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Gênero Paracoccidioides : especiação e análise do intein PRP8 /

Theodoro, Raquel Cordeiro. January 2010 (has links)
Orientador: Eduardo Bagagli / Banca: Rosana Puccia / Banca: Cleslei Fernando Zanelli / Banca: João Lucio de Azevedo / Banca: Guaracy Tadeu Rocha / Resumo: Não disponível / Abstract: Not available / Doutor
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Gênero Paracoccidioides: especiação e análise do intein PRP8

Theodoro, Raquel Cordeiro [UNESP] 27 September 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-09-27Bitstream added on 2014-06-13T18:43:17Z : No. of bitstreams: 1 theodoro_rc_dr_botib.pdf: 3958340 bytes, checksum: 8ff9c8795d7045c522c1b57fc251bded (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Not available
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Avaliação do efeito anti-inflamatório da silibinina sobre monócitos de sangue periférico de indivíduos saudáveis, infectados in vitro com cepa virulenta de Paracoccidioides brasiliensis

Castro, Camila Ferreira Bannwart [UNESP] 18 December 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-12-18Bitstream added on 2014-06-13T19:01:04Z : No. of bitstreams: 1 bannwart_cf_dr_botib.pdf: 1094046 bytes, checksum: 3e5c01fb3fd618a497a73f357427ec4d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Silibinin is the major active component of silymarin (Silybum marianum), a polyphenolic plant flavonoid that has anti-inflammatory, cytoprotective and anticarcinogenic effects. The modulatory effect of silibinin on monocyte function against Paracoccidioides brasiliensis (Pb18) has not yet been demonstrated. The present study investigated whether the effect of silibinin on NF-kB pathways may affects the production of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), interleukin-10 (IL-10), Transforming growth factor beta (TGF-β1), prostaglandin E2 (PGE2) and nitric oxide (NO), as well as the fungicidal activity of human monocytes challenged in vitro with Pb18. Peripheral blood monocytes from healthy individuals were treated with or without 5 uM and 50 uM silibinin and challenged with Pb18 or were stimulated with lipopolissaccharide (LPS). After 18 h of culture TNF-α, IL-10, TGF-β1 and PGE2 were determined by ELISA, while NO release was quantified by the accumulation of nitrite in the supernatants using the standard Griess assay. Fungicidal activity of monocytes against Pb18 was assessed after cell incubation with interferon-gamma, culture with or without silibinin for 18 h and challenge with Pb18 for 4h. NF-kB activation in the cultures was evaluated by flow cytometry and ELISA after monocyte stimulation with Pb18 or LPS for 30 min. Silibinin at 50uM concentration partially inhibited p65NF-kB activation as observed by reduction in the number of cells expressing this factor, that was confirmed by low concentration detection of p65NF-kB in the nucleus. This silibinin effects resulted in suppression of TNF-α, IL-10, TGF-β1 and PGE2 and NO production, but did not affect fungicidal activity of monocytes against Pb18. The modulatory effect of silibinin on the monocytes inflammatory response against P. brasiliensis might be important to establish an efficient and beneficial immune response of the host against the fungus
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Avaliação do efeito anti-inflamatório da silibinina sobre monócitos de sangue periférico de indivíduos saudáveis, infectados in vitro com cepa virulenta de Paracoccidioides brasiliensis /

Castro, Camila Ferreira Bannwart. January 2009 (has links)
Orientador: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: Ramon Kaneno / Banca: Vanessa Lara / Banca: Iracilda Z. Carlos / Banca: Sueli Calvi / Não disponível / Abstract: Silibinin is the major active component of silymarin (Silybum marianum), a polyphenolic plant flavonoid that has anti-inflammatory, cytoprotective and anticarcinogenic effects. The modulatory effect of silibinin on monocyte function against Paracoccidioides brasiliensis (Pb18) has not yet been demonstrated. The present study investigated whether the effect of silibinin on NF-kB pathways may affects the production of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), interleukin-10 (IL-10), Transforming growth factor beta (TGF-β1), prostaglandin E2 (PGE2) and nitric oxide (NO), as well as the fungicidal activity of human monocytes challenged in vitro with Pb18. Peripheral blood monocytes from healthy individuals were treated with or without 5 uM and 50 uM silibinin and challenged with Pb18 or were stimulated with lipopolissaccharide (LPS). After 18 h of culture TNF-α, IL-10, TGF-β1 and PGE2 were determined by ELISA, while NO release was quantified by the accumulation of nitrite in the supernatants using the standard Griess assay. Fungicidal activity of monocytes against Pb18 was assessed after cell incubation with interferon-gamma, culture with or without silibinin for 18 h and challenge with Pb18 for 4h. NF-kB activation in the cultures was evaluated by flow cytometry and ELISA after monocyte stimulation with Pb18 or LPS for 30 min. Silibinin at 50uM concentration partially inhibited p65NF-kB activation as observed by reduction in the number of cells expressing this factor, that was confirmed by low concentration detection of p65NF-kB in the nucleus. This silibinin effects resulted in suppression of TNF-α, IL-10, TGF-β1 and PGE2 and NO production, but did not affect fungicidal activity of monocytes against Pb18. The modulatory effect of silibinin on the monocytes inflammatory response against P. brasiliensis might be important to establish an efficient and beneficial immune response of the host against the fungus / Doutor
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Efeito de um inibidor de leucotrienos no processo inflamatório decorrente da infecção por Paracoccidioides brasiliensis em camundongos geneticamnte selecionados

Balderramas, Helanderson de Almeida [UNESP] 13 February 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-13Bitstream added on 2014-06-13T20:12:17Z : No. of bitstreams: 1 balderramas_ha_me_botfm.pdf: 358097 bytes, checksum: c417b922a0a5cb167dc7ed65911f38d6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Leucotrienos são mediadores clássicos da resposta inflamatória, descritos como agentes quimiotáticos e reguladores da atividade microbicida de células do sistema imune inato, tendo papel protetor contra diferentes agentes infecciosos. Neste estudo, nós investigamos o envolvimento de leucotrienos no curso da paracoccidioidomicose murina a partir dos seguintes parâmetros imunológicos: influxo celular, atividade da mieloperoxidase, produção de NO, produção de citocinas e recuperação fúngica em pulmões de camundongos selecionados de acordo com a intensidade da sua resposta inflamatória aguda máxima (AIRmax) e mínima (AIRmin). Observamos que a infecção por P. brasiliensis induz considerável produção de citocinas IL-6, IL-10, IFN- e TNF-, promove o recrutamento celular e produção de NO nos pulmões em diferentes períodos de estudo. Nos animais tratados com um inibidor as síntese de leucotrienos (MK886) observamos uma menor produção das citocinas IFN-, IL-6 e TNF- concomitante com a queda do influxo de neutrófilos, e também diminuição na produção de NO, esses resultados podem explicar uma maior carga fungica nos pulmões de animais que tiveram a síntese de leucotrienos inibida, sugerindo aos leucotrienos um possível papel protetor na paracoccidioidomicose experimental. Animais da linhagem AIRmax apresentaram menor carga fungica quando comparado com animais AIRmin, este resultado pode ser relacionado ao fenótipo da AIR quanto à migração de neutrófilos, além de uma menor produção de NO e citocinas pró-inflamatórias, conferindo aos camundongos com background AIRmax maior resistência a infecção por P.brasiliensis. / Leukotrienes are classic inflammatory response mediators considered chemotactic agents and microbicide activity regulators in cells of the innate immune system, playing a protective role against different infectious agents. In this study, we investigated the involvement of leukotrienes in the course of murine paracoccidioidomycosis based on the following immunologic parameters: cell influx, mieloperoxydase activity, NO production, cytokine production, and fungal recovery in lungs of mice selected according to the intensity of their low (AIRmin) and high (AIRmax) acute inflammatory response. Infection by P. brasiliensis induced considerable production of the cytokines IL-6, IL-10, IFN-, and TNF-, and led to cell recruitment, as well as NO production, in lungs at different study periods. In animals treated with MK886, a leukotriene biosynthesis inhibitor, IFN-, IL-6 and TNF- production was lower, while neutrophil influx and NO production decreased. These results may explain the higher fungal load in lungs of animals in which leukotriene synthesis was inhibited, suggesting that leukotrienes have a possible protective role in experimental paracoccidioidomycosis. AIRmax animals had lower fungal load relative to AIRmin ones, which can be related to the AIR phenotype regarding neutrophil migration, besides lower production of NO and pro-inflammatory cytokines; thus, mice presenting AIRmax background are more resistant to infection by P.brasiliensis.
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Comparação da eficácia de dose diária do cotrimoxazol, administrada uma ou duas vezes no tratamento da Paracoccidioidomicose murina / Comparison of the daily dose efficacy of cotrimoxazole given once or twice in the treatment of murine Paracoccidioidomycosis

Maza, Lariza 26 February 2018 (has links)
Submitted by lariza Maza (lariza.maza@hotmail.com) on 2018-04-16T14:40:41Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Final Mestrado Lariza Maza pdf.pdf: 2708028 bytes, checksum: d776645b08f3ecce08017c07afc27ae3 (MD5) / Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2018-04-17T13:47:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 maza_l_me_bot.pdf: 2708028 bytes, checksum: d776645b08f3ecce08017c07afc27ae3 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-17T13:47:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 maza_l_me_bot.pdf: 2708028 bytes, checksum: d776645b08f3ecce08017c07afc27ae3 (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução. A Paracoccidioidomicose (PCM) é micose sistêmica causada por fungos termo dimórficos do gênero Paracocidioides. A associação sulfametoxazol trimetoprim, também denominada Cotrimoxazol (CMX), é uma das principais opções terapêuticas. No atual tratamento da PCM, o CMX é utilizado na dose de 2400 mg de sulfametoxazol, o que corresponde a seis comprimidos, divididos em duas tomadas diárias, fato que tem levado a menor adesão do paciente à terapia antifúngica. Estudos experimentais têm observado que a dose única diária pode ser suficiente para tratar a PCM. Objetivo. Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia do tratamento da PCM Murina com CMX administrado em uma e duas doses diárias. Material e métodos. Utilizou-se camundongos machos, isogênicos da linhagem Balb/c e o isolado Pb 326, de uma paciente atendida no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu em 2012 com a forma aguda e subaguda. Este estudo apresentou três experimentos. No experimento I, 100 animais foram sorteados em 4 grupos: controle saudável (G1), controle infectado (G2) e os grupos infectados que receberam CMX uma vez (G3) e duas vezes ao dia (G4). Após 28 dias da infecção, iniciou-se o tratamento, com avaliação da recuperação fúngica em pulmão e baço, exame histopatológico dos pulmões e pesquisa de anticorpos séricos específicos anti P. brasiliensis, pela imunodifusão dupla em gel de ágar (IDD) nas semanas 8, 12, 16 e 20 após a infecção. No experimento II, os mesmos animais foram avaliados quanto a sobrevida cumulativa em 140 dias. No experimento III, 40 camundongos infectados e tratados por 10 dias com dose única diária e com duas tomadas ao dia foram avaliados quanto ao perfil sérico de sulfametoxazol em quatro medidas durante o dia e foi determinado a concentração inibitória mínima deste isolado utilizado no estudo. Os testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney foram utilizados para comparação de medianas, regressão linear para analisar os parâmetros nos sucessivos momentos de sacrifício e Kaplan-Meier para a avaliação de sobrevida. Foi considerado significativo os valores de p menores que 0,05. Resultados. Os dois grupos tratados com CMX (G3 e G4) apresentaram resposta ao tratamento, caracterizada pela melhora do aspecto e do comportamento do animal, queda dos níveis de anticorpos séricos pela IDD (G3: p=0,005; G4: p=0,01), redução da carga fúngica pulmonar, analisada pelo exame histopatológico, na 16ª e 20ª se- manas comparadas com a 8ª e 12ª (p<0,01) e menor porcentagem de fibras colágenas por área peribronquiolar na 20ª semana comparados com a 12ª semana (p<0,05). Não houve diferença na recuperação fúngica em pulmões e baço, na carga fúngica contada pelo exame histopatológico de pulmão e nem na porcentagem de fibra colágena por área peribronquiolar entre G3 e G4 nas semanas 8, 12, 16 e 20. No entanto, os níveis de IDD tenderam a ser mais baixos no G4 do que no G3 na 8ª semana de tratamento (1:4 vs 1:16, p = 0,08). O grupo G4 apresentou menor recuperação fúngica dos pulmões na 8ª e 12ª semanas e no baço nas semanas 16 e 20 quando comparado ao controle infectado. Não houve diferença na mortalidade cumulativa entre G3 e G4 (0,0% vs 4,0%). Conclusões. Esses achados demonstram eficácia em ambos os esquemas de tratamento da PCM Murina com CMX. Embora não se observou diferenças diretas entre os dois esquemas de tratamento com CMX, o grupo que recebeu duas doses ao dia apresentou maior resposta quando comparado com o controle infectado, fato que não ocorreu com o grupo tratado com dose única diária. Isto sugere que diferenças podem existir entre os dois esquemas e que estudo futuros são necessários para se conhecer melhor a eficácia destes esquemas terapêuticos. / Introduction. Paracoccidioidomycosis (PCM) is systemic mycosis caused by termodimorphic fungi of the genus Paracoccidioides. The association of sulfamethoxazole-trimethoprim, also called cotrimoxazole (CMX), is one of the main therapeutic options. In the current treatment of PCM, CMX is used in the dose of 2,400 mg of sulfamethoxazole, which corresponds to six tablets divided into two daily doses, a fact that has led to the patient's lesser adherence to anti-fungal therapy. Experimental studies have observed that the single daily dose may be suffi-cient to treat PCM. Goal. This study aimed to evaluate the efficacy of murine PCM treatment with CMX administered in one and two daily doses. Material and methods. Male, isogenic mice of the Balb / c gem line and Pb 326 isolate were collected from a patient attended at the Hospital das Clínicas of the Faculty of Medicine of Botucatu in 2012 with the acute and sub-acute form. This study presented three experiments. In the experiment I, 100 animals were randomly assigned to 4 groups: healthy control (G1), infected control (G2) and infected groups receiving CMX once (G3) and twice daily (G4). After 28 days of infection, treatment with the evaluation of fungal recovery in the lung and spleen, histopathological examination of the lungs and the detection of specific serum antibodies to P. brasiliensis by double agar gel immunodiffusion (IDD) in the weeks 8, 12, 16 and 20 after infection. In Experiment II, the same animals were evaluated for cumulative survival at 140 days. In Experiment III, 40 mice infected and treated for 10 days with single daily dose and with two intakes per day were evaluated for the serum sulfamethoxazole profile in four measures during the day and the minimum inbred concentration of this isolate used in the study. The Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests were used for comparison of medians, linear regression to analyze the parame-ters in the successive moments of sacrifice and Kaplan-Meier for the evaluation of survival. P value of less than 0.05 was considered significant. Results. The two groups treated with CMX (G3 and G4) presented a response to treatment, characterized by an improvement in the ap-pearance and behavior of the animal, a decrease in serum antibody levels by IDD (G3: p = 0.005, G4: p = 0.01), reduction of lung fungal load, analyzed by histopathological examination, at the 16th and 20th week periods compared with the 8th and 12th days (p <0.01), and a low-er percentage of collagen fibers by peribronchiolar area at week 20 compared to at week 12 (p <0.05). There was no difference in fungal recovery in the lungs and spleen, in the fungal load counted by histopathological examination of the lung, nor in the percentage of collagen fiber per peri-brachial area between G3 and G4 at weeks 8, 12, 16 and 20. However, levels of IDD tended to be lower in G4 than in G3 at week 8 of treatment (1: 4 vs. 1:16, p = 0.08). The G4 group presented lower fungal recovery of the lungs at the 8th and 12th weeks and in the spleen at weeks 16 and 20 when compared to the infected control. There was no difference in cumulative mortality between G3 and G4 (0.0% vs 4.0%). Con-clusions. These findings demonstrate efficacy in both murine PCM treatment regimens with CMX. Although there were no direct differences between the two treatment regimens with CMX, the group receiving two doses per day presented a higher response when compared to the infected control, a fact that did not occur with the single daily dose group. This suggests that differences may exist between the two schemes and that future studies are needed to better understand the efficacy of these therapeutic regimens
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Comparação da eficácia de dose diária do cotrimoxazol, administrada uma ou duas vezes no tratamento da Paracoccidioidomicose murina

Maza, Lariza January 2018 (has links)
Orientador: Ricardo de Souza Cavalcante / Resumo: Introdução. A Paracoccidioidomicose (PCM) é micose sistêmica causada por fungos termo dimórficos do gênero Paracocidioides. A associação sulfametoxazol trimetoprim, também denominada Cotrimoxazol (CMX), é uma das principais opções terapêuticas. No atual tratamento da PCM, o CMX é utilizado na dose de 2400 mg de sulfametoxazol, o que corresponde a seis comprimidos, divididos em duas tomadas diárias, fato que tem levado a menor adesão do paciente à terapia antifúngica. Estudos experimentais têm observado que a dose única diária pode ser suficiente para tratar a PCM. Objetivo. Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia do tratamento da PCM Murina com CMX administrado em uma e duas doses diárias. Material e métodos. Utilizou-se camundongos machos, isogênicos da linhagem Balb/c e o isolado Pb 326, de uma paciente atendida no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu em 2012 com a forma aguda e subaguda. Este estudo apresentou três experimentos. No experimento I, 100 animais foram sorteados em 4 grupos: controle saudável (G1), controle infectado (G2) e os grupos infectados que receberam CMX uma vez (G3) e duas vezes ao dia (G4). Após 28 dias da infecção, iniciou-se o tratamento, com avaliação da recuperação fúngica em pulmão e baço, exame histopatológico dos pulmões e pesquisa de anticorpos séricos específicos anti P. brasiliensis, pela imunodifusão dupla em gel de ágar (IDD) nas semanas 8, 12, 16 e 20 após a infecção. No experimento II, os mesmos animais fo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction. Paracoccidioidomycosis (PCM) is systemic mycosis caused by termodimorphic fungi of the genus Paracoccidioides. The association of sulfamethoxazole-trimethoprim, also called cotrimoxazole (CMX), is one of the main therapeutic options. In the current treatment of PCM, CMX is used in the dose of 2,400 mg of sulfamethoxazole, which corresponds to six tablets divided into two daily doses, a fact that has led to the patient's lesser adherence to anti-fungal therapy. Experimental studies have observed that the single daily dose may be suffi-cient to treat PCM. Goal. This study aimed to evaluate the efficacy of murine PCM treatment with CMX administered in one and two daily doses. Material and methods. Male, isogenic mice of the Balb / c gem line and Pb 326 isolate were collected from a patient attended at the Hospital das Clínicas of the Faculty of Medicine of Botucatu in 2012 with the acute and sub-acute form. This study presented three experiments. In the experiment I, 100 animals were randomly assigned to 4 groups: healthy control (G1), infected control (G2) and infected groups receiving CMX once (G3) and twice daily (G4). After 28 days of infection, treatment with the evaluation of fungal recovery in the lung and spleen, histopathological examination of the lungs and the detection of specific serum antibodies to P. brasiliensis by double agar gel immunodiffusion (IDD) in the weeks 8, 12, 16 and 20 after infection. In Experiment II, the same animals were evaluated f... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Produção de citocinas na paracoccidioidomicose experimental murina em períodos iniciais do processo infeccioso em linhagens selecionadas para resposta inflamatória aguda

Cavalheiro, Juliana Semim [UNESP] 06 February 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-06Bitstream added on 2014-06-13T18:42:09Z : No. of bitstreams: 1 cavalheiro_js_dr_botfm.pdf: 355047 bytes, checksum: d0af4a219752a076dbe64c1332627767 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A Paracoccidioidomicose é uma micose sistêmica humana causada por um fungo imperfeito e dimórfico denominado Paracoccidioides brasilienis (P.brasiliensis), sendo os conídeos sua forma infectante. Camundongos geneticamente selecionados para Resposta Inflamatória Aguda Máxima (AIRmax) e Mínima (AIRmin), foram usados como modelo experimental da paracoccidioidomicose. Os animais foram inoculados pela via intraperitoneal com P. brasiliensis (cepa 18) e sacrificados após 6, 12 e 24 horas e 3, 7 e 14 dias de infecção. Nestes períodos foram removidos fragmentos de baço, fígado e pulmão para avaliação do grau de infecção de células fúngicas nestes órgãos, avaliação da atividade macrofágica por macrófagos peritoneais e esplênicos pela determinação das concentrações de óxido nítrico e produção de citocinas pró e anti-inflamatórias de sobrenadantes de homogenatos de pulmão e baço. No presente trabalho observamos que as linhagens AIRmax apresentaram maior contenção do processo infeccioso que as linhagens AIRmin nos compartimentos analisados. Quanto a produção de NO observamos que animais AIRmax produziram mais deste metabólito em períodos tardios, o que pode ter ajudado esta linhagem na maior contenção do processo infeccioso nos órgãos analisados. Quanto a produção de citocinas observamos que a produção de INF- , TNF- , IL-1, IL- 6, IL-8, IL-12, estão aumentadas nas linhagens AIRmax na maioria dos órgãos e períodos analisados, contribuindo para a maior resistência destas linhagens frente à infecção pelo fungo em relação aos AIRmin, com exceção da IL-4 e IL-10 que apresentaram sua produção diminuída na linhagem AIRmax e aumentada na linhagem AIRmin reproduzindo seu efeito biológico supressor. Frente aos resultados observamos que a linhagem AIRmax apresentou maior contenção do processo infeccioso, com importante envolvimento... / Paracoccidioidomycosis is a systemic human mycosis caused by Paracoccidioides brasiliensis (P. brasiliensis), an imperfect dimorphic fungus whose conidia are its infectant form.Mice genetically selected for Maximum (AIRmax) and Minimum (AIRmin) Acute Inflammatory Response were used as an experimental paracoccidioidomycosis model. The animals were intraperitoneally inoculated with P. brasiliensis (strain 18) and sacrificed after 6, 12 and 24 hours and after 3, 7 and 14 days of infection. In these periods, fragments from their spleen, liver and lung were removed for evaluation of the level of infection by fungal cells in those organs, evaluation of macrophagic activity by peritoneal and splenic macrophages through the determination of the concentrations of nitric oxide (NO) and production of pro- and anti-inflammatory cytokines of lung and spleen homogenate supernatants. In the present study, it was observed that the AIRmax lineages presented greater control of the infectious process than did the AIRmin lineages in the analyzed compartments. As regards NO production, it was found that AIRmax animals produced more of such metabolite in late periods, which may have helped that lineage with the greater control of the infectious process in the analyzed organs. Concerning cytokine production, it was observed that the production of INF- , TNF- , IL-1, IL-6, IL-8 and IL-12 were increased for the AIRmax lineages in most analyzed organs and periods, thus contributing to the greater resistance exhibited by such lineages against infection with the fungus in relation to AIRmin, except for IL-4 and IL-10, which showed decreased production for the AIRmax lineage, reproducing its suppressive biological effect. From these results, it was observed that the AIRmax lineage showed greater control over the infectious process with an important involvement of the analyzed cytokines. These findings... (Complet abstract click electronic access below)
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Efeito de um inibidor de leucotrienos no processo inflamatório decorrente da infecção por Paracoccidioides brasiliensis em camundongos geneticamnte selecionados /

Balderramas, Helanderson de Almeida. January 2009 (has links)
Orientador: Silvio Luis de Oliveira / Banca: José Maurício Sforcin / Banca: Orlando Garcia Ribeiro Filho / Resumo: Leucotrienos são mediadores clássicos da resposta inflamatória, descritos como agentes quimiotáticos e reguladores da atividade microbicida de células do sistema imune inato, tendo papel protetor contra diferentes agentes infecciosos. Neste estudo, nós investigamos o envolvimento de leucotrienos no curso da paracoccidioidomicose murina a partir dos seguintes parâmetros imunológicos: influxo celular, atividade da mieloperoxidase, produção de NO, produção de citocinas e recuperação fúngica em pulmões de camundongos selecionados de acordo com a intensidade da sua resposta inflamatória aguda máxima (AIRmax) e mínima (AIRmin). Observamos que a infecção por P. brasiliensis induz considerável produção de citocinas IL-6, IL-10, IFN- e TNF-, promove o recrutamento celular e produção de NO nos pulmões em diferentes períodos de estudo. Nos animais tratados com um inibidor as síntese de leucotrienos (MK886) observamos uma menor produção das citocinas IFN-, IL-6 e TNF- concomitante com a queda do influxo de neutrófilos, e também diminuição na produção de NO, esses resultados podem explicar uma maior carga fungica nos pulmões de animais que tiveram a síntese de leucotrienos inibida, sugerindo aos leucotrienos um possível papel protetor na paracoccidioidomicose experimental. Animais da linhagem AIRmax apresentaram menor carga fungica quando comparado com animais AIRmin, este resultado pode ser relacionado ao fenótipo da AIR quanto à migração de neutrófilos, além de uma menor produção de NO e citocinas pró-inflamatórias, conferindo aos camundongos com background AIRmax maior resistência a infecção por P.brasiliensis. / Abstract: Leukotrienes are classic inflammatory response mediators considered chemotactic agents and microbicide activity regulators in cells of the innate immune system, playing a protective role against different infectious agents. In this study, we investigated the involvement of leukotrienes in the course of murine paracoccidioidomycosis based on the following immunologic parameters: cell influx, mieloperoxydase activity, NO production, cytokine production, and fungal recovery in lungs of mice selected according to the intensity of their low (AIRmin) and high (AIRmax) acute inflammatory response. Infection by P. brasiliensis induced considerable production of the cytokines IL-6, IL-10, IFN-, and TNF-, and led to cell recruitment, as well as NO production, in lungs at different study periods. In animals treated with MK886, a leukotriene biosynthesis inhibitor, IFN-, IL-6 and TNF- production was lower, while neutrophil influx and NO production decreased. These results may explain the higher fungal load in lungs of animals in which leukotriene synthesis was inhibited, suggesting that leukotrienes have a possible protective role in experimental paracoccidioidomycosis. AIRmax animals had lower fungal load relative to AIRmin ones, which can be related to the AIR phenotype regarding neutrophil migration, besides lower production of NO and pro-inflammatory cytokines; thus, mice presenting AIRmax background are more resistant to infection by P.brasiliensis. / Mestre
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Produção de citocinas na paracoccidioidomicose experimental murina em períodos iniciais do processo infeccioso em linhagens selecionadas para resposta inflamatória aguda /

Cavalheiro, Juliana Semim. January 2009 (has links)
Orientador: Silvio Luis de Oliveira / Banca: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: Eduardo Bagagli / Banca: Luis Florêncio Franco Margatho / Banca: Carlos Alberto Sorgi / Resumo: A Paracoccidioidomicose é uma micose sistêmica humana causada por um fungo imperfeito e dimórfico denominado Paracoccidioides brasilienis (P.brasiliensis), sendo os conídeos sua forma infectante. Camundongos geneticamente selecionados para Resposta Inflamatória Aguda Máxima (AIRmax) e Mínima (AIRmin), foram usados como modelo experimental da paracoccidioidomicose. Os animais foram inoculados pela via intraperitoneal com P. brasiliensis (cepa 18) e sacrificados após 6, 12 e 24 horas e 3, 7 e 14 dias de infecção. Nestes períodos foram removidos fragmentos de baço, fígado e pulmão para avaliação do grau de infecção de células fúngicas nestes órgãos, avaliação da atividade macrofágica por macrófagos peritoneais e esplênicos pela determinação das concentrações de óxido nítrico e produção de citocinas pró e anti-inflamatórias de sobrenadantes de homogenatos de pulmão e baço. No presente trabalho observamos que as linhagens AIRmax apresentaram maior contenção do processo infeccioso que as linhagens AIRmin nos compartimentos analisados. Quanto a produção de NO observamos que animais AIRmax produziram mais deste metabólito em períodos tardios, o que pode ter ajudado esta linhagem na maior contenção do processo infeccioso nos órgãos analisados. Quanto a produção de citocinas observamos que a produção de INF- , TNF- , IL-1, IL- 6, IL-8, IL-12, estão aumentadas nas linhagens AIRmax na maioria dos órgãos e períodos analisados, contribuindo para a maior resistência destas linhagens frente à infecção pelo fungo em relação aos AIRmin, com exceção da IL-4 e IL-10 que apresentaram sua produção diminuída na linhagem AIRmax e aumentada na linhagem AIRmin reproduzindo seu efeito biológico supressor. Frente aos resultados observamos que a linhagem AIRmax apresentou maior contenção do processo infeccioso, com importante envolvimento... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Paracoccidioidomycosis is a systemic human mycosis caused by Paracoccidioides brasiliensis (P. brasiliensis), an imperfect dimorphic fungus whose conidia are its infectant form.Mice genetically selected for Maximum (AIRmax) and Minimum (AIRmin) Acute Inflammatory Response were used as an experimental paracoccidioidomycosis model. The animals were intraperitoneally inoculated with P. brasiliensis (strain 18) and sacrificed after 6, 12 and 24 hours and after 3, 7 and 14 days of infection. In these periods, fragments from their spleen, liver and lung were removed for evaluation of the level of infection by fungal cells in those organs, evaluation of macrophagic activity by peritoneal and splenic macrophages through the determination of the concentrations of nitric oxide (NO) and production of pro- and anti-inflammatory cytokines of lung and spleen homogenate supernatants. In the present study, it was observed that the AIRmax lineages presented greater control of the infectious process than did the AIRmin lineages in the analyzed compartments. As regards NO production, it was found that AIRmax animals produced more of such metabolite in late periods, which may have helped that lineage with the greater control of the infectious process in the analyzed organs. Concerning cytokine production, it was observed that the production of INF- , TNF- , IL-1, IL-6, IL-8 and IL-12 were increased for the AIRmax lineages in most analyzed organs and periods, thus contributing to the greater resistance exhibited by such lineages against infection with the fungus in relation to AIRmin, except for IL-4 and IL-10, which showed decreased production for the AIRmax lineage, reproducing its suppressive biological effect. From these results, it was observed that the AIRmax lineage showed greater control over the infectious process with an important involvement of the analyzed cytokines. These findings... (Complet abstract click electronic access below) / Doutor

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