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Eficácia de sais imidazólicos sobre espécies micotoxigênicas de Fusarium spp. que contaminam grãos de trigo / Eficacy of imidazolium salts against mycotoxigenic Fusarium spp. affecting wheath grains

Ribas, Aícha Daniela Ribas e January 2015 (has links)
Os membros do complexo de espécies Fusarium graminearum (CEFG) estão entre os mais importantes fungos micotoxigênico que infectam tecidos florais e interferem no desenvolvimento dos grãos de cereais resultando na redução da produtividade e qualidade dos grãos. Sais imidazólicos (SI) são compostos orgânicos constituídos por um grande cátion orgânico em conjunto com um ânion e alquilo substituintes. Os cátions e ânions constituintes modificam as propriedades químicas e físicas resultando no surgimento de características interessantes destes compostos, que incluem natureza anfifílica e baixa toxicidade para as células humanas. Recentemente, SI foram testados contra fungos e bactérias patogênicas para o homem com resultados promissores. O objetivo deste estudo foi investigar a atividade antifúngica de SI contra o CEFG que afetam grãos de trigo. A sensibilidade de F. graminearum, F. asiaticum e F. meridionale foi avaliada frente a três SI, que variaram quanto aos ânions substituintes (C16MImCl, C16MImMeS e C16MImNTf2), e um fungicida comercial (tebuconazol). A avaliação foi realizada com base na germinação dos esporos e na inibição efetiva de 50% do micélio. A concentração inibitória mínima (CIM) variou de 1,56 a 6,25 μg/mL, e o CIM mais frequente foi determinado em 3,12 μg/mL. Apenas um SI, cloreto de 1-n-hexadecil-3-metilimidazolio - C16MImCl, foi capaz de reduzir 50% do crescimento micelial in vitro (CE50) para todos os isolados, a uma concentração de 0,321 g/L. As curvas de tempo de morte indicaram que o SI C16MImCl apresenta efeito fungicida significativo na concentração de 12,48 μg/mL, com a ação iniciada desde a primeira hora de incubação, que foi mantida durante o desenvolvimento do ensaio. O SI C16MImCl foi pulverizado sobre as espigas de trigo durante a floração suprimindo com sucesso os sintomas e controlando F. graminearum nas espigas e grãos quando aplicado de forma preventiva (antes da inoculação fúngica) e na dose mais elevada (2 g/L), não diferindo do fungicida usual tebuconazol. Os dados sugerem o uso potencial do SI C16MImCl para o controle do fungo micotoxigênico F. graminearum em doenças que afetam o trigo especialmente quando aplicados antes da infecção fúngica. / Members of the Fusarium graminearum species complex (FGSC) are among the most important mycotoxigenic fungi that infect floral tissues and developing kernels of cereal crops, and lead to reduced grain yield and quality. Imidazolium salts (IMSs), are organic compounds composed entirely of a large organic cation together with an anion and alkyl substituents. The cation and/or anion constituents modifiy the chemical and physical properties which may result in the emergence of interesting properties of these compounds that include an amphiphilic nature, low toxicity to human cells . Recently, IMSs have been tested against fungi and bacteria that are pathogenic to humans with promising results. The aim of this study was to investigate the antifungal activity of imidazolium salts (IMS) against FGSC which affects wheat grains. The sensitivity of F. graminearum, F. asiaticum and F. meridionale isolates to three IMS, which vary in substituent anions (C16MImCl, C16MImMeS and C16MImNTf2), and one commercial fungicide (tebuconazole) was evaluated based on spore germination and mycelial growth inhibition. The minimum inhibitory concentration (MIC) ranged from 1.56 to 6.25 μg/mL, with 3.12 μg/mL as the most frequent MIC. Only one IMS, 1-n-Hexadecyl-3-methylimidazolium chloride (C16MImCl), was able to reduce 50% of the in vitro mycelial growth (EC50) for all isolates at a concentration of 0.321g/L. The time-kill curves indicated a significant fungicidal effect at the concentration of four times the MIC (12,48 μg/mL), starting since one hour after incubation, which was maintained during the course of the experiment. The IMS C16MImCl sprayed onto the wheat spikes during flowering succesfully supressed symptoms and control of the disease in the spikes and kernels when applied preventatively (before fungal inoculation) at the highest dosage (2 g/L), not differing from tebuconazole. The data suggests the potential of using an IMS for controlling mycotoxigenic Fusarium and the resulting disease affecting wheat, especially when applied prior to fungal infection.
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Determinación y cuantificación de aflatoxinas en vinos comerciales chilenos

Seguel Rubio, Eliana Inés January 2013 (has links)
Tesis para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo y al Grado de Magister en Enología y Vitivinicultura / Las aflatoxinas son metabolitos secundarios de origen fúngico que poseen una alta toxicidad. Estas micotoxinas se han asociado con la presencia de hepatocarcinomas en humanos y se han catalogado como agentes inmunosupresores, genotóxicos, teratogénicos y hepato-tóxicos. Es por ello, que diversos organismos internacionales han fijado límites regulatorios en determinados alimentos. Así, la OIV definió una concentración máxima de AFLAs en el vino de 4 µg/kg. A pesar de lo anterior, existe limitada información acerca de la presencia de estos compuestos en vinos y de una metodología precisa, confiable y fácil de reproducir para su identificación y cuantificación en la matriz vínica. El objetivo de este estudio fue optimizar un método para la determinación y cuantificación de AFLAs G1, B1, G2 y B2 mediante la utilización de la técnica de HPLC-FL mediante el uso de columnas de inmunoafinidad en vinos blancos y tintos. Se observó que la metodología propuesta fue lineal en el rango de concentraciones de 1,5 a 24 ng/mL en vinos blancos y tintos fortificados, obteniendo valores de coeficiente de determinación entre 0.990 y 0.999. Además, parámetros de validación como porcentaje de recuperación (entre 91,6 y 103,7%) y estabilidad (% CV ente 2,41 y 4,36%) cumplieron con los requerimientos internacionales y nacionales señalados por la FDA y el ISP respectivamente. Asimismo, los límites de detección (LD) y límites de cuantificación (LC) obtenidos, permiten detectar AFLAs por debajo del límite regulatorio establecido por la OIV. Finalmente, en las 48 muestras de vinos analizadas no se detectó ninguna de las AFLAs. / Aflatoxins are considered one of the most important toxins worldwide, due to its wellknown and documented toxicity. AFB1 is classified as a human carcinogen (liver), also they are catalogued as mutagenic, immunosuppressive, teratogenic and might cause liver diseases. Many international organizations have set legal limits to the acceptable levels of AFLAs in human food. The office of vine and wine (OIV) has set a maximum level of 4 µg/Kg in wine Despite what is been said, there is not enough information regarding the presence of AFLAs in wine, also there is not a method that is accurate and easily reproducible to its determination and quantification on the wine matrix. The main objective of this research was to improve a method capable of determination and quantification of AFLAs G1, B1, G2, and B2 in white and red wine. The proposed method is based on the use on immunoaffinity columns and HPLC with fluorescence detector. Determinations performed using this method produced a high correlation coefficients (all above 0.995), showing linearity on the range of 1,5 to 24 ng/mL on whites and red spiked wines. Parameters as recovery rate (91,6-103,7%) and stability (%CV 2,41-4,36%) were within the ranges allowed by the FDA and ISP. The Limit of detection (LOD) and the limit of quantification (LOQ) obtained were under the maximum level set it by the OIV. 48 wines samples were analyzed; none of the AFLAs was detected.
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Fungos e micotoxinas em grãos de cevada (Hordeum vulgare L.) cervejeira, descontaminação pelo gás ozônio e segurança de cervejas artesanais

Piacentini, Karim Cristina January 2015 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-02-09T03:11:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 337259.pdf: 1768430 bytes, checksum: 81f9c242c11db192a9c906e9b652dc02 (MD5) Previous issue date: 2015 / A cevada (Hordeum vulgare L sp. vulgare) é considerada um dos cereais mais importantes no contexto mundial. Atualmente, uma preocupação latente da indústria cervejeira é o crescimento de fungos filamentosos nos grãos, que acorre devido ao manejo inadequado da matéria prima durante o armazenamento (excesso de umidade), a condensação, o aquecimento, o vazamento de água da chuva e a infestação por insetos. Tendo isso em vista e considerando que a cevada é um dos cereais mais comercializados no mundo, o objetivo desse trabalho foi investigar a presença de fungos toxigênicos e micotoxinas nos grãos, avaliar a qualidade da cerveja artesanal produzida no Sul do Brasil, bem como determinar a eficiência do gás ozônio da destruição dos principais fungos encontrados na cevada. Adicionalmente, as características químicas e microestruturais de 5 cultivares de cevada cervejeira recomendados para cultivo no Brasil foram avaliados. As cervejas artesanais apresentaram contaminação por deoxynivalenol (DON) em aproximadamente 32% das amostras analisadas e contaminação por Fumonisina B1 em 15.08% das amostras. Os grãos de cevada cervejeira utilizados na pesquisa apresentar amimportantes espécies fúngicas (Fusarium, Alternaria, Rhysopus e Penicilllum),sendo Fusarium o gênero mais predominante. No que diz respeito a contaminação por DON, a variedade BRS Brau apresentou maior contaminação, representando 50% das amostras desse cultivar. As fumonisinas foram encontradas, contudo, em poucas amostras e baixos níveis. No estudo realizado com O3 como agente descontaminante, a espécie mais suscetível ao gás foi F. poae, seguida pelo F. gramineraum. É necessário mencionar que a germinação dos grãos após os tratamentos com o O3 não foi afetada. Finalmente, no estudo de análise química e microestrutural da cevada cervejeira, o cultivar BRS Brau apresentou características de melhor qualidade para a cevada em comparação com os outros, destacando, elevado teor de amido, com mais presença de grânulos tipo-A e baixas quantidades de proteína.<br> / Abstract : Barley (Hordeum vulgare L sp. vulgare) is considered one of the most important cereals in the global context. Currently, a latent concern of the brewing industry is the growth of filamentous fungi in grains, due to the improper manipulation of raw material during storage (excess of moisture), condensation, heating and infestation by insects. Regarding it and considering that barley is one of the most cereals comercialize din the world, the aim of this study was to investigate the presence of toxigenic fungi and mycotoxins in grains, evaluate the quality of craft beer produced in southern Brazil, and to determine the ozone gas efficiency of the destruction of some fungi found in barley. In addition, chemical and microstructural of 5 barley cultivars recommended for cultivation in Brazil were evaluated. The craft beers showed levels of deoxynivalenol (DON) in approximately 32% of the samples, and contamination with Fumonisin B1 in 15.8% of samples. The malting barley grains used in the research presented important fungal species (Fusarium, Alternaria, Rhysopus and Penicilllum) being Fusarium the most predominant genus. Concerning DON, the Brau variety showed more contamination, representing 50% of the samples. Fumonisins have been found, however, in a few samples and low levels. In the study of O3 as decontamination agent, the most susceptible species to the gas was F. poae, followed by F gramineraum. It is necessary to mention that the grain germination after treatment with O3 was not affected. Finally, chemical and microstructural analysis study of the brewing barley genotypes, BRS Brau showed better quality characteristics compared to the others, emphasizing high starch, with more presence of A-type starch granules, and low amounts of protein.
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Avaliação da microflora contaminante e micotoxinas em leite humano e alimentos infantis para lactentes e crianças de primeira infância por LC-MS/MS

Tonon, Karina Merini January 2013 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:22:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 318278.pdf: 2471080 bytes, checksum: 33068889907cf9fe010fbf4e3ef71b24 (MD5) Previous issue date: 2013 / Alguns fungos que contaminam alimentos possuem a capacidade de produzir substâncias tóxicas, conhecidas como micotoxinas. Determinados fungos, como os do gênero Fusarium, infectam alimentos durante o seu cultivo e outros são capazes de se desenvolver durante o seu armazenamento, como os fungos dos gêneros Aspergillus e Penicillium. Algumas micotoxinas são conhecidas por apresentarem propriedades carcinogênicas para humanos e animais, como as aflatoxinas e a ocratoxina A. Outras micotoxinas possuem propriedades teratogênicas, estrogênicas e imunossupressivas, como as fumonisinas, zearalenona e tricotecenos, respectivamente. Os seres humanos são expostos às micotoxinas principalmente através da ingestão de alimentos contaminados. Alguns dos alimentos mais propensos à contaminação por micotoxinas são cereais, oleaginosas, leite e seus derivados. Nas mulheres em fase de lactação, as micotoxinas presentes na sua dieta podem ser absorvidas e transferidas para o leite humano e em seguida ingeridas pelo bebê. O mesmo processo ocorre no gado leiteiro. Micotoxinas presentes na alimentação do gado podem ser transferidas para o leite bovino e, em seguida, aos seus produtos, como queijos e manteiga. Como a maioria das fórmulas infantis são produtos à base de leite de bovino, com exceção das fórmulas à base de proteína de soja, elas também podem conter micotoxinas. Bebês e crianças são considerados mais suscetíveis aos efeitos tóxicos das micotoxinas do que os adultos, devido ao seu menor peso corporal, maior taxa metabólica, baixa capacidade de desintoxicação e ao desenvolvimento incompleto de alguns órgãos e tecidos, tais como o sistema nervoso central. A presença universal de micotoxinas em alimentos e a elevada suscetibilidade infantil aos seus efeitos tóxicos gera uma grande preocupação sobre a exposição infantil às micotoxinas, e tem motivado a adoção de regulamentos restritivos sobre os limites tolerados destes compostos nos alimentos. O objetivo do trabalho foi investigar a ocorrência de fungos filamentosos e de aflatoxina M1 (AFM1), ocratoxina A (OTA) e deoxinivalenol (DON) em leite humano, fórmulas infantis e produtos à base de leite para a alimentação infantil. Para a análise de micotoxinas, um método por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas tandem (LC-MS/MS) foi validado para leite e fórmula infantil. Os resultados deste estudo indicam adequadas condições higiênico-sanitárias dos alimentos avaliados e que os lactentes da região estudada não estão expostos às micotoxinas através do aleitamento materno. A ausência de AFM1, OTA e DON no leitehumano como bioindicadores da exposição materna às micotoxinas através da dieta, sugere o consumo de alimentos de elevada qualidade, ausentes de contaminação por micotoxinas pelas lactantes participantes. Os baixos níveis de AFM1 nas fórmulas infantis e nos produtos à base de leite para a alimentação infantil avaliados indicam a excelente qualidade dos produtos fabricados no Brasil, embora em poucos casos, os níveis encontrados ultrapassem os limites estabelecidos pela legislação européia. Para garantir a qualidade e a segurança dos alimentos, a prevenção da contaminação de alimentos por fungos toxigênicos e a seleção de matéria-prima de qualidade são cruciais para a produção de alimentos seguros e para a redução da exposição humana às micotoxinas. <br> / Abstract : Some food spoilage fungi produce toxic substances known as mycotoxins. Certain fungi, such as the Fusarium genera, infect food during their growing and others are able to develop during storage, such as Aspergillus and Penicillium fungi. Some mycotoxins are known to have carcinogenic properties in animals, such as ochratoxin A and in humans, like aflatoxins. Other mycotoxins have teratogenic, immunosuppressive and estrogenic properties, as fumonisins, trichothecenes and zearalenone, respectively. Humans are exposed to mycotoxins primarily through ingestion of contaminated food. Some of the foods prone to contamination by mycotoxins are cereals, oilseeds, milk and dairy products. In lactating women, mycotoxins present in their diet can be absorbed and transferred to human milk and then ingested by the baby. The same process occurs in the dairy cattle. Mycotoxins present in cattle feed and silage may be transferred to cow's milk and then to their products, such as cheese and butter. Like most infant formulas are milk-based products, with the exception of formulas based on soy protein, they can also contain mycotoxins. Infants and children are considered more susceptible to the toxic effects of mycotoxins than adults, due to their lower body weight, higher metabolic rate, low capacity for detoxification and the incomplete development of some organs and tissues such as the central nervous system. The universal presence of mycotoxins in food and the high infant susceptibility to its toxic effects creates a great concern about children's exposure to mycotoxins and has motivated the adoption of restrictive regulations on the limits tolerated of these compounds in infant food. The aim of this study was to investigate the occurrence of filamentous fungi and aflatoxin M1 (AFM1), ochratoxin A (OTA) and deoxynivalenol (DON) in human milk, infant formula and milk-based products for infant feeding. For the analysis of mycotoxins, a method by liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) was validated for milk and infant formula. The results of this study indicate adequate sanitary conditions of the evaluated samples and that the infants of the studied region are not exposed to mycotoxins through breastfeeding. The absence of AFM1, OTA and DON in human milk as biomarkers of maternal exposure to mycotoxins through diet, suggests the intake of high quality food, absent from mycotoxin contamination by the lactating women who participated of the study. Low levels of AFM1 in the evaluated infant formulas and milk-based products for children indicates the excellent quality of the products manufactured in Brazil, although in a few cases, the levels found exceeded the limits set by European legislation. To ensure quality and food safety, the prevention of food contamination by toxigenic fungi and selection of high quality raw material are crucial for the production of safe food and to reduce human exposure to mycotoxins.
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Micotoxinas em silagens de milho do sul do Brasil e metodologia analítica para aflatoxinas por espectroscopia de infravermelho proximo em milho

Horn, Marcelina Bottoni January 2013 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:14:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 322207.pdf: 2398901 bytes, checksum: 76b16c653c0e59e7a5baeed716133b06 (MD5) Previous issue date: 2013 / Esse trabalho reporta o desenvolvimento de metodologia para análise rápida de aflatoxinas (AFLs) em milho (Zea mays L.) por espectrometria através de sua detecção em comprimento de onda na faixa do infravermelho próximo (S-NIR). Para tal, foram utilizadas 450 amostras de milho em grão (contendo uma faixa ampla de contaminação bem como amostras negativas como Controle) previamente analisadas por método imunoenzimático (ELISA). Através de leituras destas amostras no S-NIR, foi definida e quantificada a curva de calibração correspondente a faixa de AFLs (amostras contendo AFLs em diferentes concentrações) que representem contaminações em milho (= e > do limite máximo tolerável- MTL do Mercosul e Brasil: 20 e 50 µg/kg, respectivamente para alimentos para animais de produção). O Limite de quantificação (LOQ) do método referência utilizado para quantificar previamente a contaminação por AFLs foi de 5 µg/kg. A partir dos dados referência, foram obtidos espectros no S-NIR e desenvolvida curva de calibração através de modelos matemáticos aplicados para verificar a viabilidade da análise de AFLs por S-NIR. Dos 450 espectros coletados (?: 400 a 2500 nm), 24 espectros foram selecionados para o tratamento matemático e aplicada a equação de regressão mínimo quadrados parciais - PLS (partial least-square). A faixa de detecção estabelecida foi de 6,1 a 62,0 µg/kg. O valor de R² (coeficiente de determinação) para a curva de AFLs no milho foi de 0,9885, SECV (erro padrão de validação cruzada)de 7,4508 e SEC (erro padrão de calibração) de 2,0584. Novos espectros de amostras contaminadas 92 deverão ser coletadas com objetivo de tornar a curva mais robusta bem como estabelecer seus respectivos limite de detecção (LOD) e LOQ.<br> / Abstract : This work reports the development of a methodology for rapid analysis of aflatoxins (AFLs) in maize (Zea mays L.) spectrometry through its detection wavelength in the near-infrared (NIR-S). To this end, we used 450 samples of corn (containing a wide range of contamination as well as negative control samples) previously analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Through readings of these samples in the NIR-S, was defined and quantified the calibration curve corresponding to band AFLs (AFLs samples containing different concentrations) that represent contamination in maize (= and> the maximum limit tolerable-LMT Mercosul and Brazil: 20 and 50 µg/kg, respectively for animal feed production). The limit of quantitation (LOQ) of the reference method used to quantify previously contamination AFLs was 5 µg/kg. From the data reference spectra were obtained on S-NIR calibration curve developed using mathematical models applied to verify the feasibility of analysis of AFLs by S-NIR. Of the 450 collected spectra (?: 400 to 2500 nm), 24 spectra were selected for the mathematical treatment and applied the regression equation partial least squares - PLS (partial least-square). The detection range was set from 6.1 to 62.0 µg/kg. The value of R² (coefficient of determination) for the curve AFLs maize was 0.9885, SECV (standard error of cross validation) of 7.4508 and SEC (standard error of calibration) of 2. New spectra contaminated samples should be collected in order to make the curve more robust as well as establish their respective LOD and LOQ.
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Fungos e micotoxinas em grãos de milho (Zea mays L.) e seus derivados produzidos no estado de Rondônia, região norte do Brasil

Valmorbida, Roberta January 2016 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:45:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 341272.pdf: 1935135 bytes, checksum: 5c3d4ed1be1fc7c44016ba805d19d5c7 (MD5) Previous issue date: 2016 / Foram avaliadas a qualidade (danos / umidade) e a segurança (fungos / fumonisinas - FBs) de grãos de milho (Zea mays L.) de diferentes unidades armazenadoras de grãos (UAGs), localizado na principal região produtora de Rondônia (RO), região Norte do Brasil. Foram coletadas amostras de grãos de milho seco (total 76) armazenados em quatro UAGs (município de Vilhena) de julho a novembro de 2014 (n ± 4 / mês) e avaliadas por danos (grãos quebrados, bolorados, fermentados, presença de insetos e matéria estranha, de acordo com a instrução normativa do Ministério da agricultura), umidade (teor de umidade / atividade de água - aw), fungos (contagem total, gêneros e espécies) e FBs (FB1, FB2 - FBtotal - por cromatografia líquida de alta eficiência). As condições climáticas (dados de temperatura, umidade relativa - UR, precipitação) também foram obtidos a partir do plantio até períodos de armazenamento. Dos resultados encontrados, o maior dano dentre as amostras foi o de grãos fermentados, seguido por grãos quebrados. Grãos bolorados e gessados foram encontrados em quantidades mínimas. Em relação à umidade, o teor de umidade e aw variaram entre 10,03 -16,10% (média de 13,20) e 0,52-0,80 (média de 0,62), respectivamente. Como esperado, esporos de fungos estavam presentes em 94,8% das amostras, dentre as quais, cinco gêneros foram isolados e 16 espécies identificadas. O gênero Fusarium prevaleceu, seguido por Aspergillus e Penicillium, Cladosporium e Mucor. O máximo unidades formadoras de colônias (UFC) foi de 2,2 x 103 UFC/g, em milho armazenado por período superior a 4 meses no silo, sendo de rejeito, pela qualidade ruim, da safra 2014/1. Em relação a FBs, 52,63% das amostras (40) estavam acima do limite de quantificação (FBtotal 43,80 µg/kg) e abaixo dos limites máximos toleráveis (LMTs) do Brasil e Estados Unidos (5000/4000 µg/kg), sendo neste aspecto, seguro para o consumo. Apenas 9,20% (7) das amostras continham níveis acima do regulamento da União Européia (LMTs: 1000 µg/kg). Este é o primeiro estudo realizado quanto à presensa de FBs em grãos de milho seco da região Norte do Brasil, novos estudos são necessários para segurança do consumo humano e animal. No segundo estudo, objetivou-se averiguar a segurança de milho (pipoca) e derivados, também provenienetes do estado de RO. Neste, 40 amostras foram adquiridas randomicamente em supermercados, feiras públicas e agropecuárias de duas regiões do estado, sendo Porto Velho (capital e extremo norte do estado - região A) e Vilhena (extremo sul do estado - região B). Os produtos estudadosforam milho para pipoca, canjica (branca e amarela), canjiquinha, farinha de milho (flocada) e quirela (também conhecida como quirera). Os produtos selecionados com critério de produção local, safra 2014/1 (período da enchente) e 2014/2 (pós-enchente). Dentre as amostras supracitadas, os mesmos gêneros Fusarium, seguido por Aspergillus e Penicillium foram isolados com maior predominância, e em menor número, o gênero Trichoderma sp., dentre outros. Em relação a contagem total de colônias, o milho e derivados com finalidade para alimentação humana apresentaram índices inferiores ao LMTs brasileiro (<1x103 UFC/g), sendo mínimo <10 e máx. 8,1x102 UFC/g. O produto com maior contaminação fúngica, em espécies e número total de colônias (mín. 9,1x102 e máx. 1,6x103 UFC/g) foi a quirela destinada ao consumo animal. Com relação à contaminação por FBs, 40% das amostras (n=16) apresentaram valores inferioires ao limite de quantificação para FB1 e FB2 (12,5 e 31,3 µg/kg respectivamente). O milho de pipoca foi o produto que apresentou o menor índice de FBs detectável, com o teor de FB1 12,72 µg/kg (região A). Concluiu-se que todos os produtos apresentaram contaminação menores que os dados obtidos por outros autores, com valores muito inferiores ao permitido pela legislação brasileira, estando seguros (fungos e fumonisinas) para o consumo. Apesar da região norte apresentar condições favoráveis (clima) para o desenvolvimento fúngico, foi observado que o controle de umidade são respeitados durante a armazenagem, reduzindo assim a possibilidade de proliferação fúngica em quantidades prejudiciais à saúde humana e animal.<br> / Abstract : Quality were evaluated (damage / humidity) and security (fungus / fumonisin - FBs) of grains of maize (Zea mays L.) from different storage units of grains (SUGs), located in the main producing region of Rondonia (RO) North region of Brazil. Samples of dried maize grains were collected (total 76) stored in four UAGs (municipality of Vilhena) from July to November 2014 (n ± 4 / month) and evaluated for damage (broken grains, bolorados, fermented, presence of insects and foreign matter, according to the normative instruction of the Ministry of agriculture), humidity (moisture content / water activity - aw), fungi (total count, genera and species) and FBs (FB1, FB2 - FBtotal - by high performance liquid chromatography efficiency). Climatic conditions (temperature data, relative humidity - RH, precipitation) were also obtained from planting to storage periods. Of the results, the most damage among the samples was the fermented grains, followed by broken grains. bolorados and chalky grains were found in minute quantities. Relative humidity, moisture content and aw ranged from 10.03 -16.10% (average of 13.20) and 0.52 to 0.80 (mean 0.62), respectively.. As expected, fungal spores were present in 94.8% of samples, of which five were isolated genera and 16 species identified. The genus Fusarium prevailed, followed by Aspergillus, Penicillium, Cladosporium and Mucor. The maximum colony forming units (CFU) was 2.2x103 CFU/g, in maize stored for longer than four months in the silo, and tailing by the bad quality of the crop 2014/1. For FBs, 52.63% of the samples (40) were above the quantitation limit (FBtotal 43.80 µg/ kg) and below the maximum tolerable limits (MTLs) of Brazil and the United States (5000/4000 µg/kg ). Only 9.20% (7) contained levels above the European Union regulation (MTLs: 1000 µg/kg). This is the first study for the presence of FBs in dry corn grain of northern Brazil, further studies are necessary for the safety of human and animal consumption.For the second study aimed to investigate the corn security (popcorn) and derivatives also provenienetes RO state. In this, 40 samples were purchased randomly in supermarkets, public agricultural fairs and in two regions of the state, and Porto Velho (capital and the far north of the state - A region) and Vilhena (extreme south of the state - B region). The products studied were popcorn, flaking grits (white and yellow), broken maize grains (regular grits), corn flour (flocked) and fine grits. Products selected criteria of local production, 2014/1 season (the periodof the flooding) and 2014/2 (post-flood). Among the above samples, the same Fusarium, followed by Aspergillus and Penicillium were isolated with a predominance, and outnumbered, the genus Trichoderma sp., among others. Compared to the total colony count, maize and derivatives with purpose for human consumption had lower rates to the Brazilian LMTs (<1x103 CFU/g), with minimum <10 and max. 8,1x102 CFU/g. The product with the highest fungal contamination, species and total number of colonies (min. and max 9,1x102 - 1,6x103 CFU/g) was quirela intended for animal consumption. With regard to contamination by FBS 40% of samples (n = 16) showed values inferioires the limit of quantification for FB1 and FB2 (12.5 and 31.3 µg/ kg respectively). The popcorn was the product that showed the lowest FBs index detectable with the FB1 content of 12.72 µg/kg (the region A). It was concluded that all products had lower contamination that the data obtained by other authors, with much lower values than permitted by Brazilian law, being safe (fungi and fumonisin) for consumption. Despite the northern present favorable conditions (climate) for fungal growth was observed that the moisture control are respected during storage, thereby reducing the possibility of fungal proliferation in harmful quantities to human and animal health.
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Caracterização dos farelos de arroz parbolizado e polido estabilizados termicamente

Silva, Marco Antonio da January 2001 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. / Made available in DSpace on 2012-10-18T09:09:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / : O Farelo de arroz é um subproduto da indústria do arroz, representando de 5 a 8 % do grão. É rico em proteínas, lipídios, fibras alimentares e compostos com atividade antioxidante, como tocoferóis, tocotrienóis e orizanóis. O farelo de arroz é fonte natural de lipídios, podendo conter mais de 25 % de óleo, principalmente ácidos graxos insaturados. No entanto, mesmo sendo fonte de ácidos graxos essenciais, o alto teor lipídico do farelo restringe seu uso, pois sofre rápida rancificação, necessitando ser estabilizado imediatamente após sua obtenção. No Brasil, o farelo de arroz é consumido sem qualquer controle físico-químico, microbiológico ou estudos toxicológico que atestem seu uso como alimento, na forma de multimistura, principalmente por crianças de famílias de baixa renda. Objetivos: 1) avaliar a composição centesimal do farelo de arroz da cultivar EPAGRI 108, submetidos a seis tratamentos: farelo de arroz polido não estabilizado (FAPL), farelo de arroz polido tostado (FAPLTO), farelo de arroz polido estabilizado com soro de queijo (FAPLESQ), farelo de arroz parbolizado não estabilizado (FAPR), farelo de arroz parbolizado tostado (FAPRTO) e farelo de arroz parbolizado estabilizado com soro de queijo (FAPRESQ); 2) avaliar a estabilidade dos farelos, quanto a rancificação, durante 4 meses de armazenamento e, 3) analisar a presença de micotoxinas nos FAPL e FAPR. Métodos: 1) Avaliação centesimal e cálcio - AOAC (1998), 2) Acidez-áquo- e álcool-solúvel - AOAC (1998) e, 3) Método de multi-toxinas (Soares e Rodrigues-Amaya, 1989) e citrinina (IAL, 1985). Resultados: 1) (%) Proteínas: FAPL (11,49±0,32), FAPLTO (13,09±0,05), FAPLESQ (12,51±0,15), FAPR (12,51±0,08), FAPRTO (13,26±0,07), FAPRESQ (13,04±0,06); Lipídios FAPL (17,42±0,22), FAPLTO (21,38±0,23), FAPLESQ (15,52±0,26), FAPR (24,36±0,18), FAPRTO (27,13±0,35), FAPRESQ (22,38±0,77); Carboidratos FAPL (53,53±0,40), FAPLTO (52,66±0,20), FAPLESQ (57,36±0,36), FAPR (46,51±0,31), FAPRTO (46,66±0,49), FAPRESQ (51,36±0,39); Cinzas FAPL (7,77±0,07), FAPLTO (8,88±0,08), FAPLESQ (8,15±0,03), FAPR (8,45±0,76), FAPRTO (9,56±0,05), FAPRESQ (8,14±0,02); Cálcio (mg/100g) FAPL (67,0±2,28), FAPLESQ (174,5±3,68), FAPR (123,5±4,74), FAPRESQ (223,0±4,83). 2) Acidez álcool-solúvel (% inicial\final) FAPL (15,43±0,58\61,82±1,23), FAPLTO (13,86±0,70\39,43±0,91), FAPLESQ (7,67±0,15\22,55±0,34), FAPR (1,41±0,05\7,37±0,14), FAPRTO (3,23±0,03\7,32±0,45), FAPRESQ (4,12±0,12\16,02±0,10); Acidez áquo-solúvel (% inicial\final) FAPL (2,91±0,57\7,32±0,82), FAPLTO (1,35±0,79\2,99±0,51), FAPLESQ (4,99±0,36\9,15±0,76), FAPR (1,17±0,13\1,94±0,25), FAPRTO (1.64±0,28\2,78±0,28), FAPRESQ (3,99±0,69\8,04±0,28). 3) FAPL - todas as amostras contaminadas com ocratoxina A e 12% por citrinina. Não foi observado contaminação no FAPR. Conclusão: Quanto a análise centesimal, o processo de tostagem é o mais eficiente, apresentando maiores teores de proteínas, lipídios e cinzas. O processo de adição de soro de queijo eleva o teor de cálcio nos farelos. O FAPR apresenta maior concentração de cálcio que o FAPL. Quanto a estabilização lipídica, o FAPR obteve o melhor resultado, sugerindo que a parbolização confere maior estabilidade aos farelos. As análises de micotoxinas alertam para um grave problema - o consumo de farelo de arroz polido, isoladamente ou na forma de multimistura. O processo de parbolização parece exercer um efeito inibidor sobre a contaminação das micotoxionas estudadas.
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Desempenho, qualidade de ovos e características histopatológicas de codornas japonesas em postura alimentadas com rações contendo micotoxinas e adsorvente

Abreu, Antonio Paulo Nunes de [UNESP] 02 1900 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-02Bitstream added on 2014-06-13T19:43:54Z : No. of bitstreams: 1 abreu_apn_dr_botfmvz.pdf: 284995 bytes, checksum: f70cdff20644b4b8758f65b8d18ea6f4 (MD5) / O trabalho foi desenvolvido nas instalações do Setor de Avicultura da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da USP, campus de Pirassununga – SP, com o objetivo de avaliar os efeitos das micotoxinas sobre os parâmetros de desempenho (consumo de ração, porcentagem de postura, peso dos ovos, massa dos ovos, CA/massa, CA/dúzia e variação de peso) e o efeito protetor do adsorvente, em codornas japonesas em postura recebendo rações contaminadas com micotoxinas e suplementadas com adsorvente. Para isso foram utilizadas 576 codornas japonesas (Coturnix coturnix japonica), com 15 semanas de idade e distribuídas em 36 gaiolas de área útil 1,00 m x 0,34 m x 0,19 m, com quatro compartimentos cada. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com o esquema fatorial 3x2x2, com três níveis de inclusão de aflatoxinas (0, 1000 e 2000 mg/kg), dois níveis de inclusão de zearalenona (0 e 2000 mg/kg) e dois níveis de inclusão de adsorvente (0 e 0,1%), com três repetições de 16 aves em cada parcela. Os parâmetros foram avaliados no período de 28 e 56 dias, utilizando-se o SASÒ (SAS Institute, 2000) e, foi utilizado o teste de Tukey pela ANOVA para comparação entre... / The work was developed in the poultry farming department of Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da USP, campus de Pirassununga – SP, with the objective of evaluating the effects of the mycotoxins on the performance parameter (feed consumption, laying percentage, egg weight, egg mass, feed gain/egg mass, feed gain/egg dozen and weight variation) and the protective effect of the adsorbent, in Japanese quails in laying receiving feed contaminated with mycotoxins and supplemented with adsorbent. For this work 576 Japanese quails were used (Coturnix coturnix japonica), with 15 weeks of age and distributed in 36 cages of an area of 1.00 m x 0.34 m x 0.19 m, with four compartment each. The experimental model used was entirely randomized with fatorial 3x2x2, with three levels of aflatoxin inclusion (0, 1000 and 2000 mg/kg), two levels of zearalenone inclusion (0 and 2000 mg/kg) and two levels of adsorbent inclusion (0 and 0.1%), with three replicates of 16 birds in each cage. The parameters were evaluated on period of 28 and 56 days, through the SASÒ (SAS Institute, 2000) and, the test of Tukey was used with ANOVA for... (Complete abstract click electronic address below)
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Estudo da mobilidade de micotoxinas em solo sob condições de clima tropical / Mycotoxins mobility in soil in tropical climate conditions

Zamariola, Nathalie [UNESP] 13 May 2016 (has links)
Submitted by Nathalie Zamariola null (nathalie_zamariola@yahoo.com.br) on 2016-05-24T01:26:25Z No. of bitstreams: 1 Tese Nathalie Zamariola - FINAL.pdf: 2147804 bytes, checksum: e0b65fe2cdeedac5633f85d848ac8fc5 (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-05-30T13:07:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 zamariola_n_dr_araiq_par.pdf: 1042313 bytes, checksum: 41b584017680f06055695467d01eb30a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-30T13:07:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 zamariola_n_dr_araiq_par.pdf: 1042313 bytes, checksum: 41b584017680f06055695467d01eb30a (MD5) Previous issue date: 2016-05-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As micotoxinas são metabólitos secundários, produzidos naturalmente por uma variedade de fungos, que se desenvolvem em plantações ou nos cereais. Além de serem responsáveis por enormes prejuízos econômicos, as micotoxinas apresentam elevado risco à saúde humana e animal. Dentre as centenas de micotoxinas existentes destacam-se a AFB1 (carcinogênica) e a ZEA (estrogênica). Devido à preocupação com a saúde humana, no que diz respeito à contaminação dos alimentos, existem inúmeros países e comunidades econômicas que possuem legislações cada vez mais rígidas quanto aos níveis máximos permitidos e ao número de micotoxinas avaliadas, o que justifica os inúmeros trabalhos envolvendo o desenvolvimento de métodos analíticos para quantificação dessas substâncias em amostras alimentícias. Por outro lado, pouco tem sido feito para determinar o destino e a distribuição dessas substâncias no ambiente. Nesse sentido, o presente estudo tem como objetivos desenvolver um método para determinação das micotoxinas (AFB1 e ZEA) em solo, e avaliar a mobilidade das micotoxinas, por meio de testes de degradação e sorção/dessorção em solos de três cidades brasileiras. Para tanto, desenvolveu-se um método de determinação de AFB1 e ZEA em solo, utilizando um método de extração QuEChERS modificado, e analisado por CLAE-FLU utilizando etanol como fase móvel. O método apresentou seletividade adequada, recuperações entre 74 e 120%, precisão (CV máximo de 8%) e limite de quantificação de 45 ng g-1. O efeito matriz e a linearidade foram estudados utilizando abordagem estatística criteriosa. Para os estudos de degradação o modelo não linear de Gustafson-Holden apresentou as melhores correlações com os dados experimentais, com tempo de meia vida (DT50) de 5 a 10 dias para a AFB1 e de 1 a 3 dias para ZEA. Dos estudos que definiram a cinética de sorção, notou-se uma fase inicial, de rápida sorção (até 12 horas), seguida de uma etapa mais lenta. Das Isotermas avaliadas, a de Freundlich apresentou os melhores coeficientes de correlação. Pode-se observar que, para as duas micotoxinas, em mistura ou individual, os menores valores foram encontrados para o solo de Araraquara, o que é justificado pelos menores valores de argila e matéria orgânica, mostrando que as principais interações solo/micotoxina são as hidrofóbicas. Também foi observado e efeito sinérgico de sorção das micotoxinas em mistura, indicando que na presença de outra micotoxina, a sorção é favorecida. Os estudos de dessorção apontaram para um processo irreversível. Quanto à avaliação da mobilidade das micotoxinas, alguns modelos demonstraram o risco de dispersão da AFB1 e ZEA para o ambiente. / Mycotoxins are naturally occurring secondary metabolites of fungi that grow on agricultural products in the field and during storage. In addition to being responsible for huge economic losses, mycotoxins present a high risk to human and animal health. Among hundreds existing mycotoxins stand out the aflatoxin B1 (carcinogenic) and zearalenone (estrogenic). Due to concern for human health, in relation to contamination of food, there are many countries and economic community with increasingly stricter legislation as regards maximum levels and the number of evaluated mycotoxins, which explains the numerous studies involving the development of analytical methods for the quantification of these substances in food samples. On the other hand, little has been done to determine the fate and distribution of these substances in the environment. In this sense, this project aims to develop a method for determination of mycotoxins (AFB1 and ZEA) in soil, and evaluate the mycotoxins mobility through degradation and sorption/desorption tests in three Brazilian soils. Thus, we developed a method for determination AFB1 and ZEA in soil, using a QuEChERS modified method followed by HPLC-FLD with ethanol as mobile phase. The method validation process showed that were achieved a method with adequate selectivity, recovery (74-120%, for different concentrations of AFB1 and ZEA), precision (RSD below 8%) and the quantification limit (LQ) was 45 ng g-1 . The matrix effect and linearity was studied based in statistical approach. To degradation study, nonlinear Gustafson-Holden model showed the best correlation with experimental data, with half-life (DT50) 5 to 10 days for AFB1 and 1 to 3 days to ZEA. In the studies that defined the kinetics sorption, was noted, an initial phase of rapid sorption (up to 12 hours), followed by a slower phase. The Freundlich isotherms showed the best correlation coefficients. It was noted for both mycotoxins, mixed or individually, the lowest values were found in the Araraquara soil, which is justified by the lower clay and organic matter amounts, proving that the main interactions soil/mycotoxin are hydrophobic. It was also observed synergic effect sorption of mixed mycotoxins, indicating that in the presence of other mycotoxin, sorption is favored. Desorption studies indicated an irreversible process. With respect to the evaluation of the mycotoxins mobility, some models have demonstrated the risk of AFB1 and ZEA environment dispersion.
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Avaliação da interação entre aflatoxina M1 e B1 com a fração proteica do leite

Castagnaro, Denise 26 June 2015 (has links)
Dissertação composta por 02 artigos. / CNPq; Capes / O leite é uma das principais fontes de nutrientes da dieta humana e é um alimento que acompanha o ser humano durante toda a vida, tanto como leite de consumo como através de seus derivados. Entretanto, são inúmeras as formas e os tipos de contaminação que acometem o leite, destacando-se, dentre os contaminantes de ordem química, as aflatoxinas. Dentre os métodos de análise de aflatoxinas em leite e derivados, destaca-se a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), principalmente devido a sua versatilidade, rapidez e acuracidade das medidas quantitativas. Entretanto, trata-se de um sistema complexo em que as propriedades dos constituintes da fase móvel são afetadas por mudanças nas condições de processo nas quais são realizados os experimentos. Normalmente as condições de análise por CLAE são determinadas empiricamente, pelo método “tentativa e erro” em que inúmeras tentativas são realizadas sem um estudo mais detalhado do sistema. Diante disso, a primeira etapa deste estudo objetivou a otimização de multirrespostas em CLAE, por meio da seleção das condições ótimas como a composição da fase móvel, sua vazão no sistema cromatográfico e a temperatura da coluna, a fim de identificar, separar e quantificar simultaneamente a aflatoxina M1 (AFM1) e a aflatoxina B1 (AFB1). Para tanto, realizou-se planejamento experimental de misturas para três componentes com restrições combinado com um planejamento fatorial 22 para as variáveis de processo (temperatura da coluna e vazão). Após a definição dos modelos para as variáveis dependentes, foi realizada busca das condições ótimas usando o método simplex sequencial e as funções de desejabilidade de Derringer e Suich. As variáveis avaliadas foram: composição da fase móvel (acetonitrila, metanol e solução aquosa de ácido acético 1%), vazão da fase móvel e temperatura da coluna. Os parâmetros cromatográficos obtidos como respostas foram: tempo e fator de retenção para ambas as aflatoxinas, fator de separação, resolução da coluna e altura dos picos. Após a validação do planejamento, foi realizada a validação analítica do método otimizado através das figuras analíticas de mérito: linearidade, precisão, exatidão e limites de detecção e quantificação. O planejamento realizado foi capaz de produzir modelos confiáveis que possibilitaram a estimativa das melhores condições atendendo aos múltiplos objetivos. Na validação analítica do método cromatográfico, os parâmetros analíticos avaliados ficaram dentro dos intervalos de confiança, podendo o método ser considerado exato e preciso, apresentando limites de quantificação de 0,3 e 0,5 μg L-1 para AFM1 e AFB1, respectivamente e linearidade com R2 > 0,99 para ambas as aflatoxinas. A segunda etapa do estudo objetivou a avaliação da interação entre as AFM1 e AFB1 com proteínas lácteas, tendo em vista que estudos demonstram que aquelas, especialmente a AFM1, localizam-se predominantemente nas frações proteicas. Entretanto, esses estudos não avaliaram a interação entre aflatoxinas e as proteínas do leite, mas apenas baseiam-se na sua quantificação nas frações proteicas do leite. Portanto, buscou-se por meio deste estudo avaliar a possível interação entre as AFM1 e AFB1 com as frações proteicas do leite. Análises por Espectroscopia na região de infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) foram realizadas para avaliação de possíveis modificações na estrutura secundária das proteínas lácteas quando fortificadas com as aflatoxinas e Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC). Para tanto, preliminarmente foram avaliados os espectros obtidos com padrões de caseína e β-lactoglobulina em solução tampão fosfato-salino (PBS) e em solução modelo, assim como no leite propriamente dito, integral e desnatado. Na segunda etapa, regiões espectrais específicas foram avaliadas por meio de técnicas de deconvolução e curve-fitting. Os resultados indicam que a solução PBS foi mais adequada para o estudo da interação entre as AFB1 e AFM1 e proteínas lácteas avaliadas, β-lactoglobulina e caseína. Foram observadas alterações nas estruturas secundárias e essas sugerem que, embora possivelmente ocorram interações de caráter hidrofílico entre β-lactoglobulina e as aflatoxinas (especialmente com AFM1), ocorram também interações de caráter hidrofóbico (especialmente de AFB1) com os pacotes hidrofóbicos da β-lactoglobulina. Já com a caseína, as alterações promovidas nas estruturas secundárias proteicas foram mais discretas, porém deslocamentos de picos foram observados indicando alterações estruturais da proteína, especialmente na presença de AFB1, o que sugere que ocorram interações químicas entre os componentes avaliados. As alterações espectrais, mais evidentes com a fração β-lactoglobulina, do que com a fração caseína sugerem que, embora a quantificação de aflatoxinas seja comumente superior na fração caseína, não se pode afirmar que por esse motivo ocorram interações mais tangíveis entre aflatoxinas e caseína do que entre aflatoxinas e β-lactoglobulina. Possivelmente a quantificação em maior percentual de aflatoxinas na fração caseína é atribuída ao fato dessa proteína encontrar-se, no leite, em percentual superior às proteínas do soro. Outra hipótese levantada pelo estudo é a possibilidade das aflatoxinas avaliadas encontrarem-se “mascaradas” por estarem conjugadas com a β-lactoglobulina e não sendo, portanto, detectadas pelos métodos analíticos convencionais ocasionando sua subestimação nessa fração. / Milk is one of the main sources of nutrients in the human diet and is a food that accompanies the human being throughout life, both as drinking milk as through its derivatives. However, there are countless forms and types of contamination that affect milk, especially among the contaminants of chemical order, aflatoxins. Among the methods of analysis of aflatoxins in milk and dairy products, the High Performance Liquid Chromatography (HPLC) stands out mainly due to its versatility, speed and accuracy of quantitative measurements. However, it is a complex system in which the properties of the constituents of the mobile phase are affected by changes in process conditions under which the experiments are performed. Typically the HPLC analysis conditions are determined empirically, using the "trial and error" in which numerous attempts are made without a more detailed study of the system. Therefore, the first step of this aimed to optimize multiresponses in HPLC, by selecting the optimal conditions as the mobile phase composition, its flow into the chromatographic system and the column temperature in order to identify, separate and quantify aflatoxin M1 (AFM1) and aflatoxin B1 (AFB1) simultaneously. Therefore, it was carried out experimental a mixture design for three components with restrictions combined with a 22 factorial design to the process variables (flow and column temperature). After defining the models for the dependent variables, a search of the optimum conditions was made using the sequential simplex method and the Derringer and Suich desirability functions. The variables evaluated were: mobile phase composition (acetonitrile, methanol and aqueous solution of acetic acid 1%), the mobile phase flow rate and column temperature. The chromatographic parameters obtained as responses were time and factor of retention for both aflatoxins, separation factor, column resolution and height of the peaks. After the design validation, analytical validation was performed through the analytical figures of merit: linearity, precision, accuracy and limits of detection and quantification. The experimental design carried out was able to produce reliable models that allowed better conditions estimation regarding multiple objectives. In the analytical validation of the chromatographic method, the analytical parameters evaluated were within the confidence interval, the method can be considered accurate and precise showing quantitation limits of 0.3 and 0.5 μg L-1 for AFB1 and AFM1, respectively, and linearity with R2> 0.99 for both aflatoxins. The second stage of the study aimed to evaluate the interaction between the AFB1 and AFM1 with dairy proteins, considering that studies show that those, especially AFM1, are located predominantly in the protein fractions. However, these studies did not evaluate the possibility of interaction between aflatoxins and dairy proteins, but only based on its quantification in the dairy protein fractions. Therefore, we sought through this study to evaluate a possible interaction between AFM1 and AFB1 with dairy protein fractions. Analyzes were performed by Fourier transformation infrared spectroscopy (FTIR) to assess possible changes in the secondary structure of dairy proteins when spiked with aflatoxins and Differential Scanning Calorimetry (DSC). For this purpose, preliminarily the spectra obtained were evaluated with standard casein and β-lactoglobulin in phosphate buffer saline solution (PBS) and a bovine milk model solution as well as in actual milk, whole and skim. In the second step, specific spectra bands were assessed through deconvolution and curve-fitting techniques. The results show that PBS was more suitable for the interaction study between aflatoxins B1 and M1 and the dairy proteins evaluated, β-lactoglobulin and casein. Changes in secondary structures suggest that although possibly occurring interactions with hydrophilic characters between β-lactoglobulin and aflatoxins were observed (especially with AFM1) also occur interactions with hydrophobic character (especially AFB1) with the hydrophobic β-lactoglobulin packages. Already with the casein, the changes introduced in protein secondary structure were more discreet but peak shifts were observed indicating structural changes of the protein, especially in the presence of AFB1, which suggests that chemical interactions occur between the components evaluated. The spectral changes, more evident with the β-lactoglobulin fraction than the casein fraction, suggests that although the quantification of aflatoxins is commonly higher in the casein fraction, it’s not possible to ensure that for this reason occur more tangible interactions between aflatoxins and casein than between aflatoxins and whey proteins (β-lactoglobulin). The greater quantify percentage of aflatoxins in the casein fraction, apparently, is attributed to the fact that this protein is found, in milk, in superior percentage to the whey proteins. Another hypothesis is the possibility of the aflatoxins evaluated are "masked" by being combined with β-lactoglobulin and not, therefore, being detected by conventional analytical methods leading to their underestimation in this fraction. / 5000

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