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Crescimento inicial de três procedências de Jatropha curcas L. inoculadas com fungos micorrízicos / Initial growth of tree provenances of Jatropha curcas L inoculated with micorrizal fungi

Aquino, Noelle Farias de 08 August 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Noelle_Farias_Aquino.pdf: 377139 bytes, checksum: 4b46af9081e8e4b3493e8cee5428bcf4 (MD5) Previous issue date: 2009-08-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of this work was to identify differences in the development of Jatropha curcas from three origins and the influence of mycorrhizal fungi. Physic-nut seedlings were produced in the Municipality of Marechal Cândi Rondon PR and by the age of 60 days they were allocated in plastic vase with a capacity of 18 L. The vases were filled with three types of soil, control (no treatment), solarized and solarized with inoculum of mycorrhizal fungi. At 60 days after sowing, morphometric and destructive analysis were performed to determine fresh and dried masses. Throughout the period of the experiment there was gathering of morphometric data in order to determine the development of seedlings. At 60 days it was possible to note there are differences in the formation of seedlings between seeds from different provenances. Among the evaluated provenances, Mato Grosso do Sul showed higher averages for almost all evaluated parameters, except for number of leaves (NF), which the highest average was for the seedling from Minas Gerais. Seedlings produced with seeds from Pernambuco showed lower values in all variables measured, including the ratio between height and collar diameter (H: DC). The differences between the studied origins persisted after planting the seedlings in vases. As to soil treatments, the presence of mycorrhizal fungi in roots influenced the development, and its absence was not favorable to the development of seedlings, showing the same behavior throughout trial and for most variables / O objetivo deste trabalho foi avaliar o desenvolvimento de mudas de Jatropha curcas provenientes de três procedências e verificar a influência de fungos micorrízicos. Para tanto mudas de pinhão manso foram produzidas no Município de Marechal Cândido Rondon - PR, e aos 60 dias essas foram alocadas em vasos plásticos com capacidade de 18 L. Os vasos foram preenchidos com três tipos de solo, testemunha (sem tratamento), solarizado e solarizado com inóculo de fungos micorrizos. Aos 60 dias da semeadura realizou-se análise morfométrica e destrutiva de massas frescas e secas. Durante todo o período do experimento houve coleta de dados morfométricos para determinação do desenvolvimento das mudas. Aos 60 dias pode-se notar existência de diferenças no crescimento de mudas a partir de sementes provenientes de diferentes regiões. Entre as procedências avaliadas, a procedência Mato Grosso do Sul mostrou médias superiores em quase todos os parâmetros avaliados, com exceção de número de folhas (NF), cujo maior média foi obtida em mudas da procedência Minas Gerais. Mudas formadas com sementes da procedência Pernambuco apresentaram menores valores em todas as variáveis mensuradas, inclusive para a razão entre altura e diâmetro de coleto (H:DC). As diferenças entre as procedências persistiram após o plantio das mudas em vasos estudadas. Quanto aos tratamentos de solo, a presença de fungos micorrizos nas raízes influenciou o desenvolvimento, sendo a sua ausência desfavorável ao desenvolvimento das mudas, apresentando o mesmo comportamento durante todo experimento e para a maioria das variáveis estudadas
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Respostas de paricá e clones de eucalipto à inoculação de fungos micorrízicos e rizobactérias em área de neossolo quartzarênico em São Domingos do Araguaia – PA.

LIMA, Antônio Ozenilto de Sousa January 2018 (has links)
This study had the objective to evaluate mortality and growth of different eucalyptus clones under inoculation of mycorrhizal fungi as well as and mortality and growth of paricá under inoculation of mycorrhizal fungi and rhizobacteria in the southeast of Pará state, Brazil. The experiment with the eucalyptus clones was installed following a randomized block design with three replicates (three blocks) with 12 treatments and six clones. The seedling spacing was 3.0 x 3.0 meters with each plot having 56 seedlings. Half of the seedlings were inoculated with the arbuscular mycorrhizals fungi (endomycorrhizal) Glomus etunicatum, Glomus clarum, and the ectomycorrhizal Pisolithus microcarpus and the other half of the seedlings had no inoculation and served as a control. Each eucalyptus clone had 168 seedlings, totaling 1008 seedlings. Up to the last experiment measurement, the inoculation with the mycorrhizal fungi did not promote higher growth in diameter and height of the eucalyptus clones tested, when compared to the treatment without inoculation. The clones VM01 Eucalyptus urocan, 373 E. platyphylla, and 1250 E. urograndis had the lowest mortality rates. Therefore, the most recommended clones for Southeastern Pará were VM01 E. urocan, A 2017 E. urograndis, 373 E. platyphylla and 1250 E. urograndis because they presented better growth in diameter, height and lower mortality rate. The experiment with paricá was installed following the randomized block design with three replicates (three blocks) for each treatment being one replicate with 49 individuals, totaling 147 trees per treatment. The seedling spacing was 3.0 x 3.0 meters. In total, 588 paricá seedlings were used in the experiment. The development of paricá was evaluated under the influence of four treatments: (T0) control, (T1) conventional chemical fertilization (thermophosphate and, in the cover, NPK), (T2) inoculation with arbuscular mycorrhizal fungi, and (T3) inoculation with arbuscular mycorrhizal fungi and use of the plant growth promoting rhizobacteria. Inoculation with the plant growth promoter rhizobacteria (Enterobacter sp., Enterobacter aerogenes, Bacillus sp. and Pantoea sp.) and arbuscular mycorrhizal fungi in the species Glomus ethunicatum and Glomus clarum during the period evaluated did not influence development in diameter, height, and mortality of paricá plants. The paricá trees with conventional chemical fertilization had the best growth in height and diameter and lower mortality rate. However chemical fertilization is recommended in paricá plantations up four years in age in southeast Pará. / Este estudo teve como objetivo avaliar a mortalidade e o crescimento de diferentes clones de eucalipto sob inoculação de fungos micorrízicos e a mortalidade e crescimento de paricá sob inoculação de fungos micorrízicos e rizobactérias no sudeste do estado do Pará, Brasil. O experimento com os clones de eucalipto foi instalado seguindo um delineamento de blocos casualizados com três repetições (três blocos) com 12 tratamentos e seis clones. O espaçamento foi de 3,0 x 3,0 metros, com cada parcela tendo 56 mudas. Metade das plântulas foi inoculada com fungos micorrízicos arbusculares (endomicorrízicos) Glomus etunicatum, Glomus clarum e o ectomicorrízico Pisolithus microcarpus e a outra metade das plântulas não teve inoculação e serviu como controle. Até a última medição do experimento, a inoculação com os fungos micorrízicos não promoveu maior crescimento no diâmetro e altura dos clones de eucalipto testados, quando comparado ao tratamento sem inoculação. Os clones VM01 Eucalyptus urocan, 373 E. platyphylla e 1250 E. urograndis apresentaram as menores taxas de mortalidade. Portanto, os clones mais recomendados para o Sudeste do Pará foram VM01 E. urocan, A 2017 E. urograndis, 373 E. platyphylla e 1250 E. urograndis por apresentarem melhor crescimento em diâmetro, altura e menor taxa de mortalidade. O experimento com paricá foi instalado seguindo o delineamento de blocos casualizados com três repetições (três blocos) para cada tratamento, sendo cada repetição com 49 indivíduos, totalizando 147 árvores por tratamento. O espaçamento das mudas foi de 3,0 x 3,0 metros. O crescimento do paricá foi avaliado sob a influência de quatro tratamentos: (T0) controle, (T1) adubação química convencional (termofosfato e, na cobertura, NPK), (T2) inoculação com fungos micorrízicos arbusculares e (T3) inoculação com fungos micorrízicos arbusculares e uso de rizobactérias promotoras de crescimento de plantas. A inoculação com rizobactérias promotoras de crescimento (Enterobacter sp., Enterobacter aerogenes, Bacillus sp. e Pantoea sp.) e fungos micorrízicos arbusculares nas espécies Glomus ethunicatum e Glomus clarum durante o período avaliado não influenciou o crescimento em diâmetro, altura e mortalidade do paricá. As árvores de paricá com adubação química convencional apresentaram o melhor crescimento em altura e diâmetro e menor taxa de mortalidade. Entretanto, a adubação química é recomendada nas plantações de paricá com até quatro anos de idade no sudeste do Pará.
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Arbuscular mycorrhizal fungi and Eucalyptus species with different levels of water stress tolerance / Fungos micorrízicos arbusculares e espécies de Eucalyptus com diferentes níveis de tolerância ao estresse hídrico

Lopes, Bruna Andréia de Bacco 08 August 2019 (has links)
Eucalyptus species account for almost 80% of the forests planted in Brazil, which makes silviculture an activity of great importance in the national and international scenario. Despite its adaptability, Eucalyptus is subject to damages caused by climate change, especially the water deficit. Most plants have survival strategies in water deficit situations. Association with mycorrhizal fungi (FM) is one of them, since they increase water and nutrients uptake by the roots. Thus, the main objective of this study was to evaluate the colonization of mycorrhizal fungi in six Eucalyptus species with different levels of drought tolerance: E. brassiana, E. camaldulensis, E. citriodora, E. cloeziana, E. grandis and E. urophylla. Two trials were carried out, one in the field and another in a greenhouse. In the greenhouse, the substrate of the pots were submitted to different levels of water retention, 50, 75 and 100% of the field capacity, for three months. In the field, soil and roots were sampled at two different periods: after the dry period and after the rainy season. The soil samples and fine roots collected from the two experiments were submitted to microbiological and molecular analyses. AMF root colonization was evaluated. The ITS genes were analyzed by quantitative PCR (qPCR) and the fungal community structure by restriction fragment polymorphism (T-RFLP). Among the eucalypt species studied, E. urophylla presented higher colonization in both trials. Soil microbial activity was strongly affected by soil moisture. The fungal community structure did not differ clearly among the treatments. Age of plants and soil moisture seemed to affect the plant species more than levels of water stress tolerance. / As espécies de eucalipto respondem por quase 80% das florestas plantadas no Brasil, o que faz da silvicultura uma atividade de grande importância no cenário nacional e internacional. Apesar de sua adaptabilidade, o eucalipto está sujeito a danos que as alterações climáticas podem causar, especialmente o déficit hídrico. A maioria das plantas possui estratégias de sobrevivência em situações de déficit hídrico. A associação com fungos micorrízicos arbusculares (FMA) é uma delas, pois aumenta a absorção de água e nutrientes pelas raízes. Assim, o objetivo principal deste trabalho foi avaliar a colonização de fungos micorrízicos em seis espécies de Eucalyptus com diferentes níveis de tolerância à seca: E. brassiana, E. camaldulensis, E. citriodora, E. cloeziana, E. grandis e E. urophylla. Dois ensaios foram realizados: um no campo e outro em casa de vegetação. Em casa de vegetação, os vasos foram submetidos a diferentes níveis de água: 50, 75 e 100% da capacidade de campo, por três meses. No campo, as amostras foram coletadas em dois períodos diferentes: após o período seco e após a estação chuvosa. As amostras de solo e raízes finas coletadas nos dois experimentos foram submetidas à análise microbiológica e molecular. A colonização da raiz por FMA foi avaliada. Os genes ITS foram analisados por PCR quantitativo (qPCR) e a estrutura da comunidade fúngica por polimorfismo de fragmentos de restrição (T-RFLP). Dentre as espécies estudadas, E. urophylla apresentou maior colonização em ambos os ensaios. A atividade microbiana do solo foi fortemente afetada pela umidade do solo. A estrutura da comunidade fúngica não se diferenciou claramente entre os tratamentos. A idade das plantas e a umidade do solo parecem ter maior efeito no desempenho das espécies de eucalipto do que seu nível de tolerância ao estresse hídrico.
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Din?mica sazonal de fungos micorr?zicos arbusculares (Glomeromycota) em cerrad?o e brejo de altitude na Chapada do Araripe, CE

Lima, Ruy Anderson Ara?jo de 19 March 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T15:49:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RuyAAL_DISSERT.pdf: 2128055 bytes, checksum: 8d6cb4ba8070b2733dd933f1021d095c (MD5) Previous issue date: 2013-03-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) are obligatory symbiotic organisms that associate with roots of a large number of plant taxa, and are found in all terrestrial ecosystems. These fungi promote greater tolerance to environmental stresses to associated plant, favoring the establishment of plant communities, especially where soil fertility is a limiting factor, as in the Caatinga, an exclusively Brazilian domain that has been focus of research due to its great biodiversity that can help clarify the history of vegetation in South America. Because of the ecological importance of AMF, the limited number of jobs and the potential diversity of the Caatinga, this work aims to inventory the diversity and determine AMF communities in areas with different faces occurrent in FLONA Araripe, Cear? (CE). The sample collection occurred in four periods at the beginning and end of the dry season (August and December 2011, respectively) and rainy (February and June 2012, respectively) in an area of marsh and woodland altitude of the Araripe, Crato, CE. The glomerosporos were extracted by wet sieving and centrifugation in water and sucrose (50%) mounted between slide and coverslip using PVLG and PVLG + Reagent Melzer. In total, we found 46 species of AMF distributed in eight families and 16 genera: Acaulospora (6), Ambispora (1), Cetraspora (2), Dentiscutata (5), Fuscutata (2), Gigaspora (6), Glomus (13) Intraornatospora (1), Kuklospora (1), Orbispora (1), Paradentiscutata (1), Quatunica (1), Racocetra (1), Scutellospora (2), Septoglomus (2) and a new genus. analysis showed that ecological each area of study has its own seasonal dynamics, with an area of woodland with a greater diversity of species throughout the year, while the marsh elevation showed greater variation in species found among the collection periods, showing that vegetation and rainfall has strong influence on the seasonal dynamics of AMF, as well as the availability of nutrients and soil pH so / Os fungos micorr?zicos arbusculares (FMA) s?o organismos simbiontes obrigat?rios de ra?zes de vasto n?mero de t?xons vegetais, sendo encontrados em todos os ecossistemas terrestres. Estes fungos promovem maior toler?ncia a estresses ambientais aos vegetais associados favorecendo o estabelecimento de comunidades vegetais, especialmente quando a fertilidade do solo ? fator limitante, como em ?reas de Caatinga, dom?nio exclusivamente brasileiro que vem sendo foco de pesquisas em fun??o da particular biodiversidade que pode proporcionar maior compreen??o da hist?ria vegetacional de parte da Am?rica do Sul. Devido ? import?ncia ecol?gica dos FMA, ao limitado n?mero de trabalhos e o potencial em diversidade da Caatinga, este trabalho visa inventariar a diversidade e determinar as comunidades de FMA em ?reas com diferentes fisionomias ocorrentes na FLONA Araripe, Cear? (CE). A coleta das amostras ocorreu em quatro per?odos, no in?cio e final da esta??o seca (agosto e dezembro de 2011, respectivamente) e chuvosa (fevereiro e junho de 2012, respectivamente) em uma ?rea de brejo de altitude e de cerrad?o da Chapada do Araripe, Crato, CE. Os glomerosporos foram extra?dos por peneiramento ?mido e centrifuga??o em ?gua e sacarose (50%), montados entre l?mina e laminula utilizando PVLG e PVLG + Reagente de Melzer. No total, foram encontradas 46 esp?cies de FMA distribuidas em oito fam?lias e 16 g?neros: Acaulospora (6), Ambispora (1), Cetraspora (2), Dentiscutata (5), Fuscutata (2), Gigaspora (6), Glomus (13), Intraornatospora (1), Kuklospora (1), Orbispora (1), Paradentiscutata (1), Quatunica (1), Racocetra (1), Scutellospora (2), Septoglomus (2) e um novo g?nero. An?lises ecol?gicas mostraram que cada ?rea de estudo apresenta din?micas sazonais pr?prias, com a ?rea de cerrad?o com maior diversidade de esp?cies ao longo do ano, enquanto que o brejo de altitude mostrou maior varia??o nas esp?cies encontradas entre os periodos de coleta, mostrando que a vegeta??o e a pluviosidade tem forte influ?ncia na din?mica sazonal dos FMA, assim como a disponibilidade de nutrientes e o pH so solo
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Micorrizas arbusculares e enzimas do estresse oxidativo em raízes de cenoura transformada e em morangueiro / Arbuscular mycorrhizas and oxidative stress enzymes in transformed carrot roots and in strawberry plants

Costa, Francilina Araújo 20 December 2003 (has links)
Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T17:18:54Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 135498 bytes, checksum: b0abb80fb1012e76f58c9eecc79cc596 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T17:18:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 135498 bytes, checksum: b0abb80fb1012e76f58c9eecc79cc596 (MD5) Previous issue date: 2003-12-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo deste trabalho foi estabelecer o cultivo in vitro de Glomus clarum e Gigaspora decipiens e estudar os efeitos da simbiose micorrízica arbuscular sobre a atividade de enzimas do estresse oxidativo em raízes de cenoura transformadas, submetidas a temperaturas de choque térmico, e em plantas de morangueiro micropropagadas, durante a fase de aclimatização em casa-de-vegetação. Para o desenvolvimento do cultivo in vitro , a viabilidade do micélio de fungos micorrízicos arbusculares, durante o cultivo, e os efeitos do pH do meio de cultura e da temperatura de incubação sobre a produção de esporos fúngicos foram analisados. Para G. clarum , a mais alta viabilidade do micélio foi de 70%, obtida aos 75-90 dias após a transferência do inóculo para meio novo. Para G. decipiens , a viabilidade medida variou de 70 a 90% após 30-90 dias de cultivo. A produção de esporos não diferiu significativamente às temperaturas de 22 a 28°C. No entanto, declínio significativo na produção de esporos foi verificado à temperatura de 32°C para ambas as espécies fúngicas. O pH ótimo para a produção de esporos foi de 4,0, para G. clarum , e de 6,0, para G. decipiens . No estudo de tolerância térmica conduzido com raízes de cenoura transformadas, a colonização micorrízica e as temperaturas testadas (28, 40, 42, 44, 46°C) não induziram a expressão de novas isoenzimas do estresse oxidativo. No entanto, as atividades de catalase e superóxido dismutase apresentaram aumentos significativos às temperaturas supra-ótimas (40-46°C) ou como resultante da colonização radicular por G. decipiens . Estes resultados demonstram que o sistema de cultivo de raízes in vitro é um sistema modelo promissor para os estudos sobre as respostas de plantas a condições ambientais desfavoráveis. Nos experimento de casa-de-vegetação, a inoculação de plântulas de morangueiro micropropagadas com G. clarum e Glomus etunicatum resultou em aumentos significativos nas atividades de peroxidase, catalase e superóxido dismutase. Esses aumentos ocorreram em diferentes períodos durante a fase de aclimatização. A colonização das raízes de morangueiro micropropagadas por G. clarum e G. etunicatum foi benéfica, possivelmente por resultar em aumentos na tolerância da planta ao estresse oxidativo, durante a aclimatização. / The objective of this work was to establish the in vitro cultivation of Glomus clarum and Gigaspora decipiens and to study the effects of the arbuscular mycorrhizal symbiosis on the activity of oxidative stress enzymes in transformed carrot roots submitted to supra-optimum temperatures and in micropropagated strawberry plants, during acclimatization in the greenhouse. For the development of the in vitro cultivation, the viability of the arbuscular mycorrhizal fungi, during cultivation, and the effects of pH of the culture medium and of the incubation temperature on the production of fungal spores were analyzed. For G. clarum, the highest viability of the mycelium corresponded to 70%, at 75 to xii90 days after the transfer of the inoculum to a fresh medium. For G. decipiens , a viability of 70-90% was obtained at 30 to 90 days. The production of spores did not differ significantly at temperatures ranging from 22 to 28°C. However, a decline in spore production was observed at 32 °C for both fungal species. The optimum pH for the production of spores was 4.0, for G. clarum , and 6.0, for G. decipiens. In the thermal tolerance studies conducted with transformed carrot roots, the mycorrhizal colonization and the temperatures tested (28, 40, 42, 44, 46°C) did not induce the expression of new oxidative stress isozymes. However, the activities of catalase and superoxide dismutase were significantly increased only at supra-optimum temperatures (40-46°C) and by root colonization by G. decipiens . These results demonstrate that the in vitro technique for the cultivation of roots is a suitable model system for the studies of plant responses to unfavorable environmental conditions. In the greenhouse experiments, the inoculation of micropropagated strawberry plants with G. clarum and Glomus etunicatum caused significant increases in the activities of peroxidase, catalase, and superoxide dismutase. These increases occurred at different periods for each enzyme. The colonization of the roots of micropropagated strawberry plants by G. clarum and G. etunicatum was beneficial, probably as a consequence of increases in plant tolerance to oxidative stress during acclimatization.
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\"Perfil fisiológico e da expressão de transportadores de fosfato da cana-de-açúcar durante a simbiose com micorriza arbuscular\" / Sugarcane (Saccharum Spp.) physiological profile and phosphate transporters expression during an arbuscular mycorrhizal symbiosis

Raul Santin Almeida 22 June 2007 (has links)
As plantas apresentam diversas adaptações fisiológicas à baixa disponibilidade de fósforo (Pi) do solo. Este trabalho discute os custos fisiológicos e energéticos associados com essas estratégias, focado nas respostas da cana-de-açúcar (Saccharum spp.) à disponibilidade de Pi durante a simbiose com micorrizas arbusculares (Glomus clarum). Esses custos são importantes componentes para a adaptação a solos com baixo Pi, afetando a aquisição e conteúdo de fósforo; o crescimento e concentração de açúcares em tecidos vegetais. Plantas de cana-de-açúcar foram cultivadas em vasos com ou sem micorrizas (Glomus clarum), e sob a disponibilidade de baixo (20 mg kg-1) ou alto (202 mg kg-1) fósforo. Raízes e parte-aérea foram coletadas para as análises após 14, 30, 44 e 58 dias pós-inoculação (dpi) com Glomus clarum . A condição de BP causou a deficiência de Pi nas plantas, micorrízicas ou não. As plantas sob AP continham um teor foliar de Pi adequado, e partir dos 44 dpi acumularam pelo menos 6 vezes mais Pi parte-aérea, do que as cultivadas sob BP, efeito mais evidente nas micorrízicas. A eficiência de absorção, indicada pelo acúmulo de Pi na parte-aérea a uma dada biomassa da raiz, foi igual para todos os tratamentos, sugerindo que as eficiências radicular e micorrízica da absorção de Pi foram similares, independentemente da doses de Pi. A disponibilidade de fósforo não afetou a biomassa total das plantas, sendo as cultivadas sob BP mais eficientes na utilização deste nutriente. Por outro lado, as plantas micorrízicas suplementadas com BP apresentaram maior crescimento da raiz e redução na parte-aérea, resultando no aumento da proporção raiz:parte-aérea. Aos 58 dpi, a glicose, frutose e sacarose presente nas folhas de plantas micorrízicas foi 3,8, 2,3 e 2,4 vezes respectivamente mais concentrada do que nas não micorrízicas. Esses resultados sugerem que, nestas condições experimentais, o estabelecimento da simbiose não foi uma associação mutualística típica, afetando o perfil de crescimento e a alometria da cana cultivada com BP. As concentrações de fotoassimilados na folhas de planta micorrízicas indicam que houve aumentos nas taxas fotossintéticas, mas isso não resultou no maior crescimento do macrosimbionte. A tecnologia de amplificação quantitativa de transcritos reversos (RT-PCR) se tornou uma opção para a validação funcional de genes, com alta sensibilidade, acurada quantificação e eficácia. A quantificação relativa da expressão gênica é conseqüentemente fácil e determina a expressão de um gene em relação a outro expresso e relativamente constante. Neste trabalho foi analisada a variabilidade de expressão dos genes de cana-de-açúcar codificando a actina (Actina), gliceraldeido fosfato desidrogenase (GAPDH), tubulina (Tubulina), e ubiquitinas (UbiQ1 e UbiQ2) em diversos tecidos, e comparou-se a variabilidade obtida utilizando os programas Genorm e NormFinder. Em seguida, foram realizadas análises de expressão gênica utilizando o programa REST para a validação estatística da expressão de genes de cana-de-açúcar. O gene UbiQ1 foi mais estável nos tecidos ou órgãos testados: meristema, inflorescência, folha, colmo e raízes tratadas com alto e baixo fósforo. Tendo o gene UbiQ1 como referência, a expressão relativa dos genes transportadores de fosfato de alta afinidade de cana-de-açúcar PT7 e PT8 foi avaliada em amostras de raiz fertilizadas com alto ou baixo Pi, inoculadas ou não com fungo micorrízico e coletadas aos 58 dpi. Esses dois genes pertencem à família Pht1 de transportadores de fosfato e são similares aos ortólogos de arroz ORYsa;tPht1;7 e ORYsa;Pht1;8. Sob a deficiência de Pi, o transportador de fosfato PT7 foi induzido em raízes não colonizadas; já nas micorrízicas foi pouco expresso, sendo que altas taxas de colonização radicular suprimiram a expressão do PT7. O gene PT8 pouco variou sua expressão, sendo sutilmente mais expresso em plantas micorrízicas do que nas não micorrízicas sob o suprimento de BP. Estes resultados indicam que o PT7 é induzido em raízes sob estresse por fósforo e provavelmente associado à absorção radicular de Pi. Enquanto o gene PT8 possui uma modulação pouco variável provavelmente envolvido na manutenção do fluxo ou homeostase de Pi, possivelmente associado com a absorção radicular e micorrízica de fosfato. O PT7 e o PT8 foram expressos em tratamentos de médio/longo prazo, apresentando expressão ou indução em resposta a privação por Pi, o que é consistente com a função proposta de aquisição e mobilização de Pi para esta família de transportadores. A cana-de-açúcar micorrízica mostrou alta plasticidade de resposta ao BP / Plants display a wide array of physiological adaptations to low soil phosphorus (Pi) availability. This work discussed physiological and energetic costs associated with these strategies, focusing on sugarcane responses to Pi availability during the development of arbuscular mycorrhizal (AM) symbiosis. Such costs are important components of adaptation to low phosphorus soils affecting phosphorus acquisition and leve, growth and soluble sugars concentration in plant tissues. Sugarcane plants were grown in pots, with or without AM (Glomus clarum), and with low (20 mg kg-1) or high (200 mg kg-1) phosphorus supply. Roots and shoots were harvest for analysis after 14, 30, 44 and 58 days post-inoculation (dpi) with the fungus Glomus clarum,. The low Pi supply caused Pi deficiency in mycorrhizedl or non-mycorrhizedl plants. The efficiency of Pi absorption, indicated by shoot Pi accumulation in correlation to root biomass, suggested that root and mycorrhizal Pi absorption were similar, regardless of the Pi doses. Phosphorus availability did not affect the whole-plant biomass, and plants under low Pi supply, used more efficiently this nutrient. On the other hand, mycorrhized plants supplemented with low Pi presented the highest root growth and shoot reduction, resulting in high root:shoot ratio. At 58 dpi, glucose, fructose and sucrose concentrations in leaves of mycorrhized plants were 3.8, 2.3 and 2.4-fold higher respectively, than in non-mycorrhizedl plants. These results suggested that, under these experimental conditions, mycorrhizal symbiosis establishment was not a typical mutualistic association affecting sugarcane growth profile and allometry, when cultivated under low Pi. The photosynthate levels of leaves from mycorrhizd plants indicated an increase in photossynthetic rate but withut resulting in higher macrobiont growth. The quantitative amplification of reversed transcripts (RT-PCR) technology has become a method of choice for functional gene validation, with sensitiveness, accurate quantification and high-throughput. The relative quantification is easier determined by relative expression in comparison to a constitutively expressed refernce gene. Here, the expression variability of a sugarcane actin gene (Actin) glyceraldehydo phosphate dehydrogenase (GAPDH), tubulin (Tubulina), and ubiquitins (UbiQ1 and UbiQ2) from various tissues were analysed and compared based on the ranking list from the Genorm and NormFinder softwares. Expression analysis based on the REST software gave the proper statistic validation. UbiQ1 was the most stable gene among the candidate gen-references along the various tissues or organs tested: meristem, inflorescence, leaf, stem and roots treated with high and low phosphorus. Considering UbiQ1 as the reference gene, the relative expression of the sugarcane high-affinity phosphate transporters genes PT7 and PT8 were assessed from roots fertilized with low Pi or high Pi , inoculated or not with the mycorrhizal fungus, harvest 58 dpi. Both genes belong to the Pht1 Pi transporter and share similarity with the rice orthologs ORYsat;Pht1;7 and ORYsat;Pht1;8. Under Pi deficiency, the phosphate transporter PT7 was induced in non-colonized roots, but less expressed in mycorrhizedl ones, with high root colonization rate suppressing PT7 expression. PT8 showed low variability in expression, slightly more expressed in mycorrhized plants than in non-mycorhized plants under low Pi supply. These results indicated that PT7 was induced in Pi stressed roots, and possibly associated with the root Pi uptake, while PT8 had limited modulation in expression and probably involved on Pi fluxes or homeostasis, likely associated with both root and mycorrhizal phosphate uptake pathways. PT7 and PT8 were induced during medium/long-term treatments, showing induction or constant expression in both acquisition and mobilization of Pi in response to Pi deprivation, which is consistent with the proposed role of this tranporter family. Mycorrhizedl sugarcane showed a highly plastic response to low Pi
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Levantamento populacional de fungos micorrízicos arbusculares e de fitonematoides em áreas produtoras de algodão no estado de Goiás / Survey of arbuscular mycorrhizal fungi and nematode population in cotton producing areas in The state of Goiás

Ferreira, Bruno da Silva 28 August 2015 (has links)
Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-10-17T20:25:43Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Bruno da Silva Ferreira - 2015.pdf: 2213963 bytes, checksum: 9d6325fb6aaf93b0f49154c30b557bc0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2016-10-18T16:21:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Bruno da Silva Ferreira - 2015.pdf: 2213963 bytes, checksum: 9d6325fb6aaf93b0f49154c30b557bc0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-18T16:21:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Bruno da Silva Ferreira - 2015.pdf: 2213963 bytes, checksum: 9d6325fb6aaf93b0f49154c30b557bc0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-08-28 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Different management strategies are necessary for the control of plant nematodes. The arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) have been an option as potential microorganisms for biological control. There is a demand of ways to manage plant parasitic nematode with less environmental impact and lower cost. Thus, the aim of this study was to survey nematodes and AMF in cotton producing areas in the state of Goiás and evaluate the interaction between AMF and nematodes, and relate their populations to the physical and chemical soil traits. The survey was conducted during two crop seasons (June/2013 and February/2014) in ten cotton producing areas. Three samples composed of ten subsamples were collected in each area. Soil and roots were collected in the depth of 0 to 20 cm. For quantification and identification of AMF and nematodes soil and root analysis were carried out in the laboratory. There was also the analysis of physical and chemical soil properties. For data analysis we used the Pearson correlation coefficient, principal component analysis (PCA) and the diversity indexes of Shannon-Wiener, Simpson and Margalef. In all sampled areas was observed occurrence of nematodes, the main genera being Meloidogyne, Pratylenchus, Helicotylenchus, Rotylenchus, Rotylenchulus, Aphelenchus and Criconemoide. The Helicotylenchus and Pratylenchus genres presented higher abundance in the two years of study, followed by Meloidogyne. The major cause of cotton damage, Rotylenchulus sp. was not observed in 80% of the sampled areas, with presence only in two areas in the first crop season (2013). Different AMF species were found, being the main genre Glomus, with most species. AMF were distributed evenly among the evaluated areas and in the two crop seasons. The correlation between Aphelenchus species and AMF Cetraspora pellucida was positive, as well as between Meloidogyne and Glomus sp. On the contrary, the correlation between G. macrocarpum and Pratylenchus was negative. The largest quantity of organic matter negatively affected Helicotylenchus sp. and positively the AMF R. intraradices. The higher phosphorus content influenced positively the population of Glomus sp. Areas cultivated with cotton in the state of Goiás with greater presence of AMF have a lower number of nematodes in the soil and roots. / Para o controle dos fitonematoides é necessário que se utilize diferentes estratégias de manejo. Os fungos micorrízicos arbusculares (FMAs) são empregados como uma opção de microrganismos com potencial controle de patógenos. Existe uma demanda por formas de manejo de fitonematoides com menor impacto ambiental e de menor custo. Com isso, o objetivo deste estudo foi realizar o levantamento de fitonematoides e de FMAs em áreas produtoras de algodão no estado de Goiás e avaliar a interação entre FMAs e fitonematoides, além de relacionar com os atributos físico-químicos do solo de Cerrado. Foi realizado o levantamento de espécies de FMAs e fitonematoides associados à cultura do algodoeiro em dois anos de cultivo agrícola (junho/2013 e fevereiro/2014) em dez áreas no estado de Goiás. Em cada área foram coletadas três amostras compostas por dez pontos (subamostras). Em cada ponto retirou-se solo e raiz na profundidade de 0 a 20 cm. Para quantificação e identificação de FMAs e fitonematoides em solo e raiz realizou-se análises em laboratório. Também realizou-se a análise dos atributos físicos e químicos do solo. Para análise dos dados foi utilizado o coeficiente de correlação de Pearson, análise de componentes principais (PCA) e os índices de diversidade de Shannon-Wiener, Simpson e Margalef. Em todas as áreas amostradas foi observada ocorrência de fitonematoides, sendo os principais gêneros Meloidogyne, Pratylenchus, Helicotylenchus, Rotylenchus, Rotylenchulus, Aphelenchus e Criconemoide. Os gêneros Helicotylenchus e Pratylenchus apresentaram maior abundância nos dois anos de estudo, seguido de Meloidogyne. Um dos principais causadores de danos em algodoeiro, o gênero Rotylenchulus não foi observado em 80% das áreas amostradas, com presença apenas em duas áreas na primeira amostragem (2013). Foram encontradas diferentes espécies de FMAs, sendo o principal gênero Glomus, com maior número de espécies. Os FMAs distribuíram- se uniformemente entre as áreas avaliadas e entre os anos avaliados. A correlação entre Aphelenchus e a espécie de FMA Cetraspora pellucida foi positiva, bem como, entre Meloidogyne e Glomus sp. Ao contrário disso a correlação entre G. macrocarpum e Pratylenchus foi negativa. A maior quantidade de matéria orgânica afetou de forma negativa Helicotylenchus sp. e positiva o FMA R. intraradices. O maior teor de fósforo influenciou de maneira positiva a população de Glomus sp. Áreas cultivadas com algodão no estado de Goiás com maior presença de FMAs apresentam menor número de nematoides no solo e nas raízes.
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Diversidade de fungos micorrÃzicos arbusculares em solo de agroecossistemas do semiÃrido cearense / Diversity of arbuscular mycorrhizal fungi in the soil of agroecosystems in semi-arid CearÃ

Fabio Perlatti 28 June 2010 (has links)
nÃo hà / Os Fungos MicorrÃzicos Arbusculares - FMA sÃo microrganismos chave tanto em agroecossistemas como em ecossistemas naturais. SÃo responsÃveis por uma simbiose que ocorre com a maioria das plantas vasculares. Atuam em mutualismo com as plantas, auxiliando-as na absorÃÃo de nutrientes pouco mÃveis no solo, alÃm de aumentar a absorÃÃo de Ãgua e protegÃ-las contra patÃgenos, sendo fortemente influenciados por prÃticas agrÃcolas e variaÃÃes ambientais. Neste trabalho avaliaram-se as influÃncias de parÃmetros quÃmicos do solo, perÃodos do ano e quatro diferentes agroecossistemas com fruteiras tropicais (cajueiros - Anacardium occidentale (2 pomares), coqueiros - Cocos nucifera, e gravioleiras - Annona muricata), na diversidade de FMA em comparaÃÃo com uma Ãrea de mata nativa adjacente aos plantios, partindo da hipÃtese de que estes fatores alteram a composiÃÃo da comunidade desses fungos. Foram coletadas amostras de solo na profundidade de 0-20 cm, no perÃodo chuvoso (abril/2009) e seco (outubro/2009), e utilizados Ãndices ecolÃgicos como forma de avaliar as alteraÃÃes entre os sistemas e os perÃodos. No total foram identificados 35 diferentes morfotipos de esporos de FMA. Entre os parÃmetros quÃmicos do solo, o pH mostrou-se negativamente correlacionado com a densidade mÃdia de esporos, o Mg com a riqueza de espÃcies e o Zn com ambos. A densidade mÃdia de esporos foi influenciada negativamente pelos agroecossistemas, pois os maiores valores foram encontrados na Ãrea de mata em ambos os perÃodos, e exceto pela cultura do coqueiro, todas as outras tiveram aumento significativo no perÃodo seco. A riqueza de espÃcies de FMA mostrou-se estÃvel, sendo que apenas a gravioleira apresentou diferenÃa em relaÃÃo aos outros sistemas no perÃodo chuvoso. Jà no perÃodo seco nÃo houve diferenÃa na riqueza entre os sistemas, sendo detectado um aumento na riqueza de espÃcies, comparado ao perÃodo chuvoso. A abundÃncia relativa indicou uma maior dominÃncia nas comunidades no perÃodo chuvoso, e a freqÃÃncia relativa demonstra a prevalÃncia de espÃcies do gÃnero Glomus em todos os sistemas. A maior diversidade de FMA foi constatada no solo cultivado com coqueiro. Houve um aumento generalizado da diversidade no perÃodo chuvoso comparada com o perÃodo seco. A dominÃncia avaliada pelo Ãndice de Simpsom corrobora os resultados obtidos pela abundÃncia relativa, demonstrando que no perÃodo chuvoso a concentraÃÃo de dominÃncia foi maior em todos os sistemas A anÃlise de similaridade, utilizando o Ãndice de Bray-Curtis, demonstra que o perÃodo seco tornou os sistemas mais similares, uma vez que apresentaram maiores valores nesse perÃodo. A anÃlise de agrupamento baseada no Ãndice de similaridade demonstra que, apesar das variaÃÃes de riqueza de abundÃncia, os sistemas foram agrupados igualmente em ambos os perÃodos. A gravioleira formou um grupo isolado, enquanto a Ãrea de mata mostrou-se mais similar a cultura do cajueiro velho. O outro agrupamento foi formado pelo coqueiral e a plantaÃÃo de cajueiro novo. Os resultados deste estudo permitem concluir: as atividades agrÃcolas alteraram a composiÃÃo da comunidade de FMA em relaÃÃo à mata nativa; o agroecossistema cultivado com coqueiro apresentou a maior biodiversidade de FMA dentre os sistemas avaliados; as espÃcies do gÃnero Glomus foram mais abundantes tanto nos agroecossistemas como no ecossistema natural; houve diferenÃa na composiÃÃo e na diversidade da comunidade de fungos entre o perÃodo chuvoso e seco; e a diversidade de esporos de FMA no solo, nÃo se relacionou com a capacidade infectiva nas fruteiras / Arbuscular Mycorrhizal Fungi - AMF are key organisms in natural ecosystems and agroecosystems, as being responsible for a symbiosis that occurs in more than 80% of terrestrial vascular plants. Work in mutualism with plants, helping them with less mobile nutrient uptake, increase the absorption of water, protect them against diseases and are strongly influenced by agricultural practices and environmental changes. This study evaluated the influence of chemical parameters of soil, climate variation in two seasons and four different agroecosystems of tropical fruit trees (cashew- Anacardium occidentale, coconut - Cocos nucifera and soursop - Annona muricata), with the diversity of AMF compared with an area of native forest adjacent to plantations, considering the hypothesis that these factors change the community composition of these fungi. Samples were collected at depth of 0-20 cm in the rainy (April/2009) and dry season (October/2009) and used ecological indexes as a way of evaluating changes in the systems and periods. In total were identified 35 different morphotypes of spores and chemical parameters of the soil indicated that pH was negatively correlated with the average density of spores, Mg with the species richness and Zn with both. The average density of spores was negatively influenced by agroecosystems, because the highest values were found in the forested area in both periods, and except for the coconut (Cocos nucifera L.) crop, all the others had a significant increase in between the periods. Species richness was found to be stable, with only the soursop culture (Annona Muricata) different compared to other systems in the rainy season. During the dry season no differences being detected in richness. The relative abundance indicates greater dominance in the communities during the rainy season and relative frequency shows the prevalence of species of the genus Glomus on all systems. The highest diversity, as measured by the Shannon- Wiener index, indicated that the soil under coconut had the highest values in both periods. There was a general increase in diversity comparing the rainy with the dry season. The dominance assessed by the Simpson index corroborates the results obtained by relative abundance, demonstrating that in the rainy season the concentration of dominance was higher in all systems. The similarity analysis using the Bray-Curtis index shows that the dry season has made the systems more similar, since they showed higher values in this period. Cluster analysis based on similarity index shows that despite the richness of abundance variations, the systems were also grouped in both periods. The soursop formed an isolated group, the area of forest was more similar to the old cashew culture. The other cluster was formed by the coconut culture and the new cashew plantation. Results of the study allowed concluding: agricultural activities have changed the community composition of AMF in relation to the native forest; the coconut agroecosystem had the highest biodiversity of AMF among all the systems evaluated; the species of the genus Glomus were the most abundant in agroecosystems and natural ecosystem; there were differences in community composition and diversity of fungi in between the rainy and dry season; and the diversity of AMF spores in soil did not correlate with the tropical fruit treeâs infective capacity.
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Efeitos combinados do fósforo e brassinoesteróides na cana-de-açúcar /

Ferreira, Lucas. January 2020 (has links)
Orientador: Paulo Alexandre Monteiro de Figueiredo / Resumo: Diante da iminente escassez de fósforo (P) para utilização agrícola, surge a necessidade de estudos voltados para o melhor entendimento de estratégias de suprimento deste elemento. Estudos recentes demonstram que a atividade hormonal potencializa processos em que o P é vital para ocorrência no metabolismo, destacando os análogos de Brassinoesteróides (BR) pela influência sobre o desenvolvimento vegetal. São escassos os estudos sobre a interação P e BR e sua aplicação em grandes culturas consumidoras de fósforo, como é o caso da cana-de-açúcar. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da aplicação de doses do análogo de BR 24-epibrassinolide (0; 0,5; 1,0; 2,0 mg. L-1), associado à presença ou ausência de fertilização fosfatada sobre os parâmetros de crescimento, fosfatase, micorrização e fotossíntese de plantas jovens de cana-de-açúcar. O experimento foi conduzido em casa de vegetação, em DBC com fatorial 4x2 com seis repetições. A aplicação dos BR proporcionou um incremento nos valores de massa seca radicular até o ponto máximo da curva de 1,27 mg.L-1. A interação P com BR incrementou respectivamente em 30% e 48% os valores de massa seca aérea nas doses 0,5 e 1,0 mg.L-1 do hormônio; e apresentou uma correlação de Pearson positiva das doses de BR com adição de P sobre essa variável. A presença de P estimulou todas as variáveis de crescimento da cana-de-açúcar. O BR desencadeou um pico significativo na atividade da enzima fosfatase ácida na dose de 1,0 mg. L-1 ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In view of the imminent shortage of phosphorus (P) for agricultural use, increase the need for studies aimed at better understanding the supply strategies of this element. Recent studies show that hormonal activity potentiates processes in which it is vital for the occurrence of metabolism, highlighting the analogues of Brassinoesterteroids (BR) for their influence on plant development. There are few studies on P and BR interaction and their application in large phosphorus-consuming crops, such as sugar cane. Thus, the objective of the present study was to evaluate the effect of applying doses of the 24-epibrassinolide dialogue (0; 0.5; 1.0; 2.0 mg. L-1), associated with the presence or absence of phosphate fertilization on the growth, phosphatase, mycorrhization and photosynthesis parameters of young sugarcane plants. The experiment was conducted in the greenhouse, in the DBC with a 4x2 factorial with six replications. The application of BR provides an increase in the values of root dry mass up to the maximum point of the curve of 1.27 mg. L-1. A P interaction with BR increases, respectively, by 30% and 48% the values of air dry mass at doses 0.5 and 1.0 mg.L-1 of the hormone; and showed a positive Pearson correlation of BR doses with the addition of P on this variable. The presence of P stimulates all sugar cane growth variables. BR triggered a significant peak of acid phosphatase enzyme activity at a dose of 1.0 mg. L-1 and did not affect root mycorrhizal colonization. The... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Plantas de amendoim (Arachis hypogaea L.) submetidas à deficiência hídrica e a influência da associação com fungos micorrízicos arbusculares e extratos de algas marinhas / Peanut plants (Arachis hypogaea L.) submitted to water deficit and the influence of the association with arbuscular mycorrhic fungi and seaweeds extracts

Coscolin, Renata Bruna dos Santos [UNESP] 17 November 2016 (has links)
Submitted by Renata Bruna dos Santos Coscolin null (rbscoscolin@fca.unesp.br) on 2017-01-16T22:27:20Z No. of bitstreams: 1 definitivo tese 8_VF_Completa.pdf: 3379003 bytes, checksum: 659bf515460d03427a658914feaa471a (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-01-19T18:33:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 coscolim_rbs_dr_bot.pdf: 3379003 bytes, checksum: 659bf515460d03427a658914feaa471a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-19T18:33:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 coscolim_rbs_dr_bot.pdf: 3379003 bytes, checksum: 659bf515460d03427a658914feaa471a (MD5) Previous issue date: 2016-11-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O amendoim é uma cultura de interesse econômico para o estado de São Paulo, principalmente para renovação de canaviais e pastagens na região oeste do estado. Nesta região, os crescentes custos de produção do amendoim acompanhados por baixo rendimento por área devido à suscetibilidade às variações climáticas são influências negativas e contribuem para desestimular a produção dessa cultura. Nesse âmbito, a associação com fungos micorrízicos arbusculares (FMAs) e suplementação com bioestimulante a base de extrato solúvel de algas (Ascophyllum nodosum) (ESA) podem promover melhorias no crescimento e desenvolvimento da planta, além de atenuarem os efeitos negativos provocados pela deficiência hídrica. As plantas foram cultivadas em estufa agrícola, com monitoramento das relações hídricas além do estudo de trocas gasosas, análise de crescimento, análises microbiológicas e de produção, bem como das respostas metabólicas das plantas em função dos tratamentos. A presente pesquisa valida os benefícios para a cultura do amendoim quando em associação com os FMAs e / ou com a suplementação com o ESA, pois além de incrementarem o crescimento e taxa de assimilação líquida de carbono nas plantas em condições hidratadas, mantiveram o status hídrico das plantas e proveram também o acionamento de enzimas do complexo antioxidativo nas plantas em condições de deficiência hídrica moderada e severa. / Water is essential element for plant development and its absence or deficiency induces physiological changes with severe consequences for productivity. Peanut is a culture of economic interest to the State of São Paulo especially in the western region. In this region, the increasing of production costs in peanuts is associate by low yield due to susceptibility to climate variations, such as dry seasons. They are negative influences and do not contribute to production in that crop. In this context, the association with arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) and supplementation with biostimulant based on soluble algal extract (Ascophyllum nodosum) (ESA) can promote improvements in plant growth and development, as well as attenuate the negative effects caused by water deficiency. The plants grown in a greenhouse with monitoring of water relations in addition to the study of gas exchange parameters, growth analysis, microbiological analysis, production, and metabolic responses of plants in the treatments. The present study validates the benefits for peanut cultivation with fungus and/or seaweed extract supplementation. Plants under hydrated conditions had better performance in growth and carbon assimilation rate and under conditions of moderate and severe water deficiency.of, they maintained water status of the plants and also provided the activation of enzymes of the antioxidative complex. / CNPq: 141167/2014-9

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