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Caracterização molecular de espécies de Pratylenchus que ocorrem no Brasil e a reação de acessos de milho a P. zeae e P. brachyurus

Andrade, Ednalva Patrícia de 28 July 2010 (has links)
Tese (doutorado)—Univesidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, 2010. / Submitted by Rafael Barcelos Santos (rafabarcelosdf@hotmail.com) on 2011-07-04T19:15:07Z No. of bitstreams: 1 2010_EdnalvaPatriciadeAndrade ok.pdf: 799260 bytes, checksum: f7ae8a737204429cc9cb37d00ab49f31 (MD5) / Approved for entry into archive by Elna Araújo(elna@bce.unb.br) on 2011-07-14T21:33:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_EdnalvaPatriciadeAndrade ok.pdf: 799260 bytes, checksum: f7ae8a737204429cc9cb37d00ab49f31 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-14T21:33:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_EdnalvaPatriciadeAndrade ok.pdf: 799260 bytes, checksum: f7ae8a737204429cc9cb37d00ab49f31 (MD5) / A cultura do milho é de grande importância econômica para o Brasil, principalmente por ser usada em rotação de cultura com a cultura da soja. Estudos têm sido feitos no sentido de buscar genótipos resistentes a várias doenças. O milho é suscetível a várias doenças, principalmente aquelas causadas por fungos. Entre os patógenos de solo estão os nematoides. As espécies mais danosas à cultura do milho são aquelas pertencentes ao gênero Pratylenchus. No Brasil, P. brachyurus e P. zeae, são os nematóides mais importantes à cultura do milho, aumentando em até duas vezes os custos de produção. Apesar de sua relevante importância, nematóides do gênero Meloidogyne spp. são os mais estudados. Portanto, há a necessidade de mais estudos sobre as espécies Pratylenchus zeae e P. brachyurus, as mais comumente associadas à cultura do milho. A caracterização destas espécies tem sido feita através da morfologia, sendo essa em alguns casos difícil e laboriosa. Por isto, a região ITS (Internal Transcribed Sequence) (ITS) do Ribosomal Desoxiribonucleic Acid (rDNA) tem sido bastante utilizada para a caracterização molecular ou para estudos filogenéticos e evolucionários de nematoides. Neste trabalho, foram caracterizadas por meio da Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Polymorphism (PCR-RFP) populações de P. zeae, P. coffeae, P. jaehni, P. penetrans e P. brachyurus, oriundas de diferentes regiões geográficas do País. As análises foram conduzidas usando as enzimas de restrição DdeI, HindIII, HpaII e PstI. Os produtos amplificados por PCR revelaram fragmentos de DNA de 750 a 1200 pb. A técnica RFP mostrou a existência de variações interespecíficas, mas não revelaram variações intraespecíficas entre as populações estudadas de cada espécie. Outro objetivo deste estudo foi avaliar a reação de 18 linhagens e híbridos de milho aos nematoides P. brachyurus e P. zeae e avaliar a reprodução dessas duas espécies de nematoides, sob condições de telado. As plantas foram inoculadas individualmente com aproximadamente 800 nematoides. Sessenta e dois dias após a inoculação determinou-se a capacidade reprodutiva dos nematoides, estimando-se o fator de reprodução(FR=Pf/Pi, sendo Pf a população final e Pi a população inicial de nematóides). O FR mostrou que, das plantas inoculadas com P. brachyurus, apenas a linhagem 521550 foi considerada suscetível, enquanto que, para P. zeae, os acessos 531162, 262841-1-4-1, 521550 e BRS3025 foram suscetíveis. Quanto à reprodução dos nematoides, demonstrada pelo FR, notou-se que a multiplicação de P. zeae foi significativamente superior à apresentada por P. brachyurus. O uso de espécies cultivadas resistentes aos nematoides das lesões radiculares em sistemas de rotação de culturas previne danos futuros em espécies mais suscetíveis. Portanto, os híbridos de milho avaliados apresentam grande potencial para semeadura em áreas infestadas por P. brachyurus e P. zeae, pois permitem taxas restritas de multiplicação do nematoide. Os resultados mostraram que a maioria das linhagens avaliadas são materiais promissores a serem usados em programas de melhoramento, visando a obtenção de híbridos resistentes. Porém, mais estudos devem ser realizados para corroborar os resultados obtidos neste trabalho. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Maize is a crop of great economic importance for Brazil, mainly because it is used in crop rotation with soybeans. Studies have been carried out in search for resistant genotypes to various diseases. As in other crops, maize is susceptible to various diseases, especially those caused by fungi, such as stalk rot and ear rot. Seed borne pathogens and soil pathogens are worth mentioning because of their role in reducing germination and seedling emergence. Among these pathogens are soil nematodes. The species of nematode that more frequently attack maize crop are those belonging to the genus Pratylenchus. Pratylenchus brachyurus and P.zeae are the most damaging nematodes to maize, and the control of nematodes increases up to twice the cost of yield. However, in maize, most studies focus on root knot nematodes(Meloidogyne spp.). Therefore, there is a need for further studies on P. zeae and P. brachyurus, the most commonly species associated with maize. Characterization of these species is usually accomplished by the morphology, which is in some cases difficult and laborious. Therefore, the region ITS (Internal Transcribed Sequence) (ITS) of the Ribosomal Desoxiribonucleic Acid (rDNA) has been widely used for molecular characterization, or phylogenetic and evolutionary studies of nematodes. In this work, were characterized by Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Polymorphism (PCR-RFP) distinct populations of Pratylenchus species most commonly found in Brazil, P. zeae, P. coffeae, P. Jaehni, P. penetrans and P. brachyurus from different geographical regions through the country. Analyses were conducted using the restriction enzymes DdeI, HindIII, PstI and HpaII. The PCR amplified products of ITS region revealed differences in size of molecular weight, ranging approximately from 750 to 1200 bp. RFP analysis showed the existence of interspecific variation, but did not reveal intraspecific variation among populations of each species. Another objective of this study was to evaluate the reaction of 18 breeding lines and hybrids of maize to the nematodes P. brachyurus and P. zeae, and to evaluate the reproduction of both nematode species under greenhouse conditions. Plants were individually inoculated with 800 nematodes. Sixty-two days after inoculation it was determined the reproductive ability of the nematodes, estimating the reproduction factor (RF = Pf / Pi, where Pf is the final population and Pi is the initial population of nematodes). According to FR, only breeding line 521550 was considered susceptible, while for P. zeae access 531162, 262841-1-4-1, 521550 and BRS3025 were susceptible. With respect to nematode reproduction, as demonstrated by FR, it was noted that the multiplication of P. zeae was significantly higher than that by P. brachyurus. The use of resistant species to the nematode in systems of crop rotation prevents injury and future damages on more susceptible species. Therefore, the hybrids evaluated represents potential for sowing in areas infested by P. brachyurus and P. zeae, because they allow restricted rates of nematode multiplication. Results showed that most of the lines evaluated constitute promising source of materials for use in breeding programs to obtain resistant hybrids. However, further studies should be performed to corroborate the results obtained in this work.
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Contribuição dos fungos micorrízicos arbusculares na indução à resistência do tomateiro a Meloidogyne incognita raça 2. / Contribution of arbuscular mycorrhizal fungi in inducing resistance of tomato to Meloidogyne incognita race 2.

Freitas, Emanuel Dias January 2013 (has links)
FREITAS, E. D. Contribuição dos fungos micorrízicos arbusculares na indução à resistência do tomateiro a Meloidogyne incognita raça 2. 2013. 71 f. Dissertação (Mestrado em Agronomia/Solos e Nutrição de Plantas) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-08-19T19:37:40Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_edfreitas.pdf: 1164421 bytes, checksum: e6952e819cf0ccd26eb7c79ae0ec992e (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2014-08-27T23:06:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_edfreitas.pdf: 1164421 bytes, checksum: e6952e819cf0ccd26eb7c79ae0ec992e (MD5) / Made available in DSpace on 2014-08-27T23:06:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_edfreitas.pdf: 1164421 bytes, checksum: e6952e819cf0ccd26eb7c79ae0ec992e (MD5) Previous issue date: 2013 / Studies mycorrhizal fungi try to elucidate the contribution of microorganisms in the transport of signaling between plants compounds, since they form a network that connects the underground mycelial and plant substances are able to translocate between neighboring plants. The aim of this study was to evaluate the contribution of mycorrhizal fungi in inducing resistance of tomato to Meloidogyne incognita race 2. The experiment was conducted in a greenhouse and the experimental design was a completely randomized design, consisting of 4 treatments and 5 replicates, totaling 20 plots. Each plot was constituted by a dual system connected initial vessel containing a plant on each side of the vessel, where a plant has been called issuing (I) and one receiver (R).The treatments were derived from the combination of the potted issuing plants with and without mycorrhiza, respectively (IM + and IM-) connected the potted receiver plant with and without mycorrhiza (RM + and RM-). The experiment was conducted in two phases, phase I and phase II. It started with phase I the introduction of nematode inoculum (4000 eggs and J2 Meloidogyne incognita race 2) only at the sides of the pots containing the issuing plants with and without mycorrhiza (IM + and IM-), and those remained in contact with nematodes for 45 days. After this period, we proceeded to double the separation vessel connected. Phase II began after the separation vessel and addition of the nematode inoculum in receiver plants 45 days remaining in contact with the nematodes in the greenhouse. The results showed that issuing plants inoculated with mycorrhizal were more likely to parasitism by M. incognita race 2, with lower plant development and increased susceptibility to nematodes. The receiver plants that were in contact with the issuing plants with mycorrhiza (IM+) during the preconditioning showed better growth and lower susceptibility to M. incognita revealing thereby that were stimulated during Phase I, the activate mechanism of defense against the pathogen. / Estudos com fungos micorrízicos arbusculares tentam elucidar a contribuição desses microrganismos no transporte de compostos sinalizadores entre plantas, uma vez que, eles formam uma rede micelial subterrânea que conecta as plantas e são capazes de translocar substâncias entre plantas vizinhas. O objetivo deste estudo foi avaliar a contribuição dos fungos micorrízicos arbusculares na indução à resistência do tomateiro a Meloidogyne incognita raça 2. O experimento foi realizado em casa de vegetação e o delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado (DIC), composto por 4 tratamentos e 5 repetições, totalizando 20 parcelas. Cada parcela constituiu-se por um sistema inicial de vaso duplo conectado (VDC), contendo uma planta em cada lado do vaso, onde uma das plantas foi denominada de emissora (E) e a outra de receptora (R). Os tratamentos foram oriundos da combinação entre os vasos com plantas emissoras com e sem micorriza, respectivamente (EM+ e EM-), conectados a vasos com plantas receptoras com e sem micorriza (RM+ e RM-). O experimento foi realizado em duas etapas, fase I e fase II. Iniciou-se a fase I com a introdução do inóculo de nematóide (4000 ovos e J2 M. incognita raça 2) apenas nos lados dos vasos contendo as plantas emissoras, com e sem micorríza (EM+ e EM-), tendo estas permanecido em contato com os nematóides durante 45 dias. Após esse período, procedeu-se a separação dos vasos duplos conectados. A fase II teve início após a separação dos vasos e adição do inóculo do nematóide nas plantas receptoras, permanecendo 45 dias em contado com os nematóides em casa de vegetação. Os resultados mostraram que as plantas emissoras inoculadas com micorrizas foram mais susceptíveis ao parasitismo por M. incognita raça 2, apresentando menor desenvolvimento da planta e maior susceptibilidade ao nematoide. As plantas receptoras que estiveram em contato com as plantas emissoras com micorriza (EM+) no período de pré-condicionamento apresentaram melhor crescimento e menor susceptibilidade ao M. incognita revelando, dessa forma, que foram estimuladas durante a fase I, a acionar seu mecanismo de defesa contra o patógeno.
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Batata-doce: resistência a nematóides de galhas e caracterização físico-química de clones promissores em betacaroteno /

Santos, Adelana Maria Freitas, 1974. January 2015 (has links)
Orientador: Rumy Goto / Coorientador: Roberto Lyra Villas Bôas / Coorientador: Silvia Renata Siciliano Wilcken / Banca: Giuseppina Pace Pereira Lima / Banca: Adalton Mazetti Fernandes / Banca: Sonia Maria Nalesso Marangoni Montes / Banca: Regina Marta Evangelista / Resumo: Foram avaliados oito clones de batata-doce quanto à resistência aos nematoides formadores de galhas, produtividade e características físicas e físicoquímicas. O primeiro experimento foi realizado em casa de vegetação com delineamento experimental de blocos casualizados em fatorial 9 x 2, com oito clones (BRS Amélia, Beauregard, CNPH 1298, CNPH 1358 e CNPH 1365 de polpas alaranjadas; Canadense, Uruguaiana e CNPH 1195de polpas brancas), uma testemunha (tomate 'Rutgers') e duas épocas de plantio (verão e inverno) para três populações de nematoides de galhas: Meloidogyne enterolobii, Meloidogyne incognita e Meloidogyne javanica. Foram avaliados o fator de reprodução (FR) e a reação dos acessos (RA). O segundo experimento foi conduzido em campo com delineamento experimental de blocos ao acaso em fatorial 8 x 2, com oito clones e duas estações (primavera e verão). Foram avaliados: produtividade total (t ha-1), produtividade comercial (t ha-1), refugo (t ha-1), comprimento (cm), diâmetro (cm), massa (g), cor da película e cor da polpa. Para as avaliações químicas e bioquímicas foram utilizadas as amostras de batata-doce apenas do cultivo do verão, onde foram avaliados: pH, AT (%), SS (°Brix), ratio, açúcar total (%), açúcar redutor (%), sacarose (%), amido (%), matéria graxa (%), proteína total (%), fibra (%), umidade (%), cinzas (%), antioxidante total (%), compostos fenólicos (mg de ácido gálico.100g-1), antocianinas (mg.100g-1), carotenoides totais (mg.100g-1) e betacaroteno (mg.100g-1). No primeiro experimento, os clones CNPH 1298, CNPH 1358 e CNPH 1365 de cor de polpa alaranjada e os clones CNPH 1195, Canadense e Uruguaiana de cor de polpa branca foram resistentes a M. enterolobii e a M. incognita nas duas estações. O clone BRS Amélia foi resistente somente a M. enterolobii, e de forma semelhante, o clone Beaureg... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Eight sweet potato clones were evaluated regarding the resistance to root-knot nematodes, productivity and physical and physicochemical characteristics. The first experiment was made in greenhouse with experimental design of randomized blocks in 9 x 2 factorial, with eight clones (orange-fleshed BRS Amélia, Beauregard, CNPH 1298, CNPH 1358 and CNPH 1365; white-fleshed Canadense, Uruguaiana and CNPH 1195, one control ('Rutgers' tomato) and two growing seasons (summer and winter) for three root-knot nematode populations: Meloidogyne enterolobii, Meloidogyne incognita and Meloidogyne javanica. The reproduction factor (FR) and the accessions reaction (RA) were evaluated. The second experiment was carried out in field with experimental design of randomized blocks in8 x 2 factorial, with eight clones and two seasons (spring and summer). Total yield(t ha-1), commercial yield (t ha-1), noncommercial yield (t ha-1), length(cm), diameter (cm), mass (g), pH, TA(%), SS (°Brix), ratio, total sugar (%), reducing sugar (%), saccharose (%), starch (%), lipids (%), total protein (%), fiber (%), moisture (%), ash (%), total antioxidant (%), phenolic compounds (mg of gallic acid.100g-1), anthocyanins (mg.100g-1), skin color, flesh color, total carotenoids (mg.100g-1) and betacarotene (mg.100g-1). In the first experiment, the orange fleshed clones CNPH 1298, CNPH 1358 and CNPH 1365 and the white-fleshed clones CNPH 1195, Canadense and Uruguaiana were resistant to M. enterolobii and M. incognita in both seasons. The clone BRS Amélia was only resistant to M. enterolobii and, in a similar way, the clone Beauregard was only resistant to M. incognita in both seasons. Concerning the M. javanica, onlythe orange-fleshed clones (BRS Amélia, Beauregard, CNPH 1195, CNPH 1298, CNPH 1358 and CNPH 1365) showed resistance. In the second experiment on the yield characteristics... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Controle de Heterodera glycines e Meloidogyne spp. por gramíneas forrageiras / Control of Heterodera glycines and Meloidogyne spp. by the forage grasses

Dias Arieira, Cláudia Regina 23 July 2002 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-04-20T13:54:28Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 444486 bytes, checksum: a0f6af16b54a56fd94f05545586e301c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-20T13:54:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 444486 bytes, checksum: a0f6af16b54a56fd94f05545586e301c (MD5) Previous issue date: 2002-07-23 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A rotação de cultura tem sido o método mais eficiente em controlar os diferentes nematóides que atacam a soja. No Brasil, o milho é a cultura mais comumente usada em rotação com a soja, mas muitas das cultivares disponíveis no mercado são suscetíveis aos nematóides de galhas. Com isso, surge a necessidade de alternativas para o controle desses patógenos e, dentre as espécies que podem ser indicadas para esta rotação, as gramíneas forrageiras merecem especial atenção, uma vez que, na maioria das áreas de cultivo de soja, a pecuária é atividade comum e não requer grandes investimentos para sua implantação. No Brasil, apesar de diversas áreas de cultivo de soja serem infestadas com populações mistas de nematóides de galhas e de cisto, há escassez de trabalhos visando o controle dessas populações. Assim, o presente trabalho teve como objetivos: 1) selecionar gramíneas forrageiras para o controle de Meloidogyne incognita, M. javanica e H. glycines na soja, tanto em populações isoladas, quanto mistas; 2) observar a penetração e o desenvolvimento dos nematóides no sistema radicular das gramíneas selecionadas; 3) avaliar o efeito da incorporação da parte aérea das gramíneas sobre a população dos nematóides; 4) avaliar o efeito dos lixiviados radiculares das gramíneas sobre a eclosão de juvenis dos nematóides e; 5) avaliar o efeito de extratos radiculares sobre a eclosão dos juvenis dos nematóides. Quinze espécies de gramíneas forrageiras foram inicialmente avaliadas a fim de selecionar aquelas com maior potencial para o controle dos nematóides de soja. Brachiaria brizantha, B. decumbens, Andropogon gayanus cv. Planaltina e as cultivares de Panicum maximum foram as que apresentaram melhores resultados nos experimentos de seleção. Essas espécies foram avaliadas quanto ao controle de populações mistas de M. incognita-H. glycines e M. javanica-H. glycines e, todas elas, promoveram significativa redução nas populações dos nematóides. Quanto à capacidade de os nematóides penetrarem e se desenvolverem nas gramíneas, observou-se que apenas A. gayanus cv. Planaltina permitiu a reprodução de M. incognita e M. javanica. Nas demais espécies esses nematóides não se desenvolveram além do estádio de J2 (juvenil de segundo estádio). Heterodera glycines não se desenvolveu em nenhuma gramínea avaliada. Os lixiviados radiculares coletados a partir das gramíneas inibiram apenas a eclosão de H. glycines. Quanto à incorporação da parte aérea das plantas, em geral, não foi observado efeito adicional ao cultivo das mesmas sobre a população dos nematóides. Dos extratos obtidos a partir do sistema radicular das gramíneas, o extrato metanólico de P. maximum cv. Guiné foi o que mais reduziu a eclosão dos juvenis de M. javanica e H. glycines. O extrato de pentano, tanto de P. maximum cv. Guiné, quanto de B. brizantha, não exerceu efeito significativo sobre a eclosão dos nematóides. Dos resultados obtidos conclui-se que gramíneas forrageiras podem ser uma opção para o controle de nematóides, tanto em populações isoladas quanto mistas, sendo importante alternativa para a rotação de culturas com a soja. / The crop rotation has been the most efficient method for controlling nematodes that attack soybean. In Brazil, generally maize is used for rotation with soybean, but many of its available cultivars are susceptible to root knot nematode. This raises the necessity of finding alternatives to control this pathogen. Among the plant species suitable for this rotation, forage grasses deserve special attention, because in most soybean cultivation areas cattle grazing is a common activity and its use does not require high investment. Although large soybean cultivation areas are infested with mixed populations of root-knot and cyst nematode, there is little work regarding their control. Thus, this study was done with the following objectives: 1) select forage grasses for controlling mixed and isolated population of Meloidogyne incognita, M. javanica and H. glycines; 2) observe the penetration and the development of the nematodes in the root system of the selected grasses; 3) evaluate the effect of incorporating the aerial parts of the grasses on the population of the nematodes; 4) evaluate the effect of root leachates on the eclosion of juvenils and; 5) evaluate the effect of root extracts on the eclosion of juvenils. Of the fifteen forage grass species evaluated initially only Brachiaria brizantha, B. decumbens, Andropogon gayanus cv. Planaltina and Panicum maximum gave the best results. All these species significantly reduced nematodes in mixed populations of M incognita - H. glycine and M. javanica - H. glycine. Only A. gayanus cv. Planaltina permitted reproduction of M. incognita and M. javanica while in the other grass species these nematodes did not develop beyond the J2 stage. Heterodera glycines did not develop in any of these grass species. The root leachates collected from the grasses inhibited eclosion of H. glycines and the incorporation of the aerial parts, in general, had an additional effect on the reduction of nematode populations. The eclosion of M. javanica and M. glycines juvenils was most inhibited by the methanolic extract of P. maximum cv. Guiné roots, while the pentane extract of P. maximum cv. Guiné and of B. brizantha, did not have significant effect. The data suggest that the forage grasses can be good option to control mixed or isolated nematode populations providing an important alternative for rotation with soybean. / Tese importada do Alexandria
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Caracterização e avaliação da atividade nematicida de constituintes químicos da parte aérea de Mucuna pruriens var. utilis / Characterization and evaluation of the nematicide activity of chemical constituents of the aerial part of Mucuna pruriens var utilis

Bonilla Castañeda, Sandra Milena 24 February 2015 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-05-03T11:07:09Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1388170 bytes, checksum: c2de0df33b43c771ed4bdeb1f19fdde6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-03T11:07:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1388170 bytes, checksum: c2de0df33b43c771ed4bdeb1f19fdde6 (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Os nematoides causam grandes prejuízos em culturas agrícolas em todo o mundo. O seu controle é realizado com o uso de produtos químicos de alta toxicidade para o homem, os animais e o meio ambiente. Por isso, tem-se buscado alternativas de controle, dentre estas o uso de plantas antagônicas. Uma das plantas antagônicas mais utilizadas pertence ao gênero Mucuna. Portanto, neste trabalho foi proposto um estudo dos metabólitos secundários presentes na parte aérea e nos exsudados das raízes de Mucuna pruriens var. utilis. A identificação destes compostos foi realizada pela primeira vez utilizando-se cromatografia líquida acoplada com espectrômetro de massas com ionização por electrospray (LC-ESI-MS/MS). Os compostos identificados foram adenosina, isoschaftosideo, isovitexina, rhoifolina e luteolina. Todos os compostos isolados foram caracterizados por espectroscopia no IV, espectrometria de massas, espectroscopia de RMN de 1H e de 13 C. Tanto os extratos como as substâncias isoladas e identificadas (glutinol, estigmasterol e triacilglicerol) foram submetidas a ensaios de atividade sobre o nematoide Meloidogyne javanica um dos mais agressivos para culturas de grande valor comercial como soja, arroz, e aveia entre outras, obtendo-se como resultado uma atividade moderada. A exceção das frações que apresentam entre seus constituintes ácidos graxos, e flavonoides provenientes do extrato metanólico da parte aérea e a fração em acetato de etila proveniente dos exsudados radiculares de Mucuna pruriens apresentaram porcentagens de controle acima de 90%. Este estudo proporciona informação sobre os fitoquímicos presentes em Mucuna pruriens e uma possível aplicação destes compostos no controle do nematoide das galhas, visto que estes apresentaram altas porcentagens de mortalidade para este gênero de nematoides. / The nematodes cause significant damage in economic cultures worldwide. Its control is performed by using chemicals with high toxicity for humans, animals, and the environment. Researchers have tried their control through antagonistic plants. One of the most used antagonistic plants belongs to the genus Mucuna. This work proposes a study of secondary metabolites exuded from the roots of Mucuna pruriens var. utilis, through hydroponic cultivation of the plant, the identification of compounds was performed for first time using liquid chromatography coupled to mass spectrometry with electrospray ionization (ESI-LC-MS/MS).The identified compounds have adenosine isoschaftoside, isovitexin, rhoifolin and luteoline; All isolated compounds were characterized by IR spectroscopy, mass spectrometry, H NMR and 13 C spectroscopy. Both isolated substances and extracts were identified and submitted for activity tests on the nematode Meloidogyne javanica that is one of the most aggressive for crops as soybeans and rice, obtaining as a result a moderate activity. However, except for fractions which have among their constituent fatty acids, and flavonoids from the aerial part of the methanol extract and the fraction in ethyl acetate from the root exudates of Mucuna which showed control percentages above 90%. This study provides information about phytochemicals present in Mucuna pruriens and a possible application of these compounds in the control of nematode cyst, given that they had high mortality percentages for this kind of nematodes.
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Controle biológico (Glomus etunicatum), químico (fipronil) e estudo molecular (pcr-its) do nematóide do cisto da soja / Biological (Glomus etunicatum), chemistry (fipronil) control and molecular (pcr-its) studies of cist cematodes in soybean

Benedetti, Tatiana 25 February 2005 (has links)
The studies of cist nematodes were evaluated in the greenhouse condition and in the Prof. Marcos Rubens Fries Environment and Soil Microbiology and Biology Laboratory, in the Soil Department of the Federal University of Santa Maria, in three stages. The first stage aimed to study through a survey of the presence of cyst nematodeos in soybean (NCS), in five counties, in Rio Grande do Sul state. The survey was carried out in eigth place with 28 samples with soybean culture. The counties were Espumoso, Eugênio de Castro, São Miguel das Missões and Tupanciretã. The soil samples had been processed in laboratory, and the NCS had been extracted by wet technique. It was detected presence of NCS in all five studied counties. The highest number of cysts was found in the counties of Espumoso and São Miguel das Missões. The second stage of the aimed to study the suppression of the NCS population using plants and to test the action of the fipronil on the egg hatching of NCS. Two experiments had been developed, the first with 10 treatments (without eggs of NCS and mycorrhizal, four treatments with diferents levels of eggs of NCS, 500, 1000, 2000 e 4000 eggs; with mycorrhizal; four treatment with mycorrhizal and eggs of NCS). In this experiment was observed that the presence of Glomus etunicatum fungi improved the plant grow. The study with fipronil showed significant reduction in hacthing when the eggs were exposed to the diferent concentrations of fipronil. It was observed, that the addition of small levels of fipronil can reduce the hatching in 50%. The third stage of the work was to evaluate the DNA characterization of the Heterodera glycines cists. It was obtained a good DNA extraction and experiments are carring out to do the PCR-ITS studies. / O trabalho foi conduzido em casa de vegetação e no laboratório de Microbiologia e Biologia do Solo e do Ambiente Prof. Marcos Rubens Fries, do Departamento de Solos da Universidade Federal de Santa Maria, em três etapas. A primeira etapa objetivou realizar um levantamento da presença do nematóide de cisto da soja (NCS) em cinco municípios produtores de soja no estado do Rio Grande do Sul. O levantamento foi conduzido em oito diferentes áreas com cultivo da soja, tendo 28 locais de coleta de amostras, nos municípios de Espumoso, Eugênio de Castro, Jóia, São Miguel das Missões e Tupanciretã. As amostras de solo foram processadas em laboratório e os cistos do NCS foram extraídos pela técnica de peneiramento úmido. Detectou-se a presença do nematóide nos cinco municípios estudados, sendo que o maior número de cistos foi encontrado nos municípios de Espumoso e São Miguel das Missões. A segunda etapa da pesquisa objetivou avaliar a supressão da população do nematóide do cisto da soja através de plantas micorrizadas e testar a ação do fipronil na eclosão de juvenis do nematóide. Dois experimentos foram desenvolvidos. O primeiro foi composto por 10 tratamentos (testemunha, quatro tratamentos com ovos do NCS, 500, 1000, 2000 e 4000 sem micorriza; quatro tratamentos com micorriza e ovos de NCS). Neste experimento observou-se que a presença de Glomus etunicatum beneficiou o crescimento da planta. O segundo constituiu-se de experimento com fipronil e mostrou uma significativa redução na eclosão dos ovos de NCS. Observouse que a adição de pequenas doses do fipronil foi capaz de diminuir a eclosão dos juvenis do NCS em 50%. A terceira etapa do trabalho teve por objetivo testar a caracterização do NCS via extração de DNA e técnica de PCR-ITS. Nesta etapa foi obtida uma boa extração de DNA dos cistos de Heterodera glycines e estudos estão sendo realizados para efetuar a caracterização via PCR-ITS.
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Análise da expressão de genes relacionados à resistência a Meloidogyne javanica em soja, através da técnica de PCR em tempo real

Morales, Aguida Maria Rodrigues [UNESP] 13 February 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-13Bitstream added on 2014-06-13T20:14:44Z : No. of bitstreams: 1 morales_amr_me_jabo.pdf: 2247542 bytes, checksum: 86246681e04ea55e109f11ef3ef48d68 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho teve como objetivo analisar a expressão de genes de soja envolvidos na resistência ao nematóide de galhas, Meloidogyne javanica, utilizando a técnica de PCR em tempo real (RT-PCR). Foram avaliadas raízes de soja inoculadas e não inoculadas com o nematóide. Linhagens de soja resistentes (genótipo PI595099) e suscetíveis (cultivar BRS133) e indivíduos resultantes deste cruzamento foram inoculados com juvenis do nematóide. Raízes foram coletadas após um, três e seis dias de inoculação. O RNA total foi extraído e em seguida foi feita a síntese de cDNA, para ser utilizado nas reações de PCR em tempo real. As reações para quantificação do nível de expressão relativa foram preparadas em triplicatas, e um controle endógeno, o gene RNAr 18S também foi incluído. Os resultados mostraram que comparando os indivíduos resistentes com os suscetíveis, os resistentes apresentaram maior expressão dos genes, Chs, Xet, Hs1pro-1, Sth-2. / This work objective was to analyze the expression of soybean genes involved in the resistance to the root nematode, Meloidogyne javanica, using the Real Time PCR (RT-PCR) technique. Soybean roots inoculated and not inoculated with the nematode were evaluated. Resistant soybean lineages (genotype PI595099) and susceptible lineages (cultivate BRS133) and resulting individuals of this crossing were inoculated with juvenile of the nematode. Roots were collected after one, three and six days after inoculation. The Total RNA was extracted and, afterwards cDNA synthesis was made, to be used in the reactions of Real Time PCR. The reactions for quantification relative expression level were prepared in triplicate, and an endogenous control, gene rRNA 18S, was also included. The results showed that comparing the resistant individuals with the susceptible ones, resistants showed higher expression level of the genes, Chs, Xet, Hs1pro-1, Sth-2.
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Controle de Sphenophorus levis e Conotrachelus humeropictus pelo uso combinado de nematoides e fungos entomopatogênicos / Control of sphenophorus levis and conotrachelus humeropictus by combined use of entomopathogenic fungi and entomopathogenic nematodes

Simi, Lucas Detogni [UNESP] 30 October 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-10-30Bitstream added on 2015-03-03T12:07:26Z : No. of bitstreams: 1 000813664.pdf: 1966919 bytes, checksum: 678f54a7263d985bcff3e4552123c64b (MD5) / O presente trabalho avaliou o uso combinado de fungos e nematoides entomopatogênicos contra o bicudo-da-cana-de-açúcar, Sphenophorus levis, e contra a broca do cupuaçu, Conotrachelus humeropictus. Contra S. levis, foi feita seleção de isolados de Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae em adultos da praga, e testes de uso combinado em laboratório contra as fases de larva e adulto. Em campo, em área de cana-de-açúcar infestada naturalmente com S. levis, foram realizados 5 tratamentos (nematoide Steinernema brazilense, Bio NEP®; fungo B. bassiana; combinação nematoide + fungo; inseticida químico Regent Duo® e testemunha) foi avaliada a infestação de larvas de S. levis nas soqueiras de cana-de-açúcar, antes e após um ano da aplicação. Para verificação do tipo de interação, foram coletadas amostras de solo em 3 tempos. Na pré-aplicação, após uma semana e um mês da aplicação, e avaliada a mortalidade de larvas de Galleria mellonella expostas às amostras de solo. Nos experimentos com C. humeropictus, foi feita seleção de isolados de B. bassiana em larvas de Conotrachelus psidii, usado como inseto teste. Os experimentos de campo avaliou-se a combinação de B. bassiana e S. brazilense, contra a larva de C. humeropictus. Também foi avaliada a capacidade do nematoide S. brazilense de carrear conídios de B. bassiana e M. anisopliae em solo arenoso. No resultado obtido na seleção de isolados de fungos para S. levis, IBCB 170 de B. bassiana e IBCB 383 de M. anisopliae foram os mais eficientes, promovendo 80% e 72% de mortalidade, respectivamente. No ensaio contra larva de S. levis, observou-se efeito aditivo na mistura de S. brazilense com B. bassiana, promovendo 80% de mortalidade. No ensaio contra adultos ... / This study evaluated the combined use of entomopathogenic fungi and nematodes against the sugarcane weevil, Sphenophorus levis, and against the cupuaçu fruit borer, Conotrachelus humeropictus. To S. levis, we made a strain selection of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae against adults, and a testing of combined use in laboratory in larvae and adults of the pest. In field experiments, were applied the treatments: 1) nematode Steinernema brazilense (Bio NEP®); B. bassiana; S. brazilense + B. bassiana; chemical treatment with Regent Duo®; and control treatment. We evaluated the infestation of S. levis larvae in sugarcane ratoon, before and after one year of the application. To evaluate interactions between agents, soil samplings were performed one week, and one month after application, and evaluated the mortality of Galleria mellonella larvae exposed to these soil samples. To C. humeropictus, a strain selection of B. bassiana was made on larvae of Conotrachelus psidii (used as preliminary test), and field experiments using B. bassiana and S. brazilense against larvae of C. humeropictus. We also evaluated the ability of the nematode S. brazilense carrying conidia of B. bassiana and M. anisopliae in sandy soil. The results of strain selection to S. levis, B. bassiana IBCB 170 and M. anisopliae IBCB 383 were the most efficient, providing 80% and 72% of mortality, respectively. In tests against larvae of S. levis, additive effect was observed in the treatment S. brazilense + B. bassiana, providing 80% mortality. Against adults of S. levis, the best treatment was B. bassiana + S. brazilense, causing 40% of mortality, showing additive interaction. In the field experiments, the infestation S. levis larvae in sugarcane ratoon was reduced by all treatments, except for control. The assessment of mortality of G. mellonella exposed to soils samples showed synergistic and additive effects, one week an on ...
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Busca de fontes de resistência genética à verticillium dahliae em solanum melongena, s. stramonifolium e s. scuticum e manejo da irrigação para controle da murcha de verticílio em berinjela

Cabral, Ricardo Nunes 11 August 2015 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, 2015. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2015-11-25T19:39:37Z No. of bitstreams: 1 2015_RicardoNunesCabral.pdf: 1264849 bytes, checksum: 67fb9bb2e38043a56f18a5a99386824e (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-12-21T16:19:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_RicardoNunesCabral.pdf: 1264849 bytes, checksum: 67fb9bb2e38043a56f18a5a99386824e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-21T16:19:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_RicardoNunesCabral.pdf: 1264849 bytes, checksum: 67fb9bb2e38043a56f18a5a99386824e (MD5) / A berinjela (Solanum melongena L.) éuma das hortaliças mais rústicas , porém,é suscetível a algumas doenças, principalmente fúngicas. A murcha de verticilio (Verticillium dahliae) é uma doença de manejo difícil, pois o controle curativo é impossível na prática e o preventivo nem sempre é eficaz, devido à capacidade de sobrevivência do patógeno no solo. Não há cultivares comerciais de berinjela resistentes ao Verticillium, o que torna atualmente inviável o controle por resistência genética. O manejo da disponibilidade de água no solo pode ajudar na redução da severidade da doença durante o ciclo da cultura,. Nesse contexto, o trabalho teve como objetivos a busca de fontes de resistência genética à V. dahliae em Solanum melongena, S. stramonifolium e S. scuticum e o manejo da água da irrigação para o controle da murcha de verticílio em berinjela. Foram testados genótipos de três espécies de Solanum quanto à resistência ao patógeno, em casa de vegetação, via inoculação pelo método de imersão de raízes em inóculo do patógeno (2x106 conídios/ml). A avaliação dos genótipos foi realizada 21 dias após a inoculação por uma escala de notas de 1 (planta assintomática) a 5 (planta morta), considerando sintomas foliares e escurecimento vascular. De acordo com a reação dos genótipos, estes foram classificados em resistentes ou suscetíveis, baseado no índice de doença (ID). Cerca de 35%dos genótipos de S. melongena e 15% dos genótipos de S. stramonifolium foram classificados como resistentes e demonstraram potencial para serem utilizados em futuros programas de melhoramento genético visando resistência à doença. Todavia, em S. scuticum, 100% dos genótipos foram classificados como suscetíveis. Em complemento, plantas de berinjela cv. Ciça foram transplantadas em microplots com volume de solo de 0,64 m³ e cobertura plástica, previamente infestados com V. dahliae ou sem o patógeno. Foram testados efeitos de quatro manejos de irrigação: AD90%: irrigado quando a água disponível (AD) no solo fosse reduzida para 90%, durante todo o ciclo da cultura; AD55%: e AD20%: irrigados quando a água disponível no solo fosse reduzida para 55% ou 20% durante todo o ciclo da cultura; e AD20-90%: irrigado no estádio vegetativo com 20% de água disponível e 90% no estádio de produção. A incidência de doenças, foi de 72% em solo inoculado, não tendo sido afetada pela estratégia de manejo de água. Não houve efeito significativo dos fatores avaliados sobre a altura de plantas. Entretanto, no que se refere à severidade da doença, a estratégia de manejo adotada no tratamento AD20-90% acarretou redução de 42% na severidade da doença, relativamente à média dos demais tratamentos, e menor altura da lesão provocada pelo patógeno no xilema, a qual não diferiu significativamente dos tratamentos AD55% e AD20%. A produção de massa seca da parte aérea no tratamento AD20-90% não diferiu dos demais e a produção no AD90% superior que a dos AD55% e AD20%, tanto em condições de solo inoculado quanto sem inoculação. A estratégia de manejo que se mostrou mais viável para reduzir a severidade da murcha de verticílio, sem prejudicar a produção de massa seca, foi irrigar com déficit durante o estádio vegetativo e de forma plena durante o estádio de produção. _________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The eggplant (Solanum melongena L.) is considered a rustic crop however is susceptible to some fungi diseases. Verticillium wilt (Verticillium dahliae) is difficult to control, the curative control is impossible in the field, while the preventive one is not always effective, because of the extensive survival capacity of the pathogen. There are no commercial eggplant varieties resistant to the disease, so the genetic resistance control is ineffective. The irrigation management can be helpful in reducing the disease severity during the crop cycle, but the literature presents controversial studies about the amount of water that encourage the disease. In that context, the aim of the study was to seek sources of resistance to V. dahliae in Solanum genus accessions and to evaluate the relationship between water availability in the soil and occurrence of Verticillium wilt in eggplant, in order to identify irrigation strategies that do not favor the pathogen and slow the progress of the diseaseAccession of three species of genus Solanum were evaluated as to the reaction to V. dahliae, using the method of root immersion for inoculation, and transplanted to 1.5 L pots, kept in greenhouse of National Center for Research on Vegetables – CNPH, Brasília – DF, Brazil. The evaluations were carried out 21 days after the inoculation using scale of 1 (healthy plant) to 5 (dead plant). Based on a disease index (ID) for severity values, the accessions were classified as resistant or susceptible. 34.6% of S. melongena genotypes and 15.4% of S. stramonifolium genotypes were classified as resistant, presenting potential for use in future breeding programs for resistance to the disease. S. scuticum presented 100% of susceptible genotypes. The experiment was carried out at the Experimental Station of Biology of University of Brasília, Federal District, Brazil. Eggplants, cultivar “Ciça” were transplanted into concrete tanks containing artificially inoculated soil with V. dahliae and non inoculated soil as control. The treatments consisted in irrigating the plants when the amount of available water in soil were reduced to 90% (AD90%); 55% (AD55%) and 20% (AD20%), throughout the crop cycle, and when the soil reached 20% during the vegetative stage and 90% during the production phase (AD20-90%). The treatment AD20-90% reduces in 42% the severity of the disease, compared with the average of the others treatments, and had shorter length of xylem injury caused by the pathogen, which was not significantly distinct of AD55% and AD20%. The dry matter production of shoot (except fruitage) in treatment AD20% did not differ from the others, but the production in treatment AD90% was significantly higher than AD55% and AD20%, in soil with and without inoculation. The incidence of the disease, absent in non-inoculated soil treatments, was not affected by irrigation treatments in inoculated soil. There was no significant effect of the evaluated factor on plant height. The most effective irrigation strategy to reduce Verticillium wilt, without decrease in dry matter production, was the AD20-90% scheme, where water availability is reduced in vegetative phase and sufficiently provided in the reproductive phase.
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Levantamento de nematoides entomopatogênicos em áreas agrícolas e influência da temperatura e do substrato na sobrevivência, multiplicação e armazenamento / Survey of entomopathogenic nematodes in agricultural areas and it influences of temperature and substrates on survival, multiplication and storage

Brida, Andressa Lima de [UNESP] 03 December 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2016-06-07T17:12:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-03. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-07T17:17:14Z : No. of bitstreams: 1 000865062.pdf: 678078 bytes, checksum: 5bde8907be239234d6b2680f52f26e92 (MD5) / Nematoides entomopatogênicos (NEPs) são promissores para o controle biológico de pragas. Os fatores abióticos, temperatura e os tipos de solos e substratos, influenciam a sobrevivência de juvenis infectantes em condições de armazenamento e a campo. Os objetivos do presente estudo foram: isolar e identificar espécies de NEPs coletadas em áreas de culturas florestais, anuais e frutíferas no Brasil; avaliar o período de mortalidade de lagartas de Galleria mellonella após a infecção de Heterorhabditis amazonensis IBCB 24, o período da emergência e JIs (juvenis infectantes) multiplicados durante o período de 30 dias em cinco temperaturas; avaliar a influência da temperatura na sobrevivência JIs de Steinernema carpocapsae IBCB 02 Heterorhabditis amazonensis IBCB 24 e Steinernema feltiae IBCB 47 em condições de armazenamento; avaliar a influência da luminosidade e do substrato na capacidade de infecção de juvenis dos isolados IBCB 06 Steinernema brazilense, IBCB 02 Steinernema carpocapsae, IBCB 47 Steinernema feltiae e IBCB 24 Heterorhabditis amazonensis em lagartas de G. mellonella e avaliar o uso de diferentes substratos para prolongar a sobrevivência de JIs de S. brazilense IBCB 06 e H. amazonensis IBCB 24 em condições de armazenamento. O presente estudo foi dividido em cinco capítulos. Após a coleta de dados, as espécies foram identificadas como H. amazonensis, S. rarum, M. rainai e O. tipulae. As temperaturas de 26°C e 30°C proporcionaram o menor período de tempo (três dias) para a mortalidade de lagartas de G. mellonella causadas por H. amazonensis. O menor período de tempo para a 2 emergência de JIs foi na temperatura 30°C, (9,4 dias). O número médio de JIs produzidos a 26°C (229.563) foi superior a todas as temperaturas estudadas, mas sem diferença estatística quando comparado aos JIs produzidos na temperatura de 30°C (127.157). A temperatura de 22°C (223.88 ... / Entomopathogenic nematodes (EPNs) show promising for biological control of pests. The abiotic factors, temperature, soil types and substrates, may influence the survival of infective juveniles storage and field conditions. The objectives of this study were to isolate and identify species of EPNs collected in areas of forestry, annual and fruit crops in Brazil; assess the period of mortality of larvae Galleria mellonella after infection of Heterorhabditis amazonensis IBCB 24, the emergency period and IJs (infective juveniles) multiplied during the 30-day period in five temperatures; evaluate the influence of temperature on survival IJs of Steinernema carpocapsae IBCB 02 Heterorhabditis amazonensis IBCB 24 and Steinernema feltiae IBCB 47 storage conditions; evaluate the influence of light and substrate on juvenile infection capacity of isolates IBCB 06 Steinernema brazilense, IBCB 02 Steinernema carpocapsae, IBCB 47 Steinernema feltiae and IBCB 24 Heterorhabditis amazonensis in larvae G. mellonella and evaluate the use of different substrates to prolong the survival of IJs of S. brazilense IBCB 06 and H. amazonensis IBCB 24 storage conditions. This study was divided into five chapters. After collecting data, the species were identified as H. amazonensis, S. rarum, M. rainai and O. tipulae. The at temperatures of 26°C and 30°C gave the shortest time period (three days) for the crawler mortality caused by H. amazonensis in G. mellonella. The shortest duration for emergency IJs was found at 30°C temperature (9.4 days). The average number of IJs produced at 26°C (229.563) was higher at all temperatures studied, but no statistical difference when compared to 30°C IJs produced in the temperature (127.157). The temperature of 22°C (223.886) did not differ statistically from the lower temperature ...

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