Foram estudadas 162 amostras de P. aeruginosa isoladas de pacientes atendidos em quatro hospitais localizados na cidade de Niterói, Rio de Janeiro; dois públicos: o Hospital Azevedo Lima e o Hospital Universitário Antônio Pedro, e dois privados, o Hospital Santa Cruz e a Casa de Saúde e Maternidade Santa Marta, no período de julho de 2002 até dezembro de 2003. As amostras foram isoladas a partir de diferentes espécimens clínicos: secreções (52,5%), urina (22,8%), sangue (8,6), ponta de cateter (6,2%), líquidos de punção (1,9%) e outras fontes (8%). Todas as amostras foram sensíveis a polimixina e mais da metade resistentes a cefotaxima (69,1%), ceftriaxona (65,5%), ciprofloxacina (54,9%), gentamicina (51,9%) e ticarcilina-ácido clavulânico (50,6%) e em menor proporção a imipenem (35,8 %), cefepima (33%), amicacina (32,1%), ceftazidima (30,9%), aztreonam (27,8%) e piperacilina-tazobactam (27,8%). A produção de metalo â-lactamase (M-bla) foi detectada em 9 (5,6%) amostras isoladas em três dos quatro hospitais avaliados. O estudo da diversidade genética foi efetuado analisando os perfis de fragmentação do DNA cromossômico, após tratamento com a enzima SpeI e eletroforese em campo pulsado (PFGE). De 19 amostras selecionadas, as 10 não produtoras de M-bla que apresentaram diferentes graus de multirresistência aos antimicrobianos, revelaram grande diversidade genética. Entretanto, as 9 amostras produtoras de M-bla, mostraram pertencer a um único clone, o mesmo detectado em amostras de P. aeruginosa com a mesma característica de resistência, isoladas nas cidades de Rio de Janeiro e São Paulo, sugerindo a disseminação interhospitalar do microorganismo, tanto no âmbito local como regional. / A total of 162 P. aeruginosa strains was studied. They were isolated from patients attended in four hospitals located in Niterói city, Rio de Janeiro state, two of them supported by public health system: Hospital Azevedo Lima and Hospital Universitário Antônio Pedro, and the others from privative service: Hospital Santa Cruz and Casa de Saúde Santa Marta, between July 2002 and December 2003. The isolates were recovered from different clinical sources, including: urine (22.8%); secretions (52.5%); catheter tips (6.2%); blood specimens (8.6%); fluids (1.9%) and others (8%). All strains were susceptible to polimixin B. More than half of them showed resistance to cefotaxime (69.1%); ceftriaxone (65.5%); ciprofloxacin (54.9%); gentamicin (51.9%) and ticarcillin-clavulanic acid (50.6%), and in lower percentages to imipenem (35.8%); cefepime (33%); amikacin (32.1%); ceftazidime (30.9%); aztreonam (27.8%)and piperacillin-tazobactam (27.8%). Metallo-â-lactamase (M-âla) production was detected in 9 (5.6%) strains recovered from three of the four hospitals evaluated. The genetic diversity study was performed by chromosomal DNA fragmentation, after SpeI enzymatic treatment using Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE). Among 19 strains selected from the study, 10 non M-âla producer multidrug-resistant strains showed a large variety of genetics profiles. However, the 9 M-âla producers were allocated in a single clonal group, the same genetic profile detected among P. aeruginosa M-âla producing strains, recovered in São Paulo city and Rio de Janeiro city, suggesting interhospital spread of strains at a local and regional level

Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnológico / O sistema imune infantil é pouco estimulado durante o período fetal e ao nascimento as respostas aos antígenos ambientais diferem das respostas do adulto na medida que seu sistema ainda está em desenvolvimento. No entanto, a imunidade da prole é influenciada pelo sistema imune da mãe através da placenta e do leite materno. Há relatos de que existe uma maior probabilidade de filhos de mães alérgicas apresentarem algum tipo de alergia ao longo da vida. A alergia alimentar é muito comum em crianças e representa uma das mais sérias reações de hipersensibilidade tendo como uma das conseqüências o desenvolvimento de inflamação intestinal crônica (IBD). Nossos objetivos foram avaliar se a inflamação intestinal das mães, causada pela re-exposição ao antígeno específico durante a gestação, influencia a resposta alérgica da prole e interfere na sua sobrevida e/ou mortalidade. Camundongos fêmeas C57Bl/6J, imunes e normais, receberam amendoim ou ração comercial como dieta desafio a partir da 2 semana de gestação. Parte da prole recebeu 10l de extrato protéico de amendoim por via oral durante a 1 semana de vida na tentativa de indução de alergia alimentar. Todos os animais foram imunizados com 100g de extrato protéico de amendoim aos 2 meses de idade. Uma semana após desafio subcutâneo todos receberam uma dieta contendo amendoim por 30 dias. Avaliamos os títulos de IgG total anti-amendoim, altura e largura de ilosidades, número de vilosidades por campo do duodeno, número de enterócitos (Ent) e leucócitos intraepiteliais (IEL), a relação Ent/IEL e Ent/lamina propria (LP), bem como número de células caliciformes e leucócitos na muscular do duodeno. Nossos resultados mostraram que a imunização da mãe bem como a dieta durante a gestação, não influenciou na indução da resposta alérgica de sua prole. Contudo a mortalidade foi significativamente maior em filhos de mães com IBD (p<0,002). A exposição precoce a baixas doses de proteína também não interferiu na resposta imune ao amendoim a partir do desmame. Não houve diferença significativa nos títulos de IgG no pós-desmame e após cada imunização. Essa diferença só foi significativa entre filhos imunizados e normais, independente do tratamento da mãe (p<0,001). Através da histopatologia confirmamos os dados sorológicos e só observamos diferença significativa dos parâmetros histométricos entre filhotes imunizados e normais (p<0,001). Nossas conclusões são que nesse modelo experimental a imunização materna não é decisiva no favorecimento da alergia da prole, mas a IBD aumenta a probabilidade de complicações no período gestacional e perinatal como por exemplo, aborto (reabsorção em camundongos) aumento de mortalidade, e canabalismo da prole. / The neonates immune system is less stimulated during the fetal period than in postnatal life. At birth responses to antigens differ from the adults immune response due to the fact that the neonates immune system is still maturing. However the offsprings immunity is influenced by their mothers immune system via the placenta and breast milk. Reports in medical research indicate that the offspring of allergic mothers are more prone to develop allergy than those born to normal mothers. Food allergy is a common disease in children represented by hypersensitivity reactions and as a consequence may lead to the development of inflammatory bowel disease (IBD). Our aims are to evaluate if mothers IBD, caused by specific antigen reexposure during pregnancy, influences the offsprings allergic response and interferes in her survival and/or mortality. Immune and normal C57Bl/6J mice were given a challenge diet of peanuts or mouse chow as of the 2nd week of pregnancy. Half of the offspring received daily 10l of peanut protein extract by the oral route during the first week of life to induce food allergy. All animals were then imunized with 100g of peanut protein extract at 2 months of age. One week after sc challenge all were given a diet containing peanuts for 30 days. We evaluated total IgG titers, height and width of villi, number of villi in duodenum area, number of enterocytes (Ent), intraepithelial leukocytes (IEL), the Ent/IEL and Ent/lamina propria (LP) ratio of duodenum segments, as well as goblet cells in villosities and leukocytes in muscular layer. Our results show that the mothers immunization as well as the diet during pregnancy did not influence the offspring allergic response. However the mortality was significantly higher in the offspring from allergic mothers (p<0.002). The early exposure to low doses to peanut protein did not interfere in the responses to peanuts as of the weaning. There was no significant difference in the IgG titers in the weaning and after each immunization. These differences just exist between immunized and normal offspring, independently of mothers treatment (p<0.001). The histopathologic analysis confirmed the sorology results and significant differences were observed in these parameters when comparing immunized to normal offspring (p<0.001). We conclude that, in this experimental protocol, the maternal immunization is not decisive in the induction of offsprings food allergy but that IBD rises the probability of complications during the gestational and perinatal periods, as for example the occurrence of abortion (re-absorption in mice), increased mortality and cannibalism of the offspring.

Orientador: Raphael Lucio Andreatti / Banca: Adriano Sakai Okamoto / Banca: João Pessoa Araújo Júnior / Banca: José Fernando Machado Menten / Banca: Terezinha Knobl / Resumo: Apesar do avanço tecnológico da avicultura no Brasil e no mundo, as salmoneloses ainda são um fator limitante do sistema de criação. Os sorotipos Enteritidis e Typhimurium de Salmonella enterica subespécie enterica são os principais responsáveis por infecções em aves e nos homens, onde um ponto crítico no ciclo para ocorrência de infecções humanas se dá durante o abate de lotes contaminados durante o processamento causando uma contaminação cruzada dos subprodutos avícolas durante o processamento industrial. No presente estudo tratamos com fagoterapia por gavagem em aves em jejum no período de pré-abate (analisando cecos e inglúvio) e por imersão da carcaça, recortes e ovos contaminados com S. Enteritidis (SE). Ao término do estudo a fagoterapia por gavagem proporcionou a redução (P<0,01) da contagem de SE nos cecos das aves e eliminou a contaminação ingluviana; o uso da fagoterapia por imersão também proporcionou a redução (P<0,01) da contaminação por SE em carcaça e recortes de frangos e eliminou a contaminação do agente na casca de ovos. Observamos também que o tratamento combinado do coquetel contendo bacteriófagos isolados de diferentes origens não apresentou resultados melhores do que o contendo bacteriófagos de mesma origem e que os bacteriófagos isolados de água residual hospitalar apresentaram melhor desempenho nos experimentos / Abstract: Not available / Doutor

Erythrovirus B19 infects erythrocytic progenitor cells, leading to a transient interruption of erythropoiesis. It is the causal agent of several clinical syndromes, including erythema infectiosum and its associated (or isolated) joint symptoms; transitory aplastic crisis of individuals with hemolytic anemias; non-immune hydrops fetalis; and the chronic anemias of immunosuppressed patients, including those with AIDS. In this latter setting, erythrovirus B19 assumes certain importance, as it is, among the innumerable causes of anemia in AIDS, a treatable one. Aiming at to look for evidences of erythrovirus B19 infection, bone marrow stored material from 42 autopsies (49 paraffin blocks) and 36 biopsies (48 paraffin blocks from 31 patients)underwent histopathological examinations and immunohistochemical and in situ hybridization tests. As a whole, 97 paraffin blocks, from autopsies and necropsies done from 1988 to 2002, were examined. Eighty-five sections were stained with hematoxylin-eosin (HE) and examined under optical microscopy. In 20 out of these blocks intra-nuclear inclusion bodies displacing the chromatin to the periphery (lantern cells), suggestive of erythrovirus B19 infection, were noticed. Eighty-seven sections were also subjected to immunohistochemistry, in which ten were deemed positive. The immunohistochemistry was repeated in these ten sections and seven were again considered positive (two from necropsy material, plus five biopsies from four patients). Nine out of the 10 originally mmunohistochemistry positive sections were also subjected to in situ hybridization, with three positives, one of them strongly. Nine other sections, taken among those that were positive under HE, were also subjected to in situ hybridization, where four were considered positive. Among the techniques used in this study, the most easy-to-do was microscopy of HE-stained sections, the lantern cells being, as described in the literature, easily seen. Most bone marrow sections were normocellular or hypocellular, and many had myelodysplastic changes, plasma cell infiltrates, histiocytosis, and hyperplasia of megacaryocytes, with immature and dysmorphic forms. In spite of the tests being done blindly, there was a regular agreement between HE and immunohistochemistry results, as the percentage of HE positive sections were far greater among the immunohistochemistry positive ones. Among the 15 sections subjected to the three techniques used in the study, only one gave unequivocal positive results with all three. The use of immunohistochemistry and in situ hybridization in the diagnosis of erythrovirus B19 infections in paraffin-stored bone marrow material deserves further study. The frequency of erythrovirus B19 infection in the examined material can be deemed low. / O eritrovírus B19 infecta precursores eritrocíticos, determinando a interrupção temporária da eritropoese. É o agente causal de várias síndromes clínicas, entre as quais: o eritema infeccioso e os quadros articulares que o acompanham (ou que surgem isoladamente); a crise aplástica transitória dos indivíduos com anemias hemolíticas; a hidropisia fetal não imune; e as anemias crônicas dos pacientes imunossuprimidos, incluindo aqueles com AIDS. Nesse último contexto a infecção pelo eritrovírus B19 reveste-se de certa importância, por tratar-se, dentre as inúmeras causas de anemia em pacientes com AIDS, de uma infecção passível de tratamento. Com o intuito de investigar as evidências de infecção pelo eritrovírus B19, o material estocado das medulas ósseas de 42 necropsias (49 blocos de parafina) e 36 biópsias (48 blocos de parafina, de 31 pacientes) foi submetido a exame histopatológico, imunoistoquímica e hibridização in situ. No total, foram estudados 97 blocos de parafina, provenientes de biópsias e necropsias realizadas entre 1988 e 2002. Oitenta e cinco cortes foram corados pela hematoxilina-eosina (HE) e examinados à microscopia óptica. Em vinte desses blocos foi observada a presença de corpúsculos de inclusão intranucleares eosinofílicos, deslocando a cromatina para a periferia, sugestivos de infecção por eritrovírus B19 (células em lanterna). Oitenta e sete cortes foram também submetidos a imunoistoquímica, sendo que dez cortes foram considerados positivos. A imunoistoquímica foi repetida nesses dez cortes, e sete foram novamente positivos (dois de material de necropsia, mais cinco biópsias de quatro pacientes). Nove dos dez cortes inicialmente positivos à imunoistoquímica foram também submetidos a hibridização in situ sendo três deles positivos, um deles fortemente. Nove outros cortes, escolhidos por terem sido positivos à HE, foram também submetidos a hibridização in situ, sendo quatro considerados positivos. Das técnicas empregadas no presente estudo, a de mais fácil realização foi o exame microscópico dos cortes corados à HE, sendo as células em lanterna de fácil visualização, conforme padrão descrito na literatura. A maior parte das medulas era normo ou hipocelular e muitas continham alterações mielodisplásicas, plasmocitose, histiocitose e hiperplasia dos megacariócitos, com formas imaturas e dismórficas. Apesar de os exames terem sido conduzidos de modo cego, houve regular concordância entre os resultados da HE e os da imunoistoquímica, uma vez que o percentual de lâminas positivas à HE foi bem maior entre as lâminas positivas à imunoistoquímica. Dos 15 cortes submetidos às três técnicas empregadas no estudo, apenas um corte mostrou resultados positivos inequívocos em todas elas. O emprego de imunoistoquímica e da hibridização in situ no diagnóstico da infecção pelo eritrovírus B19 em material de medula óssea estocado em parafina merece estudos adicionais. A freqüência de infecção por eritrovírus B19 pode ser considerada baixa no material examinado.

A apoptose é um importante fator no crescimento do câncer de mama, tendo sido relacionada a progressão tumoral. Por outro lado, o fator de necrose tumoral alfa (TNF-&#945;) que é uma citocina mediadora da apoptose é reconhecida por ter citotoxicidade contra células malignas destes tumores. Neste estudo, a presença de células apoptóticas em tumores graus I, II e III foi investigada e comparada com outros fatores prognósticos estabelecidos do câncer de mama. A detecção in situ da apoptose em células tumorais foi investigada pelo método TUNEL e a produção de TNF-&#945;, proliferação celular, receptores hormonais, expressão dos genes c-erbB-2 e p53 foram analisados utilizando-se procedimento imunoistoquímico. Nossos dados demonstraram que alto índice apoptótico esta relacionado a maiores níveis de proliferação, a expressão de p53, a tumores pouco diferenciados e a negatividade para receptores hormonais. Entretanto, quando analisados somente em tumores grau III, pacientes com história clínica de recidiva e metástase apresentaram menores níveis de apoptose, maiores índices prolifertivos e menor expressão de TNF-&#945; no infiltrado associado ao tumor. Estes achados indicam que em tumores grau III o número de células em apoptose está diretamente relacionado a um comportamento tumoral agressivo. Adicionalmente, foi observado maior expressão de TNF-&#945; no infiltrado inflamatório associado ao tumor e maior índice apoptótico pode estar relacionado a ausência de expansão ganglionar e recidiva do câncer de mama. / Tumor necrosis factor alpha (TNF-&#945;) is a cytokine recognized as an important mediator of apoptosis process and also showed citotoxicity against breast malignant tumor cells. In the present study, the presence of tumor apoptotic cells was investigated in grade I, II and III invasive breast cancer and compared with another prognostic factors. In situ detection of tumor apoptotic cells was investigated by direct immuno-peroxidase of digoxigenin-labeled genomic DNA. The production of TNF&#945;, tumor cell proliferation, hormonal receptor, c-erbB-2 and p53 was investigated using immuhistochemical procedure. Our data demonstrated that patients with high apoptotic rate correlates with higher levels of cell proliferation, positive p53 expression, negative hormonal expression and high grade breast cancer. Otherwise patients with a clinical history of cancer recurrence and metastasis presented a lower number of cancer apoptotic cells, higher tumor proliferation rate and lower expression of TNF-&#945; by inflammatory cells than that observed among patients diagnosed with the same histopathological type of breast cancer but with absence of tumor recurrence and metastasis. Taken together the results suggested that the rate of apoptosis reflect degrees of histological breast cancer and correlates with another prognostic factors. In addition, it is also possible that TNF-&#945; produced by tumorassociated inflammatory cells play an important role in the control of apoptosis of breast cancer cells and clinical behavior.