Made available in DSpace on 2016-06-07T17:12:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-10. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-07T17:16:52Z : No. of bitstreams: 1 000864070.pdf: 3276572 bytes, checksum: beb57da1d24a51f67b6dd1ab7e4b0878 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A terapia fotodinâmica se apresenta como uma opção clínica promissora para o tratamento de tumores e, de infecções causadas por vírus e bactérias por meio do uso de fotossensibilizadores não tóxicos. A ftalocianina, quando associada à luz visível, possui propriedades fotofísicas vantajosas apresentando alta absorção na faixa de espectro luminoso vermelho. A borreliose aviária é uma doença aguda e septicêmica, causada pela bactéria Borrelia anserina, transmitida pelo carrapato Argas miniatus, podendo levar a morte. A enfermidade possui grande importância econômica para a avicultura, por causar alto índice de mortalidade em aves. O estudo teve como objetivo verificar se o soro parasitado com Borrelia anserina, tratado com luz visível associada à ftalocianina de cloro-alumínio, quando inoculado in vivo, é capaz de provocar a enfermidade, e quando in vitro, mantém sua capacidade de crescimento em meio Barbour-Stoenner-Kelly. Foram utilizados 11 frangos doadores de soro parasitado e 42 galinhas receptoras, separadas em sete grupos experimentais, in vivo e in vitro, para ambas as etapas. Grupo controle, grupo doença parasitado com B. anserina, grupo Imunossupressão, grupo luz visível, grupo nanoemulsão, grupo ftalocianina e grupo tratado realizado com luz visível associada à emulsão de ftalocianina de cloro-alumínio. O acompanhamento foi realizado a cada cinco dias, durante 45 dias após a inoculação, com realização de exame clínico, espiroquetemia, reação em cadeia da polimerase quantitativa, dosagem de Imunoglobulina Y, colesterol, triglicerídeos, fosfatase alcalina, alanina aminotransferase e aspartato aminotransferase, volume globular e proteína plasmática total. Foi possível concluir que a associação de luz visível e ftalocianina de cloro-alumínio tem efeito favorável no controle da enfermidade, redução da carga parasitária e taxa de mortalidade / Photodynamic therapy is presented as a promising clinical option for the treatment of tumors, viruses and bacteria through the use of nontoxic photosensitizers. When the phthalocyanine is combined with visible light, have advantageous on the photophysical properties presenting high absorption in the red light spectrum range. Avian Spirochetosis is an acute and septicemic disease, caused by the bacterium Borrelia anserina, transmitted by Argas miniatus and can lead to death. The disease has great economic importance to the poultry industry, because this causes a high mortality in aviculture. The study had as objective to determine the serum infested with Borrelia anserina, treated using visible light associated with chloro-aluminum phthalocyanine, when inoculated in vivo, is capable of causing illness, and when in vitro, retains its capacity for growth amid Barbour-Stoenner-Kelly. Were used 11 chicken serum donors parasitized and 42 receiving chickens, in seven separate experimental groups, in vivo and in vitro for both steps. Control group, parasitized disease group B. anserina, immunosuppression group, light group visible, nanoemulsion group, phthalocyanine group and treated group conducted with visible light associated with emulsion chloro-aluminum phthalocyanine. Follow-up was conducted every five days, for 45 days after inoculation with conducting clinical examination, spirochetemia, quantitative polymerase chain reaction, Immunoglobulin Y dosage, cholesterol, triglycerides, alkaline phosphatase, alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase, Globular volume and plasma total protein. It was concluded that visible light association and chloro-aluminum phthalocyanine has a favorable effect on the control of the disease, reduction in parasite burden and mortality rate

Submitted by CRISTIAN STATKIEVICZ (c.statkievicz@gmail.com) on 2016-10-15T03:12:53Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO CRISTIAN VERSÃO FINAL - REPOSITÓRIO.pdf: 7053318 bytes, checksum: 7e3743d0506776749bc5bf1702e95116 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-10-20T18:34:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 statkievicz_c_me_araca.pdf: 7053318 bytes, checksum: 7e3743d0506776749bc5bf1702e95116 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-20T18:34:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 statkievicz_c_me_araca.pdf: 7053318 bytes, checksum: 7e3743d0506776749bc5bf1702e95116 (MD5) Previous issue date: 2016-08-30 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / OBJETIVOS: Os objetivos do presente estudo foram avaliar o efeito da terapia com laser em baixa intensidade (LLLT) e da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) no processo de reparo alveolar de ratas com os principais fatores de risco para a osteonecrose dos maxilares associada à terapia medicamentosa (ONM-M). MATERIAIS E MÉTODOS: Ratas senis (n=29) foram distribuídas nos grupos: SAL, ZOL, ZOL/LLLT e ZOL/aPDT. Durante sete semanas, a cada dois dias, administrou-se pela via intraperitoneal 0,45ml de NaCl 0,9% (SAL) ou 0,45ml desta mesma solução acrescida de 100μg/Kg de zoledronato (ZOL, ZOL/LLLT e ZOL/aPDT). Decorridas três semanas, realizou-se a exodontia do primeiro molar inferior esquerdo. Nos grupos ZOL/LLLT e ZOL/aPDT as ratas foram submetidas respectivamente a LLLT ou aPDT aos 0, 2 e 4 dias pós exodontia. A eutanásia foi realizada 28 dias após a exodontia. No sítio de extração dental foram realizadas análises: histopatológica do processo de reparação tecidual, histométrica da área de tecido ósseo neoformado (ATO) e imunoistoquímica direcionada para os seguintes biomarcadores: PCNA, BAX, C3C, TNFα, IL-1β, IL-6, HIF-1α, VEGF, CD31, BMP2/4, RUNX-2, OCN, OPG, RANKL e TRAP. RESULTADOS: Os grupos tratados com zoledronato apresentaram maior imunomarcação para OPG e menor imunomarcação para RANKL e TRAP. Em ZOL observou-se áreas de osteonecrose, comprometimento da reparação tecidual, menor ATO, menor imunomarcação para PCNA, HIF-1α, VEGF, CD31, BMP2/4 e OCN, e maior imunomarcação para BAX, C3C, TNFα, IL-1β, IL-6 e RUNX-2 em relação ao SAL. ZOL/LLLT apresentou melhora em alguns parâmetros em relação ao ZOL (ATO, PCNA, TNFα, HIF-1α, VEGF, CD31 e RUNX-2), no entanto, poucos foram os parâmetros que se igualaram ao SAL (PCNA, HIF-1α, VEGF, CD31 e RUNX-2). ZOL/aPDT não apresentou áreas de osteonecrose, o processo de reparação tecidual não diferiu significativamente de SAL, assim como, os seguintes parâmetros ATO, PCNA, BAX, C3C, IL-1β, HIF-1α, VEGF, CD31, RUNX-2 e OCN. CONCLUSÕES: O zoledronato compromete o processo de reparação tecidual do sítio de extração dental em ratas com os principais fatores de risco para a ONM-M. LLLT e aPDT são capazes de melhorar eventos relacionados com o processo de reparo alveolar. A aPDT se mostrou a terapia preventiva mais efetiva para evitar a ONM-M. RELEVÂNCIA CLÍNICA: A aPDT pode se constituir em uma alternativa de terapia preventiva para evitar o desencadeamento de ONM-M pós exodontia. / OBJECTIVES: The aim of this study was to evaluate the effects of Low Level Laser Therapy (LLLT) and antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) in the alveolar bone repair in rats with the high risk factors for Medication-Related Osteonecrosis of the Jaw (MRONJ). MATERIALS AND METHODS: Senile rats (n = 29) were distributed into four groups: SAL, ZOL, ZOL/LLLT and ZOL/aPDT. For seven weeks, every two days, 0,45ml 0.9% NaCl (SAL) or 0,45ml of this same solution plus 100μg/kg zoledronate (ZOL, ZOL/LLLT and ZOL/aPDT) were administered intraperitoneally. After three weeks, the first lower left molar was extracted. In ZOL/LLLT and ZOL/aPDT groups, the rats were submitted to LLLT or aPDT therapy at 0, 2 and 4 days after tooth extraction. Euthanasia was performed 28 days after tooth extraction. In dental extraction site was performed the histopathology analysis of the tissue repair, histometric analysis of newly formed bone area (NFB) and immunohistochemistry related to the following biomarkers: PCNA, BAX, C3C, TNFα, IL-1β, IL-6, HIF-1α, VEGF, CD31, BMP2/4, RUNX-2, OCN, OPG, RANKL and TRAP. RESULTS: The groups treated with zoledronate showed higher immunolabeling for OPG and lower immunolabeling for RANKL and TRAP. In ZOL group was observed areas of osteonecrosis, impairment of wound healing, lower ATO, lower immunolabeling for PCNA, HIF-1α, VEGF, CD31, BMP2/4 and OCN, and higher immunolabeling for BAX, C3C, TNFα, IL-1β, IL-6 and RUNX-2 when compared to the SAL group. ZOL/LLLT showed improvement in some parameters regarding to ZOL (ATO, PCNA, TNFα, HIF-1α, VEGF, CD31 and RUNX-2), however, few parameters were similar to the SAL (PCNA, HIF-1α, VEGF, CD31 and RUNX-2). ZOL/aPDT did not present areas of osteonecrosis and the tissue repair did not differ significantly from the SAL groups, as well as the following parameters: PCNA, BAX, C3C, IL-1β, HIF-1α, VEGF, CD31, RUNX-2 and OCN. CONCLUSIONS: The zoledronate compromises the tissue repair of dental extraction site in rats with the high risk factors for MRONJ. LLLT and aPDT were able to improved the events related to wound's healing. The aPDT showed to be the most effective preventive therapy to MRONJ. CLINICAL RELEVANCE: The aPDT can be in a preventive therapy to prevent the triggering of MRONJ after dental extraction. / FAPESP: 2014/02199-1

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-03-20Bitstream added on 2014-06-13T19:58:59Z : No. of bitstreams: 1 ribeiro_apd_me_arafo.pdf: 10016445 bytes, checksum: 54f364c1faa5066e22a82916fe0e1ac2 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Para considerar a Terapia Fotodinâmica (PDT) como tratamento clínico da estomatite protética, é necessário conhecer tanto o potencial antifúngico, como efeito citotóxico desta terapia sobre células normais do indivíduo. Assim, o objetivo desse estudo in vitro foi avaliar a citotoxicidade da PDT antifúngica com o fotossensibilizador Photogem® associado ao LED azul e ao LED vermelho em cultura de fibroblastos L929 e células odontoblastóides MDPC-23. As células foram cultivadas (30.000 células/cm2) em placas de 24 compartimentos por 48 horas e ambos os tipos celulares foram incubados com Photogem® (0, 10, 25, 50, 100 ou 150 mg/L) e irradiados ou não pelo LED azul (460 ± 3 nm; 25,5 ou 37,5 J/cm2; 22 mW/cm2) ou LED vermelho (630 ± 3 nm; 70 ou 100 J/cm2; 25 mW/cm2) . O metabolismo celular foi determinado 0, 12 e 24 horas após a PDT utilizando o teste do metiltetrazolium (MTT), e a morfologia celular avaliada pela microscopia eletrônica de varredura (MEV). A técnica de citometria de fluxo foi utilizada para avaliar o tipo de morte celular (necrose ou apoptose) assim como estimar os níveis intracelulares das espécies reativas de oxigênio (EROs). Observou-se redução do metabolismo celular estatisticamente significante para todas as concentrações do Photogem® quando irradiadas em qualquer dose de luz, sendo essa redução de 90 a 97% tanto para as células L929 quanto MDPC-23 (ANOVA and Dunnet’s post hoc tests; p<0.05). Essa redução da atividade mitocondrial não foi dependente da concentração do fotossensibilizador e nem da dose de luz empregada. Também, foi demonstrado que a atividade mitocondrial das células submetidas a PDT não foi recuperada após 12 ou 24 horas, caracterizando um dano irreversível. A presença do Photogem® e da luz isoladamente não alterou estatisticamente a atividade mitocondrial de ambas as linhagens. As células submetidas... / In order to consider the photodynamic therapy (PDT) as a clinical treatment for candidosis, it is necessary to know its antifungal potential and its cytotoxicity effect on normal cells. Therefore, the purpose of this in vitro study was to evaluate the cytotoxicity of PDT with Photogem® associated to blue and red LED on L929 and MDPC-23 cell cultures. The cells (30.000 cells/cm2) were seeded in 24-well plates for 48 hours, incubated with Photogem® (10, 25, 50, 100 or 150 mg/L) and were irradiated or not with a blue LED source (460 ± 3 nm; 25.5 or 37.5 J/cm2; 22 mW/cm2) or with a red LED source (630 ± 3 nm; 75 or 100 J/cm2; 22 mW/cm2). Cell metabolism was evaluated by the MTT assay (ANOVA and Dunnet’s post hoc tests; p<0.05) and cell morphology was examined by scanning electron microscopy. Flow cytometry was employed to analyze the type of PDT-induced cell death (necrosis or apoptosis) as well as to estimate intracellular production of reactive oxygen species (ROS). There was a statistically significant decrease of mitochondrial activity for all Photogem® concentrations associated to blue or red LED regardless irradiation time; this reduction ranged from 90 to 97% for both cell lines. This reduction, however, was not dependent on the photosensitizer concentration. It was also demonstrated that the mitochondrial activity of the cells submitted to PDT was not recovered after 12 or 24 hours, characterizing irreversible cell damage. PDT-treated cells presented an altered morphology with ill-defined limits. In both cell lines, there was a predominance of necrotic cell death when in contact with the photosensitizer. The presence of Photogem® and exposure to blue and red LED increased the intracellular levels of ROS in both L929 and MDPC- 23 cells in a dose-dependent manner. The association of Photogem® and blue LED caused severe toxic effects on normal cell culture... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Ewerton Garcia de Oliveira Mima / Resumo: O objetivo deste estudo foi formular e avaliar os efeitos fotodinâmicos da curcumina (CUR) encapsulada em nanopartículas poliméricas (NP) em culturas plactônicas de Candida albicans, Streptococcus mutans e Staphylococcus aureus resistente à meticilina e em biofilme misto formado por essas três espécies. NP de CUR aniônicas e catiônicas foram sintetizadas utilizando-se polímero poli-ácido lático (PLA) e sulfato de dextran (DEX). Para caracterização dessa solução, foram determinadas as propriedades fisicoquímicas (tamanho, polidispersão e potencial zeta) e realizados testes de eficiência de encapsulamento, espectro de absorção, fotoestabilidade (fotodegradação da CUR) e atividade fotodinâmica (fotodegração de reagente e scavenger de oxigênio singleto). Em seguida, os efeitos da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) mediada pela CUR-NP contra culturas planctônicas e biofilme misto cultivado in vitro por 48 horas, foram avaliados por meio de quantificação de colônias (UFC/mL). Cada avaliação foi realizada em triplicata em três ocasiões distintas e comparada com CUR livre. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística descritiva e inferencial (α=0,05). Após a síntese as CUR-NP apresentaram propriedades nanomêtricas farmacotécnicas adequadas, com valores médios de tamanho, polidispersão e potencial zeta 237,9; 0,08 e -35,2 mV; 239; 0,20 e +32 mV respectivamente para as CUR-NP aniônica e catiônica. Foi observada uma eficiência de encapsulamento de 67 e 64,6 % para as... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In vivo studies have used a computerized microtomography (Micro CT) to assess a quality and amount of tissue present in the development of induced periodontal disease. However, have not yet studied which are the most reliable standards established for the proper use of the Micro CT technique. The objective of this study was to evaluate the generation of artifacts during biopsy scanning, as well as the analysis of different parameters defined in an area and bone volume measurement in an experimental model of periodontal disease induced in rats. To analyze the different detection parameters of microcomputers with selected animals and submitted to insertion of ligatures in the subgingival region of the upper second molars. After the 7-day period the animals were used as bone biopsies scanned using resolutions of 9 μm and 18 μm, with different filters: aluminum (0.2 mm, 0.5 mm and 1 mm) and copper + aluminum (Cu 0 04 mm + 0.5 mm). Subsequently, two regions of interest (ROI's) were defined around the second molars, in the way the bone tissue was analyzed. After determining the area of interest, the amount of bone tissue was evaluated and quantified using the CTAn software, from 5 threshold values: 255-75, 255-80, 255-85, 255-70, 255-65. When different thresholds were analyzed within the same filter, only the 0.2 mm Al filter presented statistical difference for all comparisons (9 μm and 18 μm). Already when the different filters with the same threshold were compared, it is only one comparison Al 0.2 mm x Cu + Al presented statistical difference for all comparisons, except for comparisons between Al 0.1 mm x 0.2 mm (threshold 255 - 65 with resolution of 18 μm). It was concluded that advances and standardization in microtomographic analysis to evaluate bone loss in induced periodontal disease should be performed with the objective of greater...(Complete abstracelectronic access below) / Mestre

Orientador: Iguatemy Lourenço Brunetti / Coorientador: Ana Cláudia Pavarina / Banca: Livia Nordi Dovigo / Banca: Cristina Kurachi / Resumo: Nos últimos anos o aumento na incidência da candidose superficial ou invasiva causada por espécies emergentes e resistentes aos medicamentos tem sido atribuído a disseminação do uso de antibióticos e/ou agentes imunossupressores. A candidose é considerada uma doença oportunista de alta incidência em pacientes que utilizam medicamentos imunossupressores após transplante de órgãos, antibióticos de amplo espectro, terapias antineoplásicas e nos que possuem imunossupressão relacionada à síndrome da imunodeficiência adquirida. A Terapia Fotodinâmica (Photodynamic Therapy ou PDT) utiliza a combinação de luz (visível) e um composto fotossensível. A maior aplicação da PDT ocorre no tratamento de câncer, entretanto, a técnica está difundindo-se para o tratamento de outras doenças como infecções microbianas. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da PDT mediada pela Curcumina, na ausência e na presença do surfactante brometo de cetiltrimetilamônio (CTAB), com uma fonte de luz do tipo LED, sobre suspensões planctônicas de isolados clínicos das espécies C. albicans e C. glabrata fluconazol-resistentes, bem como de cepas ATCC. Após a PDT, foram obtidas diluições seriadas de cada amostra e alíquotas foram plaqueadas para a contagem das células viáveis (ufc/mL). O metabolismo celular para todas as condições experimentais também foi avaliado por meio do ensaio de redução do 2,3-bis[2-methoxy-4-nitro-5-sulphophenyl]2H-tetrazolium-carboxanilida (XTT). Também foi avaliada a capacidade de adesão/formação de biofilme dessas cepas após a PDT. Para isso, amostras obtidas da fase de adesão e da fase madura dos biofilmes foram monitoradas pela contagem de células viáveis (ufc/mL). Os resultados permitem observar que a utilização da PDT com curcumina em micelas de CTAB em suspensões planctônicas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In recent years the increase in the incidence of superficial or invasive candidiasis caused by species emerging drug-resistant and has been attributed to widespread use of antibiotics and/or immunosuppressive agents. Candidiasis is considered an opportunistic disease of high incidence in patients taking immunosuppressive drugs after organ transplantation, broad-spectrum antibiotics, anticancer therapies and who has immunosuppression related to acquired immunedeficiency syndrome. Photodynamic Therapy (PDT) uses a combination of (visible) light and a photosensitive compound. The largest application of PDT occurs in the treatment of cancer, however, the technique is diffusing in the treatment of other diseases such microbial infections. The aim of this study was to evaluate the effect of PDT mediated by Curcumin, in the absence and presence of surfactant cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) with a light source type LED on planktonic suspensions of clinical isolates of the species C. albicans and C. glabrata Fluconazole-resistant strains as well as strains ATCC. After PDT, serial dilutions were collected and aliquots of each sample were plated for viable cell count (cfu/ml). Cellular metabolism for all experimental conditions was also assessed by reduction assay of 2,3-bis [2-methoxy-4-nitro-5-sulphophenyl]-2H-tetrazolium carboxanilide (XTT). It was also evaluated the ability of adhesion/biofilm formation of these strains after PDT. For this, samples of the accession and the mature phase biofilms were monitored by viable cell count (cfu/mL). The results allow to observe that the use of PDT with curcumin in CTAB micelles in planktonic suspensions was able to decrease metabolism (XTT) strains of C. albicans and C. glabrata susceptible and resistant to fluconazole, however, the reduction in viable cell count... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Raimundo Souza Lopes / Coorientador: Antonio Claudio Tedesco / Banca: Regina Kiome Takahira / Banca: José Jurandir Fagliari / Banca: Aureo Evangelista Santana / Banca: Adivaldo Henrique da Fonseca / Resumo: A terapia fotodinâmica se apresenta como uma opção clínica promissora para o tratamento de tumores e, de infecções causadas por vírus e bactérias por meio do uso de fotossensibilizadores não tóxicos. A ftalocianina, quando associada à luz visível, possui propriedades fotofísicas vantajosas apresentando alta absorção na faixa de espectro luminoso vermelho. A borreliose aviária é uma doença aguda e septicêmica, causada pela bactéria Borrelia anserina, transmitida pelo carrapato Argas miniatus, podendo levar a morte. A enfermidade possui grande importância econômica para a avicultura, por causar alto índice de mortalidade em aves. O estudo teve como objetivo verificar se o soro parasitado com Borrelia anserina, tratado com luz visível associada à ftalocianina de cloro-alumínio, quando inoculado in vivo, é capaz de provocar a enfermidade, e quando in vitro, mantém sua capacidade de crescimento em meio Barbour-Stoenner-Kelly. Foram utilizados 11 frangos doadores de soro parasitado e 42 galinhas receptoras, separadas em sete grupos experimentais, in vivo e in vitro, para ambas as etapas. Grupo controle, grupo doença parasitado com B. anserina, grupo Imunossupressão, grupo luz visível, grupo nanoemulsão, grupo ftalocianina e grupo tratado realizado com luz visível associada à emulsão de ftalocianina de cloro-alumínio. O acompanhamento foi realizado a cada cinco dias, durante 45 dias após a inoculação, com realização de exame clínico, espiroquetemia, reação em cadeia da polimerase quantitativa, dosagem de Imunoglobulina Y, colesterol, triglicerídeos, fosfatase alcalina, alanina aminotransferase e aspartato aminotransferase, volume globular e proteína plasmática total. Foi possível concluir que a associação de luz visível e ftalocianina de cloro-alumínio tem efeito favorável no controle da enfermidade, redução da carga parasitária e taxa de mortalidade / Abstract: Photodynamic therapy is presented as a promising clinical option for the treatment of tumors, viruses and bacteria through the use of nontoxic photosensitizers. When the phthalocyanine is combined with visible light, have advantageous on the photophysical properties presenting high absorption in the red light spectrum range. Avian Spirochetosis is an acute and septicemic disease, caused by the bacterium Borrelia anserina, transmitted by Argas miniatus and can lead to death. The disease has great economic importance to the poultry industry, because this causes a high mortality in aviculture. The study had as objective to determine the serum infested with Borrelia anserina, treated using visible light associated with chloro-aluminum phthalocyanine, when inoculated in vivo, is capable of causing illness, and when in vitro, retains its capacity for growth amid Barbour-Stoenner-Kelly. Were used 11 chicken serum donors parasitized and 42 receiving chickens, in seven separate experimental groups, in vivo and in vitro for both steps. Control group, parasitized disease group B. anserina, immunosuppression group, light group visible, nanoemulsion group, phthalocyanine group and treated group conducted with visible light associated with emulsion chloro-aluminum phthalocyanine. Follow-up was conducted every five days, for 45 days after inoculation with conducting clinical examination, spirochetemia, quantitative polymerase chain reaction, Immunoglobulin Y dosage, cholesterol, triglycerides, alkaline phosphatase, alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase, Globular volume and plasma total protein. It was concluded that visible light association and chloro-aluminum phthalocyanine has a favorable effect on the control of the disease, reduction in parasite burden and mortality rate / Doutor

Orientador: Ana Gabriela Sálvio / Coorientador: Natália Myumi Inada / Banca: Luciana Patrícia Fernandes Abbade / Banca: Cristia Kurachi / Resumo: O câncer de pele é o tipo mais frequente de câncer no Brasil, correspondendo a 25% de todos os cânceres registrados no País. Queratoses actínicas (QAs) são lesões pré-malignas comuns, com uma incidência estimada em 60% dos pacientes com idade acima de 60 anos, as QAs podem evoluir para carcinoma espinocelular (CEC) que é um tipo de câncer de pele não melanoma agressivo, podendo ser responsável por 34% das mortes por câncer de pele em todo mundo. A terapia fotodinâmica (TFD) em QAs com o ácido 5- aminolevulínico (ALA) ou aminolevulinato de metila (Metil-ALA) é uma opção de tratamento aceita para esta doença, devido à sua eficácia e excelentes resultados estéticos. O objetivo deste trabalho foi Avaliar e comparar a dor referida pelos pacientes, durante o tratamento de TFD utilizando o medicamento ALA e Metil-ALA a15%. Foram selecionados 40 pacientes com QAs em membros superiores, e realizado a divisão de dois grupos de 20 pacientes, grupo I administrado o medicamento ALA e no grupo II administrado Metil-ALA, em seguida os membros foram ocluídos permanecendo por 3 horas, após o curativo foi removido e realizado a iluminação da área por 40 minutos, com fluência de 36 Jzcm", no protótipo Kerato PDT a base de emissores de LED. Durante a iluminação e a cada 5 minuto foi aplicada uma escala visual numérica (EVN) para mensurar a dor referida. As lesões foram quantificadas e fotografadas antes e 30 dias após o tratamento. Os valores obtidos foram submetidos a análise estatística pelo teste t de Student, teste t pareado, teste de Friedman e teste de Tukey. Os resultados mostraram que não houve diferença estatisticamente significativa entre os dois grupos, e que ambos os medicamentos utilizados mostraram-se eficazes no tratamento de QAs. Comparando a dor referida pelos pacientes durante o tratamento, não houve diferença estatística entre o sexo feminino e o masculino, e nem entre os dois grupos, porém para o ... / Abstract: Skin cancer is the most common type of cancer in Brazil, accounting for 25 % of all cancers registered in actinic keratoses country (AKs) are common precancerous lesions , with an estimated 60% of patients over the age incidence 60 years, AKs can progress to squamous cell carcinoma (SCC ) is a type of aggressive skin cancer melanoma, may be responsible for 34 % of deaths from skin cancer in the world. Photodynamic therapy (PDT) for AK with 5 - aminolevulinic acid ( ALA ) or methyl aminolevulinate ( Methyl- ALA ) is an accepted treatment option for this disease , due to its effectiveness and excellent cosmetic results . The aim of this study was to evaluate and compare the pain reported by the patients during the treatment of PDT using the medicine Methyl- ALA and ALA a15 %. AK 40 patients were selected for the upper limbs, the division performed and two groups of 20 patients, the drug administered group I and group II ALA administered -ALA methyl , then the remaining members were occluded for 3 hours, after curative was removed and held the lighting in the area for 40 minutes with a fluence of 36 J / em 2 , the prototype Kerato PDT -based LED emitters . During the lighting and every 5 minutes a numerical visual scale (NVS) was applied to measure referred pain . The lesions were imaged and quantified before and 30 days after treatment. Data were statistically analyzed by Student's paired t-test, Friedman test and Tukey 's t testo The results showed no statistically significant difference between the two groups, and that both drugs used were effective in the treatment of AKs . Comparing the pain reported by the patients during treatment , there was no statistical difference between the female and the male , nor between the two groups, although for males the pain scale was statistically higher when used Methyl- ALA . We conclude that both drugs may be indicated for the treatment of AKs scattered in the upper limb, and more studies focused ... / Mestre

Orientador: João Eduardo Gomes Filho / Banca: Luciano Tavares Angelo Cintra / Banca: Eloi Dezan Júnior / Banca: Mário Tanomaru Filho / Banca: Marco Antonio Húngaro Duarte / Resumo: Introdução: A terapia fotodinâmica (TFD) se baseia em um conjunto de processos biológicos, físicos e químicos que ocorre por meio da ativação de um fotossensibilizador (FS) com luz (laser ou LED) para destruir as células alvo. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a resposta tecidual da TFD incluindo a produção de citocinas (IL - 1β e IL - 6). Métodos: 1) Para o teste de citotoxicidade os grupos foram divididos em: hipoclorito de sódio 5%; hipoclorito de sódio 2,5%; clorexidina 2%; solução salina; TFD (curcumina + luz Led azul); e controle (meio de cultura). As soluções foram diluídas em meio de cultura DMEM (1x104 células) e colocadas em placas de 24 poços, com linhagem de fibroblastos de camundongos (L-929). Depois de 6, 24 e 48 horas, o ensaio de MTT foi utilizado para avaliar a viabilidade celular e o ensaio de ELISA foi utilizado para avaliação de citocinas no sobrenadante. 2) Para o teste de resposta tecidual, os grupos foram divididos em: controle (solução salina); hipoclorito de sódio 2,5%; hipoclorito de sódio 5%; clorexidina 2%; TFD (curcumina + luz Led Azul). As soluções foram colocadas em tubos de polietileno e foram implantadas no tecido conjuntivo dorsal de ratos Wistar por 7, 15, 30, 60, e 90 dias. Os tubos com tecido circundante foram removidos e divididos ao meio e uma das metades foi corada com hematoxilina e eosina e a outra metade utilizada para avaliação das citocinas por ELISA. A análise estatística foi realizada utilizando ANOVA, Kruskal Wallis ou teste de Tukey (p < 0,05). Resultados: Quanto ao estudo in vitro, a TFD e a solução salina apresentaram baixa citotoxicidade semelhante ao do grupo controle (p> 0,05), menor que o hipoclorito de sódio (2,5% e 5%) e a clorexidina 2% (p < 0,05) em todos os períodos de tempo. Todas as soluções liberaram citocinas em quantidade similar... / Abstract: Introduction: Photodynamic therapy (PDT) is based on a set of biological, physical and chemical processes that occurs through the activation of a photosensitizer (PS) with light (laser or LED) to destroy target cells. The aim of this study was to evaluate the cytotoxicity and tissue response of PDT including the production of cytokines (IL - 1β and IL - 6). Methods: 1) For the cytotoxicity test groups were divided into: 5% sodium hypochlorite; 2.5% sodium hypochlorite; 2% chlorhexidine; saline; PDT (curcumin + Led blue light); and control (culture medium). The solutions were diluted in DMEM culture medium (1x104 cells) and placed in 24 -well plates with mouse fibroblast line (L929). After 6, 24 and 48 hours, the MTT assay was used to assess cell viability and ELISA assay was used to assess cytokine in the supernatant. 2) To test the tissue response, the groups were divided into: control (saline); 2.5%; sodium hypochlorite, 5% sodium hypochlorite; 2% chlorhexidine; TFD (curcumin + Led blue light). The solutions were placed into polyethylene tubes and implanted in the dorsal tissue of Wistar rats for 7, 15, 30, 60, and 90 days. The tubes were removed with surrounding tissue and divided in half and one half was stained with hematoxylin and eosin and the other half used to assess cytokine by ELISA. Statistical analysis was performed using ANOVA, Kruskal Wallis or Tukey test (p < 0.05). Results: For the in vitro study, PDT and saline showed low cytotoxicity similar to the control group (p > 0.05) , less than sodium hypochlorite (2.5% and 5%) and 2% chlorhexidine (p < 0.05) at all time periods. All solutions released cytokines similar to control (p > 0.05) amount. As for the in vivo study, all solutions caused severe inflammatory reaction after 7 days, which decreased with time. No inflammation was observed at 90 days in the PDT group similar to the control (p > 0.05) . All materials... / Doutor

A desinfecÃÃo ou esterilizaÃÃo de dispositivos de resina acrÃlica, como prÃteses imediatas, guias e goteiras cirÃrgicas, à importante na prevenÃÃo da contaminaÃÃo do paciente por micro-organismos potencialmente patogÃnicos. As resinas acrÃlicas sÃo materiais termossensÃveis, podendo somente ser descontaminadas por meios quÃmicos ou frios. Esta dissertaÃÃo teve como objetivos fazer uma revisÃo de literatura sistemÃtica sobre a aÃÃo antimicrobiana de agentes quÃmicos em resinas acrÃlicas, alÃm de realizar um estudo experimental avaliando o efeito da terapia fotodinÃmica, mediada pelo fotossensibilizador azul de metileno a 22 &#956;M, sobre o nÃvel de contaminaÃÃo por micro-organismos presentes em prÃteses totais advindas de diferentes laboratÃrios protÃticos, bem como um novo equipamento composto por diodos emissores de luz (LEDs) de 630 nm e 1W. Para a revisÃo de literatura foram utilizados os descritores ÂÂmicroorganismsÂÂ, ÂÂdental prosthesisÂÂ, e/ou ÂÂdisinfection nas bases de dados Pubmed/ Bireme, com busca no perÃodo de 2004 a 2014, incluindo artigos em inglÃs referentes a pesquisas experimentais, comparando-se agentes quÃmicos sobre mais de uma espÃcie de micro-organismo, na superfÃcie de resinas acrÃlicas. Foi verificado que os mÃtodos apresentaram variaÃÃes nos efeitos antimicrobianos, dependendo do tempo de imersÃo, concentraÃÃo do produto e a espÃcie de micro-organismo presente. O hipoclorito de sÃdio 1%, o digluconato de clorexidina 2% e o Ãcido acÃtico apresentaram maior eficÃcia, em ordem decrescente. No estudo experimental, foram selecionadas 25 prÃteses totais superiores precedendo a instalaÃÃo nos pacientes. Em seguida, as mesmas foram aleatoriamente distribuÃdas por sorteio em quatro grupos: sem tratamento; imersÃo em digluconato de clorexidina 2% por 10 minutos; apenas irradiaÃÃo com LEDs; terapia fotodinÃmica (TFD). O circuito de controle e acionamento do equipamento composto por 8 LEDs de 1W foi desenvolvido em parceria com o LaboratÃrio de Engenharia de Sistema de ComputaÃÃo, na Faculdade de Engenharia de TeleinformÃtica da Universidade Federal do CearÃ. No grupo TFD, a irradiaÃÃo por 1 minuto ocorreu depois de 5 minutos da aplicaÃÃo do fotossensibilizador. ApÃs os tratamentos realizados, as prÃteses foram imersas em 100 ml de BHI caldo e levadas à cuba ultrasÃnica por 15 minutos. Foram coletados 5 ml deste meio de cultura para incubaÃÃo por 48 horas a 37ÂC. Em seguida, 1000 microlitros do caldo foram diluÃdos em 1:10, 1:100, 1:1000 e plaqueados em triplicada, em Ãgar Sangue, Ãgar Sabouraud Dextrose, e Hicrome UTI ÃgarÂ. As placas foram incubadas a 37ÂC por 48 horas, para posterior contagem de unidades formadoras de colÃnia (UFC/ml) e classificaÃÃo dos dados em escala ordinal. Testes de Kruskall-Wallis, Dunn, ANOVA (2 critÃrios) e Bonferroni (&#945;=0,05) foram aplicados. A TFD mostrou reduÃÃo significativa na contagem de bactÃrias totais viÃveis (p=0,0002), quando comparada ao grupo somente irradiado, e reduÃÃo significativa de fungos totais viÃveis, quando comparada aos grupos sem tratamento e somente irradiado (p=0,0002). A TFD teve efeito antimicrobiano semelhante à imersÃo em digluconato de clorexidina 2% por 10 minutos (p>0,05). As espÃcies bacterianas identificadas mais prevalentes nas prÃteses foram P. aeruginosa, K. pneumoniae e E. coli e a TFD promoveu diminuiÃÃo significativa na contagem destas espÃcies, assim como a clorexidina (p<0,001). A contaminaÃÃo de prÃteses dentÃrias advindas de laboratÃrios protÃticos foi expressiva. A terapia fotodinÃmica empregada no protocolo proposto para dispositivos de resina acrÃlica mostrou efeito antimicrobiano promissor mediante esta contaminaÃÃo. / Disinfection or sterilization of acrylic resin devices, such as immediate prostheses, surgical guides and gutters, is important in preventing the patient from contamination by potentially pathogenic microorganisms. Acrylic resins are heat-sensitive materials, which can only be decontaminated by chemicals or cold means. This study aimed at making a systematic review of literature on the antimicrobial action of chemical agents on acrylic resins. In addition, it was carried out an experimental study evaluating the effect of photodynamic therapy, mediated by methylene blue photosensitizer to 22 &#956;M, on the level of contamination by microorganisms present in dentures coming from different laboratories, and a new device consisting of light emitting diodes (LEDs) 630 nm and 1W. For the literature review, we used the descriptors microorganisms, dental prosthesis, and/or disinfection in Pubmed/ Bireme databases with search from 2004 to 2014, including articles in English on experimental studies comparing chemical agents on more than one species of microorganism in the surface of acrylic resin. It was found that methods show differences in antimicrobial effects depending on the immersion time, product concentration and type of present microorganism. Sodium hypochlorite 1%, chlorhexidine digluconate 2% and acetic acid showed greater efficacy, in decreasing order. In the experimental study, a number of 25 upper dentures were selected and installed in patients. Then, the dentures were randomly distributed into four groups: untreated; immersion in 2% chlorhexidine digluconate for 10 minutes; only irradiation with LEDs; photodynamic therapy (PDT). The control circuit and activation of equipment consisting of 8 LEDs 1W was developed in partnership with the Computer System Engineering Laboratory at the Faculty of Computer Engineering at the Federal University of CearÃ. On the PDT group, irradiation for 1 minute took place 5 minutes after application of the photosensitizer. After the treatment, the prostheses were immersed in 100 ml of BHI broth and then brought to ultrasonic tank for 15 minutes. It was collected 5 ml of this culture for incubation for 48 hours at 37  C. After that, 1000 microliter of the broth were diluted 1:10, 1: 100, 1: 1000 and plated in triplicate, on Blood Agar, Sabouraud Dextrose Agar and HiCrome UTI ÃgarÂ. The plates were incubated at 37ÂC for 48 h and then counting colony forming units (CFU / ml) and classification of data on an ordinal scale. Kruskal-Wallis test, Dunn, ANOVA (2 criteria) and Bonferroni (&#945; = 0.05) were applied. PDT showed significant reduction in count of total viable bacteria (p = 0.0002) compared to only irradiated group, and a significant reduction of total viable fungi, when compared to the only irradiated groups and untreated (p = 0.0002). PDT showed antimicrobial effect similar to immersion in 2% chlorhexidine digluconate for 10 minutes (p> 0.05). The most prevalent bacterial species identified in the prostheses were P. aeruginosa, K. pneumoniae and E. coli and PDT caused a significant decrease in counting of these species as well as chlorhexidine did (p <0.001). The contamination of dental prostheses coming from prosthetic laboratories was significant. Photodynamic therapy used in the proposed protocol for acrylic resin devices showed promising antimicrobial effect by this contamination.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-08-12T11:59:46Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE BIBLIOTECA - VERSÃO FINAL (1).pdf: 2862588 bytes, checksum: 3d785691cce449a94e01f2c63a25153f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-12T11:59:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE BIBLIOTECA - VERSÃO FINAL (1).pdf: 2862588 bytes, checksum: 3d785691cce449a94e01f2c63a25153f (MD5) Previous issue date: 2015-03-16 / FACEPE / Nas três últimas décadas nanocristais de materiais semicondutores em regime de confinamento quântico - pontos quânticos (do inglês quantum dots) - vem atraindo o interesse em diversas áreas científicas. Suas propriedades ópticas e elétricas únicas possibilitam ampla aplicação em novas tecnologias tais como dispositivos eletrônicos e em novos protocolos diagnósticos biomédicos. Na área da saúde os pontos quânticos (PQs) vêm ganhando destaque em diagnóstico por imagem nas duas últimas décadas, mas recentemente vem sendo testados também em ensaios de terapia fotodinâmica (TFD) livres ou associados a outros compostos. Neste trabalho utilizamos PQs de CdTe como fotosensibilizadores (FS) em culturas de células de Candida albicans, Staphylococcus aureus e Leishmania amazonensis, comparando o efeito fotodinâmico dos sistemas livres e conjugados à zincoporfirina catiônica [Zn(II)tetraetil-2-piridilporfirina, aqui designada ZnP]. Os PQs de CdTe foram sintetizados através de precipitação em sistema coloidal aquoso na presença de dois diferentes agentes estabilizantes (acido mercaptosuccínico-MSA, ou cisteamina-CYS) sendo caracterizados por difração de raios-X e microscopia eletrônica de transmissão. Todos os sistemas foram caracterizados opticamente por espectroscopia de absorção, emissão e excitação eletrônica. A análise espectroscópica mostra que ocorre supressão da fluorescência dos PQs após adição de quantidades crescentes de ZnP, mas não confirma transferência de energia efetiva dos PQs para a ZnP. O potencial zeta dos bioconjugados foi determinado em função da razão PQ:ZnP. A produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) por PQs, porfirinas e PQ-ZnP foi avaliada através de técnicas de detecção indireta, que indicou que todos os sistemas estudados produzem EROs. A citotoxicidade dos sistemas foi testada via ensaio fotodinâmico em fibroblastos e tanto os PQs quanto a ZnP não apresentaram toxicidade no escuro, mas apresentaram boa atividade fotodinâmica após irradiação, o que foi potencializado quando utilizou-se o conjugado PQ-ZnP. Os ensaios de TFD utilizando-se LED (150 mW.cm-2) (excitando somente PQs) mostraram que os PQs produziram uma inibição da C. albicans ~1 log10; ZnP reduziu ~ 3 log10 enquanto que o conjugado reduziu apenas ~ 1 log10. Sugere-se que a menor eficiência de TFD apresentada para os PQs e para os conjugados deve-se à dificuldade de incorporação dos sistemas nas células de C. albicans devido à baixa taxa de endocitose destas células e que os PQs não foram eficientes FS para a ZnP. Os ensaios de TFD para S. aureus evidenciaram ~8 log10 de inibição bacteriana (30s de irradiação) utilizando-se a ZnP, enquanto que observou-se ~2 log10 para os PQs (9 min de irradiação). Na TFD de L. amazonensis, a redução de viabilidade celular deste parasito foi de ~ 35% para os PQs e de ~ 70% utilizando-se ZnP. Os resultados evidenciam que existe um potencial para uso do PQs em TFD, entretanto a eficiência de geração de ROS precisa ser otimizada. Por outro lado, a ZnP apresentou-se bastante promissora para uso em TFD antimicrobiana. / In the last decade semiconductor nanocrystals in the quantum confinement region (also known as quantum dots) have attracted great interest in different research areas. Their unique optical and electrical properties promoted a vast use in most diverse technological fields, ranging from electronics to biomedical applications. In health sciences quantum dots (QDs) applied as fluorescent labels showed a great potential in the development of image diagnostics, but more recently they are also being tested as photosensitizers (PS) in Photodinamyc Therapy (PDT) free or conjugated to diverse molecules. In the present study we used CdTe QDs as PS for PDT upon cultures of Candida albicans, Staphylococcus aureus and Leishmania amazonensis, comparing the photodynamic effect in the free systems and the QDs conjugated to a cationic zincporphyrin [Zn(II)tetraetil-2-piridilporfirina, ZnP]. CdTe QDs were obtained by controlled precipitation in aqueous media in the presence of two different stabilizers (mercaptosuccinic acid – MSA; cysteamine – CYS) and characterized by X-ray diffractommetry and transmission electronic microscopy. The optical characterization of all the systems was performed by absorption, excitation and emission spectroscopy. The zeta potential of the bioconjugates was determined as a function of the QD:ZnP ratio. The spectroscopic analysis suggest that the expected energy transfer from the QDs to the ZnP is not effective, although a fluorescence quenching of the QDs is observed with increasing amounts of ZnP. The production of reactive oxygen species (ROS) induced by QDs, porphyrines and the conjugates was evaluated by indirect detection protocols. All the systems produced ROS but at different levels. The citotoxicity of the systems was tested under PDT irradiation in a fibroblast culture and none of the systems presented dark toxicity, but presented good photodinamyc activity after irradiation which was increased in the QDs-ZnP conjugates. The TFD assays on C. albicans using LED (150 mW.cm-2) (exciting QDs only) showed that the QDs induced a cell inhibition of 1 log10 while ~ 3 log10 for ZnP porphyrin and < 1log10 for the conjugate. We suggest that the less effective PDT action of the QDs and their conjugates on the C. albicans reflect the lower capacity of the cellular uptake of these systems by the cells and that QDs did not act as efficient PS for the ZnP molecules. The essays performed on S. aureus cells showed ~8 log10 of bacterial inhibition using ZnP (30s irradiation) while ~2 log10 for the QDs (9 min irradiation). L. amazonensis essays showed a cell inhibition of 35% for the QDs while 70% for ZnP. Under the conditions tested, the QD-ZnP conjugates did not present a good photodynamic inactivation on the tested cells. The overall results evidence that there is a potential application of the QDs as PS in PDT but the experimental conditions of the therapy and of the systems must increase their efficiency in ROS production. On the other hand, the ZnP alone demonstrated to be very efficient in microbicide PDT.