Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2014-10-30T16:11:02Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Alexandre Roriz Blumenschein - 2013.pdf: 1583874 bytes, checksum: d7e7853456cef455bfd20f0c4d3f1754 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-10-31T10:06:56Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Alexandre Roriz Blumenschein - 2013.pdf: 1583874 bytes, checksum: d7e7853456cef455bfd20f0c4d3f1754 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-31T10:06:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Alexandre Roriz Blumenschein - 2013.pdf: 1583874 bytes, checksum: d7e7853456cef455bfd20f0c4d3f1754 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-07-25 / Autologous fat grafts used for filling soft tissue defects have been used for more than a century. Fat is considered an ideal filler because of its low cost, ease of harvest, abundance in the human body and low immunogenic and allergic reaction due to its autologous nature, being largely used in aesthetic and reconstructive plastic surgery. Platelet rich plasma (PRP) is a plasma fraction, with platelet count above baseline, generally obtained via centrifugation of blood. PRP theoretically promotes tissue regeneration due to fact that it concentrates a greater amount of growth factors essential in the process of tissue regeneration and neovascularization. This paper aims to examine if the association of fat grafts and PRP improves graft viability in female rats, through an experimental, randomized and blinded study, which involved 47 animals. These animals underwent fat graft harvest from their inguinal fat deposits and fat grafting subcutaneously to their cranial region. In 22 animals the fat graft was mixed with PRP and in 25 the fat was grafted by itself. After a 100 day period, the animals were sacrificed and the fat grafts were analyzed using scores from 0 (absent) to 4 (abundant), in optical microscopy by two independent and blinded pathologists, by means of the following variables: fat graft cell viability, fat necrosis, tissue inflammation and fibrosis. Regarding fat graft cell viability, the PRP group scored moderate/abundant in 63% of the cases and the fat graft only group scored absent/slight in 72% of the cases (p<0.05). The PRP group presented lower fat necrosis scores and lower tissue inflammation scores when compared to the fat graft only group (p<0.05). The presence of tissue fibrosis was rarely observed in both groups. Tumors (dermoid cysts) within the fat grafts were observed in 3 animals in which the grafts were mixed with PRP. It is concluded that PRP improves the viability and integration of fat grafts in rats, but more studies are needed to fully understand the exact mechanisms that lead to this improvement and assess the safety of the method for use in humans. / Enxertos de gordura autóloga têm sido usados há mais de um século para preenchimento de defeitos de tecidos moles. A gordura é considerada um material de preenchimento ideal, devido ao baixo custo de obtenção, abundância no corpo e baixa reação imunogênica e alérgica, por se tratar de material autólogo, tendo amplo uso na cirurgia plástica estética e reparadora. O plasma rico em plaquetas (PRP) consiste em uma fração de plasma sanguíneo com concentração de plaquetas acima do normal, obtida geralmente através de centrifugação do sangue autólogo que separa os componentes celulares de acordo com seu peso, concentrando as plaquetas de forma seletiva. Esta fração sanguínea (PRP) teoricamente melhora a regeneração de tecidos, por conter em grande quantidade citocinas e fatores de crescimento essenciais no processo de regeneração e neovascularização de tecidos. O objetivo deste estudo foi analisar se a associação de plasma rico em plaquetas a enxertos de gordura em ratas melhora a viabilidade destes enxertos. Trata-se de uma pesquisa de delineamento experimental com animais, cego e randomizado. Foram estudados 47 ratas, submetidas à enxerto de gordura autóloga proveniente da região inguinal para a região subcutânea craniana. Vinte e duas ratas foram submetidas a enxerto de gordura autóloga associado a PRP (GCP) e vinte cincos ratas submetidos à enxerto de gordura sem plasma (GSP). Após 100 dias os animais foram sacrificados e as áreas de enxerto de gordura foram analisadas de forma independente e cega, por duas avaliadoras, de acordo com as seguintes variáveis: viabilidade da gordura enxertada, áreas de necrose, inflamação tecidual e áreas de fibrose, a partir de escores de avaliação histológica de 0 a 4 (ausente à abundante). Na avaliação da viabilidade das células gordurosas no enxerto, o GCP apresentou escore abundante em 63% dos casos e o GSP apresentou escore escasso em 72% destes (p<0,05). O GCP apresentou escores de necrose gordurosa e inflamação tecidual menor quando comparado ao GSP (p<0,05). A presença de fibrose tecidual foi pouco observada em ambos os grupos. Como achado histológico, observouse a presença de tumores (cistos dermoides) em três casos do grupo GCP. Conclui-se que o PRP melhora a viabilidade e integração de enxertos de gordura autóloga em ratas, porém novos estudos são necessários para entender completamente esse mecanismo e avaliar a segurança do método para uso em humanos.

Os hemoderivados têm sido utilizados com frequência cada vez maior na medicina equina, sendo caracterizados como um produto autólogo, com maior quantidade de fatores de crescimento e que melhora a capacidade de cicatrização de tecidos com pouco aporte sanguíneo, como tendões e articulações, diminuindo o tempo de recuperação do animal. Sabe-se que os fatores de crescimento são derivados das plaquetas, porém a correlação positiva entre o aumento na contagem plaquetária e a maior concentração de fatores de crescimento ainda é motivo de discussão entre os autores. Com o intuito de se obter um produto final com maior contagem plaquetária, é frequente o aumento da velocidade ou número de centrifugações na metodologia empregada, aumentando o risco de agregação plaquetária precoce. O objetivo do presente trabalho é estudar o efeito da dupla centrifugação no preparo de PRP, por meio da comparação entre contagens plaquetárias, concentrações de fator de crescimento TGF-&#946;1, e grau de ativação plaquetária por meio da porcentagem de agregação. Foram utilizados 12 equinos, machos, de 3 a 5 anos, clinicamente sadios. Para tanto foram realizados dois protocolos distintos: um com centrifugação única e o outro com dupla centrifugação. No primeiro, o sangue com anticoagulante foi centrifugado a 141G/12 minutos; enquanto no segundo a primeira centrifugação foi de 300G/5 minutos seguida de 700G/15 minutos, com repouso entre as mesmas e após. Os produtos obtidos após cada centrifugação foram submetidos à contagem plaquetária, teste de agregação e quantificação de TGF--&#946;1 por meio de kit ELISA. Os resultados obtidos demonstraram maior concentração plaquetária quando utilizado protocolo de dupla centrifugação. Agregometria evidenciou maior ativação das plaquetas durante o preparo do PRP quando submetidas a maiores velocidades de centrifugação (força gravitacional) e não ao fato das amostras serem centrifugadas duas vezes. A quantificação do TGF--&#946;1 não mostrou diferença quando realizado em amostras com apenas uma centrifugação, mas demonstrou valores maiores no produto final da segunda centrifugação. A avaliação por meio de coeficiente de determinação e coeficiente de correlação de Pearson evidenciou correlação positiva entre contagem plaquetária e de TGF--&#946;1. O protocolo com dupla centrifugação se mostrou mais eficaz em concentrar plaquetas e TGF--&#946;1, não sendo prejudicado pela ativação precoce dessas plaquetas durante o preparo. / Blood derived products have been used in equine medicine with increasing frequency, being characterized as an autologous product, with greater amount of growth factors and be capable of improvement the healing capacity in tissues with poor blood supply, such as tendons and joints, reducing the time of recovery of the animal. It is known that the growth factors are derived from platelets, but the positive correlation between the increase in platelet count and the higher concentration of growth factors is still a reason for discussion among the authors. In order to obtain a final product with a higher platelet count, it is frequent to increase the speed or number of centrifugations in the methodology employed, increasing the risk of early platelet aggregation. The aim of the present study is to verify the effect of double centrifugation in PRP preparation by comparing platelet counts, TGF-&#946;1 growth factor concentrations, and degree of platelet activation through percentage of aggregation. Twelve horses, male, aged 3 to 5 years-old, clinically healthy were subjected. Two different protocols were performed: one with single centrifugation and the other with double centrifugation. In the first one, the anticoagulated blood was centrifugated at 141G/12 minutes; while in the second one the first centrifugation was 300G/5 minutes followed by 700G/15 minutes, with rest between them and after. The products obtained after each centrifugation were submitted to platelet counting, aggregation test and measurement of TGF-&#946;1 by ELISA kit. The results showed a higher platelet concentration when double centrifugation protocol was used. The aggregometry test evidenced a greater activation of the platelets during the preparation of PRP when submitted to higher centrifugation velocities (times g), and not to double centrifugation. Quantification of TGF-&#946;1 showed no difference when performed on samples with only one centrifugation, but was higher values in the final product of the second centrifugation. The determination coefficient and Pearsons correlation coefficient showed a positive correlation between the platelet count and TGF-&#946;1 concentration. The double centrifugation protocol proved to be more effective at concentrating platelets and consequently higher amounts of TGF-&#946;1, not being impaired by early activation during obtainment.

Orientador: Tetuo Okamoto / Coorientador: Paulo Sérgio Perri de Carvalho / Banca: Robson Frederico Amui / Banca: Paulo Sérgio Perri de Carvalho / Resumo: O objetivo do presente trabalho foi de avaliar histologicamente o efeito do plasma rico em plaquetas (PRP) associado ou não ao osso autógeno no reparo de cavidades ósseas mandibulares de cães. Para o desenvolvimento do estudo, foram realizadas 6 (seis) cavidades ósseas Hemimandibulares em 4 (quatro) cães sem raça definida e sob anestesia geral. Foram formados 3 grupos: controle (preenchido por coágulo sangüíneo); PRP (preenchido por gel de PRP) e, PRP associado ao osso autógeno particulado. Após 120 dias, os animais foram sacrificados e as peças incluídas foram cortadas no sentido longitudinal e transversal e coradas pelo método da hematoxilina e eosina. Os resultados mostraram que nas cavidades preenchidas pelo gel de PRP havia a presença, em todos os animais, de tecido conjuntivo no centro da loja enquanto que no grupo da associação do PRP com osso autógeno a cavidade estava totalmente preenchida por osso neoformado. As partículas de osso autógeno remanescentes na cavidade estavam incorporadas ao osso neoformado ou com aspecto de parcialmente reabsorvidas. Assim, foi possível concluir, nas condições experimentais deste trabalho, que o gel de PRP não promove o reparo da cavidade enquanto que no grupo da associação do PRP com osso autógeno particulado houve reparo completo / Abstract: The purpose of the present study was to evaluate histologically the platelet rich plasma (PRP) associated or not to the autogenous bone in the mandibular bone cavities repair in dogs. For the development of the study, 6 mandibular bone cavities were performed in 4 indefinite race dogs under general anaesthesia. Three groups were created: control (filled with blood clot); PRP (filled with PRP gel); and PRP associated to the particulated autogenous bone. After 120 days, the animals were killed and the embedded parts were longitudinally and transverselly sectioned and completed through the hematoxylin and eosin method. The results showed that in the cavities filled with PRP gel the connective tissue could be seen in the middle of the lodge in all of the animals, while in the group of PRP associated to autogenous bone the cavity was totally filled with new bone. The remnant autogenous bone particles in the cavity were incorporated to the new bone or suggested being partially resorbed. Consequently, it was possible to conclude, through the experimental conditions of this study, that the PRP gel did not promote the cavity repair while in the group of PRP associated to particulated autogenous bone the repair was complete / Mestre

A regeneração óssea requer não somente um arcabouço, mas também uma seqüência de eventos biológicos regulados por múltiplos fatores. No presente, o plasma rico em plaquetas (PRP) consiste numa importante fonte de fatores de crescimento. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia da associação de vidro bioativo e PRP na reparação de defeitos cirúrgicos realizados no osso parietal de coelhos. Para tanto, foram utilizados dez coelhos da raça Nova Zelândia, sendo que em cada animal foram confeccionados dois defeitos de 8 mm nos ossos parietais, os quais receberam tratamentos diferentes: a) grupo 1 vidro bioativo (tratamento VB) e coágulo sangüíneo (tratamento CO); b) grupo 2 vidro bioativo + PRP (tratamento VB + PRP) e PRP isolado (tratamento PRP). Os animais foram sacrificados após 12 semanas, sendo os espécimes submetidos a estudo radiográfico (densidade em tons de cinza), histológico (coloração de hematoxilina e eosina) e histomorfométrico (planimetria por contagem de pontos). Os dados de densidade radiográfica e histomorfometria foram submetidos separadamente ao teste de análise de variância (ANOVA) e ao teste de Tukey (5%). Nos tratamentos PRP + VB e PRP observou-se maior densidade óssea radiográfica e maior neoformação óssea histomorfométrica, não havendo diferença estatística entre os mesmos. Não houve diferença estatística entre os tratamentos VB e CO em relação à densidade óssea e neoformação óssea histomorfométrica. Histologicamente, a neoformação óssea foi maior nos tratamentos PRP + VB e PRP, destacando-se o PRP + VB. Portanto, o PRP favoreceu a reparação óssea e o VB não favoreceu o reparo ósseo isoladamente e não alterou a reparação óssea obtida pelo PRP. / Bone regeneration not only requires a scaffold, but also a sequence of biological events regulated by multiple factors. Nowadays, the platelet-rich plasma (PRP) consists an important source of growth factors. The aim of this study was to evaluate the effectiveness of the association of bioactive glass and PRP in the repairing of surgical defects realized in the parietal bone of rabbits. Ten rabbits New Zealand were used, and on each animal two defects of 8 mm in the parietal bones had been confectioned, which had received different treatments: a) group 1 - bioactive glass (treatment VB) and coagulum (treatment CO); b) group 2 - bioactive glass + PRP (treatment VB + PRP) and isolated PRP (treatment PRP). The animals were sacrificed after 12 weeks, and the specimens were submitted to radiographic (density grey degrees), histological (hematoxilin and eosin coloration) and histomorfometrical (planimetry for counting of points) analysis. The results of radiographic density and histomorfometric were submitted separately to the test of analysis of variance (ANOVA) and Tukeys test (5%). In the treatments PRP + VB and PRP major radiographic bone density and major histomorfometric new bone formation was observed, without statistical difference between them. It did not have statistical difference between treatments VB and CO in relation to the bone density and histomorfometric new bone formation. Histologically, the new bone formation was bigger in the treatments PRP + VB and PRP, emphasizing PRP + VB. Therefore, the PRP supported the bone repairing and the VB does not supported the bone repair separately and does not modified the bone repairing gotten by the PRP.

Orientador: Cláudia Valéria Seullner Brandão / Banca: José Joaquim Titton Ranzani / Banca: Cláudia Helena Pellizon / Banca: Geórgia Nadalini Rodrigues / Banca: Antônio Carlos Lottelli Rodrigues / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a influência do plasma rico (PRP) e pobre (PPP) em plaquetas na proliferação celular e expressão de matriz metaloproteinases (MMPs), durante a reparação de úlceras corneais profundas. Foram utilizadas 45 coelhas, distribuídas em 3 grupos (G) experimentais (n=15), designados como grupos PRP (GR), PPP (GP) e Controle (GC), de acordo com o tratamento. Todos os animais foram submetidos à indução cirúrgica unilateral de úlcera corneal. No GR e GP, o sangue autólogo foi centrifugado, utilizando protocolo padronizado, e foram confeccionados os colírios de PRP e PPP, instilados cinco vezes ao dia. No GC, foi utilizado colírio lubrificante. Cada grupo foi subdividido (n=5), segundo o momento final de avaliação, sendo 4(M4), 7(M7) e 30 dias (M30). As córneas dos animais foram processadas para avaliação morfológica e imuno-histoquímica para PCNA, MMP1, MMP2, MMP9, MT1-MMP e TIMP1. No M4, os níveis de MMP2 foram maiores no GP e GR, sendo que no M7, esse comportamento foi observado apenas no GP. No M30, no GR verificou-se maior número de células epiteliais e marcação para MMP1 que o GP. No GR, a proliferação celular foi maior no M4 que nos demais momentos e a marcação para MMP2 foi maior no M4 que no M30. O PRP estimula a proliferação celular na fase inicial (M4) do tratamento quando comparado aos demais momentos, diferente dos demais tratamentos. O uso de colírios de plasma rico e pobre em plaquetas influencia a expressão de matriz metaloproteinases envolvidas no processo de reparação corneal / Abstract: The aim of this study was to evaluate the influence of platelet-rich (PRP) and poor (PPP) plasma in cell proliferation and matrix metalloproteinases (MMPs) expression during the repair of deep corneal ulcers. Forty-five female rabbits were distributed in 3 experimental groups (G) (n = 15), referred as PRP (GR), PPP (GP) and Control groups (GC), in accordance with the treatment. All animals underwent surgical induction of unilateral corneal ulcer. PRP and PPP eyedrops were made by using centrifuged blood through standardized protocol, and instilled five times a day. In GC, lubricant eyedrops was used. Each group was subdivided (n = 5), according to the final time point, 4 (M4), 7 (M7) and 30 days (M30). The animals corneas were processed for morphological and immunohistochemical analysis for PCNA, MMP1, MMP2, MMP9, MT1-MMP and TIMP1. In M4, the levels of MMP2 were higher in GP and GR, and in M7, this behavior was only observed in the GP. In M30, more epithelial cells and MMP1 expression were found in GR than GP. In the GR, cell proliferation was higher in M4 than at others time points and MMP2 expression was higher in M4 than in M30. The PRP stimulates cell proliferation in the early phase (M4) of treatment when compared to other time points, different from other treatments. The use of platelet-rich and poor plasma eyedrops influences the expression of matrix metalloproteinases involved in the corneal repair process / Doutor

Orientador: Daniele Cristina Cataneo / Coorientador: Marcus Vinicius Danieli / Resumo: Avaliar, através de estudo clínico randomizado e cego, a eficácia do plasma rico em plaquetas (PRP) e do ácido tranexâmico (ATX) na artroplastia total do joelho com relação à queda do nível da hemoglobina, ao controle da dor pós-operatória, ao ganho de flexão do joelho e ao ganho de função do membro inferior. Metodologia: foram selecionados 84 pacientes que seriam submetidos à prótese total do joelho e randomizados. Em 23 desses pacientes foi aplicado o ATX, em 20 pacientes o PRP, em outros 20 pacientes o PRP associado ao ATX e em 21 pacientes apenas o soro fisiológico antes do fechamento da cápsula articular. Foram realizadas dosagens de hemoglobina sérica (mg/dL) no pré-operatório, e 24 e 48 horas após a cirurgia, aplicado o questionário Western Ontario and McMaster Universities (WOMAC), a escala numérica (EN) da dor e medido o ganho de flexão do joelho até o segundo ano pós-operatório. A análise estatística comparou os resultados a fim de comprovar haver diferença entre os grupos em cada um dos momentos da avaliação. Resultados: houve diferença estatística significante (p < 0,01) na medida da queda da hemoglobina com 48 horas de pós-operatório entre os grupos em que o ATX foi utilizado em comparação ao grupo controle e ao grupo PRP, sem diferença entre os grupos com ATX isolado ou associado ao PRP. Na mensuração da dor houve significativa vantagem nos grupos que utilizaram o ATX nas avaliações com 24 e 48 horas de pós-operatório e no grupo que utilizou o PRP iso... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Not available / Doutor

INTRODUÇÃO: O plasma rico em plaquetas (PRP) é utilizado em medicina esportiva para aumentar e acelerar o processo de reparação tecidual em lesões tendineas e ligamentares, no intuito de proporcionar um retorno mais rápido às atividades esportivas. No entanto faltam estudos com alto nível de evidência comprovando sua eficácia no tratamento destas lesões. Com o objetivo de estudar o efeito da aplicação do PRP no sitio doador de enxerto do ligamento da patela para reconstrução do ligamento cruzado anterior (LCA), realizamos ressonância magnética aos seis meses de pós-operatório para avaliar o ligamento da patela. Também aplicamos questionários de função do joelho e realizamos teste isocinético após seis meses da cirurgia. MÉTODOS: O presente estudo prospectivo, randomizado, avaliador cego incluiu 27 pacientes. Comparamos doze pacientes em que foi utilizado o PRP no defeito criado no terço central do ligamento da patela para retirada de enxerto com quinze pacientes do grupo controle. Aos seis meses de cirurgia realizamos ressonância magnética, em que foi avaliada a área não regenerada do defeito no terço central do ligamento da patela, a área de secção transversa do ligamento e a altura da patela pelo índice de Insall- Salvati. Realizamos teste isocinético e aplicamos questionários específicos de função do joelho. Quantificamos a dor pós-operatória imediata com escala visual analógica (EVA) de dor. RESULTADOS: Aos seis meses de pós-operatório a área não regenerada do defeito no terço central do ligamento da patela foi 4,95 mm2 no grupo PRP e 9,38 mm2 no grupo controle (p=0,046, teste t de Student). A área de secção transversa do ligamento da patela no grupo PRP foi de 173,05 mm2 e no grupo controle 176,29 mm2 (p=0,856). O índice de Insall-Salvati nos grupos PRP e controle foi de 1,04 e 1,06, respectivamente (p=0,808). Não houve diferença entre os grupos nos resultados dos questionários e teste isocinético. Nos pacientes em que foi utilizado o PRP houve menos dor pós-operatória imediata (p=0,02). CONCLUSÃO: Concluímos, nessa amostra, que o uso do PRP no defeito do terço central do ligamento da patela na reconstrução do LCA, nos primeiros seis meses; determinou maior regeneração do defeito; diminuiu a intensidade da dor pós-operatória imediata; não ocasionou alterações estruturais na avaliação por ressonância magnética; e não modificou os resultados clínicos e funcionais da cirurgia / INTRODUCTION: Platelet-rich plasma (PRP) has been used in sports medicine to improve and accelerate ligaments and tendons healing, in an effort to provide a faster return to sports activities. However there is a lack of high evidence level studies to support its use. With the purpose to study the effect of PRP, patellar ligament was evaluated six months after harvesting its central third with magnetic resonance imaging (MRI). We also applied specific questionnaires of knee function and isokinetic testing. METHODS: This blinded, randomized, prospective study included 27 patients. Twelve patients in whom we added PRP in the patellar ligament after harvesting its central third for ACL reconstruction were compared to fifteen patients in the control group. After six months we evaluated the non-regenerated area of the patellar ligament, the cross section area of the patellar ligament and its length (Insall-Salvati index) with MRI. We also evaluated the results of isokinetic testing and specific questionnaires of knee function. Immediate post-operative pain was evaluated with visual analogical scale (VAS) score. RESULTS: The non-regenerated area of the patellar ligament was 4,95 mm2 in the PRP group and 9,35 mm2 in the control group (p=0,046 test). The cross section area of the patellar ligament in the PRP group was 173,05 mm2 and in the control group 176,29 mm2 (p=0,856). The Insall- Salvati index in the PRP and control group was 1,04 and 1,06, respectively (p=0,806). There was no difference between the groups in the questionnaires and isokinetic testing results. PRP group patients had less post-operative pain (p=0,02). CONCLUSION: We concluded, in this sample, that the use of PRP in the patellar ligament after harvesting its central third for ACL reconstruction, in the first six months: improved the ligament regeneration; reduced the intensity of immediate post-operative pain; did not cause structural changes in the patellar ligament in MRI; and did not modify the clinical and functional results of the procedure

O Plasma Rico em Plaquetas (PRP) é um produto derivado de células sanguíneas obtido por centrifugação, o qual contém uma alta concentração de fatores de crescimento em um pequeno volume de plasma. Este procedimento é utilizado desde a década de 1950 e vem crescendo amplamente para aplicação em diversas áreas como na Ortopedia, Odontologia, Cardiologia, Oftalmologia, Dermatologia, e para uso no reparo de feridas crônicas, especialmente em pacientes diabéticos ou com complicações venosas, feridas em mucosas, tecidos conjuntivos, patologias do sistema músculo-esquelético, superfície de fratura, enxerto ósseo entre outros. Nessas situações, observa-se um comprometimento dos níveis ideais de fatores de crescimento nas fases de cicatrização, por esse motivo vê-se a importância de manter os níveis adequados dos fatores de crescimento nas diferentes fases do reparo tecidual. O preparo de PRP por não ser padronizado pode comprometer a eficácia do tratamento, pois o número de células pode variar em cada paciente e a cada isolamento, e por consequência, a quantidade dos fatores de crescimento podem ser variáveis. As coletas de sangue são invasivas para o paciente, sendo dispendiosas em tempo e mão-de-obra ao procedimento operacional, implicando no aumento do custo. O preparo antecipado do PRP com possibilidade de armazenamento para o uso nas aplicações durante o tratamento pode ser uma solução importante para acelerar a regeneração tecidual e evitar o desconforto do paciente, que muitas vezes já não tem uma boa qualidade de vida. Portanto, o presente estudo visou comparar a diferença no processo de cicatrização durante sete dias em um modelo de lesão no dorso de rato nude com a aplicação de PRP humano obtido a fresco e PRP armazenado por liofilização e estocado a temperatura ambiente durante 18 dias, preparados a partir de dois diferentes doadores, comparados à aplicação do fator de crescimento derivado de plaquetas BB humano recombinante (rhPDGF-BB), um dos fatores de crescimento mais abundante no PRP. Os resultados mostraram eficácias comparadas nos tratamentos das feridas com rhPDGF-BB (controle 11 positivo) e com os PRPs fresco ou aramazenado a temperatura ambiente, de ambos os doadores, indicando a possibilidade de coleta de sangue do paciente apenas uma única vez e estocagem do mesmo até a reconstituição do produto no dia da aplicação, possibilitando o oferecimento de um tratamento de maior qualidade e menor invasividade ao paciente. Não houve diferença estatística significativa nos tratamentos das feridas com os PRPs fresco ou armazenado obtidos dos dois doadores, indicando que os valores de plaquetas dos doadores (189.000 e 216.000/mm3) foram adequados para o processo de regeneração tecidual. Este trabalho mostra a possibilidade do estoque do PRP, preparado a partir do sangue do paciente, em diversas alíquotas liofilizadas e estéreis a temperatura ambiente, o que poderá facilitar a aplicação do produto, possibilitando seu uso até mesmo em domicílio, e, consequentemente, uma melhora na qualidade de vida deste paciente. Também aponta para um protocolo de preparo rápido e efetivo para pacientes com até 189.000 plaquetas/ mm3, com atividade biológica testada in vivo, visando a preparação de PRP. / Platelet Rich Plasma (PRP) is a blood cell derived product obtained by centrifugation, which contains a high concentration of growth factors in a small volume of plasma. This procedure has been used since the 1950s and has been widely used in various areas such as Orthopedics, Dentistry, Cardiology, Ophthalmology, Dermatology for use in chronic wound repair, especially in diabetic patients or patients with venous complications, mucosal wounds, connective tissues, pathologies of the musculoskeletal system, fracture surface, bone graft, among others. In scarring and deficient tissues, there is an impairment of the ideal levels of growth factors in the wound healing phases. Therefore, it is important to maintain adequate levels of growth factors in all the different stages of tissue repair. The preparation of PRP is a non-standard procedure, with variable results being observed in the literature, being able to be involved with the amount of growth factors and methods of preparation. Usually, more than one PRP application is required involving a new blood collection for each application in order to accelerate tissue regeneration. The blood collections are invasive for the patient, being expensive in time and labor in the operational procedure, implying in the increase of the cost. The early preparation of PRP with possibility of storage for use in future applications during treatment could be an important solution to avoid the discomfort of patients, who often no longer have a good quality of life. Therefore, the present study aimed to compare the difference in the healing process for seven days in a nude rat dorsal lesion model, treated with human fresh PRP or stored PRP (prepared by lyophilization and stored at room temperature for 15 days, from two different donors, and compared to the application of recombinant human BB platelet-derived growth factor (rhPDGF-BB), one of the most abundant growth factors in PRP. The results showed comparative efficacies in the treatments of wounds with rhPDGF-BB (positive control) and with fresh PRPs or room temperature stored PRP of both donors, indicating the possibility of collecting blood from the patient only once and storing the same until the reconstitution of the product on the day of application, allowing the offer of a 13 treatment of higher quality and less invasiveness to the patient. There was no statistically significant difference in wound treatments with fresh or stored PRPs obtained from the two donors, indicating that donor platelet values (189,000 and 216,000/mm3) were adequate for the tissue regeneration process. This work shows the possibility of PRP stock, prepared from the patient\'s blood, in several sterile freeze-dried aliquots at room temperature, which may facilitate the application of the product, allowing its use even at home, and, consequently, an improvement in the quality of life of this patient. It also points to a fast and effective preparation protocol for patients with up to 189,000 platelets/mm3, with biological activity tested in vivo, aiming at the preparation of PRP.

O uso do plasma rico em plaquetas pode apresentar resultados favoráveis na reparação por se constituir em fonte natural de fatores de crescimento, que podem acelerar a reparação dos tecidos. A proposição desta pesquisa foi analisar os efeitos do plasma rico em plaquetas no processo de reparação tecidual. Foram realizadas feridas dérmicas padronizadas, com a utilização de punch, para excisão do fragmento de pele, com 5mm de diâmetro e 2mm de profundidade, no dorso de 48 ratos. Destes, 40 foram utilizados para análise microscópica e 8 ratos para análise macroscópica. Os animais foram divididos em dois grupos, conforme o tratamento realizado: em um grupo (teste), as feridas foram tratadas com plasma rico em plaquetas e em outro (controle), foi utilizado soro fisiológico. Além disso, utilizamos 5 ratos para a determinação do número de plaquetas presentes no plasma rico em plaquetas. Estas análises foram realizadas no analisador automático de células sangüíneas ABC Vet (ABX DIAGNOSTICS). Dos 40 ratos utilizados para análise microscópica, 5 ratos (grupo teste) e 5 ratos (grupo controle) foram sacrificados nos períodos de 24 horas, 3 dias, 7 dias e 14 dias. Nos 8 ratos utilizados para análise macroscópica, sendo 4 ratos (grupo teste) e 4 ratos (grupo controle), as feridas foram fotografadas nos períodos baseline, 24 horas, 3 dias, 7 dias e 14 dias e as imagens foram analisadas por software de morfometria (ImageLab2000®). Os espécimes foram processados para análises macroscópica e microscópica. As análises histomorfológica e histomorfométrica mostraram que a reparação das feridas evolui de forma similar em ambos os grupos. Os resultados desta pesquisa sugeriram que embora não ofereçam efeitos tóxicos ou prejudicial sobre os tecidos moles, o PRP não favorece a reparação de feridas dérmicas, em ratos. / The employ of platelet-rich plasma can present favorable outcomes in healing to consist of natural source of growth factors for acceleration tissue healing. The purpose of this research was to analyze the effects of platelet-rich plasma on tissue healing. Standard dermical wounds were made with a punch to excise a skin fragment with 5 millimeters diameter and 2 milliners depth, in the back of 48 rats. Of these, 40 had been used for microscopical analysis and 8 rats for macroscopic analysis. The animals had been divided in two groups according to treatment: in a group (test), the wounds had been dealt with platelet-rich plasma and in another one (control), saline was used. Also, we use 5 rats for the determination of the number of platelets present in the platelet-rich plasma. These analyses had been carried through in the automatic analyzer of sanguine cells ABC Vet (ABX DIAGNOSTICS). Of the 40 rats used for microscopical analysis, 5 rats (group test) and 5 rats (group control) ware sacrificed in the 24 hours, 3 days, 7 days and 14 days. In the 8 rats used for macroscopic analysis, being 4 rats (group test) and 4 rats (group control), the wounds had been photographed in the baseline , 24 hours, 3 days, 7 days and 14days and the images had been analyzed by morphometry software (ImageLab2000®). The specimens had been processed for macroscopic and microscopic analysis. All the data had been submitted to a quantitative analysis and the date got by the software had been also submitted to statistic analysis. The results of this research had suggested that, even so do not produce toxic or harmful effect, the PRP does not act on the dermal wound healing in rats.

Enfermidade muito observada nas articulações dos equinos, o processo degenerativo articular crônico na articulação tibio-társica pode ser de origem primária, ou secundária à osteocondrose dissecante. A confirmação diagnóstica é feita por avaliação radiográfica. Importantes aliados diagnósticos são a avaliação do líquido sinovial, a avaliação ultrassonografia e a cirurgia de video-artroscopia, sendo esta última o tratamento para a enfermidade. Por sua evolução crônica e às vezes assintomática, a osteocondrose dissecante causa alterações no ambiente articular, como a perda de matriz cartilagínea, o que limita o potencial atlético do animal, acarretando em queda na performace e perdas econômicas. É comum o uso terapêutico intra-articular no periodo pós operatório recente de substâncias autólogas como o plasma rico em plaquetas (PRP), bem como o uso ácido hialurônico (HA), como adjuvante para o tratamento cirúrgico. O presente trabalho objetiva comparar e avaliar estes tratamentos. Foram utilizados 18 equinos, com idade variando entre 2 a 6 anos de idade, da raça Brasileiro de Hipismo, com peso corpóreo entre 400 e 650 kg, oriundos do mesmo criatório, com osteocondrose dissecante, na crista intermédia do osso tíbia. Estes animais no décimo dia pós operatório são dividos em três grupos experimentais: grupo AH, grupo PRP e grupo RCL como controle. Dados clínicos, ultrassonográficos e laboratoriais foram coletados em tempos definidos. Os resultados demonstraram que os animais do grupo controle - grupo RCL, que receberam solução de ringer com lactato intraarticular, apresentaram respostas clínicas e laboratoriais que indicaram menor indução do processo inflamatório ao ambiente articular quando comparado aos grupos PRP e AH. Os animais que receberam PRP apresentaram maior efusão sinovial e resposta positiva ao teste de flexão quando comparados aos animais que receberam AH; ao passo que a administração intra-articular de AH induziu maiores alteração citológica do líquido sinovial quando comparadas aos animais que receberam PRP. / One of the most commom diseases in the equine joint, the degenerative joint disease in the tibio tarsal joint could be a primary disease, or secondary to osteochondrosis dissecans. The diagnosis is made by radiographic study. Allies in diagnosing this disease includes sinovial fluid evaluation, ultrasonographic evaluation and video arthroscopy surgery, which is the way to treat this disease. The osteochondrosis dissecans has a chronic evolution, and several times asymptomatic, which causes an alteration on articular environment that contributes to a loss in the cartilage matrix. Resulting in the limited development of the athletic potential of the animal, poor performance and economic losses. Is common to use therapeutical autholog substances intra articular as the platelet rich plasma, and hialuronic acid, in the early post surgical treatment as an adjuvant therapy to the surgical treatment. This study reaches to compare and evaluate those treatments. Were used 18 horses, with ages between 2 to 6 years old, Brasileiro de Hipismo breed, weighting between 400 and 650 kg, from the same breeding center, with osteochondrosis dissecans fragments from the intermediate tibial crest. Those patients, 10 days after the video arthroscopy surgery, were divided in three experimental groups: AH group, PRP group, and RCL group as control group. Laboratorial data, clinical signs and ultrassonographic exam were performed. The results proved that RCL group had show less induction of inflamatory process on articular enviroment, when we compare with PRP group and AH group. The PRP group had shown more synovial effusion, and more sensibility to the flexion test when we compare to AH group; but the AH group had shown more laboratorial alterations when we compare to the PRP group.