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Obtenção de proteases a partir do trato digestivo de peixes neotropicais para aplicação na produção de peptídeos de colágeno

OLIVEIRA, Vagne de Melo 12 February 2015 (has links)
Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-01-22T18:23:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE VAGNE OLIVEIRA.pdf: 2880111 bytes, checksum: b546a5ff08a76d89b069ecf859947ecb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-22T18:23:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE VAGNE OLIVEIRA.pdf: 2880111 bytes, checksum: b546a5ff08a76d89b069ecf859947ecb (MD5) Previous issue date: 2015-02-12 / CNPq / Este trabalho objetivou obter proteases com propriedades colagenolíticas a partir dos resíduos de três espécies de peixes neotropicais (arabaiana Seriola dumerili; pescada-branca Cynoscion leiarchus; e tucunaré Cichla ocellaris), através de extração por sistema de duas fases aquosas (SDFA), visando aplicá-lo para produção de peptídeos de colágeno. Inicialmente, serino proteases foram extraídas e caracterizadas físico-quimicamente quanto à temperatura e pH ótimos, bem como estabilidade à variação desses parâmetros e verificação de seus parâmetros cinéticos (Km e Vmáx). A sensibilidade aos íons metálicos e aos inibidores naturais e sintéticos também foi avaliada. Em seguida, a atividade colagenolítica dos extratos foi mensurada, obtendo-se 106,82 U/mg (C. ocellaris), 42,44 U/mg (S. dumerili) e 98,08 U/mg (C. leiarchus). Nos testes com inibidores de serino (PMSF) e metaloproteases (EDTA) obteve-se 18,53 e 23,29 U/mg, 14,09 e 14,94 U/mg e de 37,45 e 15,55 U/mg, como atividades enzimáticas de C. ocellaris, S. dumerili e C. leiarchus, respectivamente. Proteases com propriedades colagenolíticas de C. leiarchus e de C. ocellaris obtiveram pH ótimo de 8,0 e 7,5, mantendo-se estável entre 6,5 e 11,5; temperatura ótima de 55°C, termoestável entre 25 e 60°C, respectivamente. Os íons Ca2+ e Mg2+ funcionaram como ativadores, enquanto Zn2+ e Pb2+ atuaram como inibidores, assim como a ação da Benzamidina e TLCK, inibidores específicos de tripsina. No teste de especificidade ao colágeno, a enzima de C. leiarchus, após 48 horas, clivou todos os tipos de colágeno testados, sendo eficaz na seguinte ordem: colágeno da pele de P. corruscans > colágeno da pele de O. niloticus > colágeno bovino tipo I; enquanto que, para a enzima de C. ocellaris, após 36 horas, colágeno tipo I > colágeno de pele de P. corruscans > colágeno de pele de O. niloticus. As características físico-químicas da colagenases de C. ocellaris mostraram-se mais interessantes para prosseguimento das análises. Dessa forma, foram obtidos o Km e o Vmáx como 5,92 mM e 294,40 U/mg, respectivamente. Esta enzima mostrou especificidade aos colágenos testados, durante o intervalo de 1 h a 55°C, na seguinte condição: colágeno tipo I > colágeno de pele de O. niloticus > colágeno de pele de P. corruscans. A colagenase intestinal de C. ocellaris foi recuperada por meio do sistema de duas fases aquosas (SDFA) para obtenção da enzima purificada, obtendo-se coeficiente de partição de 8.24, usando 20,0% (w/w) de PEG 8000 e 12,5% (w/w) de sal de fosfato a pH 8,0. A enzima PEG-colagenolítica ainda foi capaz de clivar o colágeno do tipo I e do colágeno extraído da pele de C. ocellaris (rendimento 2.9% de peso seco). A técnica de SDFA permitiu a remoção de contaminantes por um processo rápido, simples e econômico e funcionou como etapa principal de purificação capaz satisfazer a necessidade de isolamento para a produção de peptídeos de colágeno, como descritos no presente trabalho. A simplicidade e alto rendimento, somando investimentos mais baixos, tornam o SDFA uma opção promissora de extração de colagenases a partir de resíduos do processamento do pescado para a produção de peptídeos de colágeno, visando aplicação na indústria alimentícia, farmacêutica e de cosméticos. / This study aimed to obtain proteases with collagenolytic properties from the waste of three species of Neotropical fish (greater amberjack Seriola dumerili; hake Cynoscion leiarchus, and peacock bass Cichla ocellaris), through extraction by aqueous two-phase system (ATPS), to apply it in the production of collagen peptides. Initially, serine proteases were extracted and physicochemically characterized for optimum temperature and pH, as well as stability to the variation of these parameters and verification of its kinetic parameters (Km and Vmax). The sensitivity to the metal ions and natural and synthetic inhibitors was also assessed. Then, the collagenolytic activity of the extracts was measured, yielding 106.82 U/mg (C. ocellaris), 42.44 U/mg (S. dumerili) and 98.08 U/mg (C. leiarchus). Tests with inhibitors of serine (PMSF) and metalloproteinases (EDTA) yielded 18.53 and 23.29 U/mg, 14.09 and 14.94 U/mg and 37.45 and 15.55 U/mg such as enzymatic activities of C. ocellaris, S dumerili and C. leiarchus, respectively. Collagenolytic proteases with collagenolytic properties from C. leiarchus and C. ocellaris obtained optimum pH of 8.0 to 7.5, and is stable between 6.5 and 11.5; optimum temperature 55°C, thermostable between 25 and 60°C, respectively. Ca2+ and Mg2+ functioned as activators and Zn2+, and Pb2+ acted as inhibitors, as well as the action of Benzamidine and TLCK, specific inhibitors of trypsin. In the collagen specificity test enzyme of C. leiarchus, after 48 hours, cleaved all collagen types tested being effective in the following order: P. corruscans skin collagen > O. niloticus collagen skin > bovine collagen type I; while for the enzyme from C. ocellaris, after 36 hours, type I collagen > P. corruscans skin collagen > O. niloticus skin collagen. The physicochemical characteristics of the collagenase of C. ocellaris were more interesting for further analysis. Thus, there was obtained a Michaelis-Menten constant (Km) and Vmax, 5.92 mM and 294.40 U/mg, respectively. The enzyme was specific to the tested collagens, during the interval of 1 h at 55°C in the following condition: type I collagen > O. niloticus skin collagen > P. corruscans skin collagen. The intestinal collagenase C. ocellaris was recovered by means of aqueous two-phase system (ATPS) to obtain the enzyme purified to give 8.24 partition coefficient, using 20.0% (w/w) PEG 8000 and 12.5% (w/w) of pH 8.0 phosphate salt. PEG-collagenolytic enzyme was still able to cleave collagen type I and collagen extracted from skin of C. ocellaris (yield 2.9% dry weight). The ATPS allowed the removal of contaminants by a fast, simple and cost effective technique and worked as main stage of purification, meeting the need for isolation, as in the production of collagen peptides, as described in this work. The simplicity and high performance, adding lower investments, make the ATPS a promising option collagenase extraction from waste from the fish processing for the production of collagen peptides, aiming at application in the food industry, pharmaceutical and cosmetics.
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Antibioticoterapia no trauma abdominal penetrante com lesão gastrintestinal : estudo comparativo entre dois esquemas terapeuticos

Souza, Hamilton Petry de 27 July 2018 (has links)
Orientador: Mario Mantovani / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T16:41:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_HamiltonPetryde_D.pdf: 14694836 bytes, checksum: 48ab9902634990cf7720c8df1df96cc0 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A antibioticoterapia em cirurgia é uma questão polêmica e controversa. No trauma, face aos freqüentes riscos de complicações infecciosas, essa discussão tem ocorrido de forma intensa ao longo dos últimos anos. A literatura tem publicado vários trabalhos demonstrando que é possível o tratamento da maioria dos traumatismos abdominais penetrantes, com um único antibiótico, abrangente em seu espectro, por curto período, com resultados equivalentes ou superiores a esquemas tradicionais com associação de drogas e por longo período. O presente estudo comparou dois esquemas terapêuticos no trauma abdominal penetrante com lesão gastrintestinal com vistas a complicações infecciosas, em nível de sítio cirúrgico e não-cirúrgico. Para taL utilizou-se, comparativamente, apenas, Cefoxitina sódica (C), com uso restrito ao perioperatório e a associação de Gentamicina e Metronidazol (GM), por 5 dias. Foram analisados, de forma prospectiva, aleatória e randomizada, 80 doentes durante 12 meses. Essa população foi dividida em 2 amostras de 40 doentes, estratificados através do ATI (Abdominal Trauma Index), e relacionada com variáveis como mecanismo de trauma, intervalo entre trauma e tratamento, choque à admissão, tempo de cirurgia, volume transfundido, lesão de cólon e escores de trauma como o RTS (Revised Trauma Score), ISS (Injury Severity Score) e o TRISS (Probabilidade de sobrevida). Os resultados demonstraram que ocorreram 21 complicações infecciosas (26,3%) na população estudada. Houve equilíbrio entre as infecções de sítio cirúrgico, isto é, infecção de ferida operatória (FO) e abscesso abdominal num total de 11 casos (52,3%). Quanto às infecções de sítio não-cirúrgico, a saber, infecção respiratória (BCP), infecção do trato urinário (ITU) e acesso venoso (AV) houve incidência total de 10 casos (47,7%), predominando a infecção respiratória com 8 casos. O ATI demonstrou ser um adequado elemento para estratificação dos grupos, além de confirmar sua condição de previsor sensível para complicações infecciosas, em especial neste estudo, restrito a trauma penetrante de abdome. Os doentes com ATI menor que 15 apresentaram 9,5% de complicações infecciosas, comparativamente a 81,8% com ATI maior que 25. Não foi encontrada significância estatística entre as médias das diversas variáveis analisadas, em ambos os grupos, demonstrando que esses grupos foram semelhantes e, portanto, comparáveis. Não ocorreu diferença estatisticamente significativa, igualmente, na incidência de complicações infecciosas nos dois grupos. O presente estudo permitiu concluir que foi válido o esquema com Cefoxitina sódica, apenas, restrito ao perioperatório, comparativamente ao esquema com GM, por cinco dias, no trauma abdominal penetrante com lesão gastrintestinal. / Abstract: Antibiotic therapy in trauma surgery is a controversial issue. Many studies assert that it is possible to treat these patients with a single drug of wide spectrum for a short course, producing the same results of traditional drug combinations for long period at lower costs. This study compared the efficiency of two kinds of antibiotic therapy in penetrating aMorninal trauma with hollow viscous injuries, regarding the incidence of surgical infection in each group. The drugs used were sodium cefoxitine during the perioperative period only and a Gentamicine -Metronidazol combination for 5 days. Eighty patients were followed, prospectively and randomly, during 12 months. The patients were divided into two groups, with the AMorninal Trauma Index (ATI) as the main element of comparison and evaluated for variables such as trauma mechanism, interval time between trauma and treatment, shock at admission, surgical time, transfused blood volume, colonic lesions and trauma scores like RTS, ISS and TRISS. Septic complications occurred in 21 (26,3%) of the patients. There was an equal incidence of septic complications in surgical site, i.e. infection of surgical wound and abscesses (11-52,3%) and elsewhere, i.e., respiratory infections, urinary infections and in sites of venous access (10-47,7%). In the latter group there was a predominance of respiratory infection. There were no differences between the two groups; incidence of septic complications were similar in both of them. ATI was very useful to characterize the groups and confirmed its condition as a reliable parameter for septic complications. The conclusion was that sodium cefoxitine is a valid option compared with Gentamicine-Metromdazol specifically in penetrating abdominal trauma with hollow viscous injury. / Doutorado / Cirurgia / Doutor em Cirurgia
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Produção, caracterização e imobilização de lipase de fungo filamentoso isolado do efluente de abatedouro de frangos

Pacheco, Sabrina Moro Villela January 2012 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química / Made available in DSpace on 2013-03-04T19:16:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 303477.pdf: 2662013 bytes, checksum: 4f7212291f40e5de14de7d1b5109106c (MD5) / Este trabalho ilustra três linhas de pesquisa que se interconectam para atingir um objetivo final, o de verificar a potencialidade de produção de biodiesel a partir de um material de partida ainda pouco estudado: o óleo de vísceras de frango e uma lipase obtida de uma cepa selvagem. Para isso, foram isoladas dezenove cepas fúngicas de um efluente bruto de um abatedouro de frangos, sendo que, destas, apenas três apresentaram atividade lipolítica. Através do cultivo das cepas em quatro formulações de meios de cultivo submersos, foi observado que o isolado 17 apresentou o maior valor de atividade enzimática, de 20,71 U/mL em meio de cultivo constituído por 50 mL efluente bruto de abatedouro de frangos, 0,5% (m/v) de peptona, pH inicial de 5,5, 0,25% (m/v) de óleo de oliva, 1% (m/v) de óleo de vísceras, 1% (m/v) de tween 80, 2% (m/v) de extrato de levedura, 1% (m/v) de NH4Cl, 0,1% (m/v) de NaNO3, 0,1% (m/v) de KH2PO4 e 0,01% (m/v) de MgSO4. Por esse motivo, esse isolado foi selecionado para os experimentos seguintes de otimização da produção de lipase, que consistiram de um planejamento Plackett-Burman seguido por um planejamento composto central rotacional. Os resultados mostraram que, através do uso de um meio constituído por 50 mL efluente bruto de abatedouro de frangos, 0,5% (m/v) de peptona, pH inicial de 5,5, 0,25% (m/v) de óleo de oliva, 3,41% (m/v) de óleo de vísceras, 2% (m/v) de tween 80, 2% (m/v) de extrato de levedura, 1% (m/v) de NH4Cl, 0,1% (m/v) de NaNO3, 0,1% (m/v) de KH2PO4 e 0,05% (m/v) de MgSO4, foi possível obter um máximo de rendimento de atividade enzimática de 43,51 U/mL. O extrato bruto foi concentrado utilizando-se sulfato de amônio a 40%. O concentrado enzimático foi imobilizado em esferas de quitosana/argila ativadas com glutaraldeído 3% (v/v). O rendimento de imobilização atingido foi de 80%. A análise do comportamento de atividade enzimática do extrato bruto e da enzima imobilizada foi realizado frente a diferentes temperaturas, pH(s), solventes, íons metálicos e tempo de estocagem. Para esses ensaios observou-se que a enzima imobilizada adquiriu maior estabilidade, porém a mesma não foi estável após cinco ciclos de reuso para a reação de hidrólise. Ensaios para obtenção de ésteres etílicos foram realizados com quatro sistemas diferentes envolvendo óleo de soja refinado, óleo de vísceras, extrato bruto enzimática e uma lipase comercial (Novozym 435). Os resultados revelaram que os ensaios utilizando óleo de soja com a lipase comercial e com a lipase do extrato bruto acarretaram nos maiores valores de conversão em ésteres, de 90,32 e 54,58%. Já os ensaios utilizando o óleo de vísceras com Novozym 435 e extrato bruto acarretaram em 35,17% e 28,11%. Apesar do fato do uso dos últimos sistemas apresentarem baixas taxas de conversão em ésteres, é importante ressaltar que os estudos realizados não são suficientes para descartar a possibilidade do uso deste tipo óleo para a produção de biodiesel.
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Desempenho, qualidade de ovos e características histopatológicas de codornas japonesas em postura alimentadas com rações contendo micotoxinas e adsorvente

Abreu, Antonio Paulo Nunes de [UNESP] 02 1900 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-02Bitstream added on 2014-06-13T19:43:54Z : No. of bitstreams: 1 abreu_apn_dr_botfmvz.pdf: 284995 bytes, checksum: f70cdff20644b4b8758f65b8d18ea6f4 (MD5) / O trabalho foi desenvolvido nas instalações do Setor de Avicultura da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da USP, campus de Pirassununga – SP, com o objetivo de avaliar os efeitos das micotoxinas sobre os parâmetros de desempenho (consumo de ração, porcentagem de postura, peso dos ovos, massa dos ovos, CA/massa, CA/dúzia e variação de peso) e o efeito protetor do adsorvente, em codornas japonesas em postura recebendo rações contaminadas com micotoxinas e suplementadas com adsorvente. Para isso foram utilizadas 576 codornas japonesas (Coturnix coturnix japonica), com 15 semanas de idade e distribuídas em 36 gaiolas de área útil 1,00 m x 0,34 m x 0,19 m, com quatro compartimentos cada. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com o esquema fatorial 3x2x2, com três níveis de inclusão de aflatoxinas (0, 1000 e 2000 mg/kg), dois níveis de inclusão de zearalenona (0 e 2000 mg/kg) e dois níveis de inclusão de adsorvente (0 e 0,1%), com três repetições de 16 aves em cada parcela. Os parâmetros foram avaliados no período de 28 e 56 dias, utilizando-se o SASÒ (SAS Institute, 2000) e, foi utilizado o teste de Tukey pela ANOVA para comparação entre... / The work was developed in the poultry farming department of Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da USP, campus de Pirassununga – SP, with the objective of evaluating the effects of the mycotoxins on the performance parameter (feed consumption, laying percentage, egg weight, egg mass, feed gain/egg mass, feed gain/egg dozen and weight variation) and the protective effect of the adsorbent, in Japanese quails in laying receiving feed contaminated with mycotoxins and supplemented with adsorbent. For this work 576 Japanese quails were used (Coturnix coturnix japonica), with 15 weeks of age and distributed in 36 cages of an area of 1.00 m x 0.34 m x 0.19 m, with four compartment each. The experimental model used was entirely randomized with fatorial 3x2x2, with three levels of aflatoxin inclusion (0, 1000 and 2000 mg/kg), two levels of zearalenone inclusion (0 and 2000 mg/kg) and two levels of adsorbent inclusion (0 and 0.1%), with three replicates of 16 birds in each cage. The parameters were evaluated on period of 28 and 56 days, through the SASÒ (SAS Institute, 2000) and, the test of Tukey was used with ANOVA for... (Complete abstract click electronic address below)
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Avaliação da qualidade da farinha de vísceras de aves de diferentes indústrias e épocas do ano

Fernandes, Vitor Augusto Giatti January 2011 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T07:03:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 289747.pdf: 374564 bytes, checksum: 7c0905df4f7e4704aa00261c9c1bf3e4 (MD5) / O objetivo deste estudo foi caracterizar a farinha de vísceras de aves, focando no seu uso na aquicultura. Para tal, foram escolhidas quatro empresas com produção significativa: dois frigoríficos, que processam imediatamente as vísceras após o abate das aves e dois produtores independentes, que transportam as vísceras para suas plantas processadoras em temperatura ambiente, o que pode levar muitas horas. Foram realizadas quatro coletas em cada empresa, uma em cada estação do ano (outono, inverno, primavera e verão, com exceção de um frigorífico em que não houve coleta no outono), com o objetivo de verificar a variação sazonal e entre tipos de indústria na composição proximal (proteína bruta, extrato etéreo, matéria seca, cinzas, fósforo) e nos índices qualitativos (índice de peróxidos, índice de acidez, aminoácidos e aminas biogênicas, granulometria, presença de antibióticos e Salmonella). Farinhas de vísceras de aves produzidas por frigoríficos apresentaram maior teor de proteína bruta quando comparadas àquelas fabricadas por produtores independentes (68,33% e 64,14%, respectivamente) e menor teor de cinzas (13,59% e 19,14%). Também houve diferenças no perfil de aminoácidos, aminas biogênicas e granulometria. Farinhas de vísceras de aves de todos os fornecedores apresentaram maiores índices de acidez e índice de peróxidos nos períodos mais quentes: verão e primavera. O teor de algumas aminas biogênicas e aminoácidos foram afetados sazonalmente. A farinha de vísceras de aves produzida por frigoríficos possui melhor qualidade nutricional, sendo menos susceptível à deterioração da matéria prima ao longo do ano.
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Emprego da Técnica de pcr em tempo real na detecção de DNA de Brucella spp em lesões de carcaças e vísceras provenientes de matadouros- frigoríficos sob inspeção federal. / Real-Time PCR detection of Brucella spp in lesions of carcasses and visceras from slaughterhouses under Federal Inspection

SOLA, Marilia Cristina 28 February 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Marilia Cristina Sola.pdf: 489950 bytes, checksum: 4d267a18376c43b47c56d28c43d655a5 (MD5) Previous issue date: 2011-02-28 / Brucellosis is a chronic infectious disease caused by bacterium of the genus Brucella, which affects humans and different species of animals. Despite the implementation of programs aimed at the disease controlling and eradicating, brucelosis is endemic in many countries, especially in developing ones, resulting in significant economic losses and serious implications for animal and public health, due to its zoonotic character. The disease can be transmitted by direct or indirect contact with infected animals, fetal membranes, and also transmitted to humans by contaminated animal products, especially milk and dairy products that have not undergone thermal processing, by raw meat and the handling of carcasses and visceras at the slaughterhouse. The National Programme for Control and Eradication of Brucellosis (PNCEBT), established in the country in 2001, determines the diagnosis of animals in order to establish both the distribution and characterization of the agent. In this context and seeking for a rapid, safe and precise diagnosis of this disease in cattle, we aimed to detect Brucella spp by real time PCR in suspect lesions detected during routine inspection in slaughterhouses under Federal Inspection in the state of Goias, Brazil. Such lesions were related to cervical bursitis, testicular, lung and liver lesions and also in mandibular, retropharyngeal, esophageal, intercostal, apical, mediastinal, tracheobronchial, inguinal, ischiatic, popliteal and mesenteric lymphnodes. In the sampling procedure, cellulose cards were used for storage of biological material (card FTA ® Elute) by impregnating the material in the fibrous matrix of the card. Laboratory analyses were performed on 47 samples from animal tissue and fluids, collected from carcasses and visceras at 40 bovines suspected of brucellosis. Samples were processed at the Laboratório de Biologia Molecular from the Centro de Pesquisa em Alimentos, Escola de Veterinária e Zootecnia from Universidade Federal de Goiás (LBM / CPA / EVZ / UFG). Brucella spp was detected in 42.5% of the bovines with suspect lesions and in 38.3% of samples. It was verified that the use of real-time PCR associated with the FTA® Elute method is an important diagnostic tool in the process of trial and disposition of carcasses and visceras of slaughtered animals and it gives flexibility and efficiency for the diagnosis of diseases, helping the Federal Inspection Service in fulfilling its mission of providing safe food to consumers / A brucelose é uma enfermidade infectocontagiosa de caráter crônico, causada por bactérias do gênero Brucella, que acomete o homem e diferentes espécies animais. Apesar da implementação de programas que visam o controle e a erradicação da enfermidade, apresenta-se endêmica em muitos países, principalmente aqueles em desenvolvimento, resultando em prejuízos econômicos significativos aos sistemas de produção e sérias implicações em saúde animal e pública, visto seu caráter zoonótico. A doença pode ser transmitida pelo contato direto ou indireto com animais infectados e anexos fetais e, ainda, veiculada ao homem pela ingestão de produtos de origem animal contaminados, principalmente leite e seus derivados que não passaram por processamento térmico. Pode ser veiculada também por meio de carnes cruas e pela própria manipulação de carcaças e vísceras durante o abate sanitário. O Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) instituído no país em 2001 determina como uma das medidas sanitárias, o diagnóstico dos animais, a fim de estabelecer a ocorrência, distribuição e caracterização do agente. Neste contexto, visando um diagnóstico rápido, seguro e preciso desta enfermidade em bovinos, objetivou-se detectar o DNA de Brucella spp por meio da técnica de PCR em Tempo Real em lesões sugestivas identificadas durante a inspeção sanitária de rotina em matadouros-frigoríficos sob Inspeção Federal no estado de Goiás. Tais lesões abrangeram a bursite cervical, lesões testiculares, pulmonares, hepáticas e de linfonodos mandibular, retrofaríngeo, esofageano, intercostal, apical, mediastínico, traqueobrônquico, inguinal, isquiático, poplíteo e mesentérico. Para tanto, no procedimento de colheita de amostras, foram utilizados cartões de celulose destinados ao armazenamento de material biológico (cartão FTA® Elute), por impregnação do material na matriz fibrosa do cartão. As análises laboratoriais foram efetuadas em 47 amostras provenientes de fluidos e tecido animal, colhidas em carcaças e vísceras de 40 bovinos com suspeita de brucelose e desenvolvidas no Laboratório de Biologia Molecular do Centro de Pesquisa em Alimentos da Escola de Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal de Goiás (LBM/CPA/EVZ/UFG). Detectou-se o DNA de Brucella spp em 42,5% dos bovinos que apresentaram lesões sugestivas e em 38,3% das amostras totais. Verificou-se que o emprego da técnica de PCR em Tempo Real associada ao método FTA® Elute, é uma ferramenta de diagnóstico importante no processo de julgamento e destino de carcaças e vísceras dos animais de abate, tendo em vista que confere agilidade e eficiência no diagnóstico das enfermidades, auxiliando o Serviço de Inspeção Federal no cumprimento de sua missão, ou seja, de colocar à disposição do consumidor, alimentos seguros.

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