luminexanalise gemeet. PBMSe van MPA-gebruikers produseer beduidende laer vlakke van IL-12p40, IL-1α, IL- 10, IL-13 en G-CSF, wat elk in imuunafweerreaksies teen Mtb betrokke is. Die afname in dié sitokiene het gepaard gegaan met laer hoeveelhede sirkulerende monosiete. Ons resultate regverdig verdere ondersoeke en kliniese proewe behoort die risiko van progressie vanaf latente tot aktiewe TB in vrouens wat hierdie voorbehoedmiddel gebruik te bepaal. Sulke proewe vereis egter groot getalle deelnemers en is skrikwekkend duur, om die rede het ons besluit om ʼn Mtb/MPA muis-model op te stel om sodoende die algehele effek van MPA op die uitkoms van die siekte te bepaal. BALB/c en C57BL/6 muise is met ʼn weeklikse dosis van een mg MPA of sout oplossing ingespuit en een week na die aanvang van die hormoon behandeling met 30 kolonie-vormende eenhede Mtb H37Rv geïnfekteer. Beide muis tipes was ingesluit om sodoende te bepaal watter tipe die mens data die beste verteenwoordig. Drie en agt weke na die infeksie het die MPA-behandelde C57BL/6 muise ‘n beduidende hoër bakteriële lading in hul longe gehad as die onbehandelde muise, maar was daar geen verskil in die bakteriële ladings in die longe van die BALB/c muise nie. MPA-behandelde C57BL/6 muise het beduidende laer serumvlakke van IL-10 en G-CSF gehad, terwyl MPA-behandelde BALB/c muise laer serumvlakke van IFNγ gehad het. Verder het ons gevind dat die geisoleerde limfosiete van MPA-behandelde C57BL/6 muise beduidend minder TNFα, beduidend meer IP-10 en minder IL-10 geproduseer het na stimulasie met PPD, terwyl die limfosiete van MPA-behandelde BALB/c muise beduidend minder IFNγ, IL-2, IL-17, GM-CSF en MCP-1 geproduseer het. Data van die C57BL/6 muise stem ooreen met die van ons mens studie en ons kan dus vermeld dat die C57BL/6 muise, tesame met die spesifieke serumkonsentrasie van MPA wat gebruik is, ʼn goeie model is om die effek van MPA in die konteks van ʼn lae-dosis Mtb-infeksie te bestudeer. MPA gebruik kan dus die vatbaarheid vir TB, asook die erns van die siekte verander en kan ook die effektiwiteit van nuwe BCG-gebaseerde entstowwe, veral prima-hupstoot enstowwe, wat moontlik in die nabye toekoms vir volwasse en adolessente vroue toegedien kan word, verander.

Objetivo: Avaliar os efeitos dos estrogênios conjugados eqüinos (ECE), isolados ou associados ao acetato de medroxiprogesterona (AMP) sobre os glicosaminoglicanos do colo e do corno do útero de ratas. Métodos: 40 ratas adultas, após 30 dias de ooforectomia foram distribuídas em quatro grupos: GI - controle (veículo); GII - ECE (50 g/Kg, por dia); GIII - AMP (0,2 mg/Kg, por dia) e GIV - ECE (50 g/Kg, por dia) + AMP (0,2 mg/Kg, por dia). As substâncias foram administradas por gavagem por 28 dias consecutivos, sendo que ao final, após anestesia, o colo e o corpo do útero foram retirados e mergulhados em acetona para detecção e quantificação dos glicosaminoglicanos. Os glicosaminoglicanos sulfatados foram submetidos a eletroforese em gel de agarose e o ácido hialurônico a ensaio fluorimétrico (ELISA-like). Os resultados foram analisados pelo teste de t de Student e de ANOVA, complementado pelo teste de Tukey-Kramer (p<=0,05). Resultados: Foi detectada, em todos os grupos, maior concentração de glicosaminoglicanos sulfatados tanto no colo como nos cornos uterinos, em especial do dermatam sulfato. Já a concentração de ácido hialurônico foi maior no corno do que no colo. Com relação ao dermatam sulfato, os estrogênios promoveram incremento, tanto no colo quanto no corpo, sendo que a medroxiprogesterona bloqueou esta ação nos cornos uterinos. Os estrogênios e a medroxiprogesterona, por sua vez, apresentaram ação positiva nos níveis de heparam sulfato no colo do útero, já no corno este efeito foi atribuído à medroxiprogesterona. Conclusões: O perfil e a quantificação dos glicosaminoglicanos nas duas porções do útero de ratas são diferentes. Os glicosaminoglicanos sulfatados, em especial o dermatam sulfato, mostrou-se em maior concentração tanto no colo quanto no corno uterino. Os estrogênios e a medroxiprogesterona têm ação positiva nos glicosaminoglicanos sulfatados do colo, enquanto a medroxiprogesterona apresenta efeito antagônico no corno. O ácido hialurônico apareceu em maior concentração no corno do que no colo uterino. / Objective: To evaluate the effects of conjugated equine estrogens (CEE) alone or associated to medroxyprogesterone acetate (MPg) on glycosaminoglycans (GAGs) in the cervix and horns of the rat uterus. Methods: Thirty days after ovariectomy, 40 adult rats were randomly divided into four groups: GI, control (treated with drug vehicle); GII, CEE (50 ?g/Kg per day); GIII, MPg (0.2 mg/Kg per day), and GIV, CEE + MPg (doses as in GII and GIII). Drugs and vehicle were given by gavage during 28 days. After this the animals were euthanized, the uterine cervix and body were removed, fixed in acetone and further processed for GAGs quantification. Agarose gel electrophoresis was used for sulphated GAGs analyses; the hyaluronic acid was assayed with an ELISA-like method. Statistical analysis was done by the Student\'s t test and the Tukey-Kramer test. Significant differences were set at p<=0.05. Results: In all groups sulphated GAGs concentration (especially dermatan sulphate) was higher than that of nonsulphated GAGs, both in the cervix and in the uterine horns. Hyaluronic acid concentration in uterine horns was higher than in the cervix. With regard to dermatan sulphate, CEE exerted trophic effects both in horns and cervices, whereas MPg blocked this action in the uterine horn. The cervical concentration of heparan sulphate was rised by CEE and by MPg; in the uterine horns the same rise was observed, and this effect was attributed to MPg. Conclusions: The qualitative and quantitative profiles of GAGs in the horns and cervix of rat uterus are distinct. Sulphated GAGs (especially dermatan sulphate) are more concentrated than the non-sulphated ones in both uterine regions. With regard to sulphated GAGs, estrogens and medroxyprogesterone have trophic actions on sulphated GAGs at the cervix, whereas at the uterine horn MPg shows an antagonistic action. The concentration of hyaluronic acid in the uterine horns was higher than in the cervix.

Objetivo: Avaliar os efeitos dos estrogênios conjugados eqüinos (ECE), isolados ou associados ao acetato de medroxiprogesterona (AMP) sobre os glicosaminoglicanos do colo e do corno do útero de ratas. Métodos: 40 ratas adultas, após 30 dias de ooforectomia foram distribuídas em quatro grupos: GI - controle (veículo); GII - ECE (50 g/Kg, por dia); GIII - AMP (0,2 mg/Kg, por dia) e GIV - ECE (50 g/Kg, por dia) + AMP (0,2 mg/Kg, por dia). As substâncias foram administradas por gavagem por 28 dias consecutivos, sendo que ao final, após anestesia, o colo e o corpo do útero foram retirados e mergulhados em acetona para detecção e quantificação dos glicosaminoglicanos. Os glicosaminoglicanos sulfatados foram submetidos a eletroforese em gel de agarose e o ácido hialurônico a ensaio fluorimétrico (ELISA-like). Os resultados foram analisados pelo teste de t de Student e de ANOVA, complementado pelo teste de Tukey-Kramer (p<=0,05). Resultados: Foi detectada, em todos os grupos, maior concentração de glicosaminoglicanos sulfatados tanto no colo como nos cornos uterinos, em especial do dermatam sulfato. Já a concentração de ácido hialurônico foi maior no corno do que no colo. Com relação ao dermatam sulfato, os estrogênios promoveram incremento, tanto no colo quanto no corpo, sendo que a medroxiprogesterona bloqueou esta ação nos cornos uterinos. Os estrogênios e a medroxiprogesterona, por sua vez, apresentaram ação positiva nos níveis de heparam sulfato no colo do útero, já no corno este efeito foi atribuído à medroxiprogesterona. Conclusões: O perfil e a quantificação dos glicosaminoglicanos nas duas porções do útero de ratas são diferentes. Os glicosaminoglicanos sulfatados, em especial o dermatam sulfato, mostrou-se em maior concentração tanto no colo quanto no corno uterino. Os estrogênios e a medroxiprogesterona têm ação positiva nos glicosaminoglicanos sulfatados do colo, enquanto a medroxiprogesterona apresenta efeito antagônico no corno. O ácido hialurônico apareceu em maior concentração no corno do que no colo uterino. / Objective: To evaluate the effects of conjugated equine estrogens (CEE) alone or associated to medroxyprogesterone acetate (MPg) on glycosaminoglycans (GAGs) in the cervix and horns of the rat uterus. Methods: Thirty days after ovariectomy, 40 adult rats were randomly divided into four groups: GI, control (treated with drug vehicle); GII, CEE (50 ?g/Kg per day); GIII, MPg (0.2 mg/Kg per day), and GIV, CEE + MPg (doses as in GII and GIII). Drugs and vehicle were given by gavage during 28 days. After this the animals were euthanized, the uterine cervix and body were removed, fixed in acetone and further processed for GAGs quantification. Agarose gel electrophoresis was used for sulphated GAGs analyses; the hyaluronic acid was assayed with an ELISA-like method. Statistical analysis was done by the Student\'s t test and the Tukey-Kramer test. Significant differences were set at p<=0.05. Results: In all groups sulphated GAGs concentration (especially dermatan sulphate) was higher than that of nonsulphated GAGs, both in the cervix and in the uterine horns. Hyaluronic acid concentration in uterine horns was higher than in the cervix. With regard to dermatan sulphate, CEE exerted trophic effects both in horns and cervices, whereas MPg blocked this action in the uterine horn. The cervical concentration of heparan sulphate was rised by CEE and by MPg; in the uterine horns the same rise was observed, and this effect was attributed to MPg. Conclusions: The qualitative and quantitative profiles of GAGs in the horns and cervix of rat uterus are distinct. Sulphated GAGs (especially dermatan sulphate) are more concentrated than the non-sulphated ones in both uterine regions. With regard to sulphated GAGs, estrogens and medroxyprogesterone have trophic actions on sulphated GAGs at the cervix, whereas at the uterine horn MPg shows an antagonistic action. The concentration of hyaluronic acid in the uterine horns was higher than in the cervix.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:05:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Programa de Apoio a Núcleos de Excelência (PRONEX) / Fundo de Auxílio aos docentes e Alunos (FADA) / 0 modelo experimental de epilepsia, induzido por pilocarpina, em fêmeas inicialmente descrito por Amado e cols., (1993). Após esses achados, vários estudos continuaram a ser efetuados na tentativa de se obter um conhecimento maior do envolvimento hormonal no fenômeno epileptogênico. Nesse sentido, este trabalho teve como objetivo, estudar a função dos hormônios sexuais no modelo de epilepsia induzido por pilocarpina, em ratas castradas. Utilizamos como grupo de estudos: (a) animais controles (estro, metaestro, diestro, proestro e castradas), (b) animais experimentais, que receberam pilocar pina e foram estudados na fase crônica do modelo (intacta crônica e castrada crônica) e (c) animais castrados, que na fase crônica do modelo foram submetidas à terapia de reposição hormonal (castrada crônica tratada com acetato de medroxiprogesterona, castrada crônica tratada com 17beta-estradiol e castrada crônica tratada com acetato de medroxiprogesterona + 17beta-estradiol. Pudemos verificar que todos os animais castrados tiveram atrofia genital após 4 dias do procedimento cirúrgico. Além disso, todos os animais que receberam pilocarpina apresentaram crises espontâneas e recorrentes na fase crônica. O estudo da distribuição hipocampal de parvalbumina mostrou que a marcação para esta proteína sofre flutuações durante as fases ao ciclo estral e apresenta maior marcação no grupo de ratas castradas que receberam acetato de medoxiprogesterona + 17beta-estradiol. Em relação à freqüência de crises o melhor tratamento após a castração foi aquele onde houve reposição de acetato de medoxiprogesterona + 17beta-estradiol. Entretanto, animais que receberam a reposição somente com acetato de medoxiprogesterona também tiveram redução do número de crises. Além disso, o tratamento hormonal também foi capaz de estabilizar o brotamento supragranular de fibras musgosas, mostrando a importância desses hormônios no desenvolvimento da epilepsia em fêmeas. / The epilepsy model, induced by pilocarpine, in females was described by Amado et al., (1993) and was been used to understand the effect of hormones in epileptogenesis. Therefore this work was as objective, to study the function of sexual hormones in the epilepsy model induced by pilocarpine in castrated rats. We use as groups: (a) controls animals (estrus, metaestrus, diestrus, proestrus and castrated), (b) experimental animals, that was received pilocarpine and it was studied in the chronic phase of the model (normal chronic and castrated chronic) and (c) castrated animals, that in the chronic phase it was submitted to the hormonal replace therapy (castrated chronic treated with medroxiprogesterone acetate, castrated chronic treated with 17β- estradiol and castrated chronic treated with medroxiprogesterone acetate + 17β-estradiol. We could verify that all the castrated animals were genital atrophy 4 days of the surgical procedure. Moreover, all the animals that were received pilocarpine presented spontaneous recurrent seizures in the chronic phase. The study of the hipocampal distribution of parvalbumine showed that the staining for this protein presents fluctuations during the phases from the estrous cycle and presents greater staining in the group of castrated rats that was received medoxiprogesterone acetate + 17β-estradiol. In the frequency of seizures the best treatment after the castration was that one where medoxiprogesterone acetate + 17β-estradiol. However, animals that received the replacement only medoxiprogesterone acetate also was reduction of the number of seizures. Moreover, the hormonal treatment also was capable os stabilize the sprouting mossy fibers, showing the importance of these hormones in the development of the epilepsy in females rats. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Orientador: Luis Guillermo Bahamondes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T11:48:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sanches_Luciana_M.pdf: 2162409 bytes, checksum: b3edab8c6bcc59cc639d9b6b5d09e971 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Introdução: Diante da relevância da contracepção na saúde reprodutiva, muitos estudos sobre segurança e eficácia contraceptiva são realizados a cada ano. O contraceptivo injetável com acetato de medroxiprogesterona de depósito (AMP-D) é um método reversível e eficaz. Entretanto, seu uso provoca hipoestrogenismo e pode afetar a densidade mineral óssea (DMO) durante seu uso ou após a descontinuação, levando à osteopenia e osteoporose. A osteoporose é uma doença caracterizada pela diminuição absoluta da quantidade de osso, tornando-o frágil, sendo um dos maiores problemas de saúde, pois está associada com o aumento no risco de fraturas. O efeito do uso do AMP-D durante a vida reprodutiva sobre a DMO na pós-menopausa ainda é controverso. Objetivo: Avaliar a DMO em mulheres na pós-menopausa que usaram o AMP-D como contraceptivo até a menopausa e comparar com mulheres na pós-menopausa que usaram o dispositivo intra-uterino (DIU) com cobre. Sujeitos e métodos: Estudo com 135 mulheres na pós-menopausa, com idade entre 43 e 58 anos, compreendendo 36 usuárias de AMP-D e 99 usuárias de DIU com cobre como grupo comparativo. A DMO foi avaliada nas porções distal e ultradistal do rádio do antebraço não dominante, usando a técnica da energia dupla de Raios-X, até 3 anos após a menopausa. Todos os valores foram expressos em média ± erro-padrão da média (EPM). Resultados: O tempo de uso de ambos os contraceptivos foi de 9,4 ± 3,8 e 14,7 ± 6,2 anos para o AMP-D e DIU, respectivamente. As DMO na seção distal nos anos 1 e 2-3 após a menopausa foram 0,435 e 0,449 e 0,426 e 0,447 nas usuárias de AMP-D e DIU, respectivamente. Na seção ultradistal os valores foram: 0,369 e 0,384 e 0,340 e 0,383, respectivamente. Todos sem significância estatística. Conclusões: Mulheres com idade entre 43 e 58 anos, na pós-menopausa, ex-usuárias de AMP-D, apresentaram DMO, no ano 1 ou 2-3 após a menopausa, similar ao grupo de controle. / Abstract: Objetive: The aim of the study was to compare bone mineral density (BMD) in post menopausal women who were users of depot-medroxyprogesterone acetate (DMPA) or copper intrauterine device (IUD) up to the menopause. Volunteers and methods: This study included 135 postmenopausal women, aged 43 to 58 year divided on a group of formers users of DMPA (36 women) and the control group of formers users of the copper IUD (99 women). BMD was measured at the nondominant forearm using double X-ray absorptiometry up to 3 years after the menopause. Results: The mean time of previous use of both contraceptives was (Mean ± SEM) 9.4 ± 3.8 and 14.7 ± 6.2 years for DMPA and IUD, respectively. The mean BMD at the distal section at years 1 and 2-3 after the menopause among DMPA and IUD users were 0.435 and 0.449 and 0.426 and 0.447, respectively. At the ultradistal section the values were 0.369 and 0.384 and 0.340 and 0.383, respectively, without statistically significance. Conclusions: Postmenopausal women aged 43 to 58 former users of either DMPA or copper IUD up to the onset of menopause presented similar BMD at 1 or 2-3 years after the menopause. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Tocoginecologia

Orientador: Ilza Maria Urbano Monteiro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-27T21:47:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_NataliaDal'Avade_D.pdf: 1420906 bytes, checksum: a2935c71ee1a1153564862074a4b592f (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: INTRODUÇÃO: O ganho de peso associado ao uso de métodos contraceptivos contendo apenas progestágenos pode levar à descontinuação do uso. A avaliação da composição corporal (CC) pode auxiliar na compreensão e monitoração do ganho de peso. A mensuração da CC pela técnica de absorciometria de duplo feixe de raios-X (DEXA) permite quantificar os diferentes componentes da CC - massa gorda (MG), massa magra (MM). OBJETIVOS: Estimar a CC de mulheres na menacme e avaliar sua variação entre usuárias de acetato de medroxiprogesterona de depósito (AMPD) comparadas com usuárias de dispositivo intrauterino TCu380A (DIU TCu380A). SUJEITOS E MÉTODOS: Foram realizados dois estudos de avaliação da CC pela técnica DEXA. As participantes dos estudos foram selecionadas no Ambulatório de Planejamento Familiar do Departamento de Tocoginecologia da UNICAMP. Estudo 1: Estudo de corte transversal com 639 mulheres, entre 20 e 50 anos, divididas por faixas etárias (20-25, 26-30, 31-35, 36-40, 41-45, 46-50), no qual foi avaliado o peso corporal (kg), índice de massa corpórea (IMC kg/m2) e as variáveis de CC: MG (kg) e MM (kg), percentual de MG e de MM, índice de MG (IMG kg/m²) e índice de MM (IMM kg/m²). Estudo 2: Estudo de coorte prospectivo com acompanhamento de um ano, composto por dois grupos: 26 usuárias de AMPD como grupo-estudo e 26 usuárias de DIU TCu380A como grupo-controle , pareadas por peso (±2kg) e idade (±2 anos). Para avaliação da mudança de CC utilizaram-se variações percentuais de MG e MM e do peso (kg). A primeira avaliação foi realizada antes de se iniciar o uso do método contraceptivo e a segunda após 12 meses de uso. RESULTADOS: Estudo 1: Houve aumento absoluto de peso de 8kg (p=0,0001), 4,7kg de MG (p=0,003) e 1,9kg de MM (p=0,124) concomitante com a idade, embora não tenha ocorrido mudança significativa nos percentuais de MG e MM. O IMC(kg/m²) médio foi de 26,18(±4,6), sendo que as mulheres apresentaram sobrepeso desde a faixa etária de 26 a 30 anos e altos percentuais de gordura, atingindo valor médio de 41,6%(±7,4). O IMG médio das mulheres foi 10,5(±3,5). Estudo 2: Aos 12 meses de uso, as usuárias de AMPD tiveram aumento de peso de 1,9kg (p=0,02), resultante do ganho de 1,6kg (p=0,03) de MG. Nas usuárias de DIU TCu380A não houve alteração de peso; entretanto, houve ganho de 1,2kg de MM aos 12 meses de uso (p=0,001). O número de mulheres praticantes de atividade física aumentou neste grupo. Houve diferença significativa entre os grupos na variação do percentual de gordura central (p=0,04). CONCLUSÕES: As mulheres avaliadas apresentaram sobrepeso desde a idade jovem e ganho de peso, concomitantemente ao aumento da idade. Embora os percentuais de MG e MM não tenham se modificado, a quantidade absoluta de MG e de MM aumentou com o aumento da idade. O ganho de peso ocorrido nas usuárias de AMPD deveu-se ao ganho de MG, enquanto que as usuárias de DIU TCu380A tiveram aumento de MM e diminuição na MG abdominal / Abstract: INTRODUCTION: Weight gain associated with the use progestin-only contraceptive methods can lead women to discontinue the use. The boody composition assessment (BC) could assist to understand and to monitor weight gain. Evaluation of body composition by the technique dual-energy X-ray absorptiometry (DXA) allows to quantify the different components of CC: fat mass (FM) and lean mass (LM). OBJECTIVE: This study estimated body composition in women at reproductive age and evaluated body composition (BC) changes in users of depot medroxyprogesterone acetate (DMPA) and compared to TCu380A intrauterine device (IUD) users. SUJEITOS E MÉTODOS: It was performed two studies of BC assessment by DXA. Women of both studies were recruited at Woman Hospital of University of Campinas (Unicamp). Study 1: Cross-sectional study assessed BC of 639 women, between 20 - 50 years into age brackets (20-25, 26-30, 31-35, 36-40, 41-45, 46-50). It was evaluated weight, body mass index (BMI kg/m²), fat (FM) and lean mass (LM), percentage of fat (%FM) and lean mass (%FFM), fat mass index (FMI kg/m²) and fat-free mass index (FFMI kg/m²). Study 2: Prospective study was performed to compare body weight (BW) and BC in DMPA and IUD users at baseline and after one year of use. We enrolled 26 new DMPA users and age (± 2) and weight (± 2) matched 26 new IUD users. Weight and height were measured, BC (fat and lean mass), and physical activity was assessed at baseline and at 12 months. RESULTS: Study 1: It was an increase of 8kg of BW (p=0.0001), 4.7kg of FM (p= 0.003) of 1.9kg of LM (p= 0.124) concomitantly with increasing age, however it was no significant changes in %FM and %LM. Mean BMI (kg/m²) was 26.18 (±4.6), and women presented overweight since 26 years and elevated %FM, mean of 41.6% (±7.4). Mean FMI was (kg/m²) 10.5 (±3.5). Study 2: An increase of 1.9 kg occurred in BW (p=0.02) in DMPA users at 12 months of use, resulting from an increase in fat mass of 1.6 kg (p=.03). Weight remained stable in IUD users; however, there was an increase in lean mass of 1.2kg at 12 months of use (p=0.001). The number of women practicing physical activity increased in this group. There was a significant difference between the groups regarding the variation in the percentage of central fat (p=0.04). CONCLUSIONS: The women evaluated were overweight from the range of 26-30 years and presented weight gain concomitantly with increasing age. Although the percentage of fat and lean body mass has not changed, the absolute amount of fat and lean body mass increased with increasing age. Weight gain in the DMPA group resulted from an increase in fat mass. Weight remained stable in the IUD group; however, an increase in lean mass and a reduction in localized abdominal fat mass occurred / Doutorado / Fisiopatologia Ginecológica / Doutora em Ciências da Saúde

Orientador: Sarah Monte Alegre / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T08:26:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Batista_GiseleAlmeida_M.pdf: 1859346 bytes, checksum: 3cb1bc28cbd20d9ddb7e8e3a58874a1e (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Introdução: O acetato de medroxiprogesterona de depósito (AMPD, Depoprovera®) é um método contraceptivo de alta eficácia e segurança; seu uso tem se difundido amplamente e vem sendo utilizado por milhões de mulheres. Existem poucos estudos na literatura sobre o gasto energético em repouso nas usuárias de Depoprovera®, e é possível que existam variações especialmente naquelas que ganham peso em uso do método. Objetivo: Avaliar as alterações no peso, composição corporal e gasto energético em repouso de mulheres em uso de acetato de medroxiprogesterona de depósito e DIU TCu 380 no período de 12 meses. Métodos: Estudo prospectivo com 20 usuárias de Depoprovera® e 17 usuárias de DIU TCu380, como controle, no período de um ano. Mulheres atendidas no ambulatório de Planejamento Familiar do CAISM/UNICAMP em idade fértil, que optaram como método contraceptivo o injetável Depoprovera®, sem uso prévio deste método, e que apresentavam Índice de Massa Corporal (IMC) < 30 kg/m², além de mulheres que utilizavam o método contraceptivo não hormonal DIU TCu 380A foram convidadas a participar do estudo. Resultados: Os grupos foram pareados no período basal, tornando-se um grupo homogêneo em relação a peso, idade e IMC. Após 12 meses de avaliação, pode-se observar aumento de peso, IMC e superfície corporal de forma significativa no grupo Depo. Em relação ao gasto energético em repouso e quociente respiratório, houve aumento significativo da taxa metabólica basal nos dois grupos. O quociente respiratório reduziu de forma significante nos dois grupos. Quando o grupo Depo foi subdividido por ganho de peso, o subgrupo que ganhou < 3 kg após 12 meses teve aumento significativo de peso, IMC, superfície corporal e quociente respiratório, já o subgrupo que ganhou > 3 kg aumentou significativamente peso, IMC, superfície corporal, peso de massa magra, peso de massa gorda, taxa metabólica basal, Leptina, HOMA-IR e circunferência da cintura e reduziu quociente respiratório após os 12 meses de acompanhamento. Conclusão: Nosso estudo encontrou alterações relevantes no peso, composição corporal e perfil metabólico da população estudada nos primeiros 12 meses de uso do contraceptivo. Essas alterações principalmente o aumento de peso corporal, aumento dos níveis de leptina e HOMA-IR, podem contribuir para o desenvolvimento de algumas complicações crônicas, entre elas a obesidade, resistência à insulina e diabetes mellitus / Abstract: Introduction: Depot Medroxyprogesterone Acetate (DMPA, Depoprovera®) is an high contraceptive efficacy and safety; its use has spread broadly and has been used by millions of women. There are few studies on the resting energy expenditure in Depoprovera® users, and it is possible that there are variations especially those who gain weight using the method. Objective: To evaluate the changes in weight, body composition and resting energy expenditure in women using depot medroxyprogesterone acetate and IUD TCu 380 in 12 months. Methods: This was a prospective study with 20 Depoprovera® users and 17 IUD users TCu380 as a control within one year. Women attending the outpatient clinic of CAISM / UNICAMP of childbearing age who chose the injectable contraceptive Depoprovera ® without previous use of this method, Body Mass Index (BMI) < 30kg / m², and women using non-hormonal contraception IUD TCu 380, were invited to participate in the study. Results: The groups were paired at baseline, becoming a homogeneous group in relation to age (± 1 year), and BMI (+1 kg/m²). After 12 months of evaluation, we could observe a significant increase in the DMPA group in weight, BMI and body surface. Relative to resting energy expenditure and respiratory quotient, there was an increase of baseline metabolic rate in both groups after one year. The respiratory quotient was significantly reduced after 12 months in groups DMPA and IUD. The sub-group DMPA that gained < 3kg had increased significant weight, BMI and body surface with respiratory quotient reduction, while the sub-group that gained > 3kg had a significant increase in weight, BMI, body surface, free fat mass, fat mass, baseline metabolic rate, Leptin, HOMA-IR and waist circumference, with respiratory quotient significantly reduced. Conclusion: Our study found significant changes in weight, body composition and metabolic profile of the population studied in the first 12 months of contraceptive use. These changes mainly increased body weight, leptin levels and HOMA-IR which can contribute to the development of some chronic complications, including obesity, insulin resistance and diabetes mellitus / Mestrado / Clinica Medica / Mestra em Clínica Médica