Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Platelet-rich plasma (PRP) is defined as a plasma volume with a higher platelet count than that of whole blood. PRP has been widely used for treatment of different lesions, both in human and in veterinary medicine. The aim of this study was to search for an effective method of storing equine PRP, without loss of viability. Blood (500 ml) was collected from 8 clinically healthy ponies, where 100 ml were used to prepare PRP; 2 ml were used to determine platelet count and mean platelet volume (MPV). Whole blood was centrifuged at 1000 rpm for 10 minutes to obtain plasma. The plasma obtained was centrifuged again at 1400rpm for 10 minutes to obtain 10 ml of PRP. PRP was divided into 3 samples of 2 ml, one being considered the fresh sample and the other 2 were frozen. Platelet count, determination of MPV and morphological evaluation were performed on the fresh sample. Morphologic evaluation consisted of counting 200 platelets under light-microscopy and their classification in inactive (discoid), activated (with pseudopodia) or uncertain state (who lost the discoid form but showed no pseudopodia). The samples to be cryopreserved were stored in a freezer at -80 ° C for 14 days, containing 6% dimethyl sulfoxide (DMSO) as a cryoprotectant or without any addition of cryoprotectants. After this period, samples were thawed and submitted to the same analysis of the fresh sample. The fresh and DMSO frozen samples showed no difference in the total number of platelets, activated platelets and MPV (617.9 ± 65.5 x103/μL, 5.3 ± 0.06 fL, 9.6%) However, samples frozen without DMSO showed fewer platelets (519.6 ± 66 x103/μL), higher MPV (5.71 ± 0.08 fL) and a higher percentage of activated platelets (13.87%). 6% DMSO proved be an effective cryoprotectant in storing equine PRP at -80°C for 14 days. / O plasma rico em plaquetas (PRP) é definido como plasma com quantidade de plaquetas três vezes superior ou mais à do sangue total. O PRP vem sendo largamente utilizado no tratamento de diferentes lesões, tanto na medicina humana quanto na medicina veterinária. O objetivo deste estudo foi buscar um método eficaz de armazenar o PRP eqüino, sem perda significativa de sua viabilidade. Foram coletados 500 ml de sangue de oito pôneis clinicamente saudáveis, dos quais 100 ml foram utilizados para o preparo do PRP e 2 ml foram enviados à análise laboratorial, para contagem de plaquetas e determinação do volume plaquetário médio (VPM). O sangue total passou por uma primeira centrifugação, de 1000rpm (224g) por 10 minutos para obtenção do plasma. O plasma obtido foi novamente centrifugado, a 1400rpm (440g) por mais 10 minutos para obtenção de 10 ml de PRP. O PRP foi dividido em três amostras de 2 ml, sendo uma considerada a amostra fresca e as outras duas destinadas à criopreservação. A amostra fresca foi enviada ao laboratório para contagem plaquetária, determinação do VPM e avaliação morfológica. A avaliação morfológica consistiu na contagem de 200 plaquetas, sob microscopia óptica e na classificação quanto à sua forma: em inativas (discóides), ativadas (com emissão de pseudópodes) ou em estado incerto (que perderam a forma discóide, mas não apresentavam pseudópodes). As amostras destinadas à criopreservação foram armazenadas em freezer, a -80°C, durante 14 dias, contendo 6% de dimetil sulfóxido (DMSO) como crioprotetor ou sem adição de crioprotetor. Após este período, as amostras foram descongeladas e submetidas às mesmas análises laboratoriais da amostra fresca. As amostras frescas e congeladas com DMSO não apresentaram diferença quanto ao número total de plaquetas, VPM e plaquetas ativadas (617,9 ± 65,5 x103/μL; 5,3±0,06fL; 9,6%) (p>0,05). Entretanto, as amostras sem DMSO apresentaram um número menor de plaquetas (519,6 ± 66 x103/μL), maior VPM (5,71±0,08fL) e maior percentagem de plaquetas ativadas (13,87%) (p<0,05). O DMSO 6% se mostrou um crioprotetor eficaz no armazenamento do PRP eqüino a -80°C por 14 dias.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-31Bitstream added on 2014-06-13T19:43:57Z : No. of bitstreams: 1 assuncao_lrs_dr_araca.pdf: 22650454 bytes, checksum: 031a7b3f676e002170ba15a72073e127 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A avulsão dentária é um tipo de trauma que resulta na perda da continuidade de um complexo e múltiplo compartimento de tecidos. Componentes derivados do sangue, incluindo o plasma pobre em plaquetas (PPP) e o plasma rico em plaquetas (PRP) constituem uma opção terapêutica para o reparo tecidual. O gel de PRP tem sido usado como arcabouço para células-tronco da medula óssea em Engenharia Tecidual. O propósito da presente investigação foi avaliar o efeito do PPP, PRP ativado ou não por trombina e células-tronco (CT) originárias da medula óssea associadas ao PRP no reparo de reimplantes dentários. Quatro cães foram utilizados neste estudo. PRP e PPP foram obtidos pelo método de dupla centrifugação a partir do sangue coletado da veia jugular dos animais. CT foram obtidas por aspiração da medula óssea (AMO) e isoladas pelo método de centrifugação por densidade de gradiente. A citometria de fluxo (CF) foi realizada após AMO utilizando marcadores celulares CD34 e CD90. Após 30 minutos da extração, os dentes foram reimplantados e, de acordo com a proposta metodológica, divididos em 5 grupos: Grupo I – dentes reimplantados sem material (Controle); Grupo II – dentes reimplantados com o Plasma Pobre em Plaquetas (PPP); Grupo III – dentes reimplantados com o Plasma Rico em Plaquetas ativado por cloreto de cálcio (PRP); Grupo IV – dentes reimplantados com o Plasma Rico em Plaquetas ativado por trombina de origem bovina e cloreto de cálcio (PRP + TR) e Grupo V – dentes reimplantados com células-tronco da medula óssea associadas ao PRP ativado por cloreto de cálcio (CT + PRP). Análises histológica, histomorfométrica e imuno histoquímica foram realizadas 120 dias após o reimplante. Análise de variância (ANOVA) e o teste post-hoc de Tukey foram utilizados para a análise estatística, com nível de significância de 5%. CF mostrou... / Dental avulsion constitutes a traumatism which results in the loss of a complex and multiple tissue compartments. Blood-components products, including platelet-poor plasma (PPP) and platelet-rich plasma (PRP), constitute a therapeutic option for tissue healing. PRP gel has also been used as a scaffold for bone marrow stem cells in Tissue Engineering. This study aimed to evaluate the effect of PPP, PRP activated or not with thrombin and bone marrow stem cells (BMSC) associated with PRP on the healing of replanted teeth. Four adult hybrid dogs were used in this study. PRP and PPP were obtained trough double centrifugation technique of blood collected from the jugular vein of the animals. CTM were obtained from bone marrow aspiration (BMA) and isolated by density gradient centrifugation method. Flow Cytometry Analysis (FCA) was performed after BMA using CD34 and CD90 cells markers. After 30 minutes of extraction, teeth were replanted and, according to the methodological proposal, divided into 5 Groups: Group I – teeth replanted without any material (Control); Group II – teeth replanted with Platelet-poor Plasma (PPP); Group III – teeth replanted with Platelet-rich plasma activated by sodium chloride (PRP); Group IV – teeth replanted with Platelet-rich plasma activated by bovine thrombin and sodium chloride (PRP + TR) and Group V – teeth replanted with bone marrow stem cells associated with PRP activated by sodium chloride (BMSC + PRP). Histological, histomorphometric and immunohistochemical analysis were assessed 120 days after reimplantation. Analysis of variance (ANOVA) and Tukey post-hoc test were used for the statistical analysis, with the level of significance set at 5%. FCA showed 55.98% of CD34+ and 33.28% of CD90+ after BMA. Group V (BMSC + PRP) presented the largest areas of replacement resorption, confirmed... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-03-20Bitstream added on 2014-06-13T20:25:01Z : No. of bitstreams: 1 messora_mr_dr_araca.pdf: 374960 bytes, checksum: 4398fcd4c1b5c4c9e5baa4dac6c14324 (MD5) / O propósito deste estudo foi avaliar, histologicamente, a cicatrização de enxertos de osso alógeno fresco congelado (OAFC) associados ou não ao plasma rico em plaquetas (PRP) em defeitos ósseos criados cirurgicamente em mandíbulas de cães. Defeitos ósseos bilaterais, medindo 1,5 cm de largura x 1 cm de altura, foram criados na borda inferior da mandíbula de 10 cães adultos machos. Os defeitos foram divididos em 3 grupos experimentais: C (controle), OAFC, OAFC/PRP. No Grupo C (n=7), os defeitos foram preenchidos apenas com coágulo sangüíneo. No Grupo OAFC (n=7), os defeitos foram preenchidos com enxertos de OAFC. No Grupo OAFC/PRP (n=6), os defeitos foram preenchidos com enxertos de OAFC associados ao PRP. A eutanásia dos animais foi realizada em 12 semanas pós-operatórias. Foram realizadas análises histológica e histométrica. Os dados foram analisados estatisticamente (ANOVA, Tukey, p < 0,05). Nenhum defeito regenerou completamente com tecido ósseo. Os enxertos de OAFC foram bem incorporados. A quantidade média de osso neoformado e os desvios-padrão dos Grupos C, OAFC e OAFC/PRP foram 70,55 8,01%, 71,31 14,36% e 65,57 11,55%, respectivamente. Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas entre os grupos (ANOVA, p = 0,642). Os enxertos de OAFC foram biocompatíveis e bem incorporados, mas não proporcionaram maior formação óssea que os defeitos controle em mandíbulas de cães. O uso do PRP não promoveu nenhum benefício adicional à cicatrização desses enxertos em 12 semanas pós-operatórias. / The purpose of this study was to histologically analyze the healing of fresh frozen bone allograft (FFBA) with or without platelet-rich plasma (PRP) in bony defects surgically created in mandible of dogs. Bilateral bony defects, measuring 1.5 cm in width vs. 1 cm in height, were created in the inferior border of the mandible of 10 adult male dogs. The defects were divided into three groups: C (control), FFBA and FFBA/PRP. In Group C (n=7), the defect was filled with blood clot only. In Group FFBA (n=7), the defect was filled with FFBA. In Group FFBA/PRP (n=6), the defect was filled with FFBA combined with PRP. All animals were euthanized at 12 weeks post-operative. Histologic and histometric analyses were performed. Data were statistically analyzed (ANOVA, Tukey, p < 0.05). No defect completely regenerated with bone. The FFBA was well incorporated. The mean percentage of newly formed bone and the standard-deviations of Groups C, FFBA and FFBA/PRP were 70.55 8.01%, 71.31 14.36% and 65.57 11.55%, respectively. Statistically significant differences were not found among the groups (ANOVA, p = 0,642). FFBA were biocompatible and well incorporated. However, these grafts did not promote a greater bone formation than the control defects in mandible of dogs. The use of PRP promoted no additional benefit to the healing of these grafts at 12 weeks post-operative.

Os hemoderivados estão recebendo grande enfoque no tratamento de doenças articulares em equinos. O uso de plasma rico em plaquetas (PRP) é suportado pela grande quantidade de fatores de crescimento liberados. Esses fatores de crescimento são liberados quando as plaquetas são ativadas e os grânulos &#945; sofrem degranulação. Além dos grânulos &#945;, as plaquetas também liberam fatores de coagulação e outras glicoproteínas que interferem nos processos inflamatórios, aumentando as quantidades de interleucina e quimiocinas; grânulos densos liberam adenosina difostato, adenosina trifosfato, cálcio, histamina, serotonina e dopamina, que participam da homeostase tecidual; grânulos lambda possuem proteínas lisossomais. O PRP também possui componentes do plasma, incluindo hormônios, eletrólitos, e centenas de outras proteínas. Previamente à avaliação dos efeitos do PRP em articulações lesionadas de equinos, faz-se necessário avaliar seus efeitos em articulações hígidas, uma vez que a presença de todos esses componentes podem afetar os resultados. O objetivo desse trabalho é a obtenção de PRP asséptico e então a avaliação clínica, laboratorial e ultrassonográfica da aplicação intra-articular dessa substância em articulações hígidas. PRP (4 mL) foi injetado na articulação metacarpofalangeana de oito cavalos em um primeiro experimento e em seis cavalos no segundo experimento, enquanto na articulação contralateral foi administrado solução fisiológica (0,9%), 15 dias depois. No primeiro experimento foram utilizadas três aplicações com intervalos de sete dias entre elas, simulando o tratamento clínico comumente preconizado, enquanto no segundo experimento, foi realizada uma única injeção da substância, com intervalos curtos de avaliação, para verificar os efeitos inflamatórios agudos. Presença de dor, calor, efusão e claudicação foram avaliados, bem como análise física do líquido sinovial (LS), contagem de células nucleares, mensuração de prostaglandina E2 (PGE2), interleucina 1&#946;(IL-1&#946;), antagonista do receptor de interleucina-1 (IL-1ra), fator de necrose tumoral (TNF-&#945;), AH (AH) e condroitim sulfato (CS). Os valores de ureia no LS foram utilizados como fator de correção. Todas as alterações descritas a seguir foram em comparação ao grupo SF. Após administração de PRP, observou-se turbidez do LS às 6 horas, piora na qualidade de mucina às 3 horas, aumento na contagem celular às 3, 6, 24 e 48 horas, maiores valores de PGE2 às 3 e 6 horas no grupo PRP em relação ao grupo SF. Todos os valores foram normalizados em 7 dias. As concentrações de CS, AH, IL-1&#946;, IL-1ra e TNF-&#945; não diferiram significativamente. Após três aplicações de PRP, com intervalo de sete dias, não foram observadas alterações articulares clínicas ou laboratoriais. Contudo, o exame ultrassonográfico mostrou aumento na vascularização da membrana sinovial no 14° dia de avaliação no grupo que recebeu PRP, sugerindo neovascularização induzida pelos fatores de crescimento. Esses achados sugerem que o PRP possui ação proinflamatória leve e transitória que não culmina com catabolismo da cartilagem. / Blood derived products are being on foccus in articular disease treatment in horses. The rationale support for the use of platelet-rich plasma (PRP) lies in the concept that PRP provides many growth factors. These growth factors are released when platelets are activated and &#945;-granules degranulated. Beyond &#945;-granules, platelets also release coagulation factors and others glycoproteins that influence inflammation processes by increasing the number of interleukins and chemokines; dense granules release adenosine diphosphate, adenosine triphosphate, calcium, histamine, serotonin and dopamine, that are active in tissue homeostasis; lambda granules release lysosomal proteins. PRP also contains plasma components, including hormones, electrolytes, and hundreds of other proteins. Previously to the evaluation PRP effects on articular diseases of horses, it is necessary to evaluate its effects on healthy joint, because the presence of all these components may affect the results. The aim of the present study is obtain aseptic PRP and than to investigate the clinical, laboratorial and ultrasonographic effects of PRP administration in healthy equine´s joints. PRP (4 mL) was administered to metacarpophalangeal joint of eight horses in the first experiment and in six horses in the second experiment, while in the contralateral joint was administered saline (0,9 %), with 15 days later. In the first experiment, the administration were made with seven days interval between them, simulating clinical treatments commonly recommended, for the second experiment only one injection was administered, on a short evaluation interval, in order to verify the acute inflammatory effects. Pain, heat, effusion and lameness were evaluated, as so as physical analysis of sinovial fluid, score of nucleated cells, prostaglandin E2 (PGE2) measurement , interleukin 1&#946; (IL-1&#946;), receptor antagonist of interleukin 1 (IL-1ra), tumor necrosis factor-&#945; (TNF-&#945;), hialurônico acid (HA) and condroitim sulphate (CS). Urea values in the fluid were also measured and used as a correct factor. All changesmentioned are considered relative to saline control. After PRP administration, turbidity was observed at 6 hours, poor quality of mucin at 3 hours, number of nucleated cells increased at 3, 6, 24 and 48 hours, PGE2 values increased at 3 and 6 hours. All values were normalized in seven days. The concentration of CS, HA, IL-1&#946;, IL-1ra and TNF-&#945; did not significantly vary. After three applications of PRP with seven days intervals, articular changes were not observed in clinical or laboratorial findings. However, in PRP group, ultrasonographic examination showed vascular increase of synovial membrane on the 14° day of evalution, suggesting neovascularization induced by growth factors. These findings suggest that PRP had a transitory and low pro-inflammatory action that did not lead to cartilage catabolism.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-23Bitstream added on 2014-06-13T19:57:14Z : No. of bitstreams: 1 campos_n_me_araca_parcial.pdf: 374524 bytes, checksum: 0e80098f70073718b0c1a9511ce69881 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-07-02T12:36:04Z: campos_n_me_araca_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-07-02T12:37:29Z : No. of bitstreams: 1 000674476_20250723.pdf: 374303 bytes, checksum: e8c36bf585abbff4e58e95157dbe1d90 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este estudo avaliou, histomorfometricamente, o processo de cicatrização em defeitos de fenestração periodontal, criados cirurgicamente em ratos e tratados com Plasma Rico em Plaquetas (PRP), Laser de Baixa Intensidade (LBI) ou a associação de ambos. Defeitos de fenestração periodontal foram realizados na mandíbula de 80 ratos, divididos em 4 grupos: Grupo C (Controle) – o defeito foi preenchido somente com coágulo sanguíneo; Grupo PRP – o defeito foi preenchido com PRP; Grupo LBI – o defeito recebeu a aplicação de LBI, foi preenchido com coágulo sangüíneo e irradiado novamente; Grupo PRP/LBI – o defeito recebeu a aplicação de LBI, foi preenchido com PRP e irradiado novamente. Os animais foram submetidos à eutanásia aos 10 e 30 dias pós-operatórios. A porcentagem de preenchimento ósseo (NO), densidade do novo osso (DNO), formação de novo cemento (NC) e a extensão remanescente do defeito (ERD) foram histometricamente avaliadas. Os dados foram submetidos à análise estatística (análise de variância, Tukey, p < 0,05). Aos 10 dias, o Grupo PRP apresentou ERD significativamente menor que o Grupo C. Aos 30 dias, o Grupo PRP apresentou NO e DNO significativamente maiores que o Grupo C. Todos os espécimes do Grupo C, aos 10 e 30 dias, apresentaram ausência total de formação de cemento. Já os espécimes dos grupos LBI, PRP e PRP/LBI apresentaram, aos 30 dias, significativa neoformação de cemento. LBI, PRP e PRP/LBI promoveram formação de cemento em defeitos de fenestração periodontal aos 30 dias. O PRP acelerou a regeneração óssea aos 10 dias e resultou em densidade e volume ósseos significativamente maiores que o LBI e o controle aos 30 dias. A associação PRP/LBI não foi vantajosa quando comparada ao uso isolado dessas terapias / This study histomorphometrically analyzed the influence of platelet-rich plasma (PRP), low-level laser therapy (LLLT) or their combination on the healing of surgically created periodontal fenestration defects in rats. Periodontal fenestration defects were created in the mandible of 80 rats divided into 4 groups: Group C (control) – the defect was filled by blood clot only; Group PRP – the defect was filled with PRP; Group LLLT – the defect received laser irradiation, was filled with blood clot and then irradiated again; Group PRP/LLLT – the defect received laser irradiation, was filled with PRP and then irradiated again. Animals were euthanized at either 10 or 30 days postoperatively. The percentage of bone fill (NB) and density of newly formed bone (DNB), new cementum formation (NC) and the extension of the remaining defect (ERD) were histometrically evaluated. Data were statistically analyzed (analysis of variance; Tukey p < 0.05). At 10 days, Group PRP presented ERD significantly lower than Group C. At 30 days, Group PRP presented NB and DNB significantly greater than Group C. Cementum formation was not observed in any specimen of Group C at either 10 or 30 days. The specimens of groups LLLT, PRP and PRP/LLLT showed significant formation of new cementum at 30 days. LLLT, PRP and PRP/LLLT promoted new cementum formation in periodontal fenestration defects at 30 days. PRP enhanced bone regeneration at 10 days and resulted in bone volume and density significantly greater than LLLT and control at 30 days. The combination PRP/LLLT did not show additional effects when compared to the use of each therapy separately

Made available in DSpace on 2016-07-01T13:10:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-08. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:13:43Z : No. of bitstreams: 1 000866933_20170204.pdf: 402819 bytes, checksum: 62d187d37e44d6a246ccce84bcfdddc7 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-02-10T12:53:31Z: 000866933_20170204.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-02-10T12:54:12Z : No. of bitstreams: 1 000866933.pdf: 1093450 bytes, checksum: 3a386b29a7bb7aa4f0c3076928611c70 (MD5) / O objetivo do presente estudo foi avaliar clínica e histologicamente, os efeitos do uso do PRP na viabilidade de enxertos cutâneos autólogos e homólogos de espessura total em coelhos. Para isso foram constituídos quatro grupos experimentais (n=9), designados como: G1: o enxerto autólogo tratado com o PRP; G2: enxerto autólogo; G3: enxerto homólogo tratado com PRP e G4: enxerto homólogo. Deste modo, cada coelho foi submetido ao tratamento com PRP e seu controle dos enxertos autólogos e homólogos, totalizando 36 amostras. Todas a etapas foram documentadas para a avaliação clínica macroscópica e no 19º dia foi coletado da área central, um fragmento de cada enxerto para a avaliação histomorfológica. O tratamento do enxerto autólogo com o PRP promoveu influência positiva na fase inicial ou de pega do enxerto, demonstrada por coloração avermelhada à avaliação macroscopia e aspecto cosmético comparado aos demais tratamentos. Na avaliação histomorfométrica, o número de macrófagos foi superior nos enxertos homólogos em relação aos autólogos. Porém, não houve diferença no número de macrófagos e fibroblastos com a instituição do tratamento com PRP. O tratamento do enxerto autólogo com o PRP, na forma líquida, promove influência positiva na fase inicial ou de pega do enxerto / The objective of this study was to evaluate clinically and histologically, the effect of PRP on the viability of the autologous and homologous full thickness grafts in rabbits. Four experimental groups (n=9) were studied and designated as G1: autologous graft treated with PRP; G2: autograft; G3: homograft treated with PRP and G4: homograft. Each rabbit was subjected to treatment with PRP and its control of autologous and homologous grafts, representing 36 samples. All steps were documented for the macroscopic clinical assessment and at 19th postoperative days, skin biopsy was collected from the central area, for histomorphological evaluation. The treatment of graft with PRP resulted positive influence in the initial phase or handle of the graft, demonstrated by the reddish macroscopic and cosmetic appearance compared to others treatments. The histomorphometric evaluation, the number of macrophages in the grafts was higher in homologs compared to autologous. However, there was no difference in the number of macrophages and fibroblasts with the PRP treatment. The treatment of the graft with PRP in liquid form, promotes a positive influence on the initial phase or take of the graft

Submitted by ISABELE SILVEIRA ROSA null (isabelesrv@gmail.com) on 2016-08-08T14:40:35Z No. of bitstreams: 1 IsabeleSilveiraRosaVanniMestrado - ok pdf.pdf: 3226160 bytes, checksum: 4bfd14d4c9a8ade0e472c57642b58870 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-08-10T12:14:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 vanni_isr_me_bot.pdf: 3226160 bytes, checksum: 4bfd14d4c9a8ade0e472c57642b58870 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-10T12:14:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 vanni_isr_me_bot.pdf: 3226160 bytes, checksum: 4bfd14d4c9a8ade0e472c57642b58870 (MD5) Previous issue date: 2016-07-18 / Não recebi financiamento / Muitas especialidades médicas têm utilizado o Plasma Rico em Plaquetas (PRP) em diferentes modalidades terapêuticas, como está ocorrendo com a Ortopedia e em Cirurgia Plástica. No entanto, a denominação utilizada para o PRP é muitas vezes equivocada. Diante do crescente número de especialidades médicas usando PRP ou Hormônios Derivados de Plaquetas (HDP) este trabalho foi delineado. Objetivo: compreende três etapas: 1) Levantamento bibliográfico em base de dados com a palavra-chave: platelet rich plasma com intuito de avaliar criticamente os artigos publicados na literatura em revistas com Fator de Impacto (FI)≥1; 2) Obter PRP, Concentrado de Plaquetas (CP) e HDP de indivíduos saudáveis, pela técnica de lisado plaquetário, após a utilização de agonista e congelamento / descongelamento (N=10) e 3) Avaliar o desempenho destes preparados como substituto do Soro Fetal Bovino na cultura de Células Tronco Mesenquimais humanas (CTMh). Casuística e Métodos: Os indicadores monitorados foram: idade, sexo, tipagem ABO/RhD, fenotipagem eritrocitária Rh, Kell e determinação de fatores de crescimento pelo sistema Multiplex-Milliplex®: PDGF- AA, RANTES/CCL5, PAI-1 (total), VEGF-A, FGF-1/FGF-ácido, FGF-2/FGF-básico, EGF, Angiopoietina-2, Fibrinogênio e Fator von Willebrand, estes dosados nas 3 preparações: PRP, CP e HDP. Todos os indicadores monitorados foram realizados análise estatística. Resultados: Foram analisados 50 artigos entre 2012-2016, destes, 29 com a palavra-chave platelet-rich plasma, 14 platelet lysate (PL) e 7 platelet growth factor (PGF). Os artigos publicados com a palavra-chave PL são de periódicos com maior FI e maior coerência com a metodologia, seguida do PGF e PRP. Contata-se que a maioria dos trabalhos com a terminologia PRP foi empregada de forma equivocada. Estes indicadores registram que não existe correlação entre a contagem plaquetária e a dosagem de hormônios. A idade dos indivíduos está inversamente relacionada com a concentração de fator, à exceção do FGF. Não há correlação da quantidade de fatores de crescimento e sexo. Indivíduos do grupo sanguíneo A, e fenótipo ee são melhores secretores de hormônios de crescimento. Quando se comparam os 3 métodos analisados, o CP e o HDP são estatisticamente superiores ao PRP quanto à dosagem de fatores de crescimento. A análise desempenho dos preparados, na concentração de 20% quando comparado com o Soro Fetal Bovino na mesma concentração, identifica que o melhor desempenho quantitativamente foi CP>PRP>HDP=CTLE. No entanto a análise histológica evidencia um grande número de células aderidas ao scaffold de fibrina, com desempenho nitidamente superior para o HDP. Conclusão: A maioria dos trabalhos publicados usa a terminologia PRP incorretamente. Levando-se em consideração a quantificação dos hormônios plaquetários dosados e o desempenho em cultura celular as melhores técnicas são CP e HDP, ficando o PRP em desvantagem. / Diversity medical specialties have been using Platelet Rich Plasma (PRP) therapy form as is happening with the Orthopedics and Plastic Surgery. However, the name used for the PRP is often used wrongly. This work was outlined considering the growing number of medical specialties using PRP or platelet-derived hormones (PDH). Objective: The work consisted of three steps: 1) Bibliographic search with the key word PRP in order to evaluate the articles published in journals with Impact Factor (IF) ≥1; 2) obtaining of PRP, platelet concentrate (PC) and PDH from healthy individuals using the platelet lysate technique after use agonist and freeze / thaw (N = 10); 3) evaluate the performance of these preparations as substitute for fetal bovine serum in culture of human mesenchymal stem cells. Methods: The indicators monitored were: age, sex, ABO / RhD, erythrocyte phenotyping Rh, Kell and determination of growth factors by Multiplex-Milliplex® system(PDGF-AA, RANTES / CCL5, PAI-1 (total), VEGF-A, FGF-1 / FGF-acid, FGF-2 / FGF-basic, EGF, Angiopoietin-2, fibrinogen and Factor von Wilebrand. The monitored indicators were performed statistical analysis. Results: These parameters were measured in three preparations: PRP, PC and PDH. It was analyzed 50 articles between 2012-2016, of these, 29 with the platelet-rich plasma password, 14 platelet lysate (PL) 7 and platelet growth factor (PGF). Articles published with the keyword PL are journals with higher IF and greater consistency with the methodology followed by PGF and last PRP. It was observed that most of the work with the PRP terminology was used wrongly. These indicators showed that there is no correlation between the platelet count and the dosage of hormones. The age of individuals is inversely related with the concentration of factors, excepting FGF. There is no correlation between the amount of growth factors and gender. Individuals belonging to blood group A and no phenotype E are better secreting of growth hormones. When comparing the three methods analyzed, PC and PDH are statistically higher than PRP on the dosage of growth factors. Compared with 20% of Fetal Bovine Serum, the performance was quantitatively better to PC> PRP> CTL=PDH on the viability of suspension cell. However, the histological analysis showed a large number of cells attached to the fibrin scaffold with higher performance to the PDH. Conclusion: The majority of published studies using PRP terminology are incorrectly. Considering the quantitation of platelet hormones and the performance in cell culture, the best techniques are PC and PDH.

Orientador: Marco Antonio Alvarenga / Banca: Marco Antonio Alvarenga / Banca: José Antonio Dell'Aqua Jr. / Banca: Rodrigo Costa Mattos / Resumo: A endometrite persistente pós-cobertura (EPPC) é a principal causa de redução da fertilidade nas éguas, causando impactos importantes dentro do mercado do cavalo. Os tratamentos comumente utilizados para EPPC visam apenas minimizar os fatores predisponentes a sua instalação, não atuando diretamente no processo inflamatório. Com o intuito de reduzir a resposta inflamatória, estudos recentes têm demonstrado um aumento da fertilidade de animais acometidos por EPPC, quando se utiliza agentes imunomoduladores. O PRP é modulador da resposta inflamatória que está sendo largamente utilizado na medicina veterinária. Este concentrado de plaquetas contém diversos fatores de crescimento que atuam diretamente nos mediadores inflamatórios, reduzindo o processo e promovendo reparação tecidual. O PRP é benéfico no tratamento de inflamações tendíneas e osteoarticulares, modulando a inflamação e acelerando a regeneração do tecido lesionado. Mais recentemente alguns pesquisadores demonstraram o efeito benéfico do PRP em tratamentos intrauterinos de éguas. Desta forma o presente estudo tem por objetivo revisar os aspectos relacionados a EPPC assim como ao PRP e seu mecanismo de ação. / Abstract: The persistent breeding-induced endometritis (PBIE) is the main cause of decrease fertility in the horses, thereby causing significant impact in the horse's market. The treatments commonly used for PBIE view only minimize the predisposing factors and do not act directly in the inflammatory process. Aiming to reduce the inflammatory response, recent studies have shown an increase in fertility of animals with PBIE when used immunomodulatory agents. A modulator of the inflammatory response that has been largely used in veterinary medicine is the platelet-rich plasma (PRP). This platelet concentrate contains many growth factors which act directly on inflammatory mediators, reducing process and promoting tissue repair. Several studies have shown that PRP is beneficial in the treatment of osteoarticular and tendon inflammations, modulating inflammation and accelerates the regeneration of injured tissue. More recently some researchers have demonstrated the beneficial effect of PRP in intrauterine treatment of mares. Thus, the present study aimed to do a literature review on the aspects related to PBIE, as well as the PRP and its mechanism of action. / Mestre

Resumo:o presente trabalho teve por objetivo isolar células mesenquimais da geléia de Wharton do cordão umbilical canino e avaliar, in vitro, o efeito do plasma rico em plaquetas (PRP) e da matriz óssea desmineralizada (MOD) na diferenciação osteogênica destas células na ausência de meio osteoindutor. As células foram isoladas e caracterizadas como células mesenquimais indiferenciadas com fenótipo semelhante a de fibroblastos e fenótipo característico confirmado pela citometria de fluxo com CD44+, CD105+, CD271+, CD34- e CD45-; além da habilidade de diferenciação em adipócitos, condrócitos e osteócitos. Com exceção do grupo controle (células mesenquimais), em todos os grupos, G-PRP (células mesenquimais e PRP), G-MOD (células mesenquimais e MOD) e G-PRP+MOD (células mesenquimais e PRP + MOD), houve diferenciação osteoblástica com produção de matriz óssea mineralizada, confirmada pela coloração vermelho de Alizarina. A dosagem de fosfatase alcalina (FA) aumentou aos 14 dias em todos os grupos, com redução temporal subsequente. Proteínas ósseas foram expressas na reação em cadeia da polimerase em tempo real e puderam confirmar a diferenciação óssea em todos os grupos. A osteopontina teve sua maior expressão no G-PRP aos sete dias, seguido do grupo G-PRP+MOD... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract:This study aimed to isolate MSCs from canine Wharton's jelly umbilical cord and evaluate in vitro the effect of PRP and the MOD in osteogenic differentiation of these cells in the absence of osteogenic medium. Cells were isolated and characterized as undifferentiated mesenchymal cells with a phenotype fibroblasts-like and characteristic phenotype of confirmed by flow cytometry with CD44 +, CD105 +, CD271 +, CD34-and CD45-, plus the ability to differentiate into adipocytes, chondrocytes and osteocytes. Except for the control group (MSCs), in all groups, G-PRP (PRP and MSCs), G-DBM (DBM and MSCs) and G-PRP + DBM (MSCs and PRP + DBM) was differentiation osteoblastic with production of mineralized bone matrix confirmed by Alizarin red staining. The measurement of alkaline phosphatase (AP) increased up to 14 days in all groups. Bone proteins were expressed in the polymerase chain reaction in real time and were able to confirm the differentiation bone in all groups. Osteopontin had its greatest expression in G- PRP to seven days followed by G-PRP + DBM, at other times the G-PRP + DBM had higher expression than the other groups. The osteocalcin and Runx2 were expressed more intensely in the G-PRP + DBM at the end of the experiment. It can be concluded that the PRP and DBM are capable of promoting osteogenesis mesenchymal cells in Wharton's jelly of the umbilical cord with canine, with advantage in the presence of DBM / Orientador: Alexandre Lima de Andrade / Banca: Rita Cássia Menegati Dornelles / Banca: Márcio Mateus Beloti / Doutor

Orientador: Cláudia Valéria Seullner Brandão / Banca: Sheila Canevese Rahal / Banca: Carlos Roberto Teixeira / Banca: Fernando de Biasi / Banca: Bruno Watanabe Minto / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar clínica e histologicamente, os efeitos do uso do PRP na viabilidade de enxertos cutâneos autólogos e homólogos de espessura total em coelhos. Para isso foram constituídos quatro grupos experimentais (n=9), designados como: G1: o enxerto autólogo tratado com o PRP; G2: enxerto autólogo; G3: enxerto homólogo tratado com PRP e G4: enxerto homólogo. Deste modo, cada coelho foi submetido ao tratamento com PRP e seu controle dos enxertos autólogos e homólogos, totalizando 36 amostras. Todas a etapas foram documentadas para a avaliação clínica macroscópica e no 19º dia foi coletado da área central, um fragmento de cada enxerto para a avaliação histomorfológica. O tratamento do enxerto autólogo com o PRP promoveu influência positiva na fase inicial ou de "pega" do enxerto, demonstrada por coloração avermelhada à avaliação macroscopia e aspecto cosmético comparado aos demais tratamentos. Na avaliação histomorfométrica, o número de macrófagos foi superior nos enxertos homólogos em relação aos autólogos. Porém, não houve diferença no número de macrófagos e fibroblastos com a instituição do tratamento com PRP. O tratamento do enxerto autólogo com o PRP, na forma líquida, promove influência positiva na fase inicial ou de "pega" do enxerto / Abstract: The objective of this study was to evaluate clinically and histologically, the effect of PRP on the viability of the autologous and homologous full thickness grafts in rabbits. Four experimental groups (n=9) were studied and designated as G1: autologous graft treated with PRP; G2: autograft; G3: homograft treated with PRP and G4: homograft. Each rabbit was subjected to treatment with PRP and its control of autologous and homologous grafts, representing 36 samples. All steps were documented for the macroscopic clinical assessment and at 19th postoperative days, skin biopsy was collected from the central area, for histomorphological evaluation. The treatment of graft with PRP resulted positive influence in the initial phase or "handle" of the graft, demonstrated by the reddish macroscopic and cosmetic appearance compared to others treatments. The histomorphometric evaluation, the number of macrophages in the grafts was higher in homologs compared to autologous. However, there was no difference in the number of macrophages and fibroblasts with the PRP treatment. The treatment of the graft with PRP in liquid form, promotes a positive influence on the initial phase or "take" of the graft / Mestre