Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-06-12T14:14:59Z No. of bitstreams: 1 Cecilia Maria de Souza Leao e Silva.pdf: 1493945 bytes, checksum: 8bcc1ab9e28f749b73d9d7ff2cbaa285 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-12T14:16:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cecilia Maria de Souza Leao e Silva.pdf: 1493945 bytes, checksum: 8bcc1ab9e28f749b73d9d7ff2cbaa285 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Glanders is a highly contagious disease caused by Burkholderia mallei solipeds, a Gram - negative bacterium, not motility and aerobic coccobacillus, primarily infecting horses, donkeys and mules, though humans are considered accidental hosts . The Burkholderia mallei is listed in the list of the World Organisation for Animal Health (OIE) as an important public health disease, and due to its high potential for infection is referred to as a bioterrorism agent. According to the OIE comprises the serological diagnosis, allergy testing and bacterial isolation, and complement fixation, the official test to be performed for trade of animals. This method of diagnosis is recommended in Brazil by Instruction Nº 22, 16 of march of 2018, Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply by its high sensitivity and specificity. According to the OIE comprises the serological diagnosis, allergy testing and bacterial isolation, and complement fixation, the official test to be performed for trade of animals and bacterial isolation is considered gold test for identification of the agent. From the bacterial isolation the presence of Burkholderia was identified in 11 samples from epidemiological surveillance in the disease outbreaks. Sequencing demonstrated the circulation of the strains Burkholderia pseudomallei and Burkholderia mallei in Brazilian territory where Mormo is present. The results show the differentiation of the circulating strains in the national territory and provides the knowledge of their epidemiology and virulence, later assisting in formulations of disease control and eradication measures / O Mormo constitui-se em uma doença altamente contagiosa dos solípedes causada pela Burkholderia mallei, uma bactéria Gram-negativa, não móvel e cocobacilo aeróbio, infectando primariamente equínos, asininos e muares, entretanto humanos são considerados hospedeiros acidentais. Burkholderia mallei está relacionada na lista de doenças da Organização Mundial para a Saúde Animal (OIE) como doença de importância de saúde pública, e devido ao seu alto potencial de infecção é referenciada como agente de bioterrorismo. De acordo com a OIE o diagnóstico compreende o teste sorológico, alérgico, isolamento bacteriano e testes de biologia molecular, sendo a fixação do complemento, o teste oficial a ser realizado para trânsito de animais. O Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, através da Portaria Nº 22, de 16 de março de 2018 do Ministério, utiliza o teste da Fixação do Complemento e Elisa para triagem dos animais, sendo aqueles reagentes, testados posteriormente com o Western Blotting para confirmação. Neste trabalho, temos como objetivo identificar filogeneticamente as cepas circulantes em território nacional para os animais suspeitos de Mormo. A partir do isolamento bacteriano foram identificados 08 resultados compatíveis com a Burkholderia em amostras oriundas de vigilância epidemiológica em áreas focos da doença. O sequenciamento demonstrou a circulação das cepas Burkholderia pseudomallei e Burkholdeia mallei, em território brasileiro onde há presença do Mormo. Os resultados mostram a diferenciação das estirpes circulantes em território nacional e proporciona o conhecimento de sua epidemiologia e virulência, auxiliando posteriormente em formulações de medidas para controle e erradicação da enfermidade.

O Brasil possui o maior rebanho de equinos da América Latina e o terceiro do mundo, gerando um mercado de grande importância econômica para a sociedade brasileira. Esta complexa cadeia de negócios sofre também a influência de variáveis que orbitam as diversas relações estabelecidas. Entre elas, destacam-se as variáveis de ordem macroeconômica (influenciando o mercado e as relações de troca), ambientais e legais, derivadas da ação de órgãos reguladores (MAPA, ANVISA, entre outros). Recentemente, o estado brasileiro se viu refém de uma crise sanitária da zoonose do Mormo em equinos, que afetou diretamente o complexo do agronegócio do cavalo, incluindo dificuldades no âmbito internacional, como a realização das Olimpíadas do Rio 2016. Desta maneira, busca-se contribuir na análise dos pontos críticos ocasionados por esta ameaça de ordem legal/sanitária junto à cadeia de negócios, buscando respostas para melhoria da gestão estratégica entre os atores envolvidos, com base na proposta de gerenciamento de processos de negócios. A abordagem metodológica utilizada nesta pesquisa foi de natureza qualitativa e caracteriza-se como exploratória, quanto ao seu foco, e descritiva, quanto aos seus resultados e conclusões. Na descrição das etapas do Fluxograma de controle e erradicação do Mormo, foram observadas algumas atividades críticas para a consecução deste objetivo no Estado brasileiro. Todas essas atividades foram trabalhadas dentro uma matriz de priorização e, confirmados níveis altos de impacto e de probabilidade, passaram por uma análise de risco. Ao final são formuladas uma série de propostas de melhoria ao Fluxograma atual, buscando-se contribuir na mitigação de riscos para este importante segmento do agronegócio brasileiro. / Brazil has the largest equine population of Latin America and the third one in the world, generating a market of huge economic importance for Brazilian society. This complex business chain also suffers the influence of the variables surrounding these established relationships. Among them, the macroeconomics variables (affecting market and exchange relations), environmental and legal, resulting from the regulatory agencies\" (MAPA, ANVISA and others) actions, are highlighted. Recently the Brazilian state found itself taken into a health crisis of glanders zoonosis in horses, that affected directly the horse agrobusiness complex, including challenges of international context, related to Rio 2016 Olympic Games fulfilment. In this regard, the intention is to contribute towards the analysis of critical points related to this legal/health threat within the business chain, seeking answers for strategic management improvement among engaged actors, based on the propositions of business process management. The research\'s methodologic approach was of qualitative nature; characterized as exploratory regarding their focus, and descriptive in terms of outcomes and conclusions. In the description of the steps of control flowchart and glanders\'s eradication, were sighted some critical activities for the achievement of this goal in Brazil. All of them were worked out within a prioritizin matrix, and confirmed high levels of impact and probability, undergoing a risk analysis. Several improvement proposals for the current flowchart are offered, seeking to contribute towards the mitigation of risks for this fundamental segment of Brazilian agribusiness.

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Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-13T16:32:06Z No. of bitstreams: 1 Karla Patricia Chaves da Silva.pdf: 1396251 bytes, checksum: 8552def0e4e6ca947fd2a699f600a245 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-13T16:32:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Karla Patricia Chaves da Silva.pdf: 1396251 bytes, checksum: 8552def0e4e6ca947fd2a699f600a245 (MD5) Previous issue date: 2010-07-13 / The objective this study produce and evaluate PPD-mallein with potential for application in the diagnosis of glanders from of the the production and purification of immunogenic proteins of B. mallei isolates from equines with glanders in Brazil. Were isolated and characterized phenotypically and by detecting the activity of proteases, polyphenol oxidases, esterases and determination of the resistance profile in vitro. Samples of B. mallei studied were susceptible to antimicrobial gentamicin, ciprofloxacin, norfloxacin, doxycycline and enrofloxacin and resistant to trimethoprim / sulfamethoxazole, amoxicillin and ampicillin. Was observed the activity of proteases, absence esterases polyphenyloxidase and bacterial growth resulted in toxic metabolites. For the production and purification of the protein partially mallein were used two strains of B. mallei Brazilian already characterized phenotypically and genotypically. Was inoculated broth samples Dorset-Henley to metabolize and get the bacterial proteins. Proteins were separated and precipitated with trichloroacetic acid and ammonium sulphate. The PPD-mallein were concentrated at 1.0 mg / mL and evaluation in guinea pigs previously sensitized with bacter were effective for identifying infection in animals truly positive and exclude the animals truly negative. Histological analysis of the application site of mallein revealed the development of Type IV hypersensitivity. Was evaluated the PPD-mallein about their power in five asinines with clinical signs, with bacteriological diagnosis and positive serology for glanders and five asinines negative in serology and bacteriology. The animals were tested according to the criteria established by paragraph IN nº24 regarding the diagnosis of glanders. After 48 hours of inoculation, there was swelling in the area of injection, presence of ocular discharge and tearing confirming the diagnosis of glanders. The other seronegative animals showed no inflammatory reaction at the site of inoculation of PPD-mallein. This immunogen produced and being tested in Brazil was effective being a new possibility for diagnosis and control of glanders in this country. / Objetivou-se nesse estudo produzir e avaliar PPD-maleína com potencial para aplicação no diagnóstico do mormo a partir da purificação de proteínas imunogênicas de Burkholderia. mallei isoladas de equídeos com mormo no Brasil. As bactérias foram isoladas e caracterizadas fenotipicamente por meio da detecção da atividade de proteases, polifenoloxidases e esterases, além da determinação do perfil de resistência à antimicrobianos in vitro. Para produção e purificação parcial da maleína foram utilizadas duas estirpes de B. mallei brasileiras fenotípica e genotipicamente caracterizadas. Inoculou-se as amostras em caldo Dorset-Henley para metabolizar e obter as proteínas bacterianas. As proteínas foram separadas e precipitadas com ácido tricloroacético e sulfato de amônia. As PPDs maleína foram concentradas em 1,0mg/mL e na avaliação realizada em cobaios previamente sensibilizados com a bactéria foram eficazes na identificação dos animais verdadeiros positivos e na exclusão dos verdadeiros negativos. Avaliou-se a PPD-maleína quanto a sua potência em cinco asininos com sinais clínicos e diagnóstico bacteriológico e sorológico positivo para o mormo e em cinco asininos negativos na sorologia e bacteriologia. As amostras de B. mallei estudadas foram sensíveis à gentamicina, ciprofloxacina, norfloxacina, doxiciclina e enrofloxacina, e resistentes a trimetoprim/sulfametoxazol, amoxacilina e ampicilina. Observou-se a atividade de proteases, ausência de esterases e polifenoloxidades e o crescimento bacteriano em meio de cultura resultou em metabólitos tóxicos. A análise histológica do local de aplicação da maleína, em cobaias, revelou o desenvolvimento de hipersensibilidade do tipo IV. Os asininos foram testados de acordo com os critérios estabelecidos pela IN nº24 do Ministério de Agricultura Pecuária e Abastecimento referente ao diagnóstico do mormo. Após 48 horas da inoculação, observou-se edema na área da injeção, presença de secreção ocular e lacrimejamento, confirmando-se o diagnóstico do mormo. Os outros animais sorologicamente negativos não apresentaram reação inflamatória no local de inoculação da PPD-maleína. Esse imunógeno produzido e em fase de teste no Brasil é uma nova alternativa para o diagnóstico e controle do mormo no país.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-19T17:24:07Z No. of bitstreams: 1 Marcilia Maria Alves de Souza.pdf: 1643173 bytes, checksum: de92227ec0b9b02a73e95528ab1282d2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-19T17:24:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcilia Maria Alves de Souza.pdf: 1643173 bytes, checksum: de92227ec0b9b02a73e95528ab1282d2 (MD5) Previous issue date: 2012-02-01 / Glanders is a disease that affects equids, produced by Burkholderia mallei, a coccobacillus, gram-negative, immobile, and not sporulated anaerobic (Yabuuchi et al., 1992), which can be transmitted to humans, and his agent used as a biological weapon (Ulrich, et al, 2006). Reemerging disease in Brazil since 1999, has been the subject of discussion regarding the serological diagnosis. Complement Fixation Test (CFT) is recommended in the examination program for control and eradication of glanders by the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (BRAZIL, 2004) and the World Organization for Animal Health (OIE) for international trade (OIE 2008) The Objective of this study was to evaluate the results of the Complement Fixation Test using two antigens commercially available and two methods of incubation in sera of horses from a property in Pernambuco. / O mormo é uma doença que acomete equídeos, produzida pela Burkholderia mallei, um cocobacilo, Gram-negativo, imóvel, anaeróbio e não esporulado (YABUUCHI et al., 1992), que pode ser transmitida para o homem, e seu agente utilizado como arma biológica (ULRICH, et al, 2006). Doença reemergente no Brasil desde 1999 tem sido motivo de discussão, no que concerne ao diagnóstico sorológico. Fixação do Complemento (FC) é o exame preconizado no programa de controle e erradicação do mormo, pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (BRASIL, 2004) e pela Organização Mundial de Saúde Animal (OIE) para trânsito internacional (OIE 2008). Objetiva-se com este trabalho, avaliar os resultados do Teste de Fixação do Complemento frente a dois antígenos comercialmente disponíveis utilizando dois métodos de incubação, em soros de equinos de uma propriedade em Pernambuco.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-02-22T14:08:58Z No. of bitstreams: 1 Paulo Castelo Branco de Gouveia Filho.pdf: 1165549 bytes, checksum: 16f843e48f36122b99e932a78381d634 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-22T14:08:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paulo Castelo Branco de Gouveia Filho.pdf: 1165549 bytes, checksum: 16f843e48f36122b99e932a78381d634 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Glanders is an often fatal zoonosis that affects horses, donkeys and mules, caused by Burkholderia mallei. Complement Fixation (CF) is the test prescribed by the World Organization for Animal Health (OIE) for its diagnosis. This work was conducted with the objective of evaluating the performance of CF using antigen produced with Brazilian strains of B. mallei (Biovetech, Recife Brazil) for the diagnosis of glanders compared to the antigen c.c.pro (GmbH, Oberdorla, Germany), which employs strains from Yugoslavia, India and Indonesia. The tests were performed in parallel using the protocol of cold incubation (4 ° C, 12 hours) of the serum, complement and antigen mixture. Of the 259 sera evaluated, 102 and 133 presented positive and negative results, respectively, in both tests. Twenty-four negative sera in the c.c.pro antigen test showed a positive result in the Biovetech antigen test. The calculated concordance index kappa was 0.81, considered almost perfect. / O mormo é uma zoonose frequentemente fatal que afeta equinos, asininos e muares, causada pela Burkholderia mallei. A Fixação do Complemento (FC) é o teste prescrito pela Organização Mundial de Saúde Animal (OIE) para seu o diagnóstico. Este trabalho foi conduzido com o objetivo de avaliar o desempenho da FC empregando antígeno (Biovetech, Recife Brasil), produzido com cepas brasileiras de B. mallei para diagnóstico do mormo comparativamente ao antígeno c.c.pro (GmbH, Oberdorla, Alemanha), que emprega cepas da Iuguslávia, India e Indonésia. Os testes foram realizados em paralelo utilizando o protocolo de incubação a frio (4ºC, 12 horas) da mistura soro, complemento e antígeno. Dos 259 soros avaliados, 102 e 133 apresentaram resultado positivo e negativo, respectivamente, em ambos os testes. Vinte e quatro soros negativos no teste com antígeno c.c.pro apresentaram resultado positivo no teste com antígeno Biovetech. O índice de concordância ajustada kappa calculado foi 0,81, considerado quase perfeito.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-19T14:08:54Z No. of bitstreams: 1 Cecilia Maria de Souza Leao e Silva.pdf: 1235721 bytes, checksum: fa10ebf32171212966df2a23383f5075 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-19T14:08:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cecilia Maria de Souza Leao e Silva.pdf: 1235721 bytes, checksum: fa10ebf32171212966df2a23383f5075 (MD5) Previous issue date: 2014-02-21 / Glanders is a highly contagious disease caused by Burkholderia mallei solipeds, a Gram - negative bacterium, not motility and aerobic coccobacillus, primarily infecting horses, donkeys and mules, though humans are considered accidental hosts . The Burkholderia mallei is listed in the list of the World Organisation for Animal Health (OIE) as an important public health disease, and due to its high potential for infection is referred to as a bioterrorism agent. According to the OIE comprises the serological diagnosis, allergy testing and bacterial isolation, and complement fixation, the official test to be performed for trade of animals. This method of diagnosis is recommended in Brazil by Normative Instruction Nº 24 Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply by its high sensitivity and specificity. Serological qPCR showed 76 (16.7%) positivity and a sensitivity of 24.7% and a specificity of 89 % when compared to the gold standard western blotting used. The results show that the use of the qPCR may be used as a complementary technique to other methods for rapid and accurate identification of Burkholderia mallei. About statistical results showed that the ELISAi showed the highest sensitivity (35.5%) and specificity (97.6 %) when compared to western blotting. The results show the importance of preparation and use of antigens that are produced with local strains, resulting in higher sensitivity and specificity of the test. / O Mormo constitui-se em uma doença altamente contagiosa dos solípedes causada pela Burkholderia mallei, uma bactéria Gram-negativa, não móvel e cocobacilo aeróbio, infectando primariamente cavalos, burros e mulas, entretanto humanos são considerados hospedeiros acidentais. A Burkholderia mallei está relacionada na lista de doenças da Organização Mundial para a Saúde Animal (OIE) como doença de importância de saúde pública, e devido ao seu alto potencial de infecção é referenciada como agente de bioterrorismo. De acordo com a OIE o diagnóstico compreende o teste sorológico, alérgico e o isolamento bacteriano, sendo a fixação do complemento, o teste oficial a ser realizado para trânsito de animais. Este método de diagnóstico está preconizado no Brasil pela Instrução Normativa Nº 24 do Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento por apresentar alta sensibilidade e especificidade. A qPCR sorológica apresentou 76 (16,7%) positividade e uma sensibilidade de 24,7% e especifidade de 89% quando comparado ao western blotting padrão ouro utilizado.. Os resultados mostram que a utilização da qPCR pode ser utilizada como técnica complementar de outras metodologias para identificação rápida e precisa da Burkholderia mallei. Em relação aos testes sorológicos, os resultados estatísticos mostraram que o ELISAi apresentou a maior sensibilidade (35,5%) e especificidade (97,6%) quando comparado ao western blotting. Os resultados mostram a necessidade da preparação e utilização de antígenos que sejam produzidos com cepas locais, determinando maior sensibilidade e especificidade ao teste.