Orientador: Adjair Antônio do Nascimento / Banca: Milton Hissashi Yamamura / Banca: Alessandro Francisco Talamini do Amarante / Banca: Vanete Thomaz Soccol / Banca: Rosangela Zacarias Machado / Não disponível. / Not available. / Doutor

Orientador: Maria Isabel Nogueira Cano / Resumo: O presente trabalho teve por objetivo mapear os domínios de interação da proteína LaRbp38 (RNA binding protein 38 KD) de Leishmania amazonensis com ácidos nucléicos e a identificação de proteínas parceiras que formassem possíveis complexos com ela nos telômeros do parasita. LaRbp38 é uma proteína exclusiva de protozoários tripanosomatídeos, entre os quais estão os agentes etiológicos da leishmaniose, uma doença endêmica presente em diversas regiões do Brasil. Novos casos da doença vêm aumentando progressivamente, principalmente entre indivíduos imunocomprometidos e por isso a Organização Mundial da Saúde tem incentivado a busca de novos alvos para desenvolver drogas que eliminem eficazmente o parasita. LaRbp38 é uma proteína codificada por um gene nuclear, que parece exercer diferentes funções nas maquinarias de replicação nuclear e mitocondrial. Foi primeiramente descrita como proteína estabilizadora de RNA mitocondrial e parece estar envolvida com a replicação de DNA mitocondrial. Em Leishmania, LaRbp38 também interage in vivo com DNA mitocondrial, com seqüências ricas em GT e com DNA telomérico simples e dupla fita. A análise estrutural da proteína não indica a presença de nenhum domínio canônico de interação a ácidos nucléicos. Para dar inicio aos experimentos, a primeira estratégia foi desenhar mutantes delecionais da proteína de L. amazonensis (LaRbp38) de forma que cada um representa uma sobreposição do outro. Cada mutante, nomeados mut1, mut2, mut3, mut4 e mut5, foram subclonados em vetor de expressão bacteriano para produção de polipeptídios recombinantes. Em seguida os polipeptídios foram purificados e testados em western blotting, que mostra tanto LaRbp38 quantos os 5 mutantes sendo reconhecidas pelo soro antLLaRbp38. Ensaios in vitro de interação proteína-DNA (EMSA), usando DNA telomérico simples fita Te11, dupla fita... (Resumo completo clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Recent results demonstrated that Rbp38 is a protein exclusively expressed in trypanosomatid parasites, which includes the genus Leishmania. Rbp38 is a multifunctional protein exerting functions in the kinetoplast, such as the stabilization of mitochondrial RNAs and in the nucleus, as a protein that binds in vivo kDNA, the double-stranded (LaTel) and the G-rich telomeric DNAs (Tel1). The trypanosomatid Rbp38 does not share sequénce or functional/structural similarities with any other protein deposited in the public data bank. The present work has the aim of mapping the boundaries of the DNA-binding domain of LaRBP38, since using the available in silico tools, we were not able to define any known nucleic acid binding domain in this protein. Therefore, we constructed truncated overlapping mutants of LaRbp38 in order to map the boundaries of its DNA binding domain. These mutant proteins were expressed in a bacterial system and were produced in high amounts as shown by SDS-PAGE and Western blotting analyses. Electrophoretic mobility shift assays (EMSA) were done in order to test the ability of each mutant to bind in vitro the G-rich telomeric DNA, double-stranded telomeric DNA and kDNA. EMSA and competition assays confirmed that LaRbp38 has at least one DNA binding domain (DBD), centrally located, between amino acid residues 141 and 235. This DBD, interacts with distinct affinities with ali DNAs tested. Our results suggested that this binding domain has at least two extensions one towards the N-terminus of mut2 (aa 95 and 141), which showed binding affinity to LaTel and kDNA and other towards the C-terminus of mut3 (aa 235 to283) that strongly interacted with kDNA. However, we can not discard that others parts of the protein may also contribute to these interactions. Other controversial point about LaRbp38 is whether this protein has nuclear and mitochrondrial subcelular localization... (Completo abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Germano Francisco Biondi / Resumo: O presente trabalho teve por objetivos verificar as condições higiênico-sanitárias de alfaces (Lactuca sativa), enfocando a análise voltada à pesquisa de ovos de Taenia sp.. Foram colhidos em bairros periféricos da cidade de Botucatu (SP), região sudeste do Brasil, 50 amostras de pés de alface distribuídas em 5 propriedades distintas, totalizando 25 amostras de alface lisa e 25 amostras de alface crespa. A técnica aplicada foi a de "Centrifugo-flutuação" modificada, utilizando solução de Dicromato de Sódio (D= 1:35). Nas respectivas propriedades realizaram-se inquéritos epidemiológicos relativos a questões sobre o plantio, irrigação, fornecimento da produção, presença ou não de rede de esgoto, banheiro, hábitos alimentares, tratamento com anti-helmínticos e conhecimento da doença. Os resultados descritivos referentes às propriedades investigadas revelaram que, 60% são adubadas com sulfato de amônio associado a esterco bovino; 60% são irrigadas com água proveniente de nascente própria; 60% não possuem rede de esgoto 40% dos banheiros estão ligados à rede de esgoto, enquanto 20% não possuem sanitários; 100% dos entrevistados possuem hábito de comer verdura (crua ou cozida); 80% nunca receberam anti-helmínticos; 20% não conhece solitária; 80% nunca sofreu ataque epilético; 80% não come carne mal passada. Não se observou presença de ovos de Taenia sp., porém foram encontradas outras formas parasitárias como ácaros, larvas de nematódeos e ovos de nematódeos de vida livre / Abstract: The work at hand had as objectives to verify the hygienic and sanitary conditions of lettuce (Lactuca sativa) focusing on the analysis related to the research of Taenia sp.. eggs. Therefore, 50 samples of heads of lettuce were collected in the outskirts neighborhoods of Botucatu (SP), southeast region of Brazil, distributed in 5 distinct properties, totalizing 25 samples of lettuce with straight leaves and 25 samples of lettuce with curled leaves. The technique applied was the "Centrifugation isopycnic" modified using a solution of Sodium Dichromate (D=1:35). The properties were submitted to epidemic inquiries concerning questions related to the planting, irrigation, distribution, existence or not of sewerage system, toilets, eating habits, anthelmintics treatment and knowledge of the illness. The descriptive results related to the properties under research revealed that 60% are fertilized, with Ammonium Sulfate associated with animal manure; 60% are irrigated with water originating in springs on their own land; 60% do not have sewerage system; 40% of the toilets are connected to the sewerage system, whereas 20% do not have toilets; 100% of the interviewed people have the habit of eating vegetables (either raw or cooked); 80% have never taken anthelmintics; 20% do not know tapeworm; 80% never suffered from epileptic seizures; 80% do not eat raw meat. It was not observed the presence of Taenia sp.. eggs but other kinds of parasites were found, such as mites, nematoda germs and nematoda - free life eggs / Mestre

Orientador: Alessandro Francisco Talamini do Amarante / Banca: Alexandre Securon Borges / Banca: Reinaldo Silva / Resumo: O Brasil apresenta o maior rebanho comercial de bovinos do mundo, porém, esta produtividade é afetada pelo parasitismo por nematódeos gastrintestinais. Para o controle desses parasitas são empregadas drogas anti-helmínticas, dentre elas as lactonas macrocíclicas, últimas drogas lançadas no mercado. No entanto, o uso freqüente de antihelmínticos tem contribuído para o surgimento de populações de parasitas resistentes. O presente estudo objetivou avaliar a eficácia da moxidectina em uma propriedade onde existia a suspeita da presença de Oesophagostomum spp. com resistência à moxidectina. Avaliou-se também a precisão do teste de redução da contagem de ovos nas fezes (R-OPG) em comparação com os dados obtidos pelo teste controlado (necropsia dos animais após o tratamento). No trabalho foram utilizados 20 bovinos jovens, os quais foram mantidos juntos com os bovinos da propriedade com suspeita de resistência à moxidectina. Os animais antes de serem colocados na propriedade foram tratados com fosfato de levamisol, a fim de entrarem livres de infecções por nematódeos. Os animais se infectaram naturalmente com as espécies de parasitos presentes na fazenda e quando as contagens de ovos por grama de fezes (OPG) foram superiores a 250, os animais foram distribuídos em dois grupos, por sorteio. Um grupo (n=10) foi tratado com moxidectina 1% (0,2 mg/kg; Cydectin®, Fort Dodge) e o outro foi o controle (n=10). Amostras fecais de cada animal foram colhidas no dia do tratamento, três, sete, 10 e 14 dias depois da aplicação para a determinação do número de OPG e para realização de coproculturas. Decorridos 14 dias do tratamento, todos os animais foram sacrificados para obtenção, quantificação e identificação dos nematódeos gastrintestinais. Os dados obtidos indicaram a presença de resistência anti-helmíntica... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Não disponível. / Mestre

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:13:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000424923-Texto+Completo-0.pdf: 645382 bytes, checksum: 25070e3ec621e54c54f5013c978ddf8d (MD5) Previous issue date: 2010 / Schistosomiasis mansoni is an endemic chronic parasitic infection that occurs in countries in Africa, South America, the Caribbean and the eastern Mediterranean. The main pathology is the granuloma, an immune response against the antigens secreted by the parasite eggs primarily in the liver and intestines. Those antigens are crucially involved in the modulation of the humoral and cellular immunological responses of the host and may be involved in the strategy of the egg passage through intestinal mucosal. This work had its origin in the results of an experiment realized by Candida Fagundes Teixeira of the PUCRS Biomedical Parasitology Group, which the attempts to obtain egg antibodies that could make interaction with paramagnetic particles revealed some difficulty in obtaining high levels of antibodies against the egg surface. The main goal of the present work was to verify the production of antibodies against the egg surface of Schistosoma mansoni. S. mansoni, Esteio isolated, was maintained in laboratory through passages in Biomphalaria glabrata and Swiss strain mice. The worms were recovered, washed in buffer and used for production of adults worm soluble membrane antigens. The eggs were collected from human infected feces and used for mice immunization and production of secreted egg antigens (SEA). The experimental groups were separated in 4 groups with 6 mice each, as follow: group 1 immunized with saline solution 0,9%; group 2 immunized with sonicated eggs and adjuvant; group 3 immunized with sonicated eggs without adjuvant and group 4 immunized with whole intact eggs. Through the ELISA and immunofluorescence techniques it was verified reactivity in immunization with sonicated eggs and it was not verified reactivity in immunization with whole intact eggs.The systemic and complex approach of the parasite-host interaction is an interesting study proposal and remains open for future investigations which may assist in the comprehension and treatment of the pathogenesis. / A esquistossomose mansônica é uma infecção parasitária crônica endêmica que ocorre em países na África, América do Sul, no Caribe e no Mediterrâneo Oriental. A principal patologia é o granuloma, uma resposta imune contra os antígenos secretados pelos ovos do parasito principalmente no fígado e intestinos. Estes antígenos estão crucialmente envolvidos na modulação das respostas imunológica celular e humoral do hospedeiro e podem estar envolvidos na estratégia de passagem do ovo através da mucosa intestinal. Este trabalho teve origem nos resultados de um experimento realizado por Candida Fagundes Teixeira do Grupo de Parasitologia Biomédica da PUCRS, cujas tentativas de se obter anticorpos do ovo que interagissem com partículas paramagnéticas, revelaram alguma dificuldade em obter níveis elevados de anticorpos contra a superfície do ovo. O objetivo principal do presente trabalho foi verificar a produção de anticorpos contra a superfície do ovo de Schistosoma mansoni. O S. mansoni, isolado Esteio, foi mantido em laboratório através de passagens em Biomphalaria glabrata e camundongos da cepa Swiss. Os vermes foram recuperados, lavados com tampão e utilizados para a produção de antígeno solúvel de membrana de vermes adultos. Os ovos foram coletados de fezes humanas infectadas e utilizados para a imunização de camundongos e produção de antígenos secretados pelo ovo (SEA). Os grupos experimentais foram divididos em 4 grupos com 6 camundongos cada, da seguinte forma: grupo 1 imunizado com solução salina 0,9%; grupo 2 imunizado com ovos sonicados e adjuvante; grupo 3 imunizado com ovos sonicados sem adjuvante e grupo 4 imunizado com ovos inteiros. Através da técnica de ELISA e imunofluorescência indireta foi verificada reatividade na imunização com ovos sonicados, e não foi verificada reatividade na imunização com ovos inteiros.A abordagem sistêmica e complexa da interação parasito-hospedeiro é uma proposta interessante de estudo e permanece aberta para futuras investigações que poderão auxiliar na compreensão e tratamento da patogenia.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:13:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000341115-Texto+Completo-0.pdf: 850841 bytes, checksum: fc50feef6db1a22bda86f5ef243d4f44 (MD5) Previous issue date: 2005 / Intestinal schistosomiasis was detected in Rio Grande do Sul for the first time in 1997, becoming the southernmost focus in the Americas. Starting from that date, several investigations were undertaken for the epidemiological characterization of this transmission focus of very low endemicity and recent introduction. The objective is to describe the parasite morphology and to analyze the population structure using microsatellite markers, comparing field isolates with laboratory strains, LE and MAP. Two isolates called “Esteio” and “JV” were obtained respectively, from feces and mollusks naturally infected and from a single patient. The adult worms, obtained from the experimental infection of mice were fastened, clarified and stained for the measurements taken with an optical microscope. Molecular analysis was performed with 4 microsatellite markers. The morphological data of adult worms did not differ from those reported in the literature. The small variance in measurements can be attributed to phenotypic plasticity of the populations of that trematode. The use of 4 microsatellite markers allowed the detection of a smaller number of alleles in the field strains when compared to the findings with the laboratory strains. There is a great genetic divergence found (RST<0,253) when compared isolates and laboratory strains. / A esquistossomose mansônica foi detectada no Rio Grande do Sul pela primeira vez em 1997, constituindo o foco mais meridional das Américas. A partir daquela data, vários trabalhos foram desenvolvidos para caracterizar epidemiologicamente este foco de transmissão de ultra baixa endemicidade e de recente introdução. O objetivo desse trabalho é caracterizar morfologicamente o parasito e analisar a estrutura populacional através de marcadores microssatélites, comparando com as cepas de laboratório LE e MAP. Dois isolados de campo chamados de “Esteio” e “JV” foram obtidos, respectivamente, a partir de fezes e moluscos naturalmente infectados e de um paciente. Os vermes adultos, obtidos de camundongos experimentalmente infectados, foram fixados, clarificados e corados para as mensurações com auxílio de um microscópio óptico. A análise molecular foi realizada com 4 marcadores microssatélites. Morfologicamente, o parasito, quando comparado com dados obtidos da bibliografia, não apresentou diferenças notáveis. As pequenas variações observadas podem ser atribuídas à plasticidade fenotípica das populações desse trematódeo. O uso de 4 marcadores microssatélites nos permitiu encontrar um número menor de alelos nos isolados de campo quando comparado com as cepas de laboratório. Há uma grande divergência genética encontrada (RST<0,253) quando comparados os isolados de campo e as cepas de laboratório.

Made available in DSpace on 2015-04-30T14:03:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000467370-Texto+Completo-0.pdf: 6072599 bytes, checksum: 169f7ff123882c0b088732b04ad1956d (MD5) Previous issue date: 2014 / Schistososmiasis is a chronic endemic infection caused by parasites of the genus Schistosoma, and it occurs in 74 countries in Africa, South America and Asia. The three main agents of this infection in humans are: Schistosoma mansoni and Schistosoma japonicum, that cause the hepatic-intestinal disease, and Schistosoma haematobium, responsible for the genitourinary infection. Despite the effective treatment like praziquantel, schistososmiasis remains as the second most prevalent parasitic disease in the world. Diagnosis of the intestinal schistososmiasis is achieved through the direct visualization of the eggs in fecal samples. The current method recommended by the World Health Organization in epidemiological studies is the Kato-Katz method. Despite it being simple and cheap, in areas of low endemicity this technique loose sensibility, leading to the occurrence of false-negative cases and underestimation of the prevalence in the studied area. Helmintex™ is a coproparasitological method highly sensitive that allows the isolation of Schistosoma eggs from 30 grams of feces, based in the interaction between the eggs and paramagnetic microspheres in a magnetic field. However, this method demands time and specialized equipment, being of difficult manipulation in work field. The mechanism that promotes the interaction between the paramagnetic spheres with the Schistosoma eggs is not known. Considering the necessity of sensitive diagnostic tools of easy applicability in epidemiological studies in low endemicity areas, this work has the purpose to study the surface physical-chemical characteristics of S. mansoni and S. japonicum eggs, in order to enhance the efficiency of the Helmintex™ method. S. mansoni and S. japonicum eggs were isolated from livers of experimentally infected mice. The eggs were submitted to morphological and structural analysis using Scanning and Transmission Electron Microscopy and elemental analysis using Energy Disperssion Spectroscopy. The magnetic susceptibility was determined using SQUID (Superconducting Quantum Interference Device) and the concentration of the chemical elements was determined through Atomic Emission Spectroscopy. Experiments to elucidate the interaction properties of the eggs of the eggs and the microspheres were conducted incubating the eggs from both species with different paramagnetic microspheres. The results show that the egg surface of both species is recovered by a dense layer of microspines, being those shorter and less spaced in S. mansoni. The eggs spontaneously bind the particles, with a greater preference for magnetic material. S. japonicum eggs have a higher affinity for paramagnetic microspheres than S. mansoni eggs. The presence of streptavidin in the surface of the microspheres enhances the affinity of both species for non-magnetic material, however it decreases the affinity for paramagnetic microspheres. Despite the presence of iron in the eggshell of S. mansoni and S. japonicum, the origin of the interaction does not seem to be magnetic, but, based in the difference of electrostatic charges present in the surface of the eggs and the microspheres. The continuity of this study is important to determine the physical-chemical characteristics of eggs from human feces, and it can lead to the upgrading and optimization of the Helmintex™ method. Studies using Atomic Force Microscopy are in progress. / A esquistossomose é uma infecção crônica endêmica causada por parasitos do gênero Schistosoma, e ocorre em países 74 países na África, América do Sul e Ásia. Os três principais agentes desta infecção em humanos são: Schistosoma mansoni e Schistosoma japonicum, causadores da doença hepato-intestinal, e Schistosoma haematobium, responsável pela infecção genitourinária. Apesar de haver tratamento efetivo como o praziquantel, a esquistossomose permanece como a segunda infecção parasitária mais prevalente no mundo. O diagnóstico da esquistossomose intestinal é feito através da direta visualização dos ovos em amostras fecais. O método atualmente recomendado pela Organização Mundial de Saúde em estudos epidemiológicos é o método de Kato-Katz. Apesar de simples e barato, em áreas de baixa endemicidade esta técnica perde sensibilidade, levando à ocorrência de casos falso-negativos e subestimação da prevalência da área estudada. O Helmintex® é um método coproparasitológico altamente sensível que permite o isolamento de ovos de Schistosoma à partir de 30 gramas de fezes, baseado na interação entre os ovos e esferas paramagnéticas em um campo magnético. Entretanto, este método demanda tempo e equipamentos especializados, sendo de difícil manipulação em estudos de campo.O mecanismo que promove a interação das esferas paramagnéticas com os ovos de Schistosoma não é conhecido. Tendo em vista a necessidade de ferramentas diagnósticas sensíveis e de fácil aplicabilidade em estudos epidemiológicos em áreas de baixa transmissão, este trabalho tem por objetivo estudar características físico-químicas da superfície dos ovos de S. mansoni e S. japonicum, afim de aprimorar a eficiência do método Helmintex®. Ovos de S. mansoni e S. japonicum foram isolados de fígados de camundongos experimentalmente infectados. Os ovos foram submetidos à analise morfológica e estrutural utilizando Microscopia Eletrônica de Varredura e Transmissão e análise elementar utilizando Espectroscopia por Dispersão de Energia. A susceptibilidade magnética foi determinada utilizando-se o SQUID (Superconducting Quantum Interference Device) e a concentração dos elementos químicos foi determinada através de Espectroscopia por Emissão Atômica. Experimentos para elucidar as propriedades de interação dos ovos e das microesferas foram conduzidos incubando ovos de ambas as espécies com diferentes microesferas paramagnéticas. Os resultados mostram que a superfície do ovo de ambas as espécies é recoberta por uma camada densa de microespinhos, sendo estes mais curtos e menos espaçados em S. mansoni. Os ovos espontaneamente ligam-se às partículas, com maior preferência por material magnético. Os ovos de S. japonicum possuem maior afinidade pelas microsesferas paramagnéticas do que os ovos de S. mansoni. A presença de estreptavidina na superfície das microesferas aumenta a afinidade de ambas as espécies por microesferas não-magnéticas, porém diminui a afinidade por microesferas paramagnéticas. Apesar da presença de ferro na casca do ovo tanto de S. mansoni quanto de S. japonicum, a origem da interação não parece ser magnética, e sim, baseada na diferença de cargas eletrostáticas presentes na superfície dos ovos e das microesferas. A continuidade deste estudo é importante para determinar as características físico-químicas de ovos provenientes de fezes humanas, e pode levar ao aprimoramento e otimização do método Helmintex®. Estudos utilizando-se Microscopia de Força Atômica encontram-se em andamento.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Zoologia, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-12-08T11:52:10Z No. of bitstreams: 1 2014_PedroHenriqueCavendishSchimmelpfeng.pdf: 2772767 bytes, checksum: 07d02f03c622ec396c89636f97c2f5e7 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2014-12-30T18:56:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_PedroHenriqueCavendishSchimmelpfeng.pdf: 2772767 bytes, checksum: 07d02f03c622ec396c89636f97c2f5e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-30T18:56:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_PedroHenriqueCavendishSchimmelpfeng.pdf: 2772767 bytes, checksum: 07d02f03c622ec396c89636f97c2f5e7 (MD5) / A utilização de microhimenópteros parasitoides para controlar insetos-praga dentro do Manejo Integrado de Pragas (MIP) é uma alternativa para reduzir o uso de fitossanitários na lavoura e as consequências negativas em decorrência de seu uso. Os parasitoides de ovos Telenomus podisi e Trissolcus basalis têm se destacado como agentes de controle de pentatomídeos praga-da-soja, como Euschistus heros, Piezodorus guildinii e Nezara viridula. Para localização de seus hospedeiros estes parasitoides utilizam sinais e pistas predominantemente químicas originadas das plantas ou de seus hospedeiros (feromônios de alarme e sexual, por exemplo) que são interceptadas por proteínas olfativas denominadas OBPs (do inglês, Odorant Binding Proteins). O presente trabalho teve como objetivo (1) avaliar a resposta de T. podisi e Tr. basalis aos feromônios sexuais isolados dos hospedeiros (E. heros – Eher1, Eher2 e Eher3, P. guildinii - Pgui e N. viridula - Nvir) em bioensaios de olfatometria em diferentes concentrações (1,0 mg/mL, 0,1 mg/mL e 0,01 mg/mL) e (2) identificar potenciais OBPs mediante transcriptômica de insetos adultos de ambos os sexos por RNA-Seq/Illumina e analisar a influência da exposição aos feromônios sexuais dos hospedeiros na expressão dos mesmos em T. podisi. Ambos os parasitoides estudados mostraram resposta seletiva em relação aos compostos avaliados e suas respectivas concentrações (T. podisi - Eher3 (0,01 mg/mL), Pgui (0,01 mg/mL) e Nvir (0,1 mg/mL); Tr. basalis - Eher1 (1,0 mg/mL e 0,1 mg/mL), Eher3 (1,0 mg/mL) e Pgui (1,0 mg/mL). No entanto, a resposta observada diferiu da hipótese inicial de que a resposta dos parasitoides aos compostos sintéticos está relacionada com a sua preferência pelos hospedeiros descritos na literatura. Foram encontrados em T. podisi sete transcritos de OBPs, sendo três contendo a região codificante completa, designadas de TpodOBP1, TpodOBP2 e TpodOBP3. As sequências deduzidas de aminoácidos de TpodOBP1 e TpodOBP2 apresentaram alta similaridade com OBPs do percevejo E. heros (TpodOBP1 x EherOBP2: 88,5% e TpodOBP2 x EherOBP1: 82,4%), sugerindo que tais potenciais OBPs estariam relacionadas à olfação de pistas feromonais do hospedeiro ou à olfação dos mesmos estímulos. No entanto, fêmeas de T. podisi estimuladas com compostos feromonais dos hospedeiros não tiveram a expressão das potenciais TpodOBPs alteradas. ___________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The use of microhimenopteran parasitoids has been studied within Integrated Pest Management (IPM) in order to control insects that causes economic damage to agriculture and reduce the emission of agrotoxics. The egg parasitoids Telenomus podisi and Trissolcus basalis have received significant atention as control agents of the pentatomid stinkbugs-soycomplex, such as Euschistus heros, Piezodorus guildinii and Nezara viridula. To locate it hosts these parasitoids uses manly chemical signals and cues originated by plants or by the host itself (e.g. alarm and sexual pheromones) that are intercepted by olfactory proteins called Odorant Binding Proteins (OBPs). The present work had as objective (1) to evaluate the response of T. podisi and Tr. basalis towards the isolated sexual pheromones of its main hosts (E. heros, P. guildinii, and N. viridula) in diferent concentrations (1,0 mg/mL, 0,1 mg/mL e 0,01 mg/mL) through dual-choice olfactometry bioassays and (2) identify possible OBPs, through transcriptome analysis of adult insects of both sexes with RNA-Seq/Illumina, and analyse the influence of the exposition of sexual pheromones into the profile expression in T. podisi OBPs. Both the parasitoids showed a selective response towards the treatments and its respective concentrations (T. podisi - Eher3 (0,01 mg/mL), Pgui (0,01 mg/mL) e Nvir (0,1 mg/mL; Tr. basalis - Eher1 (1,0 mg/mL e 0,1 mg/mL) Eher3 (1,0 mg/mL) e Pgui (1,0 mg/mL). However, the response observed diferred from initial hypothesis that the parasitoid response to the synthetical pheromones would be related to its preference as described on the literature. The transcriptome analysis of T. podisi retrieved seven protein transcripts potentially related to semiochemical binding (OBPs), being that three of those were full-length (i.e.: TpodOBP1, TpodOBP2 e TpodOBP3). The translated aminoacid sequence of TpodOBP1 e TpodOBP2 showed high similarity with EherOBP1 and EherOBP2 (TpodOBP1 x EherOBP2: 88.5% e TpodOBP2 x EherOBP1: 82.4%) suggesting that those putative TpodOBPs might be related to olfaction cues from its host or a shared and related stimuli. However, females of T. podisi stimulated with the pheromonal compounds of its hosts did not have any change on its expression profile.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2008. / Submitted by Suelen Silva dos Santos (suelenunb@yahoo.com.br) on 2009-10-05T18:36:06Z No. of bitstreams: 1 2008_SoniaEmiliaFigueiredoAraujoTorres.pdf: 2635700 bytes, checksum: dcf908856a55b36dba478242fa6e7e15 (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-06-23T22:44:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_SoniaEmiliaFigueiredoAraujoTorres.pdf: 2635700 bytes, checksum: dcf908856a55b36dba478242fa6e7e15 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-06-23T22:44:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_SoniaEmiliaFigueiredoAraujoTorres.pdf: 2635700 bytes, checksum: dcf908856a55b36dba478242fa6e7e15 (MD5) Previous issue date: 2008-08 / Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos de diferentes manejos de pastejos sobre a carga parasitária na pastagem. O período experimental foi de 99 dias, de janeiro a abril de 2008 em área de oito hectare com capim Panicum maximum vr Tanzânia, subdividida em 17 piquetes, para avaliar os sistemas de manejo: isolado, alternado e combinado de ovinos com bovinos. O pastejo adotado foi o rotacionado com sete dias de ocupação e 21 dias de descanso, com taxa de lotação de dois UA/ha. Foram utilizados, 20 bovinos de corte sendo 13 machos e sete fêmeas com mesma faixa etária e peso médio de 200 kg, 30 borregos com peso médio de 22 kg e 15 ovelhas adultas, ambos da raça Santa Inês. No pastejo alternado e combinado foram utilizados 16 animais "testes", 10 ovinos e seis bovinos, no isolado (ovino) 10 borregos e 15 ovelhas, no isolado (bovinos). Além da pastagem, os ovinos foram suplementados com 200g/animal/dia e os bovinos com 2.060 g. A água e sal mineral foram fornecidos a vontade. Antes do início do experimento todos os animais foram desverminados As coletas do capim para recuperação da L3 foram realizadas semanalmente no pré e pós-pastejo dos piquetes. Em geral, correlações médias foram encontradas entre o nível de entrada e de saída da mesma larva. Houve um aumento no nível de infecção dependendo do ciclo de pastejo. Em todos os sistemas de manejo a ordem decrescente de larvas foi Haemonchus spp, Trichostrongylus , Strongiloides spp, Cooperia spp, e Oesophagostomum spp, sendo que o sistema de pastejo combinado foi o que apresentou melhor resultado com menor grau de contaminação na pastagem. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The aim of this study was to evaluate the effect of different pasture management systems on the parasitic load in sheep. The experimental period was 99 days, from January to April of 2008 in an eight ha area of Panicum maximum cv. Tanzânia, subdivided in 17 pickets, to evaluate the following sheep farming systems: sheep alone, alternate and combined with cattle. The pasture system was rotational with seven days use and 21 days rest. There were two animal units per hectare. Twenty cattle and thirty lambs were used (average weight of 22 kg) as well as 15 adult sheep, both Saint Ines breed. For the alternate and combined grazing groups ten lambs and six cattle were used while in the sheep alone group ten lambs and 15 adult sheep. The sheep also received 200g/day concentrate feed and the cattle 2kg. Water and mineral salt were supplied ad libitum. At the start of the experiment all the animals were dewormed. Grass was collected weekly for recovery of L3 at entry and exit of animals from the pastures. In general, medium sized correlations were found between larva level at entry and exit from the pasture. There was an increase in worm load depending on the pasture cycle. The recuperation of larvae showed a decreasing order of occurrence for Haemonchus spp, Trichostrongylus , Strongiloides spp, Cooperia spp, e Oesophagostomum spp, with the combined pasture showing the least degree of pasture contamination.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-06-18T17:52:30Z No. of bitstreams: 1 2009_PatriciaCoutinhoAguiar.pdf: 3113968 bytes, checksum: 9d73100417d54c79e7420ff23260e5a3 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-06-21T19:10:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_PatriciaCoutinhoAguiar.pdf: 3113968 bytes, checksum: 9d73100417d54c79e7420ff23260e5a3 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-06-21T19:10:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_PatriciaCoutinhoAguiar.pdf: 3113968 bytes, checksum: 9d73100417d54c79e7420ff23260e5a3 (MD5) Previous issue date: 2009-12 / O presente trabalho relata os dados de um levantamento parasitológico em suínos de criações familiares de Núcleos Rurais do Distrito Federal realizado entre fevereiro e julho de 2009. Foram obtidas 130 amostras divididas em três grupos etários (menor que seis meses; entre sete e 12 meses e acima de 12 meses). As fezes foram obtidas diretamente da ampola retal e examinadas, utilizando os exames direto, flutuação fecal (Willis e McMaster modificado), sedimentação (espontânea e centrifugação água-éter) e coprocultura. Observaram-se as seguintes prevalências: 27,69% para Ascaris suum; 36,92% para Strongyloides ransomi; 45,38% para ovos do tipo Strongyloidea; 14,39% para Trichuris suis; 3,79% para Metastrongylus spp.; 71,17% para coccídeos e 77,64 % para Balantidium coli. Ao exame quantitativo, obteve-se 0-10.110 opg para Ascaris suum; 0-27.350 opg para Strongyloides ransomi; 0-7.550 opg para ovos do tipo Strongyloidea; 0-3200 opg para Trichuris suis; 0-100 opg para Metastrongylus spp.; 0-41.300 oopg para coccídeos e 0-400 cpg para Balantidium coli. ___________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The present research reports the data of a parasitological survey in pigs from subsistence swineherds from ten Rural Centers of Distrito Federal, Brasília, Brazil, in the period of February to July of 2009. A total of 130 samples were obtained and separated in three age groups (less than six months; among seven and twelve months; and more than twelve months old). The fecal samples were taken from the rectum and examined using direct test, faecal flotation (Willis and modified McMaster), sedimentation (spontaneous and water-ether centrifugation) and faecal culture. The prevalence of each species were: 27,69% to Ascaris suum; 36,92% to Strongyloides ransomi; 45,38% to eggs of Strongyloidea; 14,39% to Trichuris suis; 3,79% to Metastrongylus spp.; 71,17% to coccidian, and 77,64 % to Balantidium coli. For the quantitative test, the results were 0-10.110 opg to Ascaris suum; 0-27.350 opg to Strongyloides ransomi; 0-7.550 opg to eggs of Strongyloidea; 0-3200 opg to Trichuris suis; 0-100 opg to Metastrongylus spp.; 0-41.300 oopg to coccidia e 0-400 cpg to Balantidium coli.