Carcinoma espinocelular de cabeca e pescoco (CECP) é uma das malignidades mais prevalentes e mortais mundialmente. Até o momento não existem biomarcadores confiáveis para prognóstico e decisão de terapia na oncologia de CECP. Ganhos cromossômicos do fator de transcrição SOX2 foram demonstrados em CECP; entretanto, o impacto da expressão de SOX2 em processos relevantes tumorais e evolução clínica permanecem incompreendidos. Expressão de SOX2 foi analisada em 22 linhagens celulares de CECP, com e sem ganho em 3q. O nível médio de expressão de SOX2 foi significativamente maior nas linhagens com ganho em 3q quando comparada às linhagens sem ganho em 3q (p = 0,0012). Neste trabalho, realizamos o perfil global de expressão genica das linhagens de CECP controle e após silenciamento de SOX2, especificamente carcinoma espinocelular de língua com amplificação de SOX2. Os resultados mostraram 749 genes afetados por SOX2 “knock down”, considerando o valor ajustado de p ≤ 0,05. 456 genes forma encontrados negativamente regulados enquanto que 293 genes foram positivamente regulados após o “knock down” de SOX2. O principal gene positivamente regulado foi vimentin e sua expressão inversa com SOX2 foi confirmado usando “quantitative real time polymerase chain reaction”. De fato, a imunofluorescência indicou expressão inversa de SOX2 e vimentin. A análise da “transcriptome data” usando o software “Ingenuity pathway analysis” revelou genes diferentemente expressos envolvidos nas funções de mobilidade celular e movimento celular. Alinhados com esses achados, as células silenciadas para SOX2 apresentaram maior migração quando comparadas aos controles em duas linhagens independentes de CECP, uma de língua e outra de hipofaringe, sugerindo um maior risco para recidiva e metástase de tumores com baixa ou nenhuma expressão de SOX2. Complementando esses resultados, as células negativas para SOX2 localizaram-se preferencialmente no “fronte de invasão”, enquanto que as células positivas para SOX2 estavam no centro das colônias celulares, sugerindo que o silenciamenteo de SOX2 pode ser necessário para o início da migração em células de CECP. Por outro lado, também encontramos uma diminuição na viabilidade celular após o “knock down” de SOX2, coerente com o papel de SOX2 como oncogene. De acordo, após indução de apoptose com doxorubicina, células de CECP silenciadas para SOX2 mostraram significativamente mais apoptose que as controles. Interessantemente, a via de apresentação de antígeno foi a mais afetada após o “knock down” de SOX2. Os genes envolvidos nessa via e afetados nos nossos resultados, principalmente genes HLA classe I, estava afetados negativamente, mostrando correlação positiva com expressão de SOX2. Estes achados sugerem um papel de SOX2 na resposta imunológica de CECP e podem indicar um enfoque promissor para o desenvolvimento de novas terapias para tumors de CECP com expressão de SOX2. Além do potencial de SOX2 como biomarcador para prognóstico de CECP, uma maior compreensão dos mecanismo moleculares subjacentes pode ajudar no estabelecimento de novas estratégias de terapia direcionada. / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is one of the most prevalent and lethal human malignancies worldwide. To date there are no reliable biomarkers for prognosis or therapy decision making in HNSCC oncology. Recurrent copy number gain and overexpression of the transcription factor SOX2 has been shown in HNSCC; however, the impact of SOX2 expression on tumor relevant processes and clinical outcome remains largely elusive. Expression of SOX2 was assessed in 22 HNSCC cell lines with and without 3q gain. Mean expression level was significantly higher in cell lines with 3q gain as compared to cell lines without 3q gain (p = 0,0012). We performed global gene expression profiling of control and SOX2 silenced HNSCC cell lines, specifically tongue squamous cell carcinoma, with SOX2 gene amplification. Results showed 749 affected after SOX2 knock down, considering the adjusted p value ≤ 0,05. 456 genes were found to be down-regulated and 293 genes to be up-regulated after SOX2 knock down. The top up-regulated gene was vimentin and its inverse expression with SOX2 was confirmed by quantitative real time polymerase chain reaction. Indeed, immunofluorescence showed inverse expression of SOX2 and vimentin. Ingenuity pathway analysis of transcriptome data revealed an enrichment of differentially expressed genes with a functional annotation in cell mobility and cellular movement. In line with these findings, SOX2 silenced cells showed increased migration as compared to controls in two independent HNSCC cell lines, from tongue and hypopharynx, suggesting a higher risk for local recurrence and metastasis of tumors with low or no SOX2 expression. In addition, SOX2 negative cells were preferentially localized in the “invasion front” whereas SOX2 positive cells were seen in the center of the cell colonies, suggesting that silencing SOX2 could be a necessary step to initiate migration in HNSCC cells. On the other hand we also found that cell survival decreased after SOX2 knock down coherently with SOX2 role as an oncogene. Also, after apoptosis induction with doxorubicin, HNSCC SOX2 silenced cells had significantly more apoptosis than control. Interestingly, Antigen Presentation Pathway was the main affected pathway after the knock down of SOX2. The genes involved in this pathway that were found affected in our trancriptome data were mainly HLA class I, and they were all down-regulated after SOX2 knock down, showing a positive correlation with SOX2. This finding suggests a role of the transcription factor SOX2 in the underlying immune response of HNSCC and could indicate a promising approach for new therapies development for SOX2 expressing tumors. In addition to the potential of SOX2 as prognostic biomarker, a better understanding of the underlying molecular mechanisms could help to establish new strategies for targeted therapy.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2012. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-02-21T13:22:18Z No. of bitstreams: 1 2012_MarinaVazLimaFullinSaldanha.pdf: 3290917 bytes, checksum: 342de26b8a80851cc1463b366bfcc2d2 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2013-02-26T16:29:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_MarinaVazLimaFullinSaldanha.pdf: 3290917 bytes, checksum: 342de26b8a80851cc1463b366bfcc2d2 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-02-26T16:29:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_MarinaVazLimaFullinSaldanha.pdf: 3290917 bytes, checksum: 342de26b8a80851cc1463b366bfcc2d2 (MD5) / O Papilomavírus Humano (HPV) está relacionado à patogênese de vários tipos de câncer, e uma associação causal entre o HPV e o câncer de cabeça e pescoço tem sido estabelecida recentemente. A infecção pelo HPV de alto risco está frequentemente associada à superexpressão da p16, uma proteína envolvida no controle do ciclo celular e utilizada como biomarcador para os eventos iniciais da carcinogênese. O objetivo deste estudo foi analisar a expressão da p16 em carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço e sua relação com o HPV. A amostra analisada foi composta por tecidos de biópsias emblocados em parafina de casos de carcinoma espinocelular de boca e orofaringe, e um grupo controle de hiperplasia fibrosa. Todos os casos foram avaliados para expressão de p16 pela técnica imuno- histoquímica e para detecção do HPV pela reação de polimerização em cadeia (PCR). Nos casos de carcinoma, analisou-se a expressão de p16 na região do tumor e no epitélio adjacente, bem como no epitélio dos casos controle. Os dados clínicos e demográficos foram obtidos de arquivos médicos. 25% dos casos de câncer de boca e 35,7% de orofaringe foram positivos para p16. O epitélio adjacente mostrou 38,5% positividade para p16 em câncer de boca e 45,5% para orofaringe. O grupo controle apresentou positividade em 30% dos casos. Observou-se relação entre a morfologia queratinizante e a ausência de expressão de p16. A relação descrita na literatura entre superexpressão de p16 e presença de HPV não foi encontrada, pois nenhum caso foi HPV-positivo. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The Human Papillomavirus (HPV) has been linked to the pathogenesis of several types of cancer, and a causal association between HPV and head and neck cancer has been recently established. Proteins involved in cell cycle control are used as biomarkers to changes in the cycle and early events of arcinogenesis. The purpose of this study was to analyze the expression of the p16 protein in head and neck squamous cell carcinomas and its relationship with HPV. Paraffin-embedded biopsy tissues from patients with oral squamous cell carcinoma (OSCC) and oropharyngeal squamous cell carcinoma (OPSCC) comprised the sample analyzed. A control group comprised biopsies diagnosed with fibrous hyperplasia. They were evaluated for p16 immunohistochemical expression in tumor tissue and adjacent epithelium and for the presence of HPV through DNA extraction and Nested PCR. Demographic data were obtained from medical records. Results: 25% of OSCC cases and 35.7% of OPSCC were positive for p16. The adjacent epithelium showed 61% of p16 OSCC positive and 45% in OPSCC. Control group presents positivity in 30% of cases. No patients presented HPV. The study showed that the low p16 expression in the tumor area indicates that this gene is inactivated in carcinogenesis. We did not find relationship between p16 and HPV, since no cases were HPV-positive.

Carcinoma espinocelular de cabeca e pescoco (CECP) é uma das malignidades mais prevalentes e mortais mundialmente. Até o momento não existem biomarcadores confiáveis para prognóstico e decisão de terapia na oncologia de CECP. Ganhos cromossômicos do fator de transcrição SOX2 foram demonstrados em CECP; entretanto, o impacto da expressão de SOX2 em processos relevantes tumorais e evolução clínica permanecem incompreendidos. Expressão de SOX2 foi analisada em 22 linhagens celulares de CECP, com e sem ganho em 3q. O nível médio de expressão de SOX2 foi significativamente maior nas linhagens com ganho em 3q quando comparada às linhagens sem ganho em 3q (p = 0,0012). Neste trabalho, realizamos o perfil global de expressão genica das linhagens de CECP controle e após silenciamento de SOX2, especificamente carcinoma espinocelular de língua com amplificação de SOX2. Os resultados mostraram 749 genes afetados por SOX2 “knock down”, considerando o valor ajustado de p ≤ 0,05. 456 genes forma encontrados negativamente regulados enquanto que 293 genes foram positivamente regulados após o “knock down” de SOX2. O principal gene positivamente regulado foi vimentin e sua expressão inversa com SOX2 foi confirmado usando “quantitative real time polymerase chain reaction”. De fato, a imunofluorescência indicou expressão inversa de SOX2 e vimentin. A análise da “transcriptome data” usando o software “Ingenuity pathway analysis” revelou genes diferentemente expressos envolvidos nas funções de mobilidade celular e movimento celular. Alinhados com esses achados, as células silenciadas para SOX2 apresentaram maior migração quando comparadas aos controles em duas linhagens independentes de CECP, uma de língua e outra de hipofaringe, sugerindo um maior risco para recidiva e metástase de tumores com baixa ou nenhuma expressão de SOX2. Complementando esses resultados, as células negativas para SOX2 localizaram-se preferencialmente no “fronte de invasão”, enquanto que as células positivas para SOX2 estavam no centro das colônias celulares, sugerindo que o silenciamenteo de SOX2 pode ser necessário para o início da migração em células de CECP. Por outro lado, também encontramos uma diminuição na viabilidade celular após o “knock down” de SOX2, coerente com o papel de SOX2 como oncogene. De acordo, após indução de apoptose com doxorubicina, células de CECP silenciadas para SOX2 mostraram significativamente mais apoptose que as controles. Interessantemente, a via de apresentação de antígeno foi a mais afetada após o “knock down” de SOX2. Os genes envolvidos nessa via e afetados nos nossos resultados, principalmente genes HLA classe I, estava afetados negativamente, mostrando correlação positiva com expressão de SOX2. Estes achados sugerem um papel de SOX2 na resposta imunológica de CECP e podem indicar um enfoque promissor para o desenvolvimento de novas terapias para tumors de CECP com expressão de SOX2. Além do potencial de SOX2 como biomarcador para prognóstico de CECP, uma maior compreensão dos mecanismo moleculares subjacentes pode ajudar no estabelecimento de novas estratégias de terapia direcionada. / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is one of the most prevalent and lethal human malignancies worldwide. To date there are no reliable biomarkers for prognosis or therapy decision making in HNSCC oncology. Recurrent copy number gain and overexpression of the transcription factor SOX2 has been shown in HNSCC; however, the impact of SOX2 expression on tumor relevant processes and clinical outcome remains largely elusive. Expression of SOX2 was assessed in 22 HNSCC cell lines with and without 3q gain. Mean expression level was significantly higher in cell lines with 3q gain as compared to cell lines without 3q gain (p = 0,0012). We performed global gene expression profiling of control and SOX2 silenced HNSCC cell lines, specifically tongue squamous cell carcinoma, with SOX2 gene amplification. Results showed 749 affected after SOX2 knock down, considering the adjusted p value ≤ 0,05. 456 genes were found to be down-regulated and 293 genes to be up-regulated after SOX2 knock down. The top up-regulated gene was vimentin and its inverse expression with SOX2 was confirmed by quantitative real time polymerase chain reaction. Indeed, immunofluorescence showed inverse expression of SOX2 and vimentin. Ingenuity pathway analysis of transcriptome data revealed an enrichment of differentially expressed genes with a functional annotation in cell mobility and cellular movement. In line with these findings, SOX2 silenced cells showed increased migration as compared to controls in two independent HNSCC cell lines, from tongue and hypopharynx, suggesting a higher risk for local recurrence and metastasis of tumors with low or no SOX2 expression. In addition, SOX2 negative cells were preferentially localized in the “invasion front” whereas SOX2 positive cells were seen in the center of the cell colonies, suggesting that silencing SOX2 could be a necessary step to initiate migration in HNSCC cells. On the other hand we also found that cell survival decreased after SOX2 knock down coherently with SOX2 role as an oncogene. Also, after apoptosis induction with doxorubicin, HNSCC SOX2 silenced cells had significantly more apoptosis than control. Interestingly, Antigen Presentation Pathway was the main affected pathway after the knock down of SOX2. The genes involved in this pathway that were found affected in our trancriptome data were mainly HLA class I, and they were all down-regulated after SOX2 knock down, showing a positive correlation with SOX2. This finding suggests a role of the transcription factor SOX2 in the underlying immune response of HNSCC and could indicate a promising approach for new therapies development for SOX2 expressing tumors. In addition to the potential of SOX2 as prognostic biomarker, a better understanding of the underlying molecular mechanisms could help to establish new strategies for targeted therapy.

Submitted by João Arthur Martins (joao.arthur@ufpe.br) on 2015-04-08T19:21:01Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação final após defesa..pdf: 3311648 bytes, checksum: ffd3e243b189fa696f5bb64b2db6bdff (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T19:21:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação final após defesa..pdf: 3311648 bytes, checksum: ffd3e243b189fa696f5bb64b2db6bdff (MD5) Previous issue date: 2012-02-07 / CNPq / Introdução: A laringectomia total é uma forma de tratamento cirúrgico para o câncer de laringe nos estágios mais avançados. Com o procedimento, há a remoção de toda a laringe e dos músculos adjacentes a esta, acarretando alterações, além de anatômicas e estéticas. Interfere em funções básicas do sistema estomatognático, dentre elas, a mastigação, causando desequilíbrios ou desorganização, acrescidas de frequentes sequelas pós- cirúrgicas, como cicatrizes, aderências, encurtamentos musculares, dor, edema e alterações posturais, que podem influenciar na amplitude de movimento e na postura de cabeça e pescoço. Objetivo: Relacionar o lado de preferência mastigatória com os dados goniométricos e posturais da região cervical em indivíduos submetidos à laringectomia total. Métodos: Estudo transversal, descritivo, tipo série de casos, e retrospectivo para o grupo dos laringectomizados totais. A coleta de dados ocorreu no setor de Fonoaudiologia do Hospital de Câncer de Pernambuco (HCP), entre janeiro e junho de 2011. Contou com dois grupos: um composto por 9 pacientes voluntários submetidos à laringectomia total, atendidos no HCP, e um controle com 9 voluntários não laringectomizados. A preferência por um lado mastigatório foi determinada através da análise das gravações do ato mastigatório habitual. A goniometria foi utilizada para avaliação da Amplitude de Movimento (ADM) cervical, que consistiu na mensuração, em graus, da amplitude de movimento, na forma passiva e ativa, da flexão, extensão, inclinação e rotação para a direita e para a esquerda da cabeça. Para avaliar a postura de cabeça e pescoço foi utilizada a fotogrametria, através do Software de Avaliação Postural (SAPO), onde fotos, nas vistas anterior, posterior, perfil direito e perfil esquerdo dos indivíduos foram obtidas com pontos de referências demarcados nas regiões a serem analisadas. Os dados foram organizados em planilha Excel® e analisados com o programa SPSS na versão 17.0. Para análise dos dados foram utilizados o teste não paramétrico de Mann-Whitney para comparação de amostras não pareadas. Resultados: Nos dois grupos existiu uma preferência por lado mastigatório à esquerda (55,6%). Com a goniometria, observou-se que os laringectomizados, com esta preferência mastigatória, apresentam uma redução significativa da ADM da extensão passiva (p=0,047) e da inclinação para a direita, tanto ativa (p=0,044) quanto passivamente (p=0,027), enquanto que, naqueles preferência mastigatória à direita, somente o movimento de extensão, passiva (p=0,019) e ativa (p=0,020), estava limitado. Na avaliação postural pelo SAPO, a postura não diferiu entre os grupos, porém quando comparada à preferência mastigatória à esquerda, os laringectomizados apresentaram anteriorização de cabeça mais significante (p=0,009). Conclusão: Os laringectomizados totais por câncer apresentaram preferência mastigatória à esquerda, com as amplitudes de movimentos cervicais limitadas, principalmente para extensão passiva e inclinação para a direita passiva e ativamente, com uma postura anteriorizada de cabeça.

Made available in DSpace on 2018-08-01T20:28:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10964_Dissertação_AllinyBastos.pdf: 1478449 bytes, checksum: c80553159f9c8d359035662e8cb6ce77 (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / O carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço (CECP) apresenta alta taxa de mortalidade e morbidade de indivíduos em todo o mundo. Apesar de diversos estudos apresentarem possíveis biomarcadores (BM) para o CECP, não há um BM específico estabelecido para esta doença. O objetivo deste trabalho foi avaliar o papel do VEGF- C, COX-2 e IL-17A como possíveis BM do CECP, uma vez que sua sobrexpressão tem sido relacionada com o pior prognóstico da doença. Foi realizado um estudo clínico transversal aprovado pelo Comitê de Ética CEP/UFES n° 99.242/2012. Dados clínicos-patológicos e amostras biológicas de 124 pacientes com CECP e 29 indivíduos saudáveis foram coletados. A detecção da expressão do mRNA de VEGF-C e COX-2 foi realizada por ensaio de qPCR em amostras de tumor e tecido normal. A avaliação da expressão proteica de VEGF-C e COX-2 foi realizada em soro de pacientes com CECP e controles por western blotting. O nível de IL-17A (pg/ml) foi mensurado por citometria de fluxo. A análise estatística dos dados mostrou aumento da expressão relativa do mRNA de VEGF-C em tecido tumoral foi observada em pacientes com metástase em linfonodos (p= 0,027), em relação ao grupo sem envolvimento linfonodal (0,043) e as amostras de tecido normal (0,031); Alteração da expressão proteica de VEGF-C em soro de pacientes com CECP em estágio avançado da doença (III/IV) (p=0,01) foi observado em comparação com grupo em estadiamento inicial (I/II) (p= 0,03) e controle (p= 0,003). COX-2 não apresentou diferença significante em nenhum dos parâmetros e tipos de amostras biológicas analisadas. O nível de IL-17A mostrou-se elevado nas amostras de soro de pacientes com CECP (p=0,04), no estadiamento incial da doença (I/II) (p= 0,03), em tabagistas (p= 0,04) e nos indivíduos sem metástase em linfonodos regionais quando comparados ao grupo controle (p= 0,04). VEGF-C e IL-17A se mostraram como potenciais BM do CECP em amostras de soro, sendo uma forma menos invasiva e mais viável para avaliação do estado do paciente, enquanto que para COX-2 são necessárias novas abordagens para avaliar seu papel no CECP. Palavras-chave: Carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço; biomarcadores; VEGF- C; COX-2; IL-17A.

Made available in DSpace on 2018-08-01T21:35:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10521_Dissertação Barbara Freire Mesquita.pdf: 1230101 bytes, checksum: 3a2a878581795e02c56bf06486fd6d82 (MD5) Previous issue date: 2016-08-17 / Introdução: O câncer de cabeça e pescoço (CCP) inclui cânceres originados na cavidade oral, na orofaringe e na laringe. Os tratamentos mais comuns são cirurgia, radioterapia e quimioterapia, e muitos efeitos adversos a estes últimos são conhecidos. Atualmente, busca-se novas tecnologias visando melhora no prognóstico aliada a redução dos efeitos colaterais. As tecnologias da saúde podem ser classificadas em hardware e software. As tecnologias hardware incluem os artefatos como os instrumentos e medicamentos. As tecnologias software contemplam os instrumentos sociais, que utilizam tecnologias de relações como produção de vínculo, acolhimento e cuidado. Objetivo: Objetivou-se descrever o perfil epidemiológico de pacientes com CCP e analisar a importância do emprego de novas tecnologias para maior eficiência no tratamento e aumento na qualidade de vida dos indivíduos. Metodologia: Foi realizado um estudo em 273 pacientes com CCP do Hospital Santa Rita de Cássia em Vitória-ES, de 2012 a 2015. Foram obtidos dados de estadiamento e localização do tumor, história do consumo de álcool e tabaco, além das variáveis de gênero e idade, e medidas antropométricas e pressão arterial. Os dados foram obtidos a partir de entrevista, aferições no paciente e análise de prontuários. Os dados foram coletados antes e após o tratamento. Os dados foram apresentados em média ± DP e frequência. Foram aplicados o teste Qui quadrado, teste exato de Fischer, teste de Wilcoxon e Mann Whitney, além de correlação de Spearman. Foram utilizados os softwares SPSS (Statistical Package for the Social Sciences), e Prisma. O valor de p < 0,05 foi considerado significativo. Resultados: Foi demonstrado que mais de 82% de pacientes são homens e a idade média de diagnóstico é de 59 anos. A maioria dos pacientes apresentou estadiamento avançado. O sítio mais acometido foi a cavidade oral, e quanto ao tratamento, metade dos pacientes foram submetidos à quimioterapia e mais de 2\3 passaram por radioterapia e 38% por cirurgia. Grande parte dos pacientes permanece tabagista e\ou etilista após o diagnóstico. Mais de 71% dos indivíduos 7 que fumam e\ou bebem, apresentaram estadiamento avançado. Os fumantes apresentaram índice de massa corporal (IMC) menor que os não fumantes, tanto antes quanto após o tratamento. O IMC de tabagistas e etilistas foi menor do que de ambos abstêmios. Após o tratamento, houve redução significativa da Pressão arterial média. Conclusão: Foi observado que a maioria dos indivíduos permanece tabagista após o diagnóstico e que um baixo IMC está associado a um estadiamento avançado da doença. O paciente que recebe o tratamento e permanece tabagista e\ou etilista, reduz substancialmente suas chances de remissão, além disso, a perda de peso resultante dos efeitos adversos e também da manutenção do tabagismo e etilismo podem levar a um prognóstico pior. Aliar a aplicação de tecnologias software mostra- se tão importante quanto o uso das tecnologias hardware. Ao final deste trabalho são propostas ações simples para mitigar os efeitos colaterais e potencializar o efeito terapêutico diante deste perfil, com o objetivo de aumentar a capacidade do indivíduo receber e responder positivamente ao tratamento. Palavras-chave: Câncer de cabeça e pescoço, tratamento, novas tecnologias, qualidade de vida.

Made available in DSpace on 2018-08-01T21:35:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10966_CelenyFiguera_Dissertação_PPGBiotec (Final).pdf: 1556599 bytes, checksum: 51c85b164333a4f542d5ac9fbca3c088 (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / O carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço (CECP) representa o tipo histológico mais frequente nos cânceres de cabeça e pescoço. Apesar dos numerosos estudos realizados ainda não foi estabelecido um conjunto comum de biomarcadores para o CECP que facilitem o prognóstico e o diagnóstico precoce. O objetivo deste estudo foi avaliar no CECP o possível potencial de biomarcador da Serpina1 e Osteopontina (OPN) por serem moléculas pouco avaliadas neste câncer. Os dados clínicos- patológicos e amostras biológicas foram obtidos de 40 pacientes com CECP e 11 indivíduos saudáveis. Foi realizada a detecção da expressão relativa do mRNA de Serpina1 e OPN por ensaio de qPCR em amostras de tecido tumoral e tecido normal. A avaliação da expressão proteica de OPN e Serpina1 foi realizada pela técnica de Western Blot em amostras soro de pacientes com CECP e indivíduos saudáveis. Foi observado aumento significativo no mRNA da Serpina1 em tecido tumoral em relação ao tecido normal (p=0.0014) e em relação às diferentes características clinico-patológicas avaliadas (sexo, hábito de beber e fumar, estadiamento e desenvolvimento linfonodal). A expressão proteica da Serpina1 no soro foi significativamente maior (p=0.0007) em pacientes com CECP quando comparados aos controles, assim como as características clinico-patológicas avaliadas. Os níveis de OPN no mRNA não foram diferentes entre os tecidos. A expressão proteica da OPN foi maior nos pacientes com estadiamento avançado da doença (III/IV) (p=0.0181). A Serpina1 mostrou-se como um potencial biomarcador do CECP, seus níveis aumentados nos pacientes com CECP podem ser detectados tanto no tecido tumoral como no sangue o que pode facilitar sua aplicação no desenvolvimento da doença. A OPN deve ser melhor avaliada para estabelecer as possíveis diferenças significativas. Palavras-chave: Carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço. Biomarcadores. Osteopontina. Serpina1.

Made available in DSpace on 2018-08-23T21:50:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_12428_Ata 49ª Defesa de Tese - Lucas de Lima Maia.pdf: 430153 bytes, checksum: 08c6d28935fb4f81d728310e6be5eafd (MD5) Previous issue date: 2018-05-30 / Atualmente muitas vias de sinalização têm sido associadas ao surgimento, progressão e prognóstico do câncer, entre elas a via de reposta à hipóxia associada às alterações epigenéticas. O nível de metilação das histonas H3 no resíduo de lisina 9 (H3K9) têm mostrado controlar o nível de expressão dos genes supressores de tumor. A JMJD1A é uma proteína com função de desmetilar as H3K9 na região promotora de determinados genes. A JMJD1A tem sua atividade regulada pela condição de hipóxia. Um dos genes alvos da JMJD1A é a proteína adrenomedulina (ADM) que tem importante papel na carcinogênese e na progressão de tumores mais agressivos. O nível de metilação das histonas H3, assim como a expressão da JMJD1A e ADM tem sido associado com a progressão e prognóstico de diversos tipos de tumores. No entanto, o papel dessas proteínas no carcinoma de cabeça e pescoço ainda precisa ser elucidado. Sendo assim, o presente estudo teve o propósito de estudar as proteínas H3K9 mono e di-metiladas (H3K9me1 e H3K9me2, respectivamente), JMJD1A e ADM que estão relacionadas à resposta a essa condição biológica. O objetivo do trabalho foi associar a expressão das proteínas supracitadas com características clinicopatológicas e prognósticas de pacientes com câncer oral e de orofaringe. O estudo foi realizado por meio da análise por imuno-histoquímica de lâminas de tissue microarray contendo amostras de 84 pacientes com carcinoma oral e de orofaringe operados no Hospital Heliópolis (São Paulo/SP). A análise foi feita pela avaliação positiva ou negativa da proteína no núcleo e citoplasma, com nível fraco ou forte desta expressão nos casos em que a proteína esteve presente. As proteínas tiveram uma ampla expressão no tecido tumoral, além disso, foi observado relações entre a expressão de uma determinada proteína com a expressão das demais analisadas no estudo. Em relação às características clinicopatológicas e prognósticas foram observadas associações significantes. Observou-se associação da metástase linfonodal com a expressão nuclear da proteína JMJD1A e com a expressão citoplasmática da proteína ADM. Já o estádio do tumor teve associação significativa com a expressão citoplasmática da JMJD1A. Em relação às características prognósticas observou-se a associação do óbito com a expressão citoplasmática da proteína H3K9me1. A respeito da análise de sobrevida, foi observado que a sobrevida doença específica e sobrevida livre de doença tiveram relação significante com a expressão nuclear da proteína H3K9me2. Dessa forma, as proteínas JMJD1A, H3K9me1, H3K9me2 e ADM se mostraram promissoras como marcadores de prognóstico para pacientes com carcinoma de oral e de orofaringe, podendo ser utilizadas no futuro como marcadores preditivos e alvos terapêuticos para o tratamento da doença.

Orientadores: Luiz Paulo Kowalski, Oslei Paes de Almeida / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-09T14:07:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_KeniaRegina_M.pdf: 1402143 bytes, checksum: 385a4aeaced1369767478ecb4c8dd53b (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: As neoplasias benignas e malignas que acometem glândulas salivares constituem cerca de 1 a 4% de todas as neoplasias do organismo humano. As glândulas parótidas são as mais frequentemente envolvidas, seguidas das glândulas salivares menores e submandibulares, sendo raramente acometidas as glândulas sublinguais. A presença de metástases regionais, extensão do tumor, dor na apresentação e idade maior que 55 anos têm sido considerados como indicadores de pior prognóstico. O objetivo deste estudo foi avaliar as características clínicas, histopatológicas e imunohistoquímicas de 293 tumores malignos das glândulas salivares tratados no Departamento de Cirurgia de Cabeça e Pescoço do Hospital A.C. Camargo, São Paulo, a fim de identificar fatores de riscos associados ao desenvolvimento de metástases linfonodais e sua importância prognóstica. Os dados clínicos dos pacientes foram obtidos por meio dos prontuários médicos e transferidos para uma ficha clínica padronizada especialmente para o estudo. Os diagnósticos histopatológicos foram confirmados, através da revisão dos preparados histológicos. As reações imunoistoquímicas foram feitas através da técnica da estreptavidina-biotina-peroxidase, utilizando-se anticorpos contra proteína p53, antígeno carcinoembrionário (CEA), Ki-67, c-erbB-2 e bcl-2. Dos pacientes que participaram do estudo, 150 eram homens (51,2%) e 143 (48,8%) mulheres, com idade média de 48 anos, variando de 5 a 91 anos. Cento e cinqüenta dois casos (51,9%) eram tumores primários das glândulas salivares maiores, sendo desses 120 em parótida. O tipo histológico mais comum foi Carcinoma Mucoepidermóide seguido pelo Carcinoma Adenóide Cístico, que juntos corresponderam a 70,3% dos casos. Cirurgia foi o tratamento mais realizado e 119 pacientes foram submetidos a esvaziamento cervical. Cento e quatro pacientes (35,5%) apresentaram recidivas locais, regionais e ou à distância. Metástases linfonodais foram observadas em 25% dos casos com idade superior a 65 anos (p=0,020) e em 23% dos pacientes que foram a óbito pela doença (p=0,004). A sobrevida global em 5 anos foi de 65,6% e em 10 anos 54,6%. Reações imunoistoquímica para p53, bcl-2, Ki-67, CEA, c-erbB-2 foram positivas em 31,2%, 46,6%, 27,1%, 19,2% e 41,0% respectivamente. Após a análise dos dados, observou-se que os fatores de riscos para presença de metástases linfonodais incluíam a idade maior que 40 anos, linfonodos clinicamente comprometidos, p53 positivo e C-erb-2 negativo. Os fatores prognósticos independentes para óbito foram idade acima dos 40 anos, linfonodos clinicamente comprometidos, diâmetro do tumor maior que 4 cm e tumores com marcação positiva para Ki-67. Conclusão: Metástases linfonodais estão associadas a idade, achado clinico de presença de metástases e imunoexpressão de p53 (positivo) e C-erbB-2 (negativo). A metástase linfonodal é um fator prognóstico independente em carcinomas de glândulas salivares / Abstract: Benign and malignant salivary gland neoplasias comprises 4¿10% of all the neoplasias affecting humans. The parotid glands are the most commonly affected, followed by minor salivary and submandibular glands. Regional metastasis, tumor extension, presence of pain, and age older than 55 years have been considered poor prognostic indicators. The aim of this study was to analyze the clinical, histological and immunohistochemical characteristics of malignant salivary gland tumors treated at the Department of Head and Neck Surgery, A.C. Camargo Hospital, São Paulo, and to identify the risk factors associated with lymph node metastasis and its prognostic relevance. Clinical data were obtained from the medical records. Histopathological slides were reviewed and immunohistochemical reactions against p53 protein, carcinoembryonic antigen (CEA), Ki-67, c-erbB-2 and bcl-2 performed using the streptavidin-biotin-peroxidase method. Results revealed that 150 patients were men (51.2%) and 143 women (48.8%), with a mean age of 48 years, varying from 5 to 91 years. Primary tumors involving the major salivary glands were observed in 152 cases (51.9%), 120 of which affected the parotid glands. Histological analysis revealed Mucoepidermoid Carcinoma (41.6%) followed by Adenoid Cystic Carcinoma (28.7%) totaling 70.3% of the cases. Surgery was needed in most of the cases and 119 patients were submitted to neck dissection. Recurrence was observed for 104 patients (35.5%). Survival rate was 65.6% at 5 years and 54.6% at 10 years. Immunohistochemical reactions for p53, bcl-2, Ki-67, CEA, c-erbB-2 were positive in 31.2%, 46.6%, 27.1%, 19.2% and 41.0% of the cases, respectively. Clinically affected lymph nodes, p53 positive and C-erb-2 negative tumor cells, and age older than 40 years were regarded as risk factors for lymph node metastasis. Clinically affected lymph nodes, tumors 4 cm or greater in diameter, tumors with Ki-67 positive cells, and age older than 40 years were considered independent prognostic factors for death. Conclusion: limph node metastasis are associated with age, clinical identification of metastatic limph nodes and immunoexpression of p53 (positive) and C-erbB-2 (negative). Limph node metastasis is a significant and independent prognostic factor in salivary gland carcinomas / Mestrado / Patologia / Mestre em Estomatopatologia

Orientador : Nelson Ary Brandalise / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-14T01:43:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tincani_AlfioJose_M.pdf: 3342468 bytes, checksum: 3acba27be9f9c82d533e9dc95ce13a39 (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: Entre os anos de 1985 a 1990 foram estudados retrospectivamente 42 pacientes com neoplasia maligna em estagio avançado na região de cabeça e pescoço. Em todos pacientes foram necessárias amplas ressecções com intuitos curativos e, para a reconstrução do defeito cirúrgico remanescente foi utilizado o retalho miocutâneo pediculado do peitoral maior. Foram avaliados as indicações, anatomia, assim como a técnica cirúrgica e a morbidade pós-operatória com o uso do retalho. As complicações ocorridas foram resolvidas clinicamente a excessão de um paciente. O retalho ofereceu proteção a artéria carótida e também permitiu reconstrução no mesmo ato operatório. / Abstract: Between the years 1985 and 1990, 42 patients with advanced malignant neoplasm in the head and neck region were studied retrospectevely. In all the patients for the purpose of cure, large ressections were necessary and for the reconstruction of surgical defects the pectoralis major myocutaneous flap was utilized. Surgical complications that followed were resolved clinicaly with the exeption of a single patient. The flap offered protection for the cariotid artery and allowed reconstruction all in a single surgery. / Mestrado / Mestre em Ciências Médicas