Neste trabalho empregou-se a técnica de cromatografia gasosa bidimensional abrangente (GC×GC) na análise de compostos nitrogenados presentes em frações pesadas de amostras de petróleo de águas profundas: gasóleo pesado (GOP) e resíduo de destilação à pressão atmosférica (RAT); e na análise de óleos voláteis de Eucalyptus dunnii e Psidium guajava. O detector seletivo de nitrogênio e fósforo (NPD) foi aprimorado para ser utilizado em GC×GC e aplicado às amostras de petróleo. O método desenvolvido com esse sistema (GC×GC-NPD) permitiu a análise quantitativa de compostos nitrogenados presentes no GOP e no RAT. A alta resolução e a estruturação obtida no espaço de separação para a chamada mistura complexa não resolvida (UCM – unresolved complex mixture) levaram à obtenção de resultados inéditos na identificação e quantificação destes compostos utilizando-se GC×GC-NPD e GC×GC/TOFMS (cromatografia gasosa bidimensional abrangente acoplada à espectrometria de massas por tempo de vôo). Por GC×GC-NPD foi possível quantificar o indol, alquil-carbazóis entre C0 e C6+, alquil-benzocarbazóis entre C0 e C4+, alquil-quinolinas, isoquinolinas e alquil-benzoquinolinas; com limites de detecção entre 0,16 e 8,49 pg. Por GC×GC/TOFMS foi possível identificar tentativamente alquil-indóis entre C0 e C3, alquil-carbazóis entre C0 e C8, alquilbenzocarbazóis entre C0 e C6, alquil-quinolinas entre C0 e C5, alquil-indeno-piridinas C0 e C1, alquil-indeno-quinolinas C0 e C2, alquil-benzoquinolinas entre C0 e C5, alquildibenzoquinolinas entre C0 e C4+, e alquil-tribenzoquinolinas C0. Na aplicação das técnicas cromatográficas aos óleos voláteis, foram utilizados os sistemas 1D-GC (cromatografia gasosa monodimensional) com detectores FID (detector por ionização em chama) e qMS (espectrômetro de massas com quadrupolo), e GC×GC com os detectores FID, qMS e TOFMS. Além da otimização da separação bidimensional com diversos conjuntos de colunas e condições cromatográficas, foram realizados estudos comparativos utilizando índices de retenção e espectros de massas obtidos por 1D-GC e GC×GC. No óleo de E. dunnii foram tentativamente identificados 34 compostos por 1D-GC e 112 compostos por GC×GC. Para o óleo de P. guajava, foram tentativamente identificados 43 compostos por 1D-GC e 147 compostos por GC×GC. / In the present work, comprehensive two-dimensional gas chromatography (GC×GC) was applied to analyse nitrogen containing compounds in heavy fractions from deep water petroleum samples: heavy gasoil (HGO) and atmospheric pressure distillation residue (AR); and also to analyse volatile oils from Eucalyptus dunnii and Psidium guajava. Nitrogen-phosphorus selective detector (NPD) was improved to be used in GC×GC and it was also applied to petrochemical samples. The developed method (GC×GC-NPD) was able to quantify nitrogen-containing compounds in HGO and AR. Well-structured and high resolved 2D-plots obtained from these unresolved complex mixtures (UCM) by 1D-GC, provided new analytical information when GC×GC–NPD and GC×GC/TOFMS (comprehensive two-dimensional gas chromatography coupled to time-of-flight mass spectrometer) were applied. GC×GC-NPD was able to quantify indol, alkyl-carbazoles ranging from C0 to C6+, alkyl-benzocarbazoles from C0 to C4+, alkyl-quinolines, isoquinoline, and alkyl-benzoquinolines. LODs of 0.16 to 8.49 pg for individual compounds were achieved. GC×GC/TOFMS provided tentative identification of alkyl-indols ranging from C0 to C3, alkyl-carbazoles ranging from C0 and C8, alkyl-benzocarbazoles from C0 to C6, alkyl-quinolines from C0 to C5, alkylindene- pyridines C0 and C1, alkyl-indene-quinolines C0 and C2, alkyl-benzoquinolines from C0 to C5, alkyl-dibenzoquinolines from C0 to C4+, and alkyl-tribenzoquinolines C0. The application of chromatographic techniques to volatile oils were performed with 1D-GC (one-dimensional gas chromatography) using FID (flame ionization detector) and qMS (quadrupole mass spectrometer), and also with GC×GC using FID, qMS, and TOFMS. Bidimensional separations were optimized through the use of several column sets and different chromatographic conditions. Comparative studies of retention indices and mass spectra obtained under 1D-GC and GC×GC were performed. Thirty four compounds were tentatively identified on E. dunnii volatile oil under 1D-GC conditions, and 112 compounds when GC×GC was employed. On the P. guajava volatile oil, it was possible to tentatively identified 43 compounds by 1DGC, and 147 compounds by GC×GC.

Neste trabalho empregou-se a técnica de cromatografia gasosa bidimensional abrangente (GC×GC) na análise de compostos nitrogenados presentes em frações pesadas de amostras de petróleo de águas profundas: gasóleo pesado (GOP) e resíduo de destilação à pressão atmosférica (RAT); e na análise de óleos voláteis de Eucalyptus dunnii e Psidium guajava. O detector seletivo de nitrogênio e fósforo (NPD) foi aprimorado para ser utilizado em GC×GC e aplicado às amostras de petróleo. O método desenvolvido com esse sistema (GC×GC-NPD) permitiu a análise quantitativa de compostos nitrogenados presentes no GOP e no RAT. A alta resolução e a estruturação obtida no espaço de separação para a chamada mistura complexa não resolvida (UCM – unresolved complex mixture) levaram à obtenção de resultados inéditos na identificação e quantificação destes compostos utilizando-se GC×GC-NPD e GC×GC/TOFMS (cromatografia gasosa bidimensional abrangente acoplada à espectrometria de massas por tempo de vôo). Por GC×GC-NPD foi possível quantificar o indol, alquil-carbazóis entre C0 e C6+, alquil-benzocarbazóis entre C0 e C4+, alquil-quinolinas, isoquinolinas e alquil-benzoquinolinas; com limites de detecção entre 0,16 e 8,49 pg. Por GC×GC/TOFMS foi possível identificar tentativamente alquil-indóis entre C0 e C3, alquil-carbazóis entre C0 e C8, alquilbenzocarbazóis entre C0 e C6, alquil-quinolinas entre C0 e C5, alquil-indeno-piridinas C0 e C1, alquil-indeno-quinolinas C0 e C2, alquil-benzoquinolinas entre C0 e C5, alquildibenzoquinolinas entre C0 e C4+, e alquil-tribenzoquinolinas C0. Na aplicação das técnicas cromatográficas aos óleos voláteis, foram utilizados os sistemas 1D-GC (cromatografia gasosa monodimensional) com detectores FID (detector por ionização em chama) e qMS (espectrômetro de massas com quadrupolo), e GC×GC com os detectores FID, qMS e TOFMS. Além da otimização da separação bidimensional com diversos conjuntos de colunas e condições cromatográficas, foram realizados estudos comparativos utilizando índices de retenção e espectros de massas obtidos por 1D-GC e GC×GC. No óleo de E. dunnii foram tentativamente identificados 34 compostos por 1D-GC e 112 compostos por GC×GC. Para o óleo de P. guajava, foram tentativamente identificados 43 compostos por 1D-GC e 147 compostos por GC×GC. / In the present work, comprehensive two-dimensional gas chromatography (GC×GC) was applied to analyse nitrogen containing compounds in heavy fractions from deep water petroleum samples: heavy gasoil (HGO) and atmospheric pressure distillation residue (AR); and also to analyse volatile oils from Eucalyptus dunnii and Psidium guajava. Nitrogen-phosphorus selective detector (NPD) was improved to be used in GC×GC and it was also applied to petrochemical samples. The developed method (GC×GC-NPD) was able to quantify nitrogen-containing compounds in HGO and AR. Well-structured and high resolved 2D-plots obtained from these unresolved complex mixtures (UCM) by 1D-GC, provided new analytical information when GC×GC–NPD and GC×GC/TOFMS (comprehensive two-dimensional gas chromatography coupled to time-of-flight mass spectrometer) were applied. GC×GC-NPD was able to quantify indol, alkyl-carbazoles ranging from C0 to C6+, alkyl-benzocarbazoles from C0 to C4+, alkyl-quinolines, isoquinoline, and alkyl-benzoquinolines. LODs of 0.16 to 8.49 pg for individual compounds were achieved. GC×GC/TOFMS provided tentative identification of alkyl-indols ranging from C0 to C3, alkyl-carbazoles ranging from C0 and C8, alkyl-benzocarbazoles from C0 to C6, alkyl-quinolines from C0 to C5, alkylindene- pyridines C0 and C1, alkyl-indene-quinolines C0 and C2, alkyl-benzoquinolines from C0 to C5, alkyl-dibenzoquinolines from C0 to C4+, and alkyl-tribenzoquinolines C0. The application of chromatographic techniques to volatile oils were performed with 1D-GC (one-dimensional gas chromatography) using FID (flame ionization detector) and qMS (quadrupole mass spectrometer), and also with GC×GC using FID, qMS, and TOFMS. Bidimensional separations were optimized through the use of several column sets and different chromatographic conditions. Comparative studies of retention indices and mass spectra obtained under 1D-GC and GC×GC were performed. Thirty four compounds were tentatively identified on E. dunnii volatile oil under 1D-GC conditions, and 112 compounds when GC×GC was employed. On the P. guajava volatile oil, it was possible to tentatively identified 43 compounds by 1DGC, and 147 compounds by GC×GC.

Óleos essenciais são produtos naturais produzidos no metabolismo secundário de certos vegetais, com propriedades, entre outras, de defesa contra agentes nocivos. No sul do Brasil, destacam-se duas espécies da família Asteraceae, Heterothalamus alienus e Heterothalamus psiadioides, cujas substâncias bioativas ainda são pouco estudadas quanto as suas propriedades. O objetivo do estudo foi avaliar a ação antimicrobiana desses óleos essenciais e a atividade antibiofilme do óleo essencial de H. psiadioides. Os óleos foram obtidos a partir da hidrodestilação das folhas e caracterizados por cromatografia em fase gasosa acoplada a espectrometria de massas. O espectro de ação foi avaliado contra bactérias e fungos. A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada para cocos Gram-positivos resistentes a agentes antimicrobianos, como Enterococcus faecalis resistente a vancomicina (ERV), e a ação antibiofilme foi avaliada tanto pela interferência dos componentes dos óleos sobre a aderência microbiana quanto por sua ação sobre biofilme estabelecido. Os óleos essenciais de Heterothalamus sp. são constituídos por compostos terpênicos, sendo o β-pineno o componente majoritário. Ambos foram eficazes contra as bactérias Gram-positivas e fungos avaliados, porém não inibiram as bactérias Gram-negativas. A CIM variou entre 4 – 16%, sendo que isolados ERV foram também inibidos. A ação do óleo essencial de H. psiadioides diminuiu a aderência microbiana e, em menor escala, causou disrupção do biofilme pré-formado; no entanto, não foi verificada completa inibição do biofilme. Os resultados fornecem informações importantes sobre de ação antimicrobiana desses óleos essenciais e indicam o uso potencial dessas espécies como medicinais. / Essential oils are natural substances produced on secondary metabolism of some plants, with properties, among others, of defense against harmful agents. In southern Brazil, Heterothalamus alienus and Heterothalamus psiadioides (Asteraceae) are recognized by bioactive substances that are still little studied by their properties. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of essential oils from Heterothalamus sp. and the antibiofilm action of H. psiadioides essential oils. The oils were obtained from the hydrodistillation of the leaves and characterized by gas chromatography coupled mass spectrometry. The spectrum of action was determinate against bacteria and fungi. The minimal inhibitory concentration (MIC) was evaluated for Gram-positive cocci with antimicrobial resistance, as vancomycin-resistent Enterococcus faecalis (VRE) and the antibiofim action was assessed both by interference of the components of the oils on microbial adherence and by its action on established biofilm. The essential oils consist in terpene compounds, and the β-pinene was the major component. The essential oils were effective against Gram-positive bacteria and fungi, but did not inhibit Gram-negative bacteria. The MIC range 4 to 16% and the VRE isolates were also inhibit. The action of essential oils reduced microbial adherence and disrupted de pre-formed biofilm. However, the biofilm was not completely inhibited. These findings provide important information about the antimicrobial activity of these essential oils and indicated the potential use of this species as medicinal.

O gênero Eupatorium L. (Asteraceae) apresenta muitas espécies comumente encontradas no Rio Grande do Sul e se caracteriza pela presença de óleos voláteis e outros derivados terpenoídicos entre seus metabólitos secundários. Neste trabalho, o óleo volátil de oito espécies de Eupatorium nativas do estado foi extraído por hidrodestilação em aparelho tipo Clevenger e sua composição química foi avaliada por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG/EM). As espécies analisadas foram: E. inulifolium Kunth, E. polystachyum DC, E. picturatum Malme, E. tremulum Hook. & Arn, E. ivifolium L., E. laevigatum Lam., E. casarettoi (B.L.Rob.) Steyerm., E. itatiayense Hieron. e E. gaudichaudianum DC. Os óleos voláteis de partes aéreas de E. tremulum analisados antes, durante e após a floração, aplicando-se análises multivariadas para identificar compostos com variação significativa em cada estágio de desenvolvimento da espécie. Os extratos diclorometano das mesmas espécies foram avaliados na busca de lactonas sesquiterpênicas utilizando como metodologia a mensuração da absorção característica de lactonas no espectro Infravermelho e aplicação de métodos de extração específicos para essa classe de compostos. Foi realizado fracionamento dos óleos voláteis em cromatografia em coluna aberta (CC), cromatografia flash (CC flash) e cromatografia líquida de média pressão (MPLC) com monitoramento das frações por CG/EM para o isolamento de compostos não identificados apenas por seu índice de retenção linear e espectro de massas. Utilizando essa abordagem foi isolado e identificado por seus dados espectrais de RMN um furanossesquiterpeno, 3-oxoverboccidentafurano, descrito pela primeira vez em Eupatorium. Também foi realizado o fracionamento de extratos diclorometano (E. casaretoi e E. inulifolium) em CC flash e MPLC, com monitoramento das frações por CG/EM e cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de arranjo de diodos (HPLC-DAD) na tentativa de isolamento de lactonas sesquiterpênicas. Um composto foi isolado e sua completa elucidação estrutural está em andamento. Considerando as dificuldades encontradas no processo de elucidação estrutural da molécula isolada do extrato de E. inulifolium, mesmo com a abundância de dados de ressonância magnética nuclear (RMN) 13C disponíveis para consulta, e que não foi encontrada uma base digital dedicada a lactonas sesquiterpênicas reunindo esses dados em uma plataforma facilmente acessível e utilizável, foi realizada a transposição de uma base de dados da literatura para um formato digital amigável (baseada em Excel®), com a visualização e comparação de dados facilitadas graças à utilização de formas gráficas em lugar das formas tabulares de apresentação dos espectros comuns na literatura. / The genus Eupatorium L. (Asteraceae) contains several species that are common in Rio Grande do Sul State and it is characterized by essential oils and other terpenic derivatives among its secondary metabolites. Through this survey, it was evaluated the chemical composition of the essential oil from eight species of Eupatorium natives to the State and their chemical composition was analysed by gas chromatogaphy coupled to mass spectrometry. The following species were studied: E. inulifolium Kunth, E. polystachyum DC, E. picturatum Malme, E. tremulum Hook. & Arn, E. ivifolium L., E. laevigatum Lam., E. casarettoi (B.L.Rob.) Steyerm., E. itatiayense Hieron. and E. gaudichaudianum DC. Volatile oils from aereal parts of E. tremulum were analysed before, during and after blooming. Multivariate analyses were employed in order to identify compounds showing significant variation between each developmental stage. Dichloromethane extracts of these same species were evaluated for sesquiterpene lactones by measuring the typical infrared absorption for lactones and applying extraction methods directed to this class of compounds. The essential oils were fractionated by CC, CC flash and MPLC, with fractions being monitored by GC/MS for isolation of unknown compounds, whose retention index and mass spectrum were not enough for identification. Using this approach a furansesquiterpene, 3-oxo-verboccidentafuran, described for the first time for Eupatorium, was isolated and identified based on NMR spectral data. Dichloromethane extracts (E. casarettoi and E. inulifolium) were also fractionated by CC flash and MPLC, fractions were monitored by GC/MS and HPLC-DAD aiming the isolation of sesquiterpene lactones One compound was isolated and its structural elucidation is ongoing. Considering difficulties faced in the process of structural elucidation of the compound isolated from the extract of E. inulifolium, even with plenty of NMR 13C data available for search, and considering that no digital database dedicated to sesquiterpene lactones was found, that gathers these data in an easily accessible and user friendly platform, we performed the transposition of a bibliographic database to a more user friendly digital format (baseada em Excel®), with enhanced data visualization and comparison, thanks to the use of graphical rather than the tabular spectral presentation usually found in the literature.

A espécie Poiretia latifolia Vogel pertence à família Leguminosae, nativa da região sul do Brasil, pouquíssimo estudada pela comunidade científica tanto do ponto de vista químico quanto do farmacológico. Entretanto, relata-se que contém entre seus compostos secundários cerca de 0,4% de óleos essenciais. Este trabalho visou desenvolver nanoemulsões contendo o óleo essencial de Poiretia latifolia e seus constituintes majoritários carvona e/ou limoneno e avaliar as atividades antioxidantes, antibacteriana e antifúngica do óleo e das formulações obtidas. Assim , obteve-se, pelo método de hidrodestilação, o óleo volátil de folhas frescas desta espécie em diferentes estádios de desenvolvimento (brotamento, frutificação e floração). Na análise da composição química do óleo obtido foi possível identificar 21 compostos com predominância dos monoterpenos carvona (27,69%), trans-dihidrocarvona (37,08%) e limoneno (23,23% ), seguindo-se dos compostos f3-pineno (3,31% ), e císpinocanfona sendo essa última detectável apenas nos estádios de brotamento e floração (6,08%). A determinação do equilíbrio hidrófilo-lipófiilo (EHL) para os compostos carvona e limoneno revelou os valores de 9 e 11, respectivamente. A partir do óleo essencial e seus compostos majoritários, limoneno e carvona, foi possível a obtenção de nanoemulsões utilizando-se o método de inversão de fases a temperatura ambiente de 25 °C, contendo 5% de princípio ativo e 5% de tensoativos, com tamanho médio de partícula inferior a 400 nm. A atividade antioxidante foi realizada pela metodologia do sequestro do radical DPPH, espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARs) e B-caroteno/ácido linoleico. Os resultados demonstram que o óleo de P. latifolia puro mostrou-se eficiente no ensaio de B-caroteno/ácido linoleico com valor de IC50% de 508,20 IJg/mL. Com relação à atividade antifúngica, a atividade da associação carvona + limoneno demonstrou importante atividade frente ao fungo Trichophyton rubrum, apresentando um valor de CIM de 4 IJg/mL para o sistema isolado e de 64 IJg/mL para o sistema nanoemulsionado, contendo 5% dos compostos associados na proporção de 1/1 (p/p ). Frente a estes resultados, concluise que o óleo essencial de Poiretia latifolia tem potencial para ser usado como conservante de sistemas hidrofóbicos e a associação dos compostos majoritários carvona e limoneno mostra efeito sinérgico como agente antifúngico para o controle do agente dermatofítico Trichophyton rubrum. / Poiretia /atifolia is a species belonging to the family leguminosae, native to the southern region of Brazil, very little studied by the scientific community. lt contains, among its secondary compounds, about 0.4% of essential oils. This work aimed to develop nanoemulsions containing the essential oi I of Poiretia latifolia and its major compounds carvone and I or limonene; and to evaluate the antioxidant, antibacterial and antifungal activities of the oil , major compounds and the formulations obtained. Thus, the volatile oil of fresh leaves of this species at different stages of development (budding, fruiting and flowe ring) was obtained by the hydrodistillation method. In the analysis of the chemical composition of the oil obtained, it was possible to identify 21 compounds with predominance of the monoterpenes carvone (27 .69% ), trans-dihydrocarvone (37 .08%) and limonene (23.23%), followed by ~-pinene (3.31 %), and cis-pinocan fone detectable only at the budding and flowering stages (6.08%). The determination of EHL for the carvone and limonene compounds showed values of 9 and 11 , respectively. From the essential oil and its major compounds, limonene and carvone, it was poss ible to obtain nanoemulsions using the inversion phase method at room temperature. The formulations contained 5% of active principie and 5% of surfactants, with size mean of less than 400 nm. The antioxidant activity was performed by the sequestration method of the DPPH radical, thiobarbituric acid reactive species (TBARs) and ~-carote n e I linoleic acid. The results showed that pure P. latifolia oil was efficient in the assay of ~carotenellinoleic acid with IC 50% of 508.20 ~g/ml. In relation to the antifungal activity, the activity of. the carvone and limonene association showed an important activity against the Trichophyton rubrum fungus. The MICs va lues were 4 ~glml and 64 ~g/ml , respectively, for isolated compounds and the nanoemulsified system containing 5% of limonene and carvone in the ratio of 111 (w I w). As conclusion, the essential oil of Poiretia latifolia has potential to be used as a preservative of hydrophobic systems. The major compounds carvone and limonene combination shows a synergistic antifungal effect for the contrai of the dermatophytic agent Trichophyton rubrum.

A espécie Poiretia latifolia Vogel pertence à família Leguminosae, nativa da região sul do Brasil, pouquíssimo estudada pela comunidade científica tanto do ponto de vista químico quanto do farmacológico. Entretanto, relata-se que contém entre seus compostos secundários cerca de 0,4% de óleos essenciais. Este trabalho visou desenvolver nanoemulsões contendo o óleo essencial de Poiretia latifolia e seus constituintes majoritários carvona e/ou limoneno e avaliar as atividades antioxidantes, antibacteriana e antifúngica do óleo e das formulações obtidas. Assim , obteve-se, pelo método de hidrodestilação, o óleo volátil de folhas frescas desta espécie em diferentes estádios de desenvolvimento (brotamento, frutificação e floração). Na análise da composição química do óleo obtido foi possível identificar 21 compostos com predominância dos monoterpenos carvona (27,69%), trans-dihidrocarvona (37,08%) e limoneno (23,23% ), seguindo-se dos compostos f3-pineno (3,31% ), e císpinocanfona sendo essa última detectável apenas nos estádios de brotamento e floração (6,08%). A determinação do equilíbrio hidrófilo-lipófiilo (EHL) para os compostos carvona e limoneno revelou os valores de 9 e 11, respectivamente. A partir do óleo essencial e seus compostos majoritários, limoneno e carvona, foi possível a obtenção de nanoemulsões utilizando-se o método de inversão de fases a temperatura ambiente de 25 °C, contendo 5% de princípio ativo e 5% de tensoativos, com tamanho médio de partícula inferior a 400 nm. A atividade antioxidante foi realizada pela metodologia do sequestro do radical DPPH, espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARs) e B-caroteno/ácido linoleico. Os resultados demonstram que o óleo de P. latifolia puro mostrou-se eficiente no ensaio de B-caroteno/ácido linoleico com valor de IC50% de 508,20 IJg/mL. Com relação à atividade antifúngica, a atividade da associação carvona + limoneno demonstrou importante atividade frente ao fungo Trichophyton rubrum, apresentando um valor de CIM de 4 IJg/mL para o sistema isolado e de 64 IJg/mL para o sistema nanoemulsionado, contendo 5% dos compostos associados na proporção de 1/1 (p/p ). Frente a estes resultados, concluise que o óleo essencial de Poiretia latifolia tem potencial para ser usado como conservante de sistemas hidrofóbicos e a associação dos compostos majoritários carvona e limoneno mostra efeito sinérgico como agente antifúngico para o controle do agente dermatofítico Trichophyton rubrum. / Poiretia /atifolia is a species belonging to the family leguminosae, native to the southern region of Brazil, very little studied by the scientific community. lt contains, among its secondary compounds, about 0.4% of essential oils. This work aimed to develop nanoemulsions containing the essential oi I of Poiretia latifolia and its major compounds carvone and I or limonene; and to evaluate the antioxidant, antibacterial and antifungal activities of the oil , major compounds and the formulations obtained. Thus, the volatile oil of fresh leaves of this species at different stages of development (budding, fruiting and flowe ring) was obtained by the hydrodistillation method. In the analysis of the chemical composition of the oil obtained, it was possible to identify 21 compounds with predominance of the monoterpenes carvone (27 .69% ), trans-dihydrocarvone (37 .08%) and limonene (23.23%), followed by ~-pinene (3.31 %), and cis-pinocan fone detectable only at the budding and flowering stages (6.08%). The determination of EHL for the carvone and limonene compounds showed values of 9 and 11 , respectively. From the essential oil and its major compounds, limonene and carvone, it was poss ible to obtain nanoemulsions using the inversion phase method at room temperature. The formulations contained 5% of active principie and 5% of surfactants, with size mean of less than 400 nm. The antioxidant activity was performed by the sequestration method of the DPPH radical, thiobarbituric acid reactive species (TBARs) and ~-carote n e I linoleic acid. The results showed that pure P. latifolia oil was efficient in the assay of ~carotenellinoleic acid with IC 50% of 508.20 ~g/ml. In relation to the antifungal activity, the activity of. the carvone and limonene association showed an important activity against the Trichophyton rubrum fungus. The MICs va lues were 4 ~glml and 64 ~g/ml , respectively, for isolated compounds and the nanoemulsified system containing 5% of limonene and carvone in the ratio of 111 (w I w). As conclusion, the essential oil of Poiretia latifolia has potential to be used as a preservative of hydrophobic systems. The major compounds carvone and limonene combination shows a synergistic antifungal effect for the contrai of the dermatophytic agent Trichophyton rubrum.

A família Euphorbiaceae destaca-se pela produção de compostos de importância industrial e alimentícia. Diversos representantes são de interesse devido à produção de óleos voláteis. São exemplos, espécies do gênero Croton que apresentam propriedades medicinais tais como anti-inflamatória, antimicrobiana e cicatrizante. Algumas espécies de Croton nativas do Rio Grande do Sul foram investigadas visando à análise dos óleos voláteis obtidos por hidrodestilação das partes aéreas das plantas. Foram coletadas três espécies em diversas localidades do Estado, sendo elas Croton pallidulus, C. isabelli e C. ericoides. A composição química dos óleos foi determinada por cromatografia à gás/ espectrômetria de massas. Sesquiterpenos e Monoterpenos foram os principais compostos identificados nos óleos de C. pallidulus, C. isabelli e C. ericoides. Adicionalmente, os óleos voláteis obtidos de cada espécie foram testados quanto a atividade frente a Acanthamoeba polyphaga. Tanto o óleo volátil de C. pallidulus quanto o de C. ericoides apresentaram atividade amebicida, porém este último foi mais ativo: na concentração de 0,5 mg/mL, foi capaz de inviabilizar 87% dos trofozoitos, enquanto que o óleo de C. pallidulus, na mesma concentração, inviabilizou apenas 29% dos trofozoítos. O óleo volátil de C. isabelli foi o que apresentou menor atividade, pois, numa concentração de 10 mg/mL, inviabilizou apenas 4% dos trofozoitos. Os óleos voláteis das três espécies mostraram efeito citotóxico através do método do MTT em células VERO. O óleo de C. ericoides, de maior atividade amebicida, foi também o que apresentou maior citotoxicidade. Além disso, os óleos voláteis de C. pallidulus e C. ericoides foram analisados quanto à atividade antibacteriana contra Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa usando o método de bioautografia. Verificou-se que os óleos de C. pallidulus e C. ericoides inibiram o crescimento de E. coli e S. aureus. Com relação a P. aeruginosa não houve inibição do crescimento da bactéria pelas duas espécies de Croton. / The family Euphorbiaceae has been highlighted by the production of compounds of industrial interest and importance for the food. Several representatives species are of interest due to production of volatile oils. Examples are species of Croton that have medicinal properties, such as anti-inflammatory, antifungal, antimicrobial and healing. Some species of the genus Croton, widely distributed in Rio Grande do Sul, were investigated in order to analyze the chemical composition of volatile oils obtained by hydrodistillation from the aerial parts of the plants. Three species were collected in different localities of Rio Grande do Sul, Croton pallidulus, C. isabelli and C. ericoides. The chemical composition of the oils was analyzed using gas chromatography coupled to mass spectrometry. Sesquiterpenes and Monoterpenes were the major compounds identified in the oils of C. pallidulus, C. isabelli and C. ericoides. Additionally, the volatile oils obtained from each species were tested for amebicidal activity against Acanthamoeba polyphaga. Both the volatile oil of C. pallidulus and that of C. ericoides showed activity against A. polyphaga, but the latter was more active: the concentration of 0.5 mg/mL, was able to kill 87% of trophozoites, while the oil of C. pallidulus, at the same concentration, killed only 29% of trophozoites. The volatile oil of C. isabelli was the one that showed less activity; in a concentration of 10 mg/mL, the oil killed only 4% of trophozoites. The volatile oils of the three species showed a cytotoxic effect in VERO cells determined by the MTT method. The oil of C. ericoides, the most active against the Acanthamoeba, presented also the highest cytotoxicity. .In addition, the volatile oils of C. pallidulus and C. ericoides were assayed for antibacterial activity against Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa using the bioautography method. It was found that the oils of C. pallidulus and C. ericoides inhibited the growth of E. coli and S. aureus. With respect to P. aeruginosa no inhibition of bacterial growth by both species of Croton was observed.

A espécie Poiretia latifolia Vogel pertence à família Leguminosae, nativa da região sul do Brasil, pouquíssimo estudada pela comunidade científica tanto do ponto de vista químico quanto do farmacológico. Entretanto, relata-se que contém entre seus compostos secundários cerca de 0,4% de óleos essenciais. Este trabalho visou desenvolver nanoemulsões contendo o óleo essencial de Poiretia latifolia e seus constituintes majoritários carvona e/ou limoneno e avaliar as atividades antioxidantes, antibacteriana e antifúngica do óleo e das formulações obtidas. Assim , obteve-se, pelo método de hidrodestilação, o óleo volátil de folhas frescas desta espécie em diferentes estádios de desenvolvimento (brotamento, frutificação e floração). Na análise da composição química do óleo obtido foi possível identificar 21 compostos com predominância dos monoterpenos carvona (27,69%), trans-dihidrocarvona (37,08%) e limoneno (23,23% ), seguindo-se dos compostos f3-pineno (3,31% ), e císpinocanfona sendo essa última detectável apenas nos estádios de brotamento e floração (6,08%). A determinação do equilíbrio hidrófilo-lipófiilo (EHL) para os compostos carvona e limoneno revelou os valores de 9 e 11, respectivamente. A partir do óleo essencial e seus compostos majoritários, limoneno e carvona, foi possível a obtenção de nanoemulsões utilizando-se o método de inversão de fases a temperatura ambiente de 25 °C, contendo 5% de princípio ativo e 5% de tensoativos, com tamanho médio de partícula inferior a 400 nm. A atividade antioxidante foi realizada pela metodologia do sequestro do radical DPPH, espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARs) e B-caroteno/ácido linoleico. Os resultados demonstram que o óleo de P. latifolia puro mostrou-se eficiente no ensaio de B-caroteno/ácido linoleico com valor de IC50% de 508,20 IJg/mL. Com relação à atividade antifúngica, a atividade da associação carvona + limoneno demonstrou importante atividade frente ao fungo Trichophyton rubrum, apresentando um valor de CIM de 4 IJg/mL para o sistema isolado e de 64 IJg/mL para o sistema nanoemulsionado, contendo 5% dos compostos associados na proporção de 1/1 (p/p ). Frente a estes resultados, concluise que o óleo essencial de Poiretia latifolia tem potencial para ser usado como conservante de sistemas hidrofóbicos e a associação dos compostos majoritários carvona e limoneno mostra efeito sinérgico como agente antifúngico para o controle do agente dermatofítico Trichophyton rubrum. / Poiretia /atifolia is a species belonging to the family leguminosae, native to the southern region of Brazil, very little studied by the scientific community. lt contains, among its secondary compounds, about 0.4% of essential oils. This work aimed to develop nanoemulsions containing the essential oi I of Poiretia latifolia and its major compounds carvone and I or limonene; and to evaluate the antioxidant, antibacterial and antifungal activities of the oil , major compounds and the formulations obtained. Thus, the volatile oil of fresh leaves of this species at different stages of development (budding, fruiting and flowe ring) was obtained by the hydrodistillation method. In the analysis of the chemical composition of the oil obtained, it was possible to identify 21 compounds with predominance of the monoterpenes carvone (27 .69% ), trans-dihydrocarvone (37 .08%) and limonene (23.23%), followed by ~-pinene (3.31 %), and cis-pinocan fone detectable only at the budding and flowering stages (6.08%). The determination of EHL for the carvone and limonene compounds showed values of 9 and 11 , respectively. From the essential oil and its major compounds, limonene and carvone, it was poss ible to obtain nanoemulsions using the inversion phase method at room temperature. The formulations contained 5% of active principie and 5% of surfactants, with size mean of less than 400 nm. The antioxidant activity was performed by the sequestration method of the DPPH radical, thiobarbituric acid reactive species (TBARs) and ~-carote n e I linoleic acid. The results showed that pure P. latifolia oil was efficient in the assay of ~carotenellinoleic acid with IC 50% of 508.20 ~g/ml. In relation to the antifungal activity, the activity of. the carvone and limonene association showed an important activity against the Trichophyton rubrum fungus. The MICs va lues were 4 ~glml and 64 ~g/ml , respectively, for isolated compounds and the nanoemulsified system containing 5% of limonene and carvone in the ratio of 111 (w I w). As conclusion, the essential oil of Poiretia latifolia has potential to be used as a preservative of hydrophobic systems. The major compounds carvone and limonene combination shows a synergistic antifungal effect for the contrai of the dermatophytic agent Trichophyton rubrum.

A família Euphorbiaceae destaca-se pela produção de compostos de importância industrial e alimentícia. Diversos representantes são de interesse devido à produção de óleos voláteis. São exemplos, espécies do gênero Croton que apresentam propriedades medicinais tais como anti-inflamatória, antimicrobiana e cicatrizante. Algumas espécies de Croton nativas do Rio Grande do Sul foram investigadas visando à análise dos óleos voláteis obtidos por hidrodestilação das partes aéreas das plantas. Foram coletadas três espécies em diversas localidades do Estado, sendo elas Croton pallidulus, C. isabelli e C. ericoides. A composição química dos óleos foi determinada por cromatografia à gás/ espectrômetria de massas. Sesquiterpenos e Monoterpenos foram os principais compostos identificados nos óleos de C. pallidulus, C. isabelli e C. ericoides. Adicionalmente, os óleos voláteis obtidos de cada espécie foram testados quanto a atividade frente a Acanthamoeba polyphaga. Tanto o óleo volátil de C. pallidulus quanto o de C. ericoides apresentaram atividade amebicida, porém este último foi mais ativo: na concentração de 0,5 mg/mL, foi capaz de inviabilizar 87% dos trofozoitos, enquanto que o óleo de C. pallidulus, na mesma concentração, inviabilizou apenas 29% dos trofozoítos. O óleo volátil de C. isabelli foi o que apresentou menor atividade, pois, numa concentração de 10 mg/mL, inviabilizou apenas 4% dos trofozoitos. Os óleos voláteis das três espécies mostraram efeito citotóxico através do método do MTT em células VERO. O óleo de C. ericoides, de maior atividade amebicida, foi também o que apresentou maior citotoxicidade. Além disso, os óleos voláteis de C. pallidulus e C. ericoides foram analisados quanto à atividade antibacteriana contra Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa usando o método de bioautografia. Verificou-se que os óleos de C. pallidulus e C. ericoides inibiram o crescimento de E. coli e S. aureus. Com relação a P. aeruginosa não houve inibição do crescimento da bactéria pelas duas espécies de Croton. / The family Euphorbiaceae has been highlighted by the production of compounds of industrial interest and importance for the food. Several representatives species are of interest due to production of volatile oils. Examples are species of Croton that have medicinal properties, such as anti-inflammatory, antifungal, antimicrobial and healing. Some species of the genus Croton, widely distributed in Rio Grande do Sul, were investigated in order to analyze the chemical composition of volatile oils obtained by hydrodistillation from the aerial parts of the plants. Three species were collected in different localities of Rio Grande do Sul, Croton pallidulus, C. isabelli and C. ericoides. The chemical composition of the oils was analyzed using gas chromatography coupled to mass spectrometry. Sesquiterpenes and Monoterpenes were the major compounds identified in the oils of C. pallidulus, C. isabelli and C. ericoides. Additionally, the volatile oils obtained from each species were tested for amebicidal activity against Acanthamoeba polyphaga. Both the volatile oil of C. pallidulus and that of C. ericoides showed activity against A. polyphaga, but the latter was more active: the concentration of 0.5 mg/mL, was able to kill 87% of trophozoites, while the oil of C. pallidulus, at the same concentration, killed only 29% of trophozoites. The volatile oil of C. isabelli was the one that showed less activity; in a concentration of 10 mg/mL, the oil killed only 4% of trophozoites. The volatile oils of the three species showed a cytotoxic effect in VERO cells determined by the MTT method. The oil of C. ericoides, the most active against the Acanthamoeba, presented also the highest cytotoxicity. .In addition, the volatile oils of C. pallidulus and C. ericoides were assayed for antibacterial activity against Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa using the bioautography method. It was found that the oils of C. pallidulus and C. ericoides inhibited the growth of E. coli and S. aureus. With respect to P. aeruginosa no inhibition of bacterial growth by both species of Croton was observed.

A família Euphorbiaceae destaca-se pela produção de compostos de importância industrial e alimentícia. Diversos representantes são de interesse devido à produção de óleos voláteis. São exemplos, espécies do gênero Croton que apresentam propriedades medicinais tais como anti-inflamatória, antimicrobiana e cicatrizante. Algumas espécies de Croton nativas do Rio Grande do Sul foram investigadas visando à análise dos óleos voláteis obtidos por hidrodestilação das partes aéreas das plantas. Foram coletadas três espécies em diversas localidades do Estado, sendo elas Croton pallidulus, C. isabelli e C. ericoides. A composição química dos óleos foi determinada por cromatografia à gás/ espectrômetria de massas. Sesquiterpenos e Monoterpenos foram os principais compostos identificados nos óleos de C. pallidulus, C. isabelli e C. ericoides. Adicionalmente, os óleos voláteis obtidos de cada espécie foram testados quanto a atividade frente a Acanthamoeba polyphaga. Tanto o óleo volátil de C. pallidulus quanto o de C. ericoides apresentaram atividade amebicida, porém este último foi mais ativo: na concentração de 0,5 mg/mL, foi capaz de inviabilizar 87% dos trofozoitos, enquanto que o óleo de C. pallidulus, na mesma concentração, inviabilizou apenas 29% dos trofozoítos. O óleo volátil de C. isabelli foi o que apresentou menor atividade, pois, numa concentração de 10 mg/mL, inviabilizou apenas 4% dos trofozoitos. Os óleos voláteis das três espécies mostraram efeito citotóxico através do método do MTT em células VERO. O óleo de C. ericoides, de maior atividade amebicida, foi também o que apresentou maior citotoxicidade. Além disso, os óleos voláteis de C. pallidulus e C. ericoides foram analisados quanto à atividade antibacteriana contra Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa usando o método de bioautografia. Verificou-se que os óleos de C. pallidulus e C. ericoides inibiram o crescimento de E. coli e S. aureus. Com relação a P. aeruginosa não houve inibição do crescimento da bactéria pelas duas espécies de Croton. / The family Euphorbiaceae has been highlighted by the production of compounds of industrial interest and importance for the food. Several representatives species are of interest due to production of volatile oils. Examples are species of Croton that have medicinal properties, such as anti-inflammatory, antifungal, antimicrobial and healing. Some species of the genus Croton, widely distributed in Rio Grande do Sul, were investigated in order to analyze the chemical composition of volatile oils obtained by hydrodistillation from the aerial parts of the plants. Three species were collected in different localities of Rio Grande do Sul, Croton pallidulus, C. isabelli and C. ericoides. The chemical composition of the oils was analyzed using gas chromatography coupled to mass spectrometry. Sesquiterpenes and Monoterpenes were the major compounds identified in the oils of C. pallidulus, C. isabelli and C. ericoides. Additionally, the volatile oils obtained from each species were tested for amebicidal activity against Acanthamoeba polyphaga. Both the volatile oil of C. pallidulus and that of C. ericoides showed activity against A. polyphaga, but the latter was more active: the concentration of 0.5 mg/mL, was able to kill 87% of trophozoites, while the oil of C. pallidulus, at the same concentration, killed only 29% of trophozoites. The volatile oil of C. isabelli was the one that showed less activity; in a concentration of 10 mg/mL, the oil killed only 4% of trophozoites. The volatile oils of the three species showed a cytotoxic effect in VERO cells determined by the MTT method. The oil of C. ericoides, the most active against the Acanthamoeba, presented also the highest cytotoxicity. .In addition, the volatile oils of C. pallidulus and C. ericoides were assayed for antibacterial activity against Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa using the bioautography method. It was found that the oils of C. pallidulus and C. ericoides inhibited the growth of E. coli and S. aureus. With respect to P. aeruginosa no inhibition of bacterial growth by both species of Croton was observed.