Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this study was to evaluate acute and subacute renal and hepatic toxicity of the oral administration of tepoxalin in cats submitted to hypotension with isoflurane. Eighteen adult male mongrel cats were used in this study, weighing between 3 and 5 kg and clinically healthy. The animals were divided into three groups, which were anesthetized and submitted to hypotension with isoflurane (CON), or which, in addition, tepoxalin was administered two hours prior to the hypotension procedure (PRE) or after the hypotension procedure (POS). The animals from groups PRE and POS also received the same doses of tepoxalin every 24 hours, during the five days following the procedure. In order to achieve a condition of moderate hypotension, animals were induced and maintained with isoflurane in variable concentration, for maintenance of mean arterial pressure (MAP) between 45 and 60 mmHg, during 60 minutes. Complete blood count and serum concentrations of alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (FA) and urea (U) were evaluated at baseline and 24 hours, 48 hours and 7 days after hypotension. Serum concentration of creatinine (Cr), fractional excretion of sodium (FENa) and urinary concentrations of Cr, gamma-glutamyl transferase (GGT), proteinuria and albuminuria were evaluated at baseline and 24 hours, 48 hours and 7 days after hypotension. The model chosen was efficient in maintaining the proposed condition of hypotension. No physiological changes were observed in complete blood count, serum biochemistry profile (ALT, FA, U and Cr), FENa and urinary GGT. An increase in urine protein-creatinine ratio was observed in CON and PRE at 24 and 48 hours after hypotension. Urine albumin-creatinine ratio showed increase in CON at 24 hours and maintained elevated values with regard to the other groups until 7 days after hypotension. The authors conclude that administration of tepoxalin does not cause changes in hepatic parameters, urea, creatinine, fractional excretion of sodium and urinary GGT in cats submitted to anesthetic hypotension. However, there is a risk of mild renal injury by administering the drug prior to the hypotensive procedure. / Este estudo objetivou avaliar a toxicidade renal e hepática, aguda e subaguda, da administração oral da tepoxalina em gatos submetidos à hipotensão com isofluorano. Foram utilizados 18 gatos, machos, adultos, sem raça definida, com peso entre 3 e 5 kg e comprovadamente hígidos. Os animais foram alocados em três grupos, os quais foram anestesiados e submetidos à hipotensão com isofluorano (CON), ou que ainda receberam tepoxalina duas horas antes do procedimento de hipotensão (PRÉ) ou após a recuperação anestésica do procedimento de hipotensão (PÓS). Os animais dos grupos PRÉ e PÓS também receberam as mesmas doses de tepoxalina a cada 24 horas, durante cinco dias pós procedimento. Para a caracterização de um quadro de hipotensão moderada, os animais foram induzidos e mantidos anestesiados com isofluorano em vaporização variável, para a manutenção da pressão arterial média (PAM) entre 45 e 60 mmHg durante 60 minutos. Foram avaliados hemograma e concentrações séricas de alanina amino-transferase (ALT), fosfatase alcalina (FA) e ureia (U) no período basal e 24 horas, 48 horas e 7 dias após a hipotensão. A concentração sérica de creatinina (Cr), a fração de excreção de sódio (FENa) e as concentrações urinárias de Cr, gama-glutamiltransferase (GGT), proteínas totais e albumina foram avaliadas no momento basal e 24 horas, 48 horas e 7 dias após a hipotensão. O modelo escolhido foi eficiente na manutenção do quadro de hipotensão proposto. Não foram observadas alterações fisiológicas no hemograma, bioquímica sérica (ALT, FA, U e Cr), FENa e na GGT urinária. Observou-se elevação estatística na razão proteína-creatinina na urina no CON e no PRÉ em relação ao PÓS às 24 e às 48 horas de avaliação. A razão albumina-creatinina na urina apresentou elevação estatística no CON em relação aos demais à partir das 24 horas de avaliação, mantendo essa elevação até os 7 dias de avaliação. Concluiuse que a administração de tepoxalina não causou alterações de parâmetros hepáticos, ureia, creatinina, FENa e GGT urinária em gatos submetidos à hipotensão anestésica, entretanto há o risco de ocorrência de injúria renal discreta devido à proteinúria observada no grupo em que a tepoxalina foi administrada antes do procedimento hipotensor.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This study aimed to evaluate the possible renal and hepatic toxicities, acute and subacute, of the administration of tepoxalin in dogs submitted to hypotension with isoflurane. A total of 12 dogs were used, which received 10 mg kg-1 of tepoxalin PO two hours before induction of hypotension (T) or were only submitted to hypotension with isoflurane (C). For the subacute study, animals in T were treated with tepoxalin during 5 days, following the hypotensive procedure. The dogs were submitted to hypotension (MAP= 50-60mmHg) for isoflurane in a circular circuit valve, with adjusted FR for the ETCO2 remained between 35-45mmHg. ToC was maintained between 37 and 38oC. HR, SAP, MAP, DAP, CVP, ETCO2 and ETIso were evaluated at 0, 10 and every 10 min up to 60min of hipotension. pH, PaO2, PaCO2, SaO2, HCO3-, BD, Na+, K+, Ca2+ and bleeding time evaluations were carried out before hypotension and at 30 and 60min of hipotension. For renal and hepatic evaluation, serum levels of U, Cr, ALT, alkaline phosphatase, GGT and urinary levels of GGT, Cr and GGT:Cr ratio were determined at 12h, 24h and seven days after the procedure. During the anesthetic procedure, only CVP presented elevation in relation to 0min in both groups at 50 and 60min of evaluation. In blood gas and electrolyte measurement, only Na+ presented levels below to basal at 60min in T, and this same group showed increased values at all intervals, in comparison between groups. Moreover, bleeding time was shown to be more elevated at 30min of evaluation in animals in T, when compared to the ones in C. The variables corresponding to creatinine depuration, GGT:Cr ratio and UV remained stable during the evaluations; however, urinary GGT levels presented increased values in animals in C when compared to T, at 60min of evaluation. At this same interval, urinary Cr values were elevated in T. Serum levels of ALT, alkaline phosphatase, U and Cr presented minor alterations, remaining within reference values; however, GGT presented increased values at 60min of evaluation, when compared to 0min. On the seventh day of evaluation, a reduction in leukocyte number was observed in animals in T, when compared to C. Side effects were not observed in both groups. The prior administration of tepoxalin in healthy dogs submitted to hypotension did not cause significant effects upon renal and hepatic functions. Moreover, daily administrations during five days, following the anesthetic procedure, did not alter the functions of the organs mentioned. Therefore, tepoxalin showed to be a safe NSAID to be used in healthy dogs, submitted to hypotension during anesthesia with isoflurane. / Objetivou-se avaliar as possíveis toxicidades renal e hepática, aguda e subaguda, da administração de tepoxalina em cães submetidos à hipotensão com isofluorano. Foram utilizados 12 cães, os quais receberam 10mg kg-1 de tepoxalina VO duas horas antes da indução da hipotensão (T) ou somente foram submetidos à hipotensão com isofluorano (C). Para o estudo subagudo, os animais do T foram tratados com tepoxalina, durante cinco dias, seguidos ao procedimento hipotensor. Os cães foram submetidos à hipotensão (PAM = 50-60mmHg) por isofluorano em circuito circular valvular, com FR ajustada para que o ETCO2 permanecesse entre 35-45mmHg. A TºC foi mantida entre 37 e 38ºC. Avaliaram-se FC, PAS, PAM, PAD, PVC, ETCO2, e ETIso em 0, 10 e a cada 10min até 60min da hipotensão. As avaliações de pH, PaO2, PaCO2, SaO2, HCO3-, DB, Na+, K+ e Ca2+ e tempo de sangramento foram realizadas antes da hipotensão e aos 30 e 60min da hipotensão. Para a avaliação renal e hepática foram determinados os níveis séricos de U, Cr, ALT, FA, GGT e os níveis urinários de GGT, Cr e a proporção GGT:Cr em 12h, 24h e sete dias após o procedimento. Durante o procedimento anestésico somente a PVC apresentou elevação em relação aos 0min, em ambos os grupos aos 50 e 60min de avaliação. Na mensuração dos gases sanguíneos e eletrólitos, apenas o Na+ demonstrou níveis menores que o basal aos 60min no T, e este mesmo grupo apresentou valores aumentados em todos os momentos, na comparação entre os grupos. Ainda, o tempo de sangramento foi maior aos 30min de avaliação, nos animais do T, quando comparado aos do C. As variáveis correspondentes à depuração da creatinina, razão GGT:Cr e DU permaneceram estáveis durante as avaliações, porém, os níveis de GGT urinária apresentaram valores aumentados nos animais do C, quando comparados ao T, aos 60min de avaliação. Nesse mesmo momento, os valores de Cr urinária estavam aumentados dentro do T. Os níveis séricos de ALT, FA, U e Cr apresentaram poucas alterações, permanecendo dentro dos limites de referência, porém, a GGT apresentou valores aumentados aos 60min de avaliação, comparando-se com 0min. No sétimo dia de avaliação, observou-se redução do número de leucócitos nos animais do T, quando comparados aos do C. Não foram observados efeitos colaterais em ambos os grupos. A administração prévia de tepoxalina em cães hígidos submetidos à hipotensão, não ocasionou efeitos significativos sobre as funções renal e hepática dos mesmos. Da mesma forma, administrações diárias durante cinco dias, seguidas ao procedimento anestésico, não alteraram as funções dos referidos órgãos. Portanto, a tepoxalina demonstrou ser um AINE seguro para utilização em cães hígidos, submetidos à hipotensão durante anestesia com isofluorano.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This work examined the effectiveness of Cu pre-exposition on biochemical and behavioral changes induced by Hg exposure in young rats treated subcutaneously with saline or CuCl2.2H2O (Cu 2.6 mg/kg/day) from 3 to 7 days old and with saline or HgCl2 (Hg 3.7 mg/kg/day) from 8 to 12 days old. Tissue samples from animals killed 24 h or 21 days after the end of mercury exposure (13 or 33 days old) were used to analyze of blood, liver, kidney and cerebrum δ-aminolevulinic acid dehydratase (δ-ALA-D) activity; cerebrum and cerebellum acetylcholinesterase (AChE) activity; biochemical parameters indicative of hepatic and renal toxicity; and to determination of hepatic and renal metallothionein and metal levels (Hg, Cu, Zn, Fe e Mg) in all tissues studied. The animals also were submitted to behavioral tasks: negative geotaxis task (3, 5. 7, 9, 11 and 13 days old), tail immersion (13, 20 and 27 days old), rotarod tests (25 and 30 days old) and beaker test (17 to 20 days old). Mercury exposure reduced body and cerebrum and increased kidney weight; inhibited the hepatic and renal δ-ALA-D, cerebellum AChE and serum LDH activity; and increased serum urea and creatinine and hepatic MT levels at 13 days. The Hg effect persisted on body and renal weight, renal δ-ALA-D activity and urea levels checked after 33 days. Still, Hg exposure caused accumulation of this metal in all tissues analyzed; increased hepatic Zn and Fe levels; and decreased renal Fe and increased Cu levels at 13 days. The effect persisted on hepatic Hg levels; and renal Hg and Fe levels. In addition, a decrease in the liver weight and renal Mg levels; and increase in the cerebrum and cerebellum Zn levels were observed only at 33 days. In behavioral tasks, rats exposed to Hg presented impartment in motor function and muscular strength verified in the negative geotaxis task and beaker test. The Cu effectiveness as preventive treatment was immediate on parameters such as cerebellum AChE activity, serum creatinine levels, Hg content and homeostasis of hepatic Fe levels. The prevention of altered parameters as body, Kidney and liver weight, renal δ-ALA-D activity, serum urea levels and homeostasis of renal Fe and Mg levels were verified at 33 days. Behavioral changes were completely prevented by Cu pre-exposure. Moreover, Cu pre-exposure caused an important redistribution of Hg decreasing hepatic and sanguine Hg levels and increasing renal levels of 13-day-old rats. This effect occurred in parallel with an increase in MT levels in liver and kidney, suggesting that hepatic MT can bind to Hg and transporting this metal to the kidney in order to be excreted. The results of the present study suggest that Cu can be considered as potential preventive therapeutic agent against Hg toxicity, even when were evaluated later. / Este trabalho investigou o efeito preventivo do cobre contra as alterações bioquímicas e comportamentais induzidas pelo mercúrio em ratos tratados subcutaneamente com salina ou CuCl2.2H2O (Cu 2,6 mg/kg/dia) do 3o ao 7o e com salina ou HgCl2 (Hg 3,7 mg/kg/dia) do 8o ao 12o dia de idade. Amostras teciduais de animais mortos 24 h ou 21 dias após o término da exposição ao mercúrio (13 ou 33 dias de idade) foram utilizadas para a análise da atividade das enzimas δ-aminolevulinato desidratase (δ-ALA-D) de sangue, fígado, rim e cérebro; acetilcolinesterase (AChE) de cérebro e cerebelo; parâmetros bioquímicos indicativos de toxicidade hepática e renal; e para a quantificação dos níveis de metalotioneínas (MT) hepática e renal e de metais (Hg, Cu, Zn, Fe e Mg) nos diferentes tecidos. Os animais foram submetidos às tarefas comportamentais: geotactismo negativo (3, 5, 7, 9, 11 e 13 dias de idade), imersão da cauda (13, 20 e 27 dias de idade), teste do béquer (17 aos 20 dias de idade) e locomoção forçada em cilindro giratório (25 e 30 dias de idade). A exposição ao mercúrio reduziu o peso corporal e cerebral e aumentou o peso renal; inibiu a atividade das enzimas δ-ALA-D hepática e renal, AChE de cerebelo e LDH sérica; e aumentou os níveis de uréia e creatinina sérica e MT hepática aos 13 dias. O efeito do mercúrio persistiu sobre o peso corporal e renal, a atividade da δ-ALA-D renal e níveis de uréia verificados aos 33 dias. Ainda, a exposição ao mercúrio causou um acúmulo deste metal em todos os tecidos analisados; aumentou os níveis de Zn e Fe hepático; e diminuiu os níveis de Fe e aumentou os níveis de Cu renal aos 13 dias. O efeito persistiu sobre os níveis de Hg hepático e sobre os níveis de Hg e Fe renal. Além disso, um decréscimo no peso de fígado e nos níveis de Mg renal e um aumento nos níveis de Zn em cérebro e cerebelo foram observados somente aos 33 dias. Em relação às tarefas comportamentais, ratos expostos ao Hg apresentaram prejuízo na função motora e força muscular verificados nos testes do geotactismo negativo e teste do béquer. A eficiência do cobre como tratamento preventivo foi imediata em parâmetros como atividade da AChE de cerebelo, níveis de creatinina sérica, conteúdo de Hg e homeostase dos níveis de Fe hepático. A prevenção das alterações sobre o peso corporal, renal e hepático, atividade da -ALA-D renal, níveis de ureia sérica e homeostase dos níveis renais de Fe e Mg foram observados aos 33 dias. Alterações comportamentais foram totalmente prevenidas. Além disso, a pré-exposição ao cobre causou uma redistribuição do mercúrio, decrescendo os níveis de Hg hepático e sanguíneos e aumentando os níveis renais aos 13 dias. Este efeito ocorreu em paralelo a um aumento dos níveis de MT hepática e renal, sugerindo que a MT hepática pode ligar-se ao Hg e transportar o metal tóxico para o rim a fim de ser excretado. Os resultados do presente estudo sugerem que o cobre pode ser considerado um potencial agente terapêutico em casos de intoxicação por mercúrio, mesmo quando avaliado tardiamente.

Made available in DSpace on 2016-01-26T12:51:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 rosasoubhia_tese.pdf: 792706 bytes, checksum: bba71696e22270729d09c3130cc047eb (MD5) Previous issue date: 2005-05-25 / Introduction: Tacrolimus (FK 506) is a potent immunosuppressive drug that may cause nephrotoxicity decreasing the renal blood flow (RBF) and glomerular filtration rate (GFR). Conventional non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) may cause nephrotoxicity, interfering with renal hemodynamics and fluid and eletrolyte homeostasis. Recently, new selective COX-2 inhibitors have been developed producing less side effects (gastric, cardiac and renal) related to COX-1 inhibition. The increasing use of FK 506 and the intensive use of NSAIDs with analgesic or ani-inflammatory purposes, increases the possibility of a drug combination, potentiating the nephrotoxic risk of the two drugs. Objective : Compare the renal function of rats receiving combination therapy with FK and a non-selective COX inhibitor, sodium diclofenac (SD) with those receiving FK and a selective COX-2 inhibitor, rofecoxib (RO). Material and Methods : Male Munich-Wistar rats receiving a low sodium diet (0.06%) for 7 days and gavage treatment for 7 days with FK (2 mg/kg/day), SD (10 mg/kg/day), RO (3 mg/kg/day), FK+SD, FK+RO and vehicle (control) were used. Glomerular filtration rate (GFR, inulin clearance, ml/min/100g); renal blood flow (RBF, Doppler ultrasound, ml/min); mean blood pressure (MBP, intracarotid probe, mmHg); renal vascular resistence ( RVR, mmHg/ml/min); hematocrit (Htc); urinary volume ( UV, &#956;l/min); solute clearance; renal histology; animal weight (g) and FK serum concentration (SCFK, ng/ml) were assessed. Results are presented as a mean±standart deviation and compared by ANOVA followed by Student-Neuman-Keuls test. Results : The GRF of the SD group was 0.98±0.03, RO 1.06±0.04 and FK 0.99±0.06 similar to control values (1.10±0.05). GRF values decreased in the FK+RO (0.86±0.06;p<0.05 vs RO and Control) and FK+SD (0.63±0.06;p<0.001 vs control, FK and SD groups and p<0.01 vs FK+RO) groups. RBF, MBP, RVR and Htc values were similar in all groups. Diuresis was lower in the groups with drug combination, but there was a statistically significant difference only between FK+SD and RO groups (8.38±0.46 vs 12.99±1.22;p<0.05). There were no significant histological chan ges in the treatment groups. The FK+SD group showed statistically significant weigth changes (-18±5) when compared to the Control and RO groups (6±2 and 5±2, respectively; p<0.001) and to the SD an FK+RO groups (0.2±4 and 1±2, respectively; p<0.01). SCFK was significantly decreased (p<0.05) for FK+SD and FK+RO (1.7±0.3 and 1.8±0.4) groups when compared to the FK group (3.2±0.4. Conclusions: The combination of FK and a non-selective COX inhibitor significantly decreased GFR regardless of a RBF decrease or RVR increase, and is probably a result of Kf decrease. The trend to antidiuresis was similar for the combination of FK with both classes of NSAIDs. FK combined to a non-selective COX inhibitor caused a mild systemic toxicity when compared with the COX-2 selective inhibitor. Serum FK concentrations were significantly lower in NSAIDs treated animals. / Introdução: O tacrolimus (FK 506) é uma potente droga imunossupressora, pode causar nefrotoxicidade aguda com diminuição do fluxo sanguíneo renal (FSR) e ritmo de filtração glomerular (RFG). Os antiinflamatórios não-hormonais (AINHs) convencionais podem causar nefrotoxicidade, interferindo na hemodinâmica renal e na homeostase de fluidos e eletrólitos. Recentemente surgiram novas drogas do grupo coxib que são inibidores seletivos da COX-2, e portanto teriam menos efeitos colaterais relacionados à inibição da COX-1 (gástricos, cardíacos e renais). O crescente uso do FK 506 e o intenso uso de AINHs com finalidade analgésica e ou antiinflamatória aumenta a possibilidade de utilização em conjunto, potencializando o risco de nefrotoxicidade das duas drogas. Objetivo: Comparar a função renal de ratos sob os efeitos do uso simultâneo do FK e de um inibidor não-seletivo da COX, o diclofenaco sódico (DS) e do FK e de um inibidor seletivo da COX-2, o rofecoxib (RO). Materiais e Método: Utilizaram-se ratos Munich-Wistar machos em dieta hipossódica (0,06%) por 7 dias e tratamento por gavagem por 7 dias com FK (2 mg/kg/dia), DS (l0mg/kg/dia), RO (3mg/kg/dia), FK+DS, FK+RO e veículo (Contr). Aferidos ritmo de filtração glomerular (RFG, depuração de inulina, ml/min/l00g); o fluxo sanguíneo renal (FSR, ultrasom Doppler, ml/min); a pressão arterial média (PAM, probe intracarotídeo, mmHg); a resistência vascular renal (RVR, mmHg/ml/min); hematócríto (Ht); o volume urinário (VU, pl/min); a depuração de solutos; a histologia renal; o peso dos animais (g) e a concentração sanguínea de FK CSFK, ng/ml). Os resultados são apresentados com médiaserro padrão da média e comparados por ANOVA seguido do teste Student-Neuman-Keuls. Resultados: O RFG do grupo DS foi 0,980,03, do RO foi 1,060,04 e do FK 0,990,06 similares ao controle (1,100,05). Houve queda do RFG nos grupos FK+RO (0,860,06;p<0,Os vs RO e Contr) e FK+DS (0,630,06;p<0,001 vs Contr,DS, RO e FK; p<0,01 vs FK+RO) Nota de Resumo O FSR, a PAM, a RVR e o Ht foram semelhantes em todos os grupos. A diurese foi menor nos grupos com associação de drogas, mas houve diferença estatisticamente significante apenas entre os grupos FK+DS e RO (8,380,46 vs l299l,22;p<0,05). Não ocorreram modificações histológicas significativas nos grupos estudados. O grupo FK+DS apresentou variação de peso (-185) estatisticamente significante em relação aos grupos Contr 62 e RO 52 (p<0,001) e DS 0,24 e FK+RO -12 (p<0,01). A CSFK diminuiu significativamente (p<0,05) para os grupos FK+DS e FK+RO (1,70,3 e 1,80,4) em relação ao grupo FK (3,20,4). Conclusões: A associação do FK com um inibidor não-seletivo da COX causou diminuição mais acentuada do RFG independentemente da diminuição do FSR ou aumento da RVR, sendo provavelmente decorrente da diminuição do Kf. A tendência à antidiurese foi similar para a associação do FK com as duas classes de AINHs. O FK associado com um inibidor não-seletivo da COX causou discreta toxicidade sistêmica quando comparado com inibidor seletivo da COX-2. Nos animais tratados com AINHs, as concentrações sanguíneas do FK foram significativamente menores.