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Identificação de agonistas e antagonistas de receptores nucleares em extratos de plantas medicinais : morus nigra l., plectranthus ornatus codd., ipomoea cairica (L) sweet e pouteria torta (mart.) radlkFranzotti, Elaine Maria 05 May 2006 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2006. / Submitted by Érika Rayanne Carvalho (carvalho.erika@ymail.com) on 2010-05-13T23:47:22Z
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Previous issue date: 2006-05-05 / A utilização de plantas com fins terapêuticos é uma das mais antigas formas de prática medicinal da humanidade. Produtos naturais, incluindo derivados de plantas, têm contribuído grandemente para o desenvolvimento de modernos fármacos. O Brasil possui uma grande tradição no uso de plantas com fins terapêuticos, com pouca ou nenhuma comprovação de suas propriedades farmacológicas. O principal objetivo dos estudos aqui apresentados foi o de aumentar o conhecimento científico sobre a ação de espécies vegetais de nossa flora utilizadas com finalidade terapêutica. Essas informações pretendem contribuir, não somente para o descobrimento de novos ligantes para receptores nucleares, como também para o descobrimento de novos fármacos que tenham sua ação modulada pelos receptores de estrogênio e de glicocorticóide. As espécies aqui estudadas, Morus nigra, Pouteria torta, Plectranthus ornatus e Ipomoea cairica têm uso comum na medicina popular do Brasil e suas ações ainda não são adequadamente conhecidas em receptores nucleares. Utilizando-se ensaio de gene repórter e transfecção em cultura de células U937, foram pesquisadas as ações de extratos e de substâncias isoladas das espécies já citadas nos receptores de estrogênios (ERa e ERb) e de glicocorticóide (GR). Nas condições experimentais o extrato etanólico de Morus nigra apresentou toxicidade para as células U937; os extratos aquoso e o hexânico não apresentaram ação agonista ou antagonista em ERa e ERb. O extrato hexânico de Pouteria torta apresentou atividade antagonista (não competitiva) em ERb e nenhuma atividade em ERa. O extrato etanólico de Ipomoea cairica apresentou efeito antagonista em ERa e nenhuma ação sobre o ERb. Com relação aos fitoconstituintes de Ipomoea cairica, o glicosídeo de arctigenina, o glicosídeo de traquelogenina, o ácido 4,5-di-O-cafeoilquínico e o ácido 3,5-di-O-cafeoilquínico ativaram a transcrição do ERa. Essa ativação foi menor do que a ativação promovida pelo estradiol. O glicosídeo de traquelogenina e o ácido 4,5-di-O-cafeoilquínico, na presença de estradiol, intensificaram a atividade transcricional do ERb. O extrato hexânico de Plectranthus ornatus aumentou a atividade transcricional do GR com intensidade igual à da dexametasona. Quando adicionados conjuntamente, o extrato hexânico de P. ornatus e dexametasona, a atividade transcricional do GR foi intensificada. Os diterpenos ácido 11R*-acetoxicolavênico, 1a,6b,7b-triacetoxi-8,13R*-epoxi-14-labden-11-ona e 1a,6b,7b-triacetoxi-9-hidroxi-8,13R*-epoxi-14-labden-11-ona, isolados do extrato hexânico de P. ornatus, não tiveram qualquer ação sobre o receptor do GR. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The use of plants for treatment and prevention of diseases is one the oldest medicinal practices. However, for several of these plants, few or none scientific evidence of their pharmacological properties are known. Natural products, including plant derivatives, have contributed to the development of new drugs. The aim of this study is evaluate four species widely used in Brazilian folk medicine, Morus nigra, Pouteria torta, Plectranthus ornatus, and Ipomoea cairica, in relation to their activities on estrogen (ERa and ERb) and glucocorticoid (GR) receptors. In the experimental conditions the ethanol extract of Morus nigra showed to be toxic for the U937 cells, the aqueous and hexane extracts did not present either an agonist or an antagonist action on ERa and ERb. The hexane extract of Pouteria torta presented non-competitive antagonist activity on ERb and no action on ERa. Ipomoea cairica hexane extract showed an antagonist effect on ERa and no action on ERβ. The compounds isolated from Ipomoea cairica, arctigenin glucoside, trachelogenin glucoside, 3,5-di-O-caffeoylquinic acid and 4,5-di-O-caffeoylquinic acid activated the transcription of ERa. This activation was lower than the activation obtained with estradiol. The trachelogenin glucoside and the 4,5-di-O-caffeoylquinic acid, in presence of estradiol, enhanced the ERb transcriptional activity. The hexane extract of Plectranthus ornatus increased the GR transcriptional activity as well as dexametasone. When were togheter, the hexane extract of Plectranthus ornatus and dexametasone, the GR transcriptional activity was enhanced. Diterpenes 11R*-acetoxykolavenic acid, 1a,6b,7b-triacetoxy-8,13R*-epoxy-14-labden-11-one, 1a,6b,7b-triacetoxy-9-hydroxy-8,13R*-epoxy-14-labden-11-one, isolated from the hexane extract of P. ornatus did not showed effects on the GR receptor. The use of plants for treatment and prevention of diseases is one the oldest medicinal practices. However, for several of these plants, few or none scientific evidence of their pharmacological properties are known. Natural products, including plant derivatives, have contributed to the development of new drugs. The aim of this study is evaluate four species widely used in Brazilian folk medicine, Morus nigra, Pouteria torta, Plectranthus ornatus, and Ipomoea cairica, in relation to their activities on estrogen (ERa and ERb) and glucocorticoid (GR) receptors. In the experimental conditions the ethanol extract of Morus nigra showed to be toxic for the U937 cells, the aqueous and hexane extracts did not present either an agonist or an antagonist action on ERa and ERb. The hexane extract of Pouteria torta presented non-competitive antagonist activity on ERb and no action on ERa. Ipomoea cairica hexane extract showed an antagonist effect on ERa and no action on ERβ. The compounds isolated from Ipomoea cairica, arctigenin glucoside, trachelogenin glucoside, 3,5-di-O-caffeoylquinic acid and 4,5-di-O-caffeoylquinic acid activated the transcription of ERa. This activation was lower than the activation obtained with estradiol. The trachelogenin glucoside and the 4,5-di-O-caffeoylquinic acid, in presence of estradiol, enhanced the ERb transcriptional activity. The hexane extract of Plectranthus ornatus increased the GR transcriptional activity as well as dexametasone. When were togheter, the hexane extract of Plectranthus ornatus and dexametasone, the GR transcriptional activity was enhanced. Diterpenes 11R*-acetoxykolavenic acid, 1a,6b,7b-triacetoxy-8,13R*-epoxy-14-labden-11-one, 1a,6b,7b-triacetoxy-9-hydroxy-8,13R*-epoxy-14-labden-11-one, isolated from the hexane extract of P. ornatus did not showed effects on the GR receptor.
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Contribuição ao estudo químico e biológico de Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae)Barros, Ivelone Maria de Carvalho 12 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-03-23T18:36:16Z
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Previous issue date: 2008-12 / A presente dissertação descreve o estudo químico e da atividade biológica de folhas de Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae), espécie frutífera, genuinamente brasileira, comum no bioma Cerrado do Distrito Federal e conhecida popularmente como mangaba. O látex dessa espécie é utilizado na medicina popular para o tratamento de desordens gástricas e tuberculose e as folhas para tratar dismenorréia e diabetes. Dos extratos hexânico e etanólico foram obtidos: mistura de hidrocarbonetos; mistura de álcoois de cadeia longa; obtusalina e eritrodiol; lupeol, α- e β-amirina e seus derivados 3β-acilados; β-sitosterol; rutina e ácido clorogênico. Os extratos e frações de Hancornia speciosa foram submetidos a ensaios para avaliar sua atividade biológica. Em teste de citotoxicidade, utilizando como modelo a toxicidade às larvas de Artemia salina, os extratos brutos e frações não apresentaram toxicidade (DL50>1000 ppm). Na avaliação da atividade alelopática, foi determinada a ação dos extratos brutos sobre a germinação e crescimento das sementes de Lactuca sativa. O extrato hexânico não inibiu a germinação de forma significativa, mas reduziu o índice de velocidade de germinação (IVG) nas concentrações testadas e inibiu o crescimento das partes aéreas (epicótilo) das plântulas e raízes (hipocótilo). O extrato etanólico inibiu a germinação e reduziu o IVG em todas as concentrações avaliadas; não inibiu o crescimento do epicótilo, porém inibiu o crescimento do hipocótilo, nas plântulas. O extrato etanólico foi avaliado quanto à atividade antioxidante através de dois modelos: pelo método de varredura do peróxido de hidrogênio no qual, o extrato etanólico (CE50 = 4.25 μg/mL) apresentou atividade antioxidante cerca de 20 vezes maior que aquela apresentada pelo controle positivo (ácido ascórbico, CE50 = 84,87 μg/mL) e pelo modelo da redução do complexo de fosfomolibdênio, realizado de acordo com a modificação do método de Prieto, (1999), no qual o extrato etanólico (EEB) apresentou 41% de atividade antioxidante em relação à um equivalente de 1mg/mL de quercetina, Assim, trabalho visa contribuir para o conhecimento de plantas medicinais brasileira e até onde vai nosso conhecimento, esse é o primeiro relato da presença de obtusalina, eritrodiol, β-sitosterol e dos derivados acilados de α- e β-amirina no gênero Hancornia. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This dissertation report describes the chemical and the biological activity studies about leaves of Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae), a fruitful brazilian species, popularly known as mangaba. In the traditional medicine, this latex is used to protect against gastric disorders and tuberculosis and their leaves in to treat dysmenorrhea, diabetes and obesity. From the hexane and ethanol crude extracts several triterpene mixtures could be identified: obtusalin and erythrodiol, lupeol, α- and β-amyrin and their 3β-acylated derivatives. Also were obtained mixtures of hydrocarbons and of long-chain alcohols, β-sitosterol, and a mixture of rutin and chlorogenic acid. The extracts and fractions of Hancornia speciosa were tested to evaluate a possible biological activity. The crude extracts showed no toxic activity on Artemia salina brine shrimp assay (LD50 > 1000 ppm). Evaluating allelopathy activity over Lactuca sativa seeds’ germination and growing, the hexane crude extract did not inhibit germination significantly, but reduced the rate of germination (IVG) and inhibited the growth of roots and aerial parts of the seedlings. On the other hand, the ethanol crude extract inhibited germination and reduced IVG, but did not inhibit growing of aerial parts of germinated seeds; nevertheless it inhibited the growth of roots in all evaluated concentrations. The ethanol crude extract was evaluated about antioxidant activity by two models: by the scavenging hydrogen peroxide method, in comparison with ascorbic acid activity, and by reducing phosphomolybdenum complex test, done according to Prieto’s method with modifications, using quercetin as control. This work aims to contribute to the knowledge of Brazilian flora species considering that, as far we know, it is the first time the presence of α- and β-amyrin acylated derivatives, obtusalin, erythrodiol and β-sitosterol are reported to the Hancornia genus.
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Análises fitoquímica e farmacognóstica da raiz de Cochlospermum regium (Mart. et Schr.) Pilger, CochlospermaceaeSolon, Soraya 09 1900 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-05-27T20:48:16Z
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Previous issue date: 2009-09 / Esta pesquisa se comprometeu a pesquisar os aspectos fitoquimicos e farmacognosticos da raiz de Cochlospermum regium (Mart. et Schr.) visando adquirir informacoes auxiliares para sua padronizacao como materia-prima vegetal para producao de fitoterapicos. Para analise fitoquimica foi realizado o fracionamento do extrato hidroalcoolico associado com a atividade antimicrobiana e, para o estudo farmacognostico foram realizados ensaios para caracterizacao morfoanatomica e fisico-quimica seguindo metodo farmacopeico. O extrato hidroalcoolico e suas fracoes, particularmente a fracao acetato de etila, apresentaram efeito antimicrobiano frente a Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa e ausencia de atividade sobre Escherichia coli, Enterococcus faecalis e Klebsiella pneumoniae. O fracionamento quimico forneceu cinco derivados fenolicos [acido elagico, acido galico, diidrokaempferol-3-O-β-glicopiranosideo e diidrokaempferol-3-O-β-(6´´-galoil)-glicopiranosideo] e dois triacilbenzenos conhecidos como cochlosperminas A e B. Com excecao do diidrokaempferol e seu glicosideo, e a primeira vez que as substancias isoladas sao reportadas nesta especie e o registro do diidrokaempferol-3-O-β-(6´´-galoil)-glicopiranosideo e inedito na literatura. A presenca dos acidos fenolicos ratifica a acao antimicrobiana observada no extrato hidroalcoolico e fracoes mais polares de C. regium, alem de dar sustentacao ao uso tradicional da raiz para o tratamento de infeccoes. O estudo farmacognostico caracterizou a raiz de C. regium em crescimento secundario com regiao cortical menos desenvolvida, presenca de graos de amido, drusas, polifenois e bolsas oleosas. O po da droga forneceu media granulometrica de 0,285 mm, densidade aparente de 0,40 g/mL, densidade por compactacao de 0,62 g/mL, teores de umidade, cinzas totais e cinzas insoluveis em acido de 8,2, 3,1 e 0,08%, respectivamente. O fingerprint foi determinado por CCD e CLAE-DAD empregando o acido elagico, o acido galico e o diidrokaempferol-3-O-β-glicopiranosideo como marcadores. A quantificacao destas duas ultimas substancias indicou teor medio de 1,8 e 27,9 mg/g, respectivamente, sem haver variacao sazonal entre as amostras coletadas bimestralmente durante o ano de 2008. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The purpose of this study was to investigate the phytochemical and pharmacognostic features of the roots of Cochlospermum regium (Mart. et Schr.) Pilger in order to acquire ancillary information to support its standardization as a raw material for the production of phytotherapic preparations. Phytochemical analysis was based on the fractionation of its hydroalcoholic extract exhibiting antimicrobial activity. The pharmacognostic investigation involved morphoanatomical and physicochemical characterization using pharmacopea methods. The hydroalcoholic extract and its fractions, particularly the ethyl acetate fraction, had antimicrobial effect on Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa, but not on Escherichia coli, Enterococcus faecalis, or Klebsiella pneumoniae. Phytochemical investigation of the hydroalcoholic extract supplied five phenolic derivatives [ellagic acid, gallic acid, dihydrokaempferol, dihydrokaempferol-3-O-β-glucopyranoside and dihydrokaempferol-3-O-β-(6´´-galloyl)-glucopyranoside dihydrokaempferol] and two triacyl benzenes known as cochlospermines A and B. Excluding dihydrokaempferol and its glycoside, the compounds described are being isolated from this species for the first time. Dihydrokaempferol-3-O-β-(6´´-galloyl)-β-glucopyranoside was unpublished. The presence of phenolic acids corroborates the antimicrobial activity observed in the hydroalcoholic extract and the polar fractions extracted from roots. It also corroborates traditional usage of the roots for the treatment of infections. The pharmacognostic study revealed secondary growth roots to have a less developed cortical region, with the presence of starch grains, druses, polyphenols, and oil pockets. The powdered drug had average particle size of 0.285 mm, bulk density of 0.40 g/mL, compaction density of 0.62 g/mL, and humidity, total ash content, and acid-insoluble ash contents of 8.2%, 3.1%, and 0.08%, respectively. Fingerprint was determined by TLC and HPLC-DAD (gradient mode) using gallic acid, ellagic acid, and diidrokaempferol-3-O-β-glucopyranoside as markers. Quantification of the last two compounds revealed average contents of 27.9 and 1.8 mg/g, respectively. No significant seasonal variability was observed for the species during 2008.
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Avaliação da atividade antioxidante e alelopática de plantas medicinaisCondessa, Mirta Bicca 22 March 2011 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2011. / Submitted by wiliam de oliveira aguiar (wiliam@bce.unb.br) on 2011-06-22T17:53:04Z
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2011_MirtaBiccaCondessa.pdf: 4861974 bytes, checksum: 78fd1996b3344478988307589343974a (MD5) / Approved for entry into archive by Guilherme Lourenço Machado(gui.admin@gmail.com) on 2011-06-28T15:44:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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2011_MirtaBiccaCondessa.pdf: 4861974 bytes, checksum: 78fd1996b3344478988307589343974a (MD5) / Os aleloquímicos têm importante papel ecológico e sua identificação é uma
etapa fundamental na obtenção de novos herbicidas e possível correlação com
atividades citotóxicas. Neste sentido, extratos brutos de sete espécies
empregadas como medicinais no Brasil – Morus nigra, Plectranthus neochilus,
Pouteria torta, P. ramiflora, P. caimito, Genipa americana e Sapindus saponaria
– foram avaliados por ensaio de germinação e crescimento, para verificar o
potencial alelopático sobre sementes de Lactuca sativa L. e Lycopersycum
esculentum Mill., nas concentrações de 0,5; 1,0; 2,0 e 4,0 mg/mL. Além disso,
também foi verificada a atividade antioxidante pelo modelo de redução do
complexo de fosfomolibdênio. Para a alelopatia foram avaliados os seguintes
parâmetros: germinabilidade (G, em %), tempo médio de germinação (tm) e
comprimento da radícula (CR). Foram propostos pela primeira vez os conceitos
de taxa de inibição da germinabilidade (TIG) e de taxa de inibição do
crescimento radicular (TICR). Destacam-se como bastante promissores pelo
potencial antioxidante os extratos etanólico e hexânico de folhas de
Plectranthus neochilus e Morus nigra. Os extratos hexânicos de folhas de
Pouteria ramiflora e Pouteria torta também apresentaram um potencial
antioxidante bastante representativo. Avaliando as respostas obtidas para a
atividade alelopática, pode ser constatado que os extratos apresentaram
atividade alelopática inibitória em, ao menos, um dos parâmetros avaliados e os extratos etanólicos de folhas de Pouteria caimito e Plecthranthus neochilus
apresentaram inibição da atividade alelopática em todos os parâmetros
testados. Até onde vai nosso conhecimento, os conceitos de TIG e TICR
constituem contribuições inéditas do presente trabalho, mostrando-se úteis em
estudos sobre alelopatia por possibilitarem uma análise direta do efeito inibitório dos extratos sobre a germinabilidade e crescimento da radícula,
respectivamente, comparando os resultados do tratamento e do controle. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Allelochemicals play important ecological role and their identification can be
considered one of the ways to get new herbicides and possible correlation with
cytotoxic activities. In this sense, crude extracts from seven species used in
tradicional medicine in Brazil – Morus nigra, Plectranthus neochilus, Pouteria
torta, Pouteria ramiflora, Pouteria caimito, Genipa americana, Sapindus
saponaria – were evaluated by germination and growth assays, to determine
their allelopathic potential on Lactuca sativa L. and Lycopersycum esculentum
Mill. seeds at the concentrations of 0.5, 1.0, 2.0 and 4.0 mg/mL. Moreover, the
antioxidant activity was assessed by the reduction model of phosphomolybdenum complex. For allelopathy, the germinability (G, given in %), germination average time (tm) and radicle length (CR) were evaluated. As far we know, the concepts of germination inhibition rate (GIR) and of root growth inhibition rate (RGIR) were proposed in a first time. The ethanolic and hexane extracts from Plectranthus neochilus and Morus nigra are stand out as very promising by the antioxidant potential. Hexane extracts of Pouteria ramiflora and Pouteria torta also revealed a potential antioxidant activity fairly representative. Evaluating the responses obtained for the allelopathic activity, it could be found that the extracts presented inhibitory allelopathic activity in at least one of the parameters and the ethanol extracts of Pouteria caimito and Plecthranthus neochilus showed inhibitory allelopathic activity on all tested parameters. The GIR and RGIR concepts are novel contributions of this work, being useful in studies of allelopathy, because they allow a direct analysis of the inhibitory effect of extracts on germinability and radicle growth, respectively, and they compare the treatment and the control results.
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Atividade de inibição enzimática por espécies vegetais do bioma cerradoSouza, Paula Monteiro de 23 February 2011 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2011. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-10-03T12:10:36Z
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2011_PaulaMonteirodeSouza.pdf: 1924009 bytes, checksum: 86febe9ef6271ab875953e99e0080c17 (MD5) / A pesquisa por substâncias ativas presentes em plantas que possam inibir uma enzima chave em um determinado processo metabólico, de forma que sua ação seja a mais seletiva possível e com menores efeitos indesejáveis, tem sido o alvo das pesquisas na área de medicamentos. O Brasil está entre os países de maior biodiversidade mundial, abrigando cerca de 55 mil espécies de plantas superiores (aproximadamente 22% do total mundial). No entanto, o Cerrado que é o segundo maior bioma brasileiro com uma enorme variedade de espécies vegetais apresenta até então poucos estudos quanto a seus efeitos terapêuticos, principalmente como inibidores enzimáticos. Nessa direção, este projeto propôs avaliar espécies vegetais presentes no bioma Cerrado quanto à atividade de inibição das enzimas α-amilase, α-glicosidase, tirosinase e acetilcolinesterase. Os inibidores de α-amilase e de α- glicosidase, são utilizados no tratamento da diabetes por inibirem a hidrólise de carboidratos no trato digestivo diminuindo a absorção de glicose pelo organismo. A tirosinase está envolvida na formação da melanina, por isso seus inibidores são clinicamente importantes para o tratamento de doenças relacionadas a hiperpigmentação. O principal papel da acetilcolinesterase é hidrolisar rapidamente a acetilcolina na fenda sináptica das transmissões colinérgicas, sendo alvo para o tratamento de doenças como Alzheimer. Para atingir o objetivo proposto, foram investigados 39 extratos de 14 espécies oriundas de 9 famílias do bioma Cerrado sobre a atividade das enzimas. Os extratos com potencial atividade de inibição sobre a α-amilase foram os extratos aquosos das folhas de Pouteria torta, Pouteria caimito, Pouteria ramiflora e Eugenia dysenterica, além do extrato etanólico da casca do caule de Stryphnodendron adstringens. Sobre a atividade da α-glicosidase, os extratos das espécies do gênero Pouteria, S. adstringens e E. dysenterica demonstraram um elevado potencial de inibição. Os extratos que apresentaram potencial de inibição sobre a enzima tirosinase pertencem às espécies Morus nigra, S. Adstringens, E. dysenterica, P. caimito e P. torta. Porém, nenhum extrato testado, foi capaz de influenciar na atividade enzimática da acetilcolinesterase. _____________________________________________________________________________ ABSTRACT / The search for active in plants that inhibit a key enzyme in a particular metabolic process, so that its action is more selective as possible and with less side effects, has been the focus of research in medicine. Brazil is the one of greatest biodiversity in the world, gathering around 55.000 species of higher plants (about 22% of world total). Cerrado is the second largest biome of Brazil with a widw variety of plant species, so far has been poorly studied to evaluate the efficacy and therapeutic effects of crude extracts or isolated compounds, mainly as enzyme inhibitors. The aim of the present study was to investigate the inhibitory activity of Cerrado plant extracts against α-amylase, α-glucosidase, tyrosinase and acetylcholinesterase. α- Amylase and α-glucosidase inhibitors delay the digestion of carbohydrates, producing a reduction in the rate of glucose absorption and consequently reduction of the postprandial plasma glucose. Tyrosinase is involved in formation of melanin, so their inhibitors are clinically important for treatment of dermatological disorders related to melanin hyperpigmentation. The main role of acetylcholinesterase is rapidly hydrolyzes the neurotransmitter acetylcholine at brain cholinergic synapses as well as at neuromuscular junctions, thus acetylcholinesterase inhibitors become targets for the treatment of Alzheimer’s disease. This study was designed to establish the inhibitory activity of 39 extracts prepared from 14 species from 9 families of Cerrado against α-amylase, α-glucosidase, tyrosinase and acethylcolinesterase. The plant extracts which demonstrated a significant capability to inhibit α-amylase were the leaves of Pouteria torta, Pouteria caimito, Pouteria ramiflora and Eugenia dysenterica aqueous extratcs, and the stem bark of Stryphnodendron adstringens ethanolic extract. On the activity of α-glucosidase, the extracts of the genus Pouteria, S. adstringens and E. dysenterica demonstrated a high potential of inhibition. The extracts that showed potential for inhibition of tyrosinase belonging to the species Morus nigra, S. adstringens, E. dysenterica, P. caimito and P. torta. However no extract was able to influence the enzymatic activity of acetylcholinesterase.
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Avaliação da atividade de inibição de alfa-amilase e padronização do extrato aquoso da folha de Eugenia dysentericaZorzin, Fabielle Melissa January 2014 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2014. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-04-29T10:48:27Z
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2014_FabielleMelissaZorzin.pdf: 3291894 bytes, checksum: e68710f246a1c0d84ed0dd7988cf4255 (MD5) / O Diabetes Mellitus é uma doença metabólica crônica, de etiologia múltipla, caracterizada por hiperglicemia resultando na deficiência da secreção ou incapacidade da insulina exercer seus efeitos adequadamente, provocando alterações no metabolismo de carboidrados, lipídios e proteínas. A procura por substância ativa presente em plantas que possa inibir a enzima α-amilase, chave neste processo metabólico, com ação mais seletiva e menos efeitos indesejáveis, tem sido o alvo de pesquisas. O Brasil ocupa o topo dos países mais ricos em biodiversidade do mundo, possui cerca de 20% do total das espécies do planeta e pelo menos metade destas espécies possuem alguma propriedade terapêutica. No entanto, menos de 1% desta diversidade tem sido alvo de estudos apropriados, principalmente como inibidores enzimáticos, o que inclui as espécies vegetais do Cerrado, segundo maior bioma brasileiro. Assim, este projeto propôs avaliar a espécie vegetal Eugenia dysenterica, presente no bioma Cerrado, quanto à atividade de inibição da enzima α-amilase, padronizar e caracterizar o extrato bruto aquoso das folhas desta planta. Para atingir o objetivo proposto, o extrato aquoso bruto foi padronizado de acordo com a presença do marcador químico catequina, fracionado e avaliado quanto a sua ação inibitória sobre a atividade da α-amilase. O extrato aquoso bruto apresentou 47,51 mg de catequina por grama de extrato. As frações com potencial atividade de inibição sobre a α-amilase foram as frações isopropanólica e suas subfrações I8, I16, I17, I20 e I21, além do extrato aquoso bruto. Foi identificado a presença de ácido elágico na subfração com maior potencial inibitório (I8). Os valores de IC50 do extrato bruto e da fração isopropanólica (14,92, e 8,06 μg/mL), respectivamente, foram próximos ao IC50 do controle positivo de inibição Acarbose (5,58 μg/mL). As subfrações apresentaram valores de IC50 maiores que o controle. Não foi observada citotoxicidade para o extrato aquoso bruto e fração isopropanólica em concentrações próximas aos valores de IC50 para α- amilase. Foi desenvolvido um método cromatográfico rápido e confiável para determinação do flavonóide catequina no extrato bruto, pois foi observada ampla faixa de linearidade e excelente precisão. Além disso, o método foi robusto e exato informando corretamente seu limite de detecção e quantificação. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Diabetes Mellitus is a chronic metabolic disorder of multiple aetiology characterized by hyperglycemia resulting in deficiency of insulin secretion or inability to exert its effects properly, causing changes in the metabolism of carbohydrates, lipids and proteins. The search for active substance in plants that can inhibit the enzyme α- amylase, key in this metabolic process, with more selective action and less side effects, has been the target of research. Brazil topped the richest countries in biodiversity in the world, has about 20% of the planet's species and at least half of these species have some therapeutic properties. However, less than 1% of this diversity has been the subject of appropriate studies, primarily as enzyme inhibitors, which includes the plant species of the Savanna, second largest brazilian biome. This project proposed to evaluate the plant species Eugenia dysenterica, present in the Savanna biome, as for the inhibitory activity of the enzyme α-amylase, standardize and characterize the crude aqueous extract of the leaves of this plant. To achieve the proposed goal, the crude aqueous extract was standardized according to the presence of the chemical marker catechin, fractionated and evaluated for its inhibitory effect on the activity of α-amylase. The crude aqueous extract showed 47.51 mg of catechin per gram of extract. The fractions with potential inhibitory activity on α-amylase were isopropanolic fractions and its subfractions I8 , I16 , I17 , I20 and I21, besides the crude aqueous extract. The presence of ellagic acid in the subfraction with highest inhibitory potential (I8) was identified. The IC50 values of crude extract and isopropanolic fraction (14.92 and 8.06 μg/mL, respectively), were close to the IC50 inhibition positive control acarbose (5.58 μg/mL). The subfractions showed IC50 values greater than control. No cytotoxicity was observed for the crude aqueous extract and isopropanolic fraction in concentrations near the IC50 values for α-amylase. A fast and reliable chromatographic method for determination of flavonoid catechin in the crude extract was developed because wide range of linearity and excellent accuracy were observed. Moreover, the method was robust and accurate, properly informing its limit of detection and quantification.
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Estudos sobre atividades biológicas de symphyopappus casarettoi robinson (asteraceae) : evidências preliminares quanto à presença de efeitos antitumoral, antimalárico e antioxidanteBenetti, Mara Regina Netto January 2007 (has links)
Plantas da família Asteraceae de diversos gêneros têm demonstrado relevantes propriedades biológicas. O gênero Eupatorium tem sido estudado em todo o mundo e muitos compostos biologicamente ativos já foram isolados de espécies desse gênero. Entre as atividades biológicas descritas para extratos ou compostos desse gênero, merecem destaque as relacionadas à proliferação celular: citotóxica, citostática, antitumoral e antileucêmica. Destacam-se também a atividade antibacteriana, antifúngica, antimalárica e antioxidante. Esse trabalho teve por objetivo verificar a presença de atividade biológica em extratos brutos e semi-purificados de Symphyopappus casarettoi Robinson (sin. Eupatorium casarettoi (B.L. Rob) Steyerm), uma planta nativa do Sul do Brasil e cujas propriedades biológicas e compostos químicos nunca haviam sido pesquisados. O extrato etanólico de inflorescências de S. casarettoi demonstrou atividade antiproliferativa significativa em cinco linhagens celulares derivadas de tumores humanos. O fracionamento com solventes de polaridade crescente sugeriu que tal atividade antiproliferativa ocorreu devido a compostos presentes na fração clorofórmica. Desta forma, preparou-se uma fração enriquecida de lactonas sesquiterpênicas, a qual demonstrou atividade antiproliferativa com doses mais baixas. Três de quatro manchas cromatográficas obtidas a partir dessa fração foram consideradas ativas, com valores de IC50 entre 24.33±3.65 to 1.87±0.32 μg/ml nas cinco linhagens tumorais e em fibroblastos humanos normais. Adicionalmente, não foi observada atividade antiproliferativa em linfócitos humanos. A análise por citometria de fluxo da mancha de cromatografia C2, sugeriu um mecanismo de ação diferente entre os tipos celulares testados. Não foram observadas atividades antibacteriana e antifúngica nos testes com o extrato etanólico de S. casarettoi. Atividade antimalárica foi observada in vitro contra Plasmodium falciparum e in vivo, com a dose de 250 mg/kg em camundongos infectados com P. berghei. A fração clorofórmica foi a que demonstrou melhor atividade e a hexânica demonstrou uma fraca atividade. Adicionalmente, a fração metanólica de S. casarettoi demonstrou um potencial antioxidante maior, quando comparado às outras frações em ensaios in vitro. Já nos testes ex vivo, tanto a fração metanólica, quanto o extrato etanólico atenuaram a morte celular e protegeram contra dano lipídico induzido por ferro. Embora haja a necessidade de estudos adicionais com o intuito de isolar e identificar os compostos bioativos, podemos sugerir que substâncias pertencentes ao grupo das lactonas sesquiterpênicas sejam responsáveis pelas atividades antiproliferativa e antimalárica, e que compostos fenólicos respondam pelas atividades antioxidantes observadas, como descrito previamente para outras espécies do gênero Eupatorium. / Species of the Asteraceae family of many genera have demonstrated a wide array of biological properties. The Eupatorium genus has been studied worldwide and a considerable number of bioactive natural products have been isolated from species of this genus. Among the biological activities reported, special attention was given to the inhibition of cell proliferation, including cytotoxicity, cytostasis and antitumor effects. In addition, antibacterial, antifungal, antimalarial and antioxidant activities have also been described. The aim of this work is to study for the first time the biological properties of crude and partially purified extracts of Symphyopappus casarettoi Robinson (syn. Eupatorium casarettoi (B.L. Rob) Steyerm), a plant native to South Brazil. Notably, the inflorescence ethanolic extract of S. casarettoi showed significant inhibitory activity against five cell lines derived from human tumors. Fractionation with solvents in increasing polarity demonstrated that the antiproliferative activity was due compounds found in chloroformic fraction. This last fraction was separated to get the enriched sesquiterpene lactones fraction, which inhibited cell proliferation with lower dosage. Three of four chromatographic spots from sesquiterpene enriched fraction were considered active with IC50 values ranging from 24.33±3.65 to 1.87±0.32 μg/ml in five human cancer cell lines tested and normal human fibroblasts. Additionally, no cytotoxic activity was found in human lymphocytes. The flow cytometry analysis of C2 chromatographic spot suggested a different mechanism of action of the active compound. We did not observe antibacterial and antifungal activities in the ethanolic extract of S. casarettoi. Antimalarial activity was observed in vitro against Plasmodium falciparum and in vivo, at 250 mg/kg in mice infected with P. berghei. The chloroformic fraction again was the most active one and the hexanic fraction had a weak activity. In addition, methanolic fraction showed a higher antioxidant potential compared to the other fractions in the in vitro assays. In the ex vivo tests, the ethanolic extract and the methanolic fraction attenuated cell death and effectively protected against lipid damage induced by iron. Despite the needs of additional studies to isolate and identify the bioactive compounds, we suggest that substances of the lactone sesquiterpenic class are probably responsible for the antiproliferative and antimalarial activities, while phenolic compounds are responding for the antioxidant activities. These biological properties should be further evaluated.
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Uso e armazenamento de recursos vegetais em comunidades rurais do semiárido do Rio Grande do Norte (Nordeste do Brasil)RODRIGUES, Laís Costa 31 January 2012 (has links)
Submitted by Chaylane Marques (chaylane.marques@ufpe.br) on 2015-03-10T18:58:14Z
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Previous issue date: 2012 / CAPES / Na Região Nordeste do Brasil, a vegetação da Caatinga exerce um papel de grande importância na vida das pessoas, fornecendo espécies vegetais utilizadas como alimento, combustível, construção, medicamento e outros fins. Os usos das plantas locais foram investigados junto a quatro comunidades estabelecidas no município de Carnaubais, na região semiárida do estado do Rio Grande do Norte, nordeste do Brasil. A pesquisa foi conduzida através de entrevistas semi-estruturadas para inventariar as plantas úteis para os moradores, citadas por 74 informantes, enquadrando-as nas categorias medicinal, alimentício, místico-religioso, tecnológico, ornamental, combustível, artesanato e forragem. Comparou-se o número de citações de uso medicinal das espécies e os seus respectivos hábitos, através do teste de Kruskal-Wallis, e o conjunto de espécies úteis em cada comunidade, através do índice de Similaridade de Sorensen. O Índice de Importância Relativa (IR) foi calculado para saber as espécies mais importantes para uso medicinal. O Fator de Consenso do Informante (FCI) foi calculado para avaliar a maior concordância entre os informantes sobre o uso das plantas utilizadas como medicinais. Além disso, calculou-se a média de citações de espécies úteis por grupo de mulheres (jovens e idosas). Foram registradas 142 espécies, a maioria utilizada como medicinal. O uso de herbáceas, quando comparado ao número de citações de uso dos hábitos arbustivo e subarbustivo, foi significativo (N= 74, p<0,05), porém o mesmo não ocorre quando o número de citações de uso de espécies do componente herbáceo é comparado com as que compõem o estrato arbóreo. O conjunto de espécies utilizadas no tratamento de doenças do aparelho respiratório e digestório são semelhantes nas comunidades estudadas (Sorensen= 48%). O número médio de espécies nativas citadas por pessoa é menor (9,4-19,6) no primeiro grupo (23,6-41,4) que no segundo. O percentual de espécies nativas em relação ao total também difere, sendo menor (9,4-19,6%) no primeiro grupo quando comparado ao segundo grupo (23,6-41,4%). Nas comunidades estudadas percebeu-se uma preferência por espécies herbáceas introduzidas para uso medicinal, correspondendo a um melhoramento do repertório local, aumentando a riqueza de espécies utilizadas.
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Caracterização estrutural e avaliação da atividade antimicrobiana da lectina da testa de Punica granatum L.SILVA, Pollyanna Michelle da 27 February 2015 (has links)
Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-02-25T18:28:06Z
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Previous issue date: 2015-02-27 / CNPQ / Frutos da romãzeira (Punica granatum L.) são usados popularmente para tratar infecções
causadas por microorganismos. Este trabalho descreve o isolamento da lectina da sarcotesta
de P. granatum (PgTeL; P. granatum testa lectin) através de extração de proteínas utilizando
NaCl 0,15 M, fracionamento salino utilizando sulfato de amônio (30 % de saturação) e
cromatografia em coluna de quitina. A atividade hemaglutinante (AH) foi monitorada ao
longo do processo de purificação utilizando eritrócitos de coelho. A massa molecular de
PgTeL nativa foi determinada por cromatografia de gel filtração e o perfil eletroforético em
condições desnaturantes foi avaliado em gel de poliacrilamida contendo sulfato sódico de
dodecila (SDS-PAGE). Os efeitos do pH, temperatura e íons sobre a sua AH foram
determinados e a atividade antimicrobiana contra bactérias e fungos de importância médica
foi avaliada através da determinação das concentrações mínima inibitória (CMI), mínima
bactericida (CMB) e mínima fungicida (CMF). Ainda, foi avaliado o efeito de PgTeL na
capacidade de aderência e invasiva de bactérias em células HeLa. Tratamento do extrato que
apresentou HA específica (18,3) da sarcotesta com sulfato de amônio resultou na precipitação
de contaminantes proteicos, uma vez que a fração sobrenadante (FS 30%) apresentou maior
AH específica (782) que a fração de proteínas precipitadas (13,92). O perfil da cromatografia
de FS 30% em coluna de quitina apresentou um único pico proteico adsorvido, que foi eluído
com ácido acético 1,0 M e, após diálise, aglutinou eritrócitos, correspondendo a PgTeL (AH
específica: 19.430). A massa molecular relativa de PgTeL nativa em cromatografia de gel
filtração foi 58 kDa. Em SDS-PAGE, PgTeL apresentou uma única banda polipeptídica de 58
kDa, indicando que sua estrutura não é formada por subunidades unidas por ligações nãocovalentes.
A AH de PgTeL foi detectada em valores de pH de 5,0 a 8,0 e foi resistente ao
aquecimento até 100°C durante 30 minutos. A AH de PgTeL foi estimulada por Ca2+ (10
mM) e Mg2+ (20 mM). PgTeL foi agente bacteriostático e bactericida contra Aeromonas sp.,
Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Micrococcus luteus, Salmonella enteritidis, Serratia
marcescens, Staphylococcus saprophyticus e Streptococcus mutans (valores de CMI variando
de 0,27 a 9,0 μg/mL e CMB de 0,27 a 68,4 μg/mL), enquanto apenas inibiu o crescimento de
Klebsiella sp., Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis (valores de CMI
variando de 16 a 20 μg/mL). PgTeL também inibiu a capacidade de aderência de S. enteritidis
(40% de inibição) e a capacidade invasiva de E. coli e S. aureus (59% e 25% de inibição
respectivamente) em células HeLa. PgTeL mostrou atividade antifúngica contra espécies de
Candida (com CMI variando de 6,25 a 25 μg/mL e CMF variando de 6,25 a 50 μg/mL). Em
conclusão, PgTeL é uma lectina ligadora de quitina, termoestável, ativa em ampla faixa de pH
e com ação antibacteriana e antifúngica, bem como é capaz de interferir na aderência e
capacidade invasiva bacteriana. / Fruits of pomegranate (Punica granatum L.) are used by people to treat infections caused by
microorganisms. This work reports the isolation of a lectin from P. granatum sarcotesta
(PgTeL) by protein extraction using 0.15 M NaCl, saline fractionation using ammonium
sulfate (30% saturation) and chromatography on chitin column. Hemagglutinating activity
(HA) was monitored during the purification process using rabbit erythrocytes. The molecular
mass of native PgTeL was determined by gel filtration chromatography and the
electrophoretic profile under denaturing conditions was evaluated using polyacrylamide gel
containing sodium dodecyl sulphate (SDS-PAGE). The effects of pH, temperature and ions on
its HA were determined and the antimicrobial activity against bacteria and fungi with medical
importance was evaluated by determination of minimal bactericide (MBC), inhibitory (MIC)
and fungicide (MFC) concentrations. In addition, it was evaluated the effect of PgTeL on the
adherence and invasive abilities of bacteria on HeLa cells. Treatment of the sarcotesta extract
which showed specific HA (18.3) with ammonium sulphate resulted in precipitation of proteic
contaminants since the supernatant fraction (SF 30%) showed highest specific HA (782) than
the precipitated protein fraction (13.92). Chromatography profile of SF 30% on chitin column
showed a single adsorbed protein peak, which was eluted with 1.0 M acetic acid and, after
dialysis, agglutinated erythrocytes, corresponding to PgTeL (specific HA: 19.430). The
relative molecular mass of native PgTeL on gel filtration chromatography was 58 kDa. In
SDS-PAGE, PgTeL appeared as a single polypepetide band with 58 kDa, indicating that its
structure is not composed by subunits linked by non-covalent interactions. The HA of PgTeL
was detected at pH values from 5.0 to 8.0 and was resistant to heating at 100°C for 30
minutes. The HA of PgTeL was stimulated by Ca2+ (10 mM) and Mg2+ (20 mM). PgTeL was
bacteriostatic and bactericide agent against Aeromonas sp., Enterococcus faecalis,
Escherichia coli, Micrococcus luteus, Salmonella enteritidis, Serratia marcescens,
Staphylococcus saprophyticus and Streptococcus mutans (MIC values ranging from 0.27 to
9.0 μg/mL and MBC from 0.27 to 68.4 μg/mL) while only inhibited the growth of Klebsiella
sp., Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis (MIC values ranging from 16 to
20 μg/mL). PgTeL also inhibited the adherence ability of S. enteritidis (40% inhibition) and
invasive ability of E. coli and S. aureus (59% and 25% inhibition respectively) on HeLa cells.
PgTeL showed antifungal activity against Candida species (MIC values ranging from 6.25 to
25 μg/mL and MFC ranging from 6.25 to 50 μg/mL). In conclusion, PgTeL is a thermostable
and chitin-binding lectin, active at a broad pH range, and with antibacterial and antifungal
action, as well as is able to interfere with adherence and invasivive abilities of bacteria.
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Isolamento e atividade antimicrobiana de actinomicetos Endofíticos e da Rizosfera de melão-de-são caetano (Momordica charantia L.)Teixeira Lima, Vânia January 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006 / As plantas medicinais constituem uma fonte valiosa para o isolamento de
microrganismos capazes de produzir diversas moléculas bioativas. Momordica
charantia L., conhecida popularmente como Melão-de-São Caetano, pertence à
família das Cucurbitáceas e é uma planta muito utilizada na medicina popular para o
tratamento de várias afecções de origem microbiana. Folhas e raízes de Melão-de-
São Caetano foram coletadas e, após a desinfecção, foram fragmentadas e
plaqueadas nos meios Batata Dextrose Ágar (BDA) e Caseína Amido Ágar (CAA). A
rizosfera foi processada por meio de diluição seriada, seguida de semeadura nos
mesmos meios. Foram isolados 289 microrganismos endofíticos, sendo 71 das
folhas (72% fungos, 21% bactérias e 7% actinomicetos) e 218 das raízes (55%
fungos, 38% bactérias e 7% actinomicetos). Da rizosfera foram isolados 220
microrganismos (5% fungos, 47% bactérias e 48% actinomicetos). A avaliação da
atividade antimicrobiana foi realizada através dos testes de bloco de gelose e de
difusão em disco, utilizando os seguintes patógenos: Staphylococcus aureus,
Bacillus subtilis, Escherichia coli, Mycobacterium tuberculosis, quatro linhagens de
Malassezia spp. e quatro de Candida spp. Entre os actinomicetos endofíticos
testados em bloco de gelose (ISP-2), 35,2% apresentaram atividade antimicrobiana,
sendo 23,5% endofíticos da raiz e 11,7% da folha. Quanto à rizosfera, 63% dos
actinomicetos testados foram ativos para um ou mais patógenos. Neste ensaio os
halos de inibição variaram entre 10 a 40 mm. As melhores linhagens foram
cultivadas nos meios líquidos M1, MPE e ISP-2. Todas as linhagens apresentaram
atividade para pelo menos um dos patógenos testados, com halos entre 9 e 30 mm.
A maioria dos actinomicetos avaliados foi identificado como pertencente ao gênero
Streptomyces
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