Submitted by Alexandre Sousa (alexandre.sousa@incqs.fiocruz.br) on 2014-10-21T17:51:39Z No. of bitstreams: 1 Dissertação PatríciaCondéde Lima.pdf: 2501003 bytes, checksum: ae9bd16a44582c654071a25e36e5497e (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-21T17:51:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação PatríciaCondéde Lima.pdf: 2501003 bytes, checksum: ae9bd16a44582c654071a25e36e5497e (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Química. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Oscomprimidosutilizadosno tratamento da tuberculose possuem quatro fármacos associados, Isoniazida(INH), Pirazinamida(PYA), Etambutol(EMB) e Rifampicina(RMP) e são distribuídos gratuitamente pelo Sistema Único de Saúde. Até o momento, os métodos analíticos oficiais para a análise dos teores dos fármacos presentes neste medicamento de dose fixa combinada são aqueles especificados na Farmacopeia Americana 36ª edição e na Farmacopeia Internacional 4ª edição. Porém, nenhum destes compêndios oficiais possui monografias para análise simultânea dos quatro fármacos. O desenvolvimento de métodos analíticos adequados para determinar simultaneamente as concentrações dos quatro fármacos em comprimidos dose fixa combinada é de grande importância para o controle da qualidade do medicamento em questão. O objetivo deste estudo foi desenvolver um método analítico para determinar simultaneamente todos os princípios ativos do comprimido para o tratamento da tuberculose por cromatografia a líquido de alta eficiência com detector de ultravioleta-visível. O método desenvolvido utilizou uma coluna cromatográfica com fase estacionária octadecilsila no, 250mm de comprimento, 4,6mm de diâmetro e5 μm de tamanho de partícula e fase móvel constituída de uma fase aquosa(85% tampão formiato de amônio 0,3 mol/L pH 5, 15%metanol e 0,005 mol/L de Cu2+ou 250 mg/L de CuSO4.5H2O) e fase orgânica(metanol, 0,1% de trietilamina e 0,2% de ácido fórmico). O fluxo empregado foi de 1,0 mL/min e comprimento de onda265 nm, quando o software do equipamento permitiu, para a INH, PYA e o EMB um comprimento de onda de 265 e de 335 nm para a RMP. Este estudo demonstrou que o método desenvolvido apresentou linearidade entre 0,05 a 0,10 mg/mL para INH, 0,27 a 0,52 mg/mL para PYA, 0,19 a 0,36 mg/mL para EMB e 0,05 a 0,1 mg/mL para RMPe mostrou-se satisfatório quanto ao parâmetro de precisão, com desvio padrão relativo inferior a 2,0% para os quatro fármacos estudados. / Tablets used to treat tuberculosis contain four drugs, isoniazid (INH), pyrazinamide (PYA), ethambutol (EMB) and rifampicin (RMP) and are freely distributed by the National Health System. So far, the official analytical methods for testing the amount of the ingredients present in the fixed-dose combination tablet are those described in the 36th editionof U.S. Pharmacopeia and in the 4th editionof International Pharmacopoeia. However, none of these official compendium present monographs for the simultaneous analysis of the four drugs. The development of suitable analytical methods for simultaneously determining the concentrations of the four drugs in fixed-dose combination tablets is of great importance to the quality control of the medicinal product concerned. The aim of this study was to develop an analytical method to simultaneously determine all the active ingredients of the tablet for tuberculosis treatment by high-performance liquid chromatography with ultraviolet-visible detector. The developed method used a chromatographic column with octadecylsilane stationary phase, with 250mm length, 4,6mm diameter and 5 μm particle size. The mobile phase was aqueous (85% ammonium formate buffer 0,3 mol/LpH 5, 15% methanol and 0,005 mol/Lof Cu2+or250 mg/LCuSO4.5H2O), and the organic phase(methanol, 0,1% triethylamine and 0,2 % formic acid). The used flow was 1,0mL/min, at a wavelength of 265 nm or when the equipment alloweda wavelength of 265 nm for INH, EMB, and PYA and 335nmfor RMP. This study showned that the developed method was linear from 0,05 to 0,10 mg/mL for INH, 0,27 to 0,52 mg/mL for PYA, 0,19 to 0,36 mg/mL for EMB and 0,05 to0,1 mg/mL for RMP and was satisfactory regarding the precision parameter, with relative standard deviation lower than 2,0 % for the four studied drugs.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As leishmanioses são um grupo de doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania spp que afetam 98 países. No Brasil, no ano de 2013, foram relatados 3.253 casos de leishmaniose visceral e 18.226 casos de Leishmaniose Tegumentar Americana. O tratamento de primeira escolha continua sendo realizado com antimoniais pentavalentes, e em casos de insucessos os fármacos de segunda escolha são a pentamidina e a anfotericina B. Tais medicamentos causam intensos efeitos adversos e ultimamente têm surgido cepas resistentes aos mesmos. Em áreas endêmicas têm sido cada vez mais comum o surgimento da co-infecção Leishmania com Mycobacterium tuberculosis. O tratamento para a tuberculose com pirazinamida (PZA) e isoniazida (INZ), controla a leishmaniose. Esses dados sugerem atividade anti-leishmania da PZA e da INZ. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade in vitro da INZ e da PZA e seus compostos derivados (série G e série R, respectivamente) sobre Leishmania (Viannia) braziliensis. As moléculas foram testadas em monocamadas de macrófagos peritoneais de camunongos infectados com L. (V) braziliensis durante 48h. Todas as moléculas testadas inibiram o índice de infecção de forma dose dependente em comparação aos controles. As moléculas da série R foram mais ativas do que a PZA, porém o resultado foi significativo somente para a R02 (p < 0,005). Apenas a molécula R05 (76,64M) foi relativamente tóxica para macrófagos. Os compostos mais ativos foram R02, G01 e G02, cujos índices de seletividade foram 14,31, 19 e 30, respectivamente. A dosagem de nitrito foi feita em sobrenadantes de monocamadas de macrófagos peritoniais infectados e tratados com as substâncias nas concentrações 10 e 100M. A G01 e a G02 estimularam a produção de NO2 nas duas concentrações, entretanto o resultado foi estatisticamente significativo para a G02 em 100M (p < 0,0001), a G05 só estimulou óxido nítrico na maior concentração. Todos os compostos da série R estimularam NO2, contudo, o resultado foi estatisticamente significativo para a R03 e R05 a 100M (p < 0,001). Adicionalmente, foi realizado uma análise preditiva in sílico de parâmetros farmacocinéticos das moléculas mais ativas in vitro, utilizando o software admetSAR. Os dados obtidos mostraram que de forma semelhante às suas moléculas originais a G01, G02 e R02 apresentaram alta capacidade de serem absorvidas pelo trato gastrointestinal, baixo potencial hepatotoxico e carcinogênico. Juntos, esses dados demonstram que essas moléculas são seletivamente tóxicas para o parasito com potencial para serem testadas pela via oral em estudos em modelo experimental de infecção. / Leishmaniasis are a group of diseases caused by protozoan of genus Leishmania spp affecting of 98 countries. In Brazil, in the year 2013 were 3.253 reported cases of visceral leishmaniasis and 18.226 cases of cutaneous leishmaniasis. The first choice of treatment is still performed with pentavalent antimonials and in cases of failures drugs of second line of treatment are pentamidine and anfotericin B. These drugs cause many adverse effects and has lately emerged resistant strains. In endemic areas it has been increasingly common the appearance of co-infection Leishmania and Mycobacterium tuberculosis. The treatment of tuberculosis with pyrazinamid and isoniazid control the leishmaniasis.The aim of this study was evaluate the anti-leishmania activity in vitro of INZ and PZA and yours derivatives compounds (serie G and serie R,respectively) on the Leishmania (Viannia) braziliensis. The molecules were tested on infected monolayers of peritoneal murine macrophages for 48h. All the molecules te inhibited the infection index in a dose-dependent manner in relation to controls. The molecules of the R series were more active than PZA, but the result was only significant for R02 (p < 0,005). Only R05 (CC50 = 76,64M) was relatively toxic to macrophages. The most active compounds were R02, G01 and G02 whose select index were 14,31, 19 and 30, respectively. Nitrite assay was performed in supernatants of infected monolayers of peritonial macrophages treated with the substancies at 10 and 100M. G01 and G02 stimulated NO2 prodution, however, the result was only statistically significant for G02 at 100M (p < 0,001). All the compounds of R serie stimulated NO2 production however the results were statistically significant for the R03 and R05 at 100M (p < 0,001). Additionally, a in silico preditive pharmacokinetic analysis was performed to active molecules using the admetSAR software the data showed that G01, G02 and R02 were similar to their original molecules as to high capacity to be absorbed by the gastrointestinal tract, low hepatotoxic and carcinogenic potencial. Together, these data demonstrate that these molecules are selectively toxic to the parasite with the potencial to be tested orally on studies in experimental infection.

Doutor -- Universidade de Sao Paulo. Faculdade de Saude Publica. Departamento de Epidemiologia, Sao Paulo, 2004.

Orientador: Iguatemy Lourenço Brunetti / Banca: Rosângela Gonçalves Peccinini Machado / Banca: Regina Lúcia de Moraes Moreau / Resumo: Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da administração simultânea de PYR sobre os parâmetros farmacocinéticos da INH e a produção de seus metabólitos, em um grupo de animais sob tratamento com INH+PYR e outro com INH+RMP+PYR, bem como de avaliar o comportamento dos biomarcadores de hepatotoxicidade, as transaminases AST e ALT, nesses grupos. Na primeira fase do protocolo experimental foi coletado sangue da cauda dos animais (ratos Wistar, machos, peso~250g) para análise dos biomarcadores como valores basais, em seguida realizou-se a administração, por gavagem, de doses múltiplas de INH (100mg/Kg) (grupo I), INH+PYR (350mg/Kg) (grupo II), INH+PYR+RMP (100mg/Kg) (grupo III), PYR (grupo IV) e água estéril (grupo V – controle) por 21 dias. Para os animais que receberam INH (grupo I, grupo II e grupo III) construiu-se a curva de sua concentração plasmática x tempo. Amostras seriadas de sangue foram coletadas em 10 tempos diferentes entre 0-24h; para cada tempo de coleta foram empregados 5 ratos. As amostras foram desproteinizadas com ácido tricloroacético a 10%; para análise dos metabólitos acetilados promovendo a hidrólise com HCl 6M; em seguida, a INH e a Hz foram derivatizadas com cinamaldeído. As amostras foram analisadas por HPLC usando coluna Resolve TM C18 e detector UV-VS, operando a 340nm. Os parâmetros farmacocinéticos da INH apresentam diferenças estatisticamente significativas (p<0,05, teste de Tukey) entre os grupos, e sua média e EPM foram: Grupo INH vs Grupo INH+PYR: t1/2 = 1,4 (0,070) vs 1,0 (0,100); K = 0,51 (0,024) vs 0,77 (0,100); t1/2 = 3,4 (0,026) vs 7,2 (0,910); Kel = 0,21 (0,015) vs 0,10 (0,018); ClT/F = 0,68 (0,016) vs 0,90 (0,047); Vd/F = 3,32 (0,19) vs 9,52 (1,52); AUC0-24 ss INH = 146,36 (3,25) vs 111,96 (5,60); AUC0-24 ss Hz = 2,87 (0,07) vs 4,60 (0,09)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the present study was to evaluate the hepatotoxicity effect, pharmacokinetic response and biotransformation of isoniazid of rats treated with i) isoniazid (INH), ii) INH + pyrazinamide (PYR) and iii) INH + PYR + rifampicin (RMP). Daily doses of the tuberculostatic drugs were administrated intragastrically to the animals (Wistar rats) for one period of 21 days as follow: INH (100mg/Kg) (group I), INH (100mg/Kg) + PYR (350mg/Kg) (group II), INH (100mg/Kg) + PYR (350mg/Kg) + RMP (100mg/Kg) (group III), PYR (350mg/Kg) (group IV) and sterile water (group V, control). The serum levels of the biomarkers aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) were determined before the administration of the drugs (basal) and after the 21 days treatments. On day 21, blood samples were obtained before and 0,25; 0,5; 0,75; 1; 1,5; 3; 6; 12 and 24 hours after the dose (five animals for each point). The blood samples were deproteinized with 10% trichloroacetic acid, derivazed by 1% cinnamaldehyde. For the determination of the acetylated metabolites acetylisoniazid (AcINH) and acetylhydrazine (AcHz) a previous hydrolysis with 6 M hydrochloride acid was performed. Then, the samples were centrifuged and the supernatant analyzed by liquid chromatograph. The results are presented as mean and SEM. The pharmacokinetic parameter of the INH and its metabolites AcINH and hydrazine (Hz) were compared between the groups (p < 0.05, Turkey’s test). The results significantly different were: Group INH vs Group INH+PYR: t1/2 = 1,4 (0,070) vs 1,0 (0,100); K = 0,51 (0,024) vs 0,77 (0,100); t1/2 = 3,4 (0,026) vs 7,2 (0,910); Kel = 0,21 (0,015) vs 0,10 (0,018); ClT/F = 0,68 (0,016) vs 0,90 (0,047); Vd/F = 3,32 (0,19) vs 9,52 (1,52); AUC0-24 ss (INH) = 146,36 (3,25) vs 111,96 (5,60); AUC0-24 ss (Hz) = 2,87 (0,07) vs 4,60 (0,09)... (Complete abstract, click electronic address below) / Mestre

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As leishmanioses são um grupo de doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania spp que afetam 98 países. No Brasil, no ano de 2013, foram relatados 3.253 casos de leishmaniose visceral e 18.226 casos de Leishmaniose Tegumentar Americana. O tratamento de primeira escolha continua sendo realizado com antimoniais pentavalentes, e em casos de insucessos os fármacos de segunda escolha são a pentamidina e a anfotericina B. Tais medicamentos causam intensos efeitos adversos e ultimamente têm surgido cepas resistentes aos mesmos. Em áreas endêmicas têm sido cada vez mais comum o surgimento da co-infecção Leishmania com Mycobacterium tuberculosis. O tratamento para a tuberculose com pirazinamida (PZA) e isoniazida (INZ), controla a leishmaniose. Esses dados sugerem atividade anti-leishmania da PZA e da INZ. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade in vitro da INZ e da PZA e seus compostos derivados (série G e série R, respectivamente) sobre Leishmania (Viannia) braziliensis. As moléculas foram testadas em monocamadas de macrófagos peritoneais de camunongos infectados com L. (V) braziliensis durante 48h. Todas as moléculas testadas inibiram o índice de infecção de forma dose dependente em comparação aos controles. As moléculas da série R foram mais ativas do que a PZA, porém o resultado foi significativo somente para a R02 (p < 0,005). Apenas a molécula R05 (76,64M) foi relativamente tóxica para macrófagos. Os compostos mais ativos foram R02, G01 e G02, cujos índices de seletividade foram 14,31, 19 e 30, respectivamente. A dosagem de nitrito foi feita em sobrenadantes de monocamadas de macrófagos peritoniais infectados e tratados com as substâncias nas concentrações 10 e 100M. A G01 e a G02 estimularam a produção de NO2 nas duas concentrações, entretanto o resultado foi estatisticamente significativo para a G02 em 100M (p < 0,0001), a G05 só estimulou óxido nítrico na maior concentração. Todos os compostos da série R estimularam NO2, contudo, o resultado foi estatisticamente significativo para a R03 e R05 a 100M (p < 0,001). Adicionalmente, foi realizado uma análise preditiva in sílico de parâmetros farmacocinéticos das moléculas mais ativas in vitro, utilizando o software admetSAR. Os dados obtidos mostraram que de forma semelhante às suas moléculas originais a G01, G02 e R02 apresentaram alta capacidade de serem absorvidas pelo trato gastrointestinal, baixo potencial hepatotoxico e carcinogênico. Juntos, esses dados demonstram que essas moléculas são seletivamente tóxicas para o parasito com potencial para serem testadas pela via oral em estudos em modelo experimental de infecção. / Leishmaniasis are a group of diseases caused by protozoan of genus Leishmania spp affecting of 98 countries. In Brazil, in the year 2013 were 3.253 reported cases of visceral leishmaniasis and 18.226 cases of cutaneous leishmaniasis. The first choice of treatment is still performed with pentavalent antimonials and in cases of failures drugs of second line of treatment are pentamidine and anfotericin B. These drugs cause many adverse effects and has lately emerged resistant strains. In endemic areas it has been increasingly common the appearance of co-infection Leishmania and Mycobacterium tuberculosis. The treatment of tuberculosis with pyrazinamid and isoniazid control the leishmaniasis.The aim of this study was evaluate the anti-leishmania activity in vitro of INZ and PZA and yours derivatives compounds (serie G and serie R,respectively) on the Leishmania (Viannia) braziliensis. The molecules were tested on infected monolayers of peritoneal murine macrophages for 48h. All the molecules te inhibited the infection index in a dose-dependent manner in relation to controls. The molecules of the R series were more active than PZA, but the result was only significant for R02 (p < 0,005). Only R05 (CC50 = 76,64M) was relatively toxic to macrophages. The most active compounds were R02, G01 and G02 whose select index were 14,31, 19 and 30, respectively. Nitrite assay was performed in supernatants of infected monolayers of peritonial macrophages treated with the substancies at 10 and 100M. G01 and G02 stimulated NO2 prodution, however, the result was only statistically significant for G02 at 100M (p < 0,001). All the compounds of R serie stimulated NO2 production however the results were statistically significant for the R03 and R05 at 100M (p < 0,001). Additionally, a in silico preditive pharmacokinetic analysis was performed to active molecules using the admetSAR software the data showed that G01, G02 and R02 were similar to their original molecules as to high capacity to be absorbed by the gastrointestinal tract, low hepatotoxic and carcinogenic potencial. Together, these data demonstrate that these molecules are selectively toxic to the parasite with the potencial to be tested orally on studies in experimental infection.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:42:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SeverinaDSO_DISSERT.pdf: 2512071 bytes, checksum: 12a15e7529d5b018959d5e9c644f10cf (MD5) Previous issue date: 2013-07-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / In this work a study was done using electrochemical cyclic voltammetry and differential pulse voltammetry for isoniazida (INH), ethambutol (EMB), rifampicina (RIF) and pyrazinamide (PZA) using the electrode boron-doped diamond (BDD) as working electrode. It also verified the applicability of the technique of differential pulse voltammetry in the quantification of the active compounds used in the treatment of tuberculosis, subsequently applying in samples of pharmaceutical formulation. Among the four active compounds studied, isoniazid showed the best results for the detection and quantification using differential pulse voltammetry. At pH 4 and pH 8, for the calibration curves to INH showed good linearity, with quantification limits of 6.15 mmol L-1 (0,844 ppm) and 4.08 mmol L-1 (0.560 ppm) for the respective pH. The proposed method can be used to determine drug isoniazid, for recovery values were obtained in approximately 100% / Neste trabalho foi feito um estudo eletroqu?mico utilizando a voltametria c?clica e voltametria de pulso diferencial para os f?rmacos isoniazida (INH), etambutol (EMB), rifampicina (RIF) e pirazinamida (PZA) usando o eletrodo de diamante dopado com boro (BDD) como eletrodo de trabalho. Foi tamb?m verificado a aplicabilidade da t?cnica de voltametria de pulso diferencial na quantifica??o dos princ?pios ativos usados no tratamento da tuberculose, posteriormente aplicando em amostras de formula??o farmac?utica. Dentre os quatro princ?pios ativos estudados, a isoniazida apresentou os melhores resultados de detec??o e quantifica??o com o uso da voltametria de pulso diferencial. Em pH 4 e pH 8, as curvas de calibra??o para a INH apresentaram boa linearidade, apresentando os limites de quantifica??o de 6,15 &#956;mol L-1 (0,844 ppm) e 4,08 &#956;mol L-1 (0,560 ppm), para os respectivos pH. O m?todo proposto pode ser usado para a determina??o de isoniazida em f?rmacos, pois foram obtidos valores de recupera??o em torno de 100%

Diseña un sistema que detecte al ácido pirazinoico (POA), el cual es producto del metabolismo de la bacteria y principio activo de la droga. Cuando una bacteria es sensible al tratamiento con pirazinamida, produce POA en los cultivos a determinado ratio, sin embargo, aquellas resistentes no producen o producen muy poco. Se logró ensamblar dos sistemas de detección, el Sistema I consistió en acoplar la proteína RpsA y su tmRNA a una nanopartícula magnética de estreptavidina a través del tmRNA biotinilado, mientras que el Sistema II, consistió en acoplar las mismas moléculas a una nanopartícula magnética de cobalto, pero a través de la cola de histidinas de la proteína RpsA. Estos sistemas fueron enfrentados de forma preliminar, a POA comercial. Como resultado se obtuvo que el primer sistema logró detectar hasta cinco picomoles del ácido, sin embargo, estos resultados no lograron ser reproducibles. El segundo sistema logró detectar hasta 750 picomoles del ácido, y se logró reproducir en dos ocasiones. Los sistemas fueron estables y demostraron estar ensamblados correctamente, sin embargo, la variabilidad en los resultados de detección de POA, aquí presentados, estarían indicando que la interacción entre el RpsA y el POA no es tan fuerte como se mencionó en estudios anteriores. El resultado de este trabajo estaría confirmando lo reportado en un último estudio publicado en Nature, el cual refuta la hipótesis de que el ácido pirazinoico se une a RpsA con gran afinidad. / Innóvate Perú / Tesis

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EdilenePL_DISSERT.pdf: 1151865 bytes, checksum: 7a412187753da50d4030404745c567f7 (MD5) Previous issue date: 2010-02-26 / According to the global framework regarding new cases of tuberculosis, Brazil appears at the 18th place. Thus, the Ministry of Health has defined this disease as a priority in the governmental policies. As a consequence, studies concerning treatment and prevention have increased. Fixed-dose combination formulations (FDC) are recognized as beneficial and are recommended by WHO, but they present instability and loss on rifampicin bioavailability. The main purpose of this work was to carry out a pre-formulation study with the schedule 1 tuberculosis treatment drugs: rifampicin, isoniazid, pyrazinamide and ethambutol and pharmaceutical excipients (lactose, cellulose, magnesium stearate and talc), in order to develop an FDC product (150 mg of rifampicin + 75 mg of isoniazid + 400 mg of pyrazinamide + 250 mg of ethambutol). The studies consisted of the determination of particle size and distribution (Ferret s diameter) and shape through optical microscopy, as well as rheological and technological properties (bulk and tapped densities, Hausner Factor, Carr s Index, repose angle and flux rate) and interactions among drugs and drug excipient through thermal analysis (DSC, DTA, TG and your derivate). The results showed that, except isoniazid, the other drugs presented poor rheological properties, determined by the physical characteristics of the particles: small size and rod like particles shape for rifampicin; rectangular shape for pyrazinamide and ethambutol, beyond its low density. The 4 drug mixture also not presented flowability, particularly that one containing drug quantity indicated for the formulation of FDC products. In this mixture, isoniazid, that has the best flowability, was added in a lower concentration. The addition of microcrystalline cellulose, magnesium stearate and talc to the drug mixtures improved flowability properties. In DSC analysis probable interactions among drugs were found, supporting the hypothesis of ethambutol and pyrazinamide catalysis of the rifampicin-isoniazid reaction resulting in 3- formylrifamycin isonicotinyl hydrazone (HYD) as a degradation product. In the mixtures containing lactose Supertab? DSC curves evidenced incompatibility among drugs and excipient. In the DSC curves of mixtures containing cellulose MC101?, magnesium stearate and talc, no alterations were observed comparing to the drug profiles. The TG/DTG of the binary and ternary mixtures curves showed different thermogravimetrics profiles relating that observed to the drug isolated, with the thermal decomposition early supporting the evidences of incompatibilities showed in the DSC and DTA curves / De acordo com o quadro mundial da tuberculose, o Brasil ocupa o 18? lugar em n?mero de casos novos, assim o Minist?rio da Sa?de definiu a doen?a como prioridade entre as Pol?ticas Governamentais de Sa?de. Desde ent?o se intensificaram os estudos relacionados ao tratamento e preven??o desta doen?a. As formula??es em dose fixa combinada (DFC) s?o reconhecidas como ben?ficas e apoiadas pela OMS, mas apresentam problemas de instabilidade e queda na biodisponibilidade da rifampicina. O objetivo principal desse trabalho foi realizar estudo de pr?-formula??o com os f?rmacos que integram o esquema 1 para o tratamento da tuberculose: rifampicina, isoniazida, pirazinamida e etambutol e excipientes farmac?uticos (lactose, celulose, estearato de magn?sio e talco), visando o desenvolvimento de um produto em dose fixa combinada (150 mg de rifampicina + 75 mg de isoniazida + 400 mg de pirazinamida + 250 mg de etambutol). Os estudos consistiram na determina??o do tamanho e distribui??o das part?culas (di?metro de Ferret) e forma por microscopia ?ptica, al?m das propriedades reol?gicas e tecnol?gicas (densidades aparente e de compacta??o, Fator de Hausner, ?ndice de Carr, ?ngulo de repouso e velocidade de escoamento) e das intera??es entre os f?rmacos e f?rmacos-excipientes por an?lise t?rmica (DSC, DTA, TG e sua derivada). Os resultados mostraram que ? exce??o da isoniazida, os demais f?rmacos apresentaram propriedades reol?gicas pobres, determinadas pelas caracter?sticas f?sicas das part?culas: tamanho reduzido e forma de agulhas da rifampicina; forma retangular da pirazinamida e etambutol, al?m da baixa densidade deste ?ltimo. A mistura dos quatro ativos tamb?m n?o apresentou fluxo, especialmente a prepara??o contendo a quantidade de f?rmacos preconizada para a formula??o de produtos em dose fixa combinada, uma vez que nessa mistura, a isoniazida, que possui o melhor fluxo, foi adicionada a uma concentra??o menor. A adi??o de celulose microcristalina, estearato de magn?sio e talco ?s misturas dos f?rmacos, melhorou as propriedades de fluxo. Nas an?lises por DSC foram encontradas prov?veis intera??es entre as subst?ncias ativas, refor?ando a hip?tese de cat?lise por etambutol e pirazinamida para a rea??o entre rifampicina e isoniazida que resulta no produto de degrada??o 3-(isonicotinoilhidrazinometil)rifamicina. Nas curvas de DSC das misturas contendo lactose Supertab? foi evidenciada a ocorr?ncia de incompatibilidade entre os f?rmacos e o excipiente. As curvas de DSC das misturas contendo celulose MC101?, estearato de magn?sio e talco n?o apresentaram altera??es em rela??o ao perfil dos f?rmacos. As curvas de TG/DTG das misturas bin?rias e tern?rias apresentaram perfis termogravim?tricos diferentes em rela??o ao observado para os f?rmacos isoladamente, com in?cio da decomposi??o t?rmica antecipada, dando suporte as evid?ncias de incompatibilidades encontradas nas curvas de DSC e DTA

Submitted by Rosana Moreira (rosanapsm@outlook.com) on 2018-11-20T19:06:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_DeterminacaoConcentracoesSanguineas.pdf: 3006836 bytes, checksum: c3f4dac0526218e987832bc6d8f8f875 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2019-01-31T17:34:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_DeterminacaoConcentracoesSanguineas.pdf: 3006836 bytes, checksum: c3f4dac0526218e987832bc6d8f8f875 (MD5) / Made available in DSpace on 2019-01-31T17:34:36Z (GMT). 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Portanto, este trabalho tem o objetivo de determinar as concentrações sanguíneas de pirazinamida em pacientes com diagnóstico clínico e laboratorial de tuberculose pulmonar, avaliando a influência do sexo e da hiperglicemia nos níveis plasmáticos deste fármaco. Para tanto, foram incluídos 54 pacientes adultos, de ambos os sexos, diagnosticados com tuberculose pulmonar ativa, submetidos ao tratamento de primeira linha, dos quais foram coletadas amostras de sangue antes do tratamento (D0), ao final do primeiro mês (D30) e ao final do segundo mês de tratamento (D60). Foram coletados dados sócio-demográficos dos pacientes através de um questionário. As concentrações de pirazinamida foram determinadas por cromatografia líquida de alta eficiência, com detecção no ultravioleta, e a glicemia, por método espectrofotométrico convencional. Dos pacientes incluídos no estudo, 53% são do sexo masculino e 90% possuem entre 19 e 59 anos de idade. Além disso, 37% completou apenas o ensino fundamental. Foram excluídos 8 pacientes por abandono de tratamento. A concentração plasmática média de pirazinamida em amostras pré-doses foi de 3,4 μg/mL e nas amostras pós-doses foi 72,5 μg/mL. Estes dados indicam a exposição adequada do M. tuberculosis ao fármaco. O sexo dos pacientes não influenciou nas concentrações plasmáticas de pirazinamida, entretanto pacientes hiperglicêmicos apresentaram níveis plasmáticos pós-dose do fármaco significativamente elevados. Estes resultados permitem concluir que as doses empregadas de pirazinamida em pacientes com tuberculose causada por M. tuberculosis asseguraram concentrações sanguíneas terapêuticas efetivas em amostras pós-doses, assim como, as concentrações pré-doses foram condizentes com a farmacocinética do fármaco. Por fim, o sexo não influenciou os níveis pré e pós-doses do fármaco, entretanto, as concentrações pós-dose foram significativamente superior em pacientes com hiperglicemia. / Tuberculosis is an important health problem in Brazil. The first-line treatment regimen adopted by the Ministry of Health for the treatment of the disease consists of rifampicin, isoniazid, pyrazinamide and ethambutol in the intensive phase (02 months), and rifampicin and isoniazid in the maintenance phase (04 months) of the treatment. The determination of the concentrations of these drugs in biological fluids is determinant to confirm the adequate exposure, besides helping to identify the causes of the multiresistance. In Brazil, the concentrations of these drugs have not yet been described in the course of treatment of the disease. Therefore, this study aims to determine the blood concentrations of pyrazinamide in patients with clinical and laboratory diagnosis of pulmonary tuberculosis, evaluating the influence of sex and hyperglycemia on the plasma levels of these drugs. For this, 54 adult patients of both sexes, diagnosed with active pulmonary tuberculosis, submitted to the first line treatment were included in the study, from which blood samples were collected before treatment (D0), at the end of the first month (D30) and at the end of the second month of treatment (D60). Patients' socio-demographic data were collected through a questionnaire. Pyrazinamide concentrations were determined by high performance liquid chromatography with ultraviolet detection and glycemia by conventional spectrophotometric method. Of the patients included in the study, 53% are male and 90% are between 19 and 59 years old. In addition, 37% completed only elementary education. Eight patients were excluded by noncompliance. The mean plasma concentration of pyrazinamide in pre-dose samples was 3.4 μg / mL and in the post-dose samples it was 72.5 μg / mL. These data point to adequate exposure of M. tuberculosis to the drug. Patients' sex did not influence plasma pyrazinamide concentrations. These results allow us to conclude that the doses of pyrazinamide used in tuberculosis patients caused by M. tuberculosis ensure effective therapeutic blood concentrations in post-dose samples, as well as the pre-dose concentrations were consistent with the pharmacokinetics of the drug. Finally, post-dose concentrations were significantly higher in patients with hyperglycemia.

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / Baixas concentraÃÃes sÃricas de drogas antituberculose podem ser causa da resistÃncia de Mycobacterium tuberculosis Ãs drogas utilizadas para tratamento, a qual à mais freqÃente em pacientes em tratamento irregular, mas pode ser verificada em pacientes em tratamento diretamente observado. Os objetivos desse estudo foram avaliar a permeabilidade intestinal e a biodisponibilidade de rifampicina, isoniazida e pirazinamida em pacientes com tuberculose pulmonar ativa. Realizou-se estudo transversal controlado. No perÃodo entre julho de 2004 e dezembro de 2005 foram selecionados 56 pacientes consecutivos com tuberculose pulmonar ativa, atendidos no Centro de SaÃde Carlos Ribeiro em Fortaleza, Cearà e 29 controles sadios recrutados entre profissionais de saÃde, seus familiares e vizinhos para avaliaÃÃo da permeabilidade intestinal. Foram coletadas informaÃÃes sociodemogrÃficas e exames bioquÃmicos e realizou-se o teste de lactulose/manitol de todos. Os primeiros 30 casos de tuberculose e os 29 controles dessa amostra foram selecionados para a avaliaÃÃo da biodisponibilidade sÃrica de rifampicina, isoniazida e pirazinamida em amostras coletadas duas horas e seis horas depois da ingestÃo. A mÃdia de idade dos casos foi de 39,2  15 anos e a dos controles 34  11,0 (p=0,61). Eram do sexo masculino 71 % dos casos e 66% dos controles (p=0,57). O peso mÃdio dos casos (52,4  6,3 kg) foi significativamente menor do que o dos controles (71,1  14,0 kg) (p=0,014). Verificou-se menor excreÃÃo de lactulose entre os casos (mediana de 0,1721%; variando de 0,0-5.0139%) do que entre os controles (0,4301%; variando de 0,0-2,064) (p=0,049%); a excreÃÃo de manitol entre os casos foi 17,9910% (1,9567-71,5446%) e entre controles foi de 24,3899% (1,3883-63,0539%) (p=0,147); a relaÃÃo lactulose/manitol foi de 0,0095 (0,0-0,0759%) entre os casos e 0,0136 (0,0-0,0136%) entre os controles (p=0,018). A concentraÃÃo sÃrica mÃxima de rifampicina teve mÃdia de 1,46  0,72 Âg/ml nos casos e de 6,69  3,07 Âg/ml nos controles (p<0,001); a de isoniazida foi 2,62  1,53 Âg/ml entre os casos e 1,98  0,76 Âg/ml entre os controles (p=0,057) e a de pirazinamda foi de 44,10  10,40 Âg/ml entre os casos e 36,32  12,02 Âg/ml entre os controles (p=0,007). Quatro (13,3%) casos nÃo chegaram a alcanÃar os limites mÃnimos das concentraÃÃes normais esperadas de nenhuma das drogas de primeira linha para o tratamento da tuberculose; 21 (70,0%) alcanÃaram essa concentraÃÃo sÃrica apenas para uma droga (pirazinamida) e cinco (16,7%) apenas para duas drogas (pirazinamida e isoniazida). Nenhum caso alcanÃou as concentraÃÃes sÃricas normais esperadas para as trÃs drogas, simultaneamente. Em conclusÃo, observou-se reduÃÃo da absorÃÃo paracelular entre os pacientes com tuberculose bem como mà absorÃÃo intestinal de rifampicina e isoniazida. Estes resultados sugerem a necessidade da avaliaÃÃo de medidas para reduzir a mà absorÃÃo intestinal de drogas e evitar o retardo ou a impossibilidade de cura da doenÃa, bem como o risco de multirresistÃncia / Reduced antituberculosis drugs concentrations are associated with Mycobacterium tuberculosis resistance, mostly in patients in irregular but also in directly observed treatment. This study aims to evaluate intestinal permeability and bioavailability of rifampin (R), isoniazid (I) and pyrazinamide (P) in patients with active pulmonary tuberculosis. A controlled cross sectional study evaluated intestinal permeability from 56 consecutive active pulmonary tuberculosis (TB) patients who attended Carlos Ribeiro Health Unit in Fortaleza, CearÃ, northeast of Brazil, from July 2004 to December 2005. The Thirty who first came were selected to have R, I and P serum concentration dosed. Twenty nine healthy controls were select among health professionals, their relatives and neighboring. To access intestinal permeability lactulose/manitol (L/M) test was performed by HPLC in urine samples collected during five hours. To access bioavailability two blood samples were collect at 2 and 6 hours after drug ingestion. Demographic information was recorded from all volunteers. Mean age was 39.2  15 years in cases and 34  11.0 in controls (p=0.61); 71.4% cases and 65.5% controls were men (p=0.57). Lactulose urinary excretion was significantly lower in TB patients (median 0.1721%; range 0.0-5.0139) than in controls (median 0.4301%; range 0.2125-2.064) (p=0.0194); median manitol excretion in cases was 17.9910% (1.9567-71.5446) and in controls, 24.39894% (range 1.3883-63.0539) (p=0.147) and the lactulose/manitol ratio was of 0.0095 (range 0.0-0.0759) in cases and 0.0153 (0.0-0.0136) in controls (p=0.0698). Maximum means seric rifampin concentration in cases was1.46  0.72 Âg/ml and in controls, 3.07  6.69Âg/ml (p<0.001); maximum means seric isoniazid concentration was 2.62  1.53 Âg/ml in cases and 0.76  1.98 Âg/ml in controls (p=0.057); maximum means seric pirazinamide concentratio was 44.10  10.40 Âg/ml in cases and 12.02  36.32 Âg/ml in controls (p=0.007). Four cases (13.3%) had all tested drugs serum concentrations under expected normal; 21/30 (70.0%) had expected normal concentrations only for one drug (pyrazinamide) and 5/30 (16.7%) for 2 drugs only (pirazinamide and isoniazid). None of the cases had expected concentration levels for all 3 drugs, simultaneously. In conclusion, there was lesion in the functional intestinal barrier and malabsorption for rifampin and isoniazid in active pulmonary TB patients suggesting it is necessary a deeper evaluation of measures to reduce malabsorption, since only these drugs are used during last the four months of treatment