Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leandro_Chaves.pdf: 338456 bytes, checksum: 57c6cacc6b04986783e71300fb8c8f77 (MD5) Previous issue date: 2008-08-31 / Two experiments were conducted to evaluate the performance, development of digestives organs and recovered of Salmonella Enteritidis in chicks of different genetics lineages inoculated with probiotic using the technique of in ovo injection. The challenge with Salmonella spp and the feed fasting were promoted in chick s moments after the hatch. The birds ISA Label, Hubbard and Cobb were used in the experiments and the probiotic inoculated was based in multiple microorganism s culture. The experiments were designing in experimental random blocks with factorial arrangement 2x2x2 (probiotic X salmonella challenge X genetic lines). In both experiments the eggs were inoculated by in ovo injection at 19 days of incubation with probiotic and challenged with Salmonella Enteritidis in first day of age. In second experiment, the Cobb lineage birds were submitted to fasting of water and feed for 30 hours. The data were analyzed by variance analyses and Tukey test. The results showed that was no reduction of Salmonella colonization in digestive tract of chicks inoculated with probiotic. The inoculation of probiotic did not improve the performance of the chicks. Lower index of Salmonella were observed in older birds. In second experiment the fasting affected negatively the performance of the birds and the birds submitted to fasting were more susceptible to Salmonella Enteritidis / Dois experimentos foram conduzidos para avaliação do desempenho, desenvolvimento de órgãos e recuperação de Salmonella Enteritidis em pintos de diferentes linhagens inoculados com probiótico através da técnica de injeção in ovo. O desafio com Salmonella sp. e o jejum alimentar foi promovido nos pintos nos momentos seguintes à eclosão. Para tanto, foram utilizadas aves das linhagens ISA Label, Hubbard e Cobb e como probiótico utilizou-se um produto à base de cultura múltipla de microrganismos (Colostrum). Os experimentos foram delineados em blocos casualizados em arranjo fatorial 2x2x2: probiótico (presença ou ausência) x desafio (presença ou ausência) x linhagens (Hubbard ou ISA Label no experimento I e para o experimento II, além do fator probiótico e desafio, foi considerado o fator jejum após a eclosão (zero ou 30 horas). Nos dois experimentos os frangos foram inoculados in ovo, no 19° dia de incubação com a cultura de microrganismos e inoculados, no primeiro dia de vida, com Salmonella Enteritidis. No segundo experimento, utilizou-se frangos Cobb sendo esses submetidos a jejum total de água e ração, de 30 horas em relação aos tratamentos controle. Os dados foram submetidos a analise de variância e quando necessário utilizou-se o teste de Tukey (5%). Não foi observada redução da colonização do trato intestinal dos pintos por Salmonella Enteritidis com o uso de probiótico (P>0,05). A cultura de microrganismos também não proporcionou melhoria nos resultados zootécnicos dos pintos, havendo inclusive menor peso ao nascer das aves inoculadas com a cultura (P<0,05). Menores índices de positividade para Salmonella spp foram observados em aves mais velhas. No segundo experimento, o fator jejum influenciou negativamente o desempenho das aves sendo que, aves submetidas à restrição alimentar foram mais susceptíveis à infecção por Salmonella Enteritidis

O ovo é importante como alimento e matéria-prima industrial. O ovo é rico em colesterol que, por sua vez, está sujeito à oxidação, formando-se óxidos tóxicos. O presente trabalho teve como objetivos, a avaliação da formação do 7-cetocolesterol livre em ovo integral em pó e em macarrão contendo ovos, e a verificação da estabilidade oxidativa do colesterol, em ovo integral em pó, durante a estocagem, e em macarrão contendo ovos, em função do cozimento que antecede o consumo. Para tais propósitos foram analisadas cinco marcas de ovo integral em pó, adquiridas de indústrias produtoras e/ou fornecedores, estando dentro do prazo de validade (6 meses). Para a avaliação da estabilidade oxidativa do colesterol em ovo integral em pó, foi selecionada uma das cinco marcas analisadas, em três lotes, com 7 a 15 dias de fabricação, e estocada à temperatura ambiente por 224 dias. Onze marcas de macarrão contendo ovos foram obtidas comercialmente, estando dentro do prazo de validade (2 anos) e analisadas, sendo duas delas selecionadas para a avaliação da estabilidade oxidativa do colesterol em função do cozimento. A metodologia para a determinação do 7-cetocolesterol livre consistiu na extração dos Iípides totais, separação em coluna de Florisil, e a determinação por High-Perforrnance Liquid Chromatography (HPLC). Os resultados de 7-cetocolesterol em ovo integral em pó variaram de 63,74 a 112,80&#181;g/g de Iípides; em macarrão contendo ovos, de 30,49 a 157,25&#181;g/g de Iípides. O emprego do 7-cetocolesterol livre não permitiu indicar com clareza a oxidação do colesterol em ovo integral em pó durante a estocagem. Uma correlação estatisticamente significativa (r = 0,8093) foi verificada entre os resultados encontrados para o 7-cetocolesterol livre e as substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico - TBARS-, durante a estocagem. O colesterol do macarrão contendo ovos aparentemente foi afetado oxidativamente em função do tratamento térmico, (estatisticamente não-significativos), sugerindo estudos adicionais para melhor avaliar a estabilidade do colesterol nestas condições. / Egg is important as food and industrial raw material. It is rich in cholesterol, which, in turn, is subjected to oxidation. Forming toxic oxides. The present work had as objectives the evaluation of the formation of the free 7-ketocholesterol in whole egg powder and in pasta containing eggs, and the verification of the oxidative stability of cholesterol in whole egg powder during the storage, and in pasta containing eggs as a function of pre-consumption cooking. For such purposes, sample of five brands of whole egg powder within their validity period (6 months) donated by industries and/or suppliers and analyzed. For the evaluation of oxidative stability of cholesterol in whole egg powder, one of the tive analyzed brands was split into three lots within 7-15 days from manufacture and stored at room temperature for 224 days. Samples of eleven brands of pasta produced with eggs within their validity period (2 years) purchased at the local commerce and analyzed. Two brands out of the eleven were selected and evaluated concerning cholesterol oxidative stability after cooking. The method for the determination of free 7-ketocholesterol consisted of total Iipid extraction, separation through Florisil column and determination for High-Performance Liquid Chromatography (HPLC). The results of free 7-ketocholesterol ranged from 63.74 to 112.80&#181;g/g of lipids in whole egg powder and from 30.49 to 157.25&#181;g/g of lipids in pasta produced with eggs. The use of free 7-ketocholesterol did not permit to clearly indicate cholesterol oxidation in whole egg powder during storage. The statistically signiticant correlation (r = 0.8093) between the results for free 7-ketocholesterol and the substances that react with thiobarbituric acid - TBARS - during storage was observed. In pasta produced with eggs, cholesterol apparently was oxidized after thermal treatment, (not statistically significant), thus suggesting further studies to bette evaluate cholesterol stability under these conditions.

O ovo em pó é amplamente utilizado na indústria de alimentos, sendo reconhecidamente rico em óxidos de colesterol (OsC) devido às altas temperaturas utilizadas durante o processo. O armazenamento em embalagens inadequadas, presença de ar e a alta concentração lipídica do produto são fatores adicionais para sua formação. Os óxidos de colesterol formados, por sua vez, apresentam propriedades biológicas prejudiciais à saúde, relacionadas com a aterogenicidade, citotoxicidade, carcinogenicidade e mutagenicidade, além de outras manifestações que prejudicam a biossíntese do colesterol no organismo e a permeabilidade da membrana celular. Os objetivos do estudo foram caracterizar amostras comerciais de ovo integral em pó e a ocorrência de óxidos de colesterol, avaliar o efeito do processamento por atomização comercial na estabilidade oxidativa do colesterol e de ácidos graxos, e avaliar o efeito da adição de tocoferóis (aditivo comercial) ao ovo em pó armazenado (90 dias) à temperatura ambiente sobre a estabilidade oxidativa do colesterol. Foram encontrados 7-cetocolesterol (7-Ceto) e 25-hidroxicolesterol (25-OH) em todas as marcas analisadas, mas somente o 7-Ceto teve um aumento expressivo durante o armazenamento de até 180 dias, independente da marca. A atomização gerou redução das TBARS e dos carotenóides totais somente em alguns lotes analisados e redução expressiva nos ácidos graxos livres e fenólicos totais em todos os lotes. Com relação aos óxidos de colesterol, não houve o efeito esperado. Houve aumento do 7-Ceto, 7&#945;-hidroxicolesterol e 7&#946;-hidroxicolesterol somente em poucos lotes. A adição do antioxidante (AO) não evitou o aumento das TBARS e dos ácidos graxos livres, ou redução dos carotenóides totais ao longo do tempo (90 dias). Apesar da atomização não causar o efeito esperado nos OsC, o armazenamento aumentou significativamente os valores de 7-Ceto a partir dos 60 dias na maioria dos lotes. Não foi encontrada diferença estatística entre os valores de 25-OH devido à alta variação nos mesmos. Contudo a adição de AO reduziu a formação de alguns OsC e das TBARS, em relação ao seu controle no mesmo período, demonstrando uma melhora significativa no produto final. / Egg powder is widely used in food industry, being recognized as rich in cholesterol oxides (Cops) due to the high temperatures used during the process. The storage in inadequate packaging, the presence of air and high lipid concentration of the product are additional factors for their formation. The cholesterol oxides formed have biological properties harmful to health, like atherogenicity, cytotoxicity, mutagenicity and carcinogenicity, and other events that affect the cholesterol biosynthesis in the body and the membrane permeability. The aim of this study was to evaluate the occurrence of cholesterol oxides in commercial product, the effect of atomization in the liquid egg, and oxidative stability of cholesterol in egg powder storage with the addition of an commercial antioxidant (GUARDIANTM TOCO 70). It was found 7- ketocholesterol (7-k) and 25-hydroxycholesterol (25-OH) in all brands tested, but only the 7-k increased significantly during the storage of up to 180 days, regardless of brand. The spray-dryer generated reduction of TBARS and total carotenoids only in some samples analyzed and significant reduction in free fatty acids and total phenolics in all lots. There wasnt the expected effect for the cops. There was an increase of 7-k, 7&#945;-hydroxycholesterol and 7&#946;-hydroxycholesterol only in a few lots. The addition of antioxidant (AO) did not prevent the increase in TBARS and free fatty acids, or reduction of total carotenoids over time (90 days). Despite the spray-dryer does not cause the expected effect on the Cops, storage significantly increased the values of 7-k from 60 days in most lots. There was no statistical difference between the values of 25-OH due to their high variation. However the addition of AO reduced the formation of some Cops and TBARS in relation to its control over the same period, showing a significant improvement in the final product.

The in ovo sexing of chicken eggs is a current task and a prerequisite to overcome the mass killing of male day-old chicks from laying lines. Although various methods have been developed and tested in recent years, practicable methods for sex determination are still missing which can be applicated in poultry hatcheries before the chicken embryo is capable of nociception and pain sensation. Optical spectroscopic methods enable an early determination of the sex. In this study, a novel method based on two-wavelength in ovo fluorescence excitation is described. More than 1600 eggs were examined. In ovo fluorescence was sequentially excited at 532 nm and 785 nm. The fluorescence intensities of the spectral regions behave inversely with respect to sex. It is shown that the observed sex-related differences in the fluorescence intensities are based on the embryonic hemoglobin synthesis. The accuracy of sex determination is 96% for both sexes. The hatching rate is not reduced compared to an equivalent reference group.

Studies were conducted to investigate the effects of in ovo injection of selenium (Se) either as seleno-methionine (Se-Met) or sodium selenite (Na2SeO3) into the yolk of incubating eggs on tissue Se concentration, embryo livability, lipid peroxidation, immune response and growth performance. When white-shelled eggs were injected with 0.1ml of solutions providing 0, 2.5, 5, 10 or 20 μg Se/egg, no detrimental effects on embryo viability at 20 days of incubation were noted. The effects on tissue Se concentrations suggested that Se-Met and Na2SeO3 were metabolized differently by the chick embryo. In a subsequent study using injection doses up to 60 μg/egg, a greater linear response in tissue Se was obtained with Se-Met, compared with Na2SeO3 (P < 0.01). Minimal changes in heart and breast muscle Se concentrations were noted above the 40 μg dose when Na2SeO3 was used (P > 0.05). In a study with broiler eggs, injection doses of 0, 2.5, 5, 10, 20 and 40 μg Se/egg were used. Se-Met or Na2SeO3 at doses up to 40 μg Se/egg had little effect on embryo viability. Injecting Se-Met resulted in greater tissue Se accumulation than Na2SeO3 at 20 days of incubation. In another study with broiler eggs using injection doses up to 40 μg Se/egg, Se-Met injection resulted in higher hatchability, reduced lipid peroxidation in the lung and heart muscle of the embryos after 20 days incubation and higher Se concentrations in heart and breast muscle of hatched chicks through 7 days and in lung through 21 days of growth. In a feeding trial with broiler breeder hens, adding 0.3 mg/kg of Se as Se yeast or Na2SeO3 to the diet improved tissue Se status at hatching of progeny chicks. Taken together, these results indicate that injection of Se into the yolk of incubating eggs may be useful for enhancing Se status during embryonic and early post-hatch development. Therefore, the improvement in Se status using this method in conjunction with dietary Se supplementation of breeder hens would be much greater than with only using dietary supplementation.

A anemia causada por deficiência de ferro é a forma mais comum de todas as anemias e afeta grande parcela da população mundial, especialmente o grupo materno-infantil: lactentes, pré-escolares, escolares, gestantes e nutrizes. A carência acarreta atraso no desenvolvimento psicomotor e cognitivo de crianças menores de dois anos, além de diminuição da eficiência da função imune, e agravamento de doenças infecciosas. O presente estudo teve por objetivos avaliar a disponibilidade de ferro em alimentos fontes deste e de vitamina A, ovo (o), cenoura (c) e couve (cv), bem como verificar a interação do ferro com &#945; e ß-caroteno, e com outros interferentes. As misturas foram de ovo com cenoura e ovo com couve em diferentes proporções (1:1), (1:1,5), (1:2), (1:2,5) e (1:3) e também dos 3 alimentos sozinhos, totalizando 13 amostras. As amostras, após pré-preparo e cocção, foram submetidas às análises de composição centesimal, ferro, taninos, ácido fítico, ácido oxálico, &#945;- e &#946;- caroteno e ferro dialisável. Os dados foram submetidos à análise estatística empregando o teste de Tukey, regressão polinomial e correlação, utilizando o software SAS (1996). Os valores para umidade variaram de 83,93 a 95,74 g/100g, apresentando diferenças significativas entre as distintas amostras, assim como para proteínas (0,55 a 7,22g /100g) e extrato etéreo (0,21a 5,94 g/100g). Foi observado que em relação à umidade, extrato etéreo, proteínas, cinzas e &#946;-caroteno houve correlação significativa para o ferro dialisável, sendo que para umidade e &#946;-caroteno essa correlação foi positiva e para os demais componentes foi negativa. Os teores para taninos, fitatos e oxalatos variaram de 0,78 a 1,40 mEqcatequina/g, 0,17 a 0,42 mg/g, e 0,06 a 0,30% respectivamente. A amostra 2 (1o:1,5c) apresentou teores mais elevados de taninos (1,40 mEqcatequina/g), e as amostras 6 (1o:1cv) e 7 (1o:1,5cv) apresentaram teores mais elevados de oxalato e teores de ferro dialisável mais baixo, em relação às outras misturas. O teor de &#945;-caroteno para as amostras contendo cenoura variou de 2.435,27 a 4.609,83 µg/100g. Quanto ao &#946;-caroteno observou-se variações de 2.406,75 a 7.881,55 µg/100g, sendo evidenciado valores mais elevados para as amostras com cenoura. Numericamente, as misturas com maior proporção de cenoura e couve apresentaram os maiores resultados para o ferro dialisável, que variou entre 0,99 a 7,43%, sendo que a amostra 5 (1o:3c) apresentou o melhor resultado, seguida pelas amostras 1, 2, 3, 4, 8, 9 e 10. Pelos resultados obtidos pode-se concluir que as misturas com maior proporção de cenoura e couve aumentaram a disponibilidade do ferro, principalmente pelo maior conteúdo de ß-caroteno. Não houve interferência significativa dos antinutricionais sobre o ferro dialisável, embora os taninos e ácido oxálico atuaram como fatores limitantes quando observados os valores numéricos nas amostras com maiores concentrações de cenoura e couve. O ß-caroteno apresentou correlação positiva significativa com o ferro dialisável, exercendo influência na redução do efeito dos antinutricionais, especialmente dos fitatos, na disponibilidade do ferro, principalmente nas amostras com cenoura. Assim, pode ser recomendada a utilização de misturas de alimentos como ovo e cenoura, sendo que este último deve estar em maiores proporções em refeições destinadas a populações carentes em ferro. / The anemia caused by iron deficiency, is the form more common of all the anemias and it affects large portion of the world population, especially the maternal-infantile group: infants, child-school, children, pregnant woman and nutrizes, carting delay in the development psicomotor and cognitive of smaller children two years old, besides decrease of the efficiency of the immune function, and worsening of infectious diseases. This research aims to estimate the iron availability in food iron sources and vitamin A, egg (e), carrot (c) and cabbage (cb), as well as to verify the interaction of the iron with &#945;, ß-carotene and with other interferents, being mixed the foods in study, resulted 13 food mixtures in different proportions (1:1), (1:1.5), (1:2), (1:2.5) and (1:3) include three food alone. The food mixtures, after prepare and cooking, was submitted the analyses of centesimal composition, levels of iron, tannin, phytic acid, oxalic acid, &#945;, ßcarotene and in vitro iron dialysability. The statistical analysis was determinate by SAS System include polynomial regression and correlation. The values for moisture varied from 83.93 to 95.74 g/100g, showing significant differences among the different mixtures, as well as for proteins (0.55 to 7.22 g/100g) and fat (0.21 to 5.94 g/100g). There was significant correlation with regard to moisture, fat, protein, ash and ß-carotene to in vitro iron dialysability, being positive correlation to moisture and ß-carotene, and negative to other components. The levels of tannins, phytate and oxalates ranged 0.78 to 1.40 mEqcatequina/g, 0.17 to 0.42mg/g and 0.06 to 0.30%, respectively. The mixture 2 (1e:1.5c) showed high levels of tannins (1.40mEqcatequina/g), and the mixtures 6 (1e:1cb) and 7 (1e:1.5cb) high levels of oxalates, and lower levels of in vitro dialysability iron, in relation to the other mixtures. The values for &#945;- carotene to mixtures with carrot ranged 2,435.27 to 4,609.83 µg/100g. With regard to ß-carotene, ranged variations to 2,406.75 from 7,881.55 µg/100g, being observed higher levels for the mixtures with carrot. The numbers showed that the mixtures with larger carrot and cabbage proportion showed the bigger results for the in vitro dialysability iron, ranges to 0.99 from 7.43 %, and the sample 5 (1e:3cb) it presented the bigger value, proceeded by the mixtures 1, 2, 3, 4, 8, 9 and 10. It’s concluded that the mixtures with larger carrot and cabbage proportion increased the iron availability, especially for the largest content of ß-carotene. There was not significant interference of antinutritional in the in vitro iron dialysability, although tannins and oxalates were an inhibitor when observed the numeric values in the mixtures with larger carrot and cabbage concentrations. The ß-carotene showed significant positive correlation with in vitro iron dialysability, increasing influence in the reduction of the antinutritional factors effect, especially phytates, in the iron availability, mainly in the mixtures with carrot. Therefore, the use of food mixtures as egg and carrot can be recommended, and this last one should be in larger proportions in meals destined to lacking populations in iron.

O ovo é o produto de eficiente transformação biológica feita pela galinha (Gallus gallus) de postura, com alta qualidade nutricional para o consumo humano. Na gema do ovo encontra-se a proteína denominada fosvitina, a mesma atua como carreadora do ferro se ligando a ele. A deficiência de ferro ocorre normalmente devido ao consumo insuficiente de alimentos fontes de ferro ou a baixa biodisponibilidade. O objetivo desta pesquisa foi verificar a concentração de proteínas, em especial a fosvitina/lipovitelina presente em gemas de ovos crus e cozidos nos diferentes ciclos de postura (inicial, intermediário e final) e avaliar a interferência desta proteína na disponibilidade do micronutriente ferro. Os tratamentos foram realizados em diferentes períodos e utilizaram-se ovos crus e cozidos, sendo gemas cruas de poedeiras em início, meio e fim de postura e gemas cozidas nos três ciclos de postura. Foram realizadas as análises de composição centesimal, concentração de ferro total e dialisável, concentração de proteínas em gemas e eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). Houve diferença na concentração de proteínas e diferentes níveis de ferro dialisável nos três ciclos de postura, porém em gemas cruas e cozidas. Com o passar dos ciclos (inicial, intermediário e final), as poedeiras mais velhas, apresentaram gemas com teor mais elevado de ferro disponível, porém uma quantidade inferior de proteínas em especial a fosvitina/lipovitelina, comparando-se com os ciclos inicial e intermediário. A disponibilidade de ferro foi mais elevada em gemas que passaram pelo processo de cocção, porém em poedeiras de postura final. / The egg is the product of efficient biological transformation made by the hens of position, with high nutricional quality for the human consumption. In the egg yolk of the egg it meets phosvitin called protein, the same one acts as hauled of the iron if binding it. The iron deficiency normally occurs due to the insufficient food consumption iron sources or low the bioavailability. The objective of this research was to verify the protein concentration, in special the present phosvitin/lipovitelin in egg yolks of raw eggs and stews in the different cycles of position (initial, intermediate, end) and to evaluate the interference of this protein in the availability of the micronutrient iron. The treatments had been carried through in different periods and had used raw eggs and cooked, being raw egg yolks of hens in initial, intermediate and end of position and egg yolks boil in the three cycles of position. The analyses of proximal composition had been carried through, concentration of total and availability iron, protein concentration in egg yolks and electrophoresis in poliacrilamide (SDS-PAGE) were carried. It had difference in the protein concentration and different levels of iron availability in the three cycles of position, however in raw and boiled egg yolks. With passing of the cycles (initial, intermediate, end), the hens oldest, had more presented egg yolks with a raised amount of available iron, however special amount of proteins in the fosvitina/lipovitelina, comparing themselves with the cycles initial and intermediate. The iron availability more was raised in egg yolks that had passed for cooking process, however in hens of final position.

Para se verificar o efeito de drogas hipolipemizantes sobre a qualidade do ovo, desempenho das aves, níveis de Iípides plasmáticos e colesterol na gema do ovo, foram realizados dois experimentos utilizando-se galinhas poedeiras Shaver. No experimento 1, 240 aves com 30 semanas de idade, foram alimentadas durante 12 semanas com dieta comercial (CON1) acrescida de Probucol a 0,1% (PROB), Gemfibrozil a 0,025% (GEMF) e Lovastatina em três concentrações: 0,0005% (LOV1), 0,001% (LOV2) e 0,0015% (LOV3), totalizando seis tratamentos. No experimento 2, 128 aves com 26 semanas de idade, receberam como alimentação, durante seis semanas, dieta formulada sem ingredientes de origem animal (CON2), acrescida de Colestiramina a 0,2% (COL 1) e 0,3% (COL2) e Lovastatina a 0,005% (LOV4), perfazendo um total de quatro tratamentos. Em ambos os experimentos, a adição das drogas não prejudicou a qualidade da casca e do albúmen dos ovos e, de um modo geral, não determinou efeitos indesejáveis sobre o desempenho produtivo das aves, com exceção da redução observada no peso médio dos ovos no experimento 2. No experimento 1, em relação aos lípides plasmáticos, a adição de drogas à ração determinou reduções de significado estatístico (p<0,05), nos triglicérides, apenas no LOV2 (38,5%), e no colesterol total, nos grupos LOV2 (36,0%), LOV3 (36,8%), PROB (29,6%) e GEMF (30,4%). Não foram consignadas alterações significativas nos níveis de HDL-colesterol em relação ao CON 1, observando-se, com exceção do GEMF, tendência a elevação de seus valores com o uso das diferentes drogas. Verificou-se redução significativa (p<0,05) do colesterol na gema (mg/g) nos grupos LOV1 (7,4%) e LOV3 (12,1%). No experimento 2, os lípides plasmáticos não sofreram alterações de significado estatístico em relação ao CON2, sendo que os triglicérides e o colesterol total mostraram tendência a diminuição no LOV4. A concentração de colesterol na gema (mg/g) permaneceu inalterada, em cotejo com o CON2, mediante a adição das drogas utilizadas no experimento 2. Os efeitos da Lovastatina sobre as concentrações de Iípides sanguíneos e de colesterol do ovo foram menos evidentes no experimento 2, onde as aves apresentavam níveis de Iípides plasmáticos mais reduzidos. Os coeficientes de correlação e as equações de regressão calculados mostraram que o peso da gema aumenta conforme o peso do ovo se eleva (p<0,05), e que um aumento do peso da gema corresponde a um incremento de seu teor de colesterol, indicando que as variações dos níveis de colesterol por gema podem ser, em parte, justificadas pelas diferenças entre os pesos dos ovos. / Two experiments were carried out to evaluate the effect of lipid¬lowering agents upon egg quality, reproductive performance, plasma lipids and egg yolk cholesterol levels of Shaver laying hens. In the first trial, two hundred and forty 30-week-old hens were fed basal diet (commercial ration - CON1) supplemented with 0.1 % Probucol (PROB), 0.025% Gemfibrozil (GEMF), or Lovastatin at 0.0005% (LOV1), 0.001 % (LOV2) and 0.015% (LOV3) for a 12-week experimental period. In experiment 2, one hundred and twenty-eight 26-week-old hens were fed basal diet without animal products (CON2) containing either 0.2% Cholestyramine (CaL 1), 0.3% Cholestyramine (COL2) or 0.005% Lovastatin (LOV4) for a period of six weeks. At the termination of both experiments, it was observed that the supplement of the drugs did not impair albumen and shell quality. In addition, hen performance was not adversely affected, with the exception of the significant reduction (p<0.05) in egg weights observed in experiment 2. In experiment 1, with regard to the plasma lipids, the depression in triglyceride concentrations approached statistical significance (p<0.05) only in LOV2 (38.5%), and total cholesterol was significantly depressed (p<0.05) in LOV2 (36.0%), LOV3 (36.8%), PROB (29.6%) and GEMF (30.4%) groups. HOL-cholesterol levels were not significantly altered by drug treatments; but with the exception of GEMF, there was a trend towards the elevation by the use of other drugs. Egg cholesterol content, expressed per gram of yolk was significantly lowered (p<0.05) in LOV1 (7.4%) and LOV3 (12.1 %). In experiment 2, no significant changes were observed on plasma lipids due to the addition of the drugs, but cholesterol and triglyceride levels tend to reduction in LOV4 group. Egg yolk cholesterol remained unchanged in experiment 2 with the supplement of the drugs. The effect of Lovastatin on plasma lipid and egg yolk cholesterol concentration was less remarkable in experiment 2, when hens presented lower plasma lipid levels. When correlation coefficients and regression equations were calculated, it was found that yolk weight increased linearly (p<0.05) as egg weight raised, and the higher the yolk weight, the higher the yolk cholesterol content, indicating that yolk cholesterol content changes may be partially explained by differences among egg weights.

Lacase 2 é um gene com função majoritária na esclerotinização e pigmentação da cutícula corporal em insetos e evidências sugerem que desenvolva função na esclerotinização do córion dos ovos de mosquitos vetores de patógenos. A literatura registra que quando a expressão do gene é silenciada em adultos de Aedes albopictus suas fêmeas produzem ovos hialinos e inviáveis. Em teoria, este seria um bom gene-candidato à manipulação em iniciativas de controle biológico baseada em organismos geneticamente modificados. No presente estudo, caracterizamos o perfil expressional e a atividade enzimática de lacase 2 durante o desenvolvimento de Aedes aegypti, bem como silenciamos transcritos do gene em fêmeas adultas para testar se havia prejuízo na formação do córion dos ovos. A técnica de RT-PCR não foi sensível suficiente para detectar amplificação do gene lacase 2 em larvas, contudo, detectamos amplificação nos outros estágios de vida. Pupas e fêmeas adultas após repasto sanguíneo apresentaram perfis de expressão similares entre si. Com a técnica de detecção de atividade enzimática por fluorescência foi possível determinar o perfil de atividade enzimática de lacase 2 e o pH ótimo em todos estágios de desenvolvimento. O maior pico de atividade foi registrado em fêmeas adultas 32 horas após repasto sanguíneo. A atividade enzimática de lacase 2 foi confirmada após separação cromatográfica na amostra de fêmeas adultas 24 horas após repasto sanguíneo. Ambas técnicas, RT-PCR e detecção de atividade enzimática, apontam para maior produção de lacase 2 após repasto sanguíneo em fêmeas adultas, denotando sua importância no desenvolvimento do ovo. Para realização dos experimentos de silenciamento de transcritos foram sintetizados RNAs dupla-fita de lacase 2 e da proteína MSP1, utilizado como controle negativo do silenciamento. Ambos RNAs dupla-fita foram microinjetados em três concentrações, 20ng, 200ng e 1700ng, isoladamente em três grupos experimentais de fêmeas de Ae. aegypti. Em todos os experimentos não houve diferença morfológica entre os ovos das fêmeas microinjetadas com RNA dupla-fita de lacase 2 e MSP1. Os ovos dos grupos experimento e controle iniciaram a pigmentação cerca de 30 minutos após a postura. Entretanto, foram observados alguns ovos com início de pigmentação tardio no grupo experimento no lote de fêmeas microinjetadas com 200ng. Este fenômeno pareceu ter sido um incipiente do silenciamento de transcritos de lacase 2. O efeito da inserção do RNA dupla-fita de lacase 2 não resultou no mesmo efeito reportado na literatura para Ae. albopictus. Ainda assim, os resultados obtidos neste trabalho corroboram a hipótese de que lacase 2 desempenhe alguma função no desenvolvimento do ovo em mosquitos. / Laccase 2 is a gene with major role in body cuticle tanning in insects and evidences suggest laccase 2 may play a role in egg chorion tanning in mosquitoes vectors of pathogens. When the expression of the gene is knocked down in adults of Aedes albopictus their females produce hyaline and inviable eggs. Theoretically, this gene would be a good candidate for manipulation in the context of biological control of vectors based on genetically modified organisms. In the present study, we characterized the expressional profile and enzymatic activity of laccase 2 during the development of Aedes aegypti. We also knocked down the gene in adult females hypothesizing that this could jeopardize egg chorion formation. The RT-PCR technique was not sensitive to detect laccase 2 amplification in larvae, however, we detected amplification in other life stages. Pupae and adults females after blood meal exhibited equivalent expressional profiles. Using the technique of enzymatic activity detection by fluorescence, it was possible to determine the laccase 2 enzymatic activity profile and the optimum pH in all stages of development. The highest activity peak was registered in adult females 32 hours after blood meal. The laccase 2 enzymatic activity was confirmed by chromatographic separation in the adults females 24 hours after blood meal sample. Both techniques (RT-PCR and enzymatic activity detection) point to a higher production of laccase 2 after blood meal in adult females, suggesting the importance of laccase 2 for egg development. For the knocking down experiments we synthesized double-stranded RNA of laccase 2 and protein MSP1 (negative control). Both double-stranded RNAs were injected at three concentrations, 20ng, 200ng and 1700ng, in three experimental groups of Ae. aegypti females. No significant morphological differences between eggs from females injected with laccase 2 and MSP1 double-stranded RNA were observed. Pigmentation of the eggs started 30 minutes after they were laid (experimental and control group). However, the pigmentation started slightly later in those eggs of experiment females injected with 200ng. This apparent developmental delay may be related to the silencing of laccase 2. The effect of insertion of double-stranded RNA of laccase 2 did not result in the same effect reported in the literature for Ae. albopictus. Even so, the results obtained in this study corroborate the hypothesis that laccase 2 plays a role in egg development in mosquitoes.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-16T12:05:52Z No. of bitstreams: 1 Manlio Ponzi Junior.pdf: 1281996 bytes, checksum: 5f8b4de48b96eb8c517e3141a56a43d7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-16T12:05:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Manlio Ponzi Junior.pdf: 1281996 bytes, checksum: 5f8b4de48b96eb8c517e3141a56a43d7 (MD5) Previous issue date: 2003-02-14 / Reproduction by induction is a technic completely dominated, however is possible that some current proceedings utilized, would prejudice the larval production. Thus, the use of the instruments (fowl blume, spatula, etc), to blend the gamets, would can a factor to decrease the larval prodution. This work has as main objetive this hypothesis. For the experiment it was utilized the freshwater fish tambaqui Colossoma macropomum (CUVIER, 1816). To such, it was delineated a test with two conditions: A - blend the gamets with the use of the instruments , and B - blend the gamets without the use of the instruments (blend the gamets with the soft agitation of the vessel). After fertilization , the eggs were analised under a Scanning electron-microscope, thus were confirmed the existence of the damage realized by the instruments on the superficial structure. In B condition occured a increasing rate of fecundation (F(1:14) = 12,90, p < 0,01) and the larval hatching (F(1:14) = 8,43, p < 0,05). Thus, the use of the instruments isn’t to recommended for the enlargemented of larval prodution. / A reprodução induzida de peixes é uma técnica dominada. No entanto, é possível que alguns procedimentos utilizados atualmente possam prejudicar a produção final de larvas. Assim, a utilização de instrumentos (penas de aves,espátulas) para mistura dos gametas, poderia ser um fator de redução da produção. Este trabalho teve como objetivo testar esta hipótese, utilizando-se como modelo experimental desovas de tambaqui, Colossoma macropomum (CUVIER, 1816). Para tal foi delineado um teste com duas condições: A - mistura dos gametas com utilização de instrumento (pena de ave) e B – mistura de gametas sem utilização de instrumentos (com agitação suave do vasilhame). Após a fertilização os ovos foram analisados por eletro-micrografia de varredura, o que comprovou a existência de danos causados pelos instrumentos à superfície dos mesmos. Na condição B a taxa de fecundação foi maior (F(1:14) = 12,90, p < 0,01), assim como a de eclosão das larvas (F(1:14) = 8,43, p < 0,05), o que deve ocorrer em virtude das lesões causada aos ovos pelos instrumentos. Desta forma, a não utilização de instrumentos é recomendável, pois otimiza a produção de larvas.