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Moleculas organicas volateis : papel das mesmas em ecologia quimica, caminhos de fragmentação em espectrometria de massas e sintese

Silva, Ubiratan Flores da 31 July 2018 (has links)
Orientador : Anita Jocelyne Marsaioli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-31T18:43:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_UbiratanFloresda_D.pdf: 5706639 bytes, checksum: 94f957d0ed353ee154da5088f0bd3843 (MD5) Previous issue date: 2001 / Doutorado
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Prospecção, caracterização molecular e conservação in vitro de Laeliinae (Orchidaceae)

Santos, Mariana de Souza 19 February 2014 (has links)
Orchids are ornamental plants cultivated by man long ago. The great diversity of colors and forms of the flowers of the species and natural and artificial hybrids adds to these plants high commercial value. The destruction of natural habitats, coupled with predation has led to the loss of genetic variability of the species, intensifying the already severe process of extinction.The aim of this study was to characterize native orchids of the SergipeState by ISSR molecular markers, as well as to study strategies for in vitro conservation under slow growth of three orchid species belonging to the subtribe Laeliinae. Two in vitro conservation experiments were realized, both in a completely randomized design. The first experiment was in a 3x3x2 factorial scheme, and we tested three combinations of carbon sources and osmotic regulators (20 g L-1of sucrose, 10 g L-1of sucrose + 5g L-1of mannitol, 10 g L-1of sucrose + 5g L-1of sorbitol), three orchid species (Epidendrum secundumJacq.,Encyclia dichroma (Lindl.) Schltr andCattleya tigrina A. Rich) and two temperatures (18 and 25°C).The second experiment was realized in a 4x3x2factorial scheme, and we tested four concentrations of salts of MS medium (100%, 75%, 50% and 25% of salts), three orchid species (Epidendrum secundumJacq.,Encyclia dichroma (Lindl.) Schltr andCattleya tigrina A. Rich) and two temperatures (18 and 25°C). The eight primers used in the study revealed a total of 87 fragments, all polymorphic, which proved effective in characterizing the collection of study. The diversity found within and between studied genera was high and promising for conservation studies.Cattleya tigrina presented 100% of survival at 180 days,and can be kept in medium with 25% of MS salts at 18°C. The temperature 18ºC also allowed the conservation of Epidendrum secundum for 365 days, with 100% of MS salts. Encyclia dichroma presented greater sensitivity to low temperature and can be kept at 25ºC with 25% of the salts of the MS medium for 365 days. / As orquídeas são plantas ornamentais cultivadas pelo homemhá muito tempo. A grande diversidade de cores e formas das flores das espécies e híbridos naturais e artificiais agrega a estas plantas alto valor comercial. A destruição dos habitats naturais, aliada à coleta predatória, tem levado à perda da variabilidade genética das espécies, intensificando o já acentuado processo de extinção. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar por marcadores moleculares tipo ISSR orquídeas nativas do Estado de Sergipe, bem como estudar estratégias para conservação in vitro,sob crescimento lento, para três espécies pertencentes à subtribo Laeliinae. Foram realizados dois experimentos de conservaçãoin vitro, ambos em delineamento inteiramente casualizado.O primeiro experimento foi em esquema fatorial 3x3x2, onde foram testadas três combinações de fontes de carbono e reguladores osmóticos (20 g L-1 de sacarose; 10 g L-1 de sacarose + 5g L-1 de manitol; 10 g L-1 de sacarose + 5g L-1 de sorbitol), três espécies de orquídea (Epidendrum secundum Jacq.,Encyclia dichroma (Lindl.) Schltr eCattleya tigrina A. Rich) e duas temperaturas (18 e 25ºC). O segundo experimento foi em esquema fatorial 4x3x2, onde foram testadas quatro concentrações de sais do meio MS (100%, 75%, 50% e 25% dos sais), três espécies de orquídea (Epidendrum secundum Jacq.,Encyclia dichroma (Lindl.) Schltr, eCattleya tigrina A.Rich) e duas temperaturas (18 e 25ºC). Os oito primers utilizados no trabalho revelaram um total de 87 fragmentos, todos polimórficos, que se mostraram eficientes na caracterização da coleção de estudo. A diversidade encontrada entre e dentro dos gêneros estudados mostrou-se elevada e promissora para estudos de conservação. Cattleya tigrina apresentou 100% de sobrevivência aos 180 dias podendo ser conservada em meio com 25% dos sais MS à 18ºC. Esta temperatura também permitiu a conservação de Epidendrum secundum por 365 dias em meio com 100% dos sais MS. Encyclia dichroma apresentou maior sensibilidade à baixa temperatura e pode ser conservada a 25ºC em meio com 25% dos sais MS por 365 dias.
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Fenologia e anatomia dos órgãos reprodutivos de Catasetum fimbriatum Lindley cultivados sob diferentes intensidades luminosas. / Fenology and anatomy of the reproductive organs of Catasetum fimbriatum Lindley cultivated under different luminous intensities.

Moraes, Cristiano Pedroso de 28 August 2002 (has links)
Como tentativa de elucidar os fatores ambientais que controlam a plasticidade fenotípica floral de Catasetum fimbriatum Lindley, iniciaram-se estudos fenológicos, vegetativos e anatômicos da espécie, através do acompanhamento de 45 indivíduos, sendo que trinta destes indivíduos foram coletados e posteriormente envasados, enquanto os demais foram mantidos e observados em seu ambiente natural, nas árvores do Campus ESALQ/USP, permitindo assim, traçar correlações ecológicas entre os três tratamentos instalados, com quinze indivíduos cada. O primeiro tratamento foi montado em casa de vegetação onde predominou intensa luminosidade, altas temperaturas e baixa umidade relativa do ar. O segundo tratamento foi submetido a baixa intensidade luminosa, menor temperatura e a uma umidade relativa do ar mais elevada em relação ao primeiro. O terceiro tratamento foi mantido nas condições naturais. Ao final do experimento, pôde-se constatar a grande adaptabilidade da espécie aos diferenciados ambientes, através da formação de ecótipos, os quais tornaram-se visíveis devido a diferenças apresentadas pelos individuos principalmente na quantidade de brotos. Quanto ao trimorfismo sexual, mesmo não tendo havido a ocorrência de flores diclinas femininas, o estudo anatômico constatou a presença de agregados celulares com características meristemáticas nos ovários e ginostêmios das flores, os quais, acredita-se, caso fossem estimulados pelo ambiente durante um período necessário para definirem a expressão sexual da espécie, possivelmente através de um aumento nos níveis endógenos de etileno, permitindo desta forma a formação de flores diclinas femininas e flores monoclinas. / As attempt of elucidating the environmental factors that they control the plasticity floral fenotipic of Catasetum fimbriatum Lindley, fenological, vegetative and anatomical studies of the species began, through of the accompaniment of 45 individuals. Thirty of these individuals were collected and put in the vases later. The other ones 15 already existed naturally in the trees of the Campus ESALQ/USP, allowing like this, to trace ecological correlations among the three installed treatments. The first fifteen individuals, they were conditioned at vegetation house where intense brightness prevailed, high temperatures and it lowers relative humidity of the air. Such treatment was entitled treatment 1. The other collected individuals that were put in the vase, and that they constituted the treatment 2, they were submitted the low luminous intensity, to a smaller temperature and a relative humidity of the highest air. The last fifteen individuals, presented the natural conditions of survival of the species, and they constituted in that way, the treatment 3. At the end of the experiment, the great adaptability could be verified of the species to the differentiated environments, through the ecotipes formation, which became visible due to differences presented mainly by the individuals in the amount of sprouts. With relationship to the sexual, same trimorfism not having had the occurrence of feminine diclinous flowers, the anatomical study verified the presence of cellular closters with meristematic characteristic in the ovaries and ginostemeus of the flowers, the ones which, If they were environmently stimulated by the period of necessary time, possibly through an increase in the levels etylene endogenous, they would interfere in the sexual expression of the species contributing to the appearance of feminine diclinous flowers and monoclinous flowers.
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Complexo Epidendrum secundum como modelo de estudo multidisciplinar na delimitação de espécies /

Rabelo, Paula Maldonado. January 2016 (has links)
Orientadora: Alessandra Ike Coan / Coorientador: Fábio Pinheiro / Banca: Simone de Pádua Teixeira / Banca: Fábio de Barros / Resumo: O uso de fontes de dados diversas e de modo integrado tem facilitado o entendimento dos limites interespecíficos de grupos com difícil delimitação taxonômica, principalmente na região neotropical, que abriga a maior biodiversidade do planeta decorrente de processos de diversificação evolutiva. Epidendrum L. é o maior gênero de orquídeas nos neotrópicos; E. secundum e E. xanthinum, pertencentes ao denominado "complexo E. secundum" e distribuídas de maneira disjunta na Cadeia do Espinhaço e Serra do Mar, apresentam problemas de delimitação taxonômica devido ao grande polimorfismo quanto ao tamanho e forma das flores, sendo a existência de mais de uma espécie tema de muitos debates. Apesar de E. secundum e E. xanthinum apresentarem flores com cores contrastantes, estas espécies já foram consideradas como pertencentes a uma única espécie. O presente trabalho propôs responder as seguintes questões: 1) Existem diferenças micromorfológicas e anatômicas florais entre E. secundum e E. xanthinum, incluindo amostras de diferentes populações? 2) Indivíduos de E. secundum e E. xanthinum, provenientes de diferentes populações, exibem um padrão de monofiletismo recíproco, com diferentes ancestrais exclusivos? 3) Com base nessas diferentes fontes de dados, espécimes de E. secundum e E. xanthinum podem ser considerados como espécies distintas? Para tanto, foi estudada a micromorfologia e a anatomia floral de E. secundum e E. xanthinum a partir de técnicas usuais de microscopias de luz e eletrônica de varredura; também foram realizadas análises moleculares, utilizando sequências de DNA nuclear (região ITS) e do cloroplasto (clp-psb, ndhJ-tabE), previamente testadas em Epidendrum. Foi observada uniformidade nos caracteres micromorfológicos e anatômicos florais levantados, tanto para indivíduos ... (Resumo completo clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The use of various data sources in an integrated manner has facilitated the understanding of interspecific group limits, mainly in the neotropical region whose great biodiversity is related to evolutionary diversification processes. Epidendrum L. is the largest genus of orchids in the Neotropics; E. secundum and E. xanthinum belong to the called "E. secundum complex" with disjoint distribution in the Espinhaço Range (State of Minas Gerais, Brazil) and Serra do Mar (State of Rio de Janeiro, Brazil). The taxonomic delimitation problems in the complex are due to the large polymorphism as the size and shape of flowers, resulting in discussion about the existence of more than one species. Although E. secundum and E. xanthinum present flowers with contrasting colors, they have been considered as belonging to a single one. This work aimed to answer the following questions: 1) Are there floral micromorphological and anatomical differences between samples from different populations of E. secundum and E. xanthinum? 2) Does individuals from E. secundum and E. xanthinum, from distinct populations, display a reciprocal monophyly pattern, with different and exclusive ancestors? 3) Based on different data sources, can individuals from E. secundum and E. xanthinum be considered as distinct species? Therefore, we assessed the floral micromorphology and anatomy of E. secundum and E. xanthinum based on usual light and scanning electron microscopies; molecular analyzes were also performed using the nuclear (ITS region) and chloroplast (clp-psb, ndhJ-tabE) DNA sequences previously tested in Epidendrum. In the present study, we found that most of floral micromorphological and anatomical characters are shared by both E. secundum and E. xanthinum samples from disjoint populations, including individuals of what are previously considered different species ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Fenologia de Catasetum fimbriatum (Morren) Lindl. (Catasetinae, Orchidaceae) e sua polinização por abelhas Euglossini (Hymenoptera, Apidae) na região de São Carlos-SP, Brasil.

Ferreira, Alessandro Wagner Coelho 08 March 2005 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T19:32:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissAWCF.pdf: 14864501 bytes, checksum: 05aaa7e085fc2caf8ba616ae9cc02de5 (MD5) Previous issue date: 2005-03-08 / Financiadora de Estudos e Projetos / Catasetum fimbriatum is an epiphyte plant with a strong sexual dimorphism, witch can have inflorescences with male flowers, female flowers or mixed inflorescences. It can have also hermaphrodite flowers. In this work we studied twelve phenological events of this species, its main herbivores, visitors and the pollinator species. We used orchid populations of five locations at the central region of São Paulo state (Brazil), around São Carlos municipality. For the study of visitors/pollinator bees we used blooming plants and vanillin, eugenol and cineol traps. We trapped and stamped the bees with automotive color brilliant ink. The pollinator of C. fimbriatum is Eufriesea violascens. This orchid is also visited by E. truncata and E. cordata. E. violascens has the most specific interaction with the orchid, since, we met it in the field only when the major number of orchids were bloomed, other wise, Euglossa spp. could be seen for more time. C. fimbriatum has his development affected by the herbivores action, mainly by the larva of Riechia acraeoides (Lepidoptera). We registered 14 host species, the main are: Acrocomia aculeata, Cedrela fissilis, Gochnatia polymorpha e Anadenanthera falcata. A statistics analysis shows linear correlation to the following factors: pseudobulb diameter and male flowers number, pseudobulb diameter and plant larger height, plant larger height and male flowers number, male flowers number and fruits number, female flowers number and fruits number. / Catasetum fimbriatum é uma orquídea epífita que apresenta forte dimorfismo sexual, podendo apresentar inflorescências com flores masculinas, femininas ou mistas. Apresenta ainda com menor freqüência flores hermafroditas. Neste trabalho, estudamos doze fenofases desta espécie, os seus principais herbívoros, visitantes e a espécie polinizadora. Utilizamos para isto populações de orquídeas de cinco locais na região central do Estado de São Paulo, nos arredores do Município de São Carlos. Para o estudo das abelhas visitantes/polinizadora utilizamos plantas floridas e garrafas-armadilha contendo eugenol, vanilina e cineol. Capturamos e marcamos as abelhas com tinta automotiva de brilho metálico. O polinizador de C. fimbriatum é Eufriesea violascens. Além disto esta orquídea é visitada por E. truncata e E. cordata. Para Eufriesea violascens a especificidade da interação é maior do que para Euglossa spp., pois, aquela foi observada no campo apenas quando a maior parte dos indivíduos desta orquídea estavam floridos, enquanto que estas últimas foram observadas quando a primeira já não era mais encontrada no campo. C. fimbriatum tem seu desenvolvimento afetado pela ação de herbívoros, principalmente, pela larva de Riechia acraeoides (Lepidoptera). Foram registradas 14 espécies hospedeiras, sendo as principais: Acrocomia aculeata, Cedrela fissilis, Gochnatia polymorpha e Anadenanthera falcata. Nas análises estatísticas os seguintes fatores apresentaram correlação linear: diâmetro do pseudobulbo e número de flores masculinas, diâmetro do pseudobulbo e tamanho máximo da planta, tamanho máximo da planta e número de flores masculinas, número de flores masculinas e número de frutos formados, número de flores femininas e número de frutos formados.
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Incidência e caracterização dos vírus infectando orquídeas no Estado de São Paulo

Moraes, Letícia Aparecida de [UNESP] 27 February 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-27Bitstream added on 2014-06-13T20:37:45Z : No. of bitstreams: 1 moraes_la_me_botfca.pdf: 1082643 bytes, checksum: a98a243243226985befa640173e58d81 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As doenças causadas por vírus são um dos principais entraves sanitários nos sistemas de produção de orquídeas, uma vez que promovem consideráveis danos ao seu valor comercial, já que afetam diretamente sua estética e produtividade. São escassos os estudos relacionados aos principais vírus que ocorrem nessa planta ornamental em condições brasileiras. Em termos mundiais, Cymbidium mosaic virus (CymMV) e Odontoglossum ringspot virus (ORSV) prevalecem e são os vírus de maior importancia econômica.Tendo em vista esta questão, o presente trabalho objetivou avaliar, através de métodos sorológicos e moleculares, 385 amostras pertencentes a diferentes gêneros de orquídeas oriundas do estado de São Paulo a fim de estabelecer qual o(s) de maior importância fitossanitária. A análise de detecção foi realizada atraves do Enzyme linked immunossorbent assay (ELISA), com os antissoros comerciais contra: CymMV, ORSV, Cymbidium ringspot virus (CymRSV), Tomato spotted wilt virus (TSWV) e para o gênero Potyvirus. Para a análise de variabilidade, oligonucleotídeos foram desenhados para amplificar a região codificadora da proteína capsidial do CymMV e ORSV, bem como foi obtido da literatura um par de primers para detecção do Orchid fleck virus (OFV). O vírus de maior prevalência foi o CymMV, presente em 274 amostras (71,16%), seguido do ORSV presente em 61 amostras (15,85%), e OFV em 11 amostras (2,85%). Os demais vírus testados não foram identificados em nenhuma das amostras analisadas. Os sintomas causados pelo CymMV e ORSV são muito variaveis, além de serem confundidos com fatores abióticos, problemas nutricionais e fitotoxidez. Aparentemente a expressão de sintomas está relacionada ao gênero e idade da planta, bem como aos fatores climáticos das regiões de cultivo. Quanto a variabilidade... / Diseases caused by viruses are a major constraint in the production systems of orchids, as they promote considerable damage to its commercial value, as it directly affects their productivity and aesthetics. There are few studies related to major viruses that occur in this ornamental plant in the Brazilian conditions. Globally, Cymbidium mosaic virus (CymMV) and Odontoglossum ringspot virus (ORSV) are prevalent and the virus of greatest economic importance. Considering this issue, the present study aimed to evaluate, through serological and molecular methods, 385 samples of different orchid genera from São Paulo state in order to establish what is(are) the most important virus(es). As for the Enzyme linked immunossorbent assay (ELISA), commercial antisera were used against: CymMV, ORSV, Cymbidium ringspot virus (CymRSV), Tomato spotted wilt virus (TSWV) and the genus Potyvirus. Primers were designed to amplify the coding region of the capsidial protein CymMV and ORSV and a pair of primers for detection of Orchid fleck virus (OFV) was obtained from the literature. The the most prevalent virus was CymMV, present in 274 samples (71.16%), followed by ORSV present in 61 samples (15.85%) and OFV in 11 samples (2,85%). The other viruses tested were not identified in any of the samples analyzed. Symptoms caused by CymMV and ORSV are very variables, and are commonly confused with abiotic factors, nutritional problems and phytotoxicity. Apparently is related to gender and age of the plant, as well as the climate factors. As the genetic variability of CymMV e ORSV, was observed nucleotide identity... (Complete abstract click electronic access below)
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Propagação in vitro de orquídeas sem a utilização de câmara de fluxo laminar / In vitro propagation of orchids without using laminar flow

Rodrigues, Donizetti Tomaz 22 December 2009 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-20T15:06:04Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 676315 bytes, checksum: a451bf2e2060adec62ba8c114611d497 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-20T15:06:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 676315 bytes, checksum: a451bf2e2060adec62ba8c114611d497 (MD5) Previous issue date: 2009-12-22 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Há uma grande demanda por técnicas de laboratório mais simples e de menor custo e por procedimentos mais acessíveis a orquidófilos que não têm o embasamento teórico necessário à utilização de métodos usuais de produção seminífera e clonal de orquídeas in vitro. Neste trabalho, três experimentos foram conduzidos com os objetivos de avaliar a desinfestação química com hipoclorito de sódio (NaClO) de sementes e de tecidos de orquídeas para a produção de mudas in vitro, e testar a utilização de seringa descartável para o cultivo de tecidos, de modo a dispensar, em todos os casos, o uso de câmara de fluxo laminar. No primeiro experimento, sementes de Cattleya intermedia foram tratadas com seis concentrações de NaClO, variando de 1,2 a 4.800 mg L-1 de NaClO e semeadas utilizando-se dois métodos de cultivo: inoculação de sementes em frascos via seringa descartável, através de um furo em tampa de frascos de vidro, ou, abrindo-se o frasco, retirando-se a tampa, e colocando as sementes sobre o meio. Em ambos os métodos, as sementes foram inoculadas via 2 mL de suspensão semente-NaClO. Estes métodos foram comparados com o tradicional (controle), conduzido em câmara de fluxo laminar; com as sementes previamente desinfestadas com NaClO na concentração de 2.400 mg L -1 , corresponde a 100 mL L -1 de água sanitária comercial (ASC), e enxaguadas em H 2 O, mas sem a aplicação de NaClO aos meios nos frascos com as sementes. No segundo experimento, estudou-se a eficiência de concentrações de NaClO, variando de 1.200 a 6.000 mg L -1 (50 a 250 mL L -1 de ASC) aplicadas nos meios de cultura, na ausência ou presença de carvão ativado, em comparação à utilização de câmara de fluxo laminar sem a aplicação, neste caso, de NaClO nos meios, com os tecidos (explantes). Foram utilizados explantes de duas espécies de orquídeas: Arundina bambusifolia e Epidendrum ibaguenses. No terceiro experimento, estudou-se a utilização de seringa descartável, em substituição à câmara de fluxo laminar, utilizando três meios (MS1/2, GB5 e VW) e duas concentrações de três reguladores de crescimento (TDZ, ANA e BAP), para a obtenção de mudas de Phalaenopis spp. e de um híbrido de Dendrobium nobile, via cultura de tecidos. Como tratamento controle, utlizou-se o meio MS1/2 com 1,0 mg L -1 de TDZ em tubos de ensaio, com os explantes cultivados em condições normais, utilizando-se de câmara de fluxo. Não houve contaminação dos meios de cultura inoculados com a suspensão semente – NaClO. A presença do NaClO nas menores concentrações promoveu maior taxa de germinação e crescimento das plantas, em relação à sua não utilização (tratamento controle). A câmara de fluxo laminar mostrou-se desnecessária em relação à desinfestação feita com NaClO no meio de cultura. A aplicação de NaClO sobre o meio de cultura inoculado com os tecidos das plantas promoveu eficiente controle da contaminação. As maiores concentrações de NaClO causaram redução no crescimento das plantas. O uso de carvão ativado promoveu melhores resultados em termos de produção de plantas mas, por outro lado, a contaminação foi maior em sua presença. A utilização de seringa descartável mostrou-se viável para a propagação vegetativa das plantas. Embora, com alguns efeitos médios significativos, a diferença entre meios de cultura, reguladores de crescimento e suas concentrações apresentaram tendência geral para a similaridade dos dados de crescimento das plantas, evidenciando a possível simplificação dos procedimentos de desinfestação e cultivo. / There is a great demand for simpler and less costly laboratory techniques and for more accessible procedures for orchid breeders who do not have the necessary theoretical basis to use the traditional seed and clone production methods of orchids in vitro. In this study, three experiments were conducted with the purpose of evaluating chemical disinfection with sodium hypochlorite (NaClO) of orchid seeds and tissues for seedling production in vitro, and to test the use of disposable syringes for tissue culture, to dispense with the use of laminar flow in all cases. In the first experiment, seeds of Cattleya intermedia were treated with six NaClO concentrations between 1.2 and 4,800 mg L -1 NaCl, seeded by two methods: seed inoculation in glass jars with a disposable syringe through a hole in the lid, or by opening the jar, removing the lid, and placing the seeds on the medium. In both methods, seeds were inoculated in 2 mL seed – NaClO suspension. These methods were compared with the traditional (control) method, using laminar flow. After previous disinfection with NaClO at a concentration of 2400 mg L -1 , corresponding to 100 mL L -1 commercial bleach (CB), the seeds were rinsed in H 2 O, but without NaClO application to the media in the jars with the seeds. In the second experiment the effectiveness of NaCl concentrations between 1200 and 6,000 mg L -1 (50–250 mL L -1 CB) for the tissues (explants) was tested, applied to culture media in the absence or presence of activated carbon, in comparison with the use of laminar flow without the NaClO application to the media. Explants of two orchid species, Arundina bambusifolia and Epidendrum ibaguenses, were used. The third experiment tested the use of disposable syringes, instead of laminar flow, in three media (MS1/2, GB5 and VW) and with two concentrations of three growth regulators (TDZ, NAA and BAP) for obtaining Phalaenopis spp. seedlings and a Dendrobium nobile hybrid by tissue culture. In the control treatment, the MS1/2 medium was used with 1.0 mg L -1 TDZ in test tubes, and the explants were cultured under normal conditions, using a flow chamber. No contamination was observed in the culture media inoculated with seed – NaClO suspension. At low NaClO concentrations the germination and plant growth rates were higher than in absence of NaClO (control). In comparison, it was found that the application of NaClO dispensed with the use of laminar flow. The contamination control with NaClO application to the culture medium inoculated with the plant tissues was efficient. The highest NaClO concentrations resulted in reduced plant growth. The use of activated carbon led to the best results in terms of plant production while on the other hand, contamination was higher in their presence. The use of disposable syringes was feasible for the vegetative propagation of plants. However, with some significant mean effects, the difference between culture media, growth regulators and their concentrations generally tended to data similarity regarding plant growth, suggesting a possible simplification of the sterilization and cultivation procedures.
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Atividade fotossintética em folhas e pseudobulbos de Cattleya warneri (CAM) e Miltonia spectabilis (C3) sob défict hídrico

Zampirollo, Jadson Bonini 29 March 2016 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-29T15:38:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_9752_Dissertação Jadson Bonini Zampirollo.pdf: 1850424 bytes, checksum: 3ad76b00bed4dc3388a2280f461a435d (MD5) Previous issue date: 2016-03-29 / CAPES / Neste estudo foram avaliadas características ecofisiológicas em folhas e pseudobulbos de espécies de orquídeas epífitas com metabolismo CAM (Cattleya warneri T. Moore) e C3 (Miltonia spectabilis Lindl.) submetidas ao déficit hídrico (DH) prolongado (0, 15, 30, 45, 60, 75, e 90 dias.). Para isto, plantas de C. warneri e M. spectabilis obtidas em um orquidário em João Neiva/ES foram transferidas para orquidário na UFES Campus de São Mateus/ES, onde avaliações da fluorescência transiente da clorofila a, conteúdo relativo de água (CRA) e pigmentos fotossintéticos foram realizadas em folhas e pseudobulbos. Sob DH, o CRA foi significativamente reduzido nas folhas e pseudobulbos de ambas as espécies, porém, de maneira similar entre os órgãos da espécie CAM (a partir dos 30 dias de DH) e mais lentamente nas folhas em relação aos pseudobulbos na espécie C3 (a partir do DH-60 e DH-30, respectivamente). A concentração de pigmentos fotossintéticos também foi alterada em resposta ao déficit hídrico, com declínios observados na concentração de clorofila a, b e total e incrementos dos carotenoides nas folhas de ambas as espécies, com acréscimos de todos esses pigmentos nos pseudobulbos de C. warneri e nenhuma alteração em M. spectabilis. Parâmetros da fluorescência da clorofila a revelaram incrementos nas fases O-J, J-I, Bandas-L e K, F0, ABS/RC, DI0/RC e decréscimos na fase I-P, FV/FM, ET0/TR0, ET0/ABS e PITOTAL em folhas e pseudobulbos de ambas as espécies, porém, mais expressivamente nos pseudobulbos de M. spectabilis e com certa similaridade entre folhas e pseudobulbos de C. warneri. Dessa forma, observou-se que ambas as espécies demonstraram-se vulneráveis ao DH prolongado, com declínios no CRA, fotodestruição dos pigmentos fotossintéticos e declínios nas atividades fotoquímicas, especialmente após o DH-30. Entretanto, a melhor manutenção dos valores de CRA e menor perda do desempenho das reações fotoquímicas observados nas folhas da espécie C3, M. spectabilis, associadas a um maior comprometimento dos pseudobulbos, indicam que esta espécie apresenta-se mais tolerante ao DH de longo prazo. A explicação para isso pode ser o fato de as folhas senescentes, e, principalmente os pseudobulbos, estarem atuando como órgãos facilitadores na mobilização de água mais eficientemente em M. spectabilis, permitindo a manutenção do CRA mais elevado nas folhas jovens com consequente manutenção das atividades fotoquímicas. / In this study ecophysiological characteristics were evaluated in leaves and pseudobulbs of epiphytic orchids species with CAM (Cattleya warneri T. Moore) and C3 (Miltonia spectabilis Lindl.) metabolism under prolonged water deficit (WD) (0, 15, 30, 45, 60, 75, and 90 days). For this, C. warneri and M. spectabilis plants obtained from a nursery in João Neiva/ES were transferred to nursery in UFES - Campus de São Mateus/ES, where chlorophyll a fluorescence transient, relative water content (RWC) and photosynthetic pigments were measured in leaves and pseudobulbs. Under WD, the RWC was significantly reduced in leaves and pseudobulbs of both species, however, in a similar way between the organs of CAM species (as from 30 days of WD - WD-30) and more slowly in the leaves in relation to pseudobulbs in C3 species (as from WD-60 and WD-30, respectively). The photosynthetic pigments concentration also were changed in response to water deficit, with declines observed in the chlorophyll a, b and total and increases of carotenoids in the leaves of both species, with increases in all of these pigments in the pseudobulbs of C. warneri, and no change in M. spectabilis. Chlorophyll a fluorescence parameters revealed increases in O-J and J-I phases, L and K-Bands, F0, ABS/RC, DI0/RC and decreases in the I-P phase, FV/FM, ET0/TR0, ET0/ABS e PITOTAL in leaves and pseudobulbs of both species, but more markedly in the pseudobulbs of M. spectabilis and with certain similarity between leaves and pseudobulbs of C. warneri. Thus, it is noted that both species demonstrated vulnerable to prolonged WD, with declines in the RWC, photodestruction of photosynthetic pigments and declines in photochemical activities, especially after the WD-30. However, the better maintenance of RWC values and smaller loss of performance of photochemical reactions observed in leaves of C3 species, M. spectabilis, associated with greater engagement of pseudobulbs indicate that this species is more tolerant to prolonged WD. The explanation for this may be the fact that senescent leaves, and mainly pseudobulbs are acting as facilitators organs in the in mobilization of water more effectively in this species, allowing the maintenance of the highest RWC on young leaves with consequent maintenance of photochemical activities.
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Isolamento, identificação e inoculação de bactérias produtoras de auxinas associadas às raízes de orquídeas

Galdiano Júnior, Renato Fernandes [UNESP] 26 June 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-06-26Bitstream added on 2014-06-13T19:33:27Z : No. of bitstreams: 1 galdianojunior_rf_me_jabo.pdf: 690122 bytes, checksum: 501da9f097d5b39bf9010fb96e017d11 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A rizosfera favorece a colonização radicular por rizobactérias promotoras do crescimento de plantas (RPCPs), as quais podem oferecer importantes benefícios para a hospedeira. Este estudo teve o objetivo de isolar e identificar bactérias produtoras de auxinas das espécies Cattleya walkeriana, Cyrtopodium paludicolum, Ionopsis utricularioides, Oeceoclades maculata, Phalaenopsis amabilis e Vanilla planifolia e avaliar a inoculação de sementes e plântulas da orquídea brasileira Cattleya walkeriana. Ao total, foram isolados 85 bactérias, 67 delas produtoras de auxinas (quantificados por ensaios colorimétrico e detectados por CLAE) e 26 foram identificadas pelo sequenciamento parcial do gene 16S rRNA. Seis isolados produtores de auxinas foram inoculados em bioensaios. Para a inoculação in vitro, sementes foram inoculadas com os isolados Burkholderia RzW32, Enterobacter Endw37, Curtobacterium Endw57, Bacilllus EndW60 e testemunha representada por água destilada autoclavada em meio nutritivo Knudson-C e mantidas em câmara de incubação com luminosidade e temperatura controladas. Após 120 dias, a germinação do tratamento controle apresentou-se bem desenvolvida, ao contrário de sementes dos tratamentos inoculados. No experimento de bacterização ex vitro, plântulas germinadas em cultivo assimbiótico in vitro foram inoculadas com os isolados Burkholderia RzW32, Curtobacterium RzW35, Enterobacter EndW37, Bacillus EndW48 e testemunha. Após 90 dias de cultivo em condições de casa de vegetação, foram avaliados porcentagem de sobrevivência, área foliar, número de raízes, comprimento das raízes, massa de matéria seca da parte radicular e da parte aérea, índice de aumento da área foliar e índice de aumento da massa seca total. Curtobacterium sp. e Burkholderia sp. proporcionaram a menor eficiência para o crescimento enquanto... / The rhizosphere promotes root colonization by Plant growthpromoting rizobacteria (PGPR), which may offer significant benefits to the host . This study aimed to isolate and identify auxin-producing bacteria of the species Cattleya walkeriana, Cyrtopodium paludicolum, Ionopsis utricularioides, Oeceoclades maculata, Phalaenopsis amabilis and Vanilla planifolia, and evaluate seeds and seedlings innoculation of the Brazilian orchid Cattleya walkeriana. In total, 85 bacteria were isolated, 67 of them produce auxins (quantified by colorimetric assays and detected by HPLC) and 26 were identified by partial sequencing of 16S rRNA gene. Six-producing isolates were inoculated in auxin bioassays. For in vitro inoculation, seeds were inoculated with isolates Burkholderia RzW32, Enterobacter Endw37, Curtobacterium Endw57, Bacilllus EndW60 and control represented by distilled autoclaved water in nutrient medium Knudson-C and kept in an incubation chamber with controlled temperature and luminosity. After 120 days, the germination of the control treatment presented was well developed, unlike seeds of inoculated treatments. In the experiment of bacterization ex vitro, asymbiotic in vitro germinated seedlings were inoculated with isolates Burkholderia RzW32, Curtobacterium RzW35, Enterobacter EndW37, Bacillus EndW48 and control. After 90 days of cultivation in a greenhouse, were evaluated for survival percentage, leaf area, number of roots, root length, dry matter of the root and shoot, rate of increase in leaf area index and increase in total dry mass. Curtobacterium sp. RzW35 and Burkholderia sp. RzW32 provided the lowest efficiency for growth while Bacillus sp. EndW48 and Enterobacter sp. EndW37 to encourage growth in all parameters investigated and may be recommended for growth and survival during ex vitro acclimatization of seedlings of Cattleya walkeriana.
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Paclobutrazol no crescimento e desenvolvimento in vitro e na aclimatização de Sophronitis cernua (Lindl.) Lindl. e Brassavola flagellaris Barb. Rodr. (Orchidaceae)

Ichinose, Juliana Garcia dos Santos [UNESP] 19 April 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-04-19Bitstream added on 2014-06-13T19:23:49Z : No. of bitstreams: 1 ichinose_jgs_dr_jabo.pdf: 375994 bytes, checksum: ca9a5202ea2ae13b7677ec7e4a5a5440 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Sophronitis cernua e Brassavola flagellaris são orquídeas epífitas, nativas do Brasil. O cultivo in vitro é uma técnica que permite produzir grande número de indivíduos, entretanto ocorrem muitas perdas durante o período de aclimatização (ex vitro). Em razão disto, este trabalho teve como objetivo estudar o efeito da suplementação do meio de cultura Murashige e Skoog com paclobutrazol, no crescimento e desenvolvimento de plântulas de Sophronitis cernua e Brassavola flagellaris (in vitro), visando aumentar a taxa de sobrevivência das plântulas ex vitro. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualisado. Foram quatro tratamentos (três concentrações de paclobutrazol: 0,5; 1,0 e 1,5 mg i.a. L-1 e controle) e 10 repetições com 12 plântulas. Após cultivo em meio sem suplementação, as plântulas foram inoculadas nos tratamentos, onde permaneceram por mais 90 dias. Após este período, cinco repetições foram separadas para as análises destrutivas e as outras cinco foram transplantadas para bandejas contendo fibra de coco (S. cernua) e mistura de fibra de coco e esfagno (B. flagellaris). Verificou-se que as diferentes concentrações de paclobutrazol promoveram alterações nas características morfológicas das plântulas das duas espécies. Para S. cernua foi verificada redução do número de folhas, área foliar, massa seca e comprimento da parte aérea; aumento no diâmetro e massa seca de raízes e redução na taxa de sobrevivência das plântulas. Para B. flagellaris houve incrementos no acúmulo de massa seca de todas as partes (exceto na maior concentração para parte aérea), no número de folhas, na área foliar (0,5 mgL-1), no diâmetro no comprimento de raízes e no número de raízes; redução no número de brotos e comprimento da parte aérea e maiores taxas de sobrevivência da plântulas / Sophronitis cernua and Brassavola flagellaris are orchids epiphytes, native of Brazil. The in vitro propagation is a technique that allows to produce large numbers of plants, however many losses occur during the period of acclimatization (ex vitro). For this reason, this work aimed to study the effect of supplementation of the Murashige and Skoog medium with paclobutrazol on growth and development of plants of Sophronitis cernua and Brassavola flagellaris (in vitro) to increase the survival rate of seedlings ex vitro. The experimental design was completely randomized. There were four treatments (three concentrations of paclobutrazol: 0.5, 1.0 and 1.5 mg ai L-1 and control) and 10 repetitions with 12 plants. After cultivation in medium without supplementation, the seedlings were inoculated on treatments, where they remained for another 90 days. After this period, five replicates were separated for destructive analysis and the other five were transplanted into trays containing coir (S. cernua) and a mixture of coconut fiber and sphagnum moss (B. flagellaris). It was found that paclobutrazol induced changes in the morphological characteristics of both species. To S. cernua: reducing the number of leaves, leaf area, dry weight and shoot length and increase in diameter and dry mass of roots. Reduction in the rate of seedling survival. To B. flagellaris: increases in dry mass of all parties, except at the highest concentration (aerial part), the number of leaves, leaf area (0.5 mgL-1), diameter, length of roots and more roots. Reduction in the number of shoots and shoot length. Highest survival rates of seedlings

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