Orientador: Carlos Alberto de Souza Costa / Banca: Jacques Eduardo Nör / Banca: Flávio Fernando Demarco / Banca: Joni Cirelli / Banca: Elisa Maria Aparecida Giro / Resumo: Luxações dentárias resultam em injúrias ao feixe vásculo-nervoso, o que pode causar redução significante no nível de oxigênio das polpas dentárias, ou mesmo morte deste tecido conjuntivo especializado. O conhecimento dos mecanismos envolvidos na resposta das células pulpares à hipóxia pode melhorar o prognóstico dos tratamentos das luxações dentárias. O objetivo deste trabalho foi avaliar o comportamento de células-tronco (DPSC) e de fibroblastos (HDPF) de polpas dentárias humanas em condições de hipóxia e a capacidade destas em estimular a proliferação e formação de tubos capilares por células endoteliais microvasculares dérmicas humanas (HDMEC). As análises do western blot e imunocitoquímica foram realizadas para avaliar o efeito da hipóxia na ativação do fator de transcrição induzido pela hipóxia 1 (HIF-1alfa). A expressão dos fatores de crescimento vascular endotelial (VEGF) e fibroblástico básico (bFGF) foi avaliada pelos testes de imunoensaio ELISA. O efeito do HIF-1alfa na expressão do VEGF foi avaliado pelo tratamento das células DPSC e HDPF com 40 μM YC-1, inibidor do HIF-1alfa. Para a avaliação da angiogênese in vitro, os testes de proliferação celular (WST-1) e de formação de tubos capilares em gel de colágeno foram realizados após tratamento das células HDMEC com os meios de acondicionamento das células DPSC ou HDPF, em condições de normóxia ou hipóxia.. A análise dos dados obtidos foi realizada por testes estatísticos não-paramétricos com nível de significância de 5%. Aumento da atividade do HIF-1alfa e da expressão de VEGF foram observados nas células DPSC e HDPF em condições de hipóxia. Entretanto, não foram observadas alterações nos níveis de expressão de bFGF. A expressão do HIF-1alfa foi inibida... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Dental luxations can result in the severing of the dental pulp and the creation of a hypoxic environment that might lead to the death of the pulp tissue. Improved understanding of the mechanisms underlying the response of dental pulp cells to hypoxic conditions might lead to better treatment of dental luxations. The purpose of this work was to evaluate the behavior of Dental Pulp Stem Cells (DPSC) and Human Dental Pulp Fibroblasts (HDPF) under hypoxia and their ability to stimulate proliferation and sprouting of endothelial cells. Western blots and immunohistochemistry were used to evaluate the effect of hypoxia on the activation of the transcriptional factor HIF-1α. Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) and Basic Fibroblastic Growth Factor (bFGF) expression was evaluated by ELISA. The effect of HIF-1αon VEGF expression was evaluated by treating DPSC or HDPF with 40 μM YC-1, an inhibitor of HIF-1α. To evaluate the angiogenic potential of dental pulp cells in vitro, human dermal microvascular endothelial cells (HDMEC) were treated with conditioned medium from DPSC or HDPF in normoxia or hypoxia. Sprouting and WST-1 assays were used to evaluate capillaries tubes-like formation and cell proliferation rate,respectively. The statistic analysis was performed by non-parametric tests. HIF-1αactivity and VEGF expression were up-regulated in DPSC and HDPF under hypoxic conditions. However, no changes in the expression levels of bFGF were observed. YC-1 40μM was able to inhibit HIF-1alpha in both cell lines and it also reduced VEGF expression in DPSCs in hypoxia. HDPF under hypoxia increased HDMEC sprouting by 50% when compared to HDPF in normoxia, and by 30% when compared to DPSC in hypoxia. Notably, HDPF under hypoxia stimulated HDMEC proliferation by 30% when compared to DPSC in hypoxia. It was concluded... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2010. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-02-23T14:18:11Z No. of bitstreams: 1 2010_JulianaDuarteBittar.pdf: 18834026 bytes, checksum: 3b66d4718f66fab5f79787487d272e58 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2011-02-25T14:42:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_JulianaDuarteBittar.pdf: 18834026 bytes, checksum: 3b66d4718f66fab5f79787487d272e58 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-02-25T14:42:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_JulianaDuarteBittar.pdf: 18834026 bytes, checksum: 3b66d4718f66fab5f79787487d272e58 (MD5) / Para o procedimento de capeamento pulpar direto, a Odontologia utiliza materiais sintéticos com o objetivo de manter a vitalidade do tecido pulpar e substituir a estrutura mineralizada perdida por cárie ou trauma. O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações ocorridas no tecido pulpar e a formação de estrutura mineralizada formada em resposta a diferentes materiais em dentes cultivados ex vivo. Dentes terceiros molares humanos (n=45) em fase de formação radicular, com o objetivo de comparar a resposta do tecido pulpar ao capeamento direto utilizando diferentes materiais odontológicos: agregado trióxido mineral, hidróxido de cálcio, cimento de óxido de zinco-eugenol e cimento de ionômero de vidro. As amostras foram cultivadas após exposição pulpar por 1, 14 e 28 dias e em seguida foram processadas para análise histológica. Tipo de inflamação e sua intensidade, hiperemia, necrose, camada de células odontoblásticas, continuidade e espessura da estrutura mineralizada formada foram analisados. Os grupos não se diferiram estatisticamente quanto aos aspectos da resposta pulpar avaliados, nem em relação a espessura da estrutura mineralizada formada. Porém os grupos tratados com hidróxido de cálcio e cimento de ionômero de vidro apresentaram formação de estrutura mineralizada completa após 14 dias, ao contrário dos outros materiais utilizados. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Direct pulp capping is the use of a biocompatible material on pulp that has been exposed during removal of caries or by traumatic injuries. This study was based on an ex vivo entire tooth culture model of human immature third molars. Direct pulp capping was made in 45 teeth third molars, using calcium hydroxide, mineral trioxide aggregate, zinc oxide eugenol cement and glass-ionomer cement. Then the pulp response and the mineralized tissue were analyzed, after 1, 14 and 28 days of culture, but in the parameters’ analyzed there weren´t difference between the odontologic materials.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2011. / Submitted by claudia teixeira (claudiadtx@gmail.com) on 2011-06-22T00:06:57Z No. of bitstreams: 1 2010_DanielaFerreiraAraújo.pdf: 426000 bytes, checksum: 71813e9376cc8c000b705365aa96ba71 (MD5) / Approved for entry into archive by Elna Araújo(elna@bce.unb.br) on 2011-06-29T14:09:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_DanielaFerreiraAraújo.pdf: 426000 bytes, checksum: 71813e9376cc8c000b705365aa96ba71 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-29T14:09:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_DanielaFerreiraAraújo.pdf: 426000 bytes, checksum: 71813e9376cc8c000b705365aa96ba71 (MD5) / A polpa dentária, por ser fonte de células-tronco multipotentes, tem merecido inúmeras pesquisas para se conhecer melhor suas características. Este estudo teve como objetivo sistematizar os conhecimentos, avanços científicos, limitações e perspectivas relacionados à aplicação de células-tronco de tecido pulpar (Artigo 1: "Células-tronco da polpa dental- Atualidades e perspectivas"); e avaliar se os dentes extraídos e mantidos em temperatura e pressão ambientes por diferentes períodos de tempo ainda apresentavam suas células viáveis (Artigo 2: Cultura de células de polpa dental humana após diferentes períodos pós-exodontia). O Artigo 1 foi resultado de uma revisão da literatura que incluiu artigos que abordavam os tópicos relacionados ao desenvolvimento das possibilidades de utilização da polpa dentária para cultivo e viabilidade de células-tronco. No Artigo 2, foi realizado trabalho experimental com utilização de 21 dentes permanentes hígidos, divididos em 5 grupos de acordo com o tempo aguardado para colocação da polpa em meio de cultura após a exodontia. Os tempos testados foram: imediatamente; 30 minutos, 1 hora, 2 horas e 5 horas. Realizou-se análise morfológica, ensaio de MTT e contagem celular para efeito de comparação da viabilidade celular. O comportamento de todos os grupos foi semelhante. Concluiu-se que as possibilidades de uso e o potencial regenerativo das células do tecido pulpar são vastos, e por isso, é importante a atualização dos conhecimentos, avanços científicos, limitações e perspectivas relativos à sua aplicação (Artigo 1). Além disso, as conclusões sobre a viabilidade das células pulpares após a exodontia são que aguardar até 5 horas para remover o tecido pulpar e estabelecer a cultura não impede a proliferação celular (Artigo 2). _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Dental pulp, as a source of multipotent stem cells, has motivated numerous researches to better understand its characteristics. The study aimed to systematize knowledge, scientific advances, limitations and perspectives related to the application of stem cells from pulp tissue (Article 1: "Dental pulp stem cells- Update and perspectives”); and to evaluate whether the extracted teeth that were maintained in ambient temperature and pressure for different periods of time would still present their cells viable (Article 2: Culture of human dental pulp cells after different times post-extraction). Article 1 was the result of a review. In Article 2, the experimental research was performed with 21 permanent healthy teeth, which was divided into five groups according to the time projected for placing the pulp into the culture medium after the extraction. The experimental times were: immediately, 30 minutes, 1 hour, 2 hours and 5 hours. Morphological analysis, MTT assay and cell counting were evaluated. The behavior of all groups was similar. It was concluded that the possibilities of use and regenerative potential of dental pulp cells are vast, and therefore the update of knowledge, scientific advances, limitations and prospects for its implementation is important (Article 1). Moreover, conclusions about the viability of pulp cells after extraction is that to wait until 5 hours to remove the pulp tissue and establish a culture does not impair their proliferation (Article 2).

Orientador: Luiz Valdrighi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-21T00:45:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bueno_CarlosEduardodaSilveira_M.pdf: 3316193 bytes, checksum: bb28101b750557cd6b5c7d1a0a4b1f12 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: o objetivo deste trabalho foi a avaliação "in vitro" da efetividade de cinco solventes de guta-percha e de quatro técnicas utilizadas na desobturação de canais radiculares de dentes humanos extraídos. Numa primeira etapa, analisou-se a atuação dos seguintes solventes : clorofórmio, eucaliptol, halotano, terebintina e xilol, nos tempos de 5 e 10 min., em relação à perda de massa dos cones de guta-percha testados. Constatou-se uma equivalência estatística de efetividade do clorofórmio, halotano e xilol, e uma menor efetividade do eucaliptol, no tempo teste de 5 min, e uma superioridade do clorofórmio, seguido pelo halotano e xilol, e posteriormente, pelo eucaliptol, no tempo teste de 10 min., enquanto que a terebintina, nos dois tempos, proporcionou apenas o amolecimento da guta-percha e nenhuma dissolução dos cones testados. Na segunda fase deste trabalho, analisou-se a efetividade na remoção de material obturador e o tempo gasto na desobturação de canais radiculares retos em 4 técnicas distintas, tendo como sol vente auxiliar o clorofórmio, da seguinte forma: Grupo I - Limas + Solvente; Grupo II - Gates-Glidden + Limas + Solvente; Grupo III - Gates-Glidden + Ultra-som + Solvente e Grupo IV Gates-Glidden + Canal Finder + Solvente. Segundo os testes realizados, o Grupo II supera os outros tanto em quantidade de limpeza obtida quanto em tempo gasto na desobturação, enquanto que os outros são menos efetivos e, estatisticamente, equivalentes entre si. Analisou-se também o uso de um procedimento que foi denominado de "Complementar", que consistiu no uso de um algodão embebido em solvente, e depois de um algodão seco, envoltos numa lima tipo Hedstrõen, após o emprego de cada técnica, por um tempo determinado. Este procedimento foi realizado no intuito de descobrir uma maneira simples e rápida de aumentar a limpeza dos canais, antes de iniciar a reinstrumentação dos mesmos. Os resultados obtidos demonstram, em média, um aumento de 60% na limpeza dos canais, em todas as técnicas testadas, após a aplicação deste procedimento / Abstract: The purpose of this paper was an "in vitro" evaluation of the efficiency of five usual gutta-percha solvents and four techniques of removing gutta-percha from root canais. At first, the efficacy of the following solvents was appreciated : chloroform, eucalyptol, halothane, turpentine oi! and xylene, according to the loss of gutta percha tested points mass, after tive and ten minutes. After five minutes, an estatistic equivalency between chloroform, halothane and xylene, and a minor efficacy of eucalyptol was observed. After ten minutes, a superiority of chloroform, followed by halothane and xylene, and finally, eucalyptol, was noted. The turpentine oil just softened the gutta-percha points (with no loss of mass) after five and ten minutes. In the second part of this study, the efficacy of four techniques of removing gutta-percha from root canal and the time lost in this removing, having the chloroform as auxiliar solvent, was evaluated in the following way: Group I - Files + Solvent; Group II - Gates-Glidden + Files + Solvent; Group III - Gates-Glidden + Ultrasonic + Solvent; Group IV - Gates-Glidden + Canal Finder + Solvent. According to the realized tests, the Group II was better than the others, which were estatisticaly inferior and equivalent. The Group II was superior in cleaning and also in time lost in removing gutta-percha. The use of a procedure that was called "Complement" was also evaluated. That consisted of a piece of cotton absorbed in chloroform and then a dry cotton, wrapped in a Hedstrõen file, after each technique, during an especific time. This procedure was realized to try to find a simple and fast way to improve the cleaning of root canais, before starting their reinstrumentation. The results showed, as an average, an increase of 60% in root canais cleaning, in all of the tested techniques, after the realization of this "Complement" / Mestrado / Endodontia / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Mario Roberto Vizioli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-21T20:51:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ito_ValdirSeije_D.pdf: 3662989 bytes, checksum: b001af023d29fce3ed89294e3e1fe078 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A ciclosporina inibe a produção de IL-2, e é um potente imunossupressor na prevenção e rejeição de transplantes de órgãos humanos. Os efeitos da ciclosporina no desenvolvimento de reações inflamatórias é controverso. Inflamação periapical foram estudados em ratos normais, jovens e adultos todos tratados com ciclosporinas. Ratos tratados com ciclosporina foram injetados via subcutânea diariamente com 10 mg/kg de peso corporal durante todo período experimental ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Cyclosporin inhibits the production of IL-2, and is the most effective immunosupressor to prevent rejection of human organ transplants.The effects of cyclosporin in the development of the inflammatory process is controversial. Periapical infIammation was studied in young and adults normal and cyclosporin treated rats. Cyclosporin treated rats were injected subcutaneously daily with 10 mg/kg of body weight during the whole experimental period ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Doutor em Ciências

Orientador: Maria Cristina Volpato / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-08T06:11:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Branco_FilipePolese_D.pdf: 1567364 bytes, checksum: 49e978a109d02d28d81bb848765787cd (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O uso do pulp tester ainda não está padronizado na literatura. Assim, o objetivo deste trabalho foi determinar as condições ideais para determinação do limiar basal de resposta pulpar a estímulo elétrico. Duzentos e cinqüenta e seis voluntários sadios e com dentes responsíveis a estímulo elétrico foram selecionados e divididos em 7 estudos. Estímulo elétrico foi aplicado aos dentes em testes sucessivos, com intervalo de 2 minutos entre eles. As variáveis estudadas foram: número de medidas e de voluntários, necessidade de secagem do dente, influência da solução condutora, do operador, do período do dia e da temperatura ambiente, do grupo étnico-racial do voluntário, e do uso de ácido mefenâmico e nimesulida. Foi também avaliada a sensibilidade dolorosa dos voluntários por meio da escala analógica visual (EAV). Os resultados de limiar basal de resposta pulpar foram submetidos aos testes t e de Tukey e os de EAV aos testes de Wilcoxon e Friedman (a=0,05). A média obtida com 3 medidas não diferiu das obtidas com número maior de medidas; a secagem prévia do dente e o uso de gel de flúor neutro levaram a menores valores de limiar pulpar; voluntários de ambos os gêneros apresentam maiores valores de limiar pulpar quando avaliados por operador do gênero feminino. Não houve diferença no limiar pulpar entre os horários 8h, 11h, 14h e 17h, entre as sessões com temperatura ambiente inferior a 15oC ou superior a 25oC, bem como entre as raças amarela, branca e preta, e após administração de dose única de ácido mefenâmico ou de nimesulida quando comparados a placebo. Concluiu-se que para a determinação do limiar basal pulpar após aplicação de estímulo elétrico deve-se fazer a média de pelo menos 3 medidas consecutivas e utilizar no mínimo 20 voluntários; a secagem prévia do dente pode levar à melhor condução do impulso; o gel de flúor neutro deve ser a substância condutora de escolha; o gênero do operador pode exercer influência nos voluntários; o limiar basal pulpar não apresenta ritmo circadiano e não sofre interferência da temperatura ambiente, da etnia do voluntário ou da nimesulida e ácido mefenâmico, administrados em dose única / Abstract: There are some unclear aspects about electrical pulpal threshold measure. The objective of this study was to determine the ideal conditions for pulpal threshold measure. Two hundred and fifty six healthy volunteers with teeth able to respond to electrical stimulus were selected and divided in 7 studies. Pulpal threshold was evaluated by means of an electric pulp tester, with a 2min interval between tests. The variables studied were: number of measures and volunteers, and the influence of moisture, conductive media, gender of the operator, room temperature, period of the day, volunteers¿ ethnicity, and administration of mefenamic acid and nimesulide. Pain sensibility was evaluated by Analogue Visual Scale (VAS). Pulpal threshold data were evaluated by ANOVA and t and Tukey tests; VAS results were submitted to Wilcoxon and Friedman tests. Results: the mean obtained with 3 measures was not dfferent than the obtained with higher number of measures; lower pulpal threshold means were obtained with previous dryness of teeth and neutral fluoride gel as conductive media; male and female volunteers presented higher pulpal threshold mean when evaluated by female operator; no difference in pulpal threshold were observed among ethnic Brazilian groups, yellow, white, and black, among periods of the day (8h, 11h, 14h and 17h), between room temperature bellow 15oC and above 25oC and with the administration of mefenamic acid and nimesulid when compared to placebo. It was concluded that at least 20 volunteers must be measured and 3 measures must be performed to determine electrical pulpal threshold; dryness of teeth can improve electrical conductance; operator gender can influence the volunteers¿ pulpal threshold; pulpal threshold is not influenced by room temperature, volunteer ethnicity, and single dose dministration of mefenamic acid and nimesulide. No circadian pattern was observed for pulpal threshold / Doutorado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Doutor em Odontologia

Avaliou-se a proliferação das células tronco da polpa de dentes decíduos esfoliados humanos (SHED) após aplicação única do laser de baixa potência. Foi realizada a análise da viabilidade das SHED cultivadas sob déficit nutricional e em condições ideais após irradiação com o laser de baixa potência vermelho de Indio Gálio Alumínio e Fósforo - InGaAlP (660nm, 40mW e 10J/cm2) e infravermelho (780nm, 40mW e 10J/cm2) durante 4 e 8 segundos, nos períodos de 24, 48 e 72 horas através dos ensaios de redução do MTT e do ensaio colorimétrico de Busatti e Gomes. Para análise estatística utilizou-se o teste ANOVA complementado pelo teste de Tukey com nível de significância de 5% (p< 0,05). Observou-se tanto com o MTT quanto com o ensaio colorimétrico de Busatti e Gomes uma tendência de aumento da proliferação celular diretamente relacionada à dose do LBP, estatisticamente significante nos períodos de 24, 48 e 72 horas. Ao analisar os resultados e considerando os parâmetros utilizados e o protocolo de LBP, pode-se concluir que o LBP promoveu a proliferação das SHED tanto a 660 nm quanto a 780nm, pode influenciar a viabilidade e a proliferação das SHED nas doses e comprimentos de onda utilizados e os ensaios do MTT e colorimétrico de Busati e Gomes demonstraram dentro de suas limitações ser eficientes para determinar a viabilidade e proliferação das SHED. / It was evaluated the proliferation of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED) after a single application of low power laser. The viability of SHED grown under ideal conditions and under nutritional deficit after irradiation with red laser (660/780nm, 10J/cm2 and 40mW) during periods of 4 and 8 seconds was analyzed through the MTT reduction assays and rapid colorimetric assay of Busatti and Gomes. Statistical analysis was performed using the ANOVA and Tukey´s multiple comparisons test with a significance level of 5% (p < 0.05). It was observed with the MTT assay and Busatti and Gomes assay a trend of cell proliferation increase directly releated to the irradiation dose, statistically significant. After 24, 48 and 72 hours, all the groups showed higher cell proliferation when compared to control. Analyzing the results and considering the used parameters and LBP protocol, it can be concluded that LBP promoted the proliferation of SHED both 660nm and 780nm according to the dosage and wavelengths used, and MTT assay and colorimetric Busatti and Gomes demonstrated within their limitations to be effective in determining the viability and proliferation of SHED.

Cavalcanti, BN. Resposta de fibroblastos de polpa humanos frente a substâncias liberadas por capeadores pulpares diretos [Tese de Doutorado]. São Paulo: Faculdade de Odontologia da USP; 2003. RESUMO O objetivo do presente estudo foi o de avaliar os efeitos citotóxicos de substâncias liberadas durante a aplicação de materiais utilizados em capeamento pulpar direto, sobre fibroblastos de polpa dentária humana. Utilizou-se para o experimento meios condicionados pelas substâncias a serem testadas, divididas nos grupos a seguir: grupo I: controle (meio de cultivo sem condicionamento); grupo II: cimento de hidróxido de cálcio; grupo III: adesivo dentinário; grupo IV: ácido ortofosfórico a 37%. O condicionamento foi realizado, colocando-se meio de cultivo fresco sobre os materiais de modo que a presa (grupo II), polimerização (grupo III) ou o contato direto (grupo IV) liberassem substâncias para esse meio de cultivo. Esse meio era colocado sobre as células durante todo o experimento, excetuando-se o grupo IV, onde o contato foi feito por um período de 15 segundos, conforme recomendações clínicas. Posteriormente foram realizadas contagens em hemocitômetro pelo método de exclusão por azul de Trypan, que cora somente as células mortas. As contagens foram realizadas em períodos de 0, 6, 12 e 24 horas para o experimento de viabilidade celular (curto prazo), onde se avaliou o percentual de células vivas sobre o total de células, e em períodos de 1, 3, 5 e 7 dias para o experimento de sobrevivência celular, no qual se avaliou o número absoluto de células vivas. Observou-se que as substâncias liberadas pelo adesivo dentinário são citotóxicas em qualquer período, diminuindo consideravelmente a viabilidade celular e afetando suas curvas de crescimento. Aquelas liberadas pelo ácido ortofosfórico a 37% provocam diminuição da viabilidade somente nos primeiros momentos do contato com as células, enquanto as substâncias liberadas durante a presa do hidróxido de cálcio não são citotóxicas em nenhum momento. / The purpose of the present study was to evaluate the cytotoxic effects of substances leached during the use of direct pulp capping materials, on human pulp fibroblasts. There were used cell culture mediums conditioned by the test materials, as follows: group I: control (fresh medium without conditioning); group II: calcium hydroxide cement; group III: bonding system; group IV: 37% orthophosphoric acid. The medium conditioning was made, pouring the fresh conditioning medium on the materials, in order that its setting (group II), polymerization (group III) or the direct contact (group IV) would be able to leach substances to this culture medium. These conditioned mediums were put on the cells for the entire experiment, excepting the group IV, in which the mediums were put in contact with the cells for 15 seconds, following clinical recommendations. Cell counting was performed in hemocytometer, using the Trypan blue exclusion method, which mark only the dead cells. These counting was made at experimental times of 0, 6, 12 and 24 hours for the cell viability assay (short term), where it is evaluated the percentage of live cells on the total number of cells, and at experimental times of 1, 3, 5 and 7 days for the survival assay, in which is evaluated the absolute number of live cells. It was observed that the substances leached by the bonding system are cytotoxic at all experimental times, decreasing significantly the cell viability and affecting its growing rate. Those leached by the 37% orthophosphoric acid decreased the cell viability only at the first contact with the cells, and the substances leached during the setting of the calcium hydroxide cement are not cytotoxic.

The forces applied during orthodontic treatment will cause effects on the teeth and adjacent tissues, depending on the intensity and time of application. Changes caused in the pulp tissues are not fully clarified in the literature by the scarcity of studies, the variety of methodologies, conflicting results and difficulty in conducting research that simulate clinical situations. Given this fact, the present study aimed to evaluate the human dental pulp after application of orthodontic intrusion force through histological examination. The selected sample consisted of 34 first human premolars, with orthodontic indication of extraction, from 17 young individuals (12-19 years old, both genders). On each patient, was applied intrusion force of 60g, randomly in only one of the dental elements, forming Group-Experimental (GE). The counterpart did not receive force, constituting the Control Group (CG), characterizing a split-mouth study. After 21 days, the premolars were extracted, stored in 10% formaldehyde, submitted to histotechnical preparation and stained with hematoxylineosin. The analysis of the histological slides was carried out in optical microscopy by a single experienced calibrated examiner. The paired Fisher exact test (p ≤ 0.05), showed significant increase of fibrous tissue in the GE. The nonparametric Wilcoxon test (p ≤ 0.05), paired, showed significant increase in the number of pulpal nodules in the elements of GE and showed no difference in the number of blood vessels between the groups. In 8 elements of the GE was observed the presence of congested large caliber vessels. The orthodontic intrusion force in these conditions, caused vascular changes in the pulp tissue, increase of fibrosis and of the number of pulpal calcifications in the experimental elements. / As forças aplicadas durante o tratamento ortodôntico ocasionam efeitos nos dentes e tecidos adjacentes, conforme a intensidade e tempo de aplicação. As alterações causadas nos tecidos pulpares não estão totalmente esclarecidas na literatura pela escassez de estudos, variedade de metodologias empregadas, resultados conflitantes e dificuldade de realização de pesquisas que simulem situações clínicas. Diante desse fato, o presente estudo teve como objetivo avaliar a polpa dental humana, após a aplicação de força ortodôntica de intrusão, por meio de exame histológico. A amostra selecionada foi de 34 primeiros pré-molares humanos, com indicação ortodôntica de exodontia, de 17 indivíduos jovens (12 a 19 anos, ambos os sexos). Em cada paciente, foi aplicada força de intrusão de 60g aleatoriamente em apenas um dos elementos dentais, constituindo o Grupo- Experimental (GE). O homólogo não recebeu força constituindo o Grupo-Controle (GC), caracterizando um estudo de boca dividida. Passados 21 dias, os pré-molares foram extraídos, armazenados em formol a 10%, submetidos ao preparo histotécnico e corados com hematoxilina-eosina. A análise das lâminas histológicas foi feita em microscópio óptico, por um único examinador experiente calibrado. O teste exato de Fischer (p≤ 0,05), pareado, mostrou significativo aumento da presença de tecido fibroso no GE. O teste não-paramétrico de Wilcoxon (p≤ 0,05), pareado, mostrou significativo aumento no número de nódulos pulpares nos elementos do GE e não mostrou diferença no número de vasos sanguíneos entre os grupos. Em 8 elementos do GE foi observada a presença de vasos calibrosos e congestos. A força ortodôntica de intrusão, nessas condições, causou alterações vasculares no tecido pulpar, aumentou a presença de áreas de fibrose e o número de calcificações pulpares nos elementos experimentais.

Cavalcanti, BN. Resposta de fibroblastos de polpa humanos frente a substâncias liberadas por capeadores pulpares diretos [Tese de Doutorado]. São Paulo: Faculdade de Odontologia da USP; 2003. RESUMO O objetivo do presente estudo foi o de avaliar os efeitos citotóxicos de substâncias liberadas durante a aplicação de materiais utilizados em capeamento pulpar direto, sobre fibroblastos de polpa dentária humana. Utilizou-se para o experimento meios condicionados pelas substâncias a serem testadas, divididas nos grupos a seguir: grupo I: controle (meio de cultivo sem condicionamento); grupo II: cimento de hidróxido de cálcio; grupo III: adesivo dentinário; grupo IV: ácido ortofosfórico a 37%. O condicionamento foi realizado, colocando-se meio de cultivo fresco sobre os materiais de modo que a presa (grupo II), polimerização (grupo III) ou o contato direto (grupo IV) liberassem substâncias para esse meio de cultivo. Esse meio era colocado sobre as células durante todo o experimento, excetuando-se o grupo IV, onde o contato foi feito por um período de 15 segundos, conforme recomendações clínicas. Posteriormente foram realizadas contagens em hemocitômetro pelo método de exclusão por azul de Trypan, que cora somente as células mortas. As contagens foram realizadas em períodos de 0, 6, 12 e 24 horas para o experimento de viabilidade celular (curto prazo), onde se avaliou o percentual de células vivas sobre o total de células, e em períodos de 1, 3, 5 e 7 dias para o experimento de sobrevivência celular, no qual se avaliou o número absoluto de células vivas. Observou-se que as substâncias liberadas pelo adesivo dentinário são citotóxicas em qualquer período, diminuindo consideravelmente a viabilidade celular e afetando suas curvas de crescimento. Aquelas liberadas pelo ácido ortofosfórico a 37% provocam diminuição da viabilidade somente nos primeiros momentos do contato com as células, enquanto as substâncias liberadas durante a presa do hidróxido de cálcio não são citotóxicas em nenhum momento. / The purpose of the present study was to evaluate the cytotoxic effects of substances leached during the use of direct pulp capping materials, on human pulp fibroblasts. There were used cell culture mediums conditioned by the test materials, as follows: group I: control (fresh medium without conditioning); group II: calcium hydroxide cement; group III: bonding system; group IV: 37% orthophosphoric acid. The medium conditioning was made, pouring the fresh conditioning medium on the materials, in order that its setting (group II), polymerization (group III) or the direct contact (group IV) would be able to leach substances to this culture medium. These conditioned mediums were put on the cells for the entire experiment, excepting the group IV, in which the mediums were put in contact with the cells for 15 seconds, following clinical recommendations. Cell counting was performed in hemocytometer, using the Trypan blue exclusion method, which mark only the dead cells. These counting was made at experimental times of 0, 6, 12 and 24 hours for the cell viability assay (short term), where it is evaluated the percentage of live cells on the total number of cells, and at experimental times of 1, 3, 5 and 7 days for the survival assay, in which is evaluated the absolute number of live cells. It was observed that the substances leached by the bonding system are cytotoxic at all experimental times, decreasing significantly the cell viability and affecting its growing rate. Those leached by the 37% orthophosphoric acid decreased the cell viability only at the first contact with the cells, and the substances leached during the setting of the calcium hydroxide cement are not cytotoxic.