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Introdução: a epilepsia é uma doença neurológica, cuja prevalência é de 0,5 a 1% na população, sendo que 20 a 30% dos pacientes apresentam crises refratárias ao tratamento medicamentoso. A dieta cetogênica (DC) composta por alto teor de gorduras, baixo teor de carboidratos e quantidade proteica adequada tem emergido como um tratamento adjuvante e eficaz no controle de crises. Apesar de sua eficácia ser bem descrita na literatura, em humanos pouco se sabe sobre influência da DC em marcadores oxidativos e na modulação de fatores de transcrição como o NF-kB e Nrf2. Além disso, não se sabe sobre o impacto que diferentes tipos de ácidos graxos dietéticos ofertados na DC poderiam ocasionar nesses marcadores. Objetivo: avaliar o impacto da modificação do perfil de ácidos graxos dietéticos ofertados na DC SAFA sobre o perfil lipídico, oxidativo e ativação de fatores de transcrição NF-kB e Nrf2 em crianças e adolescentes com epilepsia refratária submetidos ao tratamento com dieta cetogênica. Metodologia: tratase de um ensaio clínico com seguimento de 6 meses, no qual o grupo DC SAFA recebeu uma dieta rica em colesterol e gordura saturada, e o grupo DC NSAFA recebeu uma dieta com redução de pelo menos 20% de gorduras saturadas; aumento em > 50% da oferta de ácido graxo monoinsaturados e ácidos graxos poli-insaturados quando comparados ao grupo DC SAFA. Foram avaliadas características socioeconômicas e clínicas e marcadores: antropométricos; bioquímicos de adesão a dieta; de consumo alimentar; de estresse oxidativo; e de capacidade antioxidante em ambos os grupos. Esses parâmetros foram avaliados em três momentos: antes do início da DC (T0), três meses (T1) e seis meses (T2) após o início do tratamento. As análises estatísticas foram realizadas através do software SPSS. Resultados: Foram incluídas 26 crianças e adolescentes no grupo DC clássica e 26 no grupo DC modificada. A DC NSAFA conferiu alterações menos intensas no perfil lipídico com menor percentual de aumento de colesterol total, LDL-C, APO B, razão LDL-C por HDL-C, razão HDL-C por APO A, razão LDL-C por APO B, colesterol não HDL e ácidos graxos não esterificados em comparação com a DC SAFA. Em ambas as dietas houve aumento significativo da concentração de LDLox. Foi observado o aumento significativo do NFkB na DC SAFA, sem diferenças significativas no percentual de mudança dessa variável entre as intervenções, além disso na DC SAFA houve redução de Nrf2 e o mesmo se comportou de forma distinta entre as intervenções, sendo que na DC SAFA houve redução significativa desse marcador. Conclusão: a DC SAFA demonstrou apresentar pior perfil de resposta lipídica, inflamatória e oxidante em comparação a DC NSAFA, a adoção da DC NSAFA para o tratamento da epilepsia refratária poderia minimizar os efeitos negativos observados na DC SAFA e atenuar o principal efeito adverso observado que são as dislipidemias. / Introduction: epilepsy is a neurological disease, its prevalence is estimated about 0,5 to 1 % in the population and 20 to 30% are refractory to the drug treatment. The ketogenic diet (KD) composed by high content of fat, low quantity of carbohydrate and adequate content of protein it is an adjuvant treatment with high efficacy in seizure control. Although it is well known about the efficacy of the diet, in humans there are few studies about the influence of the diet in oxidative biomarkers and its modulation in transcription factors such as NF-kB and Nrf2. Moreover it is not known about the impact of different types of dietetic fatty acids offers in KD could be influence in oxidative biomarkers and transcription factors. Objective: to evaluate and compare the impact of two different ketogenic diet, one composed by high content of saturated fatty acids (KD SAFA) and another one composed by high content of monounsaturated fatty acids and polyunsaturated fatty acids (KD NSAFA), on lipid and oxidative profile and activations of NF-kB and Nrf2 transcriptions factors in children and adolescents with refractory epilepsy on dietetic treatment with KD. Methods: clinical study, with 6 months of follow up, the patients was divided in two groups: one received a KD rich in saturated fatty acids and cholesterol (KD SAFA) and other received a KD with 20% less content of saturated fatty acids, increase in 50% of monounsaturated and polyunsaturated fatty acids comparing to KD SAFA (KD NSAFA). It was evaluated socioeconomic and clinical characteristics, anthropometric measure, food intake and lipids, oxidative and inflammatory biomarkers. The patients was evaluated in three different moments: before start the diet (T0), three months after start the KD (T1) and six months after start the KD (T2). The statistical analysis was performed using the software SPSS. Results: It was included 26 children and adolescents in KD SAFA and 26 in KD NSAFA. The participants treated with KD NSAFA had less modifications on classical lipid profile with less increase of: total cholesterol, LDL-C, APO B, LDL-C/HDL-C, HDL-C/APO A, LDL-C/APO B, non HDL cholesterol and non esterified fatty acids comparing to the participants treated with KD SAFA. In both diets there was a significant increase in oxidized LDL. It was observed increase of NFkB in the group treated with KD SAFA, without differences on the percentage of change of this biomarker between the interventions, in addition on the KD SAFA there was decrease in Nrf2 and the percentage of change it was different between the interventions with more reduction of this biomarker on KD SAFA. Conclusion: the KD SAFA showed worst profile in lipid, oxidative and inflammatory parameters comparing to KD NSAFA, suggesting that the use of KD NSAFA could be attenuate one of the main negative effect that are dyslipidemias.

A exposição à radiação ultravioleta (RUV) pode provocar desequilíbrio no balanço oxidante/antioxidante da pele, causando prejuízos à sua integridade e levando a diversas alterações, entre as quais o envelhecimento precoce e o câncer de pele. Considerando a estreita relação entre o aumento do estresse oxidativo e os efeitos danosos causados pela RUV na pele, aliado ao fato de que estudos epidemiológicos demonstram que o uso de protetores ou bloqueadores solares não é completamente efetivo na prevenção dos diversos malefícios causados pela exposição à RUV, o uso de antioxidantes aparece como importante alternativa nas terapias de fotoproteção. A administração tópica de antioxidantes, como a quercetina, poderia afetar as alterações moleculares desencadeadas pela RUV e conseqüentemente as seqüelas biológicas e clínicas resultantes das mesmas. Desta forma, na presente pesquisa, sistema microemulsionado para a liberação cutânea de quercetina foi obtido, caracterizado e avaliado quanto a sua capacidade em promover maior penetração cutânea deste ativo, estabilidade, segurança e eficácia in vivo contra os danos na pele causados pela exposição à RUV. Além disso, o efeito da quercetina contra diferentes alterações moleculares induzidas pela RUV foi também avaliado, com o objetivo de investigar os possíveis mecanismos de ação fotoprotetora deste flavonóide. Os resultados demonstram que a incorporação da quercetina em sistema microemulsionado aumentou a penetração cutânea in vitro e in vivo deste flavonóide sem causar irritação, sendo, portanto, uma importante estratégia para melhorar a liberação tópica da quercetina. O estudo de estabilidade demonstra a necessidade de armazenamento deste sistema a 4°C para manutenção de sua funcionalidade. A microemulsão contendo quercetina inibiu a depleção do antioxidante endógeno GSH, assim como o aumento da atividade/secreção de proteinases e da atividade da MPO, induzidos pela exposição à RUVB. O pré-tratamento de queratinócitos com quercetina não alterou a indução pela RUV das MAP quinases, conseqüentemente não houve inibição na elevação dos níveis de c-Jun e c-Fos, assim como no aumento da produção das MMPs 1 e 3, mas por outro lado foi efetivo contra o aumento na produção das citocinas IL-1, IL-6, IL-8 e TNF-. Finalmente, demonstrou-se que a ação fotoprotetora da quercetina contra os danos na pele causados pela RUV é mediada principalmente pela inibição da via de sinalização do NF-kB, uma vez que, enquanto o pré-tratamento de queratinócitos com quercetina diminuiu a ativação deste fator de transcrição, nenhum efeito contra a indução da via de sinalização da AP-1 foi observado. Concluindo, este trabalho sugere a incorporação da quercetina em sistema microemulsionado como estratégia relevante no combate ao aparecimento de desordens cutâneas causadas pela exposição à RUV, além de contribuir para a elucidação, pelo menos em parte, do mecanismo de ação fotoprotetora da quercetina contra alterações moleculares induzidas pela RUV. / The ultraviolet radiation (UVR) exposition may lead to the skin oxidant/antioxidant imbalance injuring its integrity and leading to several disorders, such as ageing and skin cancer. Considering the close relationship between the increase in oxidative stress and UV-induced skin damages, together with the fact that epidemiological studies indicate that the use of sunscreen and sun block are not completely effective in preventing UV-induced damages, the use of antioxidants arises as an important approach to photoprotection therapies. The topical use of antioxidants, such as quercetin, would affect the molecular changes induced by UV and subsequent biological and clinical sequela. Therefore, in the present study, microemulsion system for topical delivery of quercetin was obtained, characterized and evaluated with regards to its capability to increase skin penetration of quercetin, stability, toxicity and in vivo effectiveness against UV-induced skin damages. Moreover, quercetin effect against different UV-induced molecular changes was also assessed, in order to investigate the possible photoprotective mechanisms of action of this flavonoid. The results demonstrate that the incorporation of quercetin into microemulsion increased the in vitro and in vivo skin penetration of this flavonoid without causing skin irritation, being an important strategy to improve the topical delivery of quercetin. The stability study demonstrate the necessity to storage this system at 4°C to maintain its functionality. The microemulsion containing quercetin inhibited the depletion of the endogenous antioxidant GSH, as well as the increase in proteinases activity/secretion and MPO activity induced by UVB irradiation exposure. The pretreatment of keratinocytes with quercetin had no blocking effect on UV activation of MAP kinases, consequently, there was no inhibition in the c-Jun and c-Fos levels, as well as in the induction of MMPs 1 and 3, on the other hand, it was effective against the increase in the production of cytokines IL-1, IL-6, IL-8 e TNF-. Finally, it was demonstrated that the photoprotective action of quercetin against UV-induced skin damages is mediated mainly by suppression of NF-kB signaling pathway, once, while the pretreatment of keratinocytes with quercetin suppressed the activation of this transcription factor, no effect was observed against UV-induced AP-1 activation. In conclusion, the present study suggests the incorporation of quercetin into microemulsion system as a relevant strategy to prevent UV-induced skin disorders, and contribute, at least in part, to the elucidation of quercetin photoprotective mechanism of action against UV-induced molecular changes.

Introdução: a epilepsia é uma doença neurológica, cuja prevalência é de 0,5 a 1% na população, sendo que 20 a 30% dos pacientes apresentam crises refratárias ao tratamento medicamentoso. A dieta cetogênica (DC) composta por alto teor de gorduras, baixo teor de carboidratos e quantidade proteica adequada tem emergido como um tratamento adjuvante e eficaz no controle de crises. Apesar de sua eficácia ser bem descrita na literatura, em humanos pouco se sabe sobre influência da DC em marcadores oxidativos e na modulação de fatores de transcrição como o NF-kB e Nrf2. Além disso, não se sabe sobre o impacto que diferentes tipos de ácidos graxos dietéticos ofertados na DC poderiam ocasionar nesses marcadores. Objetivo: avaliar o impacto da modificação do perfil de ácidos graxos dietéticos ofertados na DC SAFA sobre o perfil lipídico, oxidativo e ativação de fatores de transcrição NF-kB e Nrf2 em crianças e adolescentes com epilepsia refratária submetidos ao tratamento com dieta cetogênica. Metodologia: tratase de um ensaio clínico com seguimento de 6 meses, no qual o grupo DC SAFA recebeu uma dieta rica em colesterol e gordura saturada, e o grupo DC NSAFA recebeu uma dieta com redução de pelo menos 20% de gorduras saturadas; aumento em > 50% da oferta de ácido graxo monoinsaturados e ácidos graxos poli-insaturados quando comparados ao grupo DC SAFA. Foram avaliadas características socioeconômicas e clínicas e marcadores: antropométricos; bioquímicos de adesão a dieta; de consumo alimentar; de estresse oxidativo; e de capacidade antioxidante em ambos os grupos. Esses parâmetros foram avaliados em três momentos: antes do início da DC (T0), três meses (T1) e seis meses (T2) após o início do tratamento. As análises estatísticas foram realizadas através do software SPSS. Resultados: Foram incluídas 26 crianças e adolescentes no grupo DC clássica e 26 no grupo DC modificada. A DC NSAFA conferiu alterações menos intensas no perfil lipídico com menor percentual de aumento de colesterol total, LDL-C, APO B, razão LDL-C por HDL-C, razão HDL-C por APO A, razão LDL-C por APO B, colesterol não HDL e ácidos graxos não esterificados em comparação com a DC SAFA. Em ambas as dietas houve aumento significativo da concentração de LDLox. Foi observado o aumento significativo do NFkB na DC SAFA, sem diferenças significativas no percentual de mudança dessa variável entre as intervenções, além disso na DC SAFA houve redução de Nrf2 e o mesmo se comportou de forma distinta entre as intervenções, sendo que na DC SAFA houve redução significativa desse marcador. Conclusão: a DC SAFA demonstrou apresentar pior perfil de resposta lipídica, inflamatória e oxidante em comparação a DC NSAFA, a adoção da DC NSAFA para o tratamento da epilepsia refratária poderia minimizar os efeitos negativos observados na DC SAFA e atenuar o principal efeito adverso observado que são as dislipidemias. / Introduction: epilepsy is a neurological disease, its prevalence is estimated about 0,5 to 1 % in the population and 20 to 30% are refractory to the drug treatment. The ketogenic diet (KD) composed by high content of fat, low quantity of carbohydrate and adequate content of protein it is an adjuvant treatment with high efficacy in seizure control. Although it is well known about the efficacy of the diet, in humans there are few studies about the influence of the diet in oxidative biomarkers and its modulation in transcription factors such as NF-kB and Nrf2. Moreover it is not known about the impact of different types of dietetic fatty acids offers in KD could be influence in oxidative biomarkers and transcription factors. Objective: to evaluate and compare the impact of two different ketogenic diet, one composed by high content of saturated fatty acids (KD SAFA) and another one composed by high content of monounsaturated fatty acids and polyunsaturated fatty acids (KD NSAFA), on lipid and oxidative profile and activations of NF-kB and Nrf2 transcriptions factors in children and adolescents with refractory epilepsy on dietetic treatment with KD. Methods: clinical study, with 6 months of follow up, the patients was divided in two groups: one received a KD rich in saturated fatty acids and cholesterol (KD SAFA) and other received a KD with 20% less content of saturated fatty acids, increase in 50% of monounsaturated and polyunsaturated fatty acids comparing to KD SAFA (KD NSAFA). It was evaluated socioeconomic and clinical characteristics, anthropometric measure, food intake and lipids, oxidative and inflammatory biomarkers. The patients was evaluated in three different moments: before start the diet (T0), three months after start the KD (T1) and six months after start the KD (T2). The statistical analysis was performed using the software SPSS. Results: It was included 26 children and adolescents in KD SAFA and 26 in KD NSAFA. The participants treated with KD NSAFA had less modifications on classical lipid profile with less increase of: total cholesterol, LDL-C, APO B, LDL-C/HDL-C, HDL-C/APO A, LDL-C/APO B, non HDL cholesterol and non esterified fatty acids comparing to the participants treated with KD SAFA. In both diets there was a significant increase in oxidized LDL. It was observed increase of NFkB in the group treated with KD SAFA, without differences on the percentage of change of this biomarker between the interventions, in addition on the KD SAFA there was decrease in Nrf2 and the percentage of change it was different between the interventions with more reduction of this biomarker on KD SAFA. Conclusion: the KD SAFA showed worst profile in lipid, oxidative and inflammatory parameters comparing to KD NSAFA, suggesting that the use of KD NSAFA could be attenuate one of the main negative effect that are dyslipidemias.

O carcinoma epidermóide é a neoplasia maligna que ocorre com maior freqüência na boca. Os pacientes portadores desta neoplasia ainda apresentam um pobre prognóstico com índices de sobrevida, em cinco anos, variando de 20 a 40% em vários estudos. Um grande número de trabalhos tem sido direcionado para identificar marcadores que auxiliem no direcionamento do tratamento e melhorem o prognóstico. A metalotioneína (MT) é uma proteína de baixo peso molecular, com alto conteúdo de cisteína e que está associada à resistência neoplásica a várias modalidades de tratamento, e que por isso tem sido estudada como fator prognóstico em uma variedade de neoplasias malignas humanas. O Fator Nuclear B desempenha um importante papel na ativação de genes que estão relacionados à imunidade, inflamação, sobrevida, apoptose, proteção celular à radiação e à quimioterapia. A proteína serina/treonina quinase Akt é um alvo downstream da quinase 3-fosfaditilinositol, desempenhando um importante papel na proliferação e no bloqueio da apoptose de células cancerígenas. Neste estudo, nós examinamos a expressão das proteínas MT, NF-kB e pAKT em 51 casos de carcinomas epidermóides de boca, através de imunoistoquímica, com a finalidade de investigar suas influências prognosticas, assim como estudar as correlações entre alguns fatores clínicos com a sobrevida. Os resultados mostraram uma associação estatisticamente significante entre a expressão pAkt e NF-kB e entre MT e NF-kB. Ao lado disso, nossos resultados mostraram que a expressão de pAkt está associada a um pior prognóstico. Nossos resultados, portanto, sugerem que a proteína pAkt pode ter implicações terapêuticas em carcinomas epidermóides de boca. / Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the most frequent malignant tumor of the oral cavity. In spite of improved therapeutic procedures, patients with OSCC in advanced stage generally present a poor prognosis, with an overall 5-year survival rate that ranges from 20% to 40%. An extensive effort has started to identify features of the oral tumors that predict treatment response and prognosis. The metallothionein (MT), a low-molecular weight protein with high cysteine content, seems to be related to neoplastic resistance to oncologic treatment and therefore has been studied as a prognostic factor for a variety of human malignant tumors. The nuclear factor B (NF-B) plays an important role in the activation of the genes that code for immunity, survival, inflammation, apoptosis and in the cell protection for radiation and chemotherapy. The serine/threonine protein kinase Akt is a downstream target of phosphatidylinositol-3-kinase and it plays a key regulator of cancerous cell growth. Therefore, we have examined the MT, NF-kB and pAkt expression in 51 samples of oral squamous cell carcinoma by immunohistochemistry in order to investigate their prognostic influence on oral cancer, as well as studying the correlations between clinical factors and patient survival. The results showed a significant association between pAkt and NF-kB and between MT and NF-kB expression in tumor tissue. Besides pAkt over-expression was found in OSCC clinical samples and its expression was significantly associated with a poor overall patient survival. In conclusion, our findings suggested that pAkt expression may have therapeutic implications in squamous cell carcinoma.

O reconhecimento da flagelina é compartilhado pelo receptor transmembrânico TLR5 e citosólico NAIP5/NLRC4. Entretanto, pouco se sabe sobre os mecanismos efetores individuais induzidos a partir do reconhecimento extra e intracelular da flagelina. Aqui, nós demonstramos que macrófagos estimulados com a flagelina citosólica (FLA-BSDot) induziu a expressão de iNOS, enzima responsável pela produção do óxido nítrico (NO). A expressão de iNOS foi dependente do eixo NAIP5/NLRC4/caspase-1 e independente de IL-1β, IL-18 e MyD88, descartando a via de ativação dos TLRs. Ainda, esta via não requer a ativação do fator de transcrição IRF-1, mas envolve a ativação do NF-kB, assim como a clivagem da enzima PARP-1 (poly(ADP-ribose)polymerase-1). Por fim, avaliamos a relevância biológica desta via no controle das infecções por L. pneumophila e S. Typhimurium, dados que definem um mecanismo efetor adicional no controle de patógenos. / Recognition of flagellin is shared by transmembranic TLR5 and cytosolic NAIP5/NLRC4. However, little is known about the individual effector mechanisms induced by extra and intracellular flagellin. Here, we have demonstrated that cytosolic flagellin-stimulated macrophages (FLA-BSDot) induced iNOS expression, an enzyme responsible for the production of nitric oxide (NO). iNOS expression was dependent of the NAIP5/NLRC4/caspase-1 axis and independent of IL-1β, IL-18 and MyD88, discarding TLRs signaling pathway. Still, this pathway do not require the activation of IRF-1 transcriptional factor, but involves NF-kB activation as well as the cleavage of the enzyme, PARP-1 (poly(ADP-ribose)polymerase-1). Finally, we have evaluated the biological relevance of this pathway in the control of the infections by L. pneumophila e S. Typhimurium, which define an additional effector mechanism to the control of pathogens.

O câncer colorretal (CCR) é importante causa de morte no Brasil, representando a segunda causa de morbimortalidade por câncer nas regiões Sudeste e Sul. Foi uma das primeiras neoplasias malignas a ter modelo de carcinogênese identificado. Os objetivos deste trabalho foram avaliar a expressão do NF-KB e da survivina na progressão do CCR, sua relação com alvos moleculares envolvidos na sobrevivência celular [proibitina, fator de necrose tumoral (TNFR1), p53, B- catenina]; invasão (metaloproteinases 2 e 9 - MMP), angiogênese (fator de crescimento endotelial vascular VEGF) e apoptose (caspase 3 e método do Túnel). Trata-se de estudo retrospectivo baseado na análise histopatológica de dezoito casos de adenomas com displasia de alto (AG) e baixo grau (BG), respectivamente; dez casos de adenocarcinoma bem, moderado e pouco diferenciado, respectivamente, nove casos de lesões serrilhadas e nove biópsias colorretais (controle) selecionados aleatoriamente no Serviço de Patologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo, no período de 2000 a 2009. Foram construídos arranjos de matriz tecidual para representar os casos de adenocarcinomas e cinco casos de adenomas >1 cm de diâmetro. A detecção do NF-KB foi realizada pelo método de Southwestern imunoistoquímica. Avaliou-se a expressão imunoistoquímica da survivina, proibitina, TNFR1, p53, B-catenina, MMPs 2 e 9, VEGF, caspase 3 e Túnel. Não observamos expressão imunoistoquímica do NF-KB em 70% dos casos de adenocarcinomas, em 72% dos adenomas AG e em 89% das lesões serrilhadas; a marcação foi positiva em 66% e 56% dos casos de adenoma do BG e controle, respectivamente. Expressões da survivina, proibitina citoplasmática, TNFR1, p53, MMP 2 e 9 foram crescentes na seqüência adenoma-carcinoma, sem aparente modulação pelo NF-KB. A survivina suprimiu ação da caspase 3, exceto nos adenomas BG e controle, com baixos níveis de apoptose ao túnel. Lesões serrilhadas e controle apresentaram baixa expressão do TNFR1 e da proibitina citoplasmática, ausência de marcação da p53 e MMPs 2 e 9, exceto um caso controle. Identificou-se marcação nuclear da proibitina nos adenocarcinomas pouco diferenciados, adenomas AG e BG. A expressão da p53 relacionou-se ao grau de displasia nos adenomas e à desregulação da survivina. Observou-se expressão citoplasmática e nuclear da B- catenina nos adenocarcinomas, adenomas AG e BG. As lesões serrilhadas exibiram expressão citoplasmática em 44% dos casos. O grupo controle exibiu expressão preservada da B-catenina. Identificou-se expressão do VEGF nos adenocarcinomas, relacionada à perda de diferenciação celular, presença de metástases, não correlacionada ao NF-KB. Com base nos nossos resultados, sugerimos a desregulação da B- catenina como possível responsável pela inibição do NF-KB; além de sua participação na desregulação da survivina juntamente com a p53. As lesões serrilhadas não exibiram indícios sugestivos de inibição do NF- KB pela B-catenina.A survivina, devido propriedades anti-apoptóticas, emerge como potencial alvo terapêutico no tratamento do CCR, confirmando estudos anteriores. / Colorectal cancer (CRC) is an important cause of death in Brazil, representing the second leading cause of cancer mortality in the Southeast and South. It was among the first malignancies that have the carcinogenesis model identified.The aim of this study was to evaluate the expression of NF-KB and survivin in the progression of CRC, its relationship with molecular targets involved in cell survival [prohibitin, tumor necrosis factor (TNFR1), p53,B-catenina], invasion (metalloproteinases 2 and 9 - MMP), angiogenesis (vascular endothelial growth factor VEGF) and apoptosis (caspase 3 and method Tunnel). This is a retrospective study based on the histopathological analyses of eighteen cases of high- (HG) and low- grade dysplastic (LG) adenomas, respectively; ten cases of adenocarcinoma well, moderately and poorly differentiated, respectively, nine cases of serrated lesions e nine biopsies (control); randomly selected in the Pathology Service of the University Hospital of the Faculty of Medicine of Ribeirão Preto, University of São Paulo from 2000 to 2009. Tissue microarray were constructed to represent the cases of adenocarcinomas and five cases of adenomas > 1cm in diameter. Detection of NF-KB was performed by the Southwestern immunohistochemistry method. We evaluated immunohistochemical expression of survivin, prohibitin, TNFR1, p53, B- catenin, MMPs 2 and 9, VEGF, caspase 3 and method Tunnel. We did not observe immunohistochemical expression of NF-KB in 70% of cases of adenocarcinomas, in 72% of HG adenomas and 89% of lesions serrated; staining was positive in 66% and 56% of cases of LG adenoma and control, respectively. Expressions of survivin, cytoplasmic prohibitin, TNFR1, p53, MMPs 2 and 9 were increasing in adenoma-carcinoma sequence, without apparent modulation by NF-KB. Survivin suppressed action of caspase 3, except in BG adenomas and control, with low levels of apoptosis to the tunnel. Serrated lesions and control showed low expression of TNFR1 and cytoplasmic prohibitin, the absence of staining of p53 and MMPs2 and 9, except for one control. We identified nuclear staining of prohibitin in poorly differentiated adenocarcinomas, HG and LG adenomas. Expression of p53 was related to the grade of dysplasia in adenomas and deregulation of survivin.The expression of the cytoplasmic and nuclear B-catenin was observed in adenocarcinoma, HG and LG adenoma. Serrated lesions exhibited cytoplasmic expression in 44% of cases. Control group exhibited preserved expression of B-catenin. It was identified VEGF expression in adenocarcinomas, related to the loss of cellular differentiation, metastasis, not correlated with NF-KB. According to our results, we suggest that deregulation of catenin is possible responsible for the inhibition of NF-KB besides their participation in the deregulation of survivin with p53.Serrated lesions exhibited no evidence suggestive of inhibition of NF-KB by B-catenin. Survivin emerges as a potential therapeutic target in the treatment of CRC due to their anti-apoptotic properties, confirming previous studies.

O câncer colorretal (CCR) é importante causa de morte no Brasil, representando a segunda causa de morbimortalidade por câncer nas regiões Sudeste e Sul. Foi uma das primeiras neoplasias malignas a ter modelo de carcinogênese identificado. Os objetivos deste trabalho foram avaliar a expressão do NF-KB e da survivina na progressão do CCR, sua relação com alvos moleculares envolvidos na sobrevivência celular [proibitina, fator de necrose tumoral (TNFR1), p53, B- catenina]; invasão (metaloproteinases 2 e 9 - MMP), angiogênese (fator de crescimento endotelial vascular VEGF) e apoptose (caspase 3 e método do Túnel). Trata-se de estudo retrospectivo baseado na análise histopatológica de dezoito casos de adenomas com displasia de alto (AG) e baixo grau (BG), respectivamente; dez casos de adenocarcinoma bem, moderado e pouco diferenciado, respectivamente, nove casos de lesões serrilhadas e nove biópsias colorretais (controle) selecionados aleatoriamente no Serviço de Patologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo, no período de 2000 a 2009. Foram construídos arranjos de matriz tecidual para representar os casos de adenocarcinomas e cinco casos de adenomas >1 cm de diâmetro. A detecção do NF-KB foi realizada pelo método de Southwestern imunoistoquímica. Avaliou-se a expressão imunoistoquímica da survivina, proibitina, TNFR1, p53, B-catenina, MMPs 2 e 9, VEGF, caspase 3 e Túnel. Não observamos expressão imunoistoquímica do NF-KB em 70% dos casos de adenocarcinomas, em 72% dos adenomas AG e em 89% das lesões serrilhadas; a marcação foi positiva em 66% e 56% dos casos de adenoma do BG e controle, respectivamente. Expressões da survivina, proibitina citoplasmática, TNFR1, p53, MMP 2 e 9 foram crescentes na seqüência adenoma-carcinoma, sem aparente modulação pelo NF-KB. A survivina suprimiu ação da caspase 3, exceto nos adenomas BG e controle, com baixos níveis de apoptose ao túnel. Lesões serrilhadas e controle apresentaram baixa expressão do TNFR1 e da proibitina citoplasmática, ausência de marcação da p53 e MMPs 2 e 9, exceto um caso controle. Identificou-se marcação nuclear da proibitina nos adenocarcinomas pouco diferenciados, adenomas AG e BG. A expressão da p53 relacionou-se ao grau de displasia nos adenomas e à desregulação da survivina. Observou-se expressão citoplasmática e nuclear da B- catenina nos adenocarcinomas, adenomas AG e BG. As lesões serrilhadas exibiram expressão citoplasmática em 44% dos casos. O grupo controle exibiu expressão preservada da B-catenina. Identificou-se expressão do VEGF nos adenocarcinomas, relacionada à perda de diferenciação celular, presença de metástases, não correlacionada ao NF-KB. Com base nos nossos resultados, sugerimos a desregulação da B- catenina como possível responsável pela inibição do NF-KB; além de sua participação na desregulação da survivina juntamente com a p53. As lesões serrilhadas não exibiram indícios sugestivos de inibição do NF- KB pela B-catenina.A survivina, devido propriedades anti-apoptóticas, emerge como potencial alvo terapêutico no tratamento do CCR, confirmando estudos anteriores. / Colorectal cancer (CRC) is an important cause of death in Brazil, representing the second leading cause of cancer mortality in the Southeast and South. It was among the first malignancies that have the carcinogenesis model identified.The aim of this study was to evaluate the expression of NF-KB and survivin in the progression of CRC, its relationship with molecular targets involved in cell survival [prohibitin, tumor necrosis factor (TNFR1), p53,B-catenina], invasion (metalloproteinases 2 and 9 - MMP), angiogenesis (vascular endothelial growth factor VEGF) and apoptosis (caspase 3 and method Tunnel). This is a retrospective study based on the histopathological analyses of eighteen cases of high- (HG) and low- grade dysplastic (LG) adenomas, respectively; ten cases of adenocarcinoma well, moderately and poorly differentiated, respectively, nine cases of serrated lesions e nine biopsies (control); randomly selected in the Pathology Service of the University Hospital of the Faculty of Medicine of Ribeirão Preto, University of São Paulo from 2000 to 2009. Tissue microarray were constructed to represent the cases of adenocarcinomas and five cases of adenomas > 1cm in diameter. Detection of NF-KB was performed by the Southwestern immunohistochemistry method. We evaluated immunohistochemical expression of survivin, prohibitin, TNFR1, p53, B- catenin, MMPs 2 and 9, VEGF, caspase 3 and method Tunnel. We did not observe immunohistochemical expression of NF-KB in 70% of cases of adenocarcinomas, in 72% of HG adenomas and 89% of lesions serrated; staining was positive in 66% and 56% of cases of LG adenoma and control, respectively. Expressions of survivin, cytoplasmic prohibitin, TNFR1, p53, MMPs 2 and 9 were increasing in adenoma-carcinoma sequence, without apparent modulation by NF-KB. Survivin suppressed action of caspase 3, except in BG adenomas and control, with low levels of apoptosis to the tunnel. Serrated lesions and control showed low expression of TNFR1 and cytoplasmic prohibitin, the absence of staining of p53 and MMPs2 and 9, except for one control. We identified nuclear staining of prohibitin in poorly differentiated adenocarcinomas, HG and LG adenomas. Expression of p53 was related to the grade of dysplasia in adenomas and deregulation of survivin.The expression of the cytoplasmic and nuclear B-catenin was observed in adenocarcinoma, HG and LG adenoma. Serrated lesions exhibited cytoplasmic expression in 44% of cases. Control group exhibited preserved expression of B-catenin. It was identified VEGF expression in adenocarcinomas, related to the loss of cellular differentiation, metastasis, not correlated with NF-KB. According to our results, we suggest that deregulation of catenin is possible responsible for the inhibition of NF-KB besides their participation in the deregulation of survivin with p53.Serrated lesions exhibited no evidence suggestive of inhibition of NF-KB by B-catenin. Survivin emerges as a potential therapeutic target in the treatment of CRC due to their anti-apoptotic properties, confirming previous studies.

O carcinoma epidermóide é a neoplasia maligna que ocorre com maior freqüência na boca. Os pacientes portadores desta neoplasia ainda apresentam um pobre prognóstico com índices de sobrevida, em cinco anos, variando de 20 a 40% em vários estudos. Um grande número de trabalhos tem sido direcionado para identificar marcadores que auxiliem no direcionamento do tratamento e melhorem o prognóstico. A metalotioneína (MT) é uma proteína de baixo peso molecular, com alto conteúdo de cisteína e que está associada à resistência neoplásica a várias modalidades de tratamento, e que por isso tem sido estudada como fator prognóstico em uma variedade de neoplasias malignas humanas. O Fator Nuclear B desempenha um importante papel na ativação de genes que estão relacionados à imunidade, inflamação, sobrevida, apoptose, proteção celular à radiação e à quimioterapia. A proteína serina/treonina quinase Akt é um alvo downstream da quinase 3-fosfaditilinositol, desempenhando um importante papel na proliferação e no bloqueio da apoptose de células cancerígenas. Neste estudo, nós examinamos a expressão das proteínas MT, NF-kB e pAKT em 51 casos de carcinomas epidermóides de boca, através de imunoistoquímica, com a finalidade de investigar suas influências prognosticas, assim como estudar as correlações entre alguns fatores clínicos com a sobrevida. Os resultados mostraram uma associação estatisticamente significante entre a expressão pAkt e NF-kB e entre MT e NF-kB. Ao lado disso, nossos resultados mostraram que a expressão de pAkt está associada a um pior prognóstico. Nossos resultados, portanto, sugerem que a proteína pAkt pode ter implicações terapêuticas em carcinomas epidermóides de boca. / Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the most frequent malignant tumor of the oral cavity. In spite of improved therapeutic procedures, patients with OSCC in advanced stage generally present a poor prognosis, with an overall 5-year survival rate that ranges from 20% to 40%. An extensive effort has started to identify features of the oral tumors that predict treatment response and prognosis. The metallothionein (MT), a low-molecular weight protein with high cysteine content, seems to be related to neoplastic resistance to oncologic treatment and therefore has been studied as a prognostic factor for a variety of human malignant tumors. The nuclear factor B (NF-B) plays an important role in the activation of the genes that code for immunity, survival, inflammation, apoptosis and in the cell protection for radiation and chemotherapy. The serine/threonine protein kinase Akt is a downstream target of phosphatidylinositol-3-kinase and it plays a key regulator of cancerous cell growth. Therefore, we have examined the MT, NF-kB and pAkt expression in 51 samples of oral squamous cell carcinoma by immunohistochemistry in order to investigate their prognostic influence on oral cancer, as well as studying the correlations between clinical factors and patient survival. The results showed a significant association between pAkt and NF-kB and between MT and NF-kB expression in tumor tissue. Besides pAkt over-expression was found in OSCC clinical samples and its expression was significantly associated with a poor overall patient survival. In conclusion, our findings suggested that pAkt expression may have therapeutic implications in squamous cell carcinoma.

A obesidade é um estado inflamatório crônico. As estatinas têm efeito antiinflamatório e podem afetar a homeostase glicêmica. Estudos, nesse sentido são contraditórios e pouco se sabe sobre os mecanismos moleculares envolvidos. Este estudo verificou em animais obesos por glutamato monossódico (MSG) que além de apresentaram resistência à insulina in vivo, o tecido adiposo branco (TAB) desses animais mostrou aumento de infiltração de macrófagos, fosforilação de IKK-a/b, expressão de mRNA de TNF-a and IL-6, e redução de mRNA e proteína de GLUT4. O tratamento com atorvastatina por 4 semanas restabeleceu a sensibilidade à insulina in vivo, reduziu a inflamação e restabeleceu a expressão de GLUT4 no TAB dos animais obesos. Adicionalmente, esse trabalho encontrou sítios de ligação de NF-kB no promotor do gene GLUT4, sugerindo ligação entre resistência à insulina e inflamação. Em conclusão, a obesidade induzida por MSG em camundongos acompanha-se de resistência à insulina in vivo e atividade inflamatória crônica no tecido adiposo, com prejuízo da expressão de GLUT4. A atorvastatina melhorou esses aspectos, sugerindo que essa estatina tenha efeitos antiinflamatórios que podem melhorar a resistência à insulina na obesidade. / Obesity is a chronic inflammatory state. Statins have anti-inflammatory effects and may affect glucose homeostasis; therefore, few are known about the molecular mechanisms. Considering that inflammation contributes to insulin resistance, the aim of the present study was to investigate if atorvastatin treatment has anti-inflammatory, and consequently insulin sensitization action in white adipose tissue (WAT) of obese mice. WAT of insulin-resistant obese mice showed increased macrophage infiltration, IKK-a and IKK-b phosphorylation, TNF-a and IL-6 mRNA expression and decreased GLUT4 mRNA and protein expression. Atorvastatin restored whole-body insulin sensitivity, decreased macrophage infiltration and normalized IKK-a/b phosphorylation, TNF-a, IL-6 and GLUT4 mRNA and GLUT4 protein to control levels. Moreover, NF-kB binding sites were found in GLUT4 gene promoter, pointing out an association between insulin resistance and inflammation. Together, atorvastatin anti-inflammatory effects on WAT may be important to its local and whole-body insulin sensitization effects.