Orientador: Mary Rosa Rodrigues de Marchi / Banca: Paulo Clairmont Feitosa de Lima Gomes / Banca: Maria Lucia Ribeiro / Banca: Eny Maria Vieira / Banca: Mario Sergio Galhiane / Resumo: As micotoxinas são metabólitos secundários, produzidos naturalmente por uma variedade de fungos, que se desenvolvem em plantações ou nos cereais. Além de serem responsáveis por enormes prejuízos econômicos, as micotoxinas apresentam elevado risco à saúde h umana e animal. Dentre as centenas de micotoxinas existentes destacam - se a AFB1 (carcinogênica) e a ZEA (estrogênica). Devido à preocupação com a saúde humana, no que diz respeito à contaminação dos alimentos, existem inúmeros países e comunidade s econômic as que possuem legislações cada vez mais rígidas quanto aos níveis máximos permitidos e ao número de micotoxinas avaliadas, o que justifica os inúmeros trabalhos envolvendo o desenvolvimento de métodos analíticos para quantificação dessas substâncias em am ostras alimentícias. Por outro lado, pouco tem sido feito para determinar o destino e a distribuição dessas substâncias no ambiente. Nesse sentido, o presente estudo tem como objetivos desenvolver um método para determinação das micotoxinas (AFB1 e ZEA) em solo, e avaliar a mobilidade das micotoxinas, por meio de testes de degradação e sorção/dessorção em solos de três cidades brasileiras . Para tanto, desenvolveu - se um método de determinação de AFB1 e ZEA em solo, utilizando um método de extração QuEChERS modificado, e analisado por CLAE - FLU utilizando etanol como fase móvel. O método apresentou seletividade adequada, recuperações entre 74 e 120 %, pre cisão (CV máximo de 8%) e limite de quantificação de 45 ng g - 1 . O efeito matriz e a linearidade foram estudados utilizando a bordagem estatística criteriosa. Para os estudos de degradação o modelo não linear de Gustafson - Holden apresentou as melhores correl ações com os dados experimentais, com tempo de meia vida (D T 50 ) de 5 a 10 dias para a AFB1 e de 1 a 3 dias para ZEA. Dos estudos que definiram a cinética de... / Abstract: Mycotoxins are naturally occurring secondary metabolites of fungi that grow on agricultural products in the field and during storage. In addition to being responsible for huge economic losses, mycotoxins present a high risk to human and animal health. Among hundreds existing mycotoxins stand out the aflatoxin B1 (carcinogenic) and zearalenone (estrogenic ). Due to concern for human health, in relation to contamination of food, there are many countries and economic co mmunity with increasingly stricter legislation as regards maximum levels and the number of evaluated mycotoxins, which explains the numerous studies involving the development of analytical methods for the quantification of these substances in food samples. On the other hand, little has been done to determine the fate and distribution of these substances in the environment . In this sense, this project aims to develop a method for determination of mycotoxins (AFB1 and ZEA) in soil, and evaluate the mycotoxins mobility t hrough degradation and sorption /desorption tests in three Brazilian soils. Thus, we developed a method for determination AFB1 and ZEA in soil, using a QuEChERS modified method followed by HPLC - FLD with ethanol as mobile phase. T he method validat ion process showed that were achieved a method with adequate selectivity, recovery (7 4 - 1 20 %, for different concentrations of AFB1 and ZEA), precision (RSD below 8 %) and the quantification limit (LQ) was 45 ng g - 1 . The matrix effect and linearity was studie d based in statistical approach. To degradation study, nonlinear Gustafson - Holden model showed the best correlation with experimental data, with half - life (D T 50 ) 5 to 10 days for AFB1 and 1 to 3 days to ZEA. In the s tudies that defined the kinetics s orption, was noted, an initial phase of rapid sorption (up to 12 hours), followed by a slower phase. The Freundlich isotherms showed the best correlation... / Doutor

Os membros do complexo de espécies Fusarium graminearum (CEFG) estão entre os mais importantes fungos micotoxigênico que infectam tecidos florais e interferem no desenvolvimento dos grãos de cereais resultando na redução da produtividade e qualidade dos grãos. Sais imidazólicos (SI) são compostos orgânicos constituídos por um grande cátion orgânico em conjunto com um ânion e alquilo substituintes. Os cátions e ânions constituintes modificam as propriedades químicas e físicas resultando no surgimento de características interessantes destes compostos, que incluem natureza anfifílica e baixa toxicidade para as células humanas. Recentemente, SI foram testados contra fungos e bactérias patogênicas para o homem com resultados promissores. O objetivo deste estudo foi investigar a atividade antifúngica de SI contra o CEFG que afetam grãos de trigo. A sensibilidade de F. graminearum, F. asiaticum e F. meridionale foi avaliada frente a três SI, que variaram quanto aos ânions substituintes (C16MImCl, C16MImMeS e C16MImNTf2), e um fungicida comercial (tebuconazol). A avaliação foi realizada com base na germinação dos esporos e na inibição efetiva de 50% do micélio. A concentração inibitória mínima (CIM) variou de 1,56 a 6,25 μg/mL, e o CIM mais frequente foi determinado em 3,12 μg/mL. Apenas um SI, cloreto de 1-n-hexadecil-3-metilimidazolio - C16MImCl, foi capaz de reduzir 50% do crescimento micelial in vitro (CE50) para todos os isolados, a uma concentração de 0,321 g/L. As curvas de tempo de morte indicaram que o SI C16MImCl apresenta efeito fungicida significativo na concentração de 12,48 μg/mL, com a ação iniciada desde a primeira hora de incubação, que foi mantida durante o desenvolvimento do ensaio. O SI C16MImCl foi pulverizado sobre as espigas de trigo durante a floração suprimindo com sucesso os sintomas e controlando F. graminearum nas espigas e grãos quando aplicado de forma preventiva (antes da inoculação fúngica) e na dose mais elevada (2 g/L), não diferindo do fungicida usual tebuconazol. Os dados sugerem o uso potencial do SI C16MImCl para o controle do fungo micotoxigênico F. graminearum em doenças que afetam o trigo especialmente quando aplicados antes da infecção fúngica. / Members of the Fusarium graminearum species complex (FGSC) are among the most important mycotoxigenic fungi that infect floral tissues and developing kernels of cereal crops, and lead to reduced grain yield and quality. Imidazolium salts (IMSs), are organic compounds composed entirely of a large organic cation together with an anion and alkyl substituents. The cation and/or anion constituents modifiy the chemical and physical properties which may result in the emergence of interesting properties of these compounds that include an amphiphilic nature, low toxicity to human cells . Recently, IMSs have been tested against fungi and bacteria that are pathogenic to humans with promising results. The aim of this study was to investigate the antifungal activity of imidazolium salts (IMS) against FGSC which affects wheat grains. The sensitivity of F. graminearum, F. asiaticum and F. meridionale isolates to three IMS, which vary in substituent anions (C16MImCl, C16MImMeS and C16MImNTf2), and one commercial fungicide (tebuconazole) was evaluated based on spore germination and mycelial growth inhibition. The minimum inhibitory concentration (MIC) ranged from 1.56 to 6.25 μg/mL, with 3.12 μg/mL as the most frequent MIC. Only one IMS, 1-n-Hexadecyl-3-methylimidazolium chloride (C16MImCl), was able to reduce 50% of the in vitro mycelial growth (EC50) for all isolates at a concentration of 0.321g/L. The time-kill curves indicated a significant fungicidal effect at the concentration of four times the MIC (12,48 μg/mL), starting since one hour after incubation, which was maintained during the course of the experiment. The IMS C16MImCl sprayed onto the wheat spikes during flowering succesfully supressed symptoms and control of the disease in the spikes and kernels when applied preventatively (before fungal inoculation) at the highest dosage (2 g/L), not differing from tebuconazole. The data suggests the potential of using an IMS for controlling mycotoxigenic Fusarium and the resulting disease affecting wheat, especially when applied prior to fungal infection.

Micotoxinas são metabólitos secundários produzidos por fungos filamentosos que podem contaminar os grãos em diferentes períodos de pré e pós-colheita. O objetivo desse trabalho foi avaliar a contaminação fúngica e por micotoxinas em diferentes períodos do cultivo do amendoim no Rio Grande o Sul, considerando diferentes regiões e cultivares, durante as safras 2006/2007 e 2007/2008 e, ainda, desenvolver um método eficiente de quantificação de aflatoxina B1, baseado na cromatografia em camada delgada com detector de carga acoplada. Foram coletadas nas regiões de Augusto Pestana e Ivorá, amostras dos cultivares Tatu e Paraguaio, em diferentes períodos da cultura: (1) solo pré-plantio, (2) enchimento dos grãos, (3) colheita, (4) pós-secagem e (5) solo pós-colheita. Os fungos contaminantes do solo foram quantificados pela técnica de diluição seriada e nos grãos, o percentual de incidência foi determinado pela técnica de plaqueamento direto. O potencial toxigênico de Aspergillus seção Flavi e Aspergillus seção Nigri foi verificado em Agar Coco e Agar Extrato de Levedura Sacarose, respectivamente. Aflatoxina B1 e ocratoxina A foram determinadas por cromatografia em camada delgada com detector de carga acoplada. As espécies predominantes em todas as amostras foram Aspergillus flavus e Aspergillus niger var. niger. Entre as espécies de A. flavus e A. parasiticus, 89,3% e 39,2%, se mostraram produtoras de aflatoxina B1, respectivamente. Nenhum dos isolados de A. niger var. niger produziu ocratoxina nas condições testadas. Aflatoxina B1 foi detectada em 50% das amostras, com níveis entre 16 μg/Kg e 115 μg/Kg. Ocratoxina A foi detectada em 25% das amostras, com níveis entre 12,2 μg/Kg e 76,9 μg/Kg. Foi observada a ocorrência simultânea das duas micotoxinas em amostras do período pós-colheita. O método desenvolvido para quantificação de aflatoxina B1, baseado em procedimentos de fotometria fotográfica, se mostrou sensível, eficiente e prático, apresentando um limite de detecção de 0,4 ng por mancha, um limite de quantificação de 1,2 μg/kg e média de recuperação de 92%. / Mycotoxins are secondary metabolites produce by filamentous fungi that can contaminate grains in different stages of pre and postharvest management. The objective of this study was to investigate the occurrence of fungi and mycotoxins at different maturation stages of peanut produced in different regions of south of Brazil during 2006/2007 and 2007/2008 harvests. Moreover, to develop an efficient quantification method of aflatoxin B1, based on thin-layer chromatography and charged coupled device detector. Peanut samples, Tatu and Paraguaio varieties, were obtained in regions of Augusto Pestana and Ivorá, in different stages of cultura: (1) soil before planting, (2) pod filling, (3) at harvest, (4) after drying, (5) soil after harvest. The soil contamination was quantified by serial dilution technique and the fungi incidence on grains was determinate by direct planting technique. The toxigenic potential of Aspergillus section Flavi and Aspergillus section Nigri was verified in Coco Medium Ágar and Yeast Extract Sucrose agar medium, respectively. Aflatoxin B1 and ochratoxin A were determinate by on thin-layer chromatography and charged coupled device detector. The predominant species in all samples were Aspergillus flavus and Aspergillus niger var. niger. Among the species of A. flavus and A. parasiticus, 89,3% e 39,2%, produced aflatoxin B1, respectively. None of A. section Nigri isolates were ochratoxin A producers in the conditions tested. Aflatoxin B1 was detected in 50% of samples, with levels of 16.0 μg/Kg to 115.0 μg/Kg. Ochratoxin A was detected in 25% of samples, with levels of 12.2 μg/Kg to 76.9 μg/Kg. It was observed the co-occurrence of both mycotoxins in samples of postharvest. The method developed for aflatoxin B1 quantification was sensitive, efficient and practical, with a detection limit of 0.4 ng per spot, a limit of quantification of 1.2 μg/kg and average recovery of 92%.

Micotoxinas são metabólitos secundários produzidos por fungos filamentosos que podem contaminar os grãos em diferentes períodos de pré e pós-colheita. O objetivo desse trabalho foi avaliar a contaminação fúngica e por micotoxinas em diferentes períodos do cultivo do amendoim no Rio Grande o Sul, considerando diferentes regiões e cultivares, durante as safras 2006/2007 e 2007/2008 e, ainda, desenvolver um método eficiente de quantificação de aflatoxina B1, baseado na cromatografia em camada delgada com detector de carga acoplada. Foram coletadas nas regiões de Augusto Pestana e Ivorá, amostras dos cultivares Tatu e Paraguaio, em diferentes períodos da cultura: (1) solo pré-plantio, (2) enchimento dos grãos, (3) colheita, (4) pós-secagem e (5) solo pós-colheita. Os fungos contaminantes do solo foram quantificados pela técnica de diluição seriada e nos grãos, o percentual de incidência foi determinado pela técnica de plaqueamento direto. O potencial toxigênico de Aspergillus seção Flavi e Aspergillus seção Nigri foi verificado em Agar Coco e Agar Extrato de Levedura Sacarose, respectivamente. Aflatoxina B1 e ocratoxina A foram determinadas por cromatografia em camada delgada com detector de carga acoplada. As espécies predominantes em todas as amostras foram Aspergillus flavus e Aspergillus niger var. niger. Entre as espécies de A. flavus e A. parasiticus, 89,3% e 39,2%, se mostraram produtoras de aflatoxina B1, respectivamente. Nenhum dos isolados de A. niger var. niger produziu ocratoxina nas condições testadas. Aflatoxina B1 foi detectada em 50% das amostras, com níveis entre 16 μg/Kg e 115 μg/Kg. Ocratoxina A foi detectada em 25% das amostras, com níveis entre 12,2 μg/Kg e 76,9 μg/Kg. Foi observada a ocorrência simultânea das duas micotoxinas em amostras do período pós-colheita. O método desenvolvido para quantificação de aflatoxina B1, baseado em procedimentos de fotometria fotográfica, se mostrou sensível, eficiente e prático, apresentando um limite de detecção de 0,4 ng por mancha, um limite de quantificação de 1,2 μg/kg e média de recuperação de 92%. / Mycotoxins are secondary metabolites produce by filamentous fungi that can contaminate grains in different stages of pre and postharvest management. The objective of this study was to investigate the occurrence of fungi and mycotoxins at different maturation stages of peanut produced in different regions of south of Brazil during 2006/2007 and 2007/2008 harvests. Moreover, to develop an efficient quantification method of aflatoxin B1, based on thin-layer chromatography and charged coupled device detector. Peanut samples, Tatu and Paraguaio varieties, were obtained in regions of Augusto Pestana and Ivorá, in different stages of cultura: (1) soil before planting, (2) pod filling, (3) at harvest, (4) after drying, (5) soil after harvest. The soil contamination was quantified by serial dilution technique and the fungi incidence on grains was determinate by direct planting technique. The toxigenic potential of Aspergillus section Flavi and Aspergillus section Nigri was verified in Coco Medium Ágar and Yeast Extract Sucrose agar medium, respectively. Aflatoxin B1 and ochratoxin A were determinate by on thin-layer chromatography and charged coupled device detector. The predominant species in all samples were Aspergillus flavus and Aspergillus niger var. niger. Among the species of A. flavus and A. parasiticus, 89,3% e 39,2%, produced aflatoxin B1, respectively. None of A. section Nigri isolates were ochratoxin A producers in the conditions tested. Aflatoxin B1 was detected in 50% of samples, with levels of 16.0 μg/Kg to 115.0 μg/Kg. Ochratoxin A was detected in 25% of samples, with levels of 12.2 μg/Kg to 76.9 μg/Kg. It was observed the co-occurrence of both mycotoxins in samples of postharvest. The method developed for aflatoxin B1 quantification was sensitive, efficient and practical, with a detection limit of 0.4 ng per spot, a limit of quantification of 1.2 μg/kg and average recovery of 92%.

Orientador: Marcos Nogueira Eberlin / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-07T11:19:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marques_LygiadeAzevedo_M.pdf: 2432568 bytes, checksum: 7bf6003b0fa0df13e1ba0f91d7ebf00b (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Neste trabalho aplicamos técnicas avançadas de espectrometria de massas, (MALDI-TOF e ESI-MS) na análise de micotoxinas em alimentos e na tipificação e verificação de fraudes em perfumes. Aplicamos a técnica MALDI-TOF em análises de micotoxinas, e esta mostrou excelente desempenho nas análises de aflatoxinas e ocratoxina e vantagem sobre a técnica de escolha atual, o método ELISA. Esta vantagem é principalmente maior especificidade através de maior exatidão em medidas de massas e, portanto, maior confiabilidade. O Planejamento de experimento foi uma ferramenta valiosa para obtenção das melhores condições e estudo dos parâmetros de interferência. O limite de detecção encontrado para a técnica foi da ordem de 25 pg para aflatoxinas e de 1 ng para ocratoxina, com perspectiva de melhoria através de aumento da massa amostral em estudos futuros para adaptação da metodologia de extração na matriz de interesse à técnica MALDI-TOF. A técnica ESI-MS foi utilizada para a tipificação e detecção de perfumes proporcionando, através da análise de componentes principais (PCA), a diferenciação com segurança entre perfumes originais, falsos e inspirados, utilizando como indicadores componentes polares não majoritários característicos de cada categoria avaliada. Este estudo abre caminho para que esta técnica seja utilizada na avaliação de perfumes que estão sob suspeita de falsificação com auxilio de uma biblioteca de "fingerprint" de perfumes por ESI-MS. O emprego da técnica de MALDI-TOF também é uma opção vantajosa para o monitoramento da qualidade de grãos quanto a presença de toxinas indesejáveis, bem como ameaças de bioterrorismo. / Abstract: In this work we applied advanced mass spectrometry techniques (MALDI-TOF and ESI-MS) to micotoxin analysis in food and for the typification and detection of counterfeit perfumes. MALDI-TOF was applied to micotoxin analysis, which showed excellent performance for the analysis of aflatoxins and ochratoxin with advantage over the current technique of choice, the ELISA method. This advantage is mainly its greater specifity due the exactness of the measurements, therefore with higher reliability. The surface analysis was a valuable tool to attain the best conditions and study the interference of several parameters. The detection limit found for the technique was 25 pg for aflatoxins and 1 ng for ochratoxins, with perspective of improvement through increase of the sample mass in future studies for adaptation of the methodology of extration in the matrix of interest for the MALDI-TOF technique. The ESI-MS technique was used for typification and detection of counterfeit perfumes, providing, through principal component analysis (PCA), the characterization of original, counterfeit and inspired perfumes, using as minoritarian polar compounds as diagnostic ions of each perfume category evaluated. We envisage that the method can be used to establish a ESI-MS fingerprinting library of perfumes for comparison with those from samples under investigation, and that such a library could be updated constantly by the addition of ESI-MS of new perfumes even before they are commercially released. MALDI-TOF technique is also an advantageous option for the monitoring of crop quality relating to the presence of undesirable toxins, as well as bioterrorism threats by micotoxin poisoning. / Mestrado / Quimica Analitica / Mestre em Química

Este trabalho teve como objetivos principais: avaliar o comportamento alimentar em rações contendo zearalenona e aflatoxina; verificar a capacidade das aves em distinguir uma ração contendo micotoxina de uma ração isenta de contaminação; observar se as aves eram capazes de selecionar uma determinada ração. Foram utilizadas, 80 codornas japonesas (Coturnix coturnix japonica) em pico de postura, num delineamento experimental de quadrado latino (4x4). Os 4 tratamentos utilizados foram: controle (T1); controle + 0,1% adsorvente (T2); 2 mg/kg aflatoxinas + 4 mg/kg zearalenona (T3) e 2mg/kg aflatoxinas + 4 mg/kg zearalenona + 0,1% adsorvente (T4), em 4 posições pré-estabelecidas. Com a finalidade de observar o comportamento das aves os comedouros foram trocados de posição a cada 7 dias. Foi observada redução no consumo de ração (p<0,05) nos tratamentos que continham 2 mg/kg de aflatoxina e zearalenona com e sem adsorvente . As aves mostraram reconhecer a ração contaminada, tendo um maior consumo da ração livre de toxinas / The aim of this experiment was: analise alimentary behavior in diets with zearalenon and aflatoxin; observe poultry abilitys to discern from diets with or with out micotoxins; to understand if quail were able to select a diet. 80 quail layers (Coturnix coturnix japonica) were used in a latin square design (4x4). The treatments were: control (T1); control + 0.1% adsorvent (T2); 2 mg/kg aflatoxin + 4 mg/kg zearalenon (T3) e 2mg/kg aflatoxin + 4 mg/kg zearalenon + 0.1% adsorvent (T4), in 4 different places. To observe animal behavior diets were changed of position every 7 seven days. There were differences (p<0,05) among treatments, with lower intake for diets with 2 mg/kg aflatoxin and zearalenon with or with out adsorvent. This study indicates that layers could recognize the contamined treatments, animal intake for free contamination diets were highest

Orientador: José Luiz Pereira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-21T13:27:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lopes_AlinedeSouza_M.pdf: 1681631 bytes, checksum: f77820cebe02c8058ad8b01cc2f36a6e (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O gênero Aspergillus é um grupo de fungos que possui diversas espécies produtoras de micotoxinas, distribuídas principalmente em três seções denominadas de Nigri, Flavi e Circumdati. Estudos para isolamento destas espécies estão sendo executados para se conhecer a micobiota e atuar na prevenção e redução da contaminação dos alimentos, principalmente por micotoxinas, como também são úteis nas descobertas de novas espécies. A identificação de fungos, como o gênero Aspergillus sp foi, por muito tempo,realizada através de suas características morfológicas, sendo hoje amparadas por técnicas como a Biologia Molecular, fisiologia e detecção de metabólitos específicos produzidos pelos microrganismos. Com este objetivo, este trabalho apresenta o inicio do levantamento de dados relacionado à ocorrência, caracteres morfológicos, fisiológicos,bioquímicos e moleculares, assim como a distribuição geográfica. A partir do isolamento de 10.048 cepas potencialmente toxigênicos de amostras de café, cacau, castanha do Brasil e frutas secas (tâmaras, uvas passas, figos e ameixas), matérias-primas de projetos desenvolvidos no Laboratório de Microbiologia do Instituto de Tecnologia de Alimentos (ITAL), 5.069 destes isolados foram preservadas em sílica gel, exigindo a catalogação dos dados. Neste acervo, a section Flavi predominou com o número de 2.507 culturas (32% destas cepas foram produtoras de aflatoxinas), seguida da section Nigri com 2.078 e 463 da section Circumdati que, somando, contribuiram com 11% de fungos produtores de ocratoxina A. Os Aspergillus da section Nigri apareceram em número considerável em todos os substratos, confirmando a sua predominância destes como contaminantes de alimentos. As amostras de castanha do Brasil contribuíram com o maior número de isolados, principalmente pela biodiversidade da floresta e colheita extrativista. Fungos que apresentaram estruturas diferenciadas, representantes de grupos com mesmas características, toxicidade ou espécies novas foram encaminhados para outros tipos de identificação. Duzentos e setenta e seis culturas foram identificadas por análise molecular, 435 pela extração de seus metabólitos e 87 espécies foram classificadas através da identificação polifásica. A distribuição das culturas apresentou representantes do Norte, Nordeste, Sul e Sudeste do Brasil, sendo que o Pará e Amazonas contribuíram com 2.759, como também culturas originárias de amostras de outros países como Irã,Turquia, Tunísia, EUA, México, Espanha e Argentina. A rotina de uma coleção consiste em novos isolamentos, manutenção do acervo e atualização do banco de dados, um trabalho enriquecedor para a ciência e que nunca se encerra / Abstract: The genus Aspergillus is part of a fungi group with several species that produce mycotoxins, mainly distributed in three sections named Nigri, Flavi and Circumdati. Studies to isolate these microorganism types are being made to know the mycobiota and their function in prevention and reduction of food contamination, mainly by mycotoxins and also to discover new species. The Aspergillus fungi identification was for a long time made by morphological characteristics but now it is supported by techniques such as molecular biology, physiology and detection of microorganism metabolites. With the objective this work presents the beginning of data collection related to the occurrence, morphological, physiological, biochemical and molecular, as well as the geographic distribution. From the potentially toxigenic strains isolation of 10,048 samples of coffee, cocoa, Brazil nuts and dried fruit (dates, raisins, figs and prunes) raw materials for projects developed in the Laboratory of Microbiology, Institute of Food Technology (ITAL), 5069 of these isolates were preserved in silica gel, requiring cataloging data. In this collection section Flavi predominates with 2,507 cultures (32% of these strains are aflatoxin producers) followed by section Nigri with 2,078 and 463 of section Circumdati that together, contributes 11% of ochratoxin A fungi producing. The Aspergillus section Nigri showed a considerable number of all substrates, confirming its predominance and resistance as a food contaminant. Brazil nut samples contributed with the largest number of strains due to forest biodiversity and harvest extraction. Fungi that had differentiated structures, group representatives with similar characteristics, toxicity or new species were referred to other types of identification. Two hundred and seventy six isolates were identified by molecular analysis with 435 metabolites, 88 species of Aspergillus showed the two forms, being classified by polyphasic identification. The genus Aspergillus was identified widely from countries such as Iran, Turkey, Tunisia, USA, Mexico, Spain and Argentina. In Brazil there are representatives from the North, Northeast, South and Southeast, and Para and Amazonas states that contributed to 2,759 cultures. The collection routine consists of new insolation, collection maintenance and updating of the database, which is an undending task for the enrichment of science / Mestrado / Ciência de Alimentos / Mestra em Ciência de Alimentos

Orientador : Lucia Maria Valente Soares / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T02:12:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mariutti_LilianReginaBarros_M.pdf: 1680960 bytes, checksum: 54a05df2fbb3674f6e787d861ae60c73 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Um recente relato da presença de Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus em polpa de tomate industrializada brasileira motivou preocupações quanto a possível presença de micotoxinas em produtos de tomate nacionais. Aspergillus fIavus e Aspergillus parasiticus são conhecidos produtores de aflatoxinas, uma família de toxinas com propriedades hepatotóxicas, mutagênicas, teratogênicas e carcinogênicas. No presente trabalho foi adaptado e avaliado um método para determinação de aflatoxinas em produtos de tomate por cromatografia de camada delgada com detecção por comparação visual com padrões. Para verificar a possível contaminação de produtos de tomate comercializados com aflatoxinas foram analisadas 63 amostras de produtos de tomate (polpa, extrato, purê, catchup, tomate desidratado e tomate seco conservado em óleo) provenientes de 5 Estados e uma do exterior, compreendendo 29 marcas. A avaliação do método para determinação das aflatoxinas em produtos de tomate resultou em uma recuperação médía de 86%, para as quatro aflatoxinas, em dois níveis de adição. Os limites de detecção para as aflatoxinas B1, B2, G1 e G2 variaram entre 2 e 7 mg/Kg dependendo do tipo de produto. As aflatoxinas não foram detectadas em nenhuma das amostras analisadas / Abstract: A recent report on the presence of Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus in tomato pulp from a Brazilian plant caused concern about the possible presence of mycotoxins in tomato products from local plants. Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus are known producers of aflatoxins, a group of toxins with hepatotoxic, mutagenic, teratogenic, and carcinogenic properties. In the present work a thin layer chromatographic method with visual detection for the determination of aflatoxins in tomato products was adapted and evaluated. In order to verify a possible contamination of tomato products with aflatoxins, 63 samples of tomato products (pulp, paste, purée, catsup, dehydrated tomato and dried tomatoes in oil preserve) from 5 states and one from abroad, totaling 29 brands, were analyzed. The method evaluation showed an average recovery of 86%, for all four aflatoxins, at two levels of addition. The detection limits for the aflatoxins 81, 82, G1 e G2 ranged from 2 and 7 mg/Kg depending on the type of product. Aflatoxins were not detected in any of the samples analyzed. / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo Mención: Enología / La ocratoxina A es una toxina producida por hongos de los géneros Aspergillus y Penicillium. Estas micotoxinas presentan propiedades tóxicas que afectarían a los riñones, el hígado, sistema inmune y desarrollo embrionario. Estas toxinas poseen una alta capacidad para producir cáncer y son producidas por algunas contaminaciones fungosas en uvas destinadas a la producción de vino. Aunque, en algunos países importadores de vino se han definido normas de aceptabilidad del contenido de ocratoxina A para el vino, actualmente existe limitada información acerca de métodos apropiados para la identificación de ocratoxinas en vinos. El objetivo de este estudio fue desarrollar un método de cromatografía líquida de alto rendimiento para la identificación y cuantificación de ocratoxina A (OTA) y evaluar su aplicabilidad en vinos tintos. Para la implementación del método se elaboró una fase móvil y diversas curvas de calibración con estándares puros y con vino fortificado. Se evaluó la estabilidad, especificidad, recuperabilidad, variabilidad y reproducibilidad del método. Las curvas de calibración con el estándar puro y con vino fortificado presentaron un valor de R2 igual a 0,99, un límite de cuantificación de 0,088 ng/mL y un límite de detección de 0,043 ng/mL de OTA. Además se observó que no existe interferencia en el tiempo de retención de OTA al adicionar elementos propios del vino y un porcentaje de recuperabilidad de un 95% en sus resultados. A partir de lo se concluye que el método propuesto es reproducible, fácil de aplicar y confiable en la detección y cuantificación de OTA en vinos tintos. / Ochratoxin A is a toxin which is produced by fungi of the genera Aspergillus and Penicillium. The micro toxins have properties that affect kidneys, liver, immune system, embryonic development. These toxins have a high capacity to cause cancer. It has been observed that these toxins are synthesized in the presence of some fungal contamination of grapes for wine production. In some countries that are importers of wine they have defined standards that accept wine containing Ocratoxin. Currently there is limited information about new methods of identifying ochratoxin wine. The aim of this study was to develop a method of chromatography high performance liquid to identify and quantity of Ochratoxin A (OTA) and its appropriateness in red wines. To implement the new method of calculation a mobile phase was created with various standards of calibration curves, pure and fortified wine were used. Stability, specification, recovery, changes and production of the method were evaluated. The curves of alignment of the standard pure and fortified wine showed that they presented an R2 value equal to 0.99, a limit of quantification of 0.088 ng / mL and a detection limit of 0.043 ng / mL of OTA. It was also observed that there is no interference in the retention time of OTA by adding elements of the wine and a recoverability rate of 95% in its results. Since it is concluded that the proposed method is reproducible, easy to apply and reliable detection and quantification of OTA in red wines.

O objetivo deste trabalho foi estudar a transferência de aflatoxinas da ração para peixes lambari (Astyanax altiparanae), avaliando a influência dos níveis de toxina na ração sobre o desempenho dos peixes. As aflatoxinas foram incorporadas à ração extrusada para peixes tropicais, previamente testada para a presença de aflatoxinas, e as concentrações foram confirmadas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Os tratamentos foram constituídos por: Controle - ração sem toxina; A. Ração + 10 &micro;g AFB1/kg; B. Ração + 20 &micro;g AFB1/kg e C. Ração + 50 &micro;g AFB1/kg. Os juvenis de lambari foram alocados em aquários com densidade de 1 peixe por litro. O experimento foi realizado por 120 dias, com três repetições. A cada 30 dias foram realizados levantamentos biométricos e avaliação do desempenho (taxa de crescimento, sobrevivência, ganho de peso). A determinação de aflatoxinas nas amostras foi realizada por CLAE em músculo e fígado. Mensalmente, dez peixes por aquário foram utilizados para compor uma amostra, totalizando 48 amostras de músculo e 48 amostras de fígado analisadas ao final do experimento. As aflatoxinas na dieta prejudicaram o desempenho dos lambaris, observando-se menor peso e tamanho dos peixes nos tratamentos com aflatoxinas em relação ao controle. Houve também menor consumo de ração pelos peixes do tratamento C no período final do experimento. De modo geral, observou-se que, principalmente a partir dos 90 dias de experimento, houve acúmulo de aflatoxinas no fígado e no músculo dos animais. A concentração de aflatoxina B1 observada no músculo dos lambaris ao final do período de exposição foi semelhante aos níveis empregados na dieta. Os resultados mostraram que o lambari é uma espécie sensível, havendo efeito das aflatoxinas sobre o desempenho e acúmulo de aflatoxinas no músculo e fígado. Assim, quando da exposição diária e prolongada de lambaris às aflatoxinas, conclui-se que os limites atuais das legislações para aflatoxinas em ração animal não garantem segurança à produção e à saúde dos consumidores. / The aim of this study was to evaluate the transfer of aflatoxins from feed to lambari fish (Astyanax altiparanae), assessing the influence of toxin levels on fish performance. Aflatoxins were incorporated into extruded feed for tropical fish, previously tested for aflatoxins, and the concentrations were confirmed by high-performance liquid chromatography (HPLC). The treatments were: Control - feed without toxin; A. Feed + 10 &micro;g AFB1/kg; B. Feed + 20 &micro;g AFB1/kg and C. Feed + 50 &micro;g AFB1/kg. Juveniles of lambari fish were placed in aquariums with density of 1 fish per liter. The experiment was conducted for 120 days, with three replications. Every 30 days biometric surveys were performed, including weight and standard length. Feed intake, feed conversion, growth rate and survival were also evaluated. Determination of aflatoxins was carried out by HPLC in muscle and liver. Monthly, a pool of 10 fish were used to make a sample, adding up to 48 samples of muscle and 48 samples of liver analyzed at the end of the experiment. Aflatoxins in the diet impaired the lambari performance, with lower weight and size of fish from aflatoxins treatments compared to control. There was also lower feed intake by fish from treatment C in the final period of the experiment. In general, it was observed that, mainly from 90 days of experiment, there was accumulation of aflatoxins in the liver of lambari fish and consequently in the muscle. Aflatoxin B1 concentration observed in the muscle of lambari fish at the end of the exposure period was similar to the levels used in the diet. Results showed that lambari fish is sensitive specie, with effects of aflatoxins on performance and accumulation of aflatoxins in muscle and liver. Therefore, when daily and prolonged exposure of lambaris to aflatoxins, it is concluded that the current regulation limits for aflatoxins in animal feed do not guarantee safety production and consumer health.